2364097 microbiologia

Escola Superior de Enfermagem da Guarda __________________________________________________________________________________________ Microbiologia

APONTAMENTOS

PERGUNTAS MAIS IMPORTANTES

1. Algumas descobertas são marcos na história da microbiologia. Cite exemplos.

• Anthony van Lunwenhok – foi o pai da microbiologia, já que foi ele o

responsável pela construção do instrumento – o microscópio – que tornou

possível a observação de seres minúsculos. Os quais observou, descreveu e

desenhou designando-os por “animáculos”;

• Lazarro Spallanzani – deu o primeiro passo para a destruição do conceito

de abiogénese (“geração espontânea”); revelou que carne quando fervida

não se alterava já que o calor destruía o microorganismo;

• Louis Pasteur – veio demonstrar com os seus frascos com pescoço de

cisne, que não existia “geração espontânea”, mas sim que os

microorganismos provinham de outros pré-existentes nas poeiras do ar –

teoria da biogénese; descobre que existem microorganismos que necessitam

de O2 para viver (bactérias anaeróbias); inventa um processo de

esterilização dos alimentos – pasteurização; isolou o parasita responsável

pela doença do bicho-da-seda e demonstrou a possibilidade de eliminar a

doença; descobriu que a acção das bactérias altera a composição químicas

dos produtos dos caldos, através da fermentação (transformam os hidratos

de carbono em álcool e ácidos orgânicos) e da putrefacção (decomposição

das proteínas, com formação de produtos de cheiro nauseabundo);

demonstra serem as fermentações o resultado de actividades microbianas;

• Conh e Tyndal – descobriram que existem formas de vida resistentes ao

calor (esporos termorresistentes) e dão nascimento a um novo método de

esterilização – tindalização;

• Joseph Lister – desenvolve trabalhos sobre antissepsia e descobre que os

vapores de ácido carbónico reduzem a infecção no pós-operatório;

_________________________ V Curso de Licenciatura __________________________________________________ 1.º ano/1.º semestre __________________________

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• Robert Koch – fez a 1.ª demonstração directa do papel desempenado por

uma bactéria no desenvolvimento de uma doença – o Bacillus anthracis – e

a doença que este agente produzia (carbúnculo); isola o Mycobacterium

tuberculosis (bacilo de Koch), agente causador da tuberculose; define um

conjunto de princípios relacionados com o que estudou – Postulados de

Koch:

• Um microorganismo específico está sempre associado a um caso de

doença;

• O microorganismo suspeito deve ser isolado e capaz de crescer em

laboratório;

• A inoculação da cultura deve ser capaz de produzir a mesma doença

num animal susceptível;

• O mesmo microorganismo deve ser isolado a partir do animal

doente;

Desvantagens dos Postulados de Koch:

• Há microorganismos que não crescem em meios de cultura;

• Presentemente conhecem-se microorganismos que apenas são

patogénicos para o Homem, não produzindo doença em animais –

vírus da hepatite C, Treponema pallidum, Mycobacterium leprae;

• James Watson – descobre a es6rutura do DNA;

• Alexander Fleming – descobriu a penicilina e a lisozina.

2. Cite as principais diferenças entre procarióticas e eucarióticas e cite exemplos de

uns e de outros.

Um ser eucariota apresenta nas suas células um núcleo individualizado

envolvido por uma membrana nuclear, onde se encontra inserido o DNA. No citoplasma

existem vários organelos – ribossomas, cloroplastos, mitocôndrias, retículo

endoplasmático, aparelho de Golgi, vacúolos, flagelos e citoesqueleto – que

desempenham funções específicas. As células eucarióticas são maiores e mais

complexas, o seu genoma é maior e possuem mecanismos muito mais elaborados que a

células procarióticas. Exemplos: animais, plantas, fungos, algas e protozoários.


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Os procariotas apresentam células sem núcleo individualizado e estão

organizadas em ribossomas e parede celular. Exemplos: eubactérias e arqueobactérias.

3. As bactérias podem ser classificadas em Gram positivas e Gram negativas de

acordo com a parede celular. Explique.

A parede celular confere protecção mecânica (impede a lise da célula bacteriana

em meio hipotónico), confere forma à bactéria e determina o comportamento ao Gram.

O diferente comportamento das bactérias ao Gram deve-se ao facto dos dois

grupos bacterianos (Gram + e Gram -) apresentarem parede celular química e

estruturalmente diferente.

A parede celular das bactérias Gram + não apresenta lípidos (excepto nos

géneros Mycobacterium, Corynebacterium e Nocardia) e apresenta elevada

concentração de peptidoglicano (50-90% do peso da parede).

Enquanto que a parede das bactérias Gram – apresenta um elevado teor em

lípidos e baixa concentração de peptidoglicano (10% do peso da parede).

3.1 Outros métodos de coloração podem ser utilizados, Cite um exemplo e explique.

Há bactérias que não são visíveis na coloração de Gram, apesar de terem uma

parede do tipo gram + complexa. Por isso recorre-se a outros processos de coloração,

por exemplo, Ziehl-Neelsen. Os BAAR após a coloração com fucsina de Ziehl,

concentrada e a quente, resistem à descoloração com o soluto de Ebner (álcool mais

ácido clorídrico).

4. Quais as funções das seguintes estruturas:

a) Retículo endoplasmático.

É constituído por um labirinto intracelular de cisterna, limitado por

membranas. Divide-se em retículo endoplasmático rugoso (cisterna revestida por

ribossomas) e retículo endoplasmático liso (não tem ribossomas).

O retículo endoplasmático rugoso é o responsável pela síntese de todas as

proteínas secretadas para o exterior das células, das proteínas das membranas e

das enzimas lisossómicas.

O retículo endoplasmático liso é muito abundante nas células hepáticas e

musculares. Tem como funções a biossíntese de lípidos, a degradação de drogas

e compostos tóxicos (desintoxicação) e o armazenamento de cálcio.


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b) Aparelho de Golgi.

É constituído por um conjunto de cisternas e vesículas que modificam,

acondicionam e distribuem as proteínas e lípidos produzidos pelo retículo

endoplasmático. É no aparelho de Golgi que se produzem as glicoproteínas.

c) Pili.

Os pili são estruturas filamentosas de natureza proteica, só visíveis na

microscopia electrónica e que permitem o contacto entre bactérias de sexo

diferente.

5. As bactérias são identificadas por características morfológicas e propriedades

bioquímicas. Cite algumas.

Em relação às propriedades morfológicas podemos dividir as bactérias em cocos

e bacilos. Podemos ainda verificar a presença/ausência de cápsula.

Em relação às propriedades químicas temos a classificação pela composição

química da membrana (colorações)

6. Em que característica se baseia a classificação dos vírus?

O vírus é uma entidade potencialmente patogénica cujo genoma são ácidos

nucleicos que se replicam no interior de células vivas usando o equipamento de síntese

celular e que sintetizam partículas que transmitem o genoma a outras células.

Os principais critérios usados na classificação de vírus são:

• Tipo e estrutura do genoma – com DNA ou RNA; DNA de cadeia linear

ou circular, de cadeia simples ou dupla; RNA de cadeia dupla ou simples;

• Estrutura – icosaédrica, helicoidal ou mista;

• Tipo de hospedeiro – vertebrado, invertebrado, plantas, fungos ou

bactérias.

7. Quais são as fases do ciclo viral?

O ciclo viral é um ciclo infeccioso que inclui diversas fases distintas:

• Absorção – o vírus adsorve-se aos receptores da membrana da célula;

• Penetração – translocação da partícula para o interior da célula;

• Descapsidação – perda da cápsula no citoplasma ou no núcleo celular;


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• Fase sintética – síntese dos componentes virais e replicação do genoma

viral;

• Montagem e extrusão – os componentes dos vírus são montados em

partículas mais ou menos complexas; são posteriormente transportados para

o exterior sem entrar em contacto com o citoplasma.

7.1 Quais os marcadores de infecção no VHB?

• HBsAg – indica infectividade do sangue;

• HBsAc – anticorpo contra o antigénio de superfície; fornece imunidade,

não está presente nos indivíduos portadores; imunidade após infecção ou

após vacinação;

• HBeAg – antigénio da nucleocopside; indica transmissibilidades;

• HBeAc – anticorpo do HbeAg; indica baixa transmissibilidade;

• HBcAg – antigénio do core;

• HBcAc – anticorpo do antigénio do core; aparece na fase inicial.

8. Cite três vantagens da flora normal para o hospedeiro.

A flora comensal serve de barreira de defesa contra as infecções. Os

microorganismos da flora comensal impedem a colonização da sua área de residência

por outras bactérias, mantendo assim o equilíbrio entre as diversas populações.

A flora comensal do intestino grosso ajuda à fermentação doa alimentos.

9. A disseminação da flora normal para locais estéreis do organismo pode ocorrer

em várias situações. Cite três exemplos.

Esta disseminação pode ocorrer por alteração do pH, por desidratação, por má

higiene e devido a defeitos congénitos.

10. Cite quatro estratégias adoptadas pelos microorganismos para maximizar a sua

sobrevivência no hospedeiro.

Para escaparem aos mecanismos de defesa do hospedeiro, os microorganismos

aderem ao hospedeiro, disseminam (invadem) para outros locais, mantém-se no local da

primeira interacção com o hospedeiro pois há características favoráveis ao seu

desenvolvimento, induzem lesão ou utilizam toxinas para facilitar o seu ciclo de vida.


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11. A densidade dos microorganismos no trato digestivo aumenta do estômago até

ao intestino grosso. Explique.

O tracto gastrointestinal é onde reside a maioria da flora do organismo.

No estômago há pouca flora devido à existência de pH muito ácido (suco

gástrico).

No intestino delgado também há pouca flora devido à acção conjunta do suco

gástrico, da bílis e do suco pancreático.

No entanto é no intestino grosso que reside a maior parte da flora do organismo,

já que aí o pH é mais alcalino devido à fermentação dos alimentos, o que permite que

cresçam abundantemente bactérias.

12. O que entende por sistema de defesa inato.

Os mecanismos de defesa inatos (imunidade inata) estão sempre presentes num

indivíduo saudável e não são específicos, são efectivos contra a maioria dos

microorganismos e constituem a 1.ª linha de defesa do organismo. É o caso das barreiras

físicas (pele), as células fagocitárias ou as moléculas com actividade antimicrobiana.

13. Quais são as vantagens da existência de diferentes classes de imunoglobulinas?

Podemos classificar os anticorpos (imunoglobulinas) em:

• IgA – surgem na fase aguda da doença e a sua detecção permite um

diagnóstico mais precoce;

• IgM – surgem no início da resposta humural e perduram até ao fim da fase

aguda da doença; revelam um contacto recente com o antigénio específico;

• IgG – na convalescença as IgG substituem as IgM e podem ficar com os

títulos residuais toda a vida.

14. Os plasmídeos podem conter genes de virulência. Diga o que sabe.

As bactérias têm na sua constituição plasmídeos.

São sequências de DNA, onde estão codificadas as resistências às drogas, a

síntese de enzimas que originam a resistência à droga.

Assim possuem resistências cromossómicas (naturais) e resistências mediadas

por plasmídeos (adquiridas).


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Por exemplo, as enzimas β-lactamases são codificadas por plasmídeos, e vão

inibir a acção dos fármacos antibióticos do grupo β-lactâmicos, utilizados para destruir

todas as bactérias.

15. O que são doenças transmitidas por vectores? Dê exemplos.

São doenças transmitidas por artrópodes (moscas, mosquitos, carraças), que

podem actuar como reservatórios (se há multiplicação do agente, o que é essencial ao

ciclo de vida do parasita) ou serem passivos (apenas transmitem).

Por exemplo a transmissão das Ricktesias.

16. Defina infecção hospitalar.

Infecção hospitalar é a infecção adquirida pela passagem ou permanência no

Hospital, e que pode infectar tanto os utentes como os profissionais de saúde.

As vias de transmissão são:

• Doente Doente;

• Meio Doente;

• Material Doente;

• Profissional de saúde doente;

• Comunidade Doente;

• Material Profissional de saúde;

• Meio Profissional de saúde.

17. Defina esterilização.

Esterilização é o processo mediante o qual todas as formas de vida – bactérias,

fungos e vírus – contidos em líquidos, utensílios, instrumentos e substâncias são

completamente destruídos.

17.1 Cite limitações no uso do óxido de etileno.

Vantagens:

• Não detiora os objectos cortantes nem os termo-sensíveis;

• Eficaz sobre bactérias e esporos;

• Tem grande capacidade de penetração.


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Desvantagens:

• Ciclos de esterilização longos;

• Deixa resíduos tóxicos em alguns materiais;

• Necessita de arejamento;

• Mais caro que os outros métodos;

• Instalação perigosa.

18. Defina desinfecção.

É o processo físico ou químico, pelo qual os agentes patogénicos ou micróbios

causadores da doença são destruídos.

18.1 Quais os critérios usados na escolha de um antisséptico?

Antissépticos são substâncias químicas que actuando sobre os tecidos vivos

destroem os microorganismos ou impedem o seu crescimento.

