MEIOS DE CULTURA

Os meios de culturas são preparações quimicas que posuem em sua formulação, nutrientes necessários para que os microrganismos possam multiplicar-se permimtindo seu estudo.

Componentes

Entre os principais componentes de um meio de cultura estão as fontes de carbono e energia como os açúcares, as fontes de nitrogênio, fósforo e sais minerais. Outros componentes mais específicos podem ser encontrados em um meio especifico para um determinado organismo (meio selectivo), estes são os Fatores de Crescimento como as vitaminas, aminoácidos, e outros mais.

Por outro lado podemos ter num meio agentes/constituintes que inibam o crescimento de determinados microrganismos, sendo estes também considerados meios selectivos.

Além de meios selectivos existem também meios que permitem diferenciar microrganismos (meios diferenciadores ou diferênciais), o exemplo mais simples é a existencia de um indicador de pH que permite verificar se, por exemplo, um açúcar presente no meio é '''metabolismo''' pois, ao ser, implica a produção de metabólitos que acidificam o meio alterando o seu pH e consequentemente a alteram a cor do indicador de pH.

Tipos

Quanto à consistência

sólido semi-sólido liquido

Quanto à função

Enriquecedor Seletivos Diferenciadores Manutenção

Quanto à natureza

Animados Inanimados

Formulação dos meios de cultivo

Os meios de cultura são classificados quanto ao estado físico em sólidos, quando contém agentes solidificantes, principalmente ágar (cerca de 1

a 2,0 %). Os semi-sólidos, quando a quantidade de ágar e ou gelatina é de 0,075 a 0,5 %, dando uma consistência intermediária, de modo a permitir o crescimento de microrganismos em tensões variadas de oxigênio ou a verificação da motilidade e também para conservação de culturas. Os líquidos, sem agentes solidificantes, apresentam-se como um caldo, utilizados para ativação das culturas, repiques de microrganismos, provas bioquímicas, e dentre outros.

Os meios de cultura podem ainda ser classificados quanto a procedência dos constituintes em naturais ou complexos, quando usa ingredientes com composição química não definida, tais como extratos de vegetais (malte, tomate, amido de tubérculos, peptona de soja, etc.) de animais (carne, cérebro, fígado, caseína, etc.) e de microrganismos (levedura) e artificiais, sintéticos ou ainda quimicamente definidos quando a composição química é conhecida (usados para trabalhos de pesquisa) e seus componentes servem para suprir as exigências nutritivas dos microrganismos, em fontes de carbono, nitrogênio, vitaminas, energia, sais minerais, dentre outros, quando então são conhecidas as necessidades nutricionais específicas. Quanto à composição química podem ser simples (meios básicos) ou complexos.

Básicos são aqueles que permitem o crescimento bacteriano, sem satisfazer contudo nenhuma exigência em especial (Ex. caldo e ágar simples).

Especiais quando cumprem com as exigências vitais de determinados microrganismos, como meio de infusão de cérebro e coração, ágar suco de tomate, ágar sangue, meio de Loeffler (com soro bovino), ágar chocolate (ágar simples fundido, adicionado de sangue e aquecido a 80 °C), Meio de Tarozzi (com fragmento de fígado - para anaeróbios), Meio de Lowenstein, meios Shahidi Ferguson Perfringens (SFP), Triptose Sulfito Ciclosserina (TSC), Baird-Parker (com gema de ovo) (meios ricos ou meios enriquecidos com as substâncias citadas), etc.

Classificação

De acordo com a finalidade bacteriológica ou micológica os meios especiais podem ser classificados em:

Meios de pré-enriquecimento - são aqueles que permitem a dessensibilização de microrganismos injuriados, i.e., para amostras que sofreram algum tipo de tratamento (térmico ou químico). Ex. Água peptonada, caldo lactosado (isolamento de salmonelas de leite em pó).

Meios de Enriquecimento - quando proporcionam nutrientes adequados ao crescimento de microrganismos presentes usualmente em baixos números ou de crescimento lento, bem como microrganismos exigentes e fastidiosos. Esses meios têm a propriedade de estimular o crescimento de determinados microrganismos, mas existem alguns que também podem inibir o crescimento de outros. Ex. Caldo Tetrationato e Selenito-Cistina para cultivo de Salmonelas (líquidos), Caldo Tioglicolato para Clostridium perfringens.

