ALFONSO GALA GARCA

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ALFONSO GALA GARCA

AVALIAO DA BIOCOMPATIBILIDADE DO COMPSITO:

BIOCERMICA/CIDO POLI (LTICO-CO-GLICLICO) EM

FIBROBLASTOS E MACRFAGOS E DA RESPOSTA PULPAR

APS CAPEAMENTO DIRETO.

BELO HORIZONTE

FACULDADE DE ODONTOLOGIA

UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS GERAIS 2010

UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS GERAIS

AVALIAO DA BIOCOMPATIBILIDADE DO COMPSITO:

BIOCERMICA/CIDO POLI (LTICO-CO-GLICLICO) EM

FIBROBLASTOS E MACRFAGOS E DA RESPOSTA PULPAR

APS CAPEAMENTO DIRETO.

Tese apresentada ao Curso de Ps-graduao em

Odontologia, nvel Doutorado da Universidade Federal

de Minas Gerais, como requisito parcial para a

obteno do ttulo de Doutor em Odontologia.

rea de Concentrao: Clnica Odontolgica

Orientadora: Profa. Dra. Maria Esperanza Corts

Co-orientador: Prof. Dr. Ruben Sinisterra Milln

BELO HORIZONTE

FACULDADE DE ODONTOLOGIA

UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS GERAIS 2010

Dios mo...

Te doy gracias por haberme cuidado todos estos

aos en el Brasil y por acompaarme espiritualmente

en mi camino por el doctorado; haciendome aprender

con mucha paciencia y cario de esta inolvidable experiencia!

DEDICACIN ESPECIAL:

Dedico la presente tesis doctoral a mis amados Padres:

Irma Garca Canales y Alfonso Gala Quispe, ejemplos de vida,

por su infinito amor y sabidura mediante su gran enseanza.

Muchas gracias por creer en m y en mis objetivos incondicionalmente.

DEDICO TAMBIN :

A mis queridos hermanos Gala-Garca : Luz, Elva, Csar, Nidia, Coral, Irma y Marlon

por todo el cario y la fuerza brindada siempre.

A mis sobrinos: Lenci Abzal, Irma Isabel, Francis Marcelo, Salvador Arol, Daliana Yael,

talo Rafael, Salim Leonardo y Dal Fernando, a quienes yo amo mucho.

A mis cuados y todos mis familiares por el gran cario y toda la preocupacin demostrada,

en especial a Walter Giraldo.

A mi bello y querido pas la Republica Del Per, el cual representa mi identidad y orgullo.

AGRADECIMENTO ESPECIAL: Profa. Dra. Mara Esperanza Corts, orientadora deste trabalho, pela grande dedicao e

por ter me dado as condies necessrias para a realizao de esta pesquisa. Tenha certeza

que todo seu valioso ensino ficar sempre presente na minha vida profissional.

AGRADECIMENTOS AOS PROFESSORES CO-AUTORES: Ao Prof. Dr. Ruben Sinisterra, co-orientador deste trabalho, pelo incentivo cientfico, pela

acolhida no Laboratrio de Encapsulamento molecular e Biomateriais do Departamento de

Qumica da UFMG e pelo trabalho em equipe.

Profa. Dra. Leda Quercia Vieira do Departamento de Imunologia e Bioqumica do ICB-

UFMG, que desde o mestrado me acolheu no seu laboratrio com carinho e confiana. Sua

colaborao cientfica muito importante.

Profa. Dra. Gerluza Borges Silva do Departamento de Biologia do Desenvolvimento do

ICB-UFMG, pelo trabalho em equipe e pela valiosa colaborao cientfica neste trabalho.

Profa. Dra. Mrcia Martins Marques do Departamento de Dentstica da Universidade de

So Paulo, que mesmo sem me conhecer me acolheu no laboratrio de cultura celular da

FO-USP. Sua colaborao cientfica foi de grande valor neste trabalho.

AGRADECIMENTOS Ao Colegiado de Ps-graduao da Faculdade de Odontologia pela aceitao como aluno

mediante o convnio internacional PEC-PG, em especial a Profa. Dra. Isabela Almeida

Pordeus, pelo seu ensino e preocupao com a minha pessoa.

Embaixada do Brasil no Peru que mediante o Programa Convnio Internacional de

Estudantes de Ps-graduao PEC-PG, foram os responsveis pela minha aceitao na FO-

UFMG. Especialmente senhora Carmem Castiella, responsvel do setor cultural.

Aos professores da FO-UFMG: Jos Eustquio da Costa, Mara Cssia Aguiar, Efignia

Ferreira, Miriam Vale, Vagner Santos, Alexandre Drumonnd, Antnio Paulino, Ktia

Maltos, Tarcilia Silva, Luiz Thadeu Poletto e Saul Paiva pelo ensino e amizade.

De forma especial a Profa. Dra. Patrcia Zarzar, pela amizade sincera e por compartilhar sua

experincia profissional, sua presena foi muito valiosa no desenvolvimento do doutorado.

s Profas. Dras. Eliete Raso da FO-PUC e Clia Lanza da FO-UFMG, pelas consideraes

e valiosas sugestes feitas com tanta educao no exame de qualificao.

s secretarias do Colegiado de Ps-graduao da Faculdade de Odontologia Lais Santiso,

Zuleica Rabelo e especialmente para Elizabeth Noronha pelo apoio e carinho.