Os critérios usados na sua escolha são:

• Factores físicos – ter em conta o pH, a temperatura e a luz do local;

• Factores químicos – não devemos juntar substâncias desconhecidas;

• Factores microbiológicos – a eficácia depende do número e da natureza

dos gérmens.

19. A que normas gerais devem obedecer a colheita e transporte de produtos

biológicos para a cultura de microorganismos?

A colheita deve obedecer às seguintes normas:

• O produto biológico deve ser colhido no local que, no momento da

infecção, oferece maior possibilidade de se isolar o agente infeccioso;

• A colheita deve ser feita antes do início de cada terapêutica;

• A colheita deve ser feita com material estéril (seringa, agulha, bisturi) e

para contentor estéril (tubo de ensaio, frasco);

• A colheita deve ser adequada e suficiente (expectoração sem saliva);

• Os produtos devem ser colhidos para um meio de transporte que mantenha

a viabilidade do microorganismo.


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20. Defina microbiologia e microorganismo.

Microbiologia é a ciência que estuda os seres vivos de dimensões microscópicas

bem como outros que têm durante a sua evolução ovos ou formas larvares

microscópicas.

A microbiologia inclui áreas como a bacteriologia, a virologia, a parasitologia e

a micologia.

Microorganismo é um organismo, vegetal ou animal, com dimensões

microscópicas.

21. O que é uma estirpe?

Estirpe são descendentes de uma colónia pura.

22. Em que consiste a técnica de coloração de Gram?

Consiste em:

• Corante primário (Violeta Cristal);

• Mordente (Soluto de Lugol);

• Descorante (Etanol);

• Corante de contraste (Fucsina básica).

As bactérias Gram + fixam o corante primário (Violeta de Cristal) adquirindo a

cor arroxeada.

As bactérias Gram – fixam o corante de contraste (Fucsina básica) corando de

vermelho.

23. O que é o peptidoglicano?

É um macropolímero em forma de saco, presente em todas as paredes celulares

bacterianas, rígido e insolúvel em água. É constituído por 2 a.a. a N-acetilglucosamina

(NAG) e o ácido N-acetilmurâmico (NAM).

24. Como é constituída a parede celular das bactérias Gram +?

É constituída por peptidoglicano, ácidos teicóicos e teicurónicos. Estes ácidos

estão associados ao peptidoglicano mas não conferem rigidez.


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25. Caracterize os ácidos teicóicos e teicurónicos.

Os ácidos teicóicos contém vestígios de glicerol e ribitol, são solúveis na água e

localizam-se em toda a espessura da membrana.

Os ácidos teicurónicos (as moléculas) substituem os ácidos teicóicos quando as

bactérias crescem em meios pobres em fósforo por conterem galactosamina mais ácido

glucónico.

Tanto os ácidos teicóicos, como os ácidos teicurónicos são responsáveis pela

carga – da superfície dos bacilos Gram +, atraem Mg2+ e Ca2+ e reduzem as repressões

electrostáticas no polímero conferindo estabilidade estrutural.

26. O que são autolisinas?

São enzimas que actuam durante o crescimento bacteriano (enzimas hidrolíticas

dos peptidoglicanos), ligando a parede bacteriana para que a bactéria possa crescer. Se

houver algum descontrolo dessa lise leva a bactéria ao suicídio.

27. Qual a composição química da parede celular das bactérias Gram -?

É constituída por lipopolissacarídeos (LPS), fosfolípidos, proteínas, porinas,

autolisinas e peptidoglicano.

28. Como actuam os antibióticos sobre a membrana exterior das bactérias?

Os antibióticos atravessam a membrana exterior das bactérias por 2 processos:

via hidrofílica (através de porinas) e via hidrofóbica (através da bicamada fosfolipídica).

29. O que são as cápsulas?

São estruturas que envolvem a parede celular de algumas bactérias, retém água e

impedem a dissecação da bactéria, Conferem grande virulência (cápsula

antifagocitária).

30. Caracterize as seguintes estruturas intracitoplasmáticas:


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• Granulações metacromáticas – constituem reserva de fósforo essencial

para a síntese de ácidos nucleicos e fosfolípidos da bactéria; estão presentes

no agente da difteria e podem visualizar-se pela coloração de Albert;

• Vacúolos de gás – estão presentes em arqueobactérias e bactérias

fotossintéticas; funcionam como reservatório de azoto, permitindo às

bactérias flutuar na água;

• Grânulos de glicogénio – são polímeros de glucose; funcionam como

material de reserva energética e coram pelo reagente de Lugol;

• Grânulos de lípidos – funcionam como material energético de reserva e

coram com o negro de Sudão;

• Ribossomas – encontram-se dispersos no citoplasma bacteriano; são muito

abundantes; são os locais de síntese proteica e são constituídos por

proteínas e ácidos nucleicos;

• Endosporos – permitem a modificação de células vegetativas em esporos;

impedem a dissecação celular, formam resistência em condições hostis tais

como radiações, detergentes, calor, antibióticos; preservam o material

genético em boas condições dando origem a células vegetativas.

• Nucleóide – local da célula onde se localiza o material genético – DNA;

não possui membrana nuclear nem aparelho mitótico e funciona como um

só cromossoma; é visível com corantes básicos e o DNA plasmídico pode

coexistir com o DNA cromossómico, na mesma célula.

31. O que são os flagelos?

São órgãos de locomoção, de natureza proteica e visíveis em microscopia óptica

com corantes.

32. O que são as fimbrias?


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São estruturas filamentosas de natureza proteica, visíveis após coloração

específica e que funcionam como órgão de aderência bacteriana a outras células, já que

contém a.a. apolares que lhes confere propriedades hidrófobas.

33. O que distingue a membrana externa da parede celular da membrana interior

(citoplasmática), nas bactérias Gram -?

O que distingue uma da outra é o facto da membrana externa ser constituída por

2 folhetos: folheto interno e folheto externo.

O folheto externo é rico em lipopolissacarídeos (LPS) que são uma molécula

permeável a compostos hidrofóbicos.

O folheto interno é rico em fosfolípidos.

34. Caracterize os seguintes organelos da célula eucariótica:

• Membrana plasmática – é capaz de isolar proteínas e ácidos nucleicos do

meio externo; é constituída por:

• Fosfolípidos, responsáveis pelo tal isolamento;

• Proteínas, que asseguram as permutas com o meio exterior;

• Esteróis, colesterol nos mamíferos e ergosterol nos fungos;

• Parede celular – é um invólucro protector que está ausente nos mamíferos

e em alguns protozoários e que se encontra nas células das algas, fungos e

alguns protozoários; é constituída por polissacarídeos (ao contrário da

célula procariótica que é constituída por peptidoglicano);

• Núcleo – possui um invólucro nuclear constituído por 2 membranas: a

membrana nuclear interna e a membrana nuclear externa; Estas 2

membranas delimitam a chamada cisterna perinuclear; através da cisterna

há transporte de DNA, RNAt e RNAr para o citoplasma e transporte de

enzimas, para replicação de DNA e síntese de RNA, do citoplasma para o

núcleo; no interior do núcleo encontra-se a informação genética da célula;

• Nucléolo – estrutura nuclear em número muito variável, cuja função é a

síntese de ribossomas;


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• Ribossomas – são constituídos por 2 subunidades: grande unidade e

pequena unidade; cada uma das quais é constituída por moléculas de RNAr;

o ribossoma é o local onde ocorre a síntese proteica e pode encontrar-se

livre no citoplasma ou associado ao retículo endoplasmático rugoso;

• Retículo endoplasmático – é constituído por um labirinto intracelular de

cisterna, limitado por membranas; divide-se em retículo endoplasmático

rugoso (cisterna revestida por ribossomas) e retículo endoplasmático liso

(não tem ribossomas); o retículo endoplasmático rugoso é o responsável

pela síntese de todas as proteínas secretadas para o exterior das células, das

proteínas das membranas e das enzimas lisossómicas; o retículo

endoplasmático liso é muito abundante nas células hepáticas e musculares.

Tem como funções a biossíntese de lípidos, a degradação de drogas e

compostos tóxicos (desintoxicação) e o armazenamento de cálcio;

• Aparelho de Golgi – é constituído por um conjunto de cisternas e vesículas

que modificam, acondicionam e distribuem as proteínas e lípidos

produzidos pelo retículo endoplasmático; é no aparelho de Golgi que se

produzem as glicoproteínas;

• Lisossomas – são “sacos intracelulares” que armazenam enzimas

hidrolíticas capazes de digerir todas as macromoléculas da célula; têm

como funções:

• Digerir moléculas vindas do exterior (endocitose);

• Destruição de componentes celulares obsoletos (autofagia);

• Degradação de microorganismos ou partículas nocivas à célula

(fagocitose);

• Mitocôndrias – fornecem à célula a energia necessária para todas as

reacções do metabolismo; têm como função produzir ATP a partir de

energia armazenada nos nutrientes orgânicos;

• Peroxissomas – são sáculos envolvidos por membranas que contém

enzimas que digerem ácidos gordos e a.a., e enzimas que catalisam a

degradação do peróxido de hidrogénio; a sua função é, pois, a β-oxidação

de ácidos gordos.


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• Citoesqueleto – é a estrutura responsável pela plasticidade, flexibilidade e

motilidade das células eucarióticas; desempenha o papel de “ossos” e

“músculos” da célula; é constituído por 3 grandes tipos de proteínas:

35. Quais os produtos biológicos que podemos usar para análise?

Podemos utilizar:

• Expectoração;

• Urina;

• Fezes;

• Corrimento vaginal ou uretral;

• Líquidos – ascítico, pleural e cafalorraquídeo;

• Secreções – nasais e faringeas;

• Sangue;

• Órgãos – biópsias.

36. O que é, e para que serve um meio de transporte?

É o recipiente onde se colocam as amostras biológicas com suspeita de que s

agentes infecciosos resistam mal fora do hospedeiro.

Os meios de transporte servem para assegurar a sobrevivência desses

microorganismos porque fornecem-lhes condições de pH, concentração proteica e

atmosféricas (CO2 e O2) ideais para manterem a sua viabilidade.

37. Como se pode identificar o agente infeccioso?

O agente infeccioso pode detectar-se:

• Directamente no produto biológico – detecção de antigénios e de

sequências genómicas;

• Após cultura do produto – caracterização bioquímica, antigénica,

genotípica e teste de sensibilidade aos antibióticos.

38. Quais são as técnicas utilizadas para a detecção directa de um microorganismo

num produto biológico?

Podemos utilizar as seguintes técnicas:


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• Exame microscópico directo;

• Detecção de antigénios específicos – evidenciados pelo uso de anticorpos

específicos;

• Detecção de sequências genómicas – com pesquisa de sequências de

nucleótidos específicos.

39. Onde é feita a cultura de bactérias, vírus, fungos e parasitas “in vitro”?

As bactérias, fungos e parasitas têm meios de cultura adequados que tornam

possível a sua multiplicação.

Os vírus e microorganismos intracelulares são cultivados em células do Homem,

de animais ou até de ovos embrionados, pois exigem um suporte celular para se

multiplicarem.

40. Como se detecta o crescimento das bactérias, vírus, fungos e parasitas nas

culturas?

O crescimento das bactérias, fungos e parasitas é detectado pelas colónias

bacterianas.

O crescimento dos vírus é detectado pelo efeito citopatogénico (ECP), ou por

técnicas alternativas (hemadsorção ou hemaglutinação).

41. O que são culturas incubadas?

São culturas que têm temperatura, humidade e atmosfera adequadas ao

desenvolvimento.

42. Como é feita a caracterização e identificação do microorganismo isolado?

A caracterização e identificação do microorganismo isolado é feita por:

• Caracterização morfológica – utiliza-se a técnica de coloração de Gram+;

• Caracterização bioquímica – reconhecimento da presença de enzimas e

produtos dos metabolismos; utiliza-se para bactérias e fungos;

• Caracterização antigénica – diferentes técnicas serológicas;

• Caracterização genotípica.

43. Qual o tipo de crescimento que podem apresentar os microorganismos?


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• Crescimento rápido – 18-24h;

• Crescimento fastidioso – mais de 24h.

44. Depois de cultivados os microorganismos o que se faz?

Após a cultura do microorganismo é feita a sua identificação através do teste de

sensibilidade aos antibióticos (TSA) ou antibiograma.

O TSA baseia-se na capacidade de um microorganismo se multiplicar “in vitro”

na presença de diferentes antibióticos.

Para efectuar o TSA podemos utilizar 2 métodos: método de diluição e método

de difusão.

45. Caracterize os métodos de diluição e de difusão.

• Método de diluição – consiste em “semear” uma suspensão bacteriana

num meio de cultura sólido ou líquido com um antibiótico em concentração

crescente; após incubação efectua-se a leitura e avaliação no caldo de

turvação; podemos assim avaliar a CMI (concentração mínima inibitória)

que inibe o crescimento bacteriano e a CMB (concentração mínima

bactericida) que leva à morte de 99,9% das bactérias;

• Método de difusão – consiste em utilizar um meio sólido em placa de Petri

no qual se semeia uma suspensão bacteriana; na superfície do meio solido

colocam-se discos de papel impregnados de vários antibióticos; após

incubação faz-se a leitura e avaliação do halo de inibição do crescimento

em volta do disco; caso forma halo diz-se que a bactéria é sensível (S) ao

antibiótico, se não formar halo diz-se que é resistente (R) ao antibiótico.