Diferenciais - quando contém substâncias que permitem estabelecer diferenças entre microrganismos muito parecidos, tais como meio de Teague ou Eosina Azul de Metileno (diferencial para coliformes), Ágar MacConkey para a diferenciação de enterobactérias, Ágar sangue, ágar Baird-Parker para isolamento e diferenciação de cocos Gram positivos (sólidos).

Seletivos - os que contém substâncias que inibem o desenvolvimento de determinados grupos de microrganismos, permitindo o crescimento de outros. Exemplo: meios com telurito de potássio (para isolamento de Corynebacterium diphtheriae), ágar Salmonella-Shigella (SS) e ágar MacConkey, meios com sais biliares e verde brilhante para isolamento seletivo de Salmonella, meios com 7,5% de cloreto de sódio, meio Baird-Parker, para isolamento de Staphylococcus aureus, meios com antibióticos para isolamento de diversos microrganismos (TSC, SFP, meio de Blaser, meio de Skirrow, etc.). A maioria deles é também diferencial, permitindo diferenciar as colônias (sólidos) dos microrganismos.

Meios de triagem - meios que avaliam determinadas atividades metabólicas permitindo caracterização e identificação perfunctória ou presuntiva de muitos microrganismos (ágar tríplice açúcar e ferro, meio Instituto Adolfo Lutz, uréia, etc.);

Identificação - prestam-se para a realização de provas bioquímicas e verificação de funções fisiológicas de organismos submetidos a identificação (meios Oxidação/Fermentação, Ágar Citrato, Caldo nitrato, meio semi-sólido, caldo triptofano, meio de Sulfito Indol Motilidade, etc.;

Dosagem - empregados nas determinações de vitaminas, antibióticos e aminoácidos;

Contagem - empregados para a determinação quantitativa da população microbiana (Agar de Contagem em Placas, TSC, Agar Batata Dextrose, Ágar Baird-Parker, etc.);

Estocagem ou manutenção - utilizados para conservação de microrganismos no laboratório, i.e. garantem a viabilidade de microrganismos (Ágar Sabouraud, Meios com leite, Ágar suco de tomate, Ágar sangue, Ágar Simples, meio semi-sólido, etc.)

Preparo do meio de cultura.

Preparo dos meios de cultura

1. A água utilizada na reidratação dos meios de cultura deverá ser destilada ou deionizada.

2. Os meios preparados comerciais, devem ser pesados separadamente em papel manteiga ou papel alumínio

3. Adicionados em um único frasco (normalmente em béquer, erlenmeyer);

4. Hidratar em pequena quantidade de água até que todo o meio fique úmido e só depois deve-se acrescentar o restante da água.

5. Sempre que for necessário levar o meio para fundir, usar vidro Pyrex, aquecer sobre a tela de amianto ou similar e tripé, no bico de Bunsen.

6. Usar sempre luvas térmicas apropriadas para laboratório para manipular vidrarias quentes.

7. Sempre que for usado o termo "esterilizar em autoclave", o tempo de esterilização é de 15 minutos e a temperatura de 121ºC.

8. Verifique a precisão da temperatura e controle de pressão da autoclave, utilizando para isso um indicador biológico Bacillus stearothermophilus, que morrem a 121 °C, entre 12-15 minutos.

9. Quando distribuir o meio antes de autoclavar, os tubos não precisam estar esterilizados.

10. Quando distribuir o meio após a autoclavação, os tubos, frascos, placas, pipetas e vidrarias ou materiais auxiliares obrigatoriamente devem ser estéreis.

11. Os meios devem ser autoclavados com as tampas semi-abertas, para que a esterilização seja por igual em todo o conteúdo dos tubos e frascos; tampas fechadas não permitem a entrada do vapor.

Controle de qualidade

1. Meios confeccionados, colocar no mínimo 10% do lote preparado na estufa 35 ± 1°C por 24 horas para o controle de esterilidade.

