1fundamentos análise toxicológica - 2011

UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEAR FACULDADE DE FARMCIA, ODONDOLOGIA E ENFERMAGEM DEPARTAMENTO DE ANLISES CLNICAS E TOXICOLGICAS ANLISES TOXICOLGICAS

FUNDAMENTO DAS ANLISES TOXIOLGICASTeresa Maria de Jesus Ponte Carvalho

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Anlises Toxicolgicas- Farmcia- UFC

Toxicologia a cincia que tem como objeto de estudo o efeito adverso proveniente da interao das substncias qumicas com os organismos vivos.

Elementos bsicosToxicante Toxicidade Intoxicao2 Anlises Toxicolgicas- Farmcia- UFC

ToxicologiaDiviso

Analtica ou Qumica (Toxicante)

Experimental (Toxicidade) Clnica (Intoxicao)

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OBJETO DE ESTUDO DA TOXICOLOGIA

Propriedades fsicas e qumicas dos agentes txicos Efeitos fisiolgicos ou comportamentais no organismo

vivos Os mtodos qualitativos e quantitativos para anlises em materiais biolgicos e no-biolgicos Desenvolvimento de procedimentos para o tratamento da intoxicao.

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reas da Toxicologa

Toxicologa de alimentos

Toxicologa ambiental

Toxicologa de medicamentos

Toxicologa ocupacional

Toxicologa social

Aspectos

Clnico

Analtico

Legislao

Investigao

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Anlises ToxicolgicasEstima os compostos qumicos de forma qualitativa ou quantitativa

Anlises de urgncia Monitorizao do grau de exposio Teraputica Biolgica da exposio ocupacional Ambiental Farmacodependncia Controle da Dopagem Toxicologia Alimentos Forense6 Anlises Toxicolgicas- Farmcia- UFC

Finalidades

Toxicologista Analtico Capaz

de identificar os agentes txicos, diferenci-los dos similares e quantific-los. Amostra limitada, complexa, compostas esto em quantidades pequenas. Confiabilidade e interpretao dos resultados

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Laboratrio de Anlises ToxicolgicasConjunto de processos analticos capaz de identificar substncias qumicas

o Informaes que ajudem na anlise

o Caractersticas do toxicanteo Tipos de mtodos o Tempo de anlise o Documentao8 Anlises Toxicolgicas- Farmcia- UFC

Agentes txicos Gases (contaminantes da atmosfera) Monxido de carbono/xidos de

nitrognio/Oznio Volteis Solventes

Inorgnicos Metais

Orgnicos no volteis Drogas de abuso Frmacos9 Anlises Toxicolgicas- Farmcia- UFC

Substncias nos alimentos, meio ocupacional e

ambiental

Anlises ToxicolgicasAspectos a serem definidos antes do trabalho analtico

Finalidade (Para qu)Toxicante (O qu) Amostra (Onde)

Mtodo (Como)10 Anlises Toxicolgicas- Farmcia- UFC

AmostraSeleo Finalidade da anlise Natureza qumica Forma e concentrao do

analito Indicador que se pretende reconhecer ou quantificar11 Anlises Toxicolgicas- Farmcia- UFC

Post-mortem Urgncia Monitorizao Teraputica Biolgica Farmacodepend ncia Ambiental

Tipos de AmostrasAmostras Sangue, soro, plasma Urina Contedo Gstrico Visceras, humor vtreo, crebro, pulmes Unhas, cabelo, plos UsoUrgncia, Monitorizao teraputica Urgncia, Monitorizao Biolgica Urgncia/ Forense Forense Monitorizao Biolgica, Forense

Alimentos, gua, plantas

Urgncia, Forense

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Anlises ToxicolgicasMtodos de anlise Triagem Confirmao Seletivos ou especficos

Sistemticas Analticas

Gases (poluentes atmosfricos) Volteis (tolueno) Inorgnicos (metais) Orgnicos no volteis (medicamentos)

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Etapas da Anlise Amostragem e obteno das amostras

(homogeneizao, hora, condies coleta)

Tratamento das amostras Determinao dos analitos

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Coleta , Transporte e Conservao de Amostras Especificidades - rea da toxicologia Estabelecer a finalidade Protocolo toxicolgico Caractersticas da exposio Hbitos individuais Higiene Frasco para coleta Identificao

Anticoagulantes Conservantes Modo de transporte e armazenamento

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Anlises Toxicolgicas Tratamento das amostras Separao: liberao dos analitos amostra

Exemplo: destruio matria orgnica, hidrlise, digesto

Extrao: retirada dos analitos da matriz Purificao: remoo de interferentes endgenos e

analitos ligados protenas

Exemplo: precipitao protenas

Principais tcnicas de extrao Lquido-lquido Fase slida (SPE)

Microextrao (SPME e LPME) Headspace

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Garantia de Qualidade em Anlises Toxicolgicas Boas Prticas de Laboratrio (BPL) Todas as aes planejadas ou sistemticas necessrias para

prover a confiana necessria de que o produto ou servio ir satisfazer certas necessidades. Os sistemas de qualidade esto relacionados aos processos organizacionais e s condies sob as quais estudos no clnicos sobre sade e ambiente so planejados, realizados, monitorados, registrados, relatados e arquivados. Sistemas o BPL (Boas Prticas de Laboratrio) o BPLC (Boas Prticas de Laboratrio Clnico) o ISO/IEC 17025:2005 (International Standard Organization/International Eletrotechnical Commision)

Validao Demonstrar que o ensaio analtico tem confiabilidade (ANVISA RE 899/2003, Inmetro DOQ-CGCREAnlises Toxicolgicas- Farmcia- UFC 19 008/2003).

Anlise de metais Separar o metal da matriz orgnica Tcnica

de mineralizao, digesto desagregao da matria orgnica.

ou

Considerar: natureza da matriz, o metal a ser

determinado e a tcnica de identificao. Tipos de mineralizao: por via mida: com agentes oxidantes (cidos

fortes sulfrico, clordrico, perclrico), agentes solubilizadores e agentes neutralizantes e fonte de aquecimento (chapa ou micro-ondas) por via seca: altas temperaturas.

Mineralizao da matria orgnicaAnlise de metais Objetivos da Mineralizao: degradar a matria

orgnica em CO2 e H2O. Ligados a constituintes de tecidos como grupos - SH de

enzimas e protenas e na corrente sangunea na forma de albuminatos.

Devemos ter os seguintes cuidados: Evitar

perdas por deflagrao, volatilizao ou adsoro. Usar reagentes isentos de metais. Lavagem vidraria com HNO3 e gua desmineralizada.

Mineralizao via seca As vantagens: Enrgico, rpido, poucos reagentes

Desvantagens Perdas por volatilizao ( Hg e As) Adsoro do material na cpsula quanto maior a

temperatura maior a adsoro Produo de carvo pode levar a perdas por reduo (antes de ir para a mufla retirar toda a umidade para evitar deflagrao do vapor dgua).

Na mineralizao da matria orgnica para anlise de arsnio em alimentos marinhos as reaes so: Reaes As+3 + 2 Mg(NO3)2 + MgO Mg3(AsO4)2 + 4NO2 Arseniato de Magnsio (fixo) Mg3(AsO4)2 As2O7Mg2 + MgO 550C Piroarseniato de Magnsio

Reaes do Mtodo de Vasak e SedivecFundamento: Baseia-se na captao de arsina por uma soluo de DDC-Ag 0,5% em piridina, formando um complexo colorido

Formao da arsinaZn0 + 2HCl 2H0 + As-3 ZnCl2 + 2H0 As H3 (arsina)

Arsina + reagente cromognico = complexo colorido

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