102
UNIVERSIDADE DO ESTADO DO RIO DE JANEIRO FACULDADE DE CIÊNCIAS MÉDICAS PÓS-GRADUAÇÃO EM FISIOPATOLOGIA CLÍNICA E EXPERIMENTAL FISCLINEX Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina Isabel Jereissati Santos Rio de Janeiro 2008

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

  • Upload
    lydieu

  • View
    219

  • Download
    0

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

UNIVERSIDADE DO ESTADO DO RIO DE JANEIRO

FACULDADE DE CIÊNCIAS MÉDICAS

PÓS-GRADUAÇÃO EM FISIOPATOLOGIA CLÍNICA E EXPERIMENTAL

FISCLINEX

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da

leptina

Isabel Jereissati Santos

Rio de Janeiro 2008

Page 2: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Livros Grátis

http://www.livrosgratis.com.br

Milhares de livros grátis para download.

Page 3: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

UNIVERSIDADE DO ESTADO DO RIO DE JANEIRO

FACULDADE DE CIÊNCIAS MÉDICAS

PÓS-GRADUAÇÃO EM FISIOPATOLOGIA CLÍNICA E EXPERIMENTAL

FISCLINEX

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da

leptina

Isabel Jereissati Santos

Dissertação de mestrado apresentada à Pós-Graduação

em Fisiopatologia Clínica e Experimental/PG-FISCLINEX

da Universidade do Estado do Rio de Janeiro.

Orientadores: Profa Dra. Virgínia Genelhu de Abreu

Profa Dra. Patrícia Cristina Lisboa Profa Dra. Márcia Mattos Gonçalves Pimentel

Rio de Janeiro

2008

Page 4: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

i

Page 5: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

ii

CATALOGAÇÃO NA FONTE

UERJ/REDE SIRIUS/BIBLIOTECA CB/A

S237 Santos, Isabel Jereissati.

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina / Isabel Jereissati Santos. – Rio de Janeiro - 2008.

xiii,84f. : il. Orientador: Virgínia Genelhu de Abreu. Orientador: Patrícia Cristina Lisboa. Orientador: Márcia Mattos Gonçalves Pimentel. Dissertação (mestrado) – Universidade do Estado do Rio de Janeiro, Faculdade

de Ciências Médicas.

1.Polimorfismo (Genética) – Teses. 2.Proteínas – Teses. 3. Obesidade – Aspectos genéticos – Teses. 4.Tireóide – Metabolismo – Teses. I. Abreu, Virgínia Genelhu de, 1949- II. Lisboa, Patrícia Cristina. III. Pimentel, Márcia Mattos Gonçalves. IV. Universidade do Estado do Rio de Janeiro, Faculdade de Ciências Médicas. V. Título.

CDU 571.1

Page 6: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

iii

UNIVERSIDADE DO ESTADO DO RIO DE JANEIRO

FACULDADE DE CIÊNCIAS MÉDICAS

PÓS-GRADUAÇÃO EM FISIOPATOLOGIA CLÍNICA E EXPERIMENTAL

FISCLINEX

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de

polimorfismo no gene do receptor da leptina

Isabel Jereissati Santos

Orientadores: Dra. Virgínia Genelhu de Abreu (Profa Adjunto do Departamento de Medicina Interna-FCM/UERJ) Dra. Patrícia Cristina Lisboa (Profa Adjunto do Departamento de Ciências Fisiológicas-IBRAG/UERJ) Dra. Márcia Mattos Gonçalves Pimentel (Profa Adjunto do Departamento de Biologia Celular e Genética-IBRAG-UERJ) Banca examinadora: Dr. Pedro Herman Cabello (Pesquisador Titular do Departamento de Genética-FIOCRUZ) Dr. Egberto Gaspar de Moura (Prof Titular do Departamento de Ciências Fisiológicas IBRAG/UERJ) Dr. Emílio Antônio Francischetti (Prof Titular de Medicina Interna -FCM/UERJ) Suplentes: Dra. Magna Cottini de Fonseca Passos (Profa Adjunto do Departamento de Nutrição Aplicada-INU/UERJ) Dra. Carmen Cabanelas Pazos-Moura (Profa Associado do Programa de Biofísica Celular e de Sistemas-IBCCF/UFRJ)

Rio de Janeiro 2008

Page 7: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

iv

DEDICATÓRIA

“Você precisa ser a mudança

que gostaria de ver no mundo"

Mahatma Gandhi

Page 8: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

v

AGRADECIMENTOS

À professora Virginia Genelhu de Abreu, pela oportunidade de desenvolver este estudo, pela orientação primorosa e principalmente por usufruir de seus conhecimentos; À professora Patrícia Cristina Lisboa, pela imensurável dedicação ao ensinar e pelo seu apoio através de seus conhecimentos; À professora Márcia Mattos Gonçalves Pimentel, pelos valiosos ensinamentos sobre Genética, os quais contribuíram significativamente para elaboração desta dissertação; Ao professor Emílio Antônio Francischetti, pelas enriquecedoras discussões sobre obesidade, fundamentais para o desenvolvimento deste trabalho; Ao professor Pedro Herman Cabello, pela paciência e pelos valiosos ensinamentos sobre estatística; A todos os pacientes, muito obrigada pela disponibilidade e paciência durante a coleta de dados e realização do estudo; À nutricionista Elizabete Goes da Silva, pela amizade, e por ter compartilhado conhecimentos, alegrias, dificuldades e ansiedades ao longo de todo o período de realização do mestrado; Ao bolsista de iniciação científica Bruno Celoria, pelo auxílio e participação no desenvolvimento deste estudo; Aos meus pais, Nico e Vera, pelo apoio, incentivo e compreensão; À secretária da pós-graduação Amélia Gomes, por toda ajuda e eficiência profissional; Às biólogas Maria de Lourdes Guimarães e Débora Valença, às nutricionistas Márcia Simas, Lívia Nogueira e Marcela Knibel e à bolsista de iniciação científica Renata Pina, pelos momentos de descontração, amizade e convivência agradável; Aos secretários Silvana, Fátima, Solange, Rubens e Eliane, pela disposição em ajudar e colaborar direta e indiretamente para a realização de algumas etapas desta pesquisa; Ao biólogo Vagner Ismerim Lobão, por ter gentilmente auxiliado e contribuído para a realização de exames bioquímicos no Laboratório Central do Hospital Pedro Ernesto.

Page 9: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

vi

SUMÁRIO

Páginas

LISTA DE TABELAS……………………………………………………………….................viii

LISTA DE ILUSTRAÇÕES................................................................................................ix

LISTA DE SIGLAS E ABREVIATURAS.............................................................................x

RESUMO.........................................................................................................................xii

ABSTRACT.....................................................................................................................xiii

1. INTRODUÇÃO..............................................................................................................1

1.1. Epidemia mundial de obesidade..........................................................................3

1.2. Fatores genéticos associados à obesidade ........................................................6

1.3. O tecido adiposo como órgão endócrino..............................................................6

1.4. Leptina..................................................................................................................8

1.4.1. Efeitos da leptina .......................................................................................10

1.4.2. O receptor da leptina e seu gene (LEPR).................................................12

1.4.3. Polimorfismo c.668A>G (p.Q223R) no gene LEPR....................................14

1.5. Função tireoideana e obesidade .......................................................................16

1.6. Leptina e o eixo hipotálamo-hipófise-tireóide.....................................................17

2. OBJETIVOS................................................................................................................20

3. CASUÍSTICA...............................................................................................................22

4. DESENHO DO ESTUDO E PLANO DE TRABALHO.................................................25

5. MÉTODOS..................................................................................................................26

5.1. Avaliação molecular...........................................................................................27

5.2. Avaliação antropométrica ..................................................................................30

5.3. Avaliação hemodinâmica....................................................................................31

5.4. Avaliação metabólica e hormonal ......................................................................31

5.4.1. Metabolismo glicídico..................................................................................31

5.4.2. Metabolismo lipídico...................................................................................32

5.4.3. Ácido úrico..................................................................................................32

5.4.4. Uréia ..........................................................................................................32

5.4.5.Creatinina....................................................................................................32

5.4.6.Leptina sérica..............................................................................................33

Page 10: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

vii

5.4.5. Adiponectina plasmática.............................................................................33

5.4.6.Hormônio estimulador da tireóide..............................................................33

5.4.7. Hormônios tireoidianos..............................................................................34

5.5. Análise estatística dos dados..............................................................................34

6. RESULTADOS............................................................................................................36

6.1. Casuística...........................................................................................................37

6.2. Análise molecular do polimorfismo c.668A>G (p.Q223R) no gene LEPR.........41

7. DISCUSSÃO...............................................................................................................48

7.1. Casuística...........................................................................................................49

7.2. Análise dos indivíduos obesos quanto à presença do polimorfismo (p.Q223R)

no gene LEPR ....................................................................................................53

7.3. Função tireoideana e polimorfismo (p.Q223R) no gene LEPR...........................54

8. CONCLUSÕES...........................................................................................................57

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS................................................................................59

ANEXOS..........................................................................................................................79

Page 11: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

viii

LISTA DE TABELAS

Tabela 1. Neuropeptídeos orexigênicos e anorexigênicos regulados pela leptina.........10 Tabela 2. Valores de normalidade das concentrações circulantes de TSH e hormônios tireoideanos livres............................................................................................................34 Tabela 3. Características antropométricas, metabólicas e hemodinâmicas de todos participantes do estudo...................................................................................................38 Tabela 4. Correlações de Pearson entre as variáveis antropométricas, metabólicas e hemodinâmicas avaliadas nos pacientes eutróficos (n= 32)...........................................40 Tabela 5. Correlações de Pearson entre as variáveis antropométricas, metabólicas e hemodinâmicas avaliadas nos pacientes obesos (n= 115).............................................41 Tabela 6. Parâmetros antropométricos, metabólicos e hemodinâmicos dos indivíduos obesos de acordo com o genótipo..................................................................................43 Tabela 7. Parâmetros antropométricos, metabólicos e hemodinâmicos dos indivíduos obesos de acordo com a presença do alelo G................................................................45

Page 12: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

ix

LISTA DE ILUSTRAÇÕES

Figura 1. Ação central da leptina ...................................................................................12 Figura 2. Mecanismo de ação da leptina via JAK2/STAT3............................................14 Figura 3. Representação esquemática dos padrões de bandas obtidas por gel de poliacrilamida...................................................................................................................30 Figura 4. Exemplo de gel de poliacrilamida com o resultado da análise do polimorfismo c.668A>G (Q223R) no gene LEPR.................................................................................42 Figura 5. Comparação entre as concentrações plasmáticas de TSH nos grupos de acordo com o genótipo....................................................................................................44 Figura 6. Comparação entre as concentrações plasmáticas de T4L nos grupos de

acordo com o genótipo....................................................................................................44

Figura 7: Comparação entre as concentrações plasmáticas de TSH nos grupos de

genótipo AA e genótipo AG + GG...................................................................................47

Figura 8: Comparação entre as concentrações plasmáticas de T4L nos grupos de

genótipo AA e genótipo AG + GG ..................................................................................47

Page 13: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

x

LISTA DE SIGLAS E ABREVIATURAS

α-MSH- α-Melanocyte stimulating hormone (hormônio estimulador da melanocortina)

AgRP- Agouti related protein (peptídeo relacionado à proteína agouti)

AMPc- Cyclic adenosine monophosphate (adenosina monofosfato cíclico)

CART- Cocaine and amphetamine-regulated transcript (fator de transcrição regulado

por anfetamina e cocaína)

CC- Circunferência da cintura

DCV- Doenças cardiovasculares

Eixo HHT- Eixo hipotálamo hipófise tireóide

FC- Freqüência cardíaca

GABA- γ-aminobutyric acid (ácido gama-aminobutírico)

HOMA-IR - Homeostasis model assessment – Insulin resistance (modelo de avaliação

homeostática – resistência à insulina)

HDL-C- High density lipoprotein cholesterol (lipoproteína de alta densidade)

HTs- Hormônios tireoideanos

IMC- Índice de massa corporal

JAK2- Janus quinase 2

JNC 7- Seventh report of the Joint National Committee on Prevention, Detection,

Evaluation, and Treatment of High Blood Pressure

LDL-C- Low density lipoprotein cholesterol (lipoproteína de baixa densidade)

LEPR – Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em seres humanos)

lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores)

MC4R- Melanocortin receptor 4 (receptor de melanocortina 4)

NCEP- ATPIII- National Cholesterol Education Program- Adult Treatment Panel III NHANES- National Health and Nutrition Survey (Pesquisa Nacional de Saúde e

Nutrição)

NPY- Neuropeptide Y (neuropeptídeo Y)

NYHA - New York Heart Association (Associação do Coração de Nova York)

WHO- World Health Organization (Organização Mundial da Saúde)

ObR- Leptin receptor (receptor da leptina)

Page 14: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

xi

PAD- Pressão arterial diastólica

PAI-1- Plasminogen activator inhibitor-1 (inibidor do ativador de plasminogênio-1)

PAM- Pressão arterial média

PAS- Pressão arterial sistólica

PCR- Polymerase chain reaction (reação em cadeia da polimerase)

POF - Pesquisa de Orçamento Familiar

POMC- Proopiomelanocortin (pró-ópiomelanocortina)

RCQ- Razão cintura-quadril

RIE- Radioimmunoassay (radioimunoensaio)

RNAm- Messenger ribonucleic acid (ácido ribonucleico mensageiro)

SNC- Sistema nervoso central

SOCS-3- Supressor of cytokine signaling-3 (supressora da sinalização de citocina 3).