2. Não deve haver mudança de cor nem crescimento de qualquer colônia.

3. As placas de Petri são de 50, 90 ou 150 mm de diâmetro 4. Todos os meios confeccionados devem ser devidamente

identificados com o nome, data de fabricação, data de validade e tipo de armazenamento.

5. Todos os meios de placa devem ser embalados em filme plástico PVC transparente para evitar o ressecamento.

6. Evitar o uso de sacos plásticos para embalar as placas, a água de condensação formada facilita a proliferação de fungos; meios de cultura em tubos, colocar em sacos plásticos, procurando tirar o excesso de ar.

Alguns meios de cultura

1. Ágar sangue: meio não seletivo, crescimento de bactérias gram – e +

2. Ágar chocolate : meio nutritivo maioria bactérias 3. Ágar thayer-martin : meio seletivo utilizado para isolamento

Neisseria, inibe a maioria das outras bactérias. 4. Ágar MacConkey: Seletivo gram -, inibe crescimento bactérias

gram+ 5. Cled- Ágar cystine lactose eletrolyte deficient : meio que permite o

crescimento de gram+ e gram- . 6. Ágar eosin methilene blue (EMB): seletivo gram-, Inibe bactérias

gram+. Substituir.

7. Ágar Salmonella-Shigella (SS): seletivo e diferencial isolamento - fezes

8. Ágar Colistin nalidix (CNA): seletivo para Streptococcus e Enterococos. Inibe bactérias gram-

9. Caldo de tioglicolato : meio de enriquecimento maioria das bactérias

10. Ágar tetrationato : meio de enriquecimento Salmonella sp 11. Ágar karmali : meio seletivo para o isolamento de campylobacter

sp

Materiais biológicos e os meios em que deverão ser semeados

1. Secreções purulentas: sg, Mac,Tio 2. Orofaringe, Nasal, Ocular: sg 3. LCR: sg, CHO, Tio 4. Fungo : Saboraund 5. Vaginal, Uretral, Endocervical: CHO, sg 6. Ponta de cateter: sg, Tio 7. Urina: Cled e MacConkey 8. Fezes: SS e MacConkey

ESTERILIZAÇÃO POR PROCESSOS FÍSICOSA esterilização por processos físicos pode ser através de calor úmido,

calor seco ou radiação. A esterilização por radiação tem sido utilizada em nível industrial, para artigos médicos-hospitalares. Ela permite uma esterilização a baixa temperatura, mas é um método de alto custo. Para materiais que resistam a altas temperaturas a esterilização por calor é o método de escolha, pois não forma produtos tóxicos, é seguro e de baixo custo.

• Esterilização por Calor Úmido: o equipamento utilizado é autoclave. É o método de 1ª escolha tratando-se de esterilização por calor. Esta preferência se justifica por preservar a estrutura dos instrumentos metálicos e de corte, por permitir a esterilização de tecidos, vidros e líquidos, desde que observados diferentes tempos de exposição e invólucros. O mecanismo de ação biocida é feito pela transferência do calor latente do vapor para os artigos, e este calor age coagulando proteínas celulares e inativando os microrganismos. Os artigos termossensíveis não devem sofrer autoclavagem, pois a temperatura mínima do processo é de 121º C, bem como os óleos que não permitem a penetração do vapor.

Etapas para processamento: Invólucros: após limpeza, secagem e separação, os artigos deverão ser

acondicionados para serem submetidos ao ciclo de esterilização. Os instrumentos articulados, tipo tesoura, porta-agulha, devem ser embalados abertos no interior do pacote. Como invólucros para este processo, existem: papel grau cirúrgico, filme plástico de polipropileno, algodão cru duplo com 56 fios, papel crepado, caixas metálicas forradas internamente com campos simples e com orifícios para permitir a entrada do vapor.

Os invólucros deverão ser identificados quanto ao conteúdo, e todos deverão ter escrito a data de validade da esterilização. Todas as embalagens deverão portar um pedaço de fita de indicação química externa para diferenciar e certificar que os pacotes passaram pelo processo.