46. Caracterize o diagnóstico indirecto.

Numa fase avançada da doença nem sempre é possível isolar e identificar o

agente da infecção, pois a resposta imune do hospedeiro já o eliminou.


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Vamos então pesquisar, no hospedeiro, anticorpos específicos contra o

microorganismo que provocou a doença ou pesquisar antigénios específicos do

microorganismo.

47. Caracterize a resposta imune humural.

Está ligada à actividade dos linfócitos B. Estas células produzem anticorpos e

estes ligam-se especificamente aos antigénios que o organismo reconheceu com os seus

e quer eliminar.

Os anticorpos pesquisam-se no soro, plasma, urina e outros líquidos biológicos.

48. Defina diagnóstico serológico.

É a designação que se utiliza para a pesquisa de anticorpos ou antigénios

específicos, independentemente do produto onde é feita essa pesquisa.

49. O que é o título de um soro?

É o inverso da mais alta diluição do soro que deu um resultado positivo.

Por exemplo, se a diluição mais lata que deu positivo for 1/16, então o título do

anticorpo é 16.

50. Qual a importância de se estudar 2 soros – um na fase aguda da doença e outro

na fase de convalescença?

A presença de anticorpos por si só não confirma que o doente está infectado, por

isso é necessário avaliar a evolução do título de anticorpos específicos.

A recolha de um 1.º soro na fase aguda da doença e de um 2.º soro na fase de

convalescença (15 dias de intervalo) vai permitir avaliara a tal evolução do título de

anticorpos.


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OUTROS APONTAMENTOS

HISTÓRIA DA MICROBIOLOGIA

A microbiologia é a ciência que estuda os seres vivos de dimensões

microscópicas.

Áreas diversas como:

• Bacteriologia;

• Virologia;

• Parasitologia;

• Micologia.

A microbiologia surge quando é possível a observação de seres de dimensões

microscópicas.

1632-1723:

• Antony Van Lunwenhok:

• 1.º microscopista;

• Animáculos (bactérias e protozoários).

• Conceito de abiogénese – seres minúsculos desenvolvem-se a partir de

matérias em decomposição – teoria da geração espontânea.


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1626-1697:

• Francesco Redi:

• Os germens desenvolvem-se a partir da matéria orgânica exposta ao

ar e calor.

1729-1799:

• Lazzaro Spallanzani:

• 1.º passo para a destruição da teoria da geração espontânea (carne

quando fervida não se alterava);

• Georg Schroder;

• Theodor Van Dusch;

• Usam pela 1.ª vez algodão para tapar os recipientes.

1822-1895:

• Louis Pasteur:

• Teoria da biogénese – os microorganismos provinham de outros pré-

existentes em suspensão nas poeiras;

• Usa frascos de colo de cisne.

1820-1893:

• Jonh Tyndall:

• Câmara isenta de poeiras;

• Juntamente com F. Cohn descobrem os esporos termorresistentes;

• Tindalização (esterilização);

• Tyndall/Cohn/Pasteur – como resultado da actividade microbiana:

• Fermentação – Hidratos de Carbono Álcool + Ác. Orgânicos;

• Putrefacção – decomposição das Proteínas – produtos de odor

nauseabundo;

• Pasteur descobre que existem microorganismos que não necessitam de O2

(bactérias anaeróbias);


19


• Os microorganismos podem provocar doenças nos homens e animais.

1705-1786:

• Verona e Penciz:

• Via de transmissão homem a homem.

1773-1856:

• Agostinho Bassi:

• O primeiro suporte para a teoria microbiana da doença (a doença do

bicho da seda era fúngica).

1839:

• Schönlein (Tinha favosa).

1827-1912:

• Joseph Lister:

• Trabalhos sobre antissepsia;

• Vapores de Ác. Carbónico – reduz a infecção no pós-operatório.

1843-1910:

• Robert Koch:

• Estudo do Bacillus anthracis (carbúnculo);

• A 1.ª demonstração directa do papel desenvolvido por uma bactéria

no desenvolvimento de uma doença;

• Postulados de Koch:

Um microorganismo específico deve estar associado a cada

doença;

O microorganismo suspeito deve ser isolado em cultura no

laboratório;


20


A inoculação daquela cultura deve ser capaz de produzir a

mesma doença num animal susceptível;

O mesmo microorganismo deve ser isolado a partir do

animal doente.

• Pelo conhecimento actual:

• Nem todos os microorganismos podem ser cultivados no

laboratório (ex.: Treponema pallidum e Mycobacterium

leprae);

• Nem todos os microorganismos patogénicos para o Homem o

são para os animais (ex.: Vírus da Hepatite C).

1882:

• Robert Koch:

• Isola em cultura Mycobacterium tuberculosis (bacilo de Koch);

• Isto foi possível porque surgiram:

•Meios sólidos (gelatina);

•Richard Petri (placa de Petri).

Nos seguintes 30 a 40 anos:

• Pasteur e Koch descobrem, isolam e cultivam muitas das bactérias

conhecidas de hoje.

1892:

• Dimitri Ivanovski:

• Isola o 1.º Vírus “Mosaico do Tabaco”;

• Desenvolvimento das primeiras vacinas.

1749-1823:

• Eduard Jenner:

• Varíola;

• Pasteur e Chamberland:

• Difteria e Tétano;


21


1854-1917:

• Emil Von Behringer:

• Kitasato;

• Paul Ehreich:

• Difteria.

1845-1916:

• Ellie Metchnikoff:

• Imunidade inespecífica;

• Descobre actividade bacteriana dos leucócitos (fagócitos) –

fagocitose.

1900:

• Walter Kud:

• Febre amarela transmitida por um mosquito.

1906:

• Fritz Schandin e Erich Hoffman;

• Treponema pallidum – Sífilis.

1921:

• Alexander Fleming:

• Descobre a lisozima (imunidade inespecífica).

1928:

• Descobre a penicilina (quimioterapia) – antibioterapia.

1933:

• Ernest Ruska e Max Knoll:

• Descobrem o microscópio electrónico;

• Chaton:


22


• Descobre e divide os seres vivos em:

•Eucariótas;

•Procariótas.

1935:

• Gerard Domagk:

• Descobre a sulfonamida – antibioterapia.

1944:

• Oswald T. Avery, C. M. Mcleod e M. J. McCarty:

• Processos de transformação bacteriana que possibilitam a possibilidade

de transferência de material genético de uma para outra bactéria.

1953:

• James Watson e Francis Corick:

• Estudos de biologia molecular;

• Descoberta da estrutura do DNA.

1892:

• Câmara Pestana:

• Fundador da bacteriologia em Portugal;

• Director do Real Instituto Bacteriológico de Lisboa;

• Faleceu no Porto vítima da peste bubónica.

Durante as primeiras décadas do século XX os microbiologistas

desenvolveram um trabalho no sentido de:

• Estudar os microorganismos como fonte de doença;

• A resposta imunitária do hospedeiro;

• A pesquisa de novos antimicrobianos;

• Avançaram no estudo do metabolismo microbiano.


23


A partir da década de 40 em trabalho com biólogos e bioquímicos – Biologia

Molecular e Genética, surgem como novas áreas de estudo e investigação.

TAXONOMIA MICROBIANA

Taxonomia – Classificação (“arrumação”).

A taxonomia tem como base a espécie (estirpes geneticamente semelhantes).

Estirpe – descendentes de uma colónia pura.

Outras características da espécie:

• Características morfológicas;

• Necessidades nutricionais.

Espécies agrupadas em Géneros

Géneros agrupados em Famílias

Famílias agrupadas em Ordens

Ordem agrupada em Classe

Classe agrupada em Filo ou Divisão

Filo agrupado em Reino

CLASSIFICAÇÃO DOS SERES VIVOS

1735 – Lineu:

Animalia

Reinos

Plantae

1886 – Ernest Haeckel:


24


Acrescenta um reino – Protistas – seres de organização unicelular ou

multicelular sem diferenciação em tecidos (bactérias, protozoários, algas, bolores,

leveduras).

1940 – A microscopia electrónica – estudo da estrutura celular interna,

surgem:

Eucariótas

2 tipos

Procariótas

ORGANIZAÇÃO CELULAR EUCARIÓTA

• Núcleo com membrana nuclear;

• Aparelho mitótico;

• DNA associado a histonas;

• Ribossomas;

• Cloroplastos (vegetal);

• Mitocôndrias;

• Retículo endoplasmático;

• Aparelho de Golgi;

• Vacúolos (vegetal);

• Flagelos;

• Citoesqueleto;

• Parede celular (vegetal).

ORGANIZAÇÃO CELULAR PROCARIÓTA

• Ribossomas;

• Parede celular;


25


CÉLULAS PROCARIÓTICAS

• Archaeobacteria – bactérias produtoras de metano, desenvolvem-se em

meio hiper salino ou em temperaturas elevadas (termofílicas);

• Eubactérias – todas as bactérias incluindo as patogénicas para o Homem,

bactérias do solo e da água.

CÉLULAS EUCARIÓTICAS

• Fungos;

• Algas;

• Protozoários;

• Plantas;

• Animais.

TAXONOMIA DE WHITTAKER (1969)

Divisão em cinco reinos:

• Plantae;

• Animalia;

• Protistas – protozoários e algas unicelulares (eucarióticas unicelulares);

• Fungi – bolores e leveduras;

• Monera ou Procaryotae – todas as bactérias procarióticas.

Critérios de classificação

• Tipo celular – procariota e eucariota;


26


• Nível de organização – solitária ou colonial, unicelular ou multicelular;

• Tipos de nutrição – fotossíntese, digestão ou absorção.

Nesta classificação os microorganismos ficam em três grupos:

• Monera – bactérias e cianobactérias;

• Protistas – algas unicelulares e protozoários;

• Fungi – bolores e leveduras.

TAXONOMIA DE CARL WOSE (1977)

Os seres vivos são divididos em três domínios ou impérios:

• Eukarya – protozoários, algas, fungos, plantas e animais eucariótas;

• Archaea – bactérias metanogénicas, termofílicas e halofílicas;

• Bactéria – todas as bactérias patogénicas, as bactérias do solo e da água.

Esta nova designação baseia-se na composição bioquímica da membrana

(natureza dos lípidos, tipo molecular do RNA ribossómico – mRNA).

Baseado nestes estudos defende-se que os eucariótas e os procariótas têm origem

numa mesma forma ancestral comum, mas que evoluiriam de uma forma diferente.

MICROORGANISMOS PROCARIÓTAS

BACTÉRIAS PROCARIÓTAS

MORFOLOGIA

Cocos e bacilos. Replicação por divisão binária.

Agrupamentos


27


• Cocos:

• Diplococos;

• Cadeia;

• Cacho;

• Tetrada.

• Bacilos:

• Isolados;

• Cadeia curta;

• Pleomorfismo:

•Curvilíneos;

•Fusiformes;

•Ondulados;

•Espiralados.

Dimensão

De 100nm a 1,5µm.

Tintagem (coloração de Gram)

Na microscopia óptica revelam-se com corantes.

A coloração de Gram tem valor taxonómico:

Corante primário – Violeta de Cristal;

Mordente – Soluto de Lugol;

Descorante – Etanol;

• Corante de contraste – Fucsina básica.

•Bactérias positivas ao Gram – fixam o Violeta de Cristal; Parede

•Bactérias negativas ao Gram – fixam a Fucsina básica. celular


28


Parede celular

As Eubactérias possuem parede celular, com excepção das Mycoplasmas

(possuem apenas membrana celular).

A parede celular:

• Confere protecção mecânica – impede a lise da célula bacteriana em

meio hipotónico;

• Dá forma à bactéria;

• Determina o comportamento ao Gram

Peptidoglicano (Mucopeptideo ou Mureina)

Presente em todas as bactérias, com excepção das Archaeobactérias (parede

celular com pseudopeptidoglicano).

O peptidoglicano é o constituinte rígido da estrutura parietal.

Diferença de comportamento ao Gram

A existência de Gram + e Gram - deve-se a estrutura e química da parede

diferentes.

Diferenças mais relevantes

• Bactérias Gram +:

• Não têm lípidos, com excepção dos três géneros Mycobacterium,

Corynebacterium e Nocardia;

• Elevada concentração de peptidoglicano – 50-90% do peso da

parede.

• Bactérias Gram -:

• Elevado teor em lípidos;

• Baixa concentração em peptidoglicano – 10% do peso da parede.


