Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro ...2015 Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral _____ ! Reitor Fabianno

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________


Raquel Oliveira dos Santos Fontenelle e Rafael Pereira

Organizadores

Anais do

I Simpósio Cearense de Microbiologia e

II Encontro de Microbiologia de Sobral

Micro-organismos emergentes e Reemergentes

1 ª edição Sobral, Ceará

2015


Reitor Fabianno Cavalcante de Carvalho

Vice-Reitora

Izabelle Mont`Alverne Napoleão Albuquerque

Diretora do Centro de Ciências Agrárias e Biológicas Cláudia de Castro Goulart

Coordenador do Curso de Ciências Biologias

Luiz Ferreira Aguiar Ponte

Coordenadora Geral do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral

Raquel Oliveira dos Santos Fontenelle

Comissão Científica Prof.ª Dr.ª Raquel Oliveira dos Santos Fontenelle

Prof.ª Dr.ª Erika Helena Salles de Brito Prof.ª M.Sc. Carolina Sidrim de Paula Cavalcante Prof.ª M.Sc. Francisca Lidiane Linhares de Aguiar

Prof. Esp. Antônio Carlos Nogueira Sobrinho

Membros Discentes

Andréa Maria Neves

Anny Sampaio Silva

Deisiane Fernandes

Francisca Mirla Alves de Araújo

Francisco Fábio Pereira de Souza

Layanne Mesquita Lopes

Marcilio Matos Ferreira

Maria Gleiciane Soares Coutinho

Marillyze Maria Nogueira Duarte

Rafael Pereira

Samuel Souza Oliveira

Priscilla Evelyn de Souza Silveiro

Maria Clara de Albuquerque

Naiani Oliveira Chaves Timbó

Capa

Fábio de Melo Magalhães

Bibliotecário Responsável

Francisco Ramos Madeiro Neto

CRB-3/1374


SUMÁRIO

APRESENTAÇÃO ................................................ .......... 05

RESUMOS EXPANDIDOS ............................................ 06


APRESENTAÇÃO

Neste livro estão reunidos os resumos expandidos dos trabalhos

aprovados no I Simpósio Cearense de Microbiologia (I SIMIC) e II Encontro de

Microbiologia de Sobral com o tema Micro-organismos Emergente e

Reemergentes, realizado no período de 26 a 27 de Novembro de 2015, na

Universidade Estadual Vale do Acaraú, localizada na cidade de Sobral- Ceará.

A programação foi composta de tal forma que abrange as mais diferentes

áreas da Microbiologia, com um total de duas mesas redondas intituladas

“Micro-organismos emergentes e reemergentes na área da saúde e alimentícia” e

“Produtos naturais com atividades antimicrobianas”, como cinco minicursos,

além dos vinte e nove trabalhos que foram aprovados pela comissão cientificas

do evento e apresentados nas seções orais.

O evento teve o objetivo de garantir o espaço para apresentação e

discussão de pesquisas na área de Microbiologia e em outras áreas afins para que

tenham como foco a melhoria da saúde, meio ambiente e educação.

Diante do exposto, o evento tem o prazer de realizar a publicação de

relevantes pesquisas nesses Anais. Vale ressaltar que, o conteúdo dos resumos

aqui publicados é de inteira responsabilidade dos seus autores.

Os organizadores

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ AANÁLISE DA MICROBIOTA FÚNGICA ANEMÓFILA EM AMBIENTES ABERTOS

E FECHADOS NO INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAÇÃO, CIÊNCIA E

TECNOLOGIA DO CEARÁ, CAMPUS ACARAÚ

Tamires de Araújo Fortunato

Renan Vasconcelos da Graça Filho

Aline de Albuquerque Ferreira

Maria Gleiciane da Rocha

Carlos Eduardo Cordeiro Teixeira

Manoel Paiva de Araújo Neto

Elciane Maria do Nascimento Farias

INTRODUÇÃO: Na literatura científica, existem diversos trabalhos relatando a importância da

realização de estudos acerca da microbiota fúngica aérea, tanto como componentes da

microbiota normal, quanto causadores de enfermidades e degradadores e bens de consumo. Vale

ressaltar também que esses organismos são facilmente encontrados em qualquer ambiente,

destacando-se as espécies que se dispersam pelo ar, denominadas de anemófilas (MEZZARI et

al., 2002). A ocupação aérea desses microrganismos sofre variações, tanto em qualidade como

em quantidade. A microbiota aérea também é diversificada em ambientes abertos e ambientes

fechados (PEI-CHIN et al., 2002). OBJETIVO: Desse modo o conhecimento desses

organismos é extremamente necessário para o meio cientifico e industrial, cujo esses

conhecimentos são aplicados em novos estudos. Assim o presente estudo teve por objetivo

identificar e classificar a microbiota aérea fúngica de ambientes abertos e fechados do Instituto

Federal de Educação, Ciência e Tecnologia do Ceará (IFCE) - Campus Acaraú. MATERIAL E

MÉTODOS: O estudo foi realizado no IFCE - Campus Acaraú, Ceará, Brasil, onde foram

utilizados três pontos para amostragem (P1, P2 e P3). Com relação aos pontos, (P1) esta

localizado em uma sala de aula já (P2) encontrasse situado no Laboratório de Biologia, ambos

locais são abertos com ventilação natural e grande incidência de luz solar durante o dia. Já o

ponto (P3) é um local fechado e acondicionado situado na sala de tecnologia de informação.

Para realização da coleta seguiu-se a metodologia proposta por Pantoja et al., (2007), com

modificações. Assim, para cada ponto foi utilizado o método de sedimentação passiva em placa

de Petri, contendo Ágar Sabouraud dextrose a 2% acrescido de cloranfenicol (0,05g/L). Cada

placa foi exposta por 12 horas em cada um dos cinco pontos de coleta selecionados, na altura de

2 m acima do solo. Após o período de exposição, as placas foram vedadas e incubadas à

temperatura de 25-28ºC durante sete dias, com observações diárias. Ao observar o aparecimento

de colônias fúngicas foi realizado à contagem das unidades formadoras de colônias (UFC) em

cada placa. Para a identificação de fungos filamentosos foi utilizado o microcultivo em lâmina,

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ em meio Ágar Batata. Para a identificação desses fungos foram utilizadas chaves de

identificação e testes fisiológicos referidos por De Hoog et al. (2002), para cada grupo. A

identificação das espécies foi baseada em características fenotípicas, como a descrição da

macromorfologia, mediante observação e da micromorfologia, obtida a partir da

realização de microcultivo, o que permite melhor visualização das estruturas fúngica

(DE HOOG et al., 2002). As colônias sugestivas de leveduras foram submetidas à

coloração de Gram e observadas ao microscópio óptico (40X) para verificar a presença

de blastoconídeos, hifas ou pseudohifas, assim como descartar a possibilidade de

contaminação bacteriana, bem como a presença de colônias mistas em meio Chromagar

Candida®. Em seguida, as leveduras foram identificadas quanto ao gênero e, sempre

que possível, quanto à espécie, por meio da realização de testes morfológicos e

bioquímicos específicos (KURTZMAN; FELL; BOEKHOUT, 2011). RESULTADOS

E DISCUSSÃO: Foram isolados 23 fungos, sendo 22 filamentosos e apenas uma

levedura. Isolaram-se os gêneros fúngicos Candida, Cladosporium, Curvularia,

Fusarium, Aspergillus e Penicilium, sendo esse último o mais representativo (7/23).

Segundo LACAZ et al. (2002), os gêneros Cladosporium, Fusarium, Aspergillus e

Penicillium são uns dos principais componentes fúngico do ar e da poeira, desse modo

os fungos isolados encontram-se dentro do esperado para esse habitat. O gênero

Aspergillus também teve uma quantidade de indivíduos representativa com 6/23. O

gênero Aspergillus é constituído por mais de 200 espécies, sendo somente 20 que têm

ligação direta com doenças que afetam o homem e os animais, podendo gerar sinusite,

asma e alergias. Esses fungos são ubíquos e podem ser encontrados em vários locais,

utilizando o ar como meio de veiculação de seus conídios (BATISTA et al., 2003). O

ponto de coleta acondicionado (P1) teve uma maior incidência numa relação de 10 dos

23 indivíduos. O estudo de fungos em ambientes fechados torna-se assim importante,

pois segundo Belo et al. (2009), o número de estudos que abordam o tema no Brasil é

escasso, logo existem poucos relatos sobre microbiota anemófila em ambientes internos,

climatizados artificialmente. CONCLUSÃO: A partir dos dados obtidos foi possível

observar que os gêneros Penicillium e Aspergillus foram os mais presentes, vale

destacar que esses podem ser produtores de micotoxinas, as quais, conforme a

quantidade ingerida, é nociva à saúde humana (RODRÍGUEZ-AMAYA; SABINO,

2002). Sendo dessa forma importante o estudo da microbiota fúngica anemófila,

sinalizando a importância da realização do aprofundamento dos estudos de forma mais

abrangente, tornando-se rotineiro o monitoramento do ar da instituição.


REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA

BATISTA, R.S.; GOMES, A.P.; SANTOS, S.S.; ALMEIDA, L.C.; FIGUEIREDO, C.E.S.; PACHECO, S.J.B. Manual de infectologia. Rio de Janeiro: Revinter, 2003. p. 461. BELO, R. A. S.; SILVA, A. C. A.; GUIMARÃES, C. S. P.;SIQUEIRA, F. S.; ARAKAWA, N. S.; KHOURI, S.Caracterização e Controle de Fungos Anemófilos Obtidos de Ambientes Internos Climatizados Artificialmente In:XIII ENCONTRO LATINO AMERICANO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA E IX ENCONTRO LATINO AMERICANO DE PÓS-GRADUAÇÃO. Paraiba -2006. DE HOOG, G.S.; GUARRO, J.; GEN, J. (eds) Atlas of Clinical Fungi. Centraalbureau voor Schinmelculture. Universitat Rovira i Virgilli, Delf. 2002. KURTZMAN, C.; FELL, J.W.; BOEKHOUT, T. The Yeasts, Fifth Edition: A Taxonomic Study. Elsevier Science; 5ª ed., 2011. 2354p. LACAZ, C.S.; PORTO, E.; MARTINS, J.E.C.; HEINS-VACCARI, E.M.; MELO, N.T. Tratado de micologia médica. 9. ed. São Paulo: Sarvier, 2002. p. 1104. MEZZARI, A.; PERIN, C.; SANTOS, Jr.S.A.; BERND, L.A.G. Airbornefungi in thecityof Porto Alegre, Rio Grande do Sul, Brazil. RevInstMedTrop S Paulo.2002; n°44, Vol.5, p.269 SIDRIM, J.J.C.; ROCHA, M.F.C. Micologia médica à luz de autores contemporâneos. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2004. p.388. RODRÍGUEZ-AMAYA, D.B.; SABINO. M. Mycotoxin research in Brazil: the last decade in review. Braz. J. Microbiol., 2002. n.33, p.1-11


ANALISE DA MICROBIOTA FÚNGICA DE Ameivula ocellifera e Iguana iguana DO

MUNICIPIO DE ACARAÚ, CEARÁ

Gerlane Luziana de Maria



Jéssica Nayane da Silva


Amaurício Lopes Rocha Brandão


INTRODUÇÃO: Os fungos são organismos eucariotas, uni ou multicelular e são divididos em

filamentosos e leveduras (TORTORA et al., 2012) são abundantes na natureza sendo muito

importantes, tanto ecologicamente quanto economicamente, também são considerados os

lixeiros do mundo, pois degradam todo tipo de restos orgânicos e têm implicações em varias

áreas tais como na medicina humana e veterinária, farmácia, nutrição, fitopatologia, agricultura,

biotecnologia, entre outras (TEVA et al., 2010). Estima-se que cerca de 1,5 milhão de

espécimes fúngicas existam no planeta terra (SULLIVAN et al. 2005). Em média 250.000

espécies foram descritas, destes milhares 200 são catalogadas como agentes patogênicos, ou

seja, podem causar doenças em humanos e outros animais (DEACON 2006).São organismos

ubíquos encontrados até mesmo em animais que, são como hábitas para as comunidades

micológicas, incluído os répteis, nos quais muitos desses microrganismos fazem parte da sua

microbiota. Alguns trabalhos descrevem o isolamento fúngico em órgãos de lagartos selvagens

(Agama agama) e geckos (Hemidactylus sp.), e isolados micológicos em amostra de pele de

lagartos hígidos de cativeiro e em amostras de fezes de Terrapene carolina carolina. Contudo,

os relatos de isolados fúngicos de répteis da Caatinga ainda são escassos (NARDONI et al.,

2008). OBJETIVO: O objetivo do trabalho foi analisar a microbiota fúngica associada à

Ameivula ocellifera e Iguana iguana da Caatinga no município de Acaraú, CE. MATERIAL E

MÉTODOS: O município de Acaraú esta localizado na região Norte do Ceará, cerca de 198 km

da capital, Fortaleza. O clima da região é do tipo tropical quente semi-árido brando, a

pluviosidade anual é de 1139,7 mm, com temperaturas médias anual variando entre 26º e 28ºC e

período chuvoso entre os meses de janeiro a abril (IPECE, 2006). Para a colheita de animais foi

realizado o método de busca ativa (CAMPBELL; CHRISTMAN, 1982), foram duas investidas

a campo com intervalo de dois meses cada. Os animais foram manuseados de acordo com lei de

nº 11. 794 de 08 de outubro de 2008, seguindo todas as normas estabelecidas para manuseio e

experimento de animais vivos. Foram utilizados Swab estéreis para a coleta de amostras, cujo a

boca e cloaca dos lagartos foram amostradas. Após a coleta os animais foram soltos em seu

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ ambiente natural e o material colhido foi acondicionado e transportado em 2 mL de salina estéril

ao Laboratório de Biologia Ambiental e Microbiologia (LABIAM) IFCE - Campus Acaraú, e

em seguida realizado o procedimento microbiológico. As amostras coletadas foram inoculadas

em placa de petri contendo Ágar Saboraud acrescido de cloranfenicol (0,05 g/L) . Depois de

inoculadas as placas foram mantidas em temperatura de 25-27 Cº por uma semana e observadas

diariamente. Depois do isolamento, foi feito o microcultivo de fungos filamentosos e leveduras,

além de testes bioquímicos específicos, como assimilação de carboidratos e cultivo em

Chromagar Candida® de acordo com Kurtzman, Fell e Boekhout (2011) e De Hoog (2002). Em

seguida, as leveduras foram identificadas quanto ao gênero e espécie sempre que possível.

RESULTADOS E DISCUSSÃO: Foram isolados sete gêneros de leveduras e fungos

filamentosos de Ameivula ocellifera e Iguana iguana . Em A. ocellifera foram isolados

dois gêneros de fungos filamentosos Mucor sp. e Hortaea sp., e dois em I. iguana,

Aspergillus sp. e Cladosporium sp. Foram isolados três gêneros de leveduras em

Ameivula ocellifera, Candida sp., Rhodotorulla sp. e Trichosporon sp., em I. iguana

apenas Candida sp., foi isolado. A. ocelllifera foi o animal com mais diversidade de

fungos. Leveduras e fungos filamentos dos gêneros Candida sp., Trichosporon sp.,

Rhodotorulla sp. e Mucor sp., são descritos como espécimes amplamente distribuídos

no meio ambiente o que facilita que sejam encontrados também em répteis (CARLOS,

2009). Já os isolados de Aspergillus sp. e até mesmo Candida sp. e Mucor sp. são

encontrados em répteis com pneumonia, algumas dessas doenças fúngicas são

associadas a todas as ordem da classe Reptilia,(ROSENTHAL; MADER, 1996). O

gênero Candida sp., foi isolado tanto em A. ocellifera quanto em I. iguana, isto pode

estar associado ao fato do gênero Candida sp., estar presente em varias partes do

ambiente como vegetais, ar, água, pele e trato gastrointestinal de animais

(BRILHANTE, et al., 2015). A identificação das espécies fúngicas presente na

microbiota de animais é importante para o conhecimento das espécies causadoras de

doença em humanos, principalmente para indivíduos imunocomprometidos, além do

monitoramento da saúde ambiental. CONCLUSÃO: O gênero Candida sp., foi o único

que foi isolado em Ameivula ocellifera e Iguana iguana. Mas todos isolados podem

representar risco para saúde humano, quando esses são imunossuprimidos ou

imunocormprometido. Com base nos resultados encontrados acredita-se que existe uma

diversidade específica de fungos para cada espécie da herpetofauna, contudo são

necessários mais estudos na área, tanto para comprovar esta diversidade fúngica como

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ para especificar se existem variações destes microrganismos em diferentes períodos do

ano.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA

BRILHANTE, R.S.N. ; PAIVA, M.A.N.; SAMPAIO, C.M.S.; CASTELO-BRANCO, D.S.C.M.; ALENCAR, L.P.; BANDEIRA, T.J.P.G.; CORDEIRO, R.A.; PEREIRA NETO, A.W.; MOREIRA, J.L.B.; SIDRIM, J.J.C.; ROCHA, M.F.G. Surveillance of Azole Resistance Among Candida spp. as a Strategy for the Indirect Monitoring of Freshwater Environments. Water, Air and Soil Pollution, v. 226, p. 1-10, 2015. CAMPBELL, H.W.; CHRISTMAN, S.P. Field techniques for herpetofaunal community analysis. In: N.J. Scott Jr. (Ed.). Herpetological communities: a Symposium of the Society for the Study of Amphibians and Reptiles and the Herpetologists’ League. U.S. Fish Wildlife Service, Washington. 1982. DEACON, J. Fungal biology.4. ed.Oxford: Blackwell Science. 2006.372p. HECKMAN, D.S.; GEISER, D.M.; EIDELL, B.R.; STAUFFER, R.L.; KARDOS, N.L.; HEDGES, S.B. 2001. Molecular evidence for the early colonization of land by fungi & plants. Science 293: 1129-1133. DE HOOG GS, GUARRO J & GEN´ E J (eds) Atlas of Clinical Fungi 2nd edition. Centraalbureau voor Schinmelculture. Universitat Rovira i Virgilli, Delf. 2002 IPECE- Instituto de Pesquisa e Estratégia Econômica do Ceará. Perfil básico municipal Acaraú. Fortaleza-CE 2006. KURTZMAN, C.; FELL, J.W.; BOEKHOUT, T. The Yeasts, Fifth Edition: A Taxonomic Study. Elsevier Science; 5ª ed., 2011. 2354p. MORAIS, A. M. L . ; PAES,R. A.; HOLANDA,V. L . A Micologia. In: TEVA, A.; MORAIS, A. M. L.; RIBEIRO, F. C.; FERNADEZ, J. C. C.; NOGUEIRA, J. M. R.; CARNEIRO, L. A. D. ; MIGUEL, L. F. S.; OLIVEIRA, M. B. S. C.; STEPHENS, P. R. S.;PAES,R. A.; SILVA,V. L.; HOLANDA,V. L. Conceitos e métodos para formação de profissionais em laboratório. volume 4 / Organização de Etelcia Moraes Molinaro, Luzia Fátima Gonçalves Caputo e Maria Regina Reis Amendoeira.- Rio de Janeiro, EPSJV,IOC, 2009.p. 399-496. NARDONI, S.; PAPINI, R; MARCUCCI, G.; MANCIANTI, F. Survey on the fungal flora of the cloaca of healthy pet reptiles. Revue de Médicine Véterinaire, v. 159, n.3, p. 159-165, 2008. PESSOA, C.A. avaliação da microbiota bacteriana e fúngica presente na cloaca de jabutis (Geochelone carbonaria) criados em domicílio e analise do potencial risco á saúde humana. (dissertação ) São Paulo , 2009. MADER, D. R. Reptile medicine and surgery. Londres: W. B. Saunders Company, 1996. p. 61-78. TORTORA, G. J.; FUNKE,B. R.;CASE,C. L.Eucariotos: Fungos,algas, protozoários e helmitos. In TORTORA, G. J.; FUNKE,B. R.;CASE,C. L. Microbiologia- 10 ed. Porto alegre. Artmed.2012, p.329-366. SULLIVAN, D.; MORAN, G.; COLEMAN, D. 2005. Fungal Diseases of Humans; em Kavanagh K (2005) Fungi – Biology and Applications. John Wiley & Sons Ltd, Irlanda


ANÁLISE DA MICROBIOTA FÚNGICA DE Rhinella jimi. E Leptodactylus latrans

(ANURA) DO MUNICIPIO DE ACARAÚ, CEARÁ

Renan Vasconcelos da Graca Filho



Gerlane Luziana de Maria


Amaurício Lopes Rocha Brandão


INTRODUÇÃO: Os fungos são seres ecologicamente importantes, ubíquos, oportunistas,

patógenos e são divididos em filamentosos e leveduriformes (SIDRIM & ROCHA, 2004). Os

animais são como hábitats para as comunidades micológicas, destacando os componentes do

anuro fauna, nos quais muitos desses microrganismos fazem parte de sua microbiota. Estima-se

que cerca de 1,5 milhão de espécimes fúngicas existam no planeta (HECKMAN et al.,2001;

SULLIVAN et al.,2005). Em média 250.000 espécies foram descritas, destes milhares 200 são

catalogadas como agentes patogênicos, ou seja, podem causar doenças em humanos e outros

animais (LACAZ et al.,2002; CHARLIER et al.,2005; DEACON, 2006). OBJETIVO: O

presente trabalho teve como objetivo caracterizar a microbiota fúngica das seguintes espécies

Rhinella jimi e Leptodactylusl c.f. latrans do município de Acaraú, Ceará. MATERIAL E

MÉTODOS: O município de Acaraú, CE é caracterizado por forte insolação, com índices

elevados de evaporação, baixa umidade relativa do ar e temperaturas médias elevadas. Os

padrões vegetacionais predominantes são Caatingas arbustivas densas e a mata ciliar ou

ribeirinha conta com a presença marcante de carnaúbas e oiticica (SUCUPIRA et al., 2006). A

coleta de animais foi através do método de busca ativa (CAMPBELL; CHRISTMAN, 1982),

com duas investidas a campo. Os animais foram manuseados de acordo com lei de nº11. 794 de

08 de outubro de 2008, seguindo todas as normas estabelecidas para manuseio e experimento

com animais vivos. Para amostragem microbiológica foram utilizados Swabs estéreis para boca,

cloaca e pele de cada anfíbio amostrado. Após a coleta micológica, os animais foram soltos em

seu ambiente natural e o material colhido foi acondicionado e transportado em dois mL de

salina estéril ao Laboratório de Biologia Ambiental e Microbiologia (LABIAM) IFCE- Campus

Acaraú. As amostras foram inoculadas em placa de petri contendo Ágar Sabourad acrescido de

cloranfenicola2%. A identificação das espécies foi baseada em características fenotípicas, como

a descrição da macromorfologia, mediante observação das colônias, e da micromorfologia,

obtida a partir da realização de microcultivo em meio Ágar Corn Meal Tween 80, o que

permitirá melhor visualização das estruturas fúngicas, bem como por meio da realização de

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ zimograma (fermentação de carboidratos) e de auxonograma (assimilação de carboidratos e

nitrogênio). Adicionalmente, será realizado, mediante observação das colônias em meio ágar

extrato de malte, o crescimento a 30°C e a 37°C, e a avaliação da produção de urease (DE

HOOG et al., 2002). RESULTADOS E DISCUSSÃO: Foram isolados os gêneros Candida,

Trichosporon, Rhodotorulla, Aspergillus e Fusarium para R. jimi e para L. latrans apenas

Aspergillus e Candida. R.jimi foi o animal que com uma maior diversidade/abundância de

fungos, sendo 19 fungos amostrados para a espécie. Foram isolados, sendo Aspergillus e

Candida os mais abundantes. Trabalhos descrevem para anfíbios como, Boreas Anaxyrus,

Regilla pseudacris, Taricha torosa e Lithobates catesbeianus os seguintes filos de bactérias

Bacteroidetes, Gammaproteobacteria, Alphaproteobacteria, Firmicutes, Sphingobacteria e

Actinobacteria (KEUENEMAN et al., 2014). Os trabalhos com existência de uma microbiota

fúngica relacionadas a anfíbios são escassos e/ou inexistentes. Há ocorrência de isolamento de

fungos parasita em anuros, como por exemplo, o Batrachochytrium dendrobatidis (Bd) que

acomete uma grande população de anfíbios com a quitridiomicose, e este parasita são os

principais responsáveis pelo declínio e extinção de anfíbios (DASZAK et al., 1999).

CONCLUSÃO: A partir dessa análise, acredita-se que existe uma diversidade específica de

fungos para cada componente da anurofauna, tornando necessários mais estudos na área, tanto

para comprovar esta diversidade fúngica em anfíbios, como para especificar se existem

variações destes microrganismos em diferentes períodos do ano e se esta fauna pode ser

carreadora de fungos patógenos ao ambiente antrópico, o que reforça a importância de estudos

da microbiota fúngica.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

CAMPBELL, H.W.; CHRISTMAN, S.P. Field techniques for herpetofaunal community analysis. In: N.J. Scott Jr. (Ed.). Herpetological communities: a Symposium of the Society for the Study of Amphibians and Reptiles and the Herpetologists’ League. U.S. FishWildlife Service, Washington. 1982. CHARLIER, C.; CHRETIEN, F.; BAUDRIMONT, M. MORDELET, E. LORTHOLARY, O.; DROMER, F. 2005. Capsule structure changes associated with Cryptococcus neoformanscrossing of the blood-brain barrier. Am.JPathol., 166: 421-432. DEACON, J. Fungal biology.4.ed.Oxford: Blackwell Science. 2006.372p. HECKMAN, D.S.; GEISER, D.M.; EIDELL, B.R.; STAUFFER, R.L.; KARDOS, N.L.; HEDGES, S.B. 2001. Molecular evidence for the early colonization of land by fungi & plants.Science 293: 1129-1133. DE HOOG GS, GUARRO J & GEN´ E J (eds) Atlas of Clinical Fungi 2nd edition. CentraalbureauvoorSchinmelculture.UniversitatRovira i Virgilli, Delf. 2002. HECKMAN, D.S.; GEISER, D.M.; EIDELL, B.R.; STAUFFER, R.L.; KARDOS, N.L.; HEDGES, S.B. 2001. Molecular evidence for the early colonization of land by fungi & plants.Science 293: 1129-1133.

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ IPECE. Perfil básico municipal: Acaraú. 2014. Disponível em: <. Acesso em: 10 fev. 2015. LACAZ, C.S.; PORTO, E.; MARTINS, J.E.C.; HEINS - VACCARI E.M.; MELO, N.T. 2002.Tratado de micologia médica. 9 ed. São Paulo, Brasil: Sarvier. SULLIVAN, D.; MORAN, G.; COLEMAN, D. 2005. Fungal Diseases of Humans; em Kavanagh K (2005) Fungi – Biology and Applications.John Wiley& Sons Ltd, Irlanda SIDRIM, J.J.C.; ROCHA, M.F.G. Micologia Médica à Luz de Autores Contemporâneos. Ed. Guanabara Koogan, 1a Edição, 2004. SUCUPIRA, P. A. P.; PINHEIRO, L. S.; ROSA, M. F. Caracterização morfométricado Médio e Baixo Curso do Rio Acaraú – Ceará – Brasil. In: VI Simpósio Nacional de Geomorfologia, Goiânia, GO. Anais… 2006


ANÁLISE MICROBIOLÓGICA DA ÁGUA DOS BEBEDOUROS DAS CRECHES DE

UM MUNICÍPIO DO INTERIOR DO CEARÁ

Deisiane Carlos Fernandes

Andrea Maria Neves


.