STAT3- Signal transducer and activator of transcription 3 (transdutor do sinal e ativador

da transcrição 3)

T3- Triiodotironina

T4- Tiroxina

TG- Triglicerídeo

TNF-α- Tumoral necrosis factor (fator de necrose tumoral)

TRH- Thyrotropin-releasing hormone (hormônio liberador de tireotrofina)

TSH- Thyroid-stimulating Hormone (hormônio estimulador da tireóide)

Page 15: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

xii

RESUMO

Santos, IJ. Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina. Rio de Janeiro, 2008. 84p. Dissertação (Mestrado) – Curso de Pós-graduação em Fisiopatologia Clínica e Experimental – Fisclinex. Universidade do Estado do Rio de Janeiro. 1. Contexto: Estudos experimentais e clínicos evidenciam relação importante entre leptina e função tireoideana. Contudo, os resultados são conflitantes. 2. Objetivo: avaliar em indivíduos obesos de origem multiétnica, se a presença do polimorfismo c.668A>G (p.Q223R) no gene do receptor de leptina (LEPR) poderia repercutir sobre a função tireoideana. 3. Casuística: participaram deste estudo transversal 115 indivíduos obesos (idade 45,73±12,04 anos) e 32 eutróficos (idade 42,56±6,59 anos), de ambos os sexos. 4. Métodos: medidas antropométricas, hemodinâmicas e bioquímicas foram avaliadas. O T3 e T4 livres plasmáticos foram dosados por RIE e o TSH plasmático por IRMA. O DNA genômico foi isolado e amplificado por reação em cadeia da polimerase (PCR). O produto da PCR foi digerido por enzima específica e resolvido por eletroforese. 5. Resultados: os indivíduos obesos apresentaram maior TSH (2,56±1,39 vs. 1,89±1,42mU/L, p=0,006) e menor T4L (1,03±0,22 vs. 1,22±0,39 ng/dl, p=0,001) quando comparados aos indivíduos eutróficos. A leptinemia apresentou maiores concentrações nos indivíduos obesos comparados aos eutróficos (43,94±29,14 vs. 10,36±5,93ng/ml, p=0,000). No grupo de 115 obesos, observamos que os indivíduos portadores do alelo G (genótipo AG e GG; n=83) apresentaram menor TSH (2,29±1,14 vs. 3,25±1,72 mU/L, p=0,002) e maior T4L (1,07±0,22 vs. 0,94±0,19 ng/dl, p=0,003), embora dentro dos limites de normalidade, comparados aos não portadores do alelo G (n=32). As concentrações de T3L encontravam-se abaixo dos limites de normalidade, não havendo diferenças estatisticamente significativas entre os grupos. A leptina sérica não apresentou diferenças entre os grupos (44,0±29,06 vs. 43,78±29,80 ng/ml; p = 0,879). Além disso, os portadores do alelo G apresentaram menor razão cintura quadril (RCQ) (0,93±0,10 vs. 0,97±0,10; p=0,026), maior HDL-C (47,05±10,67 vs. 42,5±7,50mg/dl; p=0,012) e menor concentração sérica de ácido úrico (5,34±1,54 vs. 6,2±1,76mg/dl; p=0,019). 6. Conclusões: (1) Os obesos exibiram leptinemia quatro vezes maior à observada em indivíduos eutróficos, bem como maiores concentrações de TSH e menores de T4L, embora dentro do limite de normalidade; (2) O polimorfismo p.Q223R no gene LEPR não alterou a leptinemia; (3) Portadores do alelo G apresentam menor TSH, maior T4L, menor RCQ, maior HDL-C e menor ácido úrico sérico, quando comparados aos não portadores do alelo G; (4) sugerindo que o polimorfismo p.Q223R no gene LEPR estaria associado à regulação da função tireoideana e também à redução do risco cardiometabólico relacionado à obesidade.

Page 16: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

xiii

ABSTRACT Santos, IJ. Thyroid function evaluation in obese individuals carriers of leptin receptor gene polymorphism. Rio de Janeiro, 2008. 84p. Dissertação (Mestrado) – Curso de Pós-graduação em Fisiopatologia Clínica e Experimental – Fisclinex. Universidade do Estado do Rio de Janeiro. 1. Context: experimental and clinical studies demonstrate the relationship of leptin and thyroid function. However, there is conflicting results. 2. Aim: to investigate in multiethnic obese individuals whether the presence of LEPR c.668A>G (p.Q223R) gene polymorphism has an effect on thyroid function. 3. Casuistic: in this cross-sectional study participated 115 obese (aged 45,73±12,04 years) and 32 lean individuals (aged 42,56±6,59 years), of both sex. 4. Methods: anthropometric, hemodynamic and biochemical variables were studied. Plasma free triiodothyronine (FT3) and thyroxine (FT4) were measured by RIA and plasma TSH was determined by IRMA. Genomic DNA was extracted and amplified by polymerase chain reaction (PCR). PCR products were digested with specific restriction enzymes and separated by electrophoresis. 4. Results: the obese individuals showed higher TSH (2,56±1,39 vs. 1,89±1,42mU/L, p=0,006) and lower FT4 (1,03±0,22 vs. 1,22±0,39 ng/dl, p=0,001), inside the reference range, as verified in lean individuals. Leptinemia was higher in obese compared to lean individuals (43,94±29,14 vs. 10,36±5,93ng/ml, p=0,000). In the 115 obese group, carriers of the G allele (genotype AG and GG; n=83) showed lower TSH (2,29±1,14 vs. 3,25±1,72 mU/L, p=0,002) and higher FT4 (1,07±0,22 vs. 0,94±0,19 ng/dl, p=0,003), despite all these values were in normal range, compared to allele G non-carriers (n=32). However, FT3 levels were slightly under the normal limit, and showed no differences between the groups. Serum leptin did not show differences between the groups (44,0±29,06 vs. 43,78±29,80 ng/ml; p = 0,879). Additionally, carriers of the G allele showed lower waist-to-hip ratio (WHR) (0,93±0,10 vs. 0,97±0,10; p=0,026), higher HDL-C (47,05±10,67 vs. 42,5±7,50mg/dl; p=0,012) and lower serum uric acid (5,34±1,54 vs. 6,2±1,76mg/dl; p=0,019). 6. Conclusions: (1) Obese individuals showed leptinemia four times higher than lean individuals, as well as higher TSH and lower FT4 concentrations, despite these values were in normal range; (2) The presence of LEPR p.Q223R gene polymorphism did not change the leptinemia; (3) Allele G carriers had lower TSH, higher FT4, lower WHR, higher HDL-C and lower serum uric acid, compared to allele G non-carriers; (4) suggesting that LEPR p.Q223R gene polymorphism could be associated with thyroid function regulation and lower risk to cardiometabolic changes related to obesity.

Page 17: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

INTRODUÇÃO

1

1. INTRODUÇÃO

Page 18: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

INTRODUÇÃO

2

1. INTRODUÇÃO

A obesidade é uma doença heterogênea e multifatorial, sendo considerada um grande

problema de saúde pública. O aumento mundial da prevalência da obesidade está

associado a fatores ambientais como o sedentarismo e o aumento da disponibilidade de

alimentos hipercalóricos, ricos em lipídeos e carboidratos refinados (Drewnowsk &

Popkin,1997). Fatores genéticos, metabólicos e comportamentais também estão

envolvidos na fisiopatologia da obesidade, através de seus efeitos na ingestão

alimentar, no gasto energético e no acúmulo de tecido adiposo. O sinergismo entre

genes e meio ambiente, ou seja, a presença de um ambiente “obesogênico”, parece ser

necessária para a expressão do fenótipo da obesidade (Loos & Bouchard, 2003).

Estudos evidenciam a presença de variações genéticas em indivíduos com

sobrepeso e obesidade (Rankinen et al., 2006). O gene da leptina (LEP) e de seu

receptor (LEPR) têm sido extensamente estudados nos últimos anos na procura

de variantes que possam ser importantes na fisiopatologia da obesidade (Mattevi

et al., 2002). A leptina é um hormônio produzido no tecido adiposo, que atua

controlando o peso corporal e o consumo energético. Este hormônio também está

associado a outros processos endócrino-metabólicos, dentre eles destaca-se a função

tireoideana (Zimmermann-Belsing et al., 1998). Os resultados de estudos experimentais

e clínicos avaliando a relação entre leptina e função tireoideana são bastante

conflitantes. Sabe-se que a leptina tem efeito estimulatório sobre a função tireoideana,

aumentando o hormônio liberador de tireotrofina (TRH) e o hormônio estimulador da

tireóide (TSH) (Legradi et al., 1997, Nillni et al., 2000, Ortiga-Carvalho et al., 2002). A

presença de polimorfismos no gene LEPR pode afetar o funcionamento normal do

receptor causando uma alteração na sinalização da leptina (Yiannakouris et al., 2001).

Neste contexto, o presente estudo avaliou se o polimorfismo c.668A>G (p.Q223R) no

gene LEPR pode causar alterações na sinalização da leptina, e consequentemente,

repercutir sobre a função tireoideana.

Page 19: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

INTRODUÇÃO

3

1.1. Epidemia mundial de obesidade

A epidemia global de obesidade requer atenção especial dos serviços de saúde.

A WHO (World Health Organization) estima que, atualmente no mundo, 1 bilhão e 600

mil indivíduos (idade > 15 anos) estejam com sobrepeso e pelo menos 400 milhões,

obesos. Até 2015, aproximadamente 2 bilhões e 300 mil indivíduos apresentarão

sobrepeso e mais de 700 milhões, obesidade (WHO 2006).

As taxas de obesidade para homens e mulheres estão aumentando tanto nos

países desenvolvidos, como naqueles em desenvolvimento como o Brasil. Os Estados

Unidos da América (EUA) possuem os dados mais completos sobre as

tendências nacionais de obesidade, pois se baseiam nas comparações dos

estudos populacionais do National Health Examination Survey (NHES I (1960-

1962) e do National Health and Nutrition Examination Survey (NHANES I (1971-

1974), II (1976-1980), III (1988-1994) e NHANES 2003-2004 (Odgen et al., 2007).

Entre 1960-1962, aproximadamente 45% dos americanos adultos estavam acima

do peso (IMC≥25 Kg/m2). Já em 2003-2004 estes valores chegavam a 66%,

sendo que 33% da população eram obesos (IMC≥30 Kg/m2) e 5% apresentavam

obesidade extrema (IMC≥40 Kg/m2). As análises mostram que a prevalência da

obesidade teve um aumento modesto entre 1960 e 1980, e que, entre os

períodos de 1976-1980 e 1988-1994 houve um aumento considerável, de 15%

para 23% dos americanos com obesidade. Em 1999-2000, os EUA

apresentavam 31% de sua população com obesidade (Ogden et al., 2006).

A prevalência da obesidade difere muito entre os países da Europa. Na

Inglaterra, a prevalência de adultos obesos quase triplicou desde 1980. Em 2002,

cerca de 23% dos homens e 25% das mulheres inglesas estavam acima do peso

(Rennie & Jebb, 2005). Em Portugal, a prevalência de obesidade em 2005 era de

14,2% e a de sobrepeso chegava a 39,4%. Entre 1995–1998, 49,6% dos portugueses

estavam acima do peso, já em 2003-2005 este percentual passou para 53,6% (Carmo

et al., 2007).

No Brasil, o desafio que o déficit nutricional representava há três décadas

está sendo rapidamente substituído pelo excesso de consumo energético. Dados

Page 20: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

INTRODUÇÃO

4

da Pesquisa de Orçamento Familiar (POF), realizada entre 2002- 2003 demonstraram

que 40% dos adultos do país apresentavam excesso de peso. O problema da

prevalência do excesso de peso alcança grande expressão em todas as regiões

do país, no meio urbano e no meio rural (IBGE 2004).

Quando se compara os dados de 2002-2003 com pesquisas brasileiras

anteriores (1974-1989), observa-se que na década de 70 a prevalência de

sobrepeso para os homens era de 18,6% e de obesidade de 2,8%, e em 2002-

2003, esses percentuais passaram para 41% (mais que o dobro) e 8,8% (mais

que o triplo), respectivamente. Entre as mulheres também ocorreu aumento na

prevalência de excesso de peso, porém de menor magnitude que nos homens.

Entre 1974-1975, a taxa de sobrepeso era de 28,6% e a de obesidade 7,8%,

passando para 40,7% e 12,8% em 1989, respectivamente. Entre 1989 e 2002-

2003, a prevalência de sobrepeso e obesidade se manteve relativamente estável

entre as mulheres (IBGE 2004).

Segundo a OMS, o excesso de peso causa alterações metabólicas adversas à

saúde, quando associado a outros fatores como o sedentarismo e inadequação

alimentar, sendo considerado um dos principais determinantes da alta prevalência de

doenças crônicas, tais como as doenças cardiovasculares, a hipertensão e o diabetes

mellitus tipo 2 (WHO 2000).

A obesidade está associada ao aumento do risco de mortalidade. Alguns estudos

sugerem que a expectativa de vida dos obesos é menor quando comparada aos

indivíduos eutróficos. No Framingham Heart Study, observou-se que adultos obesos

com idade média de 40 anos apresentaram uma espectativa de vida de 6 a 7 anos

menor que adultos com mesma idade e eutróficos (Peeters et al., 2002). Fontaine et al.,

(2003) observaram que os anos de vida perdidos para homens brancos com obesidade

severa, com idades entre 20 e 30 anos, é de 13 anos a menos e para as mulheres é de

8 anos, quando comparados a adultos de mesma faixa etária e peso adequado.

Segundo a OMS, aproximadamente, 220.000 indivíduos nos EUA e Canadá estão

morrendo por ano em decorrência de doenças vinculadas à obesidade. Em 20 países

do Leste Europeu, cerca de 320.000 indivíduos têm as suas vidas interrompidas em

decorrência do excesso de peso (WHO 2002).

Page 21: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

INTRODUÇÃO

5

A principal causa da alta mortalidade vinculada à obesidade são as doenças

cardiovasculares (DCV). Dorn et al. (1997) observaram que o IMC está fortemente

associado à mortalidade por DCV em mulheres e homens. A prevalência de

hipertensão arterial (Huang et al.,1998; Thomas et al., 2005; Francischetti & Genelhu,

2007), diabetes mellitus tipo 2 (Chan et al.,1994; Colditz et al.,1995), e dislipidemias

(Després et al., 1990; Groop et al., 1992) encontram-se particularmente aumentadas

quando associadas ao excesso de peso.

Mais importante que a gordura corporal total é a região em que o tecido adiposo

se encontra em maior quantidade. O acúmulo de gordura na região do tronco ou central

indica excesso de tecido adiposo visceral e apresenta relação causal, mais significativa

que o IMC, com a maioria das complicações associadas à obesidade (Dagenais et al.,

2005). Clinicamente pode-se obter uma medida simples que apresenta excelente

correlação com a gordura visceral através da circunferência abdominal (Deprés et al.,

2001). Estudos mostram que a gordura na região abdominal, medida através da

circunferência abdominal, é um importante fator de risco para DCV (Pouliot et al., 1994;

Han et al., 1996) e diabetes mellitus tipo 2 (Ohlson et al., 1985; Chan et al., 1994). A obesidade abdominal é o principal fator determinante da chamada Síndrome

Metabólica (SM) (Carr et al., 2004) . As alterações hemodinâmicas, metabólicas e

neuroendócrinas freqüentemente relacionadas à obesidade, como intolerância à

glicose, resistência à insulina, dislipidemia aterogênica, hipertensão arterial, estados

pró-inflamatório e pró-trombótico constituem a base desta síndrome (Grundy, 2004).

Ford et al., (2002) demonstraram que aproximadamente 1/3 dos americanos com

sobrepeso e obesidade manifestam SM de acordo com os critérios de diagnóstico da

National Cholesterol Education Program- Adult Treatment Panel III (NCEP- ATP III). Em

meta-análise obtida a partir da avaliação de 21 estudos prospectivos, observou-se que

indivíduos portadores de SM quando comparados aos que não apresentavam a

síndrome, caracterizaram-se maior mortalidade por DCV (RR 1,74; 95% CI, 1,29-2,35),

alem de maior incidência de acidente vascular cerebral (RR 1,76; 95% CI, 1,37-2,25) e

doença cardiovascular (RR 1,53; 95% CI, 1,26-1,87) (Galassi et al., 2006).