Os invólucros de papel crepado, papel kraft ou tecido deverão obedecer a um método de dobradura para possibilitar abertura asséptica do pacote.

Colocação da carga na autoclave: os artigos embalados em papel, dos diferentes tipos, e artigos embalados em tecido não podem ter contato entre si, pois retém umidade. Se tiverem de ser colocados na mesma carga, devem ser colocados em prateleiras diferentes da autoclave. Quanto a posição na prateleira, os invólucros devem ficar dispostos no sentido vertical, e nunca camada sobre camada na mesma prateleira, para permitir a exaustão do ar e a circulação do vapor no interior de cada pacote. As cargas de tecidos (gazes e campos) devem ser processados em cargas diferentes dos metais, caso contrário os têxteis devem ficar na prateleira superior para facilitar a penetração do calor. Os pacotes não podem encostar nas paredes internas da câmara, assim como a carga não pode ultrapassar 70% da capacidade interna. A fita indicadora química de processo deverá ser colocada em todos os pacotes ou caixas em local visível, em pequenos pedaços.

Estocagem e validade do material esterilizado: para papel Kraft a durabilidade do processo é de 7 dias de estocagem.

• Esterilização por Calor Seco: o equipamento utilizado é o Forno de Pasteur, usualmente conhecido como estufa. A esterilização é gerada através do aquecimento e irradiação do calor, que é menos penetrante e uniforme que o calor úmido. Desta forma requer um tempo de exposição mais prolongado e maiores temperaturas, sendo inadequado para tecidos, plásticos, borrachas e papel. Este processo é mais indicado para vidros, metais, pós (talco), ceras e líquidos não aquosos ( vaselina, parafina e bases de pomadas).

Etapas para processamento Invólucros: após limpeza, secagem e separação, os artigos deverão ser

acondicionados para serem submetidos ao ciclo de esterilização. Os instrumentos articulados, tipo tesoura, porta-agulha, devem ser acondicionados abertos no interior da caixa metálica. Como invólucros para este processo, existem: caixas metálicas, vidros temperados (tubo de ensaio, placas de Petri) e lâminas de papel alumínio. Utilizando-se caixas metálicas, estas devem ser fechadas com tampa. Os artigos contidos no interior das caixas devem ter um limite de volume que proporcione a circulação do calor. Preferentemente as caixas devem conter kits de instrumentos a serem usados integralmente em cada procedimento. Se utilizadas caixas maiores, contendo grande volume de artigos, recomenda-se envolver cada instrumento ou kits em papel alumínio para reduzir a possibilidade de contaminação na retirada dos instrumentos. Neste momento deve-se ter o cuidado de evitar o rompimento do papel alumínio. Os pós e líquidos devem ser colocados em vidros fechados com alumínio. Todos os invólucros deverão conter um pedaço de fita indicadora química do processo de esterilização, bem como a indicação de validade e o nome do kit ou instrumento.

Colocação da carga na estufa: os principais pontos a observar são a não sobrecarga de materiais, deixando espaço suficiente entre eles para haver uma

adequada circulação de calor. Não é permitido o empilhamento de caixas em cada prateleira da estufa.

ARMAZENAMENTO

Deve-se guardar no laboratório somente quantidades mínimas de produtos químicos. Em se tratando de reagentes líquido, manter 1 ou 2 litros no máximo. Para sais não perigosos 1 Kg e para sais reativos ou tóxicos limitar-se a algumas gramas. Quantidades maiores devem ser estocadas apropriadamente no almoxarifado.

Outro ponto importante a ressaltar é a existência de incompatibilidade entre alguns produtos químicos. Portanto, ao armazenar tais produtos, deve-se ter o cuidado de fazê-lo de forma a evitar, por exemplo, colocar produtos oxidante próximo a solvente orgânico ou pirofóricos próximo a inflamáveis.

Ao armazenar substâncias químicas, considerar:

-  Sistema de ventilação.-  Sinalização correta.-  Disponibilidade de equipamentos de proteção individual e equipamentos de proteção coletiva.-  área administrativa separada da área técnica e da armazenagem.