INTRODUÇÃO: A água é um elemento vital, necessária para a vida de qualquer organismo

vivo, seja no reino animal ou vegetal. Para o uso de forma saudável, a água deve apresentar-se

limpa, inodora, incolor e sem a presença de micro-organismos patogênicos, que oferecem riscos

à saúde humana (PEREIRA et al, 2009). Além da poluição direta das fontes de água, os

sistemas de distribuição e reservatórios também podem ser responsáveis pela transmissão de

agentes patogênicos, caso estejam em condições inadequadas de higiene e conservação

(MICHELINA et al., 2006). Em ambientes escolares, é muito comum que os alunos,

principalmente crianças, consumam a água de bebedouros, que na maioria das vezes está

imprópria para o consumo, devido à presença de bactérias, que ao serem ingeridas podem

provocar doenças no consumidor, prejudicando assim, seu desempenho escolar. Os grupos de

bactérias mais encontrados em águas contaminadas são os coliformes totais e coliformes

termotolerantes. O grupo dos coliformes totais é composto por bactérias de um número restrito

de gêneros e inclui basicamente Escherichia, Klebisiella, Citrobacter, Serratia, Erwinia e

Enterobacter (NOVAK & ALMEIDA, 2002). OBJETIVO: Diante do exposto, o presente

estudo teve com objetivo avaliar a qualidade microbiológica da água dos bebedouros das

creches do município de Groaíras, Ceará, de acordo com a quantificação de Coliformes Totais

(CT) e Coliformes Termotolerantes (CTT) presentes na mesma. MATERIAL E MÉTODOS:

Para o presente estudo, foram coletadas amostras de água de 02 bebedouros em uma creche

pública do município do interior do Ceará, nos meses de maio, junho e julho de 2014 de forma

mensal, totalizando 06 amostras. As amostras foram coletadas em frascos com 1000 mL

previamente estéril, acondicionados em caixas térmicas contendo gelo e após a coleta estes

foram vedados, identificados e posteriormente levados ao laboratório de Microbiologia da

Universidade Estadual Vale do Acaraú-UVA. As amostras foram avaliadas quanto á presença

de coliformes totais (CT) e coliformes termotolerantes (CTT) através da técnica dos tubos

múltiplos, método quantitativo que permite determinar o Número Mais Provável- NMP (APHA,

2012). Para a prova presuntiva, foram utilizados 03 séries de 05 tubos contendo 10 mL de Caldo

lactosado com tubos de Durham invertidos. O resultado positivo foi verificado através da

presença gás formado nos tubos de Durhan e turvação do meio. Os tubos positivos da prova

presuntiva foram inoculados em novos tubos de Caldo Bile Verdes Brilhantes (CBVB), e

incubados na estufa a 35° por 48 horas para enumeração de Coliformes Totais (CT). Ao final da

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ incubação aqueles com produção de gás no tubo de Durham foram considerados positivos para

coliformes totais. Para a enumeração de Coliformes Termotolerantes (CTT), foram retiradas

alíquotas de cada tubo positivo de caldo lactosado com auxílio de uma alça de inoculação e

inseridas em tubos contendo 5 mL de caldo EC (Caldo Escherichia coli) contendo tubos de

Durham invertidos. Dos tubos positivos para coliformes termotolerantes (CTT) foram retiradas

alíquotas, e com ajuda de uma alça de platina, foram estriadas em placas de Ágar Eosina Azul

de Metileno (EMB) e incubadas por 24 horas, a 37ºC. Após esse período as colônias foram

isoladas em tubos de ensaio contendo Ágar Triptose Soja (TSA) inclinado. Os tubos de TSA

foram incubados em estufa a 37ºC por 24 horas e após esse tempo, as cepas isoladas foram

identificadas em microscópio através de testes bioquímicos do IMViC (Indol, Vermelho de

Metila, Voges-Proskauer e Citrato). Para contagem de bactérias aeróbias mesófilas foi feita a

técnica do “Pour Plate. De cada amostra de água foi realizada três diluições (10-1, 10-2 e 10-3),

no qual foram retiradas 1 mL de cada uma das 3 diluições das amostras e adicionadas em Placas

de Petri esterilizadas. Posteriormente foram adicionados 15 mL de ágar padrão para contagem

(PCA), onde misturou o inóculo com o meio de cultura, logo depois homogeneizou-se através

de movimentos suaves, numa superfície plana em movimentos em forma de oito e deixou-se a

temperatura ambiente até a completa solidificação do Ágar, em duplicata. RESULTADOS E

DISCUSSÃO: Os valores do Número Mais Provável (NMP) de Coliformes Totais (CT) e

Coliformes termotolerantes (CTT) obtidos das 06 amostras coletadas variaram de 2,0 a 2,4x10¹

NMP/100mL. Das 06 amostras (100%) de água oriundas de bebedouros para Coliformes Totais

(CT), 02 amostras (33,33%) não atenderam o padrão estabelecido pela portaria nº 2.914 do

Ministério da Saúde de 2011 que regulariza as regras de potabilidade das águas para consumo

humano e proíbe a presença de Escherichia coli, Coliformes Termotolerantes e coliformes

Totais em amostras de 100mL de água. Das 06 amostras de água analisadas (100%) oriundas

dos bebedouros para Coliformes Termotolerantes (CTT), 03 (50%) não atendeu as normas,

confrontando assim com os parâmetros estabelecidos pela Portaria nº 2.914 de 2011 do

Ministério da Saúde, que determina como padrão de potabilidade para a água destinada ao

consumo humano a ausência de bactérias do grupo dos coliformes termotolerantes. A

enumeração de coliformes totais e coliformes termotolerantes pode ser um indicador da

eficiência do tratamento do sistema de distribuição, tornando-se um mecanismo de utilidade

para vigilância da qualidade microbiológica da água tratada para consumo distribuída à

população, (BARBOSA.;LAGE.; BADARÓ 2009). A contagem de bactérias mesófilas

aeróbias encontradas em amostras de água potável deve ser < 500 UFC/mL (BRASIL, 2011).

Todas as amostras testadas não apresentaram contaminação por bactérias heterotróficas sendo,

portanto próprias para o consumo. A manifestação de micro-organismos mesófilos aeróbios em

índices elevadas podem dificultar a presença de bactérias do grupo dos coliformes, seja em

virtude da produção de fatores de inibição, ou por um desenvolvimento mais intenso

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ (MACEDO, 2005). Nascimento et al (2013), ao verificar a presença de coliformes totais e

termotolerantes em água consumida em bebedouros de escolas estaduais de Campo Mourão,

Paraná, observaram que da 15 amostras analisadas, cinco (33,33%) apresentaram contaminação

com coliformes totais e uma escola (6,66%) apresentou contaminação por Escherichia coli,

sugerindo contaminação fecal. Castro (2013) ao avaliar a qualidade da água de um campus

universitário de Ipatinga-MG verificou que 100% das amostras estavam próprias para consumo

humano, com relação ao número de bactérias aeróbias mesófilas, resultados estes semelhantes

aos encontrados na presente pesquisa, onde todas as amostras de água se encontram satisfatória

para este parâmetro. CONCLUSÃO: Os resultados aqui obtidos possibilitam concluir que as

amostras de água coletadas nos bebedouros da creche pesquisada podem ser consideradas

impróprias para consumo humano, segundo os critérios avaliados neste estudo. Faz-se

necessário um constante monitoramento e manutenção da água dos bebedouros em relação ao

controle microbiológico e outros parâmetros existentes, podendo assim garantir de forma segura

a todos que utilizam os bebedouros da creche uma água de qualidade.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS APHA-AMERICAN PUBLIC HEALTH ASSOCIATION. Standard methods for the examination of water and wastewater. 22 Ed. Washington DC, 2012. BARBOSA, D. A.; LAGE, M.M.; BADARÓ, A.C.L. Qualidade microbiológica da água dos bebedouros de um campus universitário de Ipatinga, Minas Gerais. NUTRIR GERAIS- Revista Digital de Nutrição. Ipatinga, v. 3, n. 5, p. 505-517, ago./dez. 2009. BRASIL. Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância Sanitária. Portaria nº. 2914 de 12 de Dezembro de 2011. Diário Oficial da União, Brasília, 2011. CASTRO, A. Z.; SILVA, B.M.; FABRI, R.L. Avaliação da qualidade físico-química e microbiológica da água dos bebedouros de uma instituição de ensino superior de Juiz de Fora, Minas Gerais. NUTRIR GERAIS- Revista Digital de Nutrição. Juiz de Fora, v. 7, n. 12, p. 984-998, fev/jul. 2013 MACEDO, J. A. B. Métodos laboratoriais de análises físico-químicas e microbiológicas 3ª ed. Juiz de Fora: Jorge Macêdo (Venda direta do autor), 2005. MICHELINA, A. F.; BRONHAROA, T. M.; DARÉB, F.; PONSANOC, E. H. G. Qualidade microbiológica de águas de sistemas de abastecimento público da região de Araçatuba, SP. Revista Higiene Alimentar, São Paulo, v. 20, n. 147, p. 90-95, dez. 2006. NASCIMENTO, C. D.; SILVA, R. C.R.; PAVANELLI, M. F. Pesquisa de coliformes em água consumida em bebedouros de escolas estaduais de campo Mourão, Paraná. SaBios: Rev. Saúde e Biol, Paraná, v.8, n.1, p.21-26, jan./abr.2013. NOVAK, F. R. & ALMEIDA, J. A. G. Teste Alternativo Para Detecção De Coliformes Em Leite Humano Ordenhado. J. Pediatr (Rio J)., Porto Alegre, V. 78, N. 3, 2002. PEREIRA, M. C. et al. Estudo da potabilidade de água para consumo no bairro Triângulo e Vila Candelária, Porto Velho – Rondônia - Brasil. Saber Científico, v. 2, n. 1, p. 28-36,2009.


ANÁLISE MICROBIOLÓGICA DE SALADAS DE FRUTAS COMERCIALIZADAS

EM UM MERCADO, NA CIDADE DE SOBRAL – CEARÁ

Layanne Mesquita A. Lopes

Anny S. Silva

Andréa M. Neves

Maria Gleiciane S. Coutinho


INTRODUÇÃO: No Brasil e no mundo, dá-se cada vez mais ênfase à importância da

segurança na produção dos alimentos, devendo-se considerar os fatores que intervém sobre sua

qualidade. Alimentos dentro de padrões satisfatórios tornou-se uma das condições essenciais

para a promoção e manutenção da saúde, de modo que, tendo deficiência nesse controle, ocorre

transmissão de agentes patogênicos que podem levar à ocorrência de surtos de doenças

transmitidas por alimentos. Isso se deve, em parte, a um número cada vez maior de pessoas que

se alimentam fora de suas casas, em decorrência do aumento no número de mulheres atuantes

no mercado de trabalho e do ritmo acelerado da vida moderna (Galeazzi et al., 2002; Akutsu et

al., 2005). Essa mudança no comportamento do consumidor contribuiu para o desenvolvimento

do comércio de refeições e alimentos, mas trouxe uma preocupação a mais para profissionais

responsáveis pela Vigilância Sanitária e também para proprietários de estabelecimentos: garantir

qualidade higiênico-sanitária dessas refeições (Bellizzi et al., 2005). Diante do exposto, a

análise microbiológica dos alimentos, em especial os prontos para consumo, como o caso das

saladas de frutas, é fundamental para se conhecer as condições nas quais estes alimentos foram

inseridos, preparados e manipulados. OBJETIVO: O referido estudo visou caracterizar o perfil

de qualidade sanitária dos serviços de alimentação presentes em um mercado da cidade de

Sobral, CE. MATERIAL E MÉTODOS: Foram coletadas três amostras de saladas de frutas,

durante o mês de outubro de 2015, provenientes de três pontos localizados em um mercado da

cidade de Sobral, CE. Cada amostra equivalente a um ponto, identificados como A, B e C. As

amostras estavam acondicionadas em embalagens próprias dos estabelecimentos, sendo

posteriormente direcionadas em caixa isotérmica para o Laboratório de Microbiologia

(LABMIC) do Curso de Ciências Biológicas da Universidade Estadual Vale do Acaraú.

Executou-se a determinação do Número Mais Provável (NMP) de Coliformes Totais e

Termotolerantes através do método de fermentação em tubos múltiplos. Utilizou-se três

diluições das amostras com repetições de cinco tubos para cada diluição. Inicialmente, foram

pesados 25g da salada de fruta de cada ponto em balança analítica e posteriormente

homogeneizada com 225 mL de solução salina (0,85%) estéril, seguida de homogeneização,

sendo esta a diluição 10¯¹, em seguida 1 mL desta diluição foi diluída em 9 mL de solução

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ salina, constituindo a diluição 10-², procedendo assim, até a diluição10-³. Na primeira série de

tubos, foram inoculados 1 mL da diluição 10-¹ em 10 mL de Caldo Lactosado com tubos de

Durhan invertidos. A segunda série de cinco tubos foi inoculada com 1 mL da diluição 10-² e a

terceira com 1 mL da terceira diluição. Posteriormente, os tubos foram incubados em estufa

bacteriológica a 36ºC por 48h. Para enumeração de Coliformes Totais foram retiradas alíquotas

dos tubos positivos de Lactosado e inoculados em Caldo Bile Verde Brilhante (BVB),

incubados em estufa a 35ºC por 48h. A quantificação de Coliformes Termotolerantes foi feita

retirando-se alíquotas com auxílio de alça de cromo-níquel dos tubos de Lactosado positivos e

inoculando-os em tubos com Caldo de Escherichia Coli (EC) e tubos de Durhan invertidos,

sendo incubados posteriormente em banho Maria a 45ºC por 48h. Para isolamento e

identificação de E. coli, foram retiradas alíquotas dos tubos positivos de EC, semeados com alça

de cromo-níquel em placas contendo meio ágar EMB e incubados em estufa a 36ºC por 24h.

Procedeu-se também, a contagem padrão em placas utilizada para quantificar as bactérias

aeróbicas mesófilas sendo feita através da técnica “Pour Plate”, no qual foi retirado 1 mL de

cada diluição e adicionadas em 9 mL de solução salina. Em seguida, foi acrescentado 15 mL de

ágar padrão para contagem (PCA). Misturou-se o inóculo com meio de cultura movimentando-o

suavemente em superfície plana em forma de oito. Após a completa solidificação do meio, as

placas foram induzidas à estufa bacteriológica a 35ºC por 24h. O procedimento foi executado

em duplicata por todas as diluições. RESULTADOS E DISCUSSÃO: Caldo Lactosado, nos

pontos A, B e C, apresentou manifestações de micro-organismos com produção de gás,

formação de bolhas no Durhan e turvação no referente meio de cultura. Em leitura do Caldo de

Bile Verde Brilhante para Coliformes Totais, o Número Mais Provável (NMP) variou de

1,6x10³ CT/100g a >1600, como também, para Caldo de Escherichia Coli, Coliformes

Termotolerantes, indicaram oscilações entre 1,6x10³ CTT/100g e >1600, também apresentando

contaminação. Leitura de meio ágar EMB apresentou-se positiva para E.coli. Na contagem de

colônias de micro-organismos, com ajuda do contador de células presentes nas placas de Petri,

após processo de PCA, podemos observar que houve variação de 2,7950x10⁴ a 5,092x10⁴

UFC/mL, assegurando assim, segundo a legislação vigente, que houve 100% de contaminação

das amostras (A, B e C) coletadas. Diante os resultados obtidos, as saladas de frutas para

consumo apresentaram contaminação oriunda da ausência de procedimentos operacionais

padronizados e falha na higienização dos utensílios durante sua comercialização. Os índices não

são considerados aceitáveis, pois apresentaram erros no condicionamento, temperatura elevada,

manuseio excessivo, aumentando assim, riscos de veiculação de micro-organismos patogênicos.

CONCLUSÃO: Podemos concluir que, desde a concepção das frutas utilizadas nas saladas até

o seu manejo no que diz respeito à condições higiênico-sanitárias, como também, em seu modo

de preparo e comercialização, foi executado de forma errônea, levando em consideração após

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ análises feitas, que em quase todas as amostras de cada ponto coletado houveram significantes

presenças de micro-organismos.


AKUTSU, R. C.; BOTELHO, R. A.; CAMARGO, E. B.; SÁVIO, K. E. O.; ARAÚJO, W. C. Adequação das boas práticas de fabricação em serviços de alimentação. Revista de Nutrição, Campinas, v. 18, n. 3, 2005. BELLIZZI, A.; SANTOS, C. L.; COSTA, E. Q.; BERNARDINI, M. R. V. Treinamento de manipuladores de alimentos: uma revisão de literatura. Higiene Alimentar, São Paulo, v. 19, n. 13, 2005. BRASIL. RDC nº 12, de 2 de janeiro de 2001. ANVISA. BRASIL. Instrução Normativa (IN) n° 62, de 26 de agosto de 2003. MAPA. BRUNO, L. M. Avaliação microbiológica de hortaliças e frutas minimamente processadas comercializadas em Fortaleza (CE). Boletim CEPPA, v. 23, 2005. GALEAZZI, I. M. S.; GARCIA, L. S.; MARQUES, E. K. Mulheres trabalhadoras: 10 anos de mudanças do mercado de trabalho atenuam desigualdades. Porto Alegre: Fundação de Economia e Estatística Sieghried Emanuel Henser, 2002.


ASSOCIAÇÃO ENTRE FATORES GENÉTICOS DO HOSPEDEIRO E A

MODULAÇÃO DA SINTOMATOLOGIA CLÍNICA EM PACIENTES COM DENGUE:

UMA REVISÃO SISTEMÁTICA

Thiago Nobre Gomes

Iara Alda de Fontes Góis

Rayssa Kawasaki Braga Freitas

Silveny Meiga Alves Vieira

Naiany Carvalho dos Santos

Gustavo Portela Ferreira

Anna Carolina Toledo da Cunha Pereira

INTRODUÇÃO: O Dengue virus (DENV), membro da família Flaviviridae e do gênero

Flavivirus, é um vírus envelopado, icosaédrico, de fita simples de RNA senso positivo,

classificado em 4 sorotipos antigenicamente distintos capazes de causar doença pela transmissão

por fêmeas de mosquito do gênero Aedes (COFFEY et al., 2009; FANG et al., 2012). Nas

últimas 3 décadas a dengue emergiu como importante arbovirose e se tornou um grave problema

de saúde pública, especialmente em áreas tropicais e subtropicais do mundo (CHATUVERDI,

NAGAR, SHRIVASTAVA, 2006; FANG et al., 2012). Estima-se que cerca de 50 a 100

milhões de infecções por DENV ocorram anualmente no mundo, 2,5 bilhões de pessoas vivem

em regiões endêmicas, e 2/5 da população mundial correm risco de infecção (HARAPAN et al.,

2013). O espectro de manifestações clínicas em indivíduos infectados por DENV varia desde

uma infecção assintomática, autolimitada e não letal, até a febre da dengue (DF) sem

manifestações hemorrágicas, podendo evoluir para formas mais severas com risco de vida,

como a febre hemorrágica da dengue (DHF) e a síndrome do choque da dengue (DSS)

(COFFEY et al., 2009, HARAPAN et al., 2013). A evolução da doença é determinada por

interações entre fatores relacionados ao mosquito vetor (distribuição, dinâmica de transmissão e

capacidade vetorial), ao ambiente (sazonalidade e mudanças climáticas), ao vírus (sorotipos,

genótipos e suas variantes, virulência e carga viral) e também ao hospedeiro humano (ativação

de células de defesa, expressão de citocinas e fatores genéticos) (COFFEY et al., 2009). A

imunidade do hospedeiro desempenha função relevante na modulação da resposta à infecção

pelo DENV, e a heterogeneidade genética das moléculas envolvidas neste processo tem sido

relacionada com a progressão da doença (FANG et al., 2012). Em estudos genômicos de

associação entre casos e controles, vários polimorfismos do hospedeiro foram descritos por

desempenharem papel importante nas variações interindividuais associadas à susceptibilidade,

proteção ou severidade em muitas doenças infecciosas, incluindo a dengue (CHAPMAN &

HILL, 2012). OBJETIVO: O presente trabalho objetivou analisar as publicações científicas

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ que abordassem a associação entre a prevalência de fatores genéticos do hospedeiro e sua

influência na modulação da sintomatologia clínica em pacientes com dengue. MATERIAL E

MÉTODOS: Trata-se de um estudo retrospectivo, com levantamento bibliográfico de

publicações indexadas em bases de dados como Scientific Electronic Library Online (SciELO),

Biblioteca Virtual em Saúde (BVS) e PubMed. Foram utilizados como descritores os termos:

dengue, host e polymorphism. Como critérios de inclusão, foram consideradas as pesquisas

publicadas entre os anos de 2001 e 2015, nos idiomas inglês, português e espanhol, as quais

expusessem sobre a temática proposta. Como critérios de exclusão, não foram consideradas

publicações relacionadas com fatores genéticos do hospedeiro associados a outros tipos de

patógenos. RESULTADOS E DISCUSSÃO: Após leituras dos títulos, resumos, metodologias

e resultados dos trabalhos encontrados inicialmente e exclusão daqueles que não se

enquadravam aos critérios propostos, foram selecionados 47 artigos científicos. O número de

estudos aumentou a partir de 2008, sendo que em 2015 houve o maior número de publicações

(8). A maioria das pesquisas foi desenvolvida na Ásia (57%) e na América do Sul (19%),

destacando-se os trabalhos desenvolvidos em populações na Índia e no Brasil, respectivamente.

Com base em estudos genômicos de associação entre casos e controles, dentre as alterações

genéticas em moléculas envolvidas com a resposta imune que foram avaliadas, destacaram-se os

polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) em genes não relacionados ao antígeno leucocitário

humano (HLA), como os associados à citocina pró-inflamatória fator de necrose tumoral alfa

(TNF-α) e à molécula não-integrina captadora da molécula de adesão intercelular-3 específica

das células dendríticas (DC-SIGN), assim como também as variantes nos genes relacionados ao

HLA de classes I e II do complexo principal de histocompatibilidade (MHC). Em 55% das

publicações lidas foi observada associação estatisticamente significativa dos polimorfismos

encontrados na população com susceptibilidade à infecção por dengue e o possível risco de

progressão da doença para formas clínicas mais graves (DHF/DSS), enquanto em 17% das

pesquisas os polimorfismos foram associados à proteção. Contudo, em 28% dos trabalhos se

verificou a presença de resultados ainda controversos ou sem associação estatisticamente

significativa quanto à existência de tais associações. Diversos SNPs encontrados na região

regulatória, como o -308 G/A (rs1800629) e o -238 G/A (rs361525) influenciam na transcrição

do gene envolvido com TNF-α e com seus níveis de circulação, e, portanto, podem ter

associação com o desenvolvimento de DHF/DSS por diferentes vias (COFFEY et al., 2009;

HARAPAN et al., 2013). DC-SIGN é uma importante lectina de tipo C utilizada como receptor

de entrada pelo DENV para infectar células dendríticas, e alguns SNPs no gene que codifica

este receptor (CD209) já foram descritos, com destaque para o SNP -336 A/G (rs4804803),

porém alguns estudos apresentam resultados contraditórios e sem poder de associação relevante

quanto à modulação da sintomatologia clínica em pacientes com dengue (COFFEY et al., 2009;

FANG et al., 2012; HARAPAN et al., 2013). Polimorfismos em alelos do complexo HLA de

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ classe I e II podem estar correlacionados com diferentes perfis de diferenciação de células T,

levando a variáveis respostas antivirais que estejam relacionadas à patogênese da DHF/DSS

(COFFEY et al., 2009; FANG et al., 2012). Dentre as limitações observadas no grau de

reprodução entre os diferentes estudos genômicos que possam detectar corretamente uma

verdadeira associação, são destacadas na literatura: os pequenos tamanhos amostrais, que

juntamente com a frequência alélica, a magnitude do efeito e o limiar de significância podem

acarretar em baixo poder de associação; a etnicidade e estratificação das populações estudadas,

onde as diferenças de ancestralidade sistemática entre casos e controles podem levar a

associações falsas ou confusas; e outras variações não identificadas na interação entre patógeno-

hospedeiro ou gene-ambiente (CHAPMAN & HILL, 2012; CHATUVERDI, NAGAR,

SHRIVASTAVA, 2006; COFFEY et al., 2009). CONCLUSÃO: A presença de diferentes

polimorfismos em moléculas envolvidas com a resposta imunológica pode acarretar em efeitos

significativos na modulação da sintomatologia clínica em pacientes com dengue, considerando

o papel da imunidade do hospedeiro no decorrer da patogênese. Apesar dos avanços nas

abordagens metodológicas empregadas, a determinação de fatores genéticos associados à

proteção, susceptibilidade ou severidade da infecção pelo DENV ainda é insuficientemente

definida em termo mundial, e tais achados indicam a necessidade de realização de novos

estudos genômicos de associação em diferentes populações, e com maiores números amostrais.


CHAPMAN, S. J.; HILL, V. S. Human genetic susceptibility to infectious disease. Nature Reviews – Genetics, v. 13, n. 1, p. 175-188, 2012. CHATUVERDI, U. C.; NAGAR, R.; SHRIVASTAVA, R. Dengue and dengue haemorrhagic fever: implications of host genetics. Immunology & Medical Microbiology, v. 47, n. 1, p.155-166, 2006. COFFEY, L. L.; et al. Human genetic determinants of dengue virus susceptibility. Microbes and Infection, v. 11, n. 1, p. 143-156, 2009. FANG, X.; et al. Genetic polymorphisms of molecules involved in host imune response to dengue virus infection. Immunology & Medical Microbiology, v. 66, n. 1, p. 134-146, 2012. HARAPAN, H.; et al. Non-HLA gene polymorphysms and their implications on dengue virus infection. The Egyptian Journal of Medical Humans Genetics, v. 14, n. 1, p. 1-11, 2013.


ATIVIDADE ANTIFÚNGICA E COMPOSIÇÃO QUÍMICA DO ÓLEO ESSENCIAL

DA ESPÉCIE Croton zenhtneri

Soraya Marques Ribeiro

Oriel Herrera Bonilla

Eliseu Marlônio Pereira de Lucena

Francisca Lidiane Linhares de Aguiar

Antonio Carlos Nogueira Sobrinho


INTRODUÇÃO: O bioma Caatinga está inserido no domínio morfoclimático do semiárido

brasileiro, apresentando solos rasos e pedregosos com vegetações do tipo xerófila e

hiperxerófila adaptada a escassez hídrica anual, possuindo uma diversidade de espécies

endêmicas representantes da fauna e da flora do Nordeste brasileiro (SOUSA, 2010).

Amplamente distribuído na flora do Nordeste brasileiro, principalmente na Caatinga, o gênero

Croton, um dos mais numerosos da família Euphorbiaceae, pertence à subfamília Crotonoideae

e tribo Crotoneae. Das 700 espécies desse gênero, 350 são encontradas no Brasil, muitas das

quais, têm suas propriedades químicas e/ou farmacológicas conhecidas (BERRY et al, 2005). A

maioria das espécies de Croton são produtoras de óleos essenciais e possuem forte potencial

econômico devido aos metabólitos secundários produzidos pela planta (PALMEIRA; JUNIOR

et al., 2006). O interesse da indústria farmacêutica nas propriedades dos óleos essenciais vem

crescendo nos últimos anos, devido suas múltiplas funções, em especial, atividades

antioxidante, antimicrobiana e antitumoral (BAKKALI et al., 2008). Segundo Abdelgaleil et al.

(2008), diversos estudos comprovaram o efeito de compostos extraídos de óleos essenciais de

plantas, que atuam como fungicidas naturais, inibindo a atividade fúngica. Além disso, com o

aumento da incidência de infecções por fungos aliado à resistência que estes agentes têm

desenvolvido aos antimicóticos, bem como o elevado custo dos fármacos, tem levado a uma

busca constante por alternativas terapêuticas eficazes, dentre elas, a prospecção de plantas com

potencial fungicida que possam oferecer mais opções de tratamento (FONTENELLE et al.,

2007). OBJETIVO: Diante desse contexto, o objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial

antifúngico e a composição química do óleo essencial da espécie Croton zenhtneri.