Page 22: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

INTRODUÇÃO

6

1.2. Fatores genéticos associados à obesidade

São fortes as evidências de que fatores genéticos, além do excesso de aporte

calórico e do sedentarismo, contribuem substancialmente para o aparecimento da

obesidade (Barsh et al., 2000). Neste sentido, os genes podem interferir na manutenção

do peso e na gordura corporal, e acredita-se que o balanço energético depende,

aproximadamente, de 40% da herança genética, podendo afetar tanto o gasto quanto o

consumo energético (Pérusse & Bouchard, 2003). As formas monogênicas da

obesidade, ou seja, condicionada pela ação de um único gene, são raras. A

obesidade, assim como outras doenças crônicas (por exemplo, o diabetes

mellitus tipo 2), é um transtorno multifatorial, resultante da interação de vários

genes com fatores ambientais favoráveis ao consumo elevado de alimentos e

inatividade física (Loos & Bouchard, 2003).

É crescente o número de genes que vêm sendo indentificados como causa de

obesidade (Rankinen et al., 2006), e na última década ocorreram progressos

consideráveis acerca da compreensão das bases genéticas da obesidade e das

complicações metabólicas a ela associadas (Pérusse & Bouchard, 2003).

1.3. O tecido adiposo como órgão endócrino

Por muitos anos foi atribuído ao tecido adiposo, exclusivamente, as funções de

fornecer e armazenar energia. A identificação em 1994 da leptina, um hormônio

secretado pelos adipócitos que participa ativamente do controle do dispêndio energético

bem como do apetite (Zhang et al., 1994), acrescentou às reconhecidas funções do

tecido adiposo no organismo humano, o papel de órgão endócrino (Ronti et al., 2006).

As descobertas nas últimas duas décadas acerca das propriedades do tecido

adiposo em secretar inúmeras substâncias com importantes efeitos biológicos

conferiram ao tecido adiposo um conceito emergente de importante órgão

multifuncional, com intensa comunicação com os demais órgãos e sistemas orgânicos

(Ahima & Flier., 2000; Hauner, 2004).

Page 23: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

INTRODUÇÃO

7

O tecido adiposo secreta peptídeos bioativos, chamados de adipocitocinas, que

atuam ao nível local e periférico, através de seus efeitos autócrinos, parácrinos e

endócrinos (Ronti et al., 2006). Dentre estas encontram-se, a leptina, a interleucina-6

(IL-6), o fator de necrose tumoral (TNF-α), a adiponectina, a resistina, o inibidor do

ativador de plasminogênio-1 (PAI-1) e o angiotensinogênio (Ahima & Flier., 2000). Estas

adipocitocinas apresentam diversas funções, atuam no metabolismo energético e no

sistema imunológico, além de apresentarem importante papel no sistema cardiovascular

(Ahima & Flier., 2000).

Na obesidade, as concentrações de algumas adipocitocinas encontram-se

alteradas, em decorrência da hipertrofia e/ou hiperplasia dos adipócitos, situação esta

relacionada à gênese do processo fisiopatológico da obesidade (Havel et al., 2004).

Ainda que essas alterações estejam freqüentemente associadas às disfunções

metabólicas e ao aumento do risco de DCV, o estudo sobre o envolvimento do tecido

adiposo no desenvolvimento dessas complicações permanece sob investigação.

A leptina é uma proteína secretada e sintetizada principalmente pelos adipócitos

(Friedman & Halaas,1998). Entre outras ações, a leptina se liga ao seu receptor

hipotalâmico, inibindo a secreção de neuropetídeo Y (NPY), diminuindo o apetite e

aumentando a termogênese pela ativação do sistema nervoso simpático (Campfield et

al.,1995; Friedman & Halaas., 1998). Indivíduos com sobrepeso e obesos apresentam

hiperleptinemia quando comparados aos indivíduos com peso adequado (Maffei et

al.,1995; Considine et al., 1996a).

A adiponectina é uma proteína produzida pelos adipócitos (Nedvídková et al.,

2005), que possui propriedades anti-aterogênicas (Berg & Scherer, 2005). Além disso,

exerce importante papel na patogênese da obesidade e do diabetes mellius tipo 2

(Nedvídková et al., 2005). Em contraste com a leptina, as concentrações plasmáticas de

adiponectina encontram-se reduzidas, não apenas em obesos (Arita et al., 1999; Weyer

et al., 2001), mas também em doenças, como o diabetes mellitus tipo 2 (Hotta et al.,

2000; Cote et al., 2005) e hipertensão arterial (Adamczak et al., 2003; Francischetti et

al., 2007). Além disso, baixa concentração de adiponectinemia está associada à maior

risco de diabetes mellitus (Lindsay et al., 2002; Spranger et al., 2002).

Page 24: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

INTRODUÇÃO

8

O inibidor do ativador de plasminogênio-1 (PAI-1) é uma proteína reguladora da

cascata de coagulação que apresenta-se elevada em estados inflamatórios, obesidade

e SM. Apesar de ser sintetizado, primariamente, pelas plaquetas e pelo endotélio, tem

se demonstrado que o aumento de PAI-1 é atribuído à sua produção pelo tecido

adiposo (Loskutoff & Somad, 1998). Os níveis plasmáticos de PAI-1 estão aumentados

no sobrepeso e obesidade (Spiegelman & Flier, 1996) devido a maior expressão de seu

RNAm no adipócito (Loskutoff & Somad, 1998).

O fator de necrose tumoral (TNF-α), citocina pró-inflamatória, além de participar

na resposta imunológica e apresentar atividade antitumoral, apresenta importante papel

no tecido adiposo (Warne, 2003). Sintetizado pelos adipócitos e por macrófagos

infiltrados no tecido adiposo (Kern et al., 2001), o TNF-α apresenta-se elevado em

modelos de obesidade genética em roedores e em seres humanos obesos (Kern et al.,

1995). Vários estudos sugerem o envolvimento do TNF-α na gênese da resistência à

insulina (Berg & Scherer, 2005; Warne, 2003; Kern et al., 2001). A ausência completa

do TNF-α ou de seus receptores em camundongos obesos resulta em melhora

significativa da sensibilidade à insulina (Uysal et al., 1994).

Na obesidade, alterações destas adipocitocinas estão relacionadas direta ou

indiretamente a processos que contribuem para a hipertensão arterial, resistência à

insulina, diabetes, dislipidemias e doenças cardiovasculares (Ahima & Flier, 2000).

1.4. Leptina

A leptina (do grego Leptos=magro) é uma proteína composta por 167

aminoácidos (Zhang et al., 1994) sintetizada, de forma predominante, no tecido adiposo

(Caro et al., 1996), e em menor escala no epitélio gástrico (Bado et al., 1998), placenta

(Hoggard et al., 1997), epitélio mamário (Smith-Kirwin et al., 1998), hipotálamo (Morash

et al., 1999) e hipófise (Jin et al., 2000).

Inicialmente identificada em camundongos, a leptina participa da regulação da

ingestão alimentar e da homeostase energética (Zhang et al., 1994). Os camundongos

ob/ob, que apresentam deficiência de leptina devido a uma mutação do gene que

codifica esta proteína, são caracterizados por um quadro de obesidade, hiperfagia,

Page 25: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

INTRODUÇÃO

9

gasto energético reduzido e resistência insulínica (Zhang et al., 1994). A reposição de

leptina em camundongos ob/ob induz a perda de peso (Halaas et al., 1995;

Pelleymounter et al., 1995).

A leptina sérica está aumentada na maioria dos indivíduos obesos (Considine et

al., 1996a; Maffei et al., 1996; Zimmet et al., 1996; Adami et al., 2002; Kobayashi et al.,

2004; Kettaneh et al., 2007). Sabe-se que a obesidade, na maioria dos casos, não é

atribuída a defeitos na síntese de leptina (Considine et al., 1996b; Gotoda et al., 1997;

Matsuaka et al., 1997) e que mulheres e homens com sobrepeso e obesos apresentam

hiperleptinemia (Adami et al., 2002; Kettaneh et al., 2007) quando comparados aos

indivíduos com peso adequado (Maffei et al.,1995; Considine et al., 1996a). O mesmo é

observado em obesos portadores de diabetes tipo 2 (Sinha et al., 1996). Roedores e

seres humanos obesos são fracamente responsivos ou não respondem a administração

exógena de leptina (Chung et al., 1997; Maffei et al., 1995; Halaas et al., 1997). Isto

levanta a hipótese de resistência à ação da leptina na obesidade (Maffei et al., 1995;

Chung et al., 1997).

Apesar da hiperleptinemia na obesidade ser reconhecida há tempos, o

mecanismo biológico causal desta elevação da leptina plasmática permanece não

esclarecido (Zhang & Scarpace, 2006). A resistência à leptina pode resultar de uma

redução no seu transporte para o sistema nervoso central (Flier & Maratos-Flier, 1998),

atenuação da cascata de sinalização no hipotálamo (Ahima, 2006) ou por fatores

genéticos (Beltowski, 2006).

As concentrações de leptina aumentam proporcionalmente ao percentual de

gordura corporal (Considine et al., 1996a; Larsson et al., 1996; Matkovic et al., 1997).

Além disso, adipócitos de obesos expressam duas vezes mais o RNAm do gene da

leptina do que em inidviduos com peso adequado (Considine et al., 1996a). Em

particular a gordura abdominal subcutânea é determinante da leptinemia (Kobayashi et

al., 2004).

Alguns estudos demonstram que mulheres apresentam maior leptinemia

comparadas aos homens (Adami et al., 2002; Kettaneh et al., 2007), mesmo quando se

corrige para diferenças de IMC (Hickey et al., 1996; Rosenbaum et al., 1996; Zimmet et

al., 1996) e varia com o ciclo menstrual (Quinton et al., 1999; Hardie et al., 1997).

Page 26: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

INTRODUÇÃO

10

1.4.1. Efeitos da leptina

Considerada um hormônio anorexígeno, a leptina atua no centro regulatório do

apetite no hipotálamo, inibindo a via orexígena e ativando a via anorexígena. A leptina

inibe os neuropeptídeos orexigênicos, que estimulam a ingestão alimentar, e inibe a

ingestão alimentar ativando os neuropeptídeos anorexigênicos (Tabela 1) (Stephens et

al., 1995; Flier & Maratos-Flier, 1998; Friedman & Halaas., 1998; Ahima & Osei, 2004).

Tabela 1: Neuropeptídeos orexigênicos e anorexigênicos regulados pela leptina.

Neuropeptídeos orexigênicos (-) Neuropeptídeos anorexigênicos (+)

• neuropeptídeo Y (NPY)

• peptídeo relacionado à proteína agouti (AgRP)

• hormônio concentrador de melanina (MCH)

• galanina

• grelina

• orexina

• Ácido gama-aminobutírico (GABA)

• hormônio liberador de corticotrofina (CRH)

• hormônio estimulador da melanocortina (α-MSH)

• pró-ópiomelanocortina (POMC)

• fator de transcrição regulado por anfetamina e cocaína

(CART)

• colecistoquinina (CCK)

• serotonina

O neuropeptídeo Y (NPY) é um neurotransmissor difusamente expresso no SNC,

que estimula a ingestão alimentar e diminui a termogênese (Stephens et al., 1995). O

tratamento com leptina em camundongos ob/ob inibe a expressão do NPY no núcleo

arqueado (Stephens et al., 1995; Schwatz et al., 1996). Enquanto camundongos

geneticamente deficientes em NPY apresentam peso e ingestão alimentar normais

(Erickson et al., 1996), e respondem ao efeito de saciedade da leptina, surgerindo

assim que além do NPY, a leptina atua em outros fatores envolvidos no balanço

energético (Erickson et al., 1996).

A leptina inibe o peptídeo relacionado à proteína agouti (AgRP). Esta proteína

está amplamente expressa no núcleo arqueado e exerce efeito anabolizante, causando

hiperfagia quando administrada no interior de ventrículos cerebrais (Roissi et al., 1998).

Além disso, a AgRP inibe a ação de um neuropetídeo, o hormônio estimulador da

melanocortina (α-MSH), sobre os seus receptores de melanocortina tipo 4 (MC4R).

O α-MSH é um peptídeo obtido do processamento das pró-opiomelanocortinas

(POMC), cuja expressão gênica é limitada quase que exclusivamente no núcleo

Page 27: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

INTRODUÇÃO

11

arqueado do hipotálamo (Gee et al., 1983). A leptina estimula a expressão e a liberação

de α-MSH, via POMC. O α-MSH aumenta a produção de AMPc de células que contém

o receptor MC4R. Como esses receptores são expressos no hipotálamo, especula-se

que neurônios que apresentam o receptor MC4R inibem neurônios no hipotálamo

lateral, que normalmente estimulam o apetite (Cone et al., 1999).

Os neurônios do POMC expressam o receptor da leptina e camundongos ob/ob

apresentam menor expressão do RNAm do POMC no núcleo arqueado (Thornton et al.,

1997). Quando os depósitos de gordura estão em abundância, os níveis circulantes de

leptina estão aumentados e ativam receptores no núcleo arqueado do hipotálamo, que

possuem neurônios produtores de POMC, para inibir a ingestão alimentar (Cone et al.,

1999).

O fator de transcrição regulado por anfetamina e cocaína (CART) é um peptídeo

altamente expresso no núcleo arqueado, que diminui a ingestão alimentar em

camundongos (Kristensen et al., 1998). Similar ao POMC, o RNAm do CART está

reduzido no núcleo arqueado de camundongos ob/ob, que apresentam deficiência de

leptina (Kristensen et al., 1998; Schwatz et al., 2000).

Page 28: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

INTRODUÇÃO

12

Figura 1: Ação central da leptina.

1.4.2. O receptor da leptina e seu gene (LEPR)

A leptina exerce seus efeitos metabólicos e hemodinâmicos através de seus

receptores específicos ao nível periférico e central (Zabeau et al., 2003). O gene lepr

que codifica o receptor da leptina (ObR) foi primeiramente identificado no plexo coróide

de camundongos (Tartaglia et al., 1995). Os camundongos diabéticos (db/db) com uma

única mutação no gene lepr apresentam fenótipo parecido com os camundongos ob/ob,

caracterizado por obesidade e resistência insulínica, mas com altas concentrações de

leptina circulante (Chen et al., 1996; Lee et al., 1996).

O receptor de leptina (ObR) é homologo à superfamília da classe 1 dos

receptores de citocinas (Tartaglia et al., 1997), conhecidos por atuar através das JAKs

(Janus quinases) e dos STATs (transdutores do sinal e ativadores da transcrição)

(Heim, 1996).

