Aula Técnicas de coleta, fixação e coloração em citologia clínica

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TCNICAS DE COLETA, FIXAO E COLORAO EM CITOLOGIA CLNICA

Citologia Crvico-VaginalProfa. Janaina Cristiana de Oliveira Crispim Freitas [email protected]

COLO UTERINO

Ectocrvice Endocrvice Juno Escamo Colunar (JEC)

TCNICAS DE COLETA Esfoliativa

Abrasiva

Objetivo da Tcnica de coleta Citologia Onctica

Citologia Hormonal

VANTAGENS X DESVANTAGENS Esfoliativa:

Vantagens: Boa representatividade; + eficaz na deteco de tumores ocultos do endomtrio, das tubas e ovrios. Desvantagem: O mau estado de conservao das clulas.

VANTAGENS X DESVANTAGENSAbrasiva

Vantagem: Deteco precoce de leses.

Desvantagem:Exige prtica e destreza manual.

COLETA E ESFREGAOPapanicolaou Convencional

1) Esptula de Ayre

2) Swab

3) Esptula CervexAmostragem simultnea do canal endocervical e da ectocrvice

4) Escova endocervical

COLETA E ESFREGAOPapanicolaou Convencional

Esptula de Ayre

Escova Endocervical

COLETA E ESFREGAOPapanicolaou Convencional - Esfregao

Amostragem simultnea do canal endocervical e da ectocrvice

COLETA E ESFREGAOPapanicolaou Convencional - Esfregao

1)

2)

3)

Fixao e Fixadores Funo:

Preservar as caractersticas morfolgicas das clulas. Fixador ideal:

No pode ser txico, no pode ser voltel a T.A. e baixo custo.

Fixadores + usados ETANOL 70 A 90% ETANOL DESNATURADO 95% PROPANOL 80% AEROSSIS (ISOPROPANOLOL E PROPILENOGLICOL)

Fixadores habituais para esfregaos cervicais

A FIXAO COM UM AEROSSOL DEVE OBEDECER A CERTAS REGRAS:

COLETA E ESFREGAOPapanicolaou Lquida - Esfregao ou

COLETA E ESFREGAOPapanicolaou Convencional X Lquida

Convencional

Lquida

COLETA E ESFREGAOPapanicolaou Convencional X LquidaLQUIDA

Thin Prep Autocyte DNA Citoliq

ESFREGAOM fixao

Convencional

Lquida

ESFREGAOObscurecimento por Sangue

Convencional

Lquida

ESFREGAOObscurecimento por Exsudato

Convencional

Lquida

COLORAO O processo facilita o reconhecimento dos componentes celulares. No geral: Os ncleos: captam os elementos basoflicos dos corantes.

O citoplasma pode adquirir uma cor rosa (eosinoflico) ou azul (cianoflico)

COLORAOTipos de corantes usados na citologia: Colorao de Shorr: produz um bom

contraste na colorao citoplasmtica das clulas escamosas.

Colorao de Papanicolaou: empregada

de forma universal na citologia ginecolgica

COLORAO DE PAPANICOLAOUAlcool 70 - 2 min gua 2 min Hematoxilina de Harris gua 5 min

EA50 - 4 min

lcool 95 - 2 min

Orange G - 3 min

lcool 95 - 2 min

lcool 95 - 2 min

lcool Absoluto - 2 min (mnimo)

Montagem e Fixao da lmina

Princpio do Mtodo - ColoraoAlcool 70 gua

HidrataoHematoxilina de Harris

Meio aquoso para colorao dos ncleosOxidao pelo xido de mercrio (hematena) = cor azul. Laranja = citoplasma de clulas queratinizadas e grnulos das clulas superficiais.Eosina + Verde Luz Epiteliais superf /hemcias/clios Epiteliais ativas/leuco/microrgan.

Colorao dos ncleos

Orange G

Colorao do citoplasma

EA36/65

lcool 95

lcool 95 lcool Absoluto

Desidratao

Meio lcolico - montagem

Princpios de Rastreamento I ETAPA:

Identificao Formulrio com os dados clnicos Rastreamento na objetiva de 10 Rastreamento pode ser vertical ou horizontal Anormalidades devem ser confirmadas na objetiva de 40.

Princpios de Rastreamento Clulas anmalas ou no habituais devem ser marcadas com pontos de tinta, sempre posicionados da mesma forma

por todos os funcionrios do laboratrio

CITOLOGIA CRVICO-VAGINAL

CLULAS NORMAIS

CRITRIOS DE ADEQUAO DA AMOSTRASatisfatrio Clulas Epiteliais Escamosas

7 campos ou mais com equivalente celularidade. Aumento de 40

8 campos ou mais com equivalente celularidade Aumento de 40System

American Society of Cytpathology, NCI, Bethesda http://www.cytopathology.org/NIH/view.php?patientId=117

CRITRIOS DE ADEQUAO DA AMOSTRA

CRITRIOS DE ADEQUAO DA AMOSTRA

Insatisfatrio

CRITRIOS DE ADEQUAO DA AMOSTRAInsatisfatrio Clulas Epiteliais Escamosas

Celularidade escassa. Aumento de 10 vezes.

Aproximadamente 75 clulas. Aumento de 4x System

American Society of Cytpathology, NCI, Bethesda http://www.cytopathology.org/NIH/view.php?patientId=117

CRITRIOS DE ADEQUAO DA AMOSTRAInsatisfatrio Obscurecimento e ArtefatosSangue e Leuccitos Sangue

Artefato de Fixao

Contaminao

CRITRIOS DE ADEQUAO DA AMOSTRAEsfregaos Inadequados

Causa Fixao incorreta Esfregao muito espesso

Preveno Aplicar o fixador imediatamente lmina Espalhar o material bem delgada e rapidamente lmina Evite coletar material durante a menstruao Espalhe o esfregao delicada, mas rapidamente Colha material durante, ou antes, da ovulao Use menos lubrificante, ou gua quente no espculo Retire delicadamente o tampo de muco antes de coletar o material

Sangue demasiado Artefato de esfregao

Citlise excessiva

Lubrificante excessivo

Polimorfos em demasia

Perfil Celular

Obrigada!!!!