Produtos Químicos Incompatíveis

A lista abaixo contém uma relação de produtos químicos que, devido ás suas propriedades químicas, podem reagir violentamente entre si resultando numa explosão, ou podendo produzir gases altamente tóxicos ou inflamáveis. Por este motivo quaisquer atividades que necessitem o transporte, o armazenamento, a utilização e o descarte devem ser executados de tal maneira que as substâncias da coluna da esquerda, acidentalmente, não entrem em contato com as correspondentes substâncias químicas na coluna do lado direito Por causa do grande número de substâncias perigosas, relacionamos aqui apenas as principais.

Substâncias Incompatível com

Acetileno Cloro, bromo, flúor, cobre, prata, mercúrio

Acetona Bromo, cloro, ácido nítrico e ácido sulfúrico.

Ácido Acético

Etileno glicol, compostos contendo hidroxilas, óxido de cromo IV, ácido nítrico, ácido perclórico, peróxidios, permanganatos e peróxidos, permanganatos e peroxídos, ácido acético, anilina, líquidos e gases combustíveis.

Ácido cianídrico Álcalis e ácido nítrico

Ácido crômico [Cr(VI)]Ácido acético glacial, anidrido acético, álcoois, matéria combustível, líquidos, glicerina, naftaleno, ácido nítrico, éter de petróleo, hidrazina.

Ácido fluorídrico Amônia, (anidra ou aquosa)<>

Ácido Fórmico Metais em pó, agentes oxidantes.

Ácido Nítrico (concentrado)Ácido acético, anilina, ácido crômico, líquido e gases inflamáveis, gás cianídrico, substâncias nitráveis.

Ácido nítrico

Álcoois e outras substâncias orgânicas oxidáveis, ácido iodídrico, magnésio e outros metais, fósforo e etilfeno, ácido acético, anilina óxido Cr(IV), ácido cianídrico.

Ácido Oxálico Prata, sais de mercúrio prata, agentes oxidantes.

Ácido Perclórico

Anidrido acético, álcoois, bismuto e suas ligas, papel, graxas, madeira, óleos ou qualquer matéria orgânica, clorato de potássio, perclorato de potássio, agentes redutores.

Ácido pícricoamônia aquecida com óxidos ou sais de metais pesados e fricção com agentes oxidantes

Ácido sulfídricoÁcido nítrico fumegante ou ácidos oxidantes, cloratos, percloratos e permanganatos de potássio.

Água

Cloreto de acetilo, metais alcalinos terrosos seus hidretos e óxidos, peróxido de bário, carbonetos, ácido crômico, oxicloreto de fósforo, pentacloreto de fósforo, pentóxido de fósforo, ácido sulfúrico e trióxido de enxofre, etc

Alumínio e suas ligas (principalmente em pó)

Soluções ácidas ou alcalinas, persulfato de amônio e água, cloratos, compostos clorados nitratos, Hg, Cl, hipoclorito de Ca, I2, Br2 HF.

AmôniaBromo, hipoclorito de cálcio, cloro, ácido fluorídrico, iodo, mercúrio e prata, metais em pó, ácido fluorídrico.

Amônio NitratoÁcidos, metais em pó, substâncias orgânicas ou combustíveis finamente divididos

AnilinaÁcido nítrico, peróxido de hidrogênio, nitrometano e agentes oxidantes.

Bismuto e suas ligas Ácido perclórico

Bromo acetileno, amônia, butadieno, butano e outros gases de petróleo, hidrogênio, metais finamente divididos, carbetos de sódio e terebentina

Carbeto de cálcio ou de sódio

Umidade (no ar ou água)

Carvão Ativo Hipoclorito de cálcio, oxidantes

CianetosÁcidos e álcalis, agentes oxidante, nitritos Hg(IV) nitratos.

Cloratos e percloratos

Ácidos, alumínio, sais de amônio, cianetos, ácidos, metais em pó, enxofre,fósforo, substâncias orgânicas oxidáveis ou combustíveis, açúcar e sulfetos.