MATERIAL E MÉTODOS: Foram coletadas as folhas da espécie de Croton zenhtneri na

região serrana de Viçosa do Ceará, na comunidade de Cocalzinho, situada a 3º 33’ 44” de

latitude e a 41º 05' 32". As folhas foram coletadas no horário de 8h da manhã, tendo sido

confeccionado exsicata que foi depositadas no Herbário Prisco Bezerra da Universidade Federal

do Ceará, com os respectivo número, 46.721. O óleo essencial foi obtido através da técnica de

hidro destilação em aparelho do tipo Clevenger. A identificação dos constituintes do óleo

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ essencial foi realizada por Cromatografia Gasosa acoplada a Espectrometria de Massa (CG/EM)

utilizando-se o aparelho Shimadzu. Para preparação do inóculo para o teste de susceptibilidade

antifúngica foram utilizadas cepas dermatofíticas cultivadas em ágar Sabouraud durante 15 dias

a 35 °C e cepas de levedura durante 35 h a 24 °C. Um fragmento de Microsporum canis,

Trichophyton rubrum e Candida albicans foi transferido para tubos de ensaio contendo 9 mL de

solução salina a obter uma turbidez equivalente ao padrão 5x104 UFC mL-1 ou 0,5 na escala

McFarland para obtenção das concentrações finais do inóculo de aproximadamente 2,5-5 x 103

UFC mL-1 de Candida albicans e 5 x 104 UFC mL-1 para os dermatófitos M. canis e T.

rubrum. Também foi realizado o método de microdiluição em caldo, usando-se a concentração

inibitória mínima (CIM) e concentração fungicida mínima (CFM) do óleo frente aos micro-

organismos dermatófitos e leveduriformes, foram determinadas pelo método de microdiluição

usando placas de 96 poços para microdiluição de acordo com o CLSI M27A3 (2008).

RESULTADOS E DISCUSSÃO: Os compostos majoritários identificados na folha de Croton

zenhtneri foram estragol (85,26%) e 4-metoxibenzaldeído (8,91%). Em relação ao fungo

Candida albicans, o óleo essencial apresentou CIM no valor de 5.000 e CFM no valor de

10.000. E já em relação ao T. rubrum apresentou CIM no valor de 2.500 e CFM de 5.000. O

Croton zenhtneri apresentou atividade antifúngica de maior representatividade em relação às

cepas de M. canis, tendo encontrado CIM nos valores de 156 µg mL-1 e CFM no valor de 312

µg mL-1, respectivamente. Estudos realizados por Fontenelle (2007), também demonstraram a

eficácia do C. zenhtneri frente a cepas de M. canis com valores de CIM variando de 620 a 1250

µg.ml-1 e CFM variando de 1250 a 2500 µg mL-1. Provavelmente, a atividade antifúngica

deve-se aos constituintes majoritários encontrados nas espécies de C. nepetaefolius e de C.

zenhtneri, sendo o eucaliptol e o estragol, respectivamente. Estudos prévios realizados por Lee

et al (2007) e Kishore et al (2007) demonstraram a atividade antifúngica de fenóis, como o

eugenol, estragol e monoterpenos alcólicos, como o eucaliptol, ambos presentes nas espécies de

Croton que inibiram o crescimento fúngico Alguns constituintes que também estão presentes

nas espécies de Croton, como o eucaliptol e o espatulenol foram descritos na literatura devido

sua ação antifúngica e antibacteriana, inclusive na atuação contra dermatófitos (FLASH et al.,

2002). Os óleos essenciais que possuem espatulenol como um dos principais constituintes,

como é o caso do C. zenhtneri, geralmente apresentam atividade bacteriana e fungicida

(TZAKOU; SKALTSA, 2003). CONCLUSÃO: A espécie Croton zenhtner presente no

Nordeste brasileiro apresenta elevado potencial farmacológico, possuindo atividade antifúngica

frente a cepas dermatofíticas, provavelmente devido aos constituintes químicos presentes no

óleo essencial dessa espécie.

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

ABDELGALEIL, S. A. M. et al. Bioactivity of two major constituents isolated from the essential oil of Artemia judaica L. Bioresource Technology, v. 99, n. 13, p. 5947-5950, set. 2008. BAKKALI, F. et al. Biological effects of essential oils: a review. Food Chemical Toxicology, v. 46, n.2, p. 446 – 475, fev. 2008. BERRY, P. E. et al. Molecular phylogenetics of the giant genus Croton and tribe Crotoneae (Euphorbiaceae sensu stricto) using ITS and trnL-trnF sequence data. American Journal of Botany, v. 92, n.9, p.1520–1534, set. 2005. FLASH, A. et al. Chemical analysis and antifungical activity of the essential oil of Calea clematidae. Planta Medicinal, v. 68, n. 9, p. 836-838, set. 2002. FONTENELLE, R.O.S. et al. Chemical composition, toxicological aspects and antifungal activity of essential oil from Lippia sidoides Cham. Journal antimicrobial chemotherapy, v. 59, n. 5, p. 934-940, mai. 2007. KISHORE, G.K.; PANDE, S. Evaluation of Essential Oils and Their Components for Broad Spectrum Antifungal Activity and Control of Late Leaf Spot and Crown Rot Diseases in Peanut. Plant Disease, v. 91, n. 4, p. 375-379, abr. 2007. LEE, S.J. et al. Antifungal Effect of Eugenol and Nerolidol against Microsporum gypseum in a Guinea Pig Model. Biol. Pharm. Bull, v. 30, n. 1, p. 184-188, jan. 2007. PALMEIRA-JUNIOR, S. F.; ALVES, F. S. M.; VIEIRA, L. F. A.; CONVERSA, L. M.; LEMOS, R. P. L. Constituintes químicos das folhas de Croton sellowii (Euphorbiaceae). Revista Brasileira de Farmacognosia, v. 16, n.3, p.397-402, 2006. TZAKOU, O.; SKALTSA, H. Composition and bacterial activity of the essential oil of Satureja parnassica subsp parnassica. Planta medicinal, v. 69, n. 3, p. 282-284, mar. 2003.


AVALIAÇÃO DA QUALIDADE MICROBIOLÓGICA DE CARNES IN NATURA DO

MERCADO CENTRAL DE SOBRAL-CE

Lyvia Dutra Pacheco Marques de Almeida

Luciana Fujiwara Aguiar Ribeiro

Leiliane Teles Cesar

INTRODUÇÃO: Os alimentos de origem animal, especificamente a carne, pela sua

composição rica em nutrientes e sua elevada atividade de água são bastante susceptíveis à

deterioração microbiana. É um excelente meio de cultura para o desenvolvimento microbiano e

frequentemente está envolvida na disseminação de micro-organismos patogênicos causadores de

enfermidades ao homem e a outros animais. OBJETIVO: O objetivo deste trabalho foi realizar

a análise microbiológica de coliformes totais, termotolerantes e Salmonella spp. em carnes in

natura de frango, bovina e suína, vendidas em bifes, no Mercado Central de Sobral-CE.

MATERIAIS E MÉTODOS: As análises foram realizadas, de forma asséptica, logo após a

recepção das amostras, que foram submetidas às seguintes análises: contagem de coliformes

totais ou a 35°C, contagem de coliformes termotolerantes ou a 45°C e detecção de Salmonella

spp. realizadas no Laboratório de Microbiologia de Alimentos do IFCE – Campus de Sobral, de

acordo com os métodos do Manual de Métodos de Análise Microbiológica de Alimentos (1997)

e do Manual de Métodos de Análise Microbiológica de Alimentos e Água (2010).

RESULTADOS E DISCUSSÃO: Na contagem de coliformes totais para o peito de frango (F)

e coxão mole bovino (CB) obteve-se um valor maior ou igual a 2,4x10³ NMP/g, e para bisteca

suína (CS) de 2,4x10² NMP/g, ou seja, as amostras F e CB obtiveram contagens maiores do que

da amostra de CS. Na contagem de coliformes termotolerantes não houve crescimento

microbiano em nenhuma das três amostras de carne in natura, sendo um aspecto positivo para a

venda no Mercado de Sobral. A Resolução RDC n° 12 de 2001 estabelece um limite máximo de

10/g para coliformes termotolerantes apenas em carnes resfriadas, ou congeladas, "in natura", de

aves (carcaças inteiras, fracionadas ou cortes). Para coliformes termotolerantes as carnes estão

em condições sanitárias satisfatórias. CONCLUSÃO: Como não foi possível a realização dos

testes bioquímicos e sorológicos para a detecção de Salmonella spp. foi obtido reação típica de

salmonela nas três amostras de carne in natura. Sendo impróprias para o consumo humano,

segundo a legislação. É recomendado que carnes “in natura” fiquem em local adequado em

refrigeração a 10°C no mínimo, durante a comercialização, e após a compra deve ser feito o

cozimento a 100°C por no mínimo 15 minutos, para que atinja o centro térmico do alimento e

essas bactérias patogênicas não sobrevivam até o seu consumo. Sugere-se também, para os

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ locais de comercialização, realizar as Boas Práticas de Manipulação (BPM), apresentar o

certificado sanitário e condições de acondicionamento.


AVALIAÇÃO DOS CASOS DE MENINGITE NOTIFICADOS PELO SINAN, NA

CIDADE DE SOBRAL E NO ESTADO DO CEARÁ, NO PERÍODO 2013-2014

Maria Gabriela Araújo Mendes

Alexandre Caldas Costa

Daniela Rocha Rafael

Mayck Silva Barbosa

Thiago Nobre Gomes

INTRODUÇÃO: A meningite é uma doença causada por diversos agentes infeciosos

(bactérias, fungos, vírus, protozoários e helmintos) e agentes não infecciosos, que conseguem

ultrapassar as barreiras do organismo e atacar as meninges. Uma vez que os exames

laboratoriais tenham comprovado a sua etiologia viral, a meningite é caracterizada pela presença

de manifestações clínicas mais leves, portanto seu tratamento se dá de forma similar a outros

casos de viroses (MINISTÉRIO DA SAÚDE, 2015). No entanto quando se trata de uma

meningite de etiologia bacteriana, é necessário que os casos sejam tratados imediatamente, já

que são caracterizados por apresentarem uma doença de sintomatologia mais grave (MASUDA

et al., 2015). As principais bactérias causadoras desta enfermidade são Neisseria meningitidis,

Streptococcus pneumoniae e Haemophilus influenzae, transmitidas principalmente por vias

respiratórias, além de outras vias (BROUWER et al., 2010). De acordo com os dados do

SINAN, de 2007- 2013 no Brasil foram reportados 155.703 casos de meningite, dos quais 60%

foram diagnosticados do (no) sexo masculino (MASUDA et al.,2015). Observou-se assim, que

essa doença ainda constitui um grave problema de saúde pública, devido principalmente a sua

magnitude de ocorrência e o seu alto potencial infecioso de produzir surtos (RODRIGUES,

2015). OBJETIVO: O presente trabalho objetivou analisar e correlacionar os dados de casos

notificados de meningite ocorridos na cidade de Sobral e no estado do Ceará, nos períodos

2013-2014, a fim de montar seu perfil epidemiológico. MATERIAL E MÉTODOS: Foi

realizado um estudo retrospectivo, descritivo e quantitativo, em que os dados foram obtidos a

partir dos registros de casos de MB notificados tanto em Sobral quanto no estado do Ceará em

sua totalidade, nos anos de 2013 e 2014, com registro no Sistema de Informação de Agravos de

Notificação (SINAN). RESULTADOS E DISCUSSÃO: Na cidade de Sobral, no ano de 2013

foram notificados 46 casos de meningite, dos quais 63% corresponderam ao sexo masculino e

37% ao sexo feminino. Em 2014 foram notificados 27 casos, dos quais 63% corresponderam ao

sexo masculino e 37% ao sexo feminino. Já no estado do Ceará, no ano de 2013 foram

notificados 448 casos de meningite, dos quais 63% corresponderam ao sexo masculino e 37%

ao sexo feminino. Em 2014 foram notificados 335 casos, dos quais 57% correspondem ao sexo

masculino e 43% ao feminino. Conforme observado no município de Sobral e no estado do

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ Ceará, houve uma redução lenta e gradual no número de casos de meningite entre 2013 e 2014,

possivelmente justificada pelo fato que nos referidos anos o governo estadual intensificou as

campanhas de vacinação contra meningites promovidas pelo Ministério da Saúde, acarretando

em maior conhecimento da população que, uma vez mais informada, pode se prevenir melhor

contra a doença. Ao se analisar o grau de instrução dos pacientes acometidos por meningite em

Sobral, os dados revelaram que no ano de 2013 houve predominância de casos com ensino

fundamental incompleto - 5° ao 8 ° ano (50%), seguidos pelo casos com ensino médio completo

(20%) e incompleto (10%). Em 2014, a maior prevalência foi encontrada em pacientes com

ensino fundamental incompleto (43%), seguido pelo ensino médio completo (14%). Já no

estado do Ceará, quanto ao grau de instrução dos pacientes com meningite, os dados referentes a

2013 mostraram predominância de casos com ensino fundamental incompleto (5,6%), seguido

pelos casos com ensino médio incompleto (2,6%) e ensino fundamental completo (2,4%). Em

2014, observou-se que a maior prevalência foi verificada em pacientes com ensino fundamental

incompleto (11%), seguido pelos pacientes com ensino fundamental completo (5,6%) e ensino

médio completo (3,4%). Esse referido estudo comprova o que é observado na literatura, visto

que a meningite é caracterizada uma enfermidade que ocorre em maiores proporções em

pessoas que possuem o nível de escolarização baixo. Em relação à faixa etária, foi observado

que no município de Sobral e no estado do Ceará, no referido período de estudo houve maior

ocorrência da doença em indivíduos que possuíam entre 20-39 anos, já que na fase adulta o

aumento do número de casos pode estar associado à finalização do período de imunização,

considerando que o período vacinação destes pacientes ocorreu na fase de infância

(RODRIGUES, 2015). CONCLUSÃO: Conforme observado, tanto em Sobral quanto no estado

do Ceará em sua totalidade, houve uma redução lenta e gradual entre 2013 e 2014 no número de

casos de meningite entre os anos de 2013 e 2014. Dessa forma, conclui-se que é de grande valia

que ocorra de forma constante a promoção de campanhas de vacinação e atividades educativas

que informem à população sobre como se prevenir contra a meningite.


BROUWER, M. C.; et al. Epidemiology, diagnosis, and antimicrobial treatment of acute bacterial meningitis. Clinical Microbiology Reviews, v. 23, n. 3, p. 467-492, 2010. MASUDA, E. T.; et al. Mortalidade por doença meningocócica no município de são paulo, brasil: características e preditores. Cadernos de Saúde Pública, v. 31, n. 2, p. 405-416, 2015. MINISTÉRIO DA SAÚDE. Secretaria de Vigilância em Saúde. Portal da Saúde. Meningites. Disponível em: <http://portalsaude.saude.gov.br/index.php/o ministerio/principal/secretarias/svs/meningites>. Acesso em 28 out. 2015. RODRIGUES, E. M. B. Meningite: Perfil epidemiológico da doença no Brasil nos anos de 2007 a 2013. 16 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Curso de Bacharelado em Biomedicina). Centro Universitário de Brasília, Brasília, 2015.


AVALIAÇÃO HIGIÊNICA SANITÁRIA DO PÓLEN


Andréa Maria Neves

Anny Sampaio Silva


Layanne Mesquita Albuquerque Lopes

José Ribeiro do Nascimento


INTRODUÇÃO: O pólen é um pó fino e colorido, característica obtida devido à diversidade

das espécies botânicas visitadas pelas abelhas, sua composição depende da origem botânica, da

época de colheita, do meio ambiente, das condições climáticas, dos métodos de extração e do

período de armazenamento. O pólen passa por processo de secagem com temperatura de até

42ºC, que é considerada branda, porque permite o crescimento microbiano, podendo assim, se

tornar um veículo de transmissão de doenças. É necessária a correta manipulação do pólen, pois

o mesmo é suscetível a contaminação ambiental e ao crescimento de microrganismo, devido ao

seu elevado teor de nutrientes, por está exposto a contaminação advinda do contato com

abelhas, materiais vegetais, insetos, animais e manipulação. OBJETIVO: O presente estudo

tem o objetivo de avaliar a qualidade microbiológica do pólen. MATERIAL E MÉTODOS:

Foram coletadas duas amostras de pólen (A e B), em seguida encaminhadas ao Laboratório de

Microbiologia da Universidade Estadual Vale do Acaraú, onde se realizaram as análises. Foram

pesadas 25 g de pólen e homogeneizada com 225 mL de solução salina (0,85%) estéril, sendo

esta a diluição 10-1, em seguida 1 mL desta diluição foi dissolvida em 9 mL de solução salina,

constituindo a diluição 10-2, procedendo assim até a diluição 10-3, processo realizado para os

duas analises. O Número Mais Provável (NMP) de Coliformes Totais (CT) e Coliformes

Termotolerantes (CTT) foi determinado através da técnica dos tubos múltiplos. O teste foi

realizado em três etapas distintas: prova presuntiva, prova para determinação de coliformes

totais e termotolerantes e prova bioquímica. Para o teste presuntivo utilizou-se o Caldo

Lactosado com tubos de Durhan invertidos, sendo utilizadas repetições de cinco tubos para cada

diluição. Na primeira série de tubos, foram inoculados 1 mL da diluição 10-1 em 10 mL de

Caldo Lactosado. A segunda série de cinco tubos foi inoculada com 1 mL da diluição 10-2 e a

terceira série com 1 mL da diluição 10-3. Em seguida, os tubos foram incubados em estufa

bacteriológica a 35° por 48 horas. Foram considerados positivos os tubos de Caldo Lactosado

que apresentaram produção de gás com formação de bolhas no Durhan e turvação do meio. Para

a identificação de Coliformes Totais foram retiradas alíquotas dos tubos positivos de lactosado e

inoculados em Caldo Bile Verde Brilhante (BVB) que foram incubados em estufa a 35ºC por 48

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ horas. A quantificação de Coliformes Termotolerantes foi feita retirando-se alíquotas com

auxílio de uma alça de níquel cromo dos tubos de lactosado positivos e inoculando-se em tubos

com Caldo Escherichia coli (EC) e tubos de Durham invertidos e posterior incubação em banho-

maria a 45ºC por 48 horas. Para isolamento e identificação de E. coli, foram retiradas alíquotas

dos tubos positivos de EC e semeados com alça de níquel cromo em placas contendo meio

Eosin Methylene Blue Ágar (EMB) e incubados em estufa a 35ºC por 24 horas. As colônias

com características positivas para E. coli, de coloração verde brilhante, foram isoladas em

Tryptic Soy Ágar (TSA) e identificados através do teste do ImVic. Para identificação de

bactérias aeróbias mesófilas utilizou-se a contagem padrão em placas, esta foi feita através da

técnica do Pour Plate, no qual, foram retiradas 1 mL de cada uma das 3 diluições das amostras e

adicionadas a 15 mL de Plate Count Ágar (PCA). O inóculo foi misturado ao meio de cultura

movimentando suavemente as placas numa superfície plana, com movimentos em forma de

oito. Após a completa solidificação do meio de cultura as placas foram incubadas em estufa a

35ºC, por 24 horas. O procedimento foi realizado em duplicata para todas as diluições. Foram

pesadas 25g de pólen em seguida homogeneizada em 225 ml Lactosado, depois inoculado em

estufa a 36°C por 24 horas. Foram feitas as análises de identificação de Salmonella sp. pelo

método convencional baseado no enriquecimento, isolamento e identificação. Para o preparo do

enriquecimento, 1 mL da amostra foi inoculada em tubos de ensaio contendo 9 ml de Caldo

Tretrationato (TT) e 9 ml de Caldo Rapapport, em seguida incubando em banho-maria por 42ºC

por 24 horas. Depois da incubação uma alíquota dos caldos foram semeados em placas contendo

os meios para crescimento: Salmonella Shigella Ágar (SS) e Bismuth sulfite ágar (BSA),

posteriormente incubando em estufa por 35ºC por 24 horas. Depois foram isoladas colônias e

semeadas em meio TSI (ágar ferro trípice açúcar) e LIA (ágar lisina ferro) em seguida levados

para a incubação em estufa a 35°C por 24 horas, depois foram observadas e identificadas. Para

identificação de bolores e leveduras foram pesadas 25 g de cada amostras de pólen adicionou-se

225 ml de salina a (0,85%) e homogeneizou-se, obtendo-se desta forma a primeira diluição (10-

1), para a segunda diluição (10-2), transferiu-se 1 ml da primeira diluição para 9 ml de salina, e

para a terceira diluição (10-3), foi utilizado o mesmo procedimento. Em seguida plaqueou-se 0,1

ml de cada diluição nas placas contendo o meio Ágar Batata e espalhou-se o inóculo por toda a

superfície com auxílio de um swab, procedimento realizado em duplicata para todas as

diluições, as placas foram incubadas à 37°C por 6 dias. Após a incubação, foi verificada a

presença de colônias de bolores e leveduras e realizada a contagem. RESULTADOS E

DISCUSSÃO: Os resultados obtidos para amostras de pólen foram ausentes para, coliformes

totais, coliformes termotolerantes, Salmonela e bolores houve presença apenas de leveduras e

bactérias aeróbias mesófilas. Para leveduras apresentou 7,5x10 UFC/g amostra A e 5x10 UFC/g

amostra B e os resultados obtidos para bactérias aeróbias mesófilas foram de 2,8x104 e 1,2x103

amostra A e B respectivamente. Como foi observado nos resultados, as amostras apresentaram

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ presença de leveduras e bactérias aeróbias mesófilas, porém a legislação brasileira não

especifica parâmetros microbiológicos para amostra de pólen. No entanto, levando em

consideração o Código Alimentario Argentino que considera limites máximos de 1,5x103

UFC/g para contagem de bactérias aeróbias mesófilas, as amostras de pólen encontra-se

contaminadas. Para contagem de leveduras o mesmo código Alimentario Argentino estabelece

valor máximo de 102 UFC/g, de acordo com este código as amostras encontram-se próprias

para o consumo. Outros trabalhos apresentaram resultados semelhantes ao encontrados nesta

pesquisa. CONCLUSÃO: Conclui-se que nas amostras testadas não foi detectada a presença de

microrganismos patogênicos, portanto, não apresentando riscos à saúde dos consumidores. A

presença de fungos e bactérias mesófilos, não apresenta perigo, mais merecem mais atenção em

futuras investigações científicas.


AVALIAÇÃO DO PERFIL DE SENSIBILIDADE DE CEPAS DE Staphylococcus

COAGULASE POSITIVA ISOLADAS DE LINGUIÇAS MISTAS

COMERCIALIZADAS NO MERCADO PÚBLICO DE SOBRAL – CEARÁ



Andréa Maria Neves

Anny Sampaio Silva


Raquel Oliveira dos Santos Fotenelle

INTRODUÇÃO: A Linguiça mista do tipo frescal é um derivado cárneo de grande

aceitabilidade no mercado consumidor brasileiro (CORREIA, 2008) e por não receber nenhum

tratamento térmico ou dessecação durante a sua elaboração bem como apresentar uma grande

quantidade de nutrientes e alta atividade de água é considerado um alimento de curto prazo

comercial e um excelente meio para o crescimento microbiano (SILVA, 2004). A contaminação

desse tipo de alimento por micro-organismos patogênicos como Staphylococcus aureus é um

problema grave e tem sido muito reportada como causa comum de inúmeros surtos de

toxinfecções alimentares (VERONESI; FOCÁCIA, 2009). Normalmente, as infecções

bacterianas são facilmente tratadas com antimicrobianos, porém o uso indiscriminado destas

substâncias pode ocasionar o surgimento de linhagens de bactérias mais resistentes. Uma forma

de avaliar o perfil de sensibilidade desses micro-organismos é através do teste de difusão em

ágar. Este método permite avaliar o grau de sensibilidade de alguns micro-organismos de

crescimento rápido frente a determinadas drogas e dessa forma é possível classifica-los como

sensíveis, intermediários ou resistentes às drogas testadas (OSTROSKY, 2008). OBJETIVO:

Diante do exposto, o presente estudo teve por objetivo avaliar o perfil de sensibilidade de cepas

de Staphylococcus coagulase positiva isoladas de linguiças mistas comercializadas no Mercado

Público da cidade de Sobral, no Ceará. MATERIAL E MÉTODOS: Para o teste foram

utilizadas 7 (sete) cepas de Staphylococcus coagulase positiva cedidas pelo Laboratório de

Microbiologia da Universidade Estadual Vale do Acaraú. As cepas foram identificadas como

C01, C02, C04, 05, C06 e C07 e avaliadas através do método de difusão em ágar com discos de

papel, frente aos antibióticos Ampicilina, Cloranfenicol, Norfloxacina, Gentamicina e Penicilina

G, que foi utilizada como controle positivo. As cepas foram diluídas em tubos com 9 mL de

solução salina (0,85%) estéril de acordo com a Escala de McFarland e em seguida foram

inoculadas de forma homogênea em placas com 15mL de Ágar Mueller Hinton. Posteriormente

foram colocados de forma equidistante os discos de papel impregnados com as drogas a serem

testados nas placas inoculadas que foram incubadas em estufa bacteriológicas à 36ºC por 24 a

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ 48 horas. Em seguida mediu-se os halos de inibição formados envolta dos discos de papel.

RESULTADOS E DISCUSSÃO: De acordo com a análise do tamanho dos halos de inibição

as cepas foram classificadas como sensíveis, intermediária ou resistentes às drogas testadas. Das

7 (100%) cepas isoladas, 6 (85,7%) apresentaram-se sensibilidade para todos as drogas testadas

e apenas 1 (14,3%) apresentou resistência para a Ampicilina e sensibilidade intermediária para

Penicilina G. CONCLUSÃO: Diante dos resultados pode-se inferir que a maioria das cepas

analisadas apresentaram um perfil de sensibilidade semelhante mostrando-se sensíveis a todas

as drogas testadas, porém a variação nesse perfil, observada para uma das cepas, pode significar

a presença de uma linhagem de Staphylococcus coagulase positiva mais resistente o que pode

significar riscos ainda maiores para a saúde dos consumidores.


SILVA, W. P. Listeria spp. no processamento de linguiças frescal em frigoríficos de Pelotas, RS, Brasil. Ciência Rural, v. 34, n. 3, p. 911-916, Junho de 2004. CORREIA, L. M. M. Multiplicação de microbiota autóctone e de Staphylococcus aureus inoculados em linguiças frescais com diferentes concentrações de sais de cura. Dissertação (Pós-graduação em Tecnologia de Alimentos) - Universidade Federal do Paraná, 85f, Curitiba, 2008. VERONESI, R.; FOCACCIA, R. Tratado de Infectologia. São Paulo, Ed Atheneu, pp. 966-970, 2009. OSTROSKY, E. A.; MIZUMOTO, M. K.; LIMA, M. E.L.; KANEKO, T. M.; NISHIKAWA, S. O.; FREITAS, B. R. Métodos para avaliação da atividade antimicrobiana e determinação da concentração mínima inibitória (CMI) de plantas medicinais. Revista brasileira de Farmacologia. v. 18(2), p. 301-307, Abr/Jun. 2008.