29


Composição química da parede celular bacteriana

Constituintes Gram + Gram -Peptidoglicano + +/-

Ácidos Teicóicos/Teicurónicos + +/-Polissacarídeos + -

Proteínas +/- +Lipossacarídeos - +

Lípidos +/- +

Parede celular das bactérias Gram +

Constituição química

• Peptidoglicano;

• Outros heteropolímeros:

• Ácidos Teicóicos; ambos estão associados ao peptidoglicano

• Ácidos Teicurónicos. mas não conferem rigidez

Peptidoglicano

• Organização tridimensional universal;

• Macropolímero em forma de saco (muraina saculus);

• Rígido/insolúvel na água;

• Constituído por dois aminoácidos, com disposição linear alternada, ligados

por ligação glicosídica, que pode ser hidrolisada pela enzima lisozima

(acção mureínica):

• N-acetilglucosamina (NAG);

• Acido N-acetil muranico (NAM) – a cada molécula de NAM liga-se

um peptídeo (cadeia de 4 aminoácidos), através de uma ligação

amina.

Ácidos Teicóicos

• Contêm vestígios de glicerol e ribitol;


30


• São solúveis na água;

• Localizam-se em toda a espessura da membrana;

• Formam-se ácidos lipoteicóicos quando uma porção de ácidos teicóicos

que contêm glicerol se liga ao glicopeptídeo do folheto exterior da

membrana citoplasmática. Atravessam a parede celular dos bacilos Gram +

e constituem os antigénios somáticos dos bacilos Gram +;

• A zona hidrófila dos ácidos teicóicos é acessível aos ácidos específicos, o

que provoca a sua presença na superfície celular.

Ácidos Teicurónicos

São as moléculas que substituem os ácidos teicóicos quando as bactérias

crescem em meios pobres em fósforo por conterem galactosamina mais ácido

glucorónico.

Ácidos Teicóicos e Ácidos Teicurónicos

São responsáveis pela carga negativa da superfície dos bacilos Gram +, atraindo

Mg2+ e Ca2+.

Reduzem as repressões electrostáticas no polímero – conferem estabilidade

estrutural.

Lípidos

Estão presentes nos géneros:

• Mycobacterium;

• Nocardia;

• Corynebacteruium.

Estas bactérias têm lípidos de peso molecular elevado que torna a molécula

impermeável a vários compostos.

O comprimento da cadeia dos ácidos lipídicos tem valor taxonómico:


31


• C 24 - C 40 – ácidos corionomicolicos;

• C 40 - C 60 – ácidos nocardicos;

• C 60 - C 80 – ácidos micolicos.

São estes que tornam a molécula impermeável a vários compostos.

Não são por isso visíveis na coloração de Gram, mas têm uma parede do tipo

Gram + complexa. Coram pela coloração Ziehl Neelsen com Fucsina concentrada e a

quente, resistindo à descoloração pelo reagente de Ebner (álcool mais acido clorídrico),

por isso são designadas Bacilos Álcool Ácido Resistentes (BAAR).

O polissacarídeo específico dos BAAR é a arabinogalactomanana.

Autolisinas endógenas

São enzimas muralíticas (tipo amidase).

Localizam-se na membrana citoplasmática. Durante o crescimento bacteriano

têm uma acção lítica fisiológica (hidrolisam selectivamente peptidoglicano em

determinadas partes da parede bacteriana para a entrada de novas unidades de

peptidoglicano.

A sua acção é controlada pelos ácidos lipoteicóicos e fosfolípidos. Se falharem

os mecanismos de repressão ou forem activados pelas β-lactamases, ocorre lise

bacteriana – morte.

Parede celular de bactérias Gram –

Constituição química

• Lipossacarídeos (LPS);

• Fosfolípidos;

• Proteínas;

• Porinas;

• Proteínas OMpA;

• Autolisinas;


32


• Peptidoglicano.

Lipopolissacarídeo (LPS)

• Molécula mais característica dos Gram -;

• Principal endotoxina;

• Molécula anfílica:

• Polissacarídeo – hidrófilo;

• Lípido A – hidrófobo.

• Localização – folheto externo da membrana exterior;

• Os LPS estão ligados à membrana exterior pelo lípido A, e o polissacarídeo

fica virado para o exterior da célula, sendo responsável pela carga negativa

da bactéria. Esta hidrofilia torna a molécula impermeável à penetração de

compostos hidrófobos;

• Os LPS são os Antigénios Somáticos dos bacilos Gram -;

• A fracção lípido A é responsável nas infecções clínicas por bacilos Gram -,

pelo aparecimento no hospedeiro de febre, inflamação e choque séptico;

• Os LPS estão mais ou menos indirectamente envolvidos na activação de:

•Macrófagos;

•Linfócitos B;

•Linfócitos T;

•Sistema complemento;

•Sistema de coagulação.

Fosfolípidos

Localizam-se na membrana exterior no folheto interno. Quando se deslocam

para o folheto externo tornam as bactérias permeáveis a componentes hidrófobos.

Proteínas

Localizam-se na membrana exterior.

Nos Gram – a concentração de proteínas na parede celular é elevada:


33


• Lipoproteínas;

• São as mais abundantes;

• Encontram-se livres ou ligadas ao peptidoglicano;

• O seu principal papel é conferir estabilidade à bactéria, podendo esta

sobreviver sem ela, mas lisam facilmente por diversos agentes.

• Proteínas OMpA;

• Porinas – Proteínas que se organizam em poros ou canais onde passam

substâncias hidrofílicas (nutrientes para a bactéria)

• Proteínas de transporte específico de substâncias na difusão através da

membrana exterior;

• Autolisinas (enzimas hidrolíticas) do peptidoglicano;

• Nas bactérias Gram – não se conhece:

• Natureza;

• Localização;

• Mecanismos de regulação.

• Enzimas – fosfolipase A e proteases.

Esquema da arquitectura molecular da parede celular das bactérias Gram -

CONSTITUIÇÃO

Parede celular


34


Bactérias Gram -

Por microscopia electrónica verifica-se que é constituída por duas membranas:

• Membrana exterior;

• Membrana interior – membrana citoplasmática.

O espaço entre elas denomina-se espaço periplasmático.

A camada rígida R é formada pelo peptidoglicano.

Espaço periplasmático

• Composição – polipeptidossacarídeos;

• Consistência – gel;

• Espaço vital para as células bacterianas;

• Reservatório de β-lactamases;

• Enzimas degradativas;

• Enzimas de transporte – açucares e aminoácidos;

• Quimioreceptores.

Funções de permeabilidade

• Folheto externo (membrana externa) – LPS;

• Folheto interno (membrana externa) – fosfolípidos.

• Os antibióticos atravessam a membrana externa por dois processos:

• Via hidrofílica – porinas;

• Via hidrofóbica – bicamada fosfolipídica.

Canais de porinas (transmembranares)

• φ variável entre as bactérias;

• Difusão passiva de compostos hidrófilos:

Membrana citoplasmática

• Bicamada – permeabilidade selectiva:

• Permeável e moléculas lipófilas;


35


• Impermeável a moléculas hidrófobas.

• Funções de biossíntese – peptidoglicano;

• Funções energéticas – metabolismo oxidativo.

Enterobactérias

A camada fosfolipídica é impermeável.

A membrana citoplasmática envolve o citoplasma celular.

Composição química:

• Bicamada de fosfolípidos;

• Proteínas.

Archaeobactérias

Composição química:

• Fosfolípidos;

• Proteínas;

• Lípidos especiais.

Cápsula

Estrutura que envolve a parede celular em algumas bactérias.

Por microscopia electrónica (tinta da china), verifica-se um halo transparente

que envolve a bactéria.

Natureza – polissacarídeo

Retém a água e impede a dissecação da bactéria.

Confere grande virulência – cápsula antifagocitária.

Estruturas intracitoplasmáticas

• Visíveis em microscopia óptica;


36


• Colorações especiais;

• Estão presentes em algumas espécies.

Granulações metacromáticas (grânulos de volutina)

• Coloração de Albert – azul de metileno;

• Constituem reserva de fósforo essencial para a síntese de ácidos

nucleicos e Fosfolípidos da bactéria.

Vacúolos de Gaz

• Para as bactérias fotossintéticas;

• Reserva de azoto;

• Permite flutuar na água.

Grânulos de glicogénio

• Coram pelo reagente de lugol;

• Polímeros de glucose;

• Reserva energética.

Grânulos de lípidos

• Coram pelo reagente de negrão de sudão;

• Reserva.

Ribossomas


37


• Dispersos no citoplasma bacteriano;

• Local de síntese proteica;

• Constituídos por proteínas e ácidos nucleicos.

Endosporos

• Permitem a passagem da morfologia vegetativa em esporos;

• Impede a dissecação celular – sobrevivência da bactéria por centenas ou

milhares de anos;

• Forma resistência em condições hostis como:

• Radiações;

• Detergentes;

• Calor;

• Antibióticos.

• Os esporos preservam o material genético, em boas condições, dando

origem a células vegetativas – fenómeno de germinação.

Nucleóide

• Local da célula onde se localiza o material genético – DNA (material

nuclear);

• Ausência de membrana nuclear;

• Aparelho mitótico;

• Tem um único cromossoma;

• Visível em microscopia óptica com corantes básicos;

• O DNA cromossómico pode coexistir com o DNA plasmídico.


38


Mobilidade bacteriana

Flagelos

• Órgão de locomoção;

• Natureza proteica;

• Visíveis em microscopia óptica com corantes;

• A sua localização na bactéria tem valor taxonómico:

• Bactérias com flagelo polar – monótrico;

• Flagelos polares – anfítrico;

• Tufo de flagelos em um ou nos dois pólos – lofotricos;

• Distribuem-se em toda a superfície – peritrica

Outras espécies movem-se por contractura de um conjunto de fibras situadas no

periplasma – filamento axial – com mobilidade deslizante.

Pilis e fimbrias (apêndices bacterianos endocelulares que se projectam para o exterior

das células)

Pilis

• Estrutura filamentosa de natureza proteica;

• Visível só na microscopia electrónica;

• Permite o contacto entre células diferentes – conjugação.

Fimbrias

• Estrutura filamentosa de natureza proteica;

• Visível no microscópio electrónico ou por microscopia óptica após

coloração;

• Órgão de aderência bacteriana a outras células;_________________________ V Curso de Licenciatura __________________________________________________ 1.º ano/1.º semestre __________________________

39


• Reconhece receptores celulares nas superfícies epiteliais.

MICROORGANISMOS EUCARIOTAS

MORFOLOGIA E ULTRAESTRUTURAS

EUCARIOTAS

Organismos unicelulares e pluricelulares que possuem membranas internas, com

núcleo individualizado – existem espaços físicos com funções diferentes.

ORGANISMOS EUCARIOTAS

Fungos, algas e protozoários (parasitas).

ORGANISMOS EUCARIOTAS MAIS SIMPLES

Leveduras.

ORGANISMOS EUCARIOTAS UNICELULARES COMPLEXOS

Protozoários.

ORGANISMOS UNICELULARES EUCARIOTAS

Constituem metade da biomassa da Terra porque:

• São pequenos;


40


• Têm divisão rápida;

• Consomem poucos nutrientes;

• Adaptam-se facilmente a diversos ambientes

Sucesso na sua evolução

As células eucariotas são mais complexas que as células procariotas.

O genoma é maior e possui mecanismos de regulação e de expressão,

genotipicamente mais elaborados.

O DNA encontra-se num compartimento próprio delimitado por membranas – o

núcleo.

No citoplasma há vários constituintes (organitos) delimitados por membranas

com funções especiais.

CONSTITUIÇÃO

MEMBRANA CITOPLASMÁTICA

Constituição:

• Fosfolípidos;

• Proteínas;

• Esteróis (mamíferos – colesterol).

PAREDE CELULAR

• Eucariotas sem parede celular – mamíferos e alguns protozoários;

• Eucariotas com parede celular – algas, fungos e alguns protozoários.

Constituição:


41


• Peptidoglicano – o glicano nos protozoários é substituído por

polissacarídeos.

NÚCLEO

Possui invólucro nuclear constituído por duas membranas:

• Membrana nuclear externa;

• Membrana nuclear interna.

As duas membranas delimitam um espaço designado por cisterna perinuclear,

à qual está intimamente ligado o retículo endoplasmático.

Através da cisterna há transporte para o citoplasma de:

• RNA mensageiro;

• RNA de transferência;

• RNA ribossomal.

Transporte em sentido oposto:

• Enzimas para replicação do DNA;

• Enzimas de síntese do RNA.

MOLÉCULA DO DNA

Macromolécula que cabe no núcleo “enrolada” e que contém o património

genético das células.

O DNA é “encapotado” por proteínas – histonas.

DNA + histonas cromatina nuclear.

Heterocromatina – periferia nuclear, zona menos densa.

Eucromatina – interior do núcleo, zona menos densa – concentra os genes

activos e inactivos.

NUCLÉOLO


42


Estrutura nuclear em número variável.

Função – síntese de ribossomas.

RIBOSSOMAS

Síntese proteica

No citoplasma são utilizadas todas as moléculas que permitem à célula crescer,

multiplicar-se, diferenciar-se e comunicar com as outras num organismo pluricelular.

Estas moléculas com esta função são na sua maioria proteicas.

As proteínas cuja estrutura e consequente função é determinada pela sequencia

de pares do respectivo gene.

Cada gene que codifica uma proteína é inicialmente copiado no núcleo por um

mecanismo designado transcrição dando origem a uma molécula de RNA mensageiro

(RNAm).