Cloratos ou percloratos de potássio

Ácidos ou seus vapores, matéria combustível, (especialmente solventes orgânicos), fósforo e enxofre

Cloratos de sódioÁcidos, sais de amônio, matéria oxidável, metais em pó, anidrido acético, bismuto, álcool pentóxido, de fósforo, papel, madeira.

Cloreto de zinco Ácidos ou matéria orgânica

CloroAcetona, acetileno, amônia, benzeno, butadieno, butano e outros gases de petróleo, hidrogênio, metais em pó, carboneto de sódio e terebentina

Cobre Acetileno, peróxido de hidrogênio

Cromo IV ÓxidoÁcido acético, naftaleno, glicerina, líquidos combustíveis.

Dióxido de cloro Amônia, sulfeto de hidrogênio, metano e fosfina.

Flúor Maioria das substâncias (armazenar separado)

Enxofre Qualquer matéria oxidante

FósforoCloratos e percloratos, nitratos e ácido nítrico, enxofre

Fósforo branco>         Ar (oxigênio) ou qualquer matéria oxidante.

Fósforo vermelho Matéria oxidante

Hidreto de lítio e alumínioAr, hidrocarbonetos cloráveis, dióxido de carbono, acetato de etila e água

Hidrocarbonetos (benzeno, butano, gasolina, propano, terebentina, etc.)

Flúor, cloro, bromo, peróxido de sódio, ácido crômico, peróxido da hidrogênio.

Hidrogênio PeróxidoCobre, cromo, ferro, álcoois, acetonas, substâncias combustíveis

Hidroperóxido de cumeno Ácidos (minerais ou orgânicos)

Hipoclorito de cálcio Amônia ou carvão ativo.

Iodo Acetileno, amônia, (anidra ou aquosa) e hidrogênio

Líquidos inflamáveisNitrato de amônio, peróxido de hidrogênio, ácido nítrico, peróxido de sódio, halogênios

Lítio Ácidos, umidade no ar e água<>

Magnésio (principal/em pó)Carbonatos, cloratos, óxidos ou oxalatos de metais pesados (nitratos, percloratos, peróxidos fosfatos e sulfatos).

MercúrioAcetileno, amônia, metais alcalinos, ácido nítrico com etanol, ácido oxálico

Metais Alcalinos e alcalinos terrosos (Ca, Ce, Li, Mg, K, Na)

Dióxido de carbono, tetracloreto de carbono, halogênios, hidrocarbonetos clorados e água.

NitratoMatéria combustível, ésteres, fósforo, acetato de sódio, cloreto estagnoso, água e zinco em pó.

Nitrato de amônio

Ácidos, cloratos, cloretos, chumbo, nitratos metálicos, metais em pó, compostos orgânicos, metais em pó, compostos orgânicos combustíveis finamente dividido, enxofre e zinco

Nitrito Cianeto de sódio ou potássio

Nitrito de sódioCompostos de amônio, nitratos de amônio ou outros sais de amônio.

Nitro-parafinas Álcoois inorgânicos

Óxido de mercúrio Enxofre

Oxigênio (líquido ou ar enriquecido com O2)

Gases inflamáveis, líquidos ou sólidos como acetona, acetileno, graxas, hidrogênio, óleos, fósforo

Pentóxido de fósforo Compostos orgânicos, água

Perclorato de amônio, permanganato ou persulfato

Materiais combustíveis, materiais oxidantes tais como ácidos, cloratos e nitratos

Permanganato de PotássioBenzaldeído, glicerina, etilenoglicol, ácido sulfúrico, enxofre, piridina, dimetilformamida, ácido clorídrico, substâncias oxidáveis

PeróxidosMetais pesados, substâncias oxidáveis, carvão ativado, amoníaco, aminas, hidrazina, metais alcalinos.

Peróxidos (orgânicos) Ácido (mineral ou orgânico).

