14/12/2012

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UNIVERSIDADE DO ESTADO DO RIO DE JANEIRO

INSTITUTO DE BIOLOGIA ROBERTO ALCNTARA GOMES

DEPARTAMENTO DE HISTOLOGIA E EMBRIOLOGIA

Disciplina Mtodos para o Estudo da Clula

MICROSCOPIA ELETRNICA

Prof Las de Carvalho

MICROSCOPIOS ELETRNICOS

MICROSCOPIO ELETRNICO DE

TRANSMISSO - MET

MICROSCOPIO ELETRNICO DE

VARREDURA - MEV

Microscpio de Luz PROCESSAMENTO para M. OPTICA ou de LUZ:

FIXAO - formol

DESIDRATAO - etanol

INCLUSO - parafina

MICROTOMIA = 5um - 7um

COLORAO = H-E

OBSERVAR ao MO

MEVMO

MET

Hemcias

ou Microscpio de Luz

Tipos de Microscpios

A microscopia eletrnica de transmisso e de varredura se baseia na interao entre eltrons e

componentes dos tecidos.

Microscopia Eletrnica de Transmisso

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Obteno de amostras biolgicas para microscopia eletrnica de transmisso

Coleta do material

ME TRANSMISSO

FIXAO

GLUTARALDEIDO

(fixa proteinas)

PS-FIXAO

TETRXIDO DE SMIO

(fixa lipdeos)

DESIDRATAO

ETANOL

INCLUSO

EPON

ULTRAMICROTOMIA 50nm -70nmobteno de cortes ultrafinos

CONTRASTAO

OBSERVAR ao M ET

MICROSCOPIO ELETRNICO DE

TRANSMISSO ( MET)

.Fixao do material

Glutaraldeido

Tetrxido de smio

.Incluso

Epon

.Ultramicrotomia

.Contrastao

Uranila

Chumbo

Microscpio Eletrnico de Transmisso ULTRAMICRTOMO

obteno de cortes ultrafinos

TIPOS de FACA para MET :

VIDRO

DIAMANTE

Facas de VIDROFacas de DIAMANTE

cortes semifinos

PIRAMITOME

Preparao de cortes semifinos para

localizar a regio de interesse para

depois fazer cortes ultrafinos.

Aparelho para aparar os blocos

de MET.

rea para obter cortes ultrafinos

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ME TRANSMISSO

FIXAO

GLUTARALDEIDO - (fixa proteinas)

PS-FIXAO

TETRXIDO DE SMIO - (fixa lipdeos)

DESIDRATAO

INCLUSO = EPON

ULTRAMICROTOMIA 50nm -70nm

CONTRASTAO

OBSERVAR ao M ET

M OPTICA ou de LUZ

FIXAO

FORMOL

-----------------

DESIDRATAO

INCLUSO = PARAFINA

MICROTOMIA = 5um - 7um

COLORAO = H-E

OBSERVAR ao MO

COMPARAO entre os PROCESSAMENTOS para MO e MET:

Microscpio de varredura de vcuo varivel, LEO 1450VP - UERJ

Microscpio Eletrnico de Varredura

Microscopia Eletrnica de Varredura Microscopia Eletrnica de Varredura

ME TRANSMISSO

FIXAO

Glutaraldeido

PS-FIXAO

Tetrxido de smio

DESIDRATAO

INCLUSO - epon

ULTRAMICROTOMIA50nm -70nm

CONTRASTAO

OBSERVAR ao M ET

M OPTICA ou de LUZ

FIXAO

FORMOL

-----------------

DESIDRATAO

INCLUSO = PARAFINA

MICROTOMIA =

5um - 7um

COLORAO = H-E

OBSERVAR ao MO

COMPARAO entre os PROCESSAMENTOS para MO, MET e MEV:

ME VARREDURA

FIXAO

Glutaraldeido

PS-FIXAO

Tetrxido de smio

DESIDRATAO

PONTO CRITICO

METALIZAO

OBSERVAR ao M EV

MET

MEV

Clulas do

EPITLIO RESPIRATRIO

MO