Estas quando transportadas para o citoplasma associam-se a ribossomas. Aqui

ligam-se a outras moléculas adaptadoras e denominam-se RNA de transferência (RNAt).

A sequência de nucleótidos de cada RNAm é traduzida numa sequência de

aminoácidos (proteína).

As proteínas têm na célula eucariota múltiplas funções:

• Enzimas que caracterizam reacções específicas;

• Transportadores de outras moléculas.

Grande parte das proteínas é sintetizada nos ribossomas localizados no citosol –

espaço do citoplasma entre os organitos celulares.

Outras proteínas são sintetizadas no ribossoma do retículo endoplasmático

(proteínas das membranas celulares, proteínas lisossomais, proteínas de secreção).

Muitos dos antibióticos usados actuam ao nível do RNAr – interagem com os

mecanismos do ribossoma.

Muitos interferem nas células procariotas, mas não nas eucariotas.


43


Mas nas células eucariotas os ribossomas das mitocôndrias são semelhantes às

procariotas o que leva à intoxicação da célula.

RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO

• Labirinto intracelular constituído por cisternas limitadas por membranas;

• Retículo endoplasmático rugoso – cisterna revestida de ribossomas;

• Retículo endoplasmático liso – não tem ribossomas.

Retículo endoplasmático rugoso

Há síntese de:

• Proteínas secretadas para o exterior da célula;

• Proteínas das membranas;

• Enzimas lisossómicas.

No lúmen do retículo as proteínas sintetizadas nos seus ribossomas ligam-se a

um açúcar e transformam-se em glicoproteínas.

Retículo endoplasmático liso

É muito abundante nas células hepáticas e musculares.

Nas células hepáticas acumula-se no retículo liso:

• Enzimas de síntese de lipoproteínas;

• Enzimas de degradação das drogas e de outras substâncias tóxicas;

• Enzimas de síntese de hormonas esteróides – a partir do colesterol;

• Síntese de proteínas de transporte;

• Proteínas de sequestro de Ca – abundantes no músculo.

APARELHO DE GOLGI


44


• Constituído por cisternas e vesículas;

• Intimamente ligado ao retículo endoplasmático, recebendo deste as

proteínas de secreção, onde sofrem modificações químicas.

No aparelho de Golgi é onde se produzem as glicoproteínas.

VIA DA SECREÇÃO

Exocitose – as vesículas libertam proteínas para o meio extracelular.

Um mecanismo de secreção regula o armazenamento de proteínas em grânulos

de secreção cuja exocitose só ocorre por um sinal exterior (ingestão de alimento).

Permite a digestão das LDL, fracção de colesterol, libertando o colesterol usado

como nutriente celular.

LISOSSOMAS

“Sacos” intracelulares que armazenam enzimas hidrolíticas (enzimas

lisossomáticas), activas em meio ácido:

• Proteases;

• Lipases;

• Fosfolipases;

• Fosfatases.

DIAGNÓSTICO LABORATORIAL EM MICROBIOLOGIA

PESQUISA DE MICROORGANISMSOS INFECCIOSOS

PRODUTOS BIOLÓGICOS


45


• Expectoração;

• Urina;

• Fezes;

• Corrimento vaginal ou uretral;

• Líquidos: ascítico, pleural e cefaloraquídeo;

• Secreções nasais e laríngeas;

• Tecidos – sangue;

• Órgãos – biopsias.

Para o isolamento dos microorganismos é preciso respeitar:

• Regras de colheita;

• Transporte;

• Processamento da amostra

COLHEITAS DAS AMOSTRAS BIOLÓGICAS

Isolar o agente da infecção implica colher a amostra no órgão ou sistema

infectado:

• Infecção urinária – urina;

• Infecção respiratória – secreções respiratórias;

• Infecção gastrointestinal – fezes;

• Meningite – LCR;

• Infecção cutânea:

• Exsudado de vesícula;

• Raspado de lesão.

Na ausência de sintomatologia sugestiva do local – várias colheitas de sangue.

Num pico febril – hemocultura.


46


O local para a colheita pode variar no decurso da doença dependendo do ciclo

biológico do agente infeccioso.

Para o isolamento do agente responsável, deve-se:

• Colher a amostra antes de iniciar terapêutica – para não inibir o

crescimento “in vitro”;

• Colher com material estéril (seringa, zaragatoa, bisturi) para um

contentor estéril.

Para evitar contaminação com microrganismos, quando se colhe uma amostra

estéril, normalmente, sangue, líquido pleural, LCR, antes deve-se desinfectar a pele – a

flora da pele contamina a amostra.

A colheita deve ser adequada e suficiente para a analise:

• Expectoração sem saliva;

• Pús do fundo do abcesso.

Por vezes são necessárias várias colheitas em períodos diversos porque o

microorganismos tem uma presença intermitente.

Para manter alguns microrganismos viáveis é necessário enviar a amostra

em meio de transporte adequado, que forneça:

• pH adequado;

• Proteínas;

• Atmosfera (CO2);

Enviar o produto em contentores rotulados (identificação do doente, serviço e

cama).

CONSERVAÇÃO DOS PRODUTOS BIOLÓGICOS

Após recepção são trabalhados o mais rapidamente possível ou conservados no

frigorífico a 4ºC, salvo raras excepções.

IDENTIFICAÇÃO DO AGENTE INFECCIOSO


47


• Directamente no produto biológico:

• Pesquisa de antigénios específicos;

• Observação microscópica da morfologia microbiana – raramente é

possível.

• Após cultura do produto:

• Caracterização bioquímica;

• Caracterização antigénica;

• Caracterização do genótipo;

• Teste da sensibilidade aos antibióticos – ajuda na identificação.

DIAGNÓSTICO DIRECTO NO PRODUTO BIOLÓGICO

• Exame microscópico directo;

• Bactérias, parasitas, fungos em exame a fresco ou em exame corado

permite:

• Diagnóstico dos parasitas pelas características morfológicas;

• Raras vezes serve para os fungos;

• Impossível para quase todas as bactérias.

• Detecção dos antigénios específicos, evidenciados pelo uso de anticorpos

específicos:

• Imunofluorescência – anticorpos marcados com corante fluorescente

para observação com microscopia fluorescente;

• Métodos imunoenzimáticos (ELISA) – pesquisa com anticorpos por

reacção colorimétrica;

• Reacção de aglutinação em látex – partículas de látex revestidas

com anticorpos específicos.

• Detecção de sequências genómicas, com pesquisa de nucleótidos

específicos:

• A pesquisa é feita directamente no produto biológico, com

extracção do genoma (DNA) – hibridação;


48


• Após a extracção do genoma no produto biológico, amplia-se o

número de sequências específicas utilizando uma enzima, para

aumentar a sensibilidade da técnica.

DIAGNÓSTICO APÓS CULTURA DO PRODUTO

• Caracterização bioquímica:

• PCR (Polymerase Chain Reaction) – efectua-se com sondas

(sequências de nucleótidos complementares das sequências

específicas que pesquisamos) – hibridação (complementaridade de

base nucleótida);

• Caracterização antigénica:

• Diferentes técnicas serológicas;

• Reacção antigénio/anticorpo;

• Caracterização genotípica:

• Classificar os microorganismos de acordo com diferentes padrões de

sequência genómica – técnica de hibridação.

• Teste de sensibilidade aos antibióticos (antibiograma) – conhecer o

padrão de sensibilidade à terapêutica é fundamental porque têm surgido

bactérias muito resistentes. Existem várias técnicas para efectuar o TSA.

Este baseia-se na capacidade de um microorganismos se multiplicar “in

vitro” na presença de diferentes antibióticos:

• Método de difusão:

• Meio sólido em placa de Petri;

• Semeia-se uma suspensão bacteriana;

• Discos de papel impregnados de antibióticos;

• Após a incubação à temperatura adequado, faz-se a leitura –

mediação do halo de inibição do crescimento em volta do disco em

mm;

• Resultado:_________________________ V Curso de Licenciatura __________________________________________________ 1.º ano/1.º semestre __________________________

49


•Resistente – não forma halo;

•Sensível – forma halo.

• Método de diluição:

• Meio de cultura semi-sólido ou líquido;

• Antibiótico em concentração crescente;

• Suspensão bacteriana sempre igual;

• Leitura e avaliação no caldo de turvação, podendo avaliar:

•CMI (concentração mínima inibitória) que impede o

crescimento bacteriano;

•CMB (concentração mínima que leva à morte de 99% das

bactérias).

Cultura e isolamento

Bactérias, fungos, parasitas e vírus:

• Meios adequados que permitam a multiplicação bacteriana;

• Vírus e microorganismos intracelulares são cultivados em células do

Homem, animais ou embriões;

• Os produtos biológicos são semeados directamente nos meios de cultura;

• Algumas amostras antes de serem cultivadas têm de ser tratadas;

• As culturas de produtos biológicos com flora residente exigem meios

selectivos que favoreçam o crescimento dos microorganismos

potencialmente patogénicos;

• Culturas incubadas – atmosfera, humidade e temperatura adequadas;

• O tempo de incubação depende da capacidade de replicação:

• Crescimento rápido – 18-24h;

• Crescimento fastidioso – 48-72h;

• Anaeróbios estritos – 48-96h.


50


• Colónias bacterianas são a forma de detecção do crescimento de fungos

e bactérias;

• Efeito citopatogénico (ECP) – um vírus em crescimento é detectado por

alterações morfológicas nas células infectadas.

DETECÇÃO DA RESPOSTA IMUNE ESPECÍFICA CONTRA O AGENTE

INFECCIOSO

Quando não é possível identificar o microorganismo recorre-se à técnica

imunológica que permite avaliar a resposta imune do hospedeiro infectado.

Os microorganismos são nos hospedeiros antigénios e induzem a resposta

específica imunohumoral e celular.

Detecção da resposta imunohumoral

Diagnóstico serológico

Pesquisa de anticorpos ou antigénios específicos.

A resposta humoral está ligada à actividade dos linfócitos B, estas células

produzem anticorpos e estes ligam-se especificamente aos antigénios que o organismo

não reconhece como seus e quer eliminar.

Os anticorpos pesquisam-se no soro, plasma, urina e outros líquidos biológicos.

Quantificação dos anticorpos

É determinante para efectuar o diagnóstico. As reacções antigénio/anticorpo

fazem-se em diluições seriadas do soro do doente.


51


Título de anticorpo – é o inverso da mais alta diluição do soro que dá ainda

resultado positivo.

Só por si a presença de anticorpos específicos não afirma que o doente está

infectado mas é necessário avaliar a evolução do título de anticorpos específicos:

• 1.ª colheita de soro na fase de doença;

• 2.ª colheita de soro na fase de convalescença.

Estas duas colheitas efectuam-se com pelo menos 15 dias de intervalo.

Os anticorpos específicos surgem entre a 1.ª e 2.ª semana, após o contacto com o

microorganismo.

Atingem posteriormente o valor máximo e descem para valores basais.

Interpretação das provas serológicas

• Limitações;

• Resultados positivos;

• Falsos resultados positivos.

Reacção cruzada – acontece com testes muito sensíveis mas pouco específicos,

porque os antigénios usados são comuns a outros microorganismos.

Os resultados positivos devem sempre que possível ser confirmados por técnicas

mais específicas.

Devemos titular os anticorpos e determinar a classe para avaliar a possibilidade

da relação com a infecção aguda.

Resultados negativos

Se há grande suspeita de infecção deve repetir-se a colheita mais tarde, pois a

primeira colheita pode ter sido precoce, não há ainda anticorpos detectáveis.

Há pessoas imunocomprometidas, isto é, não respondem às infecções com

produção de anticorpos a um nível detectável.

Exemplos de pessoas imunocomprometidas:

• Doentes do foro oncológico;


52


• Diabéticos;

• Cirróticos;

• Insuficientes renais;

• Doentes muito idosos.

Isto são doentes que têm uma patologia de base muito debilitante.

Resposta imunocelular

Depende da actividade dos linfócitos T que são responsáveis pela resposta

inflamatória local – intradermo-reacção (tumefacção limitada, zona quente). É a reacção

à inoculação intradérmica de antigénios de agentes infecciosos.

A reacção positiva da intradermo-reacção serve quando positiva para dizer que já

houve contacto anterior com o agente infeccioso.

Pessoas anérgicas (reacção infectiva)

• Pessoas sem contacto com o agente;

• Pessoas no início da infecção;

• Pessoas imunocomprometidas.

Decisão diagnóstica

Há microorganismos que são sempre considerados agentes patogénicos. A sua

identificação leva sempre ao início da terapêutica.

A identificação de um microorganismo tem muito significado se a amostra é

colhida em local estéril habitualmente.

A identificação de microorganismos em locais onde existe flora comensal é

analisada com cuidado – resposta imune.

Deve ainda ter-se nesse caso em atenção o número de microorganismos e é de

considerar se for elevada a presença, e verificar se há reacção serológica compatível.

Uma subida de título do 1.º soro para o 2.º soro indica infecção recente. Uma

manutenção do título ou baixa – índice de que houve contacto com o microorganismo

no passado mas agora ele não é causa de doença.