Page 29: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

INTRODUÇÃO

13

Até o momento foram identificados seis isoformas diferentes do ObR (a-f), sendo

cinco curtas e uma longa (Chen et al., 1996; Lee et al., 1996; Tartaglia, 1997). No

entanto, as isoformas ObRa, ObRc, ObRd e ObRf apresentam domínio transmembrana,

mas apenas a isoforma longa, ObRb, contém os sítios intracelulares necessários para a

ativação da via de transdução sinalizada por JAK-STAT (Tartaglia, 1997). ObRe

apresenta tanto o domínio transmembrana quanto intracelular, além de circular como

um receptor solúvel (Tartaglia, 1997).

O RNAm do gene LEPR apresenta ampla distribuição tecidual, sendo altamente

expresso no cérebro, principalmente no plexo coróide e regiões hipotalâmicas incluindo

núcleo arqueado, ventromedial, paraventricular, ventromedial e dorsomedial e

hipotalamo lateral, que são conhecidas por regular a ingestão alimentar e a homeostase

energética (Ghilardi et al., 1996; Schwartz et al., 1996; Guan et al., 1997). A expressão

do gene LEPR também foi detectada na placenta, ilhotas pancreáticas, tecido adiposo,

adrenais, endotélio vascular, ovário, hipófise e tireóide (Emilsson et al., 1997; Hoggard

et al., 1997; Karlsson et al., 1997; Jin et al., 2000; Nowak et al., 2002; Isozaki et al.,

2004).

A via JAK-2/STAT-3 (Janus quinase 2/transdutor do sinal e ativador da

transcrição 3) é a principal cascata de sinalização ativada pela leptina (Vaisse et al.,

1996; Ghilardi & Skoda, 1997). A ligação da leptina ao receptor ObRb resulta na

autofosforilação e ativacão da JAK-2 e na fosforilação da tirosina do domínio

citoplasmático do ObRb. Os resíduos de tirosina servem como sítio de ligação da

STAT-3, que se fosforila. A STAT-3 fosforilada se dimeriza e transloca para o núcleo,

onde irá regular a transcrição de genes alvos (Figura 2) (Hakansson & Meister, 1998).

A sinalização da leptina é interrompida pela SOCS-3, uma proteína da família de

SOCS (supressoras da sinalização de citocinas). A leptina estimula a SOCS-3, que

ativada inibe a fosforilação da JAK-2, interrompendo a via JAK-2/STAT-3 (Ghilardi et al.,

1996; Bjørbaek et al., 1999).

Page 30: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

INTRODUÇÃO

14

Figura 2: Mecanismo de ação da leptina via JAK2/STAT3. (Adaptado de Frühbeck,

2006).

1.4.3. Polimorfismo c.668A>G (p.Q223R) no gene LEPR

Mutações no gene do receptor da leptina (lepr) promovem obesidade extrema

em animais de laboratório, tanto em homozigose como em heterozigose (Chua et al.,

1996). Em seres humanos, mutações no gene LEPR foram descritas apenas em raros

casos de obesidade severa (Clément et al., 1998). Assim como os camundongos, os

seres humanos apresentam hiperfagia, obesidade severa, hiperleptinemia e maturação

sexual deficiente. A influência de polimorfismos, já identificados, no gene LEPR na

susceptibilidade à obesidade humana, permanece em questionamento (Heo et al.,

2002).

Foram identificados cerca de 19 polimorfismos ao longo de 20 exons e introns do

gene LEPR (Chagnon et al., 2000). Entre estes, o polimorfismo c.668A>G (p.Q223R) no

Page 31: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

INTRODUÇÃO

15

exon 6 do gene LEPR tem sido amplamente estudado (Considine et al., 1996b;

Thompson et al., 1997; Clement et al., 1998; Chagnon et al., 1999; Chagnon et al.,

2000; Quinton et al., 2001; Wauters et al., 2001; Yiannakouris et al., 2001; Mattevi et al.,

2002). Este polimorfismo resulta na substituição do aminoácido Glutamina pela Arginina

na posição 223 da proteína (p.Q223R). Este polimorfismo localiza-se no domínio

extracelular, mais precisamente na região de ligação da LEP. A troca de Glutamina, um

aminoácido de carga neutra, por uma Arginina que apresenta carga positiva, pode

afetar o funcionamento normal do receptor causando, portanto, uma alteração na

sinalização da proteína (Considine et al., 1996b; Chung et al., 1997; Chagnon et al.,

1999; Chagnon et al., 2000; Yiannakouris et al., 2001).

Os estudos que avaliaram o potencial efeito do polimorfismo c.668A>G

(p.Q223R) na obesidade apresentaram diferentes resultados. Nosso grupo de pesquisa

analizou uma amostra de indivíduos (200 obesos e 150 eutróficos) de origem

multiétnica da população brasileira e observou diferenças significativas na distribuição

genotípica e na frequência alélica para o polimorfismo p.Q223R no gene LEPR entre

obesos e eutróficos (Duarte et al., 2006). No Québec Family Study (Chagnon et al.,

1999) e no HERITAGE Family Study (Chagnon et al., 2000) foi observada uma

associação positiva entre este polimorfismo e o IMC. Yiannakouris et al. (2001)

analisaram amostra da população grega, e observaram que não apenas o polimorfismo

p.Q223R associou-se à obesidade, como foi capaz de prever o ganho de peso. Em um

estudo brasileiro foi analisada uma amostra de 183 indivíduos caucasianos, e

observada uma associação entre IMC e o polimorfismo p.Q223R, principalmente em

indivíduos não fumantes (Mattevi et al., 2002).

Outros estudos não evidenciaram associação entre este polimorfismo no gene

LEPR e a obesidade. Heo et al. (2002) avaliaram os resultados de uma meta-análise

com 3.263 indivíduos de origens étnicas variadas, e concluíram não haver associação

entre este polimorfismo no gene LEPR, IMC e circunferência de cintura. Um estudo

realizado na Turquia, analisando uma amostra de 262 individuos obesos e 138

eutróficos, de ambos os sexos, observou que o polimorfismo p.Q223R não se associou

ao grau de obesidade (Mergen et al., 2007). O mesmo foi observado em dois outros

estudos realizados em homens caucasianos (Echwald et al., 1997; Gotoda et al., 1997).

Page 32: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

INTRODUÇÃO

16

1.5. Função tireoideana e obesidade

A tireóide é uma das principais glândulas do sistema endócrino. Os hormônios

tireoideanos (HTs), tiroxina (T4) e triiodotironina (T3), atuam em quase todos os tecidos,

com ações sobre o desenvolvimento, crescimento, manutenção da termogênese e

metabolismo. A tireóide não é uma glândula autônoma, sendo a produção e a secreção

dos HTs reguladas pelo hormônio adeno-hipofisário, TSH. Este por sua vez é

estimulado pelo neurohormônio hipotalâmico, TRH. Ambos TSH e TRH são controlados

por um mecanismo de retroalimentação negativa exercido pelos HTs (Brent, 1997).

Frente ao importante papel dos HTs na regulação da termogênese, a relação

entre obesidade e a dinâmica do eixo hipotálamo-hipófise-tireoidiano tem sido

amplamente estudada, mas os mecanismos envolvidos permanecem parcialmente

compreendidos (Iacobellis et al., 2005).

A concentração sérica de TSH é um confiável indicador da atividade biológica

dos HTs. A mensuração do TSH tem sido um componente consistente em estudos

clínicos que avaliam a relação entre função tireoideana e adiposidade. Evidências

recentes sugerem que o TSH estimula diretamente a adipogênese e a produção de

adipocitocinas, independentemente da ação dos HTs no balanço energético. Alguns

estudos em seres humanos observaram a presença de receptores de TSH em

adipócitos e pré-adipócitos (Sorisky et al., 1996; Valyasevi et al., 1999). Acredita-se que

o TSH ao se ligar ao seu receptor no tecido adiposo, induz a diferenciação de pré-

adipócitos em adipócitos, expandindo o tecido adiposo (adipogênese) (Sorisky et al.,

2000; Valyasevi et al., 2002).

Os resultados de estudos clínicos demonstram que em obesos as concentrações

de TSH e HTs encontram-se similares ou aumentadas. Bastemir et al. (2007)

demonstraram que mulheres turcas com sobrepeso/obesidade e função tireoideana

normal apresentam maiores concentrações de TSH, embora dentro do limite de

normalidade, quando comparadas a mulheres de peso adequado. Iacobellis et al.

(2005) observaram que mulheres com IMC > 40 kg/m² apresentam maior TSH

comparadas as mulheres de mesma idade e IMC < 40 kg/m², e que o TSH se

correlaciona positivamente com o IMC. Um estudo dinamarquês com 4.082 indivíduos

Page 33: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

INTRODUÇÃO

17

eutireóideos mostrou que o IMC associa-se positivamente com os níveis de TSH e

negativamente com o T4 livre, e que o ganho de peso em cinco anos apresenta

correlação positiva com o aumento progressivo de TSH (Knudsen et al., 2005). Estudo

realizado na Noruega com 8.000 indivíduos eutireoideos, também confirmou associação

entre IMC e TSH (Nyrnes et al., 2006). Um estudo com mulheres italianas com

sobrepeso e obesas mostrou associação positiva entre o T3 livre e o IMC e a CC,

enquanto o TSH associou-se com a CC (de Pergola et al., 2007). Já um estudo inglês

com 401 indivíduos eutiroideos, não observou nenhuma relação entre IMC e as

concentrações circulantes de HTs e TSH (Manji et al., 2006).

A obesidade na infância e adolescência também causa alterações na função

tireoideana. Num estudo retrospectivo, Stichel et al. (2000) observaram uma correlação

positiva entre as concentrações aumentadas de TSH e T3 livre e o grau de sobrepeso

em crianças. Kiortsis et al. (1999), demonstraram que os níveis aumentados de TSH e

T3L em crianças obesas são normalizados após a perda de peso.

As controversias destes estudos podem ser, em parte, devido às diferentes

populações estudadas. Diferenças consideráveis são observadas na função tireoideana

entre as populações, principalmente em relação ao TSH. Estas variações de HTs e TSH

provavelmente são causadas por fatores genéticos e ambientais (Hansen et al., 2004).

Fatores como, hora da coleta de sangue, ingestão de iodo e diferenças de sexo são

bem aceitos como determinantes para os valores séricos de TSH e HTs. Enquanto,

idade, fase do ciclo menstrual e fumo parecem influenciar os níveis séricos de TSH, T3

e T4 livres, mas os estudos não são conclusivos (Laurberg et al., 2001; Hansen et al.,

2004).

1.6. Leptina e o eixo hipotálamo-hipófise-tireóide

A leptina modula a função de vários eixos endócrinos, como corticotrófico

(Heiman et al, 1997), somatotrófico (Carro et al., 2000), gonadal (Mantzoros et al.,

2000) e tireoideano (Legradi et al., 1997, 1998). Segundo Korbonits (1998), os estudos

experimentais e clínicos analisando a relação entre leptina e eixo hipotálamo-hipófise-

tireóide apresentam resultados conflitantes.

Page 34: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

INTRODUÇÃO

18

Em indivíduos saudáveis, de ambos os sexos, as concentrações circulantes de

leptina e de TSH apresentam correlação positiva (Miyakawa et al., 1999) e ritmo

circadiano similar (Mantzoros et al., 2001), sugerindo uma pulsatilidade coordenada

entre esses hormônios. Em mulheres obesas, o TSH também se associa positivamente

com a leptinemia (Iacobellis et al., 2005). Em cultura de células do tecido adiposo

omental de humanos de ambos os sexos, foi demonstrado que a infusão de TSH

estimulou fortemente a secreção de leptina (Menendez et al., 2003).

Durante o jejum, o mecanismo de regulação da secreção dos HTs está alterado,

de tal forma que as baixas concentrações de T3 e T4 livres estão associadas a uma

resposta subnormal na síntese de TRH e secreção de TSH (Campbell et al., 1977). Em

ratos, em jejum, a infusão de leptina proporciona uma redução menor do TRH, TSH e

HTs (Ahima et al., 1996). Ortiga-Carvalho et al. (2002), demonstrou um efeito

estimulatório, in vivo, da leptina sobre o TSH em animais alimentados normalmente. Por

outro lado, estes autores também mostraram, in vitro, um efeito direto da leptina

inibindo a secreção de TSH, em hipófises de ratos eutireóideos (Ortiga-Carvalho et al.,

2002). Em 2003, Chan et al. demonstraram, em seres humanos, que a supressão do

TSH induzida por jejum de 72 horas, é parcialmente restaurada após a administração

de leptina, no entanto, o tratamento com leptina não reverteu a redução do T3 total

(Chan et al., 2003).

A presença do receptor da leptina na glândula tireóide (Nowak et al., 2002; Dutra

et al., 2007) e em cultura de células tireoideanas (Isozaki et al., 2004) de roedores

eutiroideos, sugere um efeito direto da leptina na tireóide. Nowak et al., (2002)

observaram que após a administração crônica de leptina, ocorre aumento de HTs e,

conseqüente redução de TSH. Além disso, através de análise morfométrica, foi

observado aumento do peso tireóideo e do volume do epitélio folicular, sem alteração

do colóide. A partir desse achado, foi sugerido que a administração crônica de leptina,

em roedores, estimula o crescimento e a secreção hormonal da tireóide, efeito este,

envolvendo o receptor da leptina.

De Oliveira et al. (2007) observaram, in vitro, que a leptina inibe diretamente a

captação tireoideana de iodeto, embora aumente a secreção de T4. Outros estudos

experimentais demonstram que a leptina regula o metabolismo dos HTs, estimulando a

Page 35: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

INTRODUÇÃO

19

desiodase tipo 1 em tireóide e fígado (Cusin et al., 2000; Lisboa et al., 2003), enzima

que catalisa a conversão de T4 em T3.

Os estudos em seres humanos com disfunção tireoideana e leptina são bastante

conflitantes. Em indivíduos eutróficos ou com sobrepeso apresentando hipotireoidismo,

a leptina circulante pode apresentar-se significativamente elevada (Leonhardt et al.,

1998) ou diminuída (Valcavi et al., 1997). Obesos com hipotireoidismo apresentam

leptinemia similar a obesos com concentrações normais de TSH (Tagliaferri et al.,

2001). Indivíduos eutróficos ou com sobrepeso e hipertiroideos apresentam leptinemia

similar a de indivíduos saudáveis (Valcavi et al., 1997; Leonhardt et al. 1998).

Mantzoros et al. (1997) observaram que a administração de T3 não altera as

concentrações de leptina circulante em homens saudáveis. Outros estudos clínicos não

observaram correlação entre leptina e função tireoideana em pacientes com

hipotireoidismo e hipertireoidismo (Corbetta et al., 1997; Sesmilo et al., 1998).