Peróxido de BárioCompostos orgânicos combustíveis, matéria oxidável e água

Peróxido de hidrogênio 3%Cromo, cobre, ferro, com a maioria dos metais ou seus sais, álcoois, acetona, substância orgânica

Peróxido de sódio

Ácido acético glacial, anidrido acético, álcoois benzaldeído, dissulfeto de carbono, acetato de etila, etileno glicol, furfural, glicerina, acetato de etila e outras substâncias oxidáveis, metanol, etanol

Potássio Ar (unidade e/ou oxigênio) ou água

PrataAcetileno, compostos de amônia, ácido nítrico com etanol, ácido oxálico e tartárico

Zinco em pó Ácidos ou água

Zircônio (principal/em pó)Tetracloreto de carbono e outros carbetos, pralogenados, peróxidos, bicarbonato de sódio e água

A seguir, são dadas algumas recomendações para a estocagem de produtos químicos:

A) Armazenamento é centralizado - Almoxarifado

-  Construído com pelo menos uma de suas paredes voltadas para o exterior -  Possuir janelas na parede voltada para o exterior, além de porta para o acesso do Corpo de Bombeiros de houver necessidade. -  Deve possuir saída de emergência bem localizada e sinalizada. -  Deve possuir um sistema de exaustão, ao nível do teto para retirada de vapores leves e ao nível do solo para retirada dos vapores mais pesados. -  Refrigeração ambiental caso a temperatura ambiente ultrapasse a 38 ºC -  Iluminação feita com lâmpadas à prova de explosão -  Presença de extintores de incêndio com borrifadores e vasos de areia -  Prateleiras espaçadas, com trave no limite frontal para evitar a queda dos frascos.

Os cilindros de gases devem ser armazenados em locais específicos:

-  Área coberta, sem paredes e bem ventilado. -  Rede elétrica com inspeção periódica -  Os cilindros devem ser armazenados em posição vertical e amarrados com corrente -  Observar a compatibilidade

B)Armazenamento de substâncias químicas no laboratório

O armazenamento no laboratório só é permitido em pequenas quantidades, portanto deve ser:

-  Somente para quantidades limitadas

-  Os armários devem ser confeccionados em materiais não combustíveis, comportas em vidro para possibilitar a visão de seu conteúdo -  Refrigeração ambiental caso a temperatura ambiente ultrapasse a 38 ºC -  O laboratório deve possuir um sistema de identificação das substâncias armazenadas, como por exemplo um sistema de fichas contendo informações a respeito da natureza das substâncias, volume, incompatibilidade química, dentre outras

Medidas de Segurança:

-  Preparar documento informativo sobre o uso, manipulação e disposição dos produtos químicos perigosos, e divulgá-lo para todas as pessoas que trabalham no laboratório.

-  Metais reativos (sódio, potássio) são estocados com segurança, em pedaços pequenos, imersos em hidrocarbonetos (hexano, benzeno, etc) secos. -  Adquirir, sempre, a quantidade mínima necessária às atividades do laboratório. Produtos químicos faltando rótulo ou com a embalagem violada não devem ser aceitos.

-  Utilizar no laboratório somente produtos químicos compatíveis com o sistema de ventilação e exaustão existente.

-  Selar as tampas dos recipientes de produtos voláteis em uso com filme inerte, para evitar odores ou a deterioração do mesmo, se estes forem sensíveis ao ar e/ou umidade.

-  Não armazenar produtos químicos em prateleiras elevadas; garrafas grandes devem ser colocadas no máximo a 60 cm do piso.

-  Não armazenar produtos químicos dentro da capela, nem no chão do laboratório. -  Se for utilizado armário fechado para armazenagem, que este tenha aberturas laterais ou na parte superior, para ventilação, evitando-se acúmulo de vapores.

-  Observar a compatibilidade entre os produtos químicos durante a armazenagem; e reservar locais separados para armazenar produtos com propriedades químicas distintas (corrosivo, solvente, oxidante, pirofosfóricos, reativo). Não colocar, por exemplo, ácidos próximos a bases; hidróxido de amônio deve ser colocado em armário ventilado, preferencialmente separado de outros produtos.

-  As áreas (prateleiras) ou os armários de armazenagem devem ser rotulados de acordo com a classe do produto que contém.

-  Manter na bancada a quantidade mínima necessária de produtos químicos. No caso de mistura de produtos, lembrar que a mesma possui o nível de risco do componente mais perigoso.

-  Considerar de risco elevado os produtos químicos desconhecidos.