Determinação da classe de anticorpos


53


Deve determinar-se sempre que possível a classe dos anticorpos que reagem

especificamente com o antigénio:

• IgM – surgem no início da infecção e persistem até cerca de dois meses

(fase aguda da doença) – revelam um contacto recente com o antigénio

específico (por vezes até um ano);

• IgG – na convalescença as IgG substituem as IgM e podem ficar com os

títulos residuais toda a vida;

• IgA – surgem logo no início da doença e permitem a sua detecção em

diagnóstico precoce.

Métodos utilizados para a detecção de anticorpos e antigénios

• Reacções imunoenzimáticas;

• Reacções de imunofluorescência;

• Reacções de aglutinação;

• Reacções de inibição de hemaglutinação;

• Reacções de imunodifusão;

• Reacções de fixação do complemento;

• Reacções de seroneutralização.

VÍRUS

CARACTERÍSTICAS VIRAIS

• Dimensão submicroscópica;

• Intracelular obrigatório;

• Contém informação genética num único tipo de ácido nucleico, DNA e

RNA;

• Partículas formadas por estruturas proteicas repetitivas e regulares

encerrando o ácido nucleico viral;

• Não têm metabolismo;


54


• Não produzem energia.

DEFINIÇÃO DE VÍRUS

Entidade potencialmente patogénica cujo genoma são ácidos nucleicos que se

replicam no interior de células vivas usando o equipamento de síntese celular e que

sintetizem partículas que transmitem o genoma a outras células.

DUAS PROPRIEDADES ESSENCIAIS AOS VÍRUS

• Têm material genético próprio;

• Utilizam o equipamento bioquímico da célula infectada – parasitismo

genético.

FASE EXTRACELULAR

Partículas inertes produzidas na célula sobre o comando de vírus que levam a

informação genética viral para outras células.

DEFINIÇÃO VIRAL NA PERSPECTIVA DE BIOLOGIA MOLECULAR

(Rybicki)

Elemento unitário de uma linhagem contínua com história evolutiva

individualizada.

CRITÉRIO DE VIDA

• Capacidade de replicação;

• Transmissão de informação genética;

• Evolução._________________________ V Curso de Licenciatura __________________________________________________ 1.º ano/1.º semestre __________________________

55


Ambiguidade na definição de biologia molecular:

• Plasmídeo – replicação autónoma, codifica proteínas e são

transmissíveis. Ao contrário dos vírus não têm fase extracelular;

• Viróides – são patogénicos das plantas com uma molécula de RNA, sem

genes e sem capside;

• Priões:

• Não têm ácido nucleico;

• Proteínas molecular mutada que forma agregados infecciosos.

CICLO VIRAL

Ciclo infeccioso que inclui diversas fases:

Interacção do vírus com a célula:

• Adsorção à membrana da célula;

• Penetração na célula.

Segue-se a esta fase inicial o elipse viral – não se consegue detectar o

vírus. Corresponde ao período de síntese dos componentes para formar novas

partículas viras (enzimas, ácidos nucleicos e proteínas).

Fase de maturação:

• Detectam-se após novos vírus com produção exponencial que se vão

libertar na fase final – extrusão;

• Pode ocorrer a morte celular entre 6 e 48 horas.

Este ciclo que leva à produção de novos vírus e morte da célula é o ciclo

infeccioso completo – ciclo lítico ou produtivo. Ocorre nas células permissivas.

CICLO ABORTIVO


56


• Quando o vírus não consegue expressar todas as funções necessárias à

síntese de novos vírus, chamam-se a estes vírus defectivos;

• As células não são permissivas – ocorre a síntese de alguns compostos

mas não há produção final de vírus infecciosos.

INFECÇÃO LATENTE

Quando o genoma viral fica na célula muito tempo mas não há formação de

novos vírus.

MORFOLOGIA

As partículas virais são constituídas por:

• Cápsula proteica – encerra o nucleóide;

• Nucleóide – é constituído pelo ácido nucleico e proteínas virais;

• Nucleocapside – capside mais nucleóide;

• Invólucro – reveste alguns derivados da membrana celular.

FORMA/ESTRUTURA/DIMENSÃO

• Esféricos, bastonete rígido, filamento flexível;

• Icosaédrica (vinte faces triangulares), helicoidal;

• 20-45nm.

CLASSIFICAÇÃO E TAXONOMIA

Principais critérios usados:


57


• Tipo e estrutura do genoma:

• DNA e RNA;

• DNA de cadeia linear ou circular, de cadeia simples ou dupla;

• RNA de cadeia dupla ou simples. Se a cadeia é simples pode ter uma

sequência igual ao RNAm ou RNA complementar;

• Genoma segmentado – dividido em mais do que uma molécula.

• Estrutura – icosaédrica, helicoidal, mista, com ou sem invólucro;

• Tipo de hospedeiro – vertebrados; invertebrados, plantas, fungos ou

bactérias.

Para estabelecer a diferença entre género e espécie acrescentam-se mais critérios

aos anteriores:

• Número e tipo de proteínas;

• Estratégia de replicação viral;

• Processo de transcrição;

• Propriedades físico-químicas;

• Relações antigénicas.

A classificação actual abrange 3600 vírus que constituem 75 famílias.

CLASSIFICAÇÃO DE VÍRUS DE VERTEBRADOS

Genoma Morfologia Família Exemplo

DNA

Cadeia dupla linear

Cadeia mista

Icosaédrica com

invólucro

Icosaédrica sem

invólucro

Herpes viridae Herpes

simples

Poxviridae Varíola


58


RNA

Cadeia simples RNAm

Icosaédrica Picornaviridae PoliomieliteIcosaédrica Flaviridae Febre amarelaIcosaédrica Togaviridae Rubéola

Cadeia segmentada Helicoidal Orthomyxovirida

e

Gripe

Cadeia não segmentada Helicoidal Paramyxoviridae SarampoRNA-DNA Icosaédrica Retroviridae HIV

PROCESSO DE PRODUÇÃO DE VÍRUS

Inclui diversas fases:

• Absorção:

• Adsorção do vírus (proteínas) aos receptores da membrana celular

(proteínas ou polissacarídeos);

• O tipo de receptor é factor muito importante na susceptibilidade da

célula à infecção;

• Alguns vírus têm grande especialidade de hospedeiros.

• Penetração:

• Translocação da partícula para o citoplasma da célula;

• Fusão do invólucro do vírus com a membrana celular;

• Endocitose por endossomas mediada por receptores.

• Descapsidação – perda da cápsula, pode acontecer no citoplasma ou no

núcleo celular e pode ocorrer logo depois da penetração;

• Fase sintética – fase de síntese de componentes virais (enzimas

reguladoras ou estruturais) e a replicação do genoma viral;

• Montagem e extrusão:

• Os componentes do vírus recém-sintetizados são montados em

partículas mais ou menos complexas;

• O local de replicação pode ser o citoplasma ou o núcleo;


59


• Excepção para os retrovírus cujas partículas imaturas ficam junto da

membrana celular onde adquire o invólucro e sai da célula por

gemulação;

• Excepção para os herpes, vírus de replicação nuclear, a maturação

faz-se entre os dois folhetos da membrana nuclear. Os vírus são

posteriormente transportados para o exterior pelo retículo

endoplasmático sem entrar em contacto com o citoplasma. O

invólucro é de natureza nuclear.

ESTRATÉGIA DO GENOMA VIRAL

Vários tipos de vírus e diversos genomas implicam diversos mecanismos de

expressão de informação genética e replicação do genoma.

A replicação viral tem sem excepção uma via comum.

O RNAm é traduzido em proteínas pelo equipamento das células:

• Ribossomas;

• RNAt.

De acordo com esta via, Baltimore classificou-os em grupos de estratégia.

CLASSIFICAÇÃO DE BALTIMORE (vírus dos vertebrados)

• Grupo I – vírus de DNA de cadeia dupla de replicação nuclear ou

citoplasmática. O genoma viral é transcrito em RNAm por enzimas

celulares ou enzimas virais. Decorre em duas fases:

• 1.ª fase – o DNA é transcrito em RNAm precoce e este é traduzido em

DNA – é a polimerase que replica o DNA viral;

• 2.ª fase – novo RNAm dito tardio é traduzido em outras proteínas do

vírus.


60


• Grupo II – vírus com DNA de cadeia simples. O genoma é convertido

numa molécula de cadeia dupla (forma replicativa) que serve de molde

para a transcrição do RNAm e replicação que como nos vírus do grupo I

dá-se com enzimas celulares;

• Grupo III – vírus com RNA de cadeia dupla. O RNA viral dentro do

nucleóide é transcrito em RNA+ por uma polimerase presente na capside

viral. O RNA+ serve de RNAm e serve de molde para a síntese de RNA

viral de cadeia dupla – RNA-;

• Grupo IV – nos vírus RNA+, o RNA viral pode ser usado como RNAm

que codifica e replica RNA viral;

• Grupo V – nos vírus RNA- este é transcrito em RNA complementar que

serve de RNAm. As células não têm RNA polimerases que usam RNA

como molde. Uma enzima deste tipo – transcriptase – está presente no

próprio vírus, sintetiza o RNA+ que é transcrito em RNA complementar;

• Grupo VI – retrovírus. O RNA é transcrito numa molécula de DNA de

cadeia dupla por uma enzima presente no vírus – a retranscriptase. Este

DNA é replicado e transcrito em RNAm por enzimas celulares como se

fosse DNA celular. Proteínas do vírus modificam a transcrição com

produção de RNA+, que é encapsidado como RNA viral;

• Grupo VII – vírus com DNA de cadeia dupla (vírus da hepatite B). Em

zonas do genoma a cadeia é simples, esta é preenchida por enzimas

celulares. Uma RNA polimerase celular transcreve esta cadeia reparada

em RNAm e em RNA que cobre todo o genoma. Este RNA+ é o molde

para a síntese de um híbrido RNA-DNA à custa de uma transcriptase

reversa e o híbrido é convertido em RNA viral.

VÍRUS DA HEPATITE B (HBV)

Grupo – hepadnavirus.

Tipo do genoma – DNA circular.


61


ANTIGÉNIOS IMPORTANTES

• HBsAg – Ag de superfície do vírus;

• HBeAg – Ag do invólucro ou nucleocapside;

• HBcAg – Ag do core.

O vírus localiza-se no sangue e pode disseminar-se, por replicação no tecido

linfóide, fígado e sangue.

Incubação – 1-3 meses.

Quando aumenta a lesão hepática aparecem os sintomas clínicos.

MARCADORES DA HEPATITE B

• HBsAg – indica infectividade do sangue;

• HBsAc – Ac contra o Ag de superfície. Fornece imunidade, não está

presente nos indivíduos portadores. Imunidade após infecção ou após

vacinação. Nunca está presente nos portadores;

• HBeAg – Ag da nucleocapside. Indica transmissibilidades;

• HBeAc – Ac do Ag do invólucro. Indica baixa transmissibilidade;

• HBcAg – Ag do core;

• HBcAc – Ac do Ag do core, que aparece na fase inicial.

MARCADORES SEROLÓGICOS

Seroconvenção:

• HBeAg – desaparece;


62


• Anti-HBe – aparece;

indica

• Replicação viral – evolução para cura.

Reactivação da infecção:

• HBeAg – reaparece;

• 95% dos casos de infecção HBV evoluem para cura, HBsAg e

HBeAg – desaparecem. Surgem estes Ac:

• Anti-HBc;

• Anti-HBe;

• Anti-HBs.

• 5% é infocrónica.

Hepatite activa, estão presentes – fase aguda:

• HBsAg;

• IgM anti-HBc.

Hepatite crónica – após 6 meses determinam-se:

• No soro:

• HBsAg;

• IgM anti-Hbc.

• Em biopsia hepática:

• HBeAg – hepatite crónica nativa;

• Anti-HBe – H.C. mutante.

Cura, podem desaparecer passado meses:

• Anti-HBs;

• Anti-HBe.

Vacinados contra VHB


63


Películas sintetizadas.

Ficam nos imunizados anti-HBs.

Recém-nascidos

Mãe com imunidade de infecção antiga.

RN apresenta durante meses, porque atravessam a placenta:

• Anti-HBs;

• Anti-HBe.

GRÁFICO DE SEROLOGIA E MARCADORES DA HEPATITE B

PROPRIEDADES BIOLÓGICAS DAS PRINCIPAIS CLASSES DE

IMUNOGLOBULINAS EM HUMANOS


64


Designação IgG IgA IgM IgD IgE

Principais características

Ig interna

mais

abundante

Protecção

das

superfícies

externas

Muito

eficiente na

bacteriemia

Principalment

e actua como

receptor nos

linfócitos

Inicia a inflamação,

elevada nas infecções

parasitárias, causa

síndromes alérgicasLigação ao antigénio ++ ++ ++ ++ ++

Fixação do complemento + - +++ + -Passagem transplacentária ++ - - - -

Fixação a mastócitos e

basófilos homólogos

- - - - ++

Ligação a macrófagos e

polimorfos

+++ + - - +

RICKTESIAS

MORFOLOGIA

• Bacilos Gram -:

• Coram fracamente pelo Gram;

• Corante mais usado – Gimenez. Adquirem cor vermelha – visíveis no

microscópio óptico.