AVALIAÇÃO MICROBIOLÓGICA DA ÁGUA DE UMA ESCOLA DE ENSINO

FUNDAMENTAL DE SOBRAL CEARÁ

Ana Brena Kelly Carneiro

Ilca Marque Fontenele

Lucélia Saboia Parente

INTRODUÇAO: A água de consumo humano é um dos importantes veículos de enfermidades

diarreicas de natureza infecciosa, o que torna primordial a avaliação de sua qualidade

microbiológica (MARQUEZ et al., 1994). As doenças de veiculação hídrica são causadas

principalmente por micro-organismos patogênicos de origem entérica, animal ou humana,

transmitidas basicamente pela rota fecal-oral, ou seja, são excretados nas fezes de indivíduos

infectados e ingeridos na forma de água ou alimento contaminado por água poluída com fezes

(GRABOW, 1996). A importância do controle e da análise da qualidade da água é fundamental

a fim de que se eliminem os riscos de potencial de contaminação da população por via

alimentar. Coliformes são também encontrados rotineiramente em diversas fontes ambientais,

mas água potável não é um ambiente natural para eles. Sua presença neste tipo de amostra deve

ser ao menos considerada como possível ameaça ou indicativo de deterioração da qualidade

microbiológica da água (VAN NETEN et al., 2002). OBJETIVO: O presente trabalho teve

como objetivo avaliar a qualidade da água consumida por alunos e servidores de uma Escola de

Ensino Fundamental na cidade de Sobral- Ceará. A agua foi avaliada a partir da enumeração de

coliformes totais e Termotolerantes e contagem de bactérias mesófilas. MATERIAL E

METODOS: As coletas foram realizadas em três pontos diferentes: bebedouro, torneira da

cozinha e filtro de uma escola da rede Estadual na cidade de Sobral-Ceará. Foram realizadas 5

coletas em cada ponto, totalizando 15 amostras de água coletadas. O NMP de coliformes foi

feito pelo método dos tubos múltiplos (FENG,2015). Para a prova presuntiva foi utilizado o

caldo Lauril Sulfato em dupla concentração com incubação a 350C. Para a prova de coliformes

total (CT) e termotolerante (CTT) foram utilizados os caldos Bile Verde Brilhante incubado a

350C em estufa e E.C. incubado a 44,50C em banho-Maria, respectivamente. Para a pesquisa de

Escherichia coli foi utilizado os testes bioquímicos do IMViC.O método de Contagem Padrão

em Placas (CPP) estima o número de células viáveis contido num alimento qualquer. A técnica

utilizada para quantificar as bactérias foi o “Pour Plate” (VIEIRA E TORRES, 2004).

RESULTADOS E DISCUSSÃO: Os resultados obtidos da água do bebedouro (ponto 1),

mostram ausência de coliformes totais(CT) e termotolerantes (CTT) e de bactérias mesófilas.

Segundo o Ministério da Saúde, a água potável deve apresentar qualidade adequada ao consumo

humano, respeitando os padrões de potabilidade. Para a qualidade bacteriológica da água a

Portaria 2914 de dezembro de 2011, recomenda que a água potável deve apresentar ausência de

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ bactérias do grupo coliformes em 100mL de amostra e para a Contagem Padrão em Placa um

limite de 5x102 UFC (BRASIL, 2015).Nenhum dos resultados encontrados para a contagem de

bactérias mesófilas nas águas coletadas no bebedouro excedeu este limite. Foi verificada

presença de CT e CTT em uma amostragem da água do filtro (ponto2) e a contagem de

bactérias mesófilas variou de 0 a 175 x101 UFC/100mL. Os resultados encontrados não estão de

acordo com os padrões microbiológicos estabelecidos pela Portaria 2914 de dezembro de

2011.Embora os níveis de CT e CTT tenham sido baixos, é importante que haja monitoramento,

pois estas bactérias podem atuar como patógenos oportunistas.A contagem de bactérias

mesófilas na água do filtro ultrapassou o limite estabelecido pelo Ministério da Saúde.Para as

amostras de água coletadas na torneira da cozinha (ponto 3), os níveis de CT variaram de 9,2 a

16,1 CT/100mL e de CTT o valor máximo encontrado foi de 1,1 CTT/100mL. O teor de

bactérias mesófilas variou de 0 a 106x101. De acordo com a Portaria mencionada, que

preconiza valores para águas destinadas ao consumo humano, os valores encontrados neste

trabalho se encontram fora dos padrões estabelecidos. Das cepas isoladas das amostras coletadas

no ponto 2 (água do filtro) e ponto 3 (torneira da cozinha),uma foi identificada como

Enterobacter e uma como E. colie duas cepas foram identificadas como E. coli,

respectivamente. As águas destinadas ao consumo podem ser contaminadas devido ao

fenômeno de aderência de bactérias às superfícies (canos, torneiras) que causam a formação de

um biofilme, a partir do qual estas mesmas bactérias podem regularmente ser liberadas nesta

água (OKURA E SIQUEIRA, 2005). CONCLUSÃO: Considerando-se que a água tratada deva

ser isenta de contaminação, pode-se inferir que a presença de bactérias do grupo coliformes seja

devido à sujidade proveniente da falta de limpeza desses reservatórios, como também dos

bebedouros.A presença de E. Coli nas amostras analisadas, embora em pequena quantidade,

sugere a necessidade de cuidados específicos com os reservatórios que, além da limpeza e

desinfecção periódicas.


BRASIL, Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA). Portaria - nº 2914, de 12 de Dezembro de 2011. Estabelece os procedimentos e responsabilidades relativos ao controle e vigilância da qualidade da água para consumo humano e seu padrão de potabilidade, e dá outras providência. D.O.U. - Diário Oficial da União; Poder Executivo, de 12 de dezembro de 2011. Disponível em: http://www.anvisa.gov.br/e-legis/. Out. 2015. FENG, P. & WEAGENT, S.D. DiarrheagenicEscherichia coli.inU.S. Food and Drugs Administration, Center for Food Safety & Applied Nutrition. Bacteriological Analytical Manual online.FDA/CFSAN. Out. 2015. GRABOW W. WATERBOME diseases update on Water quality assessment and control. Water S.A 1996, 22: 193-2002.

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ MARQUEZ I. A. P, DAVILAL.C.M, KU-PECK R.P, SEGOVI T.P. Calidad sanitária de lossuministros de água para consumo humano em Campeche. Salud Pública Méx. 1994; 36: 665-61. VAN NETTEN C., PEREIRA R. BRANDS R. DrinhingWatterSupplay and management practices in Bristish Columbia, 1997-1998. CanadianJournalofPublicHelt93:14-18,2002. VIEIRA, R.H.S.F & TÔRRES, R.C.O. Estimativa da população de coliformes totais e fecais (termotolerantes) e Escherichia coli Através do Número Mais Provável (NMP),p.219-226, in Vieira, R.H.S.F (ed.),Microbiologia, Higiene e Qualidade do Pescado – teoria e prática. Varela, 380 p., São Paulo, 2004. OKURA, M.H. & SIQUEIRA, K.B. Enumeração de coliformes totais e coliformes termotolerantes em água de abastecimento e de minas / Enumerationof total coliformes and coliformes termotolerantes in waterofsupplyingand mines. Revista Higiene Alimentar19(135):86-91, set. 2005.


CÂNCER DE MAMA RELACIONADO AO PAPILOMAVÍRUS HUMANO (HPV) E

EPSTEIN-BARR (EBV) NA VISÃO DOS ALUNOS DE BIOMEDICINA

Sarah Sauha Alves de Lima

Laryssa Caroline Tavares Souza

Jamilly Florêncio Pereira

Joel Xavier Gomes

Rosângela Lima de Freitas

Maria Claudia Paiva dos Santos

Morgana Maria de Oliveira Barboza

INTRODUÇÃO: O câncer de mama representa a maior causa de mortalidade por câncer entre

as mulheres em todo o mundo. O câncer é uma doença crônica caracterizada pelo crescimento

celular desordenado resultante de alterações genéticas. Cerca de 5 a 10% das neoplasias

ocorrem em indivíduos predispostos (hereditariamente), no entanto, a maioria envolve danos ao

DNA, de origem física, química ou biológica, que se acumularam ao longo da vida. No entanto,

nos últimos anos, evidências têm surgido sobre o envolvimento de alguns vírus na etiopatologia

da doença, sendo alguns desses vírus indutores clássicos do processo carcinogênico, como o

Epstein-Barr (EBV) e o Papilomavírus humano (HPV). O EBV pertence à família

Herpesviridae e mais comumente esta associado à mononucleose infecciosa. No entanto, estes

vírus codificam a proteína LMP, e os RNAs EBER, e alguns transcritos com múltiplos splices

da região BamHI A do genoma viral BARF0 e BARF1, que imitam fatores de crescimento, de

transcrição e antiapoptóticos, desregulando o ciclo celular, no entanto, os mecanismos

oncogênicos do EBV ainda não estão totalmente esclarecidos. [onde na literatura constam

achados de 0 a 100% da presença do vírus na amostra utilizando-se a técnica de Reação em

Cadeia da Polimerase (PCR)]. O HPV pertence a família Papillomaviridae, são classificados em

subtipos de baixo e alto risco oncogênico. Os de baixo risco são principalmente 6, 11 e estão

associados ao condiloma, enquanto os de alto risco, especialmente os subtipos 16, 18, 31, 33 se

associam ao câncer. É reconhecido o papel carcinógeno do HPV no câncer de colo útero

principalmente, mas também a outros tipos de cânceres como câncer de ânus e câncer de mama.

O mecanismo patogênico do HPV compreende a ativação das oncoproteínas virais E6 e E7 que

desregulam o ciclo celular, inibindo a apoptose, com a supressão de p53 e pRB, e estimulam a

progressão do ciclo celular. O aumento progressivo do câncer de mama já se tornou um

problema de saúde mundial. A atenção ao paciente com câncer envolve vários profissionais de

saúde como, médicos, enfermeiros, farmacêuticos e biomédicos. O Biomédico pode atuar em

áreas diretamente ligadas à investigação e diagnóstico do câncer através das análises clínicas e

microbiológicas. Desta forma, surgiu preocupação quanto à interdisciplinaridade acerca destes

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ temas e como vêm sendo trabalhado junto aos alunos do curso de Biomedicina, importância do

conhecimento científico dos graduandos em Biomedicina acerca do câncer de mama, sua

correlação com vírus e seus fatores de risco. É indispensável para uma formação completa que

durante a vida acadêmica, o graduando de Biomedicina obtenha conhecimento suficiente que

lhe permita oferecer qualidade e excelência em sua área de atuação. Assim, a Liga Acadêmica

de Microbiologia da Faculdade de Tecnologia Intensiva (FATECI) avaliou o conhecimento dos

alunos do curso de Biomedicina de semestre diversos, quanto ao conhecimento dos estudantes

sobre o câncer de mama, seus fatores de risco, sua correlação com os vírus HPV e EBV e

prevenção. OBJETIVO: O objetivo deste trabalho foi avaliar através da aplicação de um

questionário estruturado, o conhecimento dos graduandos do curso de Biomedicina, de

diferentes semestres, acerca da relação entre o câncer de mama e os vírus HPV e EBV,

identificando possíveis pontos que podem ser melhor trabalhados possibilitando melhorias na

formação desses profissionais. MATERIAL E MÉTODOS: A pesquisa foi realizada na

Faculdade de Tecnologia Intensiva - FATECI, com graduandos do curso de Biomedicina do 1°

ao 8° semestres. Os dados foram coletados através de um questionário contendo 16 questões

objetivas sobre o câncer de mama e os vírus HPV e EBV, diagnóstico e tratamento do câncer de

mama. Antes da aplicação do questionário, os acadêmicos foram esclarecidos sobre os objetivos

da pesquisa. O preenchimento do questionário foi de forma voluntária sem qualquer forma de

identificação dos participantes. Os dados coletados foram tabulados em Excel, e feita uma

análise descritiva. RESULTADOS E DISCUSSÃO: Participaram da pesquisa 61 alunos, onde

40 (65,57%) eram mulheres e 21 (34,42%) eram homens. Com base nas respostas do

questionário, foi possível traçar o perfil de alunos e os semestres com maior ou menor fluência

sobre os temas. A análise de dados se mostrou da seguinte forma: Quanto conhecer ou não o

vírus HPV; boa porcentagem (92%) de alunos respondeu sim, porém uma pequena parcela (8%)

desconhecia o vírus. Quando perguntados sobre as doenças associadas ao vírus, a maioria (89%)

sabia relacioná-lo ao câncer de colo do útero, porém o número decaiu para aqueles que sabiam

identificar as manifestações clínicas do HPV (72%). Foi observado o conhecimento sobre

diferença dos tipos de HPV (77%). Um resultado preocupante foi quando perguntados se

conheciam o vírus EBV, apenas 44% dos alunos afirmou conhecer. 54% foram capazes de

identificar a Mononucleose Infecciosa como sendo uma doença relacionada, mas apenas 48%

conheciam as manifestações cínicas características do agente. Uma grande parcela sabia sobre a

Vacina contra o HPV (79%). Apenas 15% sabiam da relação do Câncer de mama com os vírus

apresentados. 62% conheciam os sexos afetados pelo CA de mama. Quanto ao diagnóstico

(97%), Prevenção pelo Sistema único de Saúde (SUS) (97%) e tratamento (95%), os resultados

se mostraram satisfatórios. A análise do desempenho geral mostrou que os alunos responderam

corretamente as questões em 70%, apontando a necessidade em reforçar o assunto ao longo da

graduação, dada a importância do mesmo, afim de um melhor índice. A análise de desempenho

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ individual entre os semestres, mostrou a necessidade de maior atenção o 3º período (59%), que

obteve menor índice em relação aos demais, já o 7º período se mostrou com melhores resultados

(87%), porém a preocupação é para com o 8º período, último da graduação, que o número decai

para 73%, onde o resultado deveria ser maior, já que o aluno está ao fim do curso.: É necessário

este tipo de pesquisa entre os graduandos de Biomedicina, para a possível identificação de

pontos que possibilitem a melhoria na formação dos profissionais de biomedicina, pelo fato de

eles estarem envolvidos com o diagnóstico de doenças como o câncer. Os estudos mostram que

eles são capazes de acordo com o semestre identificar os vírus HPV e EBV, mas a correlação

com câncer de mama se tornando uma questão difícil, pois o EBV é pouco conhecido até

mesmo pelos estudantes de biomedicina (44%). Contudo o HPV está na mídia, vinculado ao

câncer de colo de útero sendo relatada a importância da vacinação contra este câncer, outro

ponto com elevado percentual de conhecimento (79%). A relação dos vírus pesquisados com o

câncer de mama demonstra a fragilidade do conhecimento adquirido pelos graduandos de

biomedicina (15%), o nível decai de acordo com o semestre (7º- 87% e 8º- 73%), quanto as

manifestações clinicas há divergências quanto aos vírus, o HPV está acima da média (72%), e o

EBV está abaixo da média (48%). Outro ponto importante é o número de conhecedores, de que

o câncer de mama afeta tanto homens como mulheres sendo abaixo do esperado (62%). O

câncer de mama causado pelos vírus HPV e EBV ainda é pouco diagnosticado, por ser de difícil

detecção neste tipo de tecido se faz necessário o aprimoramento dos estudantes de graduação em

biomedicina6. CONCLUSÃO: Os estudantes de biomedicina demonstraram um conhecimento

abaixo da média sobre a relação do câncer de mama causado por vírus, considerando que é na

graduação que se adquire o conhecimento para aplicarmos no diagnóstico clínico, devem-se

promover reformas a fim de qualificar estes futuros profissionais biomédicos.


INCA (Instituto Nacional de Câncer), 2014. Estimativa 2014: incidência de câncer no Brasil. Disponível em: http://www.inca.gov.br/estimativa/2014/index.asp. (Acessado em: 28 de outubro de 2015.) INCA: Controle do Câncer de mama - Fatores de risco. Disponível em: http://www2.inca.gov.br/wps/wcm/connect/acoes_programas/site/home/nobrasil/progra ma_controle_cancer_mama/fatores_risco (Acessado em: 28 de outubro de 2015.) ROCHA. Detecção molecular do Papilomavirus Humano (HPV) em amostras teciduais de tumores da mama. 2010. Dissertação (mestrado em doenças tropicais) – Universidade Federal do Pará. Belém, 2010. VÍRUS: uma possível associação em câncer de mama. Disponível em: http://www.uel.br/ccb/patologia/portal/pages/arquivos/Biosaude%20v%2011%202009/ BS_v11_n2_DF_20.pdf (Acessado em: 28 de outubro de 2015.)

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ HPV e o desenvolvimento de neoplasias: uma revisão integrativa de literatura http://www.periodicoseletronicos.ufma.br/index.php/rcisaude/article/view/1918/67 . (Acessado em: 28 de outubro de 2015) OLIVEIRA. Frequência do Epstein-baar Vírus (EBV) em pacientes com câncer de mama do serviço de mastologia de um hospital do estado do Ceará. Dissertação (mestrado em microbiologia) – Universidade Federal Do Ceará. Fortaleza,2015.


CARACTERIZAÇÃO DA MICROBIOTA FÚNGICA DA LESMA DO MAR Aplysia

dactylomela Rang 1828





Eugênio Pacelli Nunes Brasil de Matos



INTRODUÇÃO: A lesma do mar Aplysia dactylomela é um invertebrado marinho pertencente

ao filo mollusca, classe Gastropoda, e subclasse Opistobranchia (CAREFOOT, 1987). Estes

possuem um verdadeiro arsenal de diferentes compostos com atividades biológicas os quais

servem para a sua defesa (PRINCE; JOHNSON, 2013). Comumente, lançam uma tinta de cor

púrpura, no qual é uma fonte de compostos biologicamente importantes para a investigação

biomédica (CHERIF et al., 2015), e ainda é comum a produção da secreção opalina, no qual é

um acréscimo na defesa desses moluscos (DERBY, 2007). Sabendo da importância da busca

por novos compostos bioativos provenientes de produtos naturais, surge um grande interesse

voltado para os microrganismos marinhos. Os fungos, portanto, têm se mostrado uma fonte

promissora na descoberta destes compostos. Assim, a diversidade microbiana associada a

organismos marinhos passou a ser investigada (KENNEDY, 2010). Já foram descritos na

literatura várias espécies de fungos oriundos de ambiente marinho (MENEZES, 2010), no

entanto, para várias espécies de moluscos, os estudos sobre microbiota fúngica ainda são muito

restritos, como para a lesma do mar A. dactylomela. OBJETIVO: Com base neste contexto, o

objetivo do presente trabalho é caracterizar a microbiota fúngica da lesma do mar A.

dactylomela por fungos filamentosos e leveduras. MATERIAL E MÉTODOS: O estudo foi

realizado durante marés de sizígias de 0,0 – 0,2 na praia de Flexeiras, situada no município de

Trairi – CE, Brasil (S 03º 13,02’ 760”; W 039º 15,55’ 302”). De forma aleatória foram

selecionados 10 exemplares de A. dactylomela por coleta para o recolhimento de amostras

microbiológicas da cavidade oral e do ânus através do uso de swabs estéreis. Foram realizadas

quatro coletas nos meses de março, maio, junho e julho de 2015. As amostras foram levadas e

processadas no Laboratório de Biologia Ambiental e Microbiologia (LABIAM), do Instituto

Federal de Educação, Ciência e Tecnologia do Ceará – Campus Acaraú. Para cada amostra do

animal foi utilizado o meio de cultura ágar Sabouraud acrescido de cloranfenicol (0,5 g/L) e

água do mar. Os swabs das amostras obtidas do molusco foram semeados diretamente nas

placas, em seguida foram incubadas em temperatura ambiente, durante um período de até 10

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ dias. Inicialmente, as colônias sugestivas de leveduras foram observadas ao microscópio óptico

(400X), após coloração de Gram. Posteriormente, as leveduras foram identificadas por meio da

realização de testes macro e micromorfológicos e bioquímicos específicos (BRILHANTE et.

al., 2010). Para a identificação de Fungos filamentosos foi realizada a análise macromorfológica

baseada em aspectos de textura, cor, mudança na cor do meio de cultura, esporulação e

frutificação. A análise micromorfológica foi realizada de acordo com a técnica de microcultivo

e sua interpretação foi baseada nas chaves de identificação de De Hoog et al. (2000). Para as

espécies de Candida foi utilizado o meio cromogênico CHROMOAGAR Candida® (Himédia),

para seleção de espécies e isolamento de colônias puras. As análises estatísticas foram

conduzidas utilizando o softwere Graphpad Prism® 6.0. RESULTADOS E DISCUSSÕES: No

geral foram isolados 10 gêneros de fungos filamentosos, totalizando em 67 cepas. O gênero que

ocorreu com maior frequência foi Aspergillus (n = 30; 45%), seguido pelo Penicillium (n = 12;

18%), Cladosporium (n = 7; 11%), Chrysosporium (n = 6; 9%), Curvularia (n = 4; 6%),

Acremonium (n = 2, 3%), Fusarium (n = 2; 3%), Rhyzopus (n = 2; 3%), Alternaria (n = 1; 2%) e

Mucor (n = 1; 2%). Em relação as leveduras, foi isolado apenas um gênero, sendo ele Candida,

representado por três espécies, totalizando em 10 cepas. A espécie que ocorreu com maior

frequência foi a Candida guilliermondii (n = 4; 40%), seguida da Candida parapsilosis sensu

lato (n = 3; 30%) e Candida famata (n = 3; 30%). No estudo de Menezes (2010), realizado na

Costa Norte de São Paulo sobre a diversidade microbiana associada a algas, ascídias e esponjas,

foram obtidas 256 cepas de fungos filamentosos a partir das amostras desses invertebrados.

Loureiro et al. (2005) realizaram um estudo, no qual isolaram leveduras do solo e da água do

mar das praias de Bairro Novo e Casa Caiada, Olinda, Pernambuco, Brasil. Neste estudo, foram

obtidas 292 cepas de leveduras, em que o gênero Candida revelou maior número de espécies.

Ademais, os microorganismos associados com invertebrados marinhos são provados como

candidatos valiosos para o programa de descoberta de novas drogas (VASANTHABHARATHI;

JAYALAKSHMI, 2013). CONCLUSÃO: A partir destes resultados, nota-se que a quantidade

de fungos filamentosos é maior em relação as leveduras. E, que os fungos isolados da

microbiota da lesma do mar possuem potencial patogênico, principalmente as espécies do

gênero Candida.


BRILHANTE, R.S.; CASTELO-BRANCO, D.S.C.M.; SOARES, G.D.; ASTETE-MEDRANO, D.J.; MONTEIRO, A.J.; CORDEIRO, R.A.; SIDRIM, J.J.; ROCHA, M.F. Characterization of the gastrointestinal yeast microbiota of cockatiels (Nymphicus hollandicus): a potential hazard to human health. Journal of Medical Microbiology, v.59, p.718-723, 2010. CAREFOOT, T. H. Aplysia: Its biology and ecology. Oceanography and Marine Biology Annual Review, v. 25, p. 167-284. 1987.

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ CHERIF, E.; KARIMA, L.; CHARAF, M.; YAHIA, M. N. D. Antioxidant activity of Aplysia depilans ink colleted from Bizerte Channel (NE Tunisia). Algerian Journal of Natural Products, v. 3, n.1, p.138-145, 2015. DERBY, C. D. Escape by inking and secreting: Marine Molluscs Avoid Predators Through a Rich Array of Chemicals and Mechanisms. Biological Bulletin, v. 213, p. 274 – 289, 2007. DE HOOG, G. S.; GUARRO, J.; GENÉ, J.; FIGUEIRAS, M. J. Atlas of Clinical Fungi. The Nederlands: Centraalbureau voor Schimmslcultures, 2ª ed. Baarn, p. 130 – 143, 156 – 160, 164 – 174, 2000. KENNEDY, J.; FLEMER, B.; JACKSON, S. A.; LEJON, D. P. H.; MORRISSEY. J. P.; O’GARA, F.; DOBSON, A. D. W. Marine Metagenomics: New Tools for the Study and Exploitation of Marine Microbial Metabolism. Mar Drugs, v.8, n.3, p.608-628. 2010. MENEZES, C. B. A.; BONUGLI-SANTOS, R. C.; MIQUELETTO, P. B.; PASSARINI, M. R. Z.; , SILVA, C. H. D.; JUSTO, M. R.; LEAL, R. R.; FANTINATTI-GARBOGGINI, F.; OLIVEIRA, V. M.; BERLINCK, R. G. S.; SETTE, L. D. Microbial diversity associated with algae, ascidians and sponges from the North Coast of São Paulo State, Brazil. Microbiological Research, p. 466 – 482, 2010. PRINCE, J. S.; JOHNSON, P. M. Role of the Digestive Gland in Ink Production in Four Species of Sea Hares: An Ultrastructural Comparison. Journal of Marine Biology. 2013. VASANTHABHARATHI, V.; JAYALAKSHMI, S. Review on bioactive potential of marine microbes. African Journal of Microbiology Research, v. 7, n. 39, p. 4683-4688, 2013.


CITOTOXICIDADE E SINERGISMO DO EXTRATO ETANÓLICO DA CASCA DE

Myroxylon peruiferum L.f

Rafael Pereira

Halisson Araújo de Sousa

Francisca Lidiane Linhares de Aguiar

Patrícia Silva Costa

Carolina Sidrim de Paula Cavalcante

Selene Maia de Morais


INTRODUÇÃO: A utilização de plantas medicinais é um método antigo, predominante em

países subdesenvolvidos, como uma alternativa terapêutica aos problemas de saúde (ZAGO et

al., 2009). Muitas plantas, que já foram testadas cientificamente, são de grande importância à

contribuição da alopatia e fitoterapia, na qual podem prevenir, aliviar ou até mesmo curar

processos patológicos (VIEIRA, 2007). OBJETIVO: Diante do exposto, o objetivo deste

trabalho foi avaliar a citotoxicidade e atividade modulatória do extrato etanólico da casca de

Myroxylon peruiferum L. f. MATÉRIAIS E MÉTODOS: Casca de Myroxylon peruiferum L.f.

foi coletada no maciço de Uruburetama, secas à temperatura ambiente e trituradas utilizando um

moinho. Posteriormente, o material foi armazenado em um recipiente de 20 L com etanol por 4

dias. O extrato foi evaporado a vácuo usando o rotoevaporador. A atividade hemolítica do

extrato bruto foi determinada em células humanas centrifugadas por 10 min. Após a remoção do

plasma, o sedimento contendo os glóbulos vermelhos foi lavado com 50 µL de PBS gelado e

levado a centrifuga por 5 minutos, esse procedimento foi repetido por cinco vezes.