Page 36: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor de leptina.

OBJETIVOS

20

2. OBJETIVOS

Page 37: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor de leptina.

OBJETIVOS

21

2. OBJETIVOS Objetivo geral

O presente estudo tem como objetivo verificar em indivíduos obesos, se a

presença do polimorfismo c.668A>G (p.Q223R) no gene LEPR altera a capacidade

funcional do receptor para a sinalização da leptina, resultando em possíveis alterações

da função tireoideana.

Objetivos específicos

Avaliar em indivíduos obesos, portadores ou não do polimorfismo c.668A>G

(p.Q223R) no gene LEPR, e em indivíduos eutróficos e saudáveis os seguintes

parâmetros:

• variáveis antropométricas (IMC, circunferência de cintura, circunferência de

quadril e razão cintura/quadril);

• variáveis hemodinâmicas (pressão arterial sistólica e diatólica e freqüência

cardíaca);

• metabolismo lipídico (colesterol total, triglicerídeos, HDL-C, LDL-C);

• metabolismo glicídico (glicemia, insulina sérica e HOMA-IR);

• concentrações plasmáticas de hormônios tireoideanos livres e TSH;

• concentração plasmática de adiponectina e concentração sérica de leptina.

Page 38: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

CASUÍSTICA

22

3. CASUÍSTICA

Page 39: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

CASUÍSTICA

23

3. CASUÍSTICA

Pacientes

Foram convidados a participar do estudo, através de carta ou telefonema, 200

pacientes obesos que constituíram a casuística de um estudo prévio sobre freqüência

de polimorfismos em genes associados à obesidade. Estes pacientes (60 homens e

140 mulheres) foram identificados através de avaliação clínica realizada na Clínica de

Hipertensão e Obesidade do Hospital Universitário Pedro Ernesto

(CLINEX/HUPE/UERJ).

Para formar o grupo de comparação, selecionamos indivíduos saudáveis com

IMC entre 18,5 e 25 kg/m², entre os funcionários do Hospital Universitário Pedro

Ernesto, bem como contatos indicados pelos próprios pacientes.

Este trabalho teve início somente após aprovação do Comitê de Ética em

Pesquisa (CEP) do Hospital Universitário Pedro Ernesto da Universidade do Estado do

Rio de Janeiro (número do processo no CEP: 517-CEP/HUPE). Todos os participantes

foram esclarecidos quanto ao projeto e concordaram com a realização da avaliação

molecular e com os demais dados coletados mediante a assinatura de um termo de

consentimento (Anexo 2).

Elegibilidade dos Pacientes

Os pacientes de ambos os sexos, que foram efetivamente incluídos no grupo de

estudo preencheram os seguintes critérios:

• idade mínima de 18 anos;

• obesos, apresentando IMC igual ou superior a 30 Kg/m² (WHO, 2003);

• terem assinado o termo de consentimento livre e esclarecido.

Foram excluídos do estudo os pacientes com: familiares participando do estudo;

modificações nos últimos três meses no peso corporal ou na intensidade ou na

frequência de exercícios físicos; níveis de creatinina sérica > 1,3 mg/dl ou clearance de

Page 40: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

CASUÍSTICA

24

creatinina ≤ 60 ml/mim; doenças hepáticas; doenças psiquiátricas; alcoolismo; uso de

insulina; infarto do miocárdio ou acidente vascular encefálico; insuficiência cardíaca

classe III ou IV NYHA; hipertensão arterial estágio II, definida pela presença de valores

de pressão sistólica ≥ 160 mm Hg ou pressão diastólica ≥ 100 mm Hg de acordo com o

JNC 7 Report (Chobanian et al., 2003).

Os indivíduos incluídos no estudo foram divididos em:

• Grupo de comparação – indivíduos saudáveis com IMC entre 18,5 e 25

kg/m²;

• Grupo portador do polimorfismo p.Q223R no gene LEPR – indivíduos

obesos com IMC igual ou superior a 30 Kg/m² portadores do alelo G;

• Grupo não portador do polimorfismo p.Q223R no gene LEPR - indivíduos

obesos com IMC igual ou superior a 30 Kg/m² não portadores do alelo G.

Page 41: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina

DESENHO DO ESTUDO E PLANO DE TRABALHO

25

4. DESENHO DO ESTUDO E PLANO DE TRABALHO Trata-se de um estudo observacional e transversal. Na primeira visita (V1) os

indivíduos obesos e eutróficos foram submetidos à anamnese e avaliação clínica, para

a seleção dos pacientes de acordo com os critérios de inclusão e exclusão

estabelecidos pelo protocolo. Os pacientes que faziam uso de medicação foram

avaliados clinicamente pela médica pesquisadora responsável, para avaliar a

possibilidade de suspensão da droga por um período de duas semanas.

Todos os participantes considerados elegíveis, incluindo os indivíduos que

suspenderam a medicação, foram orientados a comparecer à segunda visita (V2) no

Laboratório do CLINEX às 07h30min para coleta de sangue, após terem realizado jejum

de 12 horas. Além da avaliação laboratorial, na V2 os pacientes também foram

submetidos à avaliação nutricional, para determinação das medidas antropométricas e

aferição das pressões arteriais sistólicas e diastólicas e freqüência cardíaca.

Page 42: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

MÉTODOS

26

5. MÉTODOS

Page 43: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

MÉTODOS

27

5.1. Avaliação molecular Extração de DNA

Foram coletados 10 mL de sangue periférico dos indivíduos obesos, utilizando-se

tubos vacutainer com anticoagulante EDTA, seguindo normas de plena assepsia. A extração do DNA foi realizada a partir de leucócitos do sangue periférico por

salting-out, segundo adaptações do método descrito por Miller et al. (1988). O sangue foi homogeneizado vagarosamente e em seguida transferido para um

tubo cônico de 50 mL, ao qual se adicionou 3,5 vezes o volume inicial de tampão de lise

de hemácias (155 mM NH4Cl, 10 mM KHCO3,1 mM EDTA – Ph 7,4). O material foi

incubado no gelo por 30 minutos e centrifugado (centrífuga Excelsa Baby 11/206-R) por

15 minutos a uma velocidade de 1500 rpm / rotor 206109300. Após a centrifugação, o

sobrenadante foi descartado e ao sedimento foram acrescentados 5 mL de tampão de

lise de hemácias. O material foi novamente homogeneizado e ressuspenso através de

agitador de tubos do tipo vortex. Adicionou-se, então, 100 µL de Proteinase K a 20

mg/mL e 150 µL de SDS 20%. A amostra foi homogeneizada e deixada em banho de

aquecimento a 37º C por 20 horas.

Após a incubação foi acrescentado 1 mL de cloreto de sódio 6M, sendo o tubo

vigorosamente agitado por 15 segundos. O material foi então centrifugado

(Ultracentrífuga Himac CR21 – Hitachi) por 30 minutos a uma velocidade de 6000 rpm /

rotor 27. Após a centrifugação, o sobrenadante foi transferido para um novo tubo cônico

de 50 mL e o sedimento foi descartado. Foram adicionados ao sobrenadante 2 volumes

de álcool etílico absoluto gelado para a precipitação do DNA. O precipitado foi lavado

com álcool etílico 70% por duas vezes e em seguida transferido com o auxilio de uma

alça de vidro para um microtubo, sendo deixado secar à temperatura ambiente. O DNA

foi ressuspenso em 1 mL de TE (10 mM Tris, HCl, 1 mM EDTA- pH 7,4) e deixado

solubilizar em banho de aquecimento a 37ºC. Após a solubilização, o DNA foi

armazenado a 4ºC.

Paralelamente, também foi realizada a extração de DNA genômico utilizando-se

um kit comercial (BIOSYSTEMS), seguindo as orientações do fabricante.

Page 44: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

MÉTODOS

28

Estimativa da concentração do DNA

Para a quantificação do DNA foi realizada a eletroforese em gel de agarose 0,8%

em tampão TBE 1X (89 mM Tris, 89 mM H3BO3, 2 mM EDTA). A corrida eletroforética

foi realizada em cuba horizontal por 1 hora a 60 V utilizando-se TBE 1X como tampão

de corrida.

As amostras aplicadas no gel consistiram de 1 µL de DNA, 4 µL de água milliQ e

1 µL de corante de corrida (0,25% azul de bromofenol; 0,25% xileno cianol; 40%

glicerol). Após a corrida eletroforética, o gel de agarose foi corado com brometo de

etídio (0,5 µL/mL) por 5 a 10 minutos. A estimativa de concentração das amostras de

DNA foi realizada comparando-se estas com padrão de 100 µg do DNA do bacteriófago

λ, visualizada através de um transluminador de luz ultravioleta. Após a quantificação,

uma alíquota do DNA foi diluída a uma concentração de uso de 50 µg/µL e o restante

do material foi armazenado a 4ºC.

Caracterização do polimorfismo c.668A>G (p.Q223R) no gene LEPR

Para a identificação do polimorfismo c.668A>G no gene LEPR foi utilizada a

técnica de PCR-RFLP. Nesta técnica o DNA é amplificado através da reação em cadeia

de polimerase (PCR) seguida da digestão dos fragmentos amplificados com enzima de

restrição específica.

As amostras de DNA foram amplificadas em um termociclador PTC 100

utilizando os primers descritos por Gotoda et al. (1997) sendo estes: 5´

AAACTCAACGACTCTCCTT 3´ (SENSO) e 5´ TGAACTGACATTAGAGGTGAC 3´

(ANTISENSO). As reações de PCR incluíram 100 µg de DNA genômico, tampão de

reação 1X (10 mM Tris–HCl, 50 mM KCl, pH 8,0), 2,0 mM MgCl2, 0,2 mM de dNTP (1

mM de dATP, 1 mM de dCTP, 1 mM de dTTP e 1 mM de dGTP), 2,5 pmol de cada um

dos oligonucleotídeos e 0,5 U Tth DNA polimerase em um volume final de 25 µL.

As condições de ciclagem utilizadas incluíram desnaturação inicial a 95º por 5

minutos, seguida de 40 ciclos com três etapas: desnaturação a 95ºC por 30 segundos,

Page 45: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

MÉTODOS

29

pareamento a 52ºC por 45 segundos e extensão a 72ºC por 45 segundos, seguindo-se

uma etapa final de extensão a 72ºC por 10 minutos.

Uma alíquota de 10 µL do produto da PCR foi digerida com 2,5 U da enzima de

restrição MspI por 3h a 37ºC. Os produtos resultantes da digestão foram resolvidos por

géis de poliacrilamida 8% não-desnaturantes. A corrida eletroforética transcorreu à

temperatura ambiente por 45 minutos a 110 V.

Após a eletroforese, os géis foram corados por prata (Santos et al., 1993).

Primeiramente, o gel foi incubado sob agitação moderada em uma solução fixadora

contendo 10% de etanol e 0,5% de ácido acético a 40ºC por 3 minutos e, em seguida,

em uma solução de 10% etanol, 0,5% de ácido acético e 0,2% de nitrato de prata a

40ºC por 10 minutos. Após a coloração, foi realizada uma lavagem de 20 segundos com

água MilliQ à temperatura ambiente. O gel foi revelado em solução contendo 3% de

hidróxido de sódio e 150 µL de formaldeído à temperatura ambiente por 15 minutos.

Para intensificar a coloração das bandas, o gel foi submetido a uma solução de 10% de

etanol e 0,5% de ácido acético a 40ºC por 3 minutos.

O padrão obtido a partir da digestão do produto amplificado com a enzima MspI,

está esquematizado na Figura 3. A presença da variante alélica G cria um sítio de

clivagem da enzima de restrição MspI, sendo assim, nos indivíduos homozigotos GG o

fragmento de 80 pb gerado pela PCR é clivado em dois fragmentos, com 58 e 22 pb.

Os indivíduos heterozigotos AG apresentam, além desses dois fragmentos, um

fragmento de 80 pb resultante do alelo A não clivado pela enzima. Os indivíduos

homozigotos AA, o fragmento amplificado não é clivado e, nestes, só observamos um

fragmento com 80 pb.

Page 46: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

MÉTODOS

30

Figura 3: Representação esquemática dos padrões de bandas obtidas por gel de

poliacrilamida, após a digestão do fragmento amplificado pela enzima MspI. Linha 1:

fragmento gerado pela PCR; linha 2: padrão obtido para indivíduos homozigotos (AA);

linha 3: padrão para indivíduos heterozigotos (AG); linha 4: padrão obtido para os

indivíduos homozigotos (GG).

5.2. Avaliação antropométrica Índice de massa corporal (IMC)

Este índice foi calculado através da divisão do peso (em kg) pela estatura

elevada ao quadrado (em m²) (WHO, 2000).

O peso foi estimado através do uso de uma balança antropométrica da marca

Filizola (precisão de 0,1 kg), e a estatura foi aferida através do uso de um estadiômetro

(precisão 0,5 cm), com os pacientes sem sapatos.

Circunferência da cintura (CC), de quadril (CQ) e razão cintura-quadril (RCQ)

As circunferências da cintura (CC) e de quadril (CQ) foram mensuradas com o

auxílio de uma fita métrica inextensível, graduada em centímetros, com o paciente em

pé. A CC foi determinada no ponto médio entre a crista ilíaca e a borda inferior do

último arco costal. A CQ foi medida na maior circunferência na extensão posterior das

Page 47: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

MÉTODOS

31

nádegas. A RCQ foi obtida a partir da divisão da circunferência da cintura pela

circunferência do quadril.

5.3. Avaliação hemodinâmica

A pressão arterial e a freqüência cardíaca foram aferidas pelo método

oscilométrico através do uso do Dinamap (1846, Critikon), com manguito de tamanho

apropriado, no membro superior não dominante com o paciente sentado. Após 5

minutos de repouso, foram consideradas 3 medidas seqüenciais de pressão arterial

com intervalos de 3 minutos, que não se diferenciassem mais do que 10 mm Hg nos

valores de pressão arterial sistólica e 5 mm Hg nos valores de pressão arterial

diastólica. A pressão arterial média foi obtida pelo cálculo do dobro da média da

pressão arterial diastólica, somado à média da pressão arterial sistólica, sendo este

resultado dividido por três. A freqüência cardíaca foi determinada a partir do cálculo da

média aritmética dos valores obtidos nos três momentos de aferição da pressão arterial.

5.4. Avaliação metabólica e hormonal

Todo o processamento das amostras de sangue coletadas após jejum de 12

horas foi realizado atendendo as especificações próprias de cada variável. Alíquotas de

plasma e soro foram estocadas a – 20ºC ou a – 80ºC, conforme apropriado, para as

determinações laboratoriais.

