CITOLOGIA CITOLOGIA BACTERIANABACTERIANA

UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO SUL

INSTITUTO DE CIÊNCIAS E TECNOLOGIA DE ALIMENTOS

Patrícia da Silva Malheiros

Eucariotos x Procariotos

CCéélula Eucarilula Eucarióóticatica

FungosProtozoáriosAlgas

CCéélula Procarilula Procarióóticatica

CápsulaPiliMembrana externa

Camada de peptídeoglicano

Parede celular

FlageloDNA

Plasmídeo

Citoplasma

Ribossomos

Membrana plasmática

VVíírusrus

ComparaComparaçção dos Tamanhosão dos Tamanhos

Vírus

Bactéria

Levedura

Esporo vegetal

Gota de água

Tamanhos das células

Eucariotos: 10 a 100µm (micrômetros)Bactérias: 0,2 a 2 µmVírus: 50 a 100nm (nanômetros)

PresenteAusenteLisossomo

PresenteAusenteComplexo de golgi

PresenteAusenteRetículo endoplasmático

Presente (plantas)AusenteCloroplasto

Presente, composto de proteínas AusenteMitocôndria

Presente (com carioteca)AusenteNúcleo

DNA linearDNA circularDNA

5 a 100 micrômetros1 a 10 micrômetrosTamanho da Célula

protozoários, fungos, plantas e animaisbactériasOrganismo

EucariotosProcariotos

VEREMOS:Morfologia celular e arranjos bacterianosEstruturas internas

Nucleóide (DNA)RibossomosCorpos de inclusão

Estruturas envoltóriasMembrana citoplasmáticaParede celularMembrana externa Gram -

Estruturas complementares (não estão em todas as bactérias)FlagelosFímbrias (pili)CápsulaEndósporos

Morfologia celular e Arranjos bacterianos

• Células arredondadas – cocos

• Células alongadas - bacilos, bastonetes

• Células monoencurvadas – vibriões

• Células poliencurvadas (helicoidal) - espirilos e espiroquetas

• Células intermediárias - cocobacilos

Morfologia celular

Arranjos Bacterianos

tétrades

sarcinas

cocos

estreptococos

estafilococos

diplococos

Arranjos Bacterianos

L. monocytogenes

Salmonella

Bacillus sp.

FORMAS MENOS FREQUENTES

- Formas de estrela: Stella- Bactéria retangular: Haloarcula

Fig. 5. A. Célula em forma de estrela. B. Célula em forma retangular.

A B

Estruturas internas

CITOPLASMA- Porção fluida da célula, limitada pela membrana

plasmática;

- Cerca de 80% é composto de H2O, contendo primariamente enzimas, carboidratos, lipídeos e íons inorgânicos.

- Estruturas: DNA, ribossomos e depósitos de reserva

Estruturas internas- Estruturas: - DNA:

uma única molécula1mm de comprimento (desdobrada)

- RibossomosResponsáveis pela síntese protéicaComposição

RNA: 60%Proteína: 40%

- Depósitos de reserva - Substância de reserva

Membrana citoplasmática

Barreira delgada que separa o interior do exterior da célula. Se rompida - extravasamento do conteúdo citoplasmático → morte.É seletiva, concentrando metabólitos específicos e excretando degetos.

Estruturas envoltórias

Estrutura da membrana celular

Composição química:Bicamada fosfolipídica

Polar

Apolar

• É fluida

Membrana citoplasmática

Barreira: impede extravasamento passivo dos constituintes citoplasmáticosSítio de localização de várias proteínas (enzimas e transporte)Conservação de energia

FUNÇÃO

Membrana citoplasmática

Molécula hidrofóbicas atravessam a mb por difusão;Moléculas hidrofílicas conseguem atravessa-la somente com transportadores específicos

FUNÇÃO

aquaporinas

Parede celular

Estrutura complexa, semi-rígida, responsável pela forma da célula;Protege a mb e o interior da célula das alterações adversas no ambiente externo;Principal função: prevenir ruptura das células bacterianas quando a pressão da água dentro da célula é maior que fora dela.

Parede celular

COMPOSIÇÃOPeptideoglicano (ou “mureína”)

Peptideoglicano: arcabouço, onde as cadeias de glicano formadas pelos açúcares são interligadas por ligações peptídicas cruzadas, formada pelos aminoácidos.

Parede celular

Parede celular

Relação entre estrutura da parede celular e coloração de gram:

Técnica desenvolvida em 1884 pelo médico dinamarquês Hans Christin Joachim Gram (1853-1938)

Relação entre estrutura da parede celular e coloração de gram:

Fixação

Cristal Violeta/Viotela genciana

Solução de Iodo

Descoloração –Álcool acetona

Safranina (Contra-corante)

Relação entre estrutura da parede celular e coloração de gram:

Técnica desenvolvida em 1884 pelo médico dinamarquês Hans Christin Joachim Gram (1853-1938)

Cultura Meio sólido Cultura Meio líquido

Inocular c/ alça1 agulha

da cultura 1 gota de

água

Inocular c/ agulha

1 – 2 alçadas da cultura

Espalhar a mistura: água + bactéria

Espalhar gota de cultura liquida

secar

Fixação por calor

(a) (a)

(b) (b)

(c)

(d)

Esfregaço passo a passo

(a) Corar com violeta genciana: 30 segundos

(b) Lavar com águapor 5 segundos

(c) Fixar com Lugol por 1 minuto

(d) Lavar com águapor 5 segundos

(e) Descorar com álcool-cetona: 15-30s

(f) Lavar com água por 5 segundos

(g) Corar com fucsina por 30 segundos

(h) Lavar com água por 5 segundos

(i) Secar com papel por pressão (não esfregar)

Coloração por Gram passo a passo

Gram

A

B

Cocobacilos gram-negativos.

Bacilos gram-positivos

Membrana externa de bactérias Gram Negativas

Composta por lipoproteínas, lipopolissacarídeos (LPS) e fosfolipídios. Corresponde a uma segunda bicamada lipídica.Diferencia-se da membrana citoplasmática,

pois além de fosfolipídeos, contém polissacarídeos e proteínas.

LPS

Lipídeo A

Antígeno O

Centro

Tb chamado “endotoxina” – em infecções ele que causa a febre.Ex.: Salmonella

Ajuda na identificação

Ajuda na identificação sendo mais variável que o centro.

Ex. E. coli O157H7flagelo

Flagelos

Estruturas complementaresMOTILIDADE

Fímbrias e Pili

Estruturas complementaresFIXAÇÃO E ADESÃO

PiliFímbrias

- Conjugação dos procariotos (transferência de DNA/plasmídeos – pili sexual).

Cápsula

Estruturas complementaresADESAO CELULAR

ENDÓSPOROS

Estruturas complementares

- Formados dentro da membranacelular quando em situações desfavoráveis;

- Esporulação (formação do esporo) e Germinação (retorno ao estado vegetativo).

ENDÓSPOROS

Estruturas complementares

Principais gêneros esporulados

Bacillus (ex: B. subtilis, B. anthracis, B cereus, etc.).

Clostridium(ex: C. botulinum, C. tetani, C. perfringens, etc.).