• Formas cocobacilares;

• Tamanho variável das diferentes estirpes – mais pequenas que as

restantes bactérias;

• Aeróbias obrigatórias;

• Imóveis;

• Crescimento lento – bactérias fastidiosas;

• Têm DNA e RNA;

• Parede celular bacteriana;


65


• Equipamento enzimático complexo;

• Reproduzem-se por divisão binária;

• Organização celular – procariota;

• Intracelulares;

• Sensíveis a antibióticos de largo espectro – Cloranfenicol e Tetraciclina.

Morfologicamente e fisiologicamente as Ricktesias ficam entre as bactérias e os

vírus.

Desenvolvem-se obrigatoriamente em tecidos e células embrionárias –

citoplasma e por vezes no núcleo da célula do hospedeiro:

• Ciclo de vida;

• Transmissão.

RESERVATÓRIO

• Pequenos roedores – ratos caseiros;

• Pulgas, piolhos, carraças – artrópodes;

• Só acidentalmente no Homem e outros vertebrados – caprinos, outros.

CADEIA DE TRANSMISSÃO

• Multiplica-se no artrópode – reservatório;

• Transmite-se ao Homem ou a outros vertebrados por picada do artrópode

infectado – carraça, piolho, pulga;

• No caso da Coxiella burnetii o hospedeiro acidental pode ser infectado

directamente

Após multiplicação no interior da célula reservatório (infectada) as enzimas da

Ricktesia promovem a lise da parede celular do hospedeiro.

Quando libertas (vida extracelular) perdem rapidamente o poder infectante.


66


Não sobrevivem à dissecação. Excepto Coxiella burnetii que é muito resistente –

assim pode haver contágio directo com o Homem. Esta não necessita de vectores –

artrópodes.

RESITÊNCIA AOS DESINFECTANTES

Com a Coxiella burnetii, a mais resistente, deve usar-se:

• Formaldeido 5%;

• Água oxigenada 5%.

ISOLAMENTO E IDENTIFICAÇÃO

• Difícil isolamento;

• Perigosa manipulação – câmara de classe III – perigo de transmissão

através de aerossóis infectados;

• Cultura em tecidos ou embriões – laboratório especializado.

SEROLOGIA – DIAGNÓSTICO PRESUNTIVO (rotina laboratorial)

Reacção de Weil Felix que utiliza antigénios homólogos da estirpe – Proteus

vulgaris – OX – 19; OX – 2; OX – K:

• Aglutinam com os anticorpos produzidos contra a Ricktesia (dos grupos

do Tifo e Febre);

• Reacção sempre negativa para a Coxiella burnetii – agente da febre;

INCUBAÇÃO DAS DOENÇAS

Agrupam-se de acordo com a morfologia, cultura e tipo de infecção. Provocam:

• Febre;

• Mialgias; Toxinas da

• Lesão cardíaca; Ricktesia

• Hemorragia.


67


RELAÇÕES PARASITA-HOSPEDEIRO

Parasitismo – se o microorganismo beneficia na relação com o hospedeiro em

detrimento deste.

Comensalismo – quando um é beneficiado e o outro não é prejudicado;

Mutualismo – quando ambos beneficiam.

equilíbrio

Floram comensal hospedeiro

Flora comensal – microorganismos residentes num local do hospedeiro sem

provocar doença – adaptação.

O hospedeiro fornece condições de residência aos microorganismos no local:

• Nutrientes;

• pH;

• Humidade;

• Temperatura.

adequadas ao crescimento bacteriano.

ZONAS DE COLONIZAÇÃO

• Cavidade bucal;

• Tracto gastrointestinal;

• Tracto respiratório superior – fossas nasais e nasofaringe;

• Pele.


68


COMO SURGE A COLONIZAÇÃO

Antes do nascimento vivemos em condições estéreis, ao nascer começa a

colonização. Varia em alguns locais com a idade e com o sexo do hospedeiro.

A flora é constituída, por ordem crescente:

• Bactérias;

• Leveduras;

• Parasitas.

BENEFÍCIOS E RISCOS DA FLORA COMENSAL PARA O HOSPEDEIRO

• Barreira de defesa contra as infecções – impedem a colonização da sua

zona de residência por outras bactérias (são selectivos), mantendo assim

o equilíbrio das diversas populações residentes no local;

• Potenciais patogénicos – podem provocar doença em caso de se romper

o equilíbrio entre ambos.

MECANISMOS DE REGULAÇÃO DO HOSPEDEIRO NA FLORA COMENSAL

PELE

• pH ácido e lisozima (suor) – têm ambos acção bactericida;

• Produção de ácido láctico, pela presença de:

• Staphylococcus epidermidis;

• Staphylococcus aureus.

• Propionibacterium acne – digestão da gordura da pele que impede os

fungos de se instalarem;


69


A pele é a primeira barreira do hospedeiro.

TRACTO RESPIRATÓRIO

• Colonização da mucosa nasal:

• Staphylococcus aureus;


• Haemophilus influenzae;

• Difteróides;

• Streptococcus pneumoniae;

• Neisseria.

• Mucosa nasal – constitui uma barreira de defesa à colonização do tracto

respiratório inferior (brônquios, traqueia e alvéolos pulmonares);

• Movimento ciliar – impede mecanicamente a entrada de partículas e

bactérias, com um movimento de dentro para fora (os fumadores têm

redução do movimento ciliar, devido ao calor, tendo maior predisposição

para infecções respiratórias;

• Muco nasal – rico em lisozima (bactericida);

• Presença de comensais ajuda a que não se instalem novas populações.

CAVIDADE ORAL

• A humidade da mucosa e os resíduos alimentares favorecem o

crescimento de uma flora muito variável;

• A flora aeróbia é predominante – Streptococcus alfa-hemolítico;

• Anaeróbios facultativos:

• Lactobacilus;

• Bacteróides;

• Actinomyces;


70


• Candida.

TRACTO GASTROINTESTINAL

A saliva arrasta parcialmente a flora para o estômago, mas são residentes em

pouca quantidade por acção do suco gástrico – pH muito baixo é incompatível com a

sobrevivência da maioria das bactérias.

Estômago

• Streptococcus;

• Staphylococcus;

• Candida;

• Haemophilus pylori.

Intestino alto

Pouca flora similar à anterior, destruída por:

• Suco gástrico;

• Bílis;

• Suco pancreático.

Intestino grosso

• pH alcalino;

• Fermentação dos alimentos, com a ajuda da flora;


71


• Predispõem ao desenvolvimento das bactérias:

• Bactérias anaeróbias – bacteróides;

• Enterobactérias – Estrectcia coli;

• Enterococcus fecalis;

• Leveduras – Candida albicans;

• Parasita – Trichomonas hominis.

Mecanismos de regulação da população

• Peristaltismo;

• Fezes;

• Muco – lisozima;

• Dieta.

O que pode desequilibrar o ecossistema

• Alteração da dieta;

• Stress – altera o peristaltismo;

• Antibióticos – destroem os patogénicos e a flora comensal podendo

seleccionar bactérias multiresistentes.

TRACTO GENITO-URINÁRIO

• Rins;

• Uretra; estéreis

• Bexiga.


72


URETRA TERMINAL

Tem flora proveniente do tracto intestinal, mas que é removida pela urina:


• Enterococcus fecalis;

• Enterobactérias – Estrectcia coli.

Pode ocorrer infecção por maior parte da população, devido a ascensão no tracto

urinário – colonização da bexiga (cistite) até ao rim (pielonefrite), devido a:

• Alteração do pH;

• Desidratação;

• Má higiene;

• Defeitos congénitos.

TRACTO GENITAL

• Varia com o sexo;

• Varia com a idade;

• Na mulher o pH é ácido:

• Bacilos Döderlein – período fértil;

• Leveduras;

• Enterococos;

• Enterobactérias.

DOENÇA INFECCIOSA

Doença infecciosa – sintomas clínicos;

Infecção assintomática – sem sintomas clínicos.


73


Portadores – perigo para a saúde pública – transmitem o agente infeccioso ao

indivíduo susceptível:

• Portadores em fase de incubação – transmitem a doença antes de se

manifestarem sintomas. Período de incubação – período entre o

contacto com o agente microbiano e o aparecimento dos sintomas;

• Portadores convalescentes – são infectantes após a fase aguda;

• Portadores crónicos – podem ser infectantes toda a vida.

IMUNIDADE

Mecanismos de defesa do organismo:

• Imunidade inata – imunidade natural e própria de cada indivíduo;

• Imunidade rácica – resistência de uma raça natural a um agente

infeccioso;

• Imunidade adquirida:

• Activa (natural) – adquirida por contactos, com o tempo;

• Passiva – vacinação.

Hospedeiro susceptível:

• Defesas deficientes;

• Defesas inexistentes.

Imunodeficiência adquirida ou imunocomprometimento – risco acrescido de

infecções oportunistas (flora comensal endógena ou oportunistas exógenos).

VIAS DE TRASNMISSÃO NA DOENÇA INFECCIOSA

• Transmissão directa – Homem a Homem:

• Aerossóis contaminados;

• Produtos biológicos:

• Saliva;_________________________ V Curso de Licenciatura __________________________________________________ 1.º ano/1.º semestre __________________________

74


• Sangue;

• Urina;

• Fezes.

• Transmissão indirecta – vectores (moscas, mosquitos, carraças –

artrópodes):

• Reservatórios – se há multiplicação do agente (essencial ao ciclo de

vida parasita);

• Passivos – apenas transmitem.

MECANISMOS DE DEFESA CONTRA AS INFECÇÕES

DEFESAS MECÂNICAS

• Integridade estrutural;

• Química das células queratinizadas – não atacadas pelas enzimas dos

microorganismos;

• Glândulas sebáceas e sudoríparas;

• Ácidos gordos esterificados (anti-microbianos) – pH ácido;

• Flora comensal – pH ácido;

• Cílios – colicinas.

DEFESAS QUÍMICAS

• Muco;

• Lisozina;

• Lactoferrine;

• IgA.


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DEFESAS INTERNAS

• Fagócitos – defesa não específica dos tecidos;

• Anticorpos – defesa específica.

DEFESA HUMORAL

• Anticorpos;

• Mediadores de reacção – activadores do complemento (inactivo a 55ºC)

SISTEMAS DO COMPLEMENTO

Activado, produz em cascata vários factores (factores do complemento) de

natureza proteica e actividade proteásica e inibitória – actividade citolítica (receptores

de células fagocitaicais, mastócitos e basófilos).

VIAS DE ACTIVAÇÃO

• Via clássica – activada pelo complexo Ag/Ac, que amplia a acção;

• Via alternativa – ligação directa ao microorganismo.

ANTICORPOS – IMUNOGLOBULINAS

Podem ser classificadas em:

• Aglutininas;

• Precipitinas;

• Opsoninas;

• Citosinas.


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Classes de imunoglobulinas (por ultracentrifugação)

• IgM – macroglobulinas;

• IgG;

• IgA;

• IgD;

• IgE.

São constituídas por cadeias leves (L) e pesadas (H), dois fragmentos Fab

(factores de ligação ao Ag) e um fragmento Fc.

São produzidas nos linfócitos B.

A sua actividade antimicrobiana deve-se ao envolvimento de:

• Neutralização – eliminação de toxinas;

• Opsonização – actividade fagocitária;

• Activação do complemento – via clássica;

• Citotoxicidade;

• Inactivação;

• Bloqueio dos receptores – impede a aderência às cápsulas alvo;

• Sensibilização celular – ligação às células para destruição dos

microorganismos;

• Aglutinação – formação de complexos Ag/Ac para eliminação,

impedindo a sua solubilização.

INTERFERÕES

Actividade antivírica.

Impedem a replicação viral nas células infectadas.

PROTEÍNAS DE FASE AGUDA

Proteínas plasmáticas de síntese hepática:


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• Proteína C reactiva;

• Fibrinogénio;

• Factor C3 do complemento;

• α2 – macroglobulina;

• Transportadores – haptoglobina e cerulopasmina.

FAGÓCITOS

• Tecidos – macrófagos;

• Circulação:

• Granuloritos neutrófilos;

• Granuloritos Eosinófilos;

• Monócitos.

INTERLEUCINAS E CITOCINAS

Mediadores dos leucócitos.

FACTORES DE VIRULÊNCIA DOS MICROORGANISMOS – MECANISMOS

DE FUGA ÀS DEFESAS DO HOSPEDEIRO

• Adesão ao hospedeiro;

• Disseminação – invasão;

• Localização;

• Indução de lesão.

INTERACÇÕES NÃO ESPECÍFICAS


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Atracção de polaridade oposta ou ligações covalentes.

INTERACÇÕES ESPECÍFICAS

• Receptores celulares do hospedeiro (fracção glucídica que está

envolvida):

• Glicoproteínas;

• Glicolípidos;

• Proteoglicanos.

• Receptores das bactérias – adesinas (fracção proteica):

• Fímbrias;

• Fibrilas.