5.4.1. Metabolismo glicídico

As amostras de sangue para dosagem de glicose foram coletadas após 12 horas

de jejum, em tubo sem anticoagulante, com centrifugação após 30 minutos e dosadas

por método enzimático-hexoquinase, no mesmo dia da coleta. Os valores foram

expressos em mg/dl.

A insulina sérica de jejum foi determinada por radioimunoensaio (RIE) usando

reagentes da LINCO Research, St Louis, USA, específicos para insulina humana.

Page 48: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

MÉTODOS

32

Neste ensaio a reatividade cruzada com a pro-insulina humana é inferior a 0,2%

(Morgan & Lazarow, 1963). Os valores foram expressos em µU/ml.

O índice de resistência à insulina foi estimado através da Fórmula da Avaliação

do Modelo Homeostático (HOMA), em que a resistência é determinada pelo produto da

insulinemia de jejum (µU/ml) e da glicemia de jejum (mmol/l) dividido por 22,5. Este

índice possui alta correlação com o clamping euglicêmico hiperinsulinêmico (Matthews

et al., 1985; Avignon et al.,1999).

5.4.2. Metabolismo lipídico O colesterol total foi dosado pelo método de Huang modificado, o HDL-colesterol

pelo sistema enzimático COD-ANA, Lab Test e os triglicerídeos, após saponificação,

pela reação de Hantzch, usando o método de Soloni modificado.

O LDL-colesterol foi estimado através da fórmula de Friedwald et al. (1972),

válida quando os valores de triglicerídeos são inferiores a 400 mg/dl: Colesterol total –

(HDL-colesterol + triglicerídeos / 5). Os valores foram expressos em mg/dl.

5.4.3. Ácido úrico

O ácido úrico foi dosado pelo método enzimático (uricase) através do Kit BT 3000

(Winer) e seus valores foram expressos em mg/ dl.

5.4.4. Uréia

A uréia foi dosada pelo método cinético (urease-GLUDH) através do Kit BT 3000

(Winer) e seus valores foram expressos em mg/ dl.

5.4.5. Creatinina

A creatinina foi dosada pelo método cinético (reação de Jaffé) através do Kit BT

3000 (Winer) e seus valores foram expressos em mg/ dl.

Page 49: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

MÉTODOS

33

5.4.6. Leptina sérica

As concentrações séricas de leptina de jejum foram determinadas por RIE

usando reagentes da LINCO Research, St Louis, USA, específicos para leptina

humana.

Alíquotas de 500 µl de soro foram armazenadas em freezer com a temperatura

mantida a -20º C.

O coeficiente de variação intra-ensaio foi de 3,4%. Os valores foram expressos

em ng/ml.

5.4.7. Adiponectina plasmática As amostras foram coletadas após jejum de 12 horas, em tubo com

anticoagulante EDTA. Depois foram centrifugadas e armazenadas em alíquotas no

freezer a -80ºC, até o momento do ensaio. A concentração de adiponectina plasmática foi determinada por RIE usando

reagentes da LINCO Research, St Louis, USA, específicos para adiponectina humana.

O coeficiente de variação intra-ensaio foi de 3,59%. Os valores obtidos foram

divididos por 1.000, sendo expressos em µg/ml.

5.4.8. Hormônio estimulador da tireóide (TSH)

O TSH plasmático foi determinado por ensaio imunorradiométrico (IRMA) usando

reagentes da ICN Pharmaceuticals Inc., CA, EUA, específicos para TSH humano.

Alíquotas de 500 µl de plasma foram coletadas em jejum de pelo menos 12

horas e armazenadas em freezer em temperatura mantida a -20º C.

O coeficiente de variação intra-ensaio foi de 4,1%.

Os valores obtidos de TSH foram expressos em mU/L e os níveis de

normalidade estão apresentados na Tabela 2.

Page 50: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

MÉTODOS

34

5.4.9. Hormônios tireoideanos livres

As concentrações plasmáticas de triiodotironia (T3) e a tiroxina (T4) livres foram

quantificadas por RIE comercial usando reagentes da MP Biomedicals Inc., NY, EUA,

específico para humanos.

Alíquotas de 500 µl de plasma foram coletadas em jejum de pelo menos 12 horas

e armazenadas em freezer a temperatura de -20º C.

O coeficiente de variação intra-ensaio para o T3 e T4 livres foram 5,3% e 3,9%,

respectivamente.

Os valores obtidos de T3 e T4 Livres foram expressos em pg/mL e ng/dL

respectivamente.

Tabela 2: Valores de normalidade das concentrações circulantes de TSH e hormônios tireoideanos livres.

TSH 0,30 – 6,50 mU/L

T4 Livre 0,7 – 1,7 ng/dL

T3 Livre 2,97 – 5,19 pg/mL

5.5. Análise estatística dos dados

Os dados foram armazenados no programa Excel para Windows e as análises

estatísticas foram realizadas utilizando o programa SPSS 12 (SPSS Lead Technologies

Station, Chicago, USA). As variáveis que não passaram no teste de normalidade, foram

logaritmizadas: adiponectina, leptina, insulina, HOMA-IR e TSH. Utilizaram-se para a

descrição das variáveis contínuas, as médias aritméticas com seus respectivos desvios

padrões. As comparações entre as distribuições das variáveis de indivíduos eutróficos e

obesos foram feitas através do teste t de Student não pareado; para comparação das

médias das variáveis dos grupos de obesos de acordo com o genótipo, AA, AG e GG

utilizou-se a análise de variância (ANOVA), seguida do pós-teste de Tukey para

determinação das diferenças entre os grupos. Procedeu-se à análise de regressão

Page 51: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

MÉTODOS

35

linear com a finalidade de verificar fatores de confundimento, como sexo e idade. A

apreciação estatística da comparação de proporções foi baseada no teste Qui-

quadrado. O nível de significância estatística considerado foi p<0,05.

Page 52: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

RESULTADOS

36

6. RESULTADOS

Page 53: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

RESULTADOS

37

6. RESULTADOS 6.1. Casuística

Compareceram 129 pacientes obesos (IMC ≥ 30 Kg/ m²) e 32 indivíduos

eutróficos (IMC < 25 Kg/ m²) de ambos os sexos para uma entrevista inicial, a qual

contemplou a aplicação dos critérios de elegibilidade estabelecidos previamente e

culminou com a exclusão de 14 pacientes: coleta incompleta das variáveis do estudo

(n=5), uso de medicação anti-tireoideana (n=2), perda de peso nos 3 meses que

antecederam a pesquisa (n=3), acompanhamento psiquiátrico (n=1), uso de insulina

(n=2) e alcoolismo (n=1). Após esta consulta, foram considerados 115 indivíduos

obesos e 32 eutróficos elegíveis, de ambos os sexos, os quais foram orientados a

comparecer no Laboratório do CLINEX para serem submetidos às avaliações

laboratoriais, clínica e nutricional. Verificou-se a possibilidade de suspensão de drogas,

mediante avaliação médica, em 32 dos 80 pacientes obesos que faziam uso de anti-

hipertensivo, hipoglicemiante oral e redutores de colesterol (estatinas). Na primeira

semana, estes pacientes foram reavaliados em uma nova consulta clínica e todos

puderam permanecer com a medicação suspensa até o término do período de duas

semanas. Entre os pacientes que não puderam suspender a medicação (n=48), 43

faziam uso de anti-hipertensivo e 12 de hipoglicemiante oral.

As características antropométricas, metabólicas e hemodinâmicas de todos os

participantes do estudo constituídos por indivíduos eutróficos e obesos, são

apresentadas na Tabela 3. Comparando ambos os grupos, não observamos diferenças

em relação a sexo e idade. As medidas antropométricas de peso, índice de massa

corporal, CC, CQ e RCQ foram, respectivamente, 69,46%, 70,48%, 40,33%, 24,79% e

13,25% maiores nos indivíduos obesos comparados aos eutróficos (Tabela 3).

Page 54: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

RESULTADOS

38

Tabela 3. Características antropométricas, metabólicas e hemodinâmicas de todos participantes do estudo. Variáveis Eutróficos

(n=32) Obesos (n=115)

p valor

Idade (anos) 42,56±6,59 45,73±12,04 0,156 Sexo masculino, n (%) 8 (25%) 35 (30,5%) 0,550 Peso (kg) 61,56±9,50 104,32±27,01 0,000 Índice de massa corporal (kg/m²) 22,77±2,03 38,82±8,44 0,000 Circunferência de cintura (cm) 80,27±6,95 112,65±15,61 0,000 Circunferência de quadril (cm) 96,72±4,57 120,70±16,49 0,000 Razão cintura- quadril 0,83±0,06 0,94±0,11 0,000 PAS (mmHg) 108,2±11,42 130,88±17,48 0,000 PAD (mmHg) 66,03±11,17 83,44±12,30 0,000 Pressão arterial média (mmHg) 80,13±10,57 99,25±13,19 0,000 Freqüência cardíaca (bpm) 69,23±10,44 73,33±10,44 0,062 Uréia (mg/dl) 28,72±11,61 30,24±9,48 0,499 Creatinina (mg/dl) 0,79±0,11 0,83±0,10 0,136 Ácido úrico (mg/dl) 3,71±1,03 5,58±1,64 0,000 Colesterol Total (mg/dl) 215,75±42,94 203,70±41,18 0,163 Triglicerídeos (mg/dl) 110,16±39,88 157,72±81,94 0,000 HDL-colesterol (mg/dl) 54,28±11,39 45,78±10,07 0,000 LDL-colesterol (mg/dl) 139,41±38,74 126,04±35,48 0,085 Glicose (mg/dl) 90,94±7,32 107,70±26,29 0,000 Insulina (µU/ml) 10,16±3,80 23,54±12,26 0,000 HOMA-IR 2,26±0,88 6,37±4,06 0,000 TSH (mU/L) 1,89±1,42 2,56±1,39 0,006 T4 Livre (ng/dl) 1,22±0,39 1,03±0,22 0,001 T3 Livre (pg/ml) 2,76±0,73 2,77±0,72 0,963 Leptina (ng/ml) 10,36±5,93 43,94±29,14 0,000 Adiponectina (µg/ml) 7,91±4,36 7,4±4,64 0,560 Valores são expressos como média ± desvio padrão da média. PAS: pressão arterial sistólica; PAD: pressão arterial diastólica; HDL: lipoproteína de alta densidade; LDL: lipoproteína de baixa densidade; HOMA-IR: índice de resistência à insulina; TSH: hormônio estimulante da tiróide; T4 Livre: tiroxina livre; T3 Livre: triiodotironina livre.

Quanto às medidas hemodinâmicas, foram observadas diferenças

estatisticamente significativas entre os grupos nos níveis de pressão arterial (sistólica e

diastólica) e pressão arterial média, enquanto que a freqüência cardíaca não variou

entre os grupos.

Page 55: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

RESULTADOS

39

Os indivíduos obesos apresentaram concentrações significativamente maiores

de ácido úrico, embora dentro do limite de normalidade, e concentrações séricas de

uréia e creatinina similares as observadas nos indivíduos eutróficos.

Em relação ao metabolismo lipídico, observamos que não houve diferenças

entre os grupos quanto às concentrações de colesterol total e LDL-C, enquanto os

níveis de HDL-C apresentaram concentrações significativemente menores no grupo de

obesos. Já as concentrações de triglicerídeos encontravam-se significativamente

maiores no grupo de obesos quando comparadas ao grupo de indivíduos eutróficos.

Os obesos apresentaram maior glicemia e insulinemia de jejum, além de maior

índice de resistência à insulina, HOMA-IR, quando comparados aos indivíduos

eutróficos. Entre os indivíduos obesos, 26,7% (n=40) apresentavam intolerância à

glicose e 21,3% (n=32) diabetes mellitus tipo 2.

Quanto à função tireoideana, os indivíduos obesos apresentaram maiores

concentrações de TSH e menores de T4L, embora dentro dos limites de normalidade,

quando comparados aos indivíduos eutróficos. Enquanto o T3L não exibiu diferença

significativa entre os grupos, apesar de estar abaixo do limite da normalidade.

As concentrações plasmáticas de adiponectina não mostraram diferenças

significativas e as concentrações de leptina sérica foram significativamente maiores nos

indivíduos obesos quando comparados aos indivíduos eutróficos.

Em adição a esses achados, foram realizadas análises da associação entre as

variáveis antropométricas, metabólicas e hemodinâmicas nos grupos de indivíduos

eutróficos e obesos.

Observamos que no grupo de indivíduos eutróficos (Tabela 4) o IMC e a CC

correlacionaram-se positivamente com a leptina (r=0,468;p=0,008 e r=0,479;p=0,009,

respectivamente), e a RCQ associou-se com a frequência cardíaca (r=0,372;p=0,047).

Na Tabela 5 observamos que no grupo de indivíduos obesos, o IMC associou-se

positivamente com a frequência cardíaca (r=0,197;p=0,035), insulina (r=0,310;p=0,001)

HOMA-IR (r=0,250;p=0,007) e leptina (r=0,651;p=0,000). Enquanto a CC correlacionou-

se com a pressão arterial média (r=0,192;p=0,040), frequência cardíaca

(r=0,240;p=0,010), glicose (r=0,244;p=0,008), insulina (r=0,419;p=0,000), HOMA-IR

(r=0,370;p=0,000), TSH (r=0,185;p=0,047) e leptina (r=0,629;p=0,000). A RCQ

Page 56: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

RESULTADOS

40

apresentou associação positiva com a pressão arterial média (r=0,241;p=0,010),

triglicerídeos (r=0,253;p=0,006), glicose (r=0,185;p=0,048), insulina (r=0,363;p=0,000) e

HOMA-IR (r=0,379;p=0,000).

Tabela 4. Correlações de Pearson entre as variáveis antropométricas, metabólicas e hemodinâmicas avaliadas nos pacientes eutróficos (n= 32). Índice de massa

corporal (kg/m²) Circunferência de

cintura (cm) Razão cintura-

quadril Variáveis* r p valor r p valor r p valor PAS (mmHg) 0,057 0,766 0,120 0,534 0,184 0,338 PAD (mmHg) 0,056 0,767 0,112 0,562 0,141 0,465 Pressão arterial média (mmHg) 0,197 0,296 0,282 0,139 0,311 0,101 Freqüência cardíaca (bpm) -0,011 0,955 0,348 0,064 0,372 0,047 Colesterol Total (mg/dl) -0,149 0,423 0,084 0,666 0,195 0,310 Triglicerídeos (mg/dl) 0,216 0,244 0,234 0,223 0,364 0,053 HDL-colesterol (mg/dl) -0,246 0,183 -0,209 0,276 -0,104 0,591 LDL-colesterol (mg/dl) -0,080 0,670 0,159 0,410 0,219 0,255 Glicose (mg/dl) 0,256 0,165 0,057 0,769 -0,033 0,867 Insulina (µU/ml) -0,046 0,808 0,016 0,936 -0,053 0,786 HOMA-IR -0,045 0,811 0,015 0,938 -0,058 0,766 TSH (mU/L) -0,008 0,966 -0,062 0,748 0,001 0,998 T4 Livre (ng/dl) 0,121 0,517 0,091 0,640 0,171 0,374 T3 Livre (pg/ml) -0,076 0,684 -0,021 0,913 0,104 0,592 Leptina (ng/ml) 0,468 0,008 0,479 0,009 0,360 0,055 Adiponectina (µg/ml) 0,117 0,530 -0,193 0,315 -0,190 0,323 *ajustadas para sexo e idade. PAS: pressão arterial sistólica; PAD: pressão arterial diastólica; HDL: lipoproteína de alta densidade; LDL: lipoproteína de baixa densidade; HOMA-IR: índice de resistência à insulina; TSH: hormônio estimulante da tiróide; T4 Livre: tiroxina livre; T3 Livre: triiodotironina livre.