Posteriormente, foi colocado cerca de 100 µL de PBS em cada tubo eppendorf adicionando 40

µL do extrato diluído em DMSO e feitas diluições seriadas num intervalo de concentração de

0,03-2,5mg/mL. As suspensões resultantes foram incubadas em um agitador refrigerado por 60

min a 37 0C. Após o tempo de incubação, as amostras foram centrifugadas durante 2 min e os

sobrenadantes foram transferidos para placas de 96 poços para a realização da leitura por

absorbância de 540 nm. Foi utilizado o leitor multiplacas Bio tek Synergy HT. Serviram como

controle positivo e negativo o Triton X-100 a 1% e 4% (v/v) em PBS com hemácias não tratado,

respectivamente. O teste foi realizado em triplicata e a percentagem de hemólise foi calculada

utilizando a seguinte expressão: [(Abs540nm-tratados - Abs540nm não tratado)/(Abs540nm 1%

de Triton X-100 - Abs540nm não tratado)x100]. O ensaio de toxicidade contra Artemia salina

Leach foi realizado segundo o método proposto por Meyer et al. (1982). Os ovos de A. salina

foram incubados em uma salina artificial com 23 g/L de sal marinho e 0,7 g/L de bicarbonato de

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ sódio em água destilada, à temperatura ambiente entre 22-29 ºC, por um período de 48 horas em

uma aquário adaptado com um compartimento escuro e outro claro. Utilizando-se uma fonte de

luz em que os náuplios foram atraídos para a luz, recolhidas com pipeta Pasteur e transferidas

para um Becker com água salina. Foram preparadas diluições seriadas a partir de 20 mg da

amostra com clorofórmio (CHCl3) para a obtenção das concentrações finais de 1000, 100, 10 e

1 ppm. Foi utilizado um controle negativo contendo apenas 100 µL de DMSO e 4,9 mL de

solução salina e um controle positivo com dicromato de potássio (K2Cr2O7) e solução salina. Em

seguida foram adicionadas em tubos de ensaio 10 larvas contendo 5 mL de cada uma das

soluções testadas e do controle. Os ensaios foram realizados em triplicata e para a contagem do

número de náuplios foram considerados mortos aqueles que permanecerem imóveis por mais de

10 segundos após agitação suave dos tubos (LHULLIER et al., 2006). O efeito do composto

combinado com antifúngico padrão foi determinado pela técnica do checkerboard. A turbidez

das suspensões fúngicas foram preparadas e ajustadas para 0,5 na escala McFarland

(105UFC/mL). Nas soluções foram utilizados os produtos testados nas concentrações dos seus

respectivos valores de CIM. Inicialmente 50 µL do meio RPMI 1640 foram adicionados em

todos os 96 poços da placa de microdiluição. Adicionaram-se então, na primeira coluna 50 µL

do extrato bruto no qual foram realizadas diluições em série na placa até a 8ª coluna. Em linhas

verticais foram colocados 50 µL do antifúngico padrão, sendo o cetoconazol, em diferentes

concentrações variando entre 16 µg/mL até 0,5 µg/mL. Finalmente, 100 µL do inóculo foram

colocados em todos os poços. Foi utilizado como controle negativo o meio RPMI 1640 com o

inóculo. Como controle positivo foi utilizado as CIM do antifúngico padrão e do extrato. As

placas de dermatófitos foram incubadas a 36 ºC durante 6 dias. Os ensaios foram realizados em

duplicata. O sinergismo foi determinado como o índice de FICI< ou =0,5, efeito aditivo quando

o índice é de FICI= 0,5 a 1,0, indiferente com FICI> 1,0 e < ou =4,0 e antagonismo com FICI>

4,0. (WHITE et al., 1996) RESULTADOS E DISCUSSÃO: O teste para determinar a

atividade hemolítica in vitro do M. peruiferum L.f. mostrou que nas concentrações de 0,039;

0,078; 0,156; 0,312; 0,625; 1,25 e 2,5 mg/mL, a percentual de hemólise variou entre 0,19% até

40,88% . Com base nos resultados observados, podemos constatar os valores da hemólise e

estimar a IC50 de 11,85 mg/mL do extrato. No bioensaio de toxicidade do extrato de M.

peruiferum L.f com larvas de A. salina, a dose letal capaz de matar 50% das larvas (CL50) foi

de 403,16 µg/mL. Os ensaios com náuplios de A. salina são utilizados devidos o seu rápido

resultado na qual correlaciona com potenciais atividades biológicas, sendo assim um indicativo

de atividade biológica (MCLAUGHLIN et al., 1998). O valor de CL50 do M. peruiferum L.f

menor ou igual a 1000 µg/mL indica que ele possui atividade biológica considerada

significativa (MEYER et al., 1982). O ensaio de combinação do extrato de M. peruiferum L.f

com o antifúngico padrão cetoconazol mostrou que houve uma redução significativa nos valores

de CIM em ambas as cepas, além do expressivo aumento do CIM do cetoconazol da cepa de T.

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ rubrum (05.1.034) de 1,0 para 4, enquanto para a cepa de T. rubrum (6753), o antifúngico

padrão variou entre 2,0 a 8,0. A partir destes valores, foi possível calcular o índice de

concentração inibitória fracionária (FICI) que mostrou um efeito antagônico com FICI de 4,06 e

4,03 no ensaio da atividade para as cepas de T. rubrum (05.1.034) e T. rubrum (6753),

respectivamente. CONCLUSÃO: Contudo, podemos constatar que em relação à atividade

hemolítica o extrato é citotóxico, já para o teste de toxicidade contra A. salina mostrou que o

extrato possui toxicidade ativa, sugerindo a utilização desse extrato para várias atividades

biológicas, como antileishmania e antitumoral. Em relação ao sinergismo, o extrato apresentou

atividade significativa. No entanto, são necessários outros estudos para comprovar a viabilidade

desse composto frente às atividades bem como comprovar a segurança toxicológica da mesma.


McLAUGHLIN, J.L. Crown gall tumors on potato discs and brine shrimp lethality: two simple bioassays for higher plant screening and ractionation. In: Hostettmann, K., Ed. Methods in Plant Biochemistry. London: Academic Press, vol. 6, p.1-36, 1991. MEYER, B.N; FERRIGINI, N.R; PUTNAN, J.E; JACOBSEN, L.B; NICHOLS, D.E; MCLAUGHLIN, J.L. Brine shrimp: a convenient general bioassay for active plants constituents. Planta Med 45:31, 1982. VIEIRA, A. Efeito da simulação da hipergravidade na germinação e crescimento de sementes de Eruca sativa Mill. (rúcula). 2007. Trabalho de conclusão de curso. Faculdade de Farmácia, Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, 2007. WHITE, R.L.; BURGESS, D.S.; MANDURU, M.; BOSSO, J.A. Comparasion of three different in vitro methods of detecting synergy: Time-kill, checkerboard and E-test. Antimicrobial agents and chemotherapy. v. 40, p.1914-1918, 1996. ZAGO, J.A.A.; USHIMARU, P.I.; BARBOSA, L.N.; FERNANDES Jr., A. Sinergismo entre óleos essenciais e drogas antimicrobianas sobre linhagens de Staphylococcus aureus e Escherichia coli isoladas de casos clínicos humanos. Rev. bras. farmacogn. v.19, n.4, p. 828-833, 2009.


DETERMINAÇÃO DA CONCENTRAÇÃO INIBITÓRIA MÍNIMA DE ISOLADOS

CLÍNICOS DE PACIENTES DO HOSPITAL SANTA CASA DE MISERICÓRDIA DE

SOBRAL, FRENTE AO DERIVADO AZÓLICO FLUCONAZOL

Samuel Souza Oliveira

Camila Gomes Virgínio Coelho

Izabelly Linhares Porto

Erika Helena Salles de Brito

Andréa Maria Neves



INTRODUÇÃO: Os fungos, por apresentarem características diferentes dos vegetais, foram

classificados em um reino próprio – o reino fungi. Esses seres vivos não sintetizam o próprio

alimento, não possuem o amido como substancia de reserva e não possuem a clorofila como

pigmento. Dentre as espécies de fungos destacam-se as leveduras, essas são encontradas

normalmente na microbiota do ser humano, especificamente nas mucosas bucais e genitais. As

leveduras do gênero Candida são patógenos oportunistas quem podem ser encontrados nas

superfícies das mucosas (MORAGUES, M.D. et al., 2003). O delicado equilíbrio entre essas

espécies e os microrganismos da microbiota humana pode facilmente ser quebrado caso ocorra

alterações no pH ou em decorrência de um desequilíbrio entre o binômio parasita-hospedeiro,

isso pode levar ao aumento no número de colônias de leveduras levando ao estado clinico

conhecido como candidíase (GARCIA et al., 2007). Essas infecções fúngicas variam desde

lesões superficiais em pessoas sadias até infecções disseminadas em pacientes neutropênicos

(COTRAN, R.S et al., 2000). Segundo ZARDO, MEZZARI (2004, p. 137) a espécie albicans é

a mais frequente, responsável por 50 a 70% de todas as infecções invasivas pelo gênero

Candida. Para o tratamento dessas infecções tem sido comumente utilizado derivados azólicos

como fluconazol. Porém, estudos realizados com isolados clínicos tem mostrado o aparecimento

de cepas de C. albicans e C. tropicales resistentes a esse antifúngico bem como a outros

derivados como Cetoconazol e Itraconazol (BRITO et al., 2007; PFALLER et al., 2004).

Pesquisas com base nos mecanismos moleculares mostraram que essa resistência aos azólicos se

dá por conta de alterações na enzima alvo e aumento do efluxo da droga (PEREA et al., 2001).

Segundo CROCCO (2004), embora a susceptibilidade das leveduras do gênero Candida aos

antifúngicos disponíveis seja variável e previsível, nem sempre uma determinada amostra

isolada segue o padrão geral. OBJETIVO: Com base no exposto, este trabalho tem por objetivo

testar a susceptibilidade das espécies do gênero Candida isoladas da Santa Casa de

Misericórdia, localizada na cidade de Sobral frente ao antifúngico Fluconazol, a fim de verificar

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ se há um aumento na resistência a drogas antifúngicas padrão. MATERIAS E METODOS:

Para o ensaio microbiológico foi utilizada o método da microdiluição em caldo preconizado

pelo CLSI (2008). Foram testadas 5 cepas de C. albicans (LABMIC 0101, LABMIC 0102,

LABMIC 0103, LABMIC 0104, LABMIC 0105), 2 de C. Tropicalis (LABMIC 0201 E

LABMIC 0202) e 4 cepas de C. Parapsiloses (LABMIC 0301, LABMIC 0302, LABMIC 0303,

LABMIC 0304) que foram cultivadas em ágar sabourand a 35ºC por 48. Para preparo do

inóculo um fragmento de candida foi transferido para tubos de ensaio contendo 9 mL de

solução salina. Posteriormente as suspensões foram diluídas a 1:2000, com meio RPMI 1640,

para obtenção das concentrações finais do inoculo de aproximadamente 5 x 104 UFC/mL. Para

determinação do CIM o ensaio foi realizado em placas de 96 poços, com forma de “U” (Placa

Elisa). Inicialmente foram distribuídas 100 µL de meio RPMI 1640 em todos os poços e

posteriormente pipetados 100 µL da droga a uma concentração de 64 mg/ml, após isso foi

realizada a técnica de diluição seriada, à partir da retirada de uma alíquota de 100 µL da

cavidade mais concentrada para a cavidade sucessora. Nos orifícios de cada coluna foram

dispensadas alíquotas de 100 µL do inóculo correspondente a cada cepa ensaiada. Como

controle negativo, verificou-se a viabilidade das cepas através da inoculação da suspensão

fúngica em meio RPMI sem a adição de antifúngicos. Foram realizadas leituras para

determinação do CIM com 24h e 48h após o ensaio, onde foi considerado a formação ou não de

aglomerados de células no fundo dos poços da placa. RESULTADOS E DISCUSSÃO: Nos

resultados obtidos as cepas de C. albicans e C. parapsiloses mostraram um CIM variando entre

0,0625 µg/ml e 4 µg/ml frente ao antifúngico Fluconazol, enquanto as cepas de C. tropicalis não

apresentaram inibição, mostrando uma resistência a concentrações de 16 mg/ml da droga. As

cepas de controle de qualidade ATCCs apresentaram um CIM de 0,5 µl/ml para C. parapsiloses

e 16 µl/ml para C. krusei, estando de acordo com o estabelecido pelo CLSI (2008). Segundo

CLSI (2008) as concentrações inibitórias do antifúngico Fluconazol para C. albicans devem

variar entre 0,25 µl/ml e 1,0 µg/ml, para C. parapsiloses deve variar entre 2 µg/ml e 8 µg/ml.

Contudo, os resultados das amostras examinada de C. albicans e C. tropicalis apresentaram uma

resistência ao antifúngico, com base nas concentrações estabelecidas pelo CLSI (2008).

CONCLUSÃO: Os resultados obtidos mostraram um aumento na resistência da espécie C.

albicans frente ao derivado azólico Fluconazol, que se enquadra nos antifúngicos mais usados

atualmente, demonstrando assim uma necessidade de buscar novas drogas para o tratamento das

infecções ocasionadas por esse fungo. Esta resistência pode estra sendo ocasionada por seleção

natural, o vasto uso desse antifúngico está selecionado as espécimes mais resistentes dentre as

mais susceptíveis. Isto tem influenciando o aumento das pesquisas por novos tipos de

tratamentos para infecções causadas por leveduras.



BRITO, E.H.S. et al. Phenotypic characterization and in vitro antifungal sensitivity of Candida spp. and Malassezia pachydermatis strains from dogs. Veterinary Journal, v.174, 2007. CLSI M27A3. Reference Method for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing of Yeasts: Approved Standard. 3rd ed, 2008. COTRAN, R.S.; KUMAR, V.; COLLINS, T. Robbins. Patologia estrutural e funcional. 6 ed. Rio de Janeiro: Guanabara-Koogan, 2000. CROCCO, E.I. et al. Identificação de especies de candida s susceptibilidade antifungica in vitro de 100 pacientes com candidiase superficiais. Rio de Janeiro. Anais Brasileiro de Dermatologia. 2004. GARCIA, M.E. et al. Fungal flora in the trachea of birds from a wildlife rehabilitation centre in Spain. Veterinarni Medicina, v.52, 2007. MORAGUES, M.D. et al. A monoclonal antibody directed against a Candida albicans cell wall mannoprotein exerts three anti-C albicans activities. Infec Immun, v.71, p. 5273-79, 2003. PEREA S, LÓPEZ-RIBOT JL, KIRKPATRICK WR, McATEE RK, SANTILLÁN RA, MARTÍNEZ M, et al. Prevalence of molecular mechanisms of resistance to azole antifungal in Candida albicans strains displaying high-level fluconazole resistance isolated from human immunodeficiency virus-infected patients. Antimicrob. Agents Chemother. 45(10): 2676–84, 2001. PFALLER MA, MESSER SA, BOYKEN L, RICE C, TENDOLKAR S, HOLLIS RJ, et al. Cross-resistance between fluconazole and ravuconazole and the use of fluconazole as a surrogate marker to predict susceptibility and resistance to ravuconazole among clinical isolates of Candida spp. J. Clin. Microbiol. 42(7): 3137–41, 2004. ZARDO, Vanessa; MEZARRI, Adelina. Os antifúngicos nas infecções por candida sp. News lab. Rio Grande do Sul. ed-63. 2004.

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ DIAGNÓSTICO DA QUALIDADE HIGIÊNICO-SANITÁRIA DE LEITE IN NATURA

COMERCIALIZADO NA CIDADE DE SENADOR SÁ-CEARÁ

Anny Sampaio Silva

Andréa Maria Neves



Layanne Mesquita Albuquerque Lopes



INTRODUÇÃO: O leite é usado como base na alimentação por ser um alimento completo. É

uma das principais fontes de cálcio disponível, composto de proteínas que auxiliam na

construção de tecidos, vitaminas que fornecem energia, sais minerais que favorecem o processo

de cicatrização e melhora o desempenho do sistema imunológico, além de apresentar um

elevado valor nutricional. O leite é produzido por células secretoras e sintetizado nos alvéolos

mamários. O mesmo é estéril, porém ao ser recolhido, manuseado, armazenado e distribuído de

maneira incorreta, pode ser contaminado por diversos microrganismos. O controle

microbiológico em amostras de leite é realizado principalmente através da presença de

microrganismos indicadores que, quando presentes, podem fornecer informações sobre as

condições sanitárias da produção e do armazenamento, assim como a possível presença de

patógenos. (TAMANINI et al., 2007). OBJETIVO: Esse trabalho objetivou avaliar a

qualidade higiênico-sanitária de três amostras de leite in natura comercializado na cidade de

Senador Sá – CE. MATERIAL E MÉTODOS: As 03 amostras de leite in natura foram

recolhidas de três diferentes estabelecimentos da cidade de Senador Sá. Logo após a coleta, elas

foram acondicionadas individualmente em recipientes estéreis, transportadas em caixas

isotérmicas com placas de gelo e encaminhadas para o Laboratório de Microbiologia da

Universidade Estadual Vale do Acaraú - UVA. As respectivas amostras foram submetidas aos

seguintes testes: coliformes totais, coliformes termotolerantes, contagem de aeróbios mesófilos,

bolores e leveduras e testes bioquímicos - IMVIC. Para o crescimento bacteriano

acondicionaram-se os seguintes meios: Lactosado, Verde Brilhante (BVB), Escherichia coli

(EC), Plate Count Agar (PCA) e Agar Batata Dextrose (ABP). Para a Determinação de Número

Mais Provável (NMP), foi realizada a diluição de forma asséptica de 1,0 ml da amostra para 9,0

ml de salina peptonada (10-¹). Para a preparação da segunda diluição (10-²), transferiu-se 1,0 ml

da diluição 10-¹ para 9,0 ml de salina. Em seguida, para a preparação da terceira diluição (10-³),

transferiu-se 1,0 ml da diluição 10-² para 9,0 ml de salina. Após esse processo, foram inoculados

1,0 ml das diluições 10-¹, 10-² e 10-³ em três séries de cinco tubos, contendo em cada um deles

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ um tubo de Duhran invertido em 10 ml de caldo Lactosado, logo após os tubos serem incubados

em estufa bacteriológica a 35ºC por 24 horas. Posteriormente ao período de incubação, a leitura

foi realizada observando a produção de gás nos tubos de Duhran ou turvação no meio. Para a

prova de coliformes totais (CT) e coliformes termotolerantes (CTT), inoculou-se uma alíquota

dos tubos positivos da prova presuntiva nos meios BVB e EC, contendo Duhran invertidos para

a verificação de presença de bolhas. O meio BVB foi incubado em estufa a 35ºC e o meio EC

em banho-maria a 45ºC, ambos analisados após 48 horas. A fim da contagem de colônias

bacterianas, foi utilizada a mesma diluição do teste anterior, no qual foi inoculado 1,0 ml de

cada diluição em 15 ml do PCA, previamente resfriado em placas de Petri estéreis, sendo as

mesmas incubadas de modo invertido a 35ºC por 24 horas. Depois do período de incubação, as

colônias formadas foram contadas. Para a contagem de bolores e leveduras, utilizou-se a

mesma diluição do teste presuntivo, porém foi inoculado 0,1 ml das diluições nas placas

contendo o meio solidificado ABP, utilizando-se um swab estéril para semear cuidadosamente o

inóculo por toda a superfície do meio. Além disso, as placas foram incubadas em estufa a 35ºc

por cinco a sete dias. RESULTADOS E DISCURSSÃO: Os coliformes são indicadores de

contaminação do meio ambiente e resíduos de fezes. Para a presença de coliformes, a Instrução

Normativa nº51 não estabelece limite de contagem para leite in natura, sendo utilizados pela

literatura valores de coliformes acima de 1,0 x 10³ UFC/ml como sendo indicativo de

deficiências de higiene na produção de leite (Brito et al., 2002). As três amostras avaliadas

apresentaram valores acima do permitido para coliformes. Ponto A: 3.5 x 10⁴ UFC/ml; Ponto B

e C: 1.6 x 10⁵ UFC/ml. As que s foram submetidas ao teste bioquímico para identificação de

Enterobactérias. Após o teste pode ser identificado as seguintes bactérias: Serratia liquefaciens,

Hafnia alvei, Enterobacter agglomerans e Enterobacter sakazakii. Segundo a Instrução

Normativa Nº 62 do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento, o limite permitido

para Contagem Padrão em Placas (CPP) a partir de 01/07/2015 é de 3,0 x 10⁵. As amostras

avaliadas apresentam valores dentro do padrão permitido. As medias para aeróbios mesofilos foi

de 9,2 x 10⁴ UFC/ml, para as amostras A, B e C respectivamente. As médias de leveduras, em

UFC/ml, foi de 1,4 x 10⁵ na amostra A, 3,4 x 10⁵ na amostra B e 2,6 x 10⁶ para a amostra C,

enquanto que as médias para bolores foi de 5 x 10 para a amostra A, 5 x 10 para a amostra B, já

a amostra C não apresentou crescimento de bolores. CONCLUSÃO: Após a realização da

pesquisa, pode- se constatar que as amostras avaliadas encontram-se improprias para consumo

em sua forma in natura. Portanto é de suma importância o estabelecimento de medidas

preventivas para atender a necessidade da melhoria da qualidade microbiológica deste produto,

reduzindo assim a contaminação do leite.


REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

TAMANINI, R.; SILVA, L.C.C.; MONTEIRO, A. A.; MAGNANI, D. F.; BARROS, M. A. F. B.; BELOTI, V.. Avaliação da qualidade microbiológica e dos parâmetros enzimáticos da pasteurização do leite tipo “C” produzido na região norte do Paraná. Ciências Agrarias v. 28, n. 3, p. 449454, 2007. BRITO, M.A.V.P.; BRITO, J.R.F.; PORTUGAL, J.A.B. Identificação de contaminantes bacterianos no leite cru de tanques de refrigeração. Revista do Instituto Laticínio Cândido Tostes, v.57, p.47-52, 2002. BRASIL – Ministério da Agricultura Pecuária e Abastecimento. Instrução Normativa Nº 61. Dispõe sobre os regulamentos técnicos aplicados ao leite cru e pasteurizados. Diário D.O.U., 30/12/2011 - Seção 1, aprovado em 29 de dezembro de 2011. Brasília, 2011.


DIVERSIDADE DO GÊNERO FÚNGICO Aspergillus EM BIBLIOTECA DE UM

CAMPUS UNIVERSITÁRIO

Ana Lea de Oliveira Araujo

Karine Silva Pimentel

Jonas Felipe da Silva Araujo

Ane Teles Reis

Carolina Bonfim Andrade

Lydia Dayanne Maia Pantoja

Germana Costa Paixão

INTRODUÇÃO: A concentração de fungos anemófilos como biocontaminantes em um

ambiente está relacionada diretamente a diversos fatores, sobretudo a elementos antrópicos,

climáticos e vegetação. Existem dois tipos de microbiotas aéreas, ade ambientes fechados ou

abertos, também denominadas artificial ou natural, respectivamente. Sabe-se que a incidência de

determinadas espécies e gêneros fúngico de ambientes fechados pode estar associada à

ventilação, temperatura, umidade relativa do ar, uso ou não de carpetes, tipos de atividades

exercidas, número de transeuntes e totais de ocupantes em um espaço, dentre outros. Na

literatura encontram-se diversos estudos sobre o monitoramento aero micológico de bibliotecas,

bem como a investigação da qualidade do ar desses recintos vêm merecendo atenção devida

principalmente à grande quantidade de substratos favoráveis à ação de agentes biodegradadores,

como os fungos anemófilos sobre as obras físicas de bibliotecas (PANTOJA et al., 2012). A

reduzida circulação do ar em bibliotecas maximiza a concentração de biopoluentes e que

atrelado à decomposição dos acervos por meio da temperatura, umidade e iluminação

inadequada promovem a disseminação de bactérias e fungos (BRICKUS, 1999). A presença de

fungos anemófilos se torna preocupante para saúde pública e ocupacional, pois são apontados

como uma das principais causas de problemas respiratórios, interferindo no rendimento ou

ausência de trabalhadores, alunos, bibliotecários, por exemplo, em seus respectivos locais de

ocupação. A literatura especializada descreve que algumas espécies de fungos, frequentemente

encontradas no ar em bibliotecas, tais como Aspergillus nigere Aspergillus fumigatus, são

corriqueiramente associadas à alergias e micoses respiratórias(RÊGO; MAGALHÃES;

SILVEIRA, 2004; MUNOZ et al., 2015). Estudos liderados por PEI-CHI e colaboradores em

2000 mostraram que a exposição a fungos do ar parece estar associada ao desenvolvimento de

várias doenças respiratórias, em especial às asmas ditas “de clima”, às quais estão na

dependência ou em relação íntima com a microbiota micótica do ar. Ademais, fungos

anemófilos também podem estar ligados à gênese de aspergilose, pneumonite por

hipersensibilidade, rinite e algumas reações tóxicas (LACAZ et al., 2002). OBJETIVO:

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ Monitorar a presença dos representantes do gênero Aspergillusem uma biblioteca de um campus

universitário e gerar aos seus gestores, elementos para aprofundar seus conhecimentos na área

de preservação e conservação. MATERIAL E MÉTODOS: As coletas mensais ocorreram em

uma biblioteca de um campus universitário de referência situado no município de Fortaleza- CE,

durante os meses de abril a agosto/2015. Adotou-se o método da sedimentação passiva em

placas de contendo meio de cultura Ágar Batata Dextrose (Himedia®). Essas placas foram

dispostas 1,5 m acima do solo, por 8 horas. Posteriormente, as placas de Petri contendo as

amostras biológicas foram encaminhadas ao Laboratório de Microbiologia (LAMIC) do Curso

de Ciências Biológicas da Universidade Estadual do Ceará. Ao chegarem ao LAMIC/UECE, as

placas de Petri permaneceram incubadas a temperatura de 25 –27 °C durante sete dias,

realizando-se observações diárias. Após a contagem global das colônias, realizou-se uma

triagem, através das características macroscópicas, depois de purificadas, as colônias foram

identificadas mediante a análise conjunta dos aspectos macro-morfológicos e micro-

morfológicos segundo metodologia preconizada por Sidrim e Rocha (2004) e Hoog e

colaboradores (2000). RESULTADOS E DISCUSSÃO: A contagem total das colônias foi

de926UFC/m3, sendo o gênero Aspergillus o mais frequente no ambiente da biblioteca, presente

em todas as coletas, três espécies foram descritas: Aspergillusflavus, A.nigere A. terreus, os

exemplares não identificados foram tratados como Aspergillussp. Destaque dado a espécie

A.nigerque esteve presente em100% das amostras seguido da espécie A.flavus (50%),A.

terreus(25%)e Aspergillussp.(25%). A variedade de representantes do gênero encontrada na

biblioteca coaduna-se a estudos anteriores realizados no estado do Ceará, como Menezes e

colaboradores (2006) expuseram 50 placas de Petri na sala de periódicos da Biblioteca das

Ciências da Saúde da Universidade Federal do Ceará e isolaram 13 gêneros fúngico, com

destaque para o Aspergillus sp., bem como, assemelha-se a estudo realizado por Pantoja e

colaboradores (2012) que ao analisar especificamente a distribuição dos fungos no ar de uma

biblioteca universitária, encontrou-seAspergillusflavus,AspergillusnigereAspergillussp.Lacaze

colaboradores(2002) afirmam que o gênero Aspergillus é considerado um dos principais fungos

anemófilos presente em ambientes fechados e o ar é uma importante via de dispersão de seus

propágulos. Algumas espécies deste gênero provocam a aspergilose, a mesma apresenta-se

como importante causa de mortalidade entre imunodeprimidos. CONCLUSÃO: Este trabalho

alerta para a incidência desse gênero, visto que, muitas espécies desse grupo comportam-se

tanto como patógenos primários, mas principalmente como patógenos oportunistas, sinalizando

a necessidade da realização de estudos mais aprofundados, tornando-se rotineiro o

monitoramento da qualidade fúngica do ar e o controle ambiental de fungos viáveis como

marcador epidemiológico da contaminação microbiana, o que poderá contribuir na diminuição

de impactos ambientais na vida das pessoas, bem como gerar aos seus gestores, elementos para

aprofundar seus conhecimentos na área de preservação e conservação.


BRICKUS LSR, AQUINO NETO FR. A Qualidade do Ar de Interiores e a Química. [S.l.]: Química Nova 22, 1999. p. 1-10. HOOG, G.S.; GUARRO, J.; GENÉ, J. Atlas of Clinical Fungi. 2. ed. Barcelona: Universitat Rovira i Virgilli, 2000. p.1125. LACAZ, C. S.; PORTO, E.; MARTINS, J. E. C.; HEINS-VACCARI, E. M.; MELO, N. T. de. Fungos e Alergia. In: ______. Tratado de Micologia Médica Lacaz. São Paulo: Sarvier, 2002. p. 810-828. MUNOZ, P.; VALERIO, M.; VENA, A.; BOUZA, E.; POSTERARO, B.; LASS-FLORI, C.; SANGUINETTI, M. Advances in the management of fungal infections. Mycoses 58, 1-2. 2015. PANTOJA, L. D. M.; RIZZO, R. S.; CARVALHO, B. S.; FERREIRA, V. C.; GALAS K. S.; FONSECA, F. R. M.; PAIXÃO, G. C. Constituição da microbiota aérea de bibliotecas públicas no município de Fortaleza, estado do Ceará, Brasil. Encontros Bibli: revista eletrônica de biblioteconomia e ciência da informação. v. 17, n. 34, p. 31-41. 2012. PEI-CHIN, W.; HUEY-JEN, S.; CHIA-YIN, L. Characteristics of indoor and outdoor airbone fungi at suburban and urban homes in two seasons. The Science of the Total Environment, v. 253, p. 111-118. 2000. RÊGO, R. S. M.; MAGALHÃES, K.; MELO, F.; SILVEIRA, N. S. S. Ocorrência de Aspergillus sp. em pacientes com sinusite crônica. In: Congresso Brasileiro de Micologia, 4., 2004, Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto. Anais... Ouro Preto, [s.n.], 2004. p.135. SIDRIM J.J.C., ROCHA, M.F.G., Micologia Médicaà luz de autores contemporâneos. Rio de Janeiro: Guanaba Koogan p. 135-161. 2004.