A Mev Dominguez e Hellen Marra pela amizade e pela carinhosa acolhida em So Paulo.

Aos meus amigos Peruanos, Julio Bartra, Pedro Ponce, Juan Carlos Mestanza, Marisol

Vivar, Alex Moncada e Lita Herrera, pela fora sincera refletidas na grande amizade.

Especialmente para minha dentista e companheira de universidade Sandie Arvalo Cobos,

pela amizade pura e sincera que cultivamos desde a graduao.

Aos mestrandos Patrcia Caldeira, Elizete Pereira, Thiago Compart, Giovanna Souto,

Satoshi Takenaka, Telma Aro, Frederico Netto e Ivanna Diniz, pela preocupao e

amizade.

Aos grandes amigos doutorandos Andr Pataro, Luis Otvio, Nelly Caires, Alessandra

Neves, Carolina Martins, Soraya Grossman e Mariela Moura, que desde o mestrado

comeamos a aprender a pesquisar e que diariamente encontramos novos desafios.

Em especial para Thalita Santa Rosa, pela valiosa amizade e sabedoria, sua preocupao e

carinho so de grande valor para mim. Obrigado pelas correes de portugus desta tese.

Ao Henrique Pretti, grande amigo de turma e companheiro da mesma rea de concentrao,

juntos caminhamos pelo doutorado aprendendo e compartilhando grandes experincias.

Ao Marco Rosa, pela amizade e disponibilidade na anlise estatstica deste trabalho.

Aos colegas do Laboratrio de Encapsulamento Molecular e Biomateriais Filipe Macedo,

Svio Morato e Patrcia Las Casas pela amizade e trabalho em equipe.

Karina Teixeira pela importante contribuio cientfica no primeiro artigo.

Aos Ps-graduandos UFMG Renata Martins, Karina Bonanato, Daniela Goursand, Amanda

Freitas, rika Joviano, Isabel Freitas, Audrey Bueno, Aline Batista, Patrcia Valente, Ana

Ceclia Diniz, Fabiano Pereira, Jeane Correia, Ana Carolina Netto, Vanessa Bernardes,

Fernanda Sardenberg, Claudia Viegas e Cristiane Bendo pelo aprendizado mtuo e amizade.

Ao Bruno Ferreira, Silvilene Martins e Conceio Moreira do Laboratrio de Odontologia

Restauradora da FO-UFMG pelo auxilio e carinho.

Aos colegas do laboratrio de Imunologia e Gnotobiologia-ICB, Liliane, Daniel, Louisa,

Juan, Paula, Magda e Marcelo pela fora e amizade, em especial ao amigo Matheus Heitor.

Aos meus amigos Brasileiros Karina Barros, Srgio Santos, Ildefonso Binatti, Leila Ferreira,

Danilo Collado, Reinaldo Dos Santos e Romer Resende. Em especial para o lamo De

Oliveira, colega de apartamento, pela preocupao e longa amizade.

Isadora Barcelos, amiga tenha certeza que sua amizade sincera, seu bom humor e seu

valioso carinho so recprocos, pode contar comigo sempre.

Ao Angelo Coimbra, valioso amigo e companheiro; agradeo pela fora sincera e por fazer

mais agradvel e familiar minha estadia no Brasil.

Aos colegas de clube, Cristiano Duarte, Rafael Pais e Nonato Moura, que alem das prticas

esportivas nos finais de semana construmos uma sincera amizade e irmandade, em especial

ao amigo Lcio Tannure pela grande ateno demonstrada.

As agencias Brasileiras de financiamento e apoio: CAPES, CNPq, FAPEMIG e

INCT/Nanobiofar pelo apoio na realizao do doutorado.

A Einco Biomateriais pela doao generosa dos biomateriais.

Aos animais, que com seu sacrifcio contriburam para o avano do conhecimento e do bem

estar humano.

A aqueles que de forma discreta e valiosa colaboraram com a realizao deste doutorado.

Ao Brasil, pas belo e hospitaleiro que atravs da FO-UFMG e do encanto dos mineiros me

acolheram como mais um dos seus filhos.

RESUMO

Biocermicas associadas a polmeros para capeamento pulpar esto sendo investigadas pela

capacidade de induzir a formao de tecido mineralizado. Esses materiais so usados na ortopedia

e implantodontia com resultados clnicos eficientes. Contudo, pouco se sabe sobre seu efeito

sobre a polpa dental e seus componentes celulares. O objetivo deste estudo foi avaliar a

biocompatibilidade do compsito: biocermica de -triclcio fosfato/hidroxiapatita (BC) e co-

polmero cido poli (ltico-co-gliclico) (PLGA) (BC/PLGA), em cultura de fibroblastos da polpa

dental humana (FP5) e de macrfagos peritoneais (MP), e avaliar a resposta pulpar aps

capeamento direto aps 30 e 60 dias. A citotoxicidade foi avaliada atravs do ensaio MTT nos

seguintes grupos: Controle (clulas), Compsito (BC/PLGA), BC e PLGA nos tempos de 0, 24 e

48h nos fibroblastos e 48h nos macrfagos. Ainda avaliou-se a aderncia celular de fibroblastos

gengivais humanos (FMM1) e MP sobre a superfcie de discos de BC/PLGA. O resultado do

ensaio MTT em FP5 foi analisado por ANOVA e Tukey. Houve crescimento celular progressivo

dos FP5 em todos os grupos experimentais, semelhantes ao contro