Page 57: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

RESULTADOS

41

Tabela 5. Correlações de Pearson entre as variáveis antropométricas, metabólicas e hemodinâmicas avaliadas nos pacientes obesos (n= 115). Índice de massa

corporal (kg/m²) Circunferência de cintura (cm)

Razão cintura- quadril

Variáveis* r p valor r p valor r p valor PAS (mmHg) 0,164 0,079 0,163 0,081 0,094 0,318 PAD (mmHg) 0,174 0,062 0,155 0,099 0,072 0,446 Pressão arterial média (mmHg) 0,126 0,179 0,192 0,040 0,241 0,010 Freqüência cardíaca (bpm) 0,197 0,035 0,240 0,010 0,136 0,147 Colesterol Total (mg/dl) 0,024 0,797 0,027 0,778 0,114 0,223 Triglicerídeos (mg/dl) -0,024 0,796 0,064 0,499 0,253 0,006 HDL-colesterol (mg/dl) -0,059 0,529 -0,048 0,610 -0,084 0,371 LDL-colesterol (mg/dl) 0,061 0,518 0,054 0,563 0,103 0,272 Glicose (mg/dl) 0,125 0,184 0,244 0,008 0,185 0,048 Insulina (µU/ml) 0,310 0,001 0,419 0,000 0,363 0,000 HOMA-IR 0,250 0,007 0,370 0,000 0,379 0,000 TSH (mU/L) 0,133 0,156 0,185 0,047 0,175 0,061 T4 Livre (ng/dl) -0,046 0,628 -0,063 0,502 -0,029 0,762 T3 Livre (pg/ml) -0,010 0,915 -0,065 0,495 -0,044 0,645 Leptina (ng/ml) 0,651 0,000 0,629 0,000 0,099 0,295 Adiponectina (µg/ml) 0,090 0,338 0,036 0,699 -0,130 0,166 *ajustadas para sexo e idade. PAS: pressão arterial sistólica; PAD: pressão arterial diastólica; HDL: lipoproteína de alta densidade; LDL: lipoproteína de baixa densidade; HOMA-IR: índice de resistência à insulina; TSH: hormônio estimulante da tiróide; T4 Livre: tiroxina livre; T3 Livre: triiodotironina livre.

6.2. Análise Molecular do polimorfismo c.668A>G (p.Q223R) no gene LEPR

No grupo de 115 indivíduos obesos analisados para o polimorfismo c.668A>G

(p.Q223R), observamos a seguinte distribuição genotípica: 32 (27,8%) genótipo AA, 64

(55,7%) genótipo AG e 19 (16,5%) genótipo GG. A análise deste polimorfismo no gene

LEPR realizada em nossa amostra está ilustrada em figura 4.

Page 58: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

RESULTADOS

42

Figura 4: Exemplo de gel de poliacrilamida com o resultado da análise do polimorfismo

c.668A>G (p.Q223R) no gene LEPR através da técnica de PCR-RFLP em quatro

individuos obesos. Linha 1:marcador de peso molecular PstI; linhas 02 e 05: indivíduos

heterozigotos (AG); linha 03: indivíduo homozigoto (GG) para o polimorfismo

(p.Q223R); linha 04: indivíduo homozigoto (AA).

Os indivíduos obesos foram divididos em grupos de acordo com o genótipo. As

características antropométricas, metabólicas e hemodinâmicas dos grupos, são

apresentadas na Tabela 6.

Comparando os indivíduos com genótipo AA, AG e GG observamos que não

houve diferenças entre eles em relação a sexo e medidas antropométricas (Tabela 6).

Quanto aos parâmetros hemodinâmicos e metabólicos, conforme observado na

Tabela 6 houve diferença estatisticamente significativa entre os grupos apenas com

relação à função tireoideana. Observamos que as concentrações de TSH (p=0,002) e

T4L (p=0,016) apresentaram valor de p significativo entre os grupos de acordo com o

genótipo (Figuras 5 e 6). Na análise de pós-teste (teste de Tukey) demonstrou-se que o

TSH estava significativamente menor nos indivíduos de genótipo AG quando

comparado ao grupo de genótipo AA (p=0,001). Em relação ao T4L, observamos

concentrações estatisticamente maiores no grupo de genótipo AG quando comparado

aos indivíduos de genótipo AA (p=0,011). Quanto às concentrações de T3L, não

Page 59: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

RESULTADOS

43

exibiram diferenças estatisticamente significativas entre os grupos (p=0,273). Não

observamos diferenças entre os grupos AG e GG.

Tabela 6: Parâmetros antropométricos, metabólicos e hemodinâmicos dos indivíduos obesos de acordo com o genótipo. AA

(n=32) AG

(n=64) GG

(n=19)

Variáveis* Média±DP Média±DP Média±DP p valor Sexo masculino, n (%) 11(34,4%) 21(32,8%) 3(15,8%) 0,312 Peso (kg) 110,14±32,76 104,081±24,54 95,31±22,71 0,165 Índice de massa corporal (kg/m²) 40,11±9,98 38,51±7,69 37,71±8,26 0,564 Circunferência de cintura (cm) 117,48±17,57 111,24±13,90 109,24±16,57 0,105 Circunferência de quadril (cm) 121,06±16,47 121,01±17,33 119,05±14,09 0,894 Razão cintura- quadril 0,97±0,10 0,93±0,11 0,92±0,10 0,082 PAS (mmHg) 134,17±17,08 129,05±17,29 131,51±18,82 0,399 PAD (mmHg) 85,51±11,44 81,89±12,96 85,17±11,20 0,320 Pressão arterial média (mmHg) 101,73±12,55 97,61±13,56 100,62±12,88 0,316 Freqüência cardíaca (bpm) 74,24±10,20 72,76±9,28 73,72±14,39 0,799 Uréia (mg/dl) 30,5±11,25 30,01±8,94 30,58±8,42 0,959 Creatinina (mg/dl) 0,86±0,24 0,83±0,19 0,77±0,17 0,332 Ácido úrico (mg/dl) 6,2±1,76 5,39±1,58 5,16±1,42 0,034 Colesterol Total (mg/dl) 198,97±37,15 203,29±44,12 213±37,68 0,501 Triglicerídeos (mg/dl) 166,06±72,35 152,53±88,99 161,16±74,61 0,736 HDL-colesterol (mg/dl) 42,5±7,5 46,86±11,03 47,68±9,61 0,089 LDL-colesterol (mg/dl) 123,26±33,29 125,34±37,53 133,08±32,67 0,620 Glicose (mg/dl) 108,12±24,27 105,86±21,35 113,21±41,51 0,565 Insulina (µU/ml) 22,45±11,25 24,43±13,29 22,37±10,50 0,890 HOMA-IR 5,92±3,30 6,52±4,20 6,58±4,84 0,972 TSH (mU/L) 3,25±1,72 2,23±1,11‡ 2,49±1,25 0,002 T4 Livre (ng/dl) 0,94±0,19 1,08±0,22§ 1,04±0,22 0,016 T3 Livre (pg/ml) 2,60±0,71 2,86±0,75 2,77±0,63 0,273 Leptina (ng/ml) 43,78±29,80 43,52±29,56 45,62±28 0,907 Adiponectina (µg/ml) 7,31±3,34 7,41±5,66 7,49±2,22 0,593 *ajustadas para sexo e idade.Valores são expressos como média ± desvio padrão da média. PAS: pressão arterial sistólica; PAD: pressão arterial diastólica; HDL: lipoproteína de alta densidade; LDL: lipoproteína de baixa densidade; HOMA-IR: índice de resistência à insulina;TSH: hormônio estimulante da tiróide; T4 Livre: tiroxina livre; T3 Livre: triiodotironina livre. Análise pós-teste (teste de Tukey): ‡ p= 0,001 AG vs. AA; § p=0,011 AG vs. AA.

Page 60: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

RESULTADOS

44

Figura 5: Comparação entre as concentrações plasmáticas de TSH nos grupos

de acordo com o genótipo. * p= 0,001 AG vs. AA.

Figura 6: Comparação entre as concentrações plasmáticas de T4L nos grupos

de acordo com o genótipo. * p= 0,011 AG vs. AA.

Esses achados sinalizam a existência de um efeito do alelo G na função

tireoideana. Como as concentrações circulantes de HTs e TSH não diferiram entre os

indivíduos heterozigotos e homozigotos para o polimorfismo no gene LEPR, mas sim

entre os indivíduos selvagens (AA) e os indivíduos de genótipo AG, outras análises

estatísticas foram realizadas agrupando os indivíduos portadores do alelo G. Na Tabela

Page 61: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

RESULTADOS

45

7 encontram-se as características antropométricas, hemodinâmicas e metabólicas dos

grupos AA e AG + GG.

Tabela 7: Parâmetros antropométricos, metabólicos e hemodinâmicos dos indivíduos obesos de acordo com a presença do alelo G. AA

(n=32) AG + GG

(n=83)

Variáveis* Média±DP Média±DP p valor Idade (anos) 47,91±12,93 44,89±11,65 0,053 Sexo masculino, n (%) 11 (34,4%) 24 (28,9%) 0,569 Peso (kg) 110,14±32,76 102,07±24,28 0,152 Índice de massa corporal (kg/m²) 40,11±9,98 38,33±7,78 0,369 Circunferência de cintura (cm) 117,48±17,57 110,78±14,47 0,061 Circunferência de quadril (cm) 121,06±16,47 120,57±16,59 0,886 Razão cintura- quadril 0,97±0,10 0,93±0,10 0,026 PAS (mmHg) 134,16±17,08 129,61±17,57 0,209 PAD (mmHg) 85,51±11,44 82,65±12,59 0,247 Pressão arterial média (mmHg) 101,73±12,55 98,30±13,39 0,203 Freqüência cardíaca (bpm) 74,24±10,20 72,98±10,57 0,561 Uréia (mg/dl) 30,5±11,25 30,14±8,77 0,873 Creatinina (mg/dl) 0,86±0,24 0,82±0,19 0,365 Ácido úrico (mg/dl) 6,2±1,76 5,34±1,54 0,019 Colesterol Total (mg/dl) 198,97±37,15 205,52±42,71 0,420 Triglicerídeos (mg/dl) 166,06±72,35 154,51±85,56 0,469 HDL-colesterol (mg/dl) 42,5±7,50 47,05±10,67 0,012 LDL-colesterol (mg/dl) 123,26±33,29 127,12±36,43 0,589 Glicose (mg/dl) 108,12±24,27 107,54±27,17 0,912 Insulina (µU/ml) 22,45±11,25 23,96±12,67 0,717 HOMA-IR 5,92±3,30 6,54±4,32 0,800 TSH (mU/L) 3,25±1,72 2,29±1,14 0,002 T4 Livre (ng/dl) 0,94±0,19 1,07±0,22 0,003 T3 Livre (pg/ml) 2,60±0,71 2,84±0,72 0,121 Leptina (ng/ml) 43,78±29,80 44,0±29,06 0,879 Adiponectina (µg/ml) 7,31±3,34 7,43±5,07 0,841 *ajustadas para sexo e idade. Valores são expressos como média ± desvio padrão da média. PAS: pressão arterial sistólica; PAD: pressão arterial diastólica; HDL: lipoproteína de alta densidade; LDL: lipoproteína de baixa densidade; HOMA-IR: índice de resistência à insulina;TSH: hormônio estimulante da tiróide; T4 Livre: tiroxina livre; T3 Livre: triiodotironina livre.

Comparando o grupo de indivíduos de genótipo AA com o grupo de genótipo AG

+ GG, observamos que não houve diferença entre eles em relação a sexo e idade. Em

Page 62: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

RESULTADOS

46

relação às medidas antropométricas, os resultados das análises não foram

estatisticamente significativos, mas podemos observar que o grupo de indivíduos

portadores do alelo G apresentou menor peso, IMC e circunferência de cintura quando

comparado aos indivíduos AA (Tabela 7). Apenas a RCQ apresentou valor de p

significativo (p=0,026), com menor valor entre os indivíduos de genótipo AG e GG.

A concentração de ácido úrico estava significativamente menor no grupo de

indivíduos portadores do alelo G quando comparados aos indivíduos de genótipo AA.

Com relação aos parâmetros hemodinâmicos, observamos que os indivíduos

portadores do alelo G apresentaram menor PAS, com diferença aproximadamente de

5mmHg, apesar de não exibir um p significativo (p=0,209). Quando comparamos a

proporção de indivíduos em uso de medicação anti-hipertensiva entre os indivíduos de

genótipo AA (65,6%; n=21) e os indivíduos portadores do alelo G (60,2%; n=50),

observamos que não houve diferença estatisticamente significativa (χ2=0,283;p=0,594).

Quanto ao metabolismo glicídico, não observamos diferenças significantes entre

os grupos. Quando comparamos a proporção de indivíduos com intolerância à glicose

entre os indivíduos de genótipo AA (40,6%; n=13) e os indivíduos portadores do alelo G

(32,5%; n=27), observamos que não houve diferença estatisticamente significativa

(χ2=0,667;p=0,414). O mesmo foi observado com relação à proporção de diabetes

mellitus tipo 2 no grupo de indivíduos de genótipo AA (31,2%; n=10) e o grupo de

indivíduos de genótipo AG e GG (26,5%; n=22) (χ2=0,259; p=0,611). A proporção de

indivíduos em uso de hipoglicemiante oral também não diferiu entre os indivíduos de

genótipo AA (18,8%;n=6) e os de genótipo AG e GG (15,7%;n=13) (χ2=0,160;p=0,690).

Quanto ao metabolismo lipídico, observamos que o HDL-colesterol apresentou

níveis significativamente maiores no grupo de indivíduos de genótipo AG + GG quando

comparado ao grupo de genótipo AA.