EFEITO SINÉRGICO ENTRE O ÓLEO ESSENCIAL DE Baccharis trinervis (Lam.)

Pers. (ASTERACEAE) E O CETOCONAZOL FRENTE A CEPAS DE Trichophyton

rubrum

Antonio Carlos Nogueira Sobrinho

Elnatan Bezerra de Souza

Maria Rose Jane Ribeiro Albuquerque

Soraya Marques Ribeiro

Rafael Pereira


INTRODUÇÃO: Alguns fungos podem adquirir potencial patogênico, promovendo infecções

micóticas, quadros de hipersensibilidade e micetismo (LACAZ et al., 2002). Um agravante na

prevenção e diminuição de novos casos de micoses consiste na ausência quase total de vacinas

antifúngicas, limitadas ao campo animal, ainda de eficácia variável (GARCÍA; BLANCO,

2000). Em relação à descoberta de novas drogas antifúngicas, os produtos naturais são

amplamente utilizados, e os resultados apresentam grande utilidade contra infecções fúngicas.

Baccharis trinervis (Lam.) Pers. é uma planta perene rizomatosa, de porte ereto e arbustivo,

com pouca ramificação, medindo de 80 a 140 cm de altura (ALBUQUERQUE et al., 2004).

Conhecida popularmente no Brasil como “assapeixe-fino” e “assapeixe-branco”, apresenta

distribuição no continente americano do México até Argentina, tendo seu uso na medicina

popular como antisséptico, digestivo e para tratamento de picada de cobras (SHARP et al.,

2001). OBJETIVO: Este trabalho objetivou investigar o potencial sinérgico do óleo essencial

de B. trinervis e do derivado imidazólico cetoconazol contra cepas do dermatófito T. rubrum.

MATERIAL E MÉTODOS: As partes aéreas da espécie vegetal Baccharis trinervis foram

coletadas no período de floração na Serra da Meruoca, Sobral, Ceará-Brasil, no domínio

Caatinga. A exsicata da planta, correspondente à coleta, encontra-se depositada no Herbário

Prof. Francisco José de Abreu Matos (HUVA) da Universidade Estadual Vale do Acaraú,

autenticada pelo Dr. Elnatan Bezerra de Souza sob o registro 3651. As partes aéreas de B.

trinervis (271,36 g), foram acondicionadas em balão de 5 L, juntamente com 1,5 L de água e

submetidas ao processo de hidrodestilação em aparelho tipo-Clevenger por um período de 2 h.

As cepas fúngicas foram provenientes do estoque em ágar batata à -20 ºC, gentilmente cedidas

pelo Laboratório de Microbiologia da Universidade Estadual Vale do Acaraú (UVA). Foram

usadas duas cepas do dermatófitos Trichophyton rubrum (LABMIC 0101, LABMIC 0102)

mantidas em solução salina (NaCl a 0,9%), a 28 ˚C. O efeito do composto combinado com

antifúngico padrão foi determinado pela técnica do checkerboard, método usado para

determinar a interação das drogas através do cálculo do Índice de Concentração Inibitória

Fracional (FICI). O FICI é calculado pela adição da Concentração Inibitória Fracional (FIC)

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ para cada um dos compostos ensaiados, sendo definida como a adição dos valores de CIM de

cada fármaco na combinação e CIM do mesmo fármaco sozinho (WHITE et al., 1996). O

sinergismo foi definida como o índice de FICI < ou = 0,5, efeito aditivo quando o índice é de

FICI entre 0,5 e 1,0, indiferente com FICI > 1,0 e < ou = 4,0 e antagonismo com FICI > 4.0)

(WHITE et al., 1996; PYUN; SHIN, 2006). Todos os experimentos foram realizados em

triplicata e os resultados normalizados pelo cálculo da média geométrica. RESULTADOS E

DISCUSSÃO: No ensaio de atividade modulatória foram utilizados as cepas T. rubrum

LABMIC 0101 e T. rubrum LABMIC 0102, no qual a combinação do imidazólico cetoconazol

com o óleo essencial de B. trinervis propiciou uma redução dos valores de CIM para ambas as

cepas de T. rubrum. A redução mais significativa ocorreu nos ensaios com a cepa LABMIC

0102, cujo índice de concentração inibitória fracionária (FICI) foi menor (0,5) quando

comparado com a cepa LABMIC 0101, cujo valor de FICI foi de 1,0. Portanto, para a cepa

LABMIC 0102 a atividade modulatória foi sinérgica e para a cepa LABMIC 0101 a atividade

foi aditiva. Para a espécie B. trinervis este é o primeiro relato de atividade antifúngica do seu

óleo essencial contra dermatófitos e de potencialização do efeito em combinação do produto

natural com uma droga padrão. O dermatófitos T. rubrum é um dos principais fungos

responsáveis pela casuística de infecções dermatofíticas (HIRUMA et al., 2012, GUPTA;

NAKRIEKO, 2015). Inúmeros produtos naturais, tais como extratos e óleos essenciais de

plantas têm sido utilizados para modificar a atividade antibiótica de fármacos por meio da

técnica do checkerboard. Na literatura é reportada atividade modulatória de drogas antifúngicas

com produtos naturais, como atividade relatada para Zuccagnia punctata Cav. e Larrea nitida

Cav. (BUTASSI et al., 2015), Thymus vulgaris L. e Cinnamomum cassia L. (PEKMEZOVIC et

al., 2015). CONCLUSÃO: O teste de sensibilidade antimicrobiano revelou uma promissora

atividade antifúngica in vitro frente cepas de T. rubrum. O ensaio de atividade modulatória com

a combinação do antifúngico padrão cetoconazol e o óleo essencial demonstrou uma

potencialização de atividade antifúngica do produto natural combinado com o cetoconazol, o

que revelou uma redução significativa nos valores de CIM para todas as cepas testadas. Novos

estudos devem ser desenvolvidos com o óleo essencial de B. trinervis, ensaiando contra outros

micro-organismos patógenos além da investigação de outras possíveis atividades biológicas,

atividade anti-inflamatória e mecanismo de ação.

REFERÊNCIAS

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ESTABELECIMENTO DA MENOR CONCENTRAÇÃO INIBITÓRIA DE

CIPROFLOXACINA SOBRE O CRESCIMENTO PLANCTÔNICO DE Staphylococcus

aureus

Maria Laína Silva

Yara Maria Vieira dos Santos

Humberlânia de Sousa Duarte

Rodrigo Maranguape Silva da Cunha

Victor Alves Carneiro

INTRODUÇÃO: Staphylococcus aureus é encontrada colonizando a flora natural,

principalmente da pele, podendo tornar-se patogênico em condições como a quebra da barreira

cutânea ou diminuição da imunidade (GELATTI et al, 2009). É responsável por uma grande

variedade de infecções, entre elas, infecções pós-cirúrgicas, osteomielites, pneumonias,

abscessos, endocardites e bacteremia (LOWY, 1998). É umas das causas mais comuns de

infecções nosocomiais, bem como de infecções comunitárias que podem apresentar altos índices

de morbidade e mortalidade (SALES et al, 2012). No combate a esse patógeno está a

ciprofloxacina (CIP) que faz parte de uma importante classe de antibióticos sintéticos,

conhecidos como fluoroquinolonas (APPELBAUM et al, 2000), que têm sido objeto de intensos

estudos. Esta classe de compostos, tem atualmente destacada importância no combate a

diferentes tipos de bactéria, sendo os únicos agentes antimicrobianos sintéticos a competirem

com os β-lactâmicos em uso clínico (APPELBAUM et al, 2000). Porém, o uso extensivo,

muitas vezes inapropriado dos antibióticos, aliado com as más condições de higiene, aos fluxos

contínuos de viagens, ao aumento de pacientes imunocomprometidos e a demora no diagnóstico

das infecções bacterianas favorece o aumento nos índices de desenvolvimento de resistência

(GUIMARÃES et al, 2010). OBJETIVO: Identificar a menor concentração de CIP capaz de

inibir o crescimento planctônico da bactéria Staphylococcus aureus ATCC 25923.

MATERIAL E MÉTODOS: Para o experimento realizado foram utilizados os métodos de

determinação da Concentração Inibitória Mínima e Bactericida (CIM) e (CBM) para avaliar a

eficácia da ciprofloxacina (CIP) sobre o crescimento planctônico de S.aureus ATCC 25923.

Logo, a partir de uma cultura estoque, 50µL do micro-organismo foram inoculados em 5 mL de

meio BHI (Brain Heart Infusion) e incubado por 24 h, a 37 °C, em condições de aerobiose.

Após 24 horas foi realizado um segundo repique, no qual uma alíquota de 50 µL da suspensão

bacteriana foi transferida para 5 mL de meio estéril. Após 18h de crescimento, deu-se início à

avaliação da atividade antimicrobiana da CIP. Por meio do teste de microdiluição em placas de

poliestireno de 96 poços de fundo “U”, foi realizada a diluição seriada da substância teste,

obtendo as concentrações finais (125 a 0.06µg/mL). Em seguida, os poços foram preenchidos

com uma alíquota de 100 µL da suspensão bacteriana em uma concentração previamente

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ ajustada de 1 x 106 UFC.mL-1, obtendo um volume final de 200 µL. As placas foram então

incubadas nos mesmo parâmetros descritos anteriormente e o crescimento bacteriano foi medido

pela densidade óptica a um comprimento de onda de 620 nm, através de um sistema

automatizado Elisa Reader, onde a análise dos dados ocorreu nos tempos 0 e 24 h. Para

determinação da CBM (Concentração Bactericida Mínima), após 24 horas de incubação a placa

foi analisada e dos poços que não apresentaram crescimento microbiano visível foram retirados

10 µL e inoculados em placas de petri contendo meio BHI Ágar e novamente incubadas.

RESULTADOS E DISCUSSÃO: Mediante os dados obtidos através dos testes de CIM e

CBM, evidenciou-se que a CIP demonstrou atividade antimicrobiana estatisticamente relevante

contra o micro-organismo S. aureus ATCC 25923, onde a CIP apresentou capacidade de

interferência no crescimento do micro-organismo em questão, nas concentrações de 125 até 0,48

µg/mL, considerando-se p<0,001 em relação ao controle negativo. Os valores da CIM e CBM

foram de 0,48 ug.mL-1, o que significa que a Concentração Inibitória Mínima não é apenas

bacteriostática, apresentando também efeito bactericida sobre o micro-organismo em estudo.

CONCLUSÃO: A busca por menores concentrações de antibióticos convencionais tem como

finalidade determinar quantidades reduzidas de determinada substância, as quais possam

apresentar a mesma eficácia na inibição do crescimento bacteriano, quando comparado a

concentrações padrão. Isso poderá promover uma menor exposição dos pacientes a esse tipo de

fármaco, o que vem a refletir na redução dos índices de desenvolvimento de resistência

provenientes da utilização exarcebada e indiscriminada destas medicações.


APPELBAUM, P.C.; Hunter, P.A. The fluoroquinolone antibacterials: past, present and future perspectives. Int. J. Antimicrob. Ag, 16, 5-15, 2000 GUIMARÃES, D. O. et al. Antibióticos: importância terapêutica e perspectivas para a descoberta e desenvolvimento de novos agentes. Vol. 33, Nº. 3, 667-679. São Paulo, Ribeirão Preto, 2010. GELATTI, L. C. et al. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus: emerging community dissemination. An Bras Dermatol.; 84(5):501-6. 2009 LOWY F. D. Staphylococcus aureus infections. N Engl J Med. 339:520-32. 1998 SALES L. M., SILVA T. M. Staphylococcus aureus meticilina resistente: um desafio para a saúde pública. Biomedica Brasiliensia. Vol. 3, Nº.1, 2236-0867. 2012.


INCIDÊNCIA DE Aspergillus niger EM ESTACIONAMENTO DE UM CENTRO

COMERCIAL DE FORTALEZA-CE

Josiany Costa de Souza

Ane Teles Reis

Carolina Bonfim Andrade

Karine Silva Pimentel

Jonas Felipe da Silva Araujo

Lydia Dayanne Maia Pantoja

Germana Costa Paixão

INTRODUÇÃO: O grande aumento do número de poluentes oriundos, sobretudo das

atividades presentes em locais que há uma aglomeração maior de pessoas, como é o caso dos

centros urbanos, vêm ocasionando maior debilidade à saúde humana. Nesta perspectiva, a

Aerobiologia procura estudar a presença de micro-organismos presentes no ar que podem ou

não serem causadores de doenças alérgicas e respiratórias, assim como avaliar a interação que

surge entre estes agentes, o ambiente e o homem. Dentre os bioaerossóis destacam-se os fungos,

os quais podem obter seus substratos por meio da decomposição de seres mortos ou de modo

parasitário e por isso causando prejuízos ao seu hospedeiro, e há ainda aqueles que vivem numa

relação mutualística com outro organismo. O Aspergillus niger é um fungo ubíquo, comumente

citado pela literatura como um importante bioagente aéreo. Trata-se de uma espécie

caracterizada como um fungo filamentoso hialino, encontrado no solo, ar, plantas e no canal

auditivo de animais. Dentre as patologias causadas pelo A. niger, está a aspergilose,

enfermidade que pode acometer o homem e os animais debilitados imunologicamente, quando

estes estabelecem um contato contínuo ao ambiente contaminado. A transmissão se dá pela

inalação através das vias aéreas superiores, de conídios do fungo que estão dispersos no ar. Em

centros comerciais existem alguns ambientes propícios para a rápida evolução e disseminação

dos fungos, em especial, em estacionamentos, que apresentam taxas significativas de poluentes,

alta taxa de rotatividade de pessoas e ausência de sistemas de filtração de ar. OBJETIVO:

Monitorar a presença da espécie A. niger em estacionamento de um centro comercial de

referência no município de Fortaleza-CE. MATERIAIS E MÉTODOS: O local de coleta foi

em um estacionamento de centro comercial público de referência situado ao centro de Fortaleza-

CE, durante os meses de junho a setembro/2015, adotou-se o método da sedimentação passiva

em placas de contendo meio de cultura Ágar Batata Dextrose (Himedia®). Essas placas foram

dispostas 1,5 m acima do solo, por 8 horas. Posteriormente, as placas de Petri contendo as

amostras biológicas foram encaminhadas ao Laboratório de Microbiologia (LAMIC) do Curso

de Ciências Biológicas da Universidade Estadual do Ceará. Ao chegarem ao LAMIC/UECE, as

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ placas de Petri permaneceram incubadas a temperatura de 25 – 27 °C durante sete dias,

realizando-se observações diárias. Após a contagem global das colônias, realizou-se uma

triagem, através das características macroscópicas, depois de purificadas, as colônias foram

identificadas mediante a análise conjunta dos aspectos macro-morfológicos e

micromorfológicos segundo metodologia preconizada por Sidrim e Rocha (2004) e Hoog e

colaboradores (2000). RESULTADOS E DISCUSSÃO: A contagem total das colônias foi de

4.833 UFC/m³ presente no estacionamento durante todo o período de coleta, com uma média de

1.208 UFC/m³ mensalmente. A espécie Aspergillus niger esteve presente em todos os meses de

coleta, sendo responsável por 40% das unidades formadores de colônia mencionadas acima, os

demais representantes foram também fungos filamentosos hialinos, alguns representantes

demácios e raros gêneros de leveduras. A espécie A. niger destaca-se como fungo oportunista

provocando surtos de aspergilose, tento um espectro grande de doenças, indo de uma reação

alérgica a infecção pulmonar invasiva (SUGUI et al., 2015). Estudos comprovam que o contato

de fungos anemófilos com o ar atmosférico pode desencadear uma serie de doenças

respiratórias, seja as asmas ditas “de clima”, pneumonite por hipersensibilidade, rinite e

algumas reações tóxicas (LACAZ et al., 2002). As condições ambientais e espaciais de um

estacionamento favorecem a diversidade e abundância de fungos anemófilos, em especial do

Aspergillus niger. E podem receber influência de fatores para a sua disseminação como: a

estação, o vento, a temperatura, a umidade relativa do ar e de outros parâmetros que exibem

variação sazonal (SCHOENLEIN-CRUSIUS, 2001; BOWERS, 2009). CONCLUSÃO: Foi

observada uma grande variedade de fungos nesses estabelecimentos, porém com maior

prevalência do Aspergillus niger, que se fez presente no estacionamento monitorado de um

centro comercial de referência. Diante desse quadro se faz necessários estudos mais

aprofundados acerca dos fungos que estejam presente na microbiota aérea, procurando

desenvolver sistema de controle de qualidade ar nesses estabelecimentos mais especificamente

em estacionamentos, onde não se encontra muitas pesquisas.


BOWERS, R. M.; FIERER, N.; HORÁNYI, E.; HANNIGAN, M.; HALLAR, A. G.; MCCUBBIN, I. A contribuição das partículas biológicas às partículas observadas carbono orgânico em uma altitude elevada remoto. Atmos Environ, v. 43, p. 4278-4282, 2009. HOOG, G.S.; GUARRO, J.; GENÉ, J. Atlas of Clinical Fungi. 2. ed. Barcelona: Universitat Rovira i Virgilli, 2000. p.1125. LUNA, M. A. C. Efeitos do cobre em Aspergillus niger: aspectos morfológicos, estruturais e bioquímicos. Tese: Mestrado em Desenvolvimento de Processos Ambientais. Universidade Católica de Pernambuco, Pernambuco, Recife, Brasil., p.132, 2013.

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ LACAZ, C. S.; PORTO, E.; MARTINS, J. E. C.; HEINS-VACCARI, E. M.; MELO, N. T. de. Fungos e Alergia. In: ______. Tratado de Micologia Médica Lacaz. São Paulo: Sarvier, 2002. p. 810-828. PANTOJA, L. D. M.; COUTO, M.S; PAIXÃO, G. C. Diversidade de bioaerossóis presentes em ambientes urbanizados e preservados de um Campus Universitário. Biólogo, São Paulo, v.69, n.1, p.41-47, jan./jun., 2007. SIDRIM J.J.C., ROCHA, M.F.G., Micologia Médica à luz de autores conteporâneos. Rio de Janeiro: Guanaba Koogan p. 135-161., 2004. SUGUI, J.; KWON-CHUNG, K. J.; JUVVADI, P. R.; LATGE, J. P.; STEINBACH, W. J. Aspergillus fumigatus and Related Species. Cold Spring Harb Perspect Med. v. 5, p. 87-95. 2015. XAVIER, M. O. Atividade ´´in vitro`` de três agentes químicos frente a diferentes espécies de Aspergillus. Universidade do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, RS, Brasil. Arq. Inst., São Paulo, v. 74, n.1, p.49-53, jan./mar., 2007.

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ ISOLAMENTO DE FUNGOS FILAMENTOSOS E LEVEDURIFORMES DA ÁGUA DE

DOIS MANGUEZAIS DO ESTUÁRIO DO RIO ACARAÚ, ACARAÚ - CE





Tamires de Araújo Fortunato



INTRODUÇÃO: O manguezal é um sistema ecológico costeiro característico de regiões

tropicais e subtropicais, ocupando terrenos baixos na foz dos rios e estuários, possui solo

inundado com variações em marés e em nível de salinidade (CORREIA; SOVIERZOSKI,

2005). Possui condições propícias para proteção, reprodução e alimentação de diversas espécies.

Dessa forma pode ser considerado um importante transformador de nutrientes em matéria

orgânica e de bens (QUINÕNES, 2000). A sociedade internacional, exige que se tenham

medidas de avaliar, controlar e desenvolver ferramentas que permitam determinar quali-

quantitativamente os riscos ao ecossistema e à saúde humana e animal. Um dos mais

importantes problemas enfrentados atualmente são os relacionados às crescentes contaminações

de ecossistemas aquáticos e o seu impacto sobre os seres vivos (MEDEIROS et al., 2008). Vale

ressaltar que os esforços de conservação de ambientes costeiros marinhos são bem inferiores ao

de ambientes terrestres, além do que o investimento em pesquisas sobre biodiversidade marinha

pode ser até dez vezes inferior em relação aos estudos de biodiversidade terrestre, fato que

demonstra a necessidade de se realizar estudos em ambientes costeiros visando apresentar

ferramentas para conservação da biodiversidade e saúde ambiental (HENDRIKS et al.,

2006).Assim, é necessário a busca por ferramentas que permitam um perfeito diagnóstico da

saúde de manguezais. OBJETIVO: Diante do exposto o presente trabalho teve como objetivo

avaliar os fungos presente em duas áreas de manguezais estuarinos do Rio Acaraú, Acaraú- CE.

MATERIAL E MÉTODOS: O trabalho foi desenvolvido em manguezais no estuário do Rio

Acaraú, na cidade de Acaraú – CE. Foram escolhidas duas áreas sujeitas às mesmas condições

ambientais, porém com diferentes níveis de perturbação antrópica. A primeira, próxima à região

portuária (02º52’32.70”S; 040º7’31.62”W), é fortemente perturbada pelo corte da vegetação e

pela grande deposição de resíduos sólidos provenientes das artes de pescas regionais. A segunda

região (02º50’59”S; 040º07’41W), apresenta perturbação ocasionada por efluentes de fazendas

de carcinicultura. As amostras de água foram coletadas imergindo tubos de rosca gordo,

previamente esterilizados, na água dos canais desses mangues e devidamente transportadas para

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ o Laboratório de Biologia Ambiental e Microbiologia (LABIAM) do Instituto Federal - Campus

Acaraú. No laboratório, uma alíquota de 20µL foi semeada em placa de Petri previamente

preparada com ágar Sabourand acrescido de cloranfenicol (0,05 g/L), sempre em duplicata,

incubadas a temperatura ambiente, por até 10 dias com observações diárias, para posteriores

análises micológicas. Após observação de crescimento essas foram isoladas em tubos com Ágar

Batata separadamente de acordo com suas características macroscópicas como textura, borda e

coloração visando melhor purificação da colônia. Em seguida foi realizado o teste de

micromorfologia através da técnica de microcultivo em lâmina para as colônias de fungo

filamentoso e utilizando ágar Corn Meal Tween 80 para as colônias de levedura. Os resultados

foram interpretados de acordo com De Hoog et al. (2000). A cepa C. parapsilosis ATCC 22019

foi utilizada como cepa controle para todos os experimentos. Os dados foram submetidos a

análises de variância (ANOVA). Todo o experimento foi realizado em duplicata.

RESULTADOS E DISCUSSÃO: Foram isolados 17 fungos, dos quais 10 são do ponto um,

sendo cinco leveduras e cinco filamentosos; e sete são do ponto dois, duas leveduras e cinco

filamentosos. No ponto 1, a salinidade era de 39, com temperatura da água de 31ºC e do ar com

36,6ºC e umidade de 76%. No ponto 2, a salinidade foi de 45, com temperatura da água de 28,2º

C e do ar de 32,1º C, com umidade 82%. Os gêneros que ocorreram com maior frequência

foram Aspergillus , Cladosporium , Hortaea , Mucor, Penicillium e Candida. Apesar de não ter

ocorrido variação de gênero fúngico salino em ambos os mangues, pouco se pode afirmar em

relação a esse estudo, entretanto sua continuidade pode apresentar maiores resultados e uma

visão mais segura em relação a microbiota desses locais assim como dos impactos da

carcinicultura e corte flora em manguezais. Araújo e Hagler (2010) já apresentam o gênero

Candida como muito frequente em manguezais, principalmente em sedimentos, o que pode

influenciar na presença dessa na água. Já Machado (2006) cita o gênero Penicillium e

Cladosporium como os mais abundantes em águas salinas. Pantoja 2007, apresenta Aspergillus

sp. e Mucor sp., como fungos anemófilos, fato que também pode ter influenciado na presença

desses na água. E, Uijithof et al (1994), cita o gênero Hortaea como presente no meio ambiente,

principalmente em locais com concentração salina. CONCLUSÃO: Os resultados aqui

apresentados, demonstram que o gênero de fungos filamentosos Aspergillus sp., Cladosporium

sp., Hortaea sp., Mucor sp., Penicillium sp. e leveduras do gênero Candida encontram-se na

água de estuários dos Manguezais do Rio Acaraú. É fato que estudos desse gênero nessas áreas

são necessários para avaliar melhor a microbiota de manguezais e o quanto esta é influenciada

por atividades antrópicas como carcinicultura e corte da flora nativa dos mangues.


CORREIA, M. D.; SOVIERZOSKI, H. H. Ecossistemas marinhos: recifes, praias e manguezais. Ed. UFAL. Maceió. Alagoas, 2005. DE HOOG, G.S.; GUARRO, J.; GEN, J. (eds) Atlas of Clinical Fungi. Centraalbureau voor Schinmelculture. Universitat Rovira i Virgilli, Delf. 2002. HENDRIKS, Iris E.; Duarte, Carlos M.; Heip, Carlo H. R.; Biodiversity Research Still Grounded .sciencemag. Vol. 312, P. 1715, 2006. MACHADO, A. Patrícia. Uso de técnicas de detecção rápida de fungos filamentosos na água. htpp://hdl.handle.net1822/6153. Acesso em 27 de outubro de 2015 MEDEIROS, J. F. de; Duarte. S. R.; Fernandes, P. D.; Dias, N. da S.; Gheyi, H. R. Crescimento e acúmulo de N, P e K pelo meloeiro irrigado com água salina. Horticultura Brasileira, v.26, n.4,p.452-457, 2008. PANTOJA LDM; COUTO MS; PAIXÃO GC. Diversidade de bioaerossóis presentes em ambientes urbanizados e preservados de um campus universitário. Revista Biológico, n.1, v.69, p.41-47, 2007. QUINÕNES, E. M. Relações água-solo no sistema ambiental do estuário de Itanhaém. Campinas, FEAGRI, UNICAMP, 2000. UIJTHOF; J.M.; de Cock, A. W.;de Hoog, G. S.; Quint, W. G.; Van Belkun A.. Polymerase chain reaction – mediated genotyping of Hortaea wernwckii, causative agente of tinea nigra. Mycosis, 1994.


MONITORAMENTO MICROBIOLÓGICO DO AÇUDE HIDELBRANDO

LOCALIZADO EM SÍTIO ALEGRE, MORRINHOS-CE

Andréa Maria Neves


Marillyze Maria Nogueira Duarte

Derlânia Maria Saraiva de Sousa

Anny Sampaio Silva

Naiane Oliveira Chaves Timbó


INTRODUÇÃO: Segundo Moura (2009), a maior parte da água utilizada pela humanidade é

proveniente de rios, mananciais, lagos e lençóis subterrâneos, esses recursos hídricos

representam uma pequena porção de água disponível para uso da população. No entanto, o

contato abusivo, direto e constante do homem com essas fontes acaba gerando poluição. No

semiárido brasileiro, a construção de reservatórios denominados regionalmente de açudes, foi de

crucial importância para o progresso da região. Estes são usados para inúmeras finalidades,

como abastecimento para uso doméstico e laser. Representando, portanto, em ecossistemas de

grande valor para a sociedade, cultura local e atividades econômicas (ARAÚJO et al.; 2014).