TOXINAS

Moléculas tóxicas que matam ou lesam as células do hospedeiro. Permitem a

invasão e a colonização do hospedeiro:

• Exotoxina – secretada pela bactéria para o meio ambiente;

• Endotoxina – moléculas da estrutura da própria bactéria.

Como actuam

• Sobre a membrana celular – lise;

• Acção intracelular:

• Inibidores de síntese proteica;

• Activadores enzimáticos;

• Inibem a transmissão de impulsos nervosos – lesão neurológica

(paralisia).


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ENZIMAS

• Coagulase – leva à formação de coágulos. Promove neste a

multiplicação dos microorganismos e foge ao ataque do sistema

imunitário (camuflagem);

• Hidrolise:

• Fibrinolisina – lise da fibrina;

• Hialuronidase – tecido conjuntivo;

• Proteinases;

• Nucleases;

• Colagenases;

• Lipases.

Invasão e disseminação dos microorganismos.

RESISTÊNCIA AO COMPLEMENTO

• Gram + – possuem peptidoglicano que as torna resistentes à lise mediada

pelo complemento;

• Gram - – algumas destas bactérias inibem os mecanismos de adesão do

complemento (lipopolissacarídeos).

ESCAPE À FAGOCITOSE

• Impedem a chegada de células fagocitárias ao local de lesão, segregando

substâncias que impedem a quimiotaxia dos granulócitos e monócitos;

• Impedem a activação do complemento à sua superfície:

• Cápsula – polissacarídeo;

• Proteína M – Streptococcus;


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• Proteína A – Staphylococcus.

• Bloqueiam os receptores de ligação à célula fagocitária.

PARASISTISMO INTRACELULAR

Infectam as células e destroem os tecidos por lise das próprias células ou não

promovem a lise, é o próprio mecanismo de defesa do hospedeiro que provoca a sua

morte.

INFECÇÃO DE CÉLULAS EPITELIAIS E PARENQUIMATOSAS

São os macrófagos e os granulócitos que as lisam para travar a infecção, por

estas células não terem mecanismos antimicrobianos.

INFECÇÃO DE CÉLULAS FAGOCITÁRIAS

Monócitos e granulócitos.

MECANISMO INTERCELULAR

• Lisam o vacúolo fagócito;

• Inibem os mecanismos oxidativos da digestão;

• Multiplicam-se dentro de vacúolos alternativos.

ESCAPE AO SISTEMA IMUNOLÓGICO

• Pobreza antigénica – impedem o hospedeiro de reconhecer o agente

microbiano;_________________________ V Curso de Licenciatura __________________________________________________ 1.º ano/1.º semestre __________________________

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• Aquisição de Ag do hospedeiro – este não reconhece o agente

microbiano como o invasor mas como o “self”;

• Formação de coágulo – camuflagem com estruturas do próprio

hospedeiro para não ser detectado;

• Sequestro antigénico – os macrófagos sequestram os Ag que permitem o

reconhecimento pelo sistema imunitário se estão expostos à superfície;

• Variação antigénica – o reconhecimento do Ag de superfície dos

microorganismos desencadeia a activação dos linfócitos e produção de

Ac específicos. Se o microorganismo variar a estrutura do antigénio

escapa à resposta específica do sistema imunitário.

MIMETISMO MOLECULAR

Os microorganismos adquirem moléculas para a sua estrutura homóloga de

estruturas do hospedeiro por integração dos genes do hospedeiro no seu próprio

genoma. Seleccionam moléculas que o organismo infectado não reconhece por serem

análogas a estruturas suas.

DESINFECÇÃO/ESTERELIZAÇÃO

Desinfecção – processo físico ou químico, pelo qual os agentes patogénicos ou

micróbios causadores de doenças são destruídos.

Esterilização – processo mediante o qual todas as formas de vida – bactérias,

esporos, fungos e vírus – contidos em, líquidos, utensílios, instrumentos e substâncias

são completamente destruídos.

MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO

• Físicos:

• Calor húmido – vapor saturado sob pressão (autoclaves verticais e

horizontais):

• Vantagens:


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•Rapidez;

•Não é tóxico;

•Económico.

• Inconvenientes:

•Corrosão de materiais metálicos;

•Destruição de plásticos;

•Destruição de fios cortantes.

• Calor seco – ar quente (estufas):

• Vantagens:

•Aparelhos de fácil instalação;

•Menos perigoso – não trabalha com pressão;

•Mais económico.

• Inconvenientes:

•Deterioração de matérias termo-sensíveis – borrachas e

plásticos);

•Processo demorado;

•Difícil de controlar – pouco fiável).

• Incineração.

• Químicos:

• Óxido de etileno (gás):

• Vantagens:

•Não detiora os objectos cortantes nem os termo-sensíveis;

•Eficaz sobre bactérias e esporos;

•Tem grande capacidade de penetração.

• Inconvenientes:

•Ciclos de esterilização longos;

•Deixa resíduos tóxicos em alguns materiais;

•Necessita de arejamento;

•Mais caro que os outros métodos;

•Instalação perigosa – fugas._________________________ V Curso de Licenciatura __________________________________________________ 1.º ano/1.º semestre __________________________

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DETERGENTES, DESINFECTANTES E ANTISSÉPTICOS

Detergentes – substância tensioactiva com efeito mecânico sem acção

antibacteriana.

Antissépticos e desinfectantes – são ambos bactericidas, por vezes fungicidas e

virucidas.

Antissépticos – destina-se ao uso clínico, para uso externo – lavagem, penso,

irrigação.

Desinfectantes – aplicação externa – chão, material e outras superfícies.

FAMÍLIAS DE ANTISSÉPTICOS E DESINFECTANTES

• Oxidantes – compostos que libertam oxigénio;

• Água oxigenada – H2O2;

• Derivados halogenados – hipoclorito de sódio 0,5% (água de jável), é

irritante, só se usa como desinfectante;

• Soluto de Dakim (antisséptico) – hipoclorito de sódio mais permanganato

de potássio;

• Cloraminas – derivados orgânicos clorados;

• Derivados iodados – o iodo é um antisséptico muito usado;

• Tintura de iodo 0,5%;

• Álcool iodado 1%;

Polividona iodada (antisséptico)

Pele, feridas e mucosas.

Tem espectro muito largo sobre bactérias Gram +, Gram -, BAAR, vírus, esporos

e fungos.


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Tensioactivos

• Tensioactivos aniónicos – sais alcalinos;

• Tensioactivos catiónicos ou compostos de amónia quaternários;

• Tensioactivos anfóteros – largo espectro.

Fenóis

Fenol e derivados.

Relativa eficácia sobre bactérias Gram - e BAAR, dada a concentração lipídica

da membrana celular destes microorganismos.

Corantes

Muito utilizados em dermatologia – fracos antissépticos:

• Verde malaquite;

• Verde brilhante;

• Violeta genciana.

Em solução aquosa ou alcoólica:

• Eosina;

• Azul de metileno.

Aldeídos (desinfectantes)

São derivados dos metais – pouco usados porque são tóxicos.

O seu poder deve-se à ionização do metal:

• Sais de ouro – reumatologia;

• Sais de cobre, zinco e prata – oftalmologia e otorrino;

• Sais de mercúrio – antissépticos.

Carbanilidas (antissépticos)


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Compostos de duplo núcleo benzénico. Triclorocarbanilidade.

Álcoois

• Monoálcoois – antissépticos:

• Etanol – 70º ou 90º;

• Isopropanol – necessita de H2O.

• Diálcoois – desinfectantes muito tóxicos:

• Metanol;

• A. Benzílico.

CRITÉRIOS DE EFICÁCIA DOS ANTISSÉPTICOS

• Factores físicos:

• pH – no local de acção;

• Temperatura e luz – degradam as moléculas activas.

• Factores químicos – não juntar substâncias desconhecidas porque pode

haver antagonismo ou sinergismo;

• Factores microbiológicos:

• Gram + – muito sensíveis a todos os antissépticos;

• Gram - – menos sensíveis (mais lípidos na membrana);

• Vírus – pouco sensíveis.

O uso não adequado de antissépticos leva à selecção de espécies, havendo já

estirpes resistentes a antissépticos no ambiente hospitalar, pelo que o seu uso obedece a

critérios e políticas de cada instituição de acordo com o conhecimento do seu

ecossistema, que deve ser revisto anualmente.

PARASITOLOGIA


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Helmintas:

• Intestinais;

• Nos tecidos:

• Nemátodos;

• Tremátodos;

• Céstodos.

HELMINTAS INTESTINAIS

Diagnóstico – pesquisa de:

• Parasitas adultos;

• Ovos;

• Larvas.

Nas fezes:

• Parasitas – macroscópicos;

• Larvas e ovos – microscópicos.

Características dos ovos:

• Tamanho;

• Forma – mamilonados, operculados, corticados;

• Estádio de desenvolvimento – embrionados e não embrionados.

Após a infecção no hospedeiro não há parasitas mas ovos e larvas (maturação) –

estes últimos podem encontrar-se na expectoração.

NEMÁTODOS

Tamanho variável.

Corpo comprido e cilíndrico.

Os parasitas adultos vivem no tracto intestinal.

Podem ter vários hospedeiros intermediários ou não ter.

Têm macho e fêmea, excepto Strongyloides._________________________ V Curso de Licenciatura __________________________________________________ 1.º ano/1.º semestre __________________________

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Quatro estádios de larvas.

Cinco estádios de adultos.

Estádio injectante – 1.º a 3.º estádio de larva.

ENTEROBIUS VERMICULARES (Oxiures)

Habitat – ceco, recto, apêndice e cólon.

As fêmeas põem os ovos na região perianal – causa prurido.

As crianças são as mais afectadas.

Reinfestam-se frequentemente.

A gravidade de pende do grau de infestação.

ASCARIS LUMBRICOIDES (Lombriga)

O mais frequente dos parasitas.

As fêmeas pões os ovos que são eliminados pelas fezes – ficam no solo três

semanas.

Os ovos fixam-se no intestino, e eclodem as larvas.

Na fase de maturação migram – fígado e pulmão.

Voltam ao intestino para completar a maturação – parasita adulto.

A infecção pode ser:

• Parasita – oclusão intestinal;

• Larva – pneumonite;

• Eosinofilia.

TRICHURIS TRICHURIA

Habitat – ceco.

Mais frequente nas crianças mais velhas.

Por vezes associado ao Ascaris.

Diagnóstico – ovos nas fezes (mamilonados barris de cor castanha), em diarreia.

Os ovos ficam no solo duas a três semanas – larvas infectantes (no hospedeiro).


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STRONGYLOIDES STERCORALIS

Habitat:

• Regiões sub-tropicais;

• Algumas regiões temperadas – endémico (nordeste transmontano).

• Reservatório – água.

• No Homem – mucosa intestinal, migra no lúmen intestinal.

Ciclo intestinal – só há fêmeas – ovos são eliminados nas fezes (larvas).

Ciclo de vida livre – macho/fêmea, as larvas são filariformes (penetram a pele),

e o 1.º estádio de larva tem forma infestante.

Número elevado no intestino, invadem muitos órgãos e provocam morte –

doentes com SIDA.

TREMÁTODOS

Habitat dos adultos – intestino, pulmão, fígado e sangue.

Ciclo – vários hospedeiros:

• Fase infectante para o Homem, desenvolve-se no molusco;

• Cercária – molusco (ovo), larva ciliada (tecidos do hospedeiro

intermediário), larva;

• Metacercária – na água infecta plantas aquáticas (fica enquistada).

FASCÍCOLA HEPÁTICA

No Homem migra do intestino (ductos biliar) para o fígado – fascioliase.

SCHISTOSOMA (Bilharziose)


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• Schistosoma japonicum – urina;

• Schistosoma mansoni – urina;

• Schistosoma healmatobium – fezes.

Habitat:

• África;

• Ásia;

• Portugal – zona do Algarve;

• No Homem – cavidade intestinal.

Macho/fêmea.

Ovos operculados (saída do miracídeo) – eliminados pelas fezes ou urina.

Parasitose grave – morbilidade e mortalidade.

CÉSTODOS

• Taenia saginata;

• Taenia solium;

• Hymenolepsis nana.

Habitat:

• Ubiquitários – distribuição mundial;

• Intestino delgado.

Corpo – fita de mastro, brancos, com corpo segmentado.

Diagnóstico:

• Ovos – morfologia;

• Proglotis – segmentos do corpo;

• Escolex (cabeça) – com ganchos/fixada na mucosa intestinal;


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• Parasita adulto – solitário no intestino;

Os proglotis soltam-se e são eliminados nas fezes, se grávidos libertam os ovos

(ingeridos por animais – vaca) – escolex enquistado nos tecidos (cisticercose).

Os proglotis podem rebentar no intestino do Homem e libertar ovos visíveis nas

fezes.

Podemos infestar-nos com carne de animais infestados – carne mal cozida.

Provocam:

• Diarreia;

• Desconforto intestinal;

• Oclusão – devido a grandes dimensões (vários metros);

• Podem sobreviver vinte anos no intestino (ficando o escolex – regenera-

se os proglotis).


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