Embora importantes, os corpos de água estão rotineiramente contaminados por diversas fontes,

tais como lixo doméstico, industrial, e lançamentos de esgotos sem tratamento adequado (Lima;

2010). Para a manutenção da qualidade dos reservatórios de água é necessário o monitoramento

dos parâmetros físicos, químicos e biológicos, que por sua vez, permitam deduzir sobre

possíveis poluentes que possam comprometer o uso a que estes reservatórios são destinados

(MAGALHÃES et al., 2014). O açude Hidelbrando encontra-se na bacia hidrográfica do Acaraú

e Coreaú, na região onde se tem clima tropical com precipitação média de 979 mm com chuvas

concentradas de janeiro a maio, e é a única fonte de abastecimento do distrito que tem

aproximadamente sete mil habitantes. O mesmo apresenta um nível de água muito baixo e

recebe lançamento de águas servidas das residências próximas, bem como de um parque

aquático, os resíduos sólidos gerados nas proximidades são carreados para dentro do açude

ocasionando a poluição do mesmo o que pode tornar o consumo quase impossível, tendo em

vista as condições que a água apresenta. OBJETIVO: Diante da relevância da água para

consumo e sobrevivência da humanidade, o presente estudo tem como objetivo avaliar a

qualidade microbiológica do açude Hidelbrando que abastece a localidade de Sítio Alegre

localizada na cidade de Morrinhos-CE. MATERIAL E METODOS: Para este estudo foram

coletadas 03 amostras de pontos distintos do açude Hidelbrando nos meses de julho, agosto e

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ setembro de 2015 de forma mensal, totalizando 09 amostras onde foram submetidas à

Determinação do Número Mais Provável (NMP) de coliformes totais e termotolerantes (APHA,

2012). A contagem de micro-organismos mesófilos aeróbios foi realizada através da ténica do

Pour plate: contagem de Unidades Formadoras de Colônia. Os pontos avaliados foram: O ponto

A e B que ficam próximos a um parque aquático e o ponto C que fica próximo a uma vila de

casas. RESULTADOS E DISCUSSÃO: Os resultados obtidos da quantificação dos valores do

Número Mais Provável (NMP) de Coliformes Totais (CT) e Coliformes Termotolerantes (CTT)

obtidos das nove amostras avaliadas foram comparados a uma tabela de número mais provável.

Para coliformes totais o número variou de 2,2x10 a 9,0x10² coliformes totais por 100 mL. Para

coliformes termotolerantes os números variaram entre 1,1x10 e 2,2x10² coliformes

termotolerantes por 100 mL da amostra. Conforme o Ministério da Saúde (MS) que determina

as regras de potabilidade das águas para consumo humano impede a presença de E.coli ou

coliformes termotolerantes em amostras de 100 mL de água, portanto, todas as amostras (100%)

tanto para coliformes totais quanto para coliformes termotolerantes apresentaram-se impróprias

para consumo humano. Foram isoladas das amostras de água do açude nas três coletas

realizadas 27 cepas da família Enterobacteriaceae, entre elas Providência alcalifaclens,

Escherichia coli, Serratia sp e Hafnia alvel. Estes patógenos estão entre os principais agentes de

infecção hospitalar e também constituem a principal razão de infecção intestinal para o homem.

Das nove amostras avaliadas, seis (66,5%) estavam acima dos valores máximos de bactérias

aeróbias mesófilas determinadas pala legislação vigente, que definiu valores máximos de 500

UFC/mL. Os valores encontrados variaram entre 1,175x10² a 8,05x10 UFC/mL. Sales, et al.

(2012) avaliaram os parâmetros microbiológicos da água do açude Cumbe no município do

Barro, Ce, com coletas em pontos diferentes, e verificaram que os valores de coliformes

encontrados apresentaram resultados satisfatórios em relação á qualidade microbiológica em

todos os pontos coletados. Estes resultados foram diferentes do observado no presente estudo,

no qual todos os pontos de coleta analisados estavam acima do permitido pela legislação em

relação a coliformes termotolerantes. Moura et al. (2009) verificaram resultados em amostras de

água coletadas de diferentes pontos do rio Cascavel utilizada como abastecimento para

população local, em que apresentaram uma alta taxa de contaminação por coliformes totais e

termotolerantes. Os altos níveis de contaminação estão associados à presença de um parque

aquático onde há liberação de resíduos diretamente na água através de uma estação de esgotos

desta forma, tornando o açude contaminado. Outro fator de relevância é a presença de resíduos

sólidos e líquidos oriundos das casas da circunvizinhança, comprometendo a potabilidade desse

reservatório. Outras causas associados à contaminação deste reservatório é a presença de

animais, como patos que podem eliminar fezes contaminadas por bactérias patogênicas e,

consequentemente, contaminar o meio aquático. CONCLUSÃO: Tendo em vista o exposto, é

possível afirmar que as amostras analisadas do açude Hidelbando- CE foram consideradas

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ impróprias para consumo humano de acordo com os padrões microbiológicos estabelecidos pela

legislação vigente. Portanto, considera-se de suma importância a implantação de um eficiente

sistema de saneamento básico para toda a população de Sítio Alegre, a fim de que todos tenha

acesso à água tratada para consumo, diminuindo o risco de contaminação.


APHA-AMERICAN PUBLIC HEALTH ASSOCIATION. Standard methods for the examination of water and wastewater. 22 Ed. Washington DC, 2012. ARAÚJO, A.B.D. et al. Qualidade microbiológica e avaliação do estado trófico de amostras de água do açude Forquilha-Ce. ENCICLOPÉDIA BIOSFERA, Centro Científico Conhecer, Goiânia, v.10, n.18, p. 368-3379, set. 2014. BRASIL. Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância Sanitária. Portaria n°. 2914 de Dezembro de 2011. Diário oficial da União, Brasília, 2011. LIMA, W.S. Qualidade da água em Ribeirópolis SE: O Açude do Cajueiro e a barragem do João Ferreira. 2008. 119 f. Dissertação (Mestrado em Agroecossistemas)- Universidade Federal de Sergipe, Sergipe, 2008. MAGALHÃES, A.Y. et al. Qualidade microbiolpogica e físico-química da água dos açudes urbanos utilizados na dessedentação animal em Sobral, Ceará. Revista da Universidade Vale do Rio Verde, Três Corações, v. 12, n. 2, p. 141-148, ago./dez. 2014. MOURA. A.C.; ASSUMPÇÃO. R.A.B.; BISCHOFF. J. Monitoramento Físico-químico e microbiológico da água do rio Cascavel durante o período de 2003 a 2006. Arq. Inst. Biol, São Paulo, v.76, n.1, p.17-22, jan./mar. 2009. SALES, A.M.D.J. et al. Avaliação da qualidade da água do açude do Cumbe, no município do Barro– CE. Revista Verde de Agroecologia e Desenvolvimento Sustentável, vol. 7, n. 4, p.30 – 38, out-dez, 2012.

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ PERFIL MICROBIOLÓGICO DE ÁGUA PARA CONSUMO HUMANO ATRAVÉS DE

METODOLOGIA SIMPLIFICADA: ESTUDO DE CASO EM MUNICÍPIO DO

INTERIOR CEARENSE

Francisco Bruno Monte Gomes

Eliel Albuquerque Aguiar

INTRODUÇÃO: A água é um recurso natural essencial à vida e ao desenvolvimento das

comunidades humanas. É direito de todos, independente das condições socioeconômicas em que

cada grupo social está inserido, devendo atender às necessidades humanas em seus diversos

aspectos: fisiológicos, econômicos e domésticos. Entretanto, para que este recurso se torne

utilizável, é necessário que atenda ao padrão de qualidade recomendado pelo Ministério da

Saúde (SILVA et al., 2013). Em decorrência disso, antes de ser consumida, a água precisa ser

tratada, passando por um processo de purificação e desinfecção, cujo intuito é destruir as

bactérias patogênicas e outros micro-organismos que podem infectar seus usuários. A etapa de

desinfecção da água, consequentemente, é uma das mais importantes medidas de saúde pública,

considerando que a sua prática tem reduzido significativamente doenças de veiculação hídrica,

refletindo assim sobre o aumento na perspectiva de vida da população (SILVA et al.,2009).

OBJETIVO: Diante disso, o objetivo do trabalho é de apresentar um levantamento da

qualidade microbiológica da água do município de Miraíma, no interior do Ceará sob análise

simplificada. MATERIAIS E MÉTODOS: O município está localizado no interior do estado

do Ceará, possui uma área de aproximadamente 699,588 km², altitude de 80 metros, clima

característico em tropical quente semiárido com chuvas de janeiro a abril, os recursos hídricos

são oriundos do açude São Pedro do Timbaúba e Missi (bacia do Litoral) e projeto São José.

(OPOVO, 2015). A população estimada para o ano de 2015, de acordo com o IBGE é de 13.428

habitantes (IBGE, 2015). O para o desenvolvimento do trabalho, além do embasamento teórico,

o estudo também se ofertará a partir da realização de quatro etapas, as quais se dividem em: 1)

caracterização da área de estudo, 2) Coletas das amostras de água em campo, 3) atividades de

laboratório e 4) monitoramento e integração dos dados e informações. RESULTADOS E

DISCUSSÃO Foram coletas 65 amostras no município de Miraíma-Ceará, no período de

Abril/15 a Setembro/15. Os coletores utilizaram os EPI´s necessários. Em seguida o material foi

encaminhando para análise no Laboratório de Controle da Qualidade de Água e Esgoto da

CAGECE, localizado na cidade de Itapipoca-Ceará. A execução das análises seguiram os

procedimentos do Standard Methods for the Examination of Water & Wastewater 22nd Edition,

2012. A análise de bactérias do grupo coliformes foi realizada em tempo hábil, menor do que 30

horas. Os materiais usados foram: cartela de contagem, seladora, lâmpada UV, caneta para

retroprojetor, papel toalha ou algodão, bico de bunsen, isqueiro ou fósforos, estufa incubadora a

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ 35°C ± 0,5°C, Álcool 70%, flaconete de substrato cromogênico. Os coliformes para os autores

Soares e Maia (1999) são considerados como a determinação mais importante do estudo

bacteriológico, fazem parte deste grupo os organismos aeróbios e também os facultativos

anaeróbios, os gram-negativos e bastonetes que produzem colônias escuras. De forma

simplificada nas estações de monitoramento da qualidade de água para consumo humano o

método do substrato cromogênico. O grupo coliforme está representado por dois grupos: os

coliformes totais e os coliformes termotolerantes. As termotolerantes indicam com maior

segurança se na água considerada potável está havendo algum mecanismo que possa trazer

riscos à saúde de seus usuários (SCURACCHIO, 2010). As bactérias do grupo coliformes são

formadas por bactérias que incluem os gêneros: Klebsiella, Escherichia, Enterobacter e

Citrobacter, porém, o grupo é mais heterogêneo e incluem uma ampla variedade de gêneros,

tais como Serratia e Hafnia (GUERRA et al., 2006). De acordo com os testes realizados,

93,8% apresentaram AUSÊNCIA de Coliformes Totais e E.coli. Com PRESENÇA o valor foi

de 6,2% em 100 ml. Mesmo com os longos períodos de estiagem e a queda da qualidade da

água dos açudes de abastecimento público do Ceará, os resultados apresentados mostram

eficiência na água distribuída para a população do município de Miraíma. Os testes

simplificados representam uma ação bem positiva na detecção tão minuciosa desses micro-

organismos. CONCLUSÃO: Conclui-se que a pesquisa foi satisfatória no sentido conhecer a

técnica do Subtrato Cromogênico e como a mesma é aplicado nas concessionárias de água,

representando eficácia e rapidez no processo. Das amostras analisadas a grande maioria

demonstrou própria para o consumo humano (cerca de 93,8%), atendendo as exigências da

portaria do ministério da saúde de n°2.914/2011.

REFERÊNCIAS BILIOGRÁFICAS

FRANCO, B.D.G.M. Métodos rápidos de análise microbiológica de alimentos: estudo crítico e avaliação de novas metodologias. 1994. 128f. Tese (Livre Docência) - Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Universidade de São Paulo, São Paulo, 1995. GUERRA, N. M. M.; OTENIO, M. H.; SILVA, M. E. Z.; GUILHERMETTI, M.; NAKAMURA, C. V.; NAKAMURA, T. U.; DIAS FILHO, B. P. Ocorrência de Pseudomonas aeruginosa em água potável. v.28, n.1, p.13-18, 2006. IBGE. Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística: Cidades 2010/2015. Disponível em: http://www.cidades.ibge.gov.br/xtras/uf.php?lang=&coduf=23&search=ceara. Acesso em: 02 set. 2015. OPOVO. Miraíma-Ceará: Dados do município. Disponível em: http://www.opovo.com.br/ceara/miraima. Acesso em: 20 de Out. 2015. SOARES, B. S. e MAIA. A. C. F. Água: microbiologia e tratamento. Fortaleza: EUFC, 1999.

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ SCURACCHIO, P. A. Qualidade da água utilizada para consumo em escolas no município de São Carlos – SP. Dissertação (Mestrado), Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho”, Araraquara, 2010. SILVA, L. M.; SOUZA, E. H.; ARREBOLA, T. M.; JESUS, G. A. Ocorrência de um surto de hepatite A em três bairros do município de Vitória (ES) e sua relação com a qualidade da água de consumo humano. Ciência e Saúde Coletiva, Espírito Santo, v. 14, n. 6, p. 2163-2167. 2009. SILVA, M. B; SANTOS, D.B; SILVA, G. P; BATISTA, R. O;. SILVA, S. C; Tratamento da Água armazenada em cisternas utilizando radiação solar. Centro Científico Conhecer, Goiânia, v. 9, N. 16, p.199-214, set/out. 2013.

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ Pseudomonas aeruginosa, ANTIBIOTICOTERAPIA E INFECÇÕES HOSPITALARES:

UMA REVISÃO SISTEMÁTICA SOBRE ESTA RELAÇÃO E OS IMPACTOS

DECORRENTES PARA A SAÚDE PÚBLICA

Léia Madeira Sabóia dos Reis

Alexandra Maria dos Santos Carvalho

Itamara Ávila Miranda

Francisco Carlos da Silva Júnior

Camila dos Santos Xavier

Thiago Nobre Gomes

INTRODUÇÃO: Pseudomonas aerugionosa é um bacilo Gram-negativo que se destaca como

uma dos principais agentes causadores de infecções hospitalares (IHs), vindo a se caracterizar

especialmente por adquirir uma ampla resistência a antimicrobianos e desinfetantes (STOVER

et al., 2000). Em termo de número de casos, dentre os microrganismos causadores de IHs, este

agente infeccioso fica atrás apenas de Staphylococcus aureus e dos Staphylococcus coagulase-

negativos (FIGUEIREDO et al., 2007). Quanto à importância clínica das infecções hospitalares

por P. auruginosa e a ocorrência de casos de resistência a antibióticos, este patógeno é

responsável por altos índices de morbidade e mortalidade em pacientes internados em Unidades

de Terapia Intensiva (UTIs), assim se tornando um grave problema de saúde pública e motivo

de estudo tanto no Brasil quanto no mundo (FIGUEIREDO et al., 2007; NEVES et al., 2011).

Devido ao uso de antibióticos de forma indiscriminada, este microrganismo apresenta

resistência natural e adquirida na comunidade, mas segundo a Organização Mundial da Saúde

(OMS), a aquisição de resistência à antibioticoterapia por P. aeruginosa também é

correlacionada a fatores como: falha ou deficiência de informações dos profissionais de saúde,

veiculação da mídia de forma incorreta, baixo nível educacional e socioeconômico das

populações, acesso inadequado aos antimicrobianos, globalização e por fim, deficiência da

vigilância epidemiológica e das comissões de controle em infecção hospitalar (NEVES et al.,

2011; OMS, 2008). Segundo Figueiredo e cols. (2007) e Neves e cols. (2011), os

antimicrobianos que se destacam por apresentarem sensibilidade reduzida são aqueles de maior

espectro de ação, como os carbapenêmicos (imipenem e meropenem) e as cefalosporinas.

OBJETIVO: O presente trabalho teve como objetivo analisar as produções científicas que

tratassem sobre a relação existente entre P. aeruginosa, antibioticoterapia e ocorrência de

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ infecções hospitalares, bem como elucidar os principais impactos causados na saúde pública a

partir desta associação. MATERIAL E MÉTODOS: Trata-se de um estudo retrospectivo, com

levantamento bibliográfico de publicações indexadas em plataformas como Scientific Electronic

Library Online (SciElo), Biblioteca Virtual em Saúde (BVS), PubMed e Google Acadêmico.

Foram utilizados como descritores os termos: Pseudomonas aerugionosa, infecção hospitalar,

antimicrobianos, prevenção e saúde pública. Como critérios de inclusão, foram consideradas as

pesquisas produzidas entre os anos 2000 e 2014, as quais abordassem a temática proposta.

RESULTADOS E DISCUSSÃO: Após leituras dos títulos, resumos e resultados dos trabalhos

encontrados inicialmente e exclusão daqueles que não se adequavam aos critérios propostos,

foram selecionados 15 artigos científicos. P. aerugionosa se caracteriza como um patógeno

oportunista responsável por causar uma variedade de infeções sistêmicas, assim se

caracterizando uma bactéria de difícil controle por estar presente na comunidade (NEVES et al.,

2011; BARROS et al., 2012). Segundo Ferrareze e cols. (2007), a P. aeruginosa é tida como um

patógeno global entre os pacientes mais debilitados, e as cepas multirresistentes são cada vez

mais isoladas das colonizações e infecções nas UTIs. A troca de material genético que ocorre

entre os bacilos Gram-negativos é indicada como um dos principais mecanismos causadores de

resistência (NEVES et al., 2011). Considera-se uma cepa multirresistente, aquela que apresenta

resistência a 4 ou mais classes de antibióticos diferentes (FUENTEFRIA et al., 2008). A forma

de resistência que P.aeruginosa adquire durante a antibioticoterapia é característico à sua

espécie, e muitas vezes tal processo não pode ser evitado (NEVES et al., 2011). Figueiredo e

cols. (2007) abordam que P. aerugionosa apresenta resistência a vários antibióticos, e também

pode vir a apresentar resistência cruzada. Alguns dos antibióticos mais utilizados na terapia são:

cefalosporinas (3ª e 4ª gerações) e carbapenêmicos (como meropenem e imipenem), os quais

apresentam amplo espectro de resistência (FUENTEFRIA et al., 2008). Estes apresentam

atividade bactericida no tratamento de infecções, acarretando um aumento da resistência e

produção de beta-lactamases e metallo-beta-lactamases em pacientes com maior tempo de

internação. Neste caso, os carbapenêmicos são antimicrobianos que devem ser administrados

como último recurso nos tratamento de IHs (NEVES et al., 2011). O uso indevido dos

antibióticos em infecções provocadas por cepas multirresistentes vem gerando um desafio

constante para a terapia antimicrobiana, assim perfazendo uma atenção maior para a

identificação dessas bactérias que apresentam multirresistência e que são consideradas um

problema de saúde pública. CONCLUSÃO: Pseudomonas aeruginosa se destaca no meio

hospitalar como um patógeno responsável pela ocorrência de casos de IHs em pacientes

debilitados, assim precisando ser encarada como uma ameaça à saúde humana. O uso

inadequado de antibióticos faz com que o microrganismo adquira resistência e o tratamento das

infecções não seja tão eficiente, sendo necessário o desenvolvimento de ações estratégicas

efetivas pelas comissões de controle de infecção hospitalar, visando a redução dos casos de IHs

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ provocadas por P. aeruginosa, assim como também pelos demais microrganismos

multirresistentes presente neste ambiente.


BARROS, L. M. et al. Prevalência de micro-organismo e sensibilidade antimicrobiana de infeções hospitalares em unidade de terapia intensive de hospital público no Brasil. Revista de Ciências Farmacêuticas Básica e Aplicada, v. 33, n. 3, p. 429-435. 2012. FERRAREZE, M. V. G. et al. Pseudomonas aeruginosa multirresistente em unidade de cuidados intensivos: Desafios que procedem?. Acta Paul Enfermagem, v. 20, n. 1, p. 7-11. 2007. FIGUEIREDO, E. A. P. et al. Pseudomonas aeruginosa: Frequência a múltiplos fármacos e resistência cruzada entre antimicrobianos no Recife/PE. Revista Brasileira de Terapia Intensiva, v. 19, n. 4, p. 421-427. 2007. FUENTEFRIA, D. B., FERREIRA, A. E., GRAF, T., CORÇÃO, G. Pseudomonas aeruginosa: disseminação de resistência antimicrobiana em efluente hospitalar e água superficial. Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical, v. 41, n. 5, p. 470-473. 2008. NEVES, P. R. et al. Pseudomonas aeruginosa multirresistente: um problema endêmico no Brasil. Jornal Brasileiro de Patologia e Medicina Laboratorial, v. 47, n. 4, p. 409-420. 2011. Organização Mundial da Saúde (OMS). Organização Pan-Americana da Saúde. Infecção Hospitalar. [Citado em 05 jul 2008] Disponível em: <http://www.opas.org/sistema/fotos/hospitala1.PDF>. STOVER, C. K. et al. Complete genome sequence of Pseudomonas aeruginosa PAO1, an opportunistic pathogen. Nature, v. 406, p. 959-964. 2000.

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ QUALIDADE BACTERIÓLOGICA DE AMOSTRAS DE CAMARÃO CONGELADO E

IN NATURA COMERCIALIZADAS EM SOBRAL-CE

Antonia Jorgiane Rodrigues de Macêdo

Maria Alana Duarte Marinho

Lucas Diogo Rosa

Jailda de Araújo Chaves Campelo

Maria Janaína Paula Gomes

Theodora Thays Arruda Cavalcante

Renata Albuquerque Costa

INTRODUÇÃO: Dentre os produtos de pesca, o camarão é um crustáceo que se destaca por ser

apreciado pelos consumidores. Dessa forma, é crucial a manutenção da sua qualidade

microbiológica, a fim de garantir à saúde dos consumidores (BORN, 2012). Entretanto, a partir

do momento que é feita a captura do camarão, começam a ocorrer alterações que interferem na

sua qualidade e, consequentemente, podem impedir o seu uso para alimentação humana

(FARIAS, 2006). Além disso, os crustáceos são tidos como alimentos altamente perecíveis,

posto que apresentam características intrínsecas que propiciam a fácil instalação do ranço

oxidativo, a saber: alta atividade de água, pH próximo a neutralidade e elevada concentração de

gorduras insaturadas (VIERA, 2008). Considerando o exposto, quando a conservação dos

camarões não ocorre de forma adequada pode haver a proliferação de alguns micro-organinsmos

patogênicos e/ou deterioradores. Citam-se como indicadores de qualidade sanitária em camarão,

os seguintes gêneros bacterianos: Salmonella spp. e Staphylococcus spp. (BRASIL, 2001).

Além desses gêneros bacterianos também podem ser citados os coliformes termotolerantes, que

são indicadores de contaminação de origem fecal. Dentre as bactérias citadas acima, os

estafilococos e os coliformes termotolerantes são considerados mesófilos, e a contagem desses

micro-organismos é habitualmente aplicada para avaliar a qualidade sanitária dos alimentos

oriundos da pesca. OBJETIVO: O presente trabalho teve como objetivo analisar a qualidade

bacteriológica de camarão congelado e in natura comercializados na cidade de Sobral – CE, a

partir da quantificação de bactérias de interesse sanitário: Staphylococcus e coliformes

termotolerantes. MATERIAIS E MÉTODOS: Foram obtidas 15 amostras de camarão

congelado e 15 amostras de camarão in natura no comércio varejista de Sobral - CE. Os

camarões pertenciam à espécie marinha Litopenaeus vannamei e cada amostra foi constituída

por um pool de 500 gramas. Para a quantificação de coliformes e Staphylococcus, foram

pesados, assepticamente, 25 g de cada amostra e homogeneizados em 225mL de solução salina

a 0,85%, correspondendo à diluição 10-1, a partir da qual foram produzidas diluições decimais

seriadas até 10-3. A quantificação de coliformes foi feita pela determinação do Número Mais

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ Provável a partir da técnica de fermentação em tubos múltiplos (FENG et al., 2002). Para a

prova presuntiva e de detecção de coliformes termotolerantes (CT) foram utilizados o Caldo

Lauril Sulfato e Caldo EC, incubados a 35°C e 45°C por 48 horas, respectivamente. Foi

utilizada a técnica de semeadura em superfície em Ágar Baird-Paker para Contagem Padrão em

Placas (CPP) de Staphylococcus (BENNETT; LANCETTE, 2001) com incubação a 35°C por

48 horas. O cálculo de CPP foi realizado pela multiplicação das contagens de colônias de

Staphylococcus pela diluição correspondente, sendo expresso em log10 Unidades Formadoras

de Colônias (UFC) por grama. RESULTADOS E DISCUSSÃO: As amostras de camarão

congelado (n=15) apresentaram índices de Staphylococcus variando de 2,43 a 5,28 log10 CFU

g-1, e 12 amostras (80%) apresentaram carga bacteriana acima do limite de 3,0 log10 CFU g-1

preconizado pela ANVISA (BRASIL, 2001). Observou-se uma variação de 2,19 a 5,39 CFU g-1

na contagem de estafilococos das amostras de camarão in natura (n=15), estando dez (66,7%)

unidades amostrais impróprias para o consumo, uma vez que apresentaram valores acima de 3,0

log10 CFU g-1. Os elevados índices de Staphylococcus em ambas as amostras de camarão

(congelado e in natura) servem de alerta para a qualidade de produtos de pesca destinados ao

consumo humano. Além disso, indicam práticas inadequadas de manipulação desde a captura

até a distribuição do produto para o consumidor, uma vez que esses micro-organismos fazem

parte da microbiota normal da pele humana. A ocorrência de Staphylococcus em camarão

congelado foi reportada por Noor et al. (2013), estando relacionada a falhas graves de

manipulação e contaminação cruzada. Costa et al. (2011) também detectaram amostras de

camarão in natura com índices de Staphylococcus acima do permitido pela legislação vigente e

chamaram a atenção para o controle da temperatura em todas as etapas da cadeia produtiva

desse produto. No que refere a quantificação de CT, não foi observado crescimento desses

indicadores em nenhuma das 30 amostras de camarão analisadas. Esse fato indica que nenhuma

amostra foi contaminada por fonte de origem fecal (KOONSE et al., 2005). CONCLUSÃO:

Os resultados obtidos sugerem que as amostras comercializadas de ambas as formas

(congeladas e in natura) podem ser veículos de transmissão de Staphylococcus. Além disso,

chama-se atenção para a necessidade de se estabelecer medidas treinamento acerca das Boas

Práticas de Manipulação em todas as etapas da cadeia produtiva de camarão.


BENNETT, R.W.; LANCETTE, G.A. Staphylococcus aureus. In: Bacteriological Analytical Manual. U.S. Food & Drug Administration Center for Food Safety & Applied Nutrition, 2001. BORN, L.C. Pesquisa de estafilococos coagulase positiva em camarões comercializados em diferentes apresentações. 2012. 21f. Trabalho de Conclusão de Curso (Especialização em

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ produção, higiene e tecnologia de alimentos de origem animal) – Faculdade de Veterinária, Universidade Federal do Rio Grande do Sul,Porto Alegre, 2012. BRASIL. Ministerio da Saude. Resolução RDC no 12, de 02 de janeiro de 2001. Aprova o Regulamento Técnico sobre Padrões Microbiológicos para Alimentos. Diário Oficial [da] Republica Federativa do Brasil. Brasília, DF, 10 jan. 2001. Seção 1, no7-E. p.45-53. COSTA, R.A.; MOREIRA, B.A.B.; CARVALHO, F.C.T.; MENEZES, F.G.R.; SILVA, C.M.; VIEIRA, R.H.S.F. Staphylococcus coagulase-positiva e enterobactérias em camarão Litopenaeus vannamei comercializado in natura. Revista do Instituto Adolfo Lutz, v. 70, n. 4, p. 566-571, 2011. FARIAS, M. do C.A. Avaliação das condições higiênico – sanitárias do pescado beneficiado em indústrias paraenses e aspectos relativos à exposição para consumo em Belém. 2006. 67f. Dissertação (Mestrado em Ciência Animal) - Universidade Federal do Pará. Pará, 2006. FENG, P.; WEAGENT, S.D.; GRANT, M.A.; BURKHARDT, W. Enumeration of Escherichia coli and the coliform bacteria. In: Bacteriological Analytical Manual. U.S. Food & Drug Administration Center for Food Safety & Applied Nutrition, 2002. KOONSE, B.; BURKHARDT, W. 3RD; CHIRTEL, S.; HOSKIN, G.P. Salmonella and the sanitary quality of aquacultured shrimp. Journal of Food Protection, v. 68, n. 12, p. 2527-2532, 2005. NOOR, G.M.U.; LARSEN, M.H.; GUARDABASSI, L.; DALSGAARD, A. Bacterial flora and antimicrobial resistance in raw frozen cultured seafood imported to Denmark. Journal of Food Protection, v. 76, n. 3, p. 490-499, 2013. VIEIRA, R.H.S.F. Microbiologia, higiene e qualidade do pescado: teoria e prática. São Paulo: Varela, 2004. 380 p.


QUALIDADE MICROBIOLÓGICA DA ÁGUA DO RIO CONTENDAS, NA CIDADE

DE MASSAPÊ, CEARÁ

Rosângela Maria Almeida Mouta

Andréa Maria Neves


INTRODUÇÃO: Os mananciais urbanos são as fontes disponíveis de água no qual a população

pode ser abastecida nas suas necessidades. Devem possuir quantidade e qualidade de água

adequada ao seu uso. O uso mais nobre é o consumo de água pela população ou denominado de

consumo doméstico. O desenvolvimento urbano à medida que aumenta envolve duas atividades

conflitantes, aumento da demanda de água com qualidade e a degradação dos mananciais

urbanos por contaminação dos resíduos urbanos e industriais. (TUCCI, 2006). O consumo de

água global vem aumentando devido ao crescimento populacional, agrícola e industrial. Fatores

como o desflorestamento, despejo de resíduos e efluentes sem tratamento e ocupação

indiscriminada de áreas de mananciais contribuem para a contaminação e poluição das águas

(FERREIRA, 2005). Os indicadores geralmente utilizados incluem coliformes totais, coliformes

fecais, Escherichia coli e enterococci ( SHIBATA et al., 2004). Dentre os riscos de

contaminação, está presente o contato com as áreas de recreação, onde se encontra uma mistura

de microrganismos patogênicos e não patogênicos (ALVES, 2007). Além da poluição direta das

fontes de água, os sistemas de distribuição e reservatórios também podem ser responsáveis pela

transmissão de agentes patogênicos, caso estejam em condições inadequadas de higiene e

conservação (MICHELINA et al., 2006). OBJETIVO: Este trabalho tem como objetivo avaliar

a qualidade microbiológica da água do Rio Contendas em Massapê-CE. MATERIAL E

MÉTODOS: Foram coletadas amostras de três pontos, em locais diferentes do rio. As amostras

foram transportadas em caixas térmicas e levadas para o laboratório de Microbiologia da

Universidade Estadual Vale do Acaraú onde as mesmas foram submetidas à Determinação do

Número Mais Provável (NMP) de coliformes totais e termotolerantes. A contagem de micro-

organismos mesófilos aeróbios foi realizada através da técnica do Pour plate: Unidades

formadoras de colônias. RESULTADOS E DISCUSSÃO: Em relação à análise microbiológica

o NMP de coliformes termotolerantes nas amostras nos três pontos, durante o mês que foi

coletado variou de 1,4x10 a 2,6x10 CTT/100 ml. Na coleta realizada, os três pontos analisados

apresentaram presença de Escherichia coli, Providência alcalifaciens, Proteus vulgaris e

Hafnia alvel. O NMP de coliformes totais, variou de 280 a > 1600 CT/100 mL. De acordo com

a portaria n°518/2004 do Ministério da Saúde (MS) que regulamenta as normas de potabilidade

das águas para consumo humano que proíbe a presença de E. coli ou coliformes termotolerantes

em amostras de 100 mL de água, todas as amostras apresentaram-se impróprias para consumo

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ humano. O número de bactérias aeróbias mesófilas nas amostras analisadas variou de 2,701x10³

a 5,131x10³ UFC/ml. A portaria 518/2004 do MS estabelece um limite de 500 UFC/mL estando

100% das amostras fora dos padrões exigidos. Araújo, et al. (2014) ao avaliarem os parâmetros

microbiológicos da água do açude de Forquilha- CE, de forma semestral, com coletas feitas em

três pontos distintos do açude, verificaram que o número de coliformes e de bactérias aeróbias

mesófila apresentaram valores insatisfatórios em relação à qualidade microbiológica em todos

os pontos coletados. Estes resultados corroboram com o presente estudo, no qual todos os

pontos de coletas analisados estavam acima do permitido pela legislação vigente.

CONCLUSÃO A partir da realização deste trabalho, observou-se que o Rio Contendas está

sofrendo grande impacto em sua qualidade, principalmente através de resíduos domésticos,

representados por altas concentração de coliformes encontrados. Os resultados obtidos mostram

que a água representa um fator de risco à saúde humana, pois os microrganismos encontrados

são a causa de inúmeras doenças infecciosas. Dessa forma, existe a necessidade de alertar a

população sobre as causas que o consumo desta água pode trazer a saúde, além de conscientiza-

los sobre a importância da preservação do rio.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ARAÚJO, A.B.D. et al. Qualidade microbiológica e avaliação do estado trófico de amostras de água do açude Forquilha-Ce. ENCICLOPÉDIA BIOSFERA, Centro Científico Conhecer, Goiânia, v.10, n.18, p. 368-3379, set. 2014. BOMFIM, M. V. J.; SOEIRO, G. de O.; MADEIRA, M.; BARROS, H. D. Avaliação físico- química e microbiológica da água de abastecimento do laboratório de bromatologia da UERJ. Revista Higiene Alimentar, São Paulo, v. 21, n. 152, p. 99-103, jun. 2007. FERREIRA, M. M. Impactos ambientais da ocupação urbana na bacia hidrográfica do Igarapé Batista Rio Branco - Acre. Rio Branco. 2005. 93 p. Dissertação (Mestrado em Ecologia e Manejo de Recursos Naturais)- Universidade Federal do Acre – UFAC, Rio Branco, 2005. MICHELINA, A. de F.; BRONHAROA, T. M.; DARÉB, F.; PONSANOC, E. H. G. Qualidade microbiológica de águas de sistemas de abastecimento público da região de Araçatuba, SP. Revista Higiene Alimentar, São Paulo, v. 20, n. 147, p. 90-95, dez. 2006. SOUSA, P. P. R.; CUNHA, A. R.; CONCEIÇÃO, M. L. Monitorização da qualidade microbiológica da água empregada em serviços de alimentação em empresas privadas da cidade de João Pessoa – PB. Revista Higiene Alimentar, São Paulo, v. 17, n. 104-105 (Encarte), p. 202-203, jan./fev. 2003. SHIBATA, T.; SOLO-GABRIELE, H.M.; FLEMING L.E.; ELMIR. S. Monitoring marine recreational water quality using multiple microbial indicators in an urban tropical environment. Water Research, v.38, p.3119-3131, 2004. http://dx.doi.org/10.1016/j.watres.2004.04.044 TUCCI, C. E. M. Água no meio urbano. In: REBOUÇAS, A. C.; BRAGA, B.; TUNDISI, J. G. Águas Doces no Brasil:Capital Ecológico, Uso e Conservação. 3. ed. São Paulo: Escrituras, 2006. cap. 12, p. 399-432.


QUALIDADE MICROBIOLÓGICA E FÍSICO-QUÍMICA DA ÁGUA DO RIO

BATOQUE DA CIDADE DE HIDROLÂNDIA-CE

Naiani Oliveira Chaves Timbo

Andrea Maria Neves


Danielle Rodrigues Maciel

Anny Sampaio Silva

Murilo Sérgio da Silva Julião


INTRODUÇÃO: A água é o recurso natural mais utilizado em todo o mundo, ela é essencial

para o desenvolvimento em várias atividades sobre a terra, sejam urbanas, industriais ou

agropecuárias (STERZ, C.2011). A poluição do meio aquático através principalmente de dejetos

de esgotos, de hospitais, residências, e indústrias é um problema alarmante, pois a qualidade da

água tornou-se uma questão de saúde pública, devido à compreensão entre a relação da água

contaminada e doença. Para que a água seja caracterizada como potável após o tratamento

convencional, os parâmetros físico-químicos e microbiológicos deverão estar de acordo com a

Portaria de nº 36, do Ministério da Saúde, de 19 de janeiro de 1990 (BRASIL, 1990). Os

indicadores microbiológicos capazes de verificar a contaminação de água por resíduos humanos

são os coliformes totais e os termotolerantes. Este grupo incluem diversos organismos que se

diferem nas características bioquímicas, sorológicas e no seu habitat. Podemos classificar em:

Escherichia, Aerobacter, Citrobacter, Klebsiela e alguns gêneros que quase nunca apresenta em

fezes, como é o caso da Serratia. O rio Batoque é um rio intermitente, isto é, seca durante um

determinado período do ano. Seu nome significa pequena peça de madeira roliça, usada pelos

índios, como adorno no lábio inferior. Sua extensão e de aproximadamente 100 Km de

extensão. A nascente do rio em estudo está localizada dentro do território do município de

Hidrolândia, na Fazenda Amarante, há uma distância de aproximadamente 40 km da sede. No

passado, abastecia a população da cidade por meio das águas que eram retiradas das cacimbas e

cacimbões, localizados no leito do rio. O maior índice de contaminação da água do rio, ocorre

na cidade, quando os domínios do rio entram no perímetro urbano, os dejetos hospitalares da

população que vive nas margens ou nas proximidades delas, por não apresentarem um sistema

de esgotamento adequado, são despejados dentro do rio, gerando grandes problemas de

contaminação da água que é utilizada por animais que serão posteriormente consumidos pela

população. Segundo Rebouças et al. (2001), em virtude da grande capacidade de dissolução e

transporte do mais variados tipos de materiais, a água representa um veículo de impurezas,

como por exemplo, de micro-organismos patogênicos. OBJETIVO: Desta forma, o presente

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ trabalho tem por finalidade avaliar a qualidade microbiológica, quanto à presença de coliformes

totais e fecais, em diferentes pontos de águas do rio batoque, localizado na cidade de

Hidrolândia/CE. MATÉRIAS E MÉTODOS: Para o presente estudo foram coletadas 03

amostras de água de pontos diferentes do rio onde foram submetidas à Determinação do

Número Mais Provável (NMP) de coliformes totais e termotolerantes. Os pontos avaliados

foram: O ponto A, fica próximo a margem do rio; o B, em frente a uma criação de animais; e o

C, situado nas proximidades de uma rocha. Os resultados obtidos da quantificação dos valores

do Número Mais Provável (NMP) de Coliformes Totais (CT) e Coliformes Termotolerantes

(CTT) obtidos das 03 amostras avaliadas, detectou-se que 100% das amostras encontravam-se

dentro da categoria “imprópria” quanto a sua balneabilidade segundo a resolução do CONAMA.

Na análise bioquímica foi possível identificar bactérias como Klebsiella pneumoniae,

Escherichia coli, Providencia alcalifaclens e Hafnia alvei. As análises físico-químicas foram

realizadas seguindo as normas analíticas do Instituto Adolfo Lutz (IAL, 2005) e foram

determinados os seguintes parâmetros: nitrato, nitrito, pH, condutividade, cloreto, alcalinidade e

dureza. RESULTADOS E DISCUSSÃO: Os resultados das análises de coliformes totais

(CTT) e coliformes termotolerantes (CTT) variou de 3,4 x 10 a >1600 CTT/100mL. O Número

Mais Provável (NMP) de coliformes totais variou de >1600 a >1600 CTT/100mL.

Apresentando 100% (A, B, C) das amostras contaminadas. Com relação a concentração de

nitrato, nitrito, pH, condutividade, cloreto, alcalinidade e dureza, nas amostras de água coletadas

foi verificado, que todos os parâmetros apresentam valores aceitáveis pela legislação, segundo o

Ministério da Saúde, 2011. Sales, et al. (2012) avaliaram os parâmetros microbiológicos da

água do açude Cumbe no município do Barro, Ce, com coletas em pontos diferentes, e

verificaram que os valores de coliformes encontrados apresentaram resultados satisfatórios em

relação à qualidade microbiológica em todos os pontos coletados. Lima e Garcia (2008) ao

avaliarem a qualidade da água de açude e barragem, atribuírem elevados valores de pH a menor

quantidade de água em períodos de estiagem. Estes resultados não corroboram com os

encontrados nesse estudos. O mesmo foi observado por Damiani et al (2013) ao avaliar a

qualidade física e química da água provenientes de bebedouros consumidos por estudantes de

Goiânia-GO. CONCLUSÃO: Pode-se concluir por meio das análises realizadas, que as águas

que abastecem o rio Batoque estão sofrendo impactos em sua qualidade. Uma vez que, no grupo

de micro-organismos avaliados, são encontrados agentes infecciosos envolvidos em

enfermidades como diarreia e infecções urinárias. Portanto é necessário o desenvolvimento de

ações preventivas com intuito de esclarecer a população local sobre os riscos à saúde, que a

presença do esgoto doméstico, do despejo de lixo e dejetos de animais representa.


BRASIL. Portaria 36, de 19 de janeiro de 1990. Dispõe sobre a água para o consumo humano. Brasília, DF: Governo Federal, 1990. CONAMA. Resolução Nº 274, de 29 de novembro de 2000. Define os critérios de balneabilidade em águas brasileiras. Diário Oficial da União. Brasília, DF, 2001 LIMA, W.S.; GARCIA, C.A.B. Qualidade da água em Ribeirópolis: o açude do Cajueiro e a barragem do João Ferreira. 2008 119 f. Dissertação (Mestrado em Agroecossistemas) – Universidade Federal de São Cristovão - UFS, Sergipe, Brasil, 2008. REBOUÇAS, A. C.; BRAGA, B.; TUNDISI, J. G. Águas doces do Brasil: Capital ecológico, uso e conservação. São Paulo: Escrituras, 2001. 717p. STERZ ,C. ;GOMES, M. F. R. ; ROSSI, E. M. Análise microbiológica e avaliação de macroinvertebrados bentônicos como bioindicadores da qualidade da água do Riacho Capivara, município de Mondaí, SC-REV.Unoesc & Ciência – ACBS, Joaçaba, v. 2, n. 1, p.7-16, jan./jun. 2011;


TESTES PARA COLIFORMES A 35ºC E A 45ºC EM MELANCIAS MINIMAMENTE

PROCESSADAS COMERCIALIZADAS EM SUPERMERCADOS DA CIDADE DE

SOBRAL

Francisca Shely Oliveira Lima

Mateus Martins Cruz

Mariana Santiago Silveira

Leiliane Teles César

INTRODUÇÃO: A crescente busca por hortaliças e frutas frescas, associada à conveniência da

vida atual e praticidade, tem incentivado o interesse em produtos minimamente processados por

muitos consumidores (SANTOS, 2007). Esses produtos são pré-preparados por meio de

operações como descascamento, corte, sanitização, centrifugação e acondicionamento em

embalagens apropriadas à manutenção do produto em seu estado fresco (GOMES et al, 2005).

Os produtos minimamente processados são mais perecíveis do que os in natura, e a injúria nos

tecidos, em função da manipulação e cortes, pode diminuir a qualidade e o tempo de vida útil do

produto, por acelerar mudanças de degradação durante a senescência. Portanto, a segurança

microbiológica de produtos minimamente processados precisa ser garantida em adição à

manutenção da qualidade sensorial e nutricional deles (VANETTI, 2002). Uma das frutas que

mais facilmente se encontra minimamente processadas é a melancia, com essa grande oferta é

aberta uma discussão, se o que está sendo comercializado está seguro microbiologicamente, pois

a melancia é uma das frutas com maior atividade de água livre facilitando assim a proliferação

de micro-organismos deteriorantes e patogênicos. Segundo a RDC n° 12 (ANVISA, 2001) o

fruto minimamente processado é dito seguro se apresentar ausência de coliformes

termotolerantes e Salmonella em 25g da amostra. OBJETIVO: Este trabalho teve por objetivo

avaliar a qualidade microbiológica de melancias minimamente processadas adquiridas em

mercado local da cidade de Sobral no estado do Ceará e melancias manipuladas em laboratório

no Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia do Ceará-Campus Sobral, seguindo os

critérios das Boas Práticas de Fabricação (BPF’s) e da seleção da matéria-prima. MATERIAL

E MÉTODOS: No presente estudo foram utilizadas duas amostras onde a Amostra 1 foi a

Melancia processada em laboratório que passou por seleção da matéria-prima antes da aquisição

in natura, posteriormente foi higienizada, minimizada, pesada até peso total de 400 gramas,

armazenada sobre refrigeração em material estéril e encaminhada para as análises

microbiológicas de coliformes totais e fecais. Já a Amostra 2 foi a Melancia comercial,

adquirida em comercio local da cidade de Sobral, já minimamente processada e então foi pesada

as 400g respectivas, armazenada a frio e encaminhou-se para as análises de Coliformes que

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ foram realizadas de acordo com o proposto por SILVA e colaboradores (2001) no Manual de

métodos de analises microbiológicas em alimentos. As análises foram feitas acompanhando a

vida de prateleira do fruto durante 8 dias sendo realizadas em dias alternados a partir do dia 0,

com espaçamento de 3 dias entre o dia 4 e o dia 7, acompanhou-se o crescimento microbiano e a

perda de peso do fruto com o passar dos dias. RESULTADOS E DISCUSSÃO: Com os

resultados obtidos pode-se perceber que o crescimento microbiano deu – se a partir do dia 1

para as duas amostras na análise de Coliformes a 35°C. Porém até o dia 4 a amostra processada

em laboratório demonstrou contaminação menor com 75 NMP/g que a máxima permitida e

obtida pela amostra comercializada de ≥ 2400 NMP/g, sendo observada no mesmo período. E

ambas obtiveram o resultado máximo para á analise realizada no dia 7. Já os resultados para

Coliformes fecais (a 45°C) percebeu-se um número mais provável por grama (NMP/g) menor

que 0,3, ou seja, ausência ou presença muito pequena de microrganismos patogênicos tanto para

a melancia comercializada quanto para a processada em laboratório em todos os dias de vida de

prateleira acompanhados, estando assim de acordo com a legislação vigente para tal patógeno.

A contaminação por Coliformes a 35°C são relacionados á deterioração do fruto, o que já era

esperado com o passar dos dias de armazenamento mesmo com a cadeia de frio, pois obteve

resultado semelhante ao encontrado na literatura. Já os índices reduzidos de crescimento de

Coliformes termotolerantes (45°C), em todas as etapas, indica possivelmente que as amostras

foram processadas com base nas boas práticas de fabricação e higiene dos manipuladores e da

matéria-prima. O estudo de Nunes e colaboradores (2010) que também analisavam produtos

minimamente processados mostraram resultados semelhantes, com baixa contaminação por

coliformes a 35°C e ausência de coliformes termotolerantes (45°C). A partir dos resultados

obtidos pode – se concluir que houve diferença de crescimento microbiano entre as duas

amostras de melancia analisadas nos 8 dias, tanto a processada seguindo as normas das Boas

Práticas de Fabricação (BPF) quanto à amostra adquirida em comércio local, com relação à

qualidade microbiológica a partir do segundo dia de análises (dia1) para coliformes a 35°C e

não houve crescimento microbiano considerável de coliformes termotolerantes, assim como é

exigido pela legislação vigente. CONCLUSÃO: Portanto através dos resultados deste trabalho,

permitiu-se assegurar a segurança microbiológica para tais patógenos em melancias

minimamente processadas adquiridas em comercio local da cidade de Sobral e elaboradas em

laboratório, e sugerir a necessidade de controle de qualidade para as mesmas, observando as

boas práticas de fabricação e outros métodos eficientes para se assegurar um produto saudável e

seguro para o consumidor. Abrindo também a possibilidade da observação do crescimento de

microrganismos deteriorantes que reduzem a vida de prateleira do fruto minimamente

processado.


REFERÊNCIA BIBBLIOGRAFIA

ANVISA. RESOLUÇÃO RDC Nº 12, DE 02 DE JANEIRO DE 2001. D.O.U. - Diário Oficial da União; Poder Executivo, de 10 de janeiro de 2001. GOMES, C.A.O., ALVARENGA, A.L.B., JUNIOR, M.F., CENCI, S.A. HORTALIÇAS MINIMAMENTE PROCESSADAS. EMBRAPA. Coleção Agroindustria familiar. Brasília, DF. 2005. NUNES, E.E., VILA BOAS, E.V.B., XISTO, A.L.R.P., LEME, S.C., BOTELHO, M.C. AVALIAÇÃO DE DIFERENTES SANIFICANTES NA QUALIDADE MICROBIOLÓGICA DE MANDIOQUINHA-SALSA MINIMAMENTE PROCESSADA. Ciência agrotécnica. vol.34 n. 4. Lavras. Jul/Aug. 2010. SANTOS, T. B. A. QUALIDADE MICROBIOLÓGICA DE FRUTAS E HORTALIÇAS MINIMAMENTE PROCESSADAS COMERCIALIZADAS NA CIDADE DE CAMPINAS - SP. Dissertação de Mestrado. Faculdade de Engenharia de Alimentos. Universidade Estadual de Campinas. Campinas-SP. p.110, 2007. SILVA, N., JUNQUEIRA, V.C.A., SILVEIRA, N.F.A. MANUAL DE MÉTODOS DE ANÁLISE MICROBIOLÓGICA DE ALIMENTOS. Revista Ampliada. Editora Varela. 2ª Edição. 2001. VANETTI, M. C. D. ASPECTOS MICROBIOLÓGICOS DE PRODUTOS MINIMAMENTE PROCESSADOS. In: Anais do Seminário Internacional de Pós-Colheita e Processamento Mínimo de Frutas e Hortaliças, Brasília DF. 2002.


TOXICIDADE DO ÓLEO ESSENCIAL DE Lippia alba L. (VERBENACEAE) FRENTE

A Artemia salina L

Patrícia Silva Costa

Rafael Pereira

Halisson Araújo de Souza

Elnatan Bezerra de Souza


INTRODUÇÃO: O conhecimento e uso de plantas medicinais são corriqueiramente

empregados na medicina popular por apresentarem efeito sobre diversas enfermidades devido a

presença de uma variedade de compostos bioativos. Esses compostos ou metabólitos

secundários, são produzidos naturalmente pelas plantas durante seu crescimento em resposta a

predadores ou sob condições de stress. A espécie Lippia alba L. ou erva-cidreira, é uma fonte

abundante desses metabólitos especiais. Seu óleo essencial é reportado na literatura por

apresentar amplo espectro de atividade antimicrobiana, cuja eficácia varia em função da sua

composição, que sofre influência de fatores bióticos e abióticos (MACHADO et al., 2014).

Todavia, a utilização desses vegetais pode resultar em efeitos adversos (LIMA et al., 2006), por

essa razão, há a necessidade de promover pesquisas no intuito de compreender tais efeitos.

Diante disso, segundo Barbosa e colaboradores. (2009), o ensaio de toxicidade sobre a Artemia

salina L. é um método viável, prático e econômico para determinar a toxicidade geral dos

compostos de produtos naturais, sendo considerado um bioensaio preliminar no estudo de

derivados vegetais utilizados na medicina popular e para indicação de uma grande variedade de

compostos biologicamente ativos em extratos (MACIEL et al., 2002). OBJETIVO: Esse

trabalho teve como objetivo investigar a toxicidade do óleo essencial de Lippia alba L. frente

aos náuplios de Artemia salina L., apresentando a concentração letal capaz de matar 50% desses

microcrustáceos. MATERIAIS E MÉTODOS: A espécie vegetal foi coletada no Sítio Santa

Cruz, no município de Meruoca, Ceará e identificada no Herbário da Universidade Estadual

Vale do Acaraú-UVA, sob o tombo 18716. O óleo essencial foi extraído através do método de

arraste a vapor, utilizando folhas frescas. Para realização do teste de toxicidade, utilizou-se a

metodologia proposta por Mc Laughlin (1991), na qual os ovos de A. salina são postos em água

salina artificial e eclodem após 48 horas, em seguida coleta-se as larvas para os bioensaios. As

dissoluções das amostras e do teste em branco são realizadas com 3,9 mL de água salina, 1mL

de água salina com artêmias e 0,1 mL de DMSO concentrado. Procedimento realizado sempre

em triplicata nas concentrações de 1000, 100, 10 e 1 ppm, e adicionadas 10 artêmias em cada

frasco, sendo a contagem das sobreviventes realizada após 24 horas. Após a análise dos

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ resultados, o procedimento é repetido em concentrações intermediárias na tentativa de encontrar

a concentração que mata 50% dos microcrustáceos. Para o cálculo das CL50 utilizou-se o

Programa Microsoft Excel através do cálculo de regressão linear com a seguinte fórmula: 5 - b /

a, onde, a e b são valores da equação de primeiro grau y = ax + b, sendo considerado ativo

quando CL50 < 1000 µg/ mL. RESULTADOS E DISCUSSÃO: A toxicidade do óleo

essencial de L. alba L., mediante às larvas de A. salina, mostrou que a concentração letal capaz

de matar 50% das larvas (CL50) foi de 53,01 µg/mL indicando forte atividade de toxicidade por

estar abaixo do limite padrão de 1000 µg/mL, proposto por Mc Laughlin (1991). Os resultados

encontrados aqui corroboraram com os achados no trabalho de Costa et al. (2009), onde

utilizaram o OE de Lantana camara, também pertencente à família Verbenaceae, frente aos

mesmos microscrustáceos, porém seguindo a metodologia de Meyer et al. (1982), revelando a

concentração letal (CL50) de 14 µg/ mL, no entanto, os autores aplicaram em seu estudo

concentrações de 100; 50; 25 e 10 µg/mL, valores inferiores aos utilizados nesse estudo.

CONCLUSÃO: O teste de toxicidade mostrou que o óleo essencial de L. alba possui alta

toxicidade frente a A. salina, sugerindo que os constituintes presentes nesse óleo têm atividade

antifúngica e larvicida. Porém, conforme informado anteriormente, esse teste é um experimento

simples e preliminar, gerando a necessidade de realizar estudos aprofundados que indiquem a

viabilidade desse OE diante dessas atividades, levando a comprovar sua segurança toxicológica.


BARBOSA, T. P., JUNIOR, C. G., SILVA, F. P. et al. Improved synthesis of seven aromatic Baylis–Hillman adducts (BHA): evaluation against Artemia salina Leach. and Leishmania chagasi. European journal of medicinal chemistry. p. 1726-1730, 2009. COSTA, J. G., SOUSA, E. O. D., RODRIGUES, F. F., LIMA, S. D., & BRAZ-FILHO, R. Composição química e avaliação das atividades antibacteriana e de toxicidade dos óleos essenciais de Lantana camara L. e Lantana sp. Braz J Pharmacogn, p. 721-725, 2009. LIMA, M. R. F., SOUZA L., J., SANTOS, A. F. et al. Anti-bacterial activity of some Brazilian medicinal plants. Journal of Ethnopharmacology. p. 137-147, 2006. MACHADO, T. F.; NOGUEIRA, N. A.P; PEREIRA, R. C. A. et al. The antimicrobial efficacy of Lippia alba essential oil and its interaction with food ingredientes. Brazilian Journal of Microbiology, p. 699-705, 2014. MCLAUGHLIN, J.L. Crown gall tumors on potato discs and brine shrimp lethality: two simple bioassays for higher plant screening and ractionation. In: Hostettmann, K., Ed. Methods in Plant Biochemistry. London: Academic Press, p. 1-36, 1991. MACIEL, M. A. M., PINTO, A. C. e VEIGA JR, V. F. et al. Plantas Medicinais: a necessidade de estudos multidisciplinares. Quim. Nova, p. 429-438, 2002.

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