Quanto à função tireoideana, observamos que o TSH (p=0,002) apresentou

menor média, embora dentro da faixa de normalidade, no grupo de indivíduos de

genótipo AG e GG, quando comparado ao grupo de indivíduos de genótipo AA (Figura

7). Enquanto que o T4L exibiu concentração significativamente maior, embora dentro do

limite de normalidade, no grupo de genótipo AG e GG (p=0,003) (Figura 8). Já o T3L

não apresentou relevância estatística.

Page 63: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

RESULTADOS

47

Figura 7: Comparação entre as concentrações plasmáticas de TSH nos grupos

de genótipo AA e genótipo AG + GG.

* p= 0,002

Figura 8: Comparação entre as concentrações plasmáticas de T4L nos grupos

de genótipo AA e genótipo AG + GG

* p= 0,003

Page 64: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

DISCUSSÃO

48

7. DISCUSSÃO

Page 65: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

DISCUSSÃO

49

7. DISCUSSÃO

7.1. Casuística

Com a finalidade de caracterizar o perfil metabólico e hemodinâmico da nossa

amostra de pacientes obesos, indivíduos saudáveis com IMC entre 18,5 e 25 kg/m²

foram recrutados. Apesar de 48 dos 115 pacientes obesos fazerem uso de medicação

anti-hipertensiva e/ou hipoglicemiantes orais, e não terem sido submetidos a um

período de suspensão da medicação, os resultados das análises estatísticas permitiram

constatar que indivíduos eutróficos e obesos apresentam diferenças marcantes tanto

nos parâmetros antropométricos quanto metabólicos e hemodinâmicos.

Estudos prévios, com diferentes grupos étnicos, demonstraram que o aumento

no peso corporal caracteriza-se pela elevação concomitante nos valores de pressão

arterial tanto em mulheres quanto em homens (Must et al., 1999; Brown et al., 2000;

Doll et al., 2002). Embora no presente estudo, parte dos pacientes obesos estivesse em

uso de medicação anti-hipertensiva (n=43), este grupo apresentou, como média,

valores de pressão arterial condizentes com a classificação de pré-hipertensos segundo

The JNC 7 Report (Chobanian et al., 2003). Quando comparados aos indivíduos

eutróficos, observamos que os obesos apresentaram maiores níveis de pressão arterial,

com uma diferença de aproximadamente 23 mmHg na pressão arterial sistólica e cerca

de 17 mmHg na diastólica. Brown et al. (2000) utilizaram os dados do NHANES III, e

verificaram que nesta população a média da pressão arterial sistólica foi 9 mmHg

superior em homens e 11 mmHg em mulheres que apresentavam IMC superior a 30

kg/m² comparados aos indivíduos de mesmo sexo com IMC entre 18,5 e 25 kg/m².

Existem controversias na literatura a respeito de qual parâmetro de distribuição

de gordura corporal é o mais apropriado para identificação de indivíduos com elevado

risco cardiometabólico (Després et al., 2001; Yusuf et al., 2005). Resultados recentes

de uma meta-análise (Koning et al., 2007) demonstraram que a circunferência de

cintura (CC) e a razão cintura/quadril (RCQ) constituem medidas capazes de evidenciar

os efeitos do acúmulo de tecido adiposo na região central. Koning et al. (2007)

observaram que, em ambos os sexos, o aumento em 1 cm na CC, eleva em 2% o risco

Page 66: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

DISCUSSÃO

50

relativo para DCV (95% IC: 1–3%), e que um aumento em 0,01 U na RCQ, o risco

relativo para DCV aumenta 5% (95% CI: 4–7%). No presente estudo, além do IMC,

foram medidas a CC e a RCQ, as quais foram significativamente maiores nos indivíduos

obesos e associaram-se de forma positiva com a pressão arterial média (CC e RCQ),

freqüência cardíaca (CC), triglicerídeos (RCQ), glicemia e insulinemia de jejum, e

HOMA-IR (CC e RCQ). O que enfatiza a necessidade de valorizar ambas as medidas

antropométricas, juntamente com o IMC, na prática clínica.

Os indivíduos obesos, em concordância com achados prévios de que o excesso

de peso corporal associa-se a alterações no metabolismo glicídico (Dalton et al., 2003),

apresentaram glicemia de jejum em média acima do limite superior de normalidade

estabelecido pela ADA (2007). Entre os indivíduos obesos, 26,7% (n=40) apresentavam

intolerância à glicose e 21,3% (n=32) diabetes mellitus tipo 2. Além disso, a insulina

plasmática estava acima da faixa de normalidade e juntamente com o HOMA-IR,

apresentou valores mais que o dobro dos que foram encontrados nos indivíduos

eutróficos. Hu et al. (2001) analisaram dados de mais de 84.000 mulheres que

participaram do Nurses’ Health Study, e demonstraram que a obesidade constitui o fator

de risco mais importante para o desenvolvimento de diabetes mellitus tipo 2. Ao analisar

dados do NHANES III, Must et al. (1999) observaram que o risco para diabetes mellitus

tipo 2 aumenta proporcionalmente ao grau de obesidade, em ambos os sexos.

Estudos demonstraram associação positiva entre IMC e concentração sérica de

ácido úrico sérico (Lee et al., 1995; Ishizaka et al., 2005). Além disso, o aumento de

ácido úrico sérico é um fator independente de risco de DCV (Bengtsson et al., 1988;

Ishizaka et al., 2005). No presente estudo observamos concentrações

significativamente maiores de ácido úrico nos indivíduos obesos comparados aos

eutróficos.

Apesar de evidências obtidas a partir do The Framingham Offspring Study

(Lamon-Fava et al., 1996) o qual demonstrou que a elevação do IMC encontra-se

associada a um aumento nos níveis séricos de colesterol total e de LDL-C, o presente

estudo não constatou diferença significativa com relação a estes parâmetros entre os

dois grupos. Possivelmente estes achados foram, em parte, devido ao fato da maioria

dos indivíduos eutróficos (n=19) apresentarem colesterol total acima de 200 mg/dl.

Page 67: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

DISCUSSÃO

51

Também observamos que as concentrações de HDL-C, estavam dentro do limite de

normalidade, embora significativamente menores nos indivíduos obesos comparados

aos eutróficos. Quanto aos triglicerídeos, estes apresentaram valores em média,

significativamente maiores nos indivíduos obesos, além de estarem acima da faixa

considerada desejável pelo Third Report of the National Cholesterol Education Program

(NCEP, 2002). Corroborando nossos resultados, Cercato et al. (2004), observaram

hipertrigliceridemia, menor HDL-C e concentrações similares de colesterol total ao

comparar indivíduos obesos e eutróficos, de ambos os sexos.

Vários estudos demostram que na obesidade humana ocorre hiperleptinemia

(Considine et al., 1996a; Maffei et al., 1996; Zimmet et al., 1996; Adami et al., 2002;

Kobayashi et al., 2004; Kettaneh et al., 2007). Em nossa amostra de obesos a média

dos valores de leptina sérica estava aproximadamente quatro vezes maior comparada

aos valores encontrados nos indivíduos eutróficos. Este achado foi também observado

por Considine et al. (1996a), que compararam 139 obesos e 136 eutróficos, e

observaram leptinemia quatro vezes maior em obesos. Maffei et al. (1996) analisaram

amostra de 87 individuos eutróficos e obesos, e observaram aumento de leptina

circulante em indivíduos com IMC elevado. No presente estudo, também observamos

que a leptinemia tanto nos indivíduos obesos quanto nos eutróficos correlacionou-se

positivamente com o IMC e CC, corroborando o estudo de Zimmet et al. (1996), que

demonstraram correlação da leptinemia com o IMC e a CC em adultos com peso

adequado e obesos. Adami et al. (2002) verificaram associação positiva entre as

concentrações de leptina e IMC em indivíduos obesos. Outro estudo (Kobayashi et al.,

2004) avaliou 52 indivíduos com sobrepeso e obesidade observou associação entre

leptina sérica, IMC e adiposidade abdominal, através de tomografia computadorizada.

Em contraste com a leptina, as concentrações plasmáticas de adiponectina

encontram-se reduzidas na obesidade (Arita et al., 1999; Weyer et al., 2001; Côté et al.,

2005). No entanto, apesar do presente estudo constatar que obesos apresentaram

menor concentração plasmática de adiponectina do que indivíduos eutróficos, a

diferença entre os grupos não alcançou significância estatística. Observamos nos

obesos valores médios de adiponectina de 7,4 µg/ml, similares aos encontrados na

Page 68: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

DISCUSSÃO

52

literatura. Lindsay et al. (2002) observaram adiponectinemia de 5,3 µg/ml individuos

obesos, e Weyer et al. (2001) encontraram adiponectinemia de 7,2 µg/ml.

Os estudos avaliando a função tireoideana na obesidade são controversos.

Resultados na literatura demonstram que as concentrações de TSH e HTs podem

apresentar-se aumentadas, diminuídos ou similares em obesos comparados a

indivíduos eutróficos (Knudsen et al., 2005; Manji et al., 2006). No presente estudo,

observamos que a concentração circulante de TSH foi significativamente mais elevada,

embora dentro da faixa de normalidade, nos indivíduos obesos em comparação aos

eutróficos. Os obesos exibiram valor médio de T4L dentro do limite de normalidade e

significativamente menor, aos encontrados no grupo de indivíduos eutróficos. Enquanto

o T3L apresentou concentrações, abaixo do limite de normalidade e similares entre os

grupos. Corroborando estes achados, Knuden et al. (2005) analisaram amostra de mais

de 4.000 indivíduos eutireoideos, e demonstraram que quanto maior o grau de

obesidade maior o TSH e menor o T4L, enquanto que o T3L não se aterou. Sari et al.

(2003) observaram que mulheres na pré-menopausa com IMC ≥ 30 kg/m² apresentaram

maior TSH e menor HTs livres, embora dentro da faixa de normalidade, quando

comparadas a mulheres de mesma faixa etária e IMC entre 18,5 e 25 kg/m². Estudo

realizado na Turquia, com amostra de 226 mulheres eutireoidéas, demonstrou que na

presença de sobrepeso/obesidade ocorria aumento de TSH (Bastemir et al., 2007). No

presente estudo, também observamos no grupo de indivíduos obesos, associação

positiva entre CC e TSH. O mesmo foi observado por de Pergola et al. (2007) que

avaliaram 201 mulheres italianas com sobrepeso/obesidade, observaram que o TSH

correlacionou-se positivamente com a CC. Sorisky et al. (2000) e Valyasevi et al.

(2002), que demonstaram a presença de receptores de TSH em adipócitos e pré-

adipócitos de seres humanos, relatam que o TSH ao se ligar ao seu receptor no tecido

adiposo, induz a diferenciação de pré-adipócitos em adipócitos, expandindo o tecido

adiposo (adipogênese).

Page 69: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

DISCUSSÃO

53

7.2. Análise dos indivíduos obesos quanto à presença do polimorfismo p.Q223R no gene LEPR

As pesquisas avaliando a associação entre obesidade e o polimorfismo p.Q223R

no gene LEPR, apresentam resultados conflitantes. Alguns estudos demonstaram não

haver associação entre IMC e o polimorfismo c.668A>G (p.Q223R) no gene LEPR

(Echwald et al., 1997; Gotoda et al., 1997; Mergen et al., 2007) enquanto outros

observam associação positiva entre este polimorfismo e a obesidade (Chagnon et al.,

2000; Yiannakouris et al. 2001; Mattevi et al., 2002). No presente estudo, no grupo de

115 indivíduos obesos analisados para o polimorfismo c.668A>G (p.Q223R) no gene

LEPR, observamos que os indivíduos portadores do alelo G (genótipos AG e GG)

apresentaram menor RCQ, tendência a apresentar menor CC e nenhuma diferença

quanto ao IMC, comparados aos indivíduos de genótipo AA. Quinton et al. (2001)

analisaram amostra de mulheres caucasianas na pós-menopausa e observaram que

indivíduos com genótipo GG apresentaram menor IMC e massa adiposa comparados

aos indivíduos de genótipo AA e AG. Wauters et al. (2001) analisaram amostra de 280

mulheres caucasianas e demonstraram que indivíduos portadores do alelo G

apresentaram menor adiposidade abdominal, avaliada pela tomografia

computadorizada, quando comparados aos indivíduos de genótipo AA. Rosmond et al.

(2000) analisaram amostra de 269 homens e não observaram nenhuma associação

entre este polimorfismo e IMC, RCQ e CC, enquanto que outros estudos observaram

maior IMC e gordura corporal em portadores do alelo G (Chagnon et al., 2000), ou em

indivíduos de genótipo GG (Yiannakouris et al., 2001; Mattevi et al., 2002).

Em relação à leptina sérica, não observamos diferenças entre os grupos.

Corroborando este achado, Rosmond et al. (2000), e Crabbe et al. (2006) não

identificaram diferenças nas concentrações de leptina sérica em indivíduos analizados

para o polimorfismo c.668A>G (p.Q223R) no gene LEPR. Já Quinton et al. (2001)

observaram maior leptinemia em indivíduos portadores do alelo A, enquanto Chagnon

et al. (2000) demonstraram o oposto, maior concentração de leptina circulante em

portadores do alelo G.

Page 70: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

DISCUSSÃO

54

7.3. Função tireoideana e o polimorfismo p.Q223R no gene LEPR

Os resultados do presente estudo mostram pela primeira vez, ao nosso

conhecimento, uma associação de um polimorfismo no gene LEPR e a função

tireoideana em seres humanos obesos. Nossos principais achados mostram que os

indivíduos portadores do alelo G (genótipos AG e GG) apresentaram maior T4L e menor

TSH, embora dentro do limite de normalidade, comparados aos indivíduos de genótipo

AA. As concentrações de T3L não exibiram diferenças significativas entre os grupos.

Considerando que os valores de leptina foram semelhantes nos três genótipos

(p=0,9), poderíamos admitir que as diferenças observadas na função tireoideana

ocorreram em decorrência de sinalização mais apropriada da leptina nos indivíduos

portadores do alelo G. A troca de glutamina, um aminoácido de carga neutra, pela

arginina que apresenta carga positiva, pode alterar a funcionalidade do receptor

causando, portanto, mudanças na sinalização da proteína (Considine et al., 1996b;

Chung et al., 1997; Chagnon et al., 1999; Chagnon et al., 2000; Yiannakouris et al.,

2001). Construiu-se, então, a hipótese de que as diferenças significativas na função

tireoideana ocorreram em decorrência da melhor sinalização da leptina nos indivíduos

portadores do alelo G, modulando mais adequadamente o efeito da leptina na glândula

tireóide. Assim, o polimorfismo c.668A>G (p.Q223R) no gene LEPR aumentaria a

síntese e secreção de T4, que por sua vez exerceria um feedback negativo, inibindo a

secreção de TSH, reduzindo, assim, as concentrações circulantes deste hormônio.

Além disso, não sendo possível dosar TRH humano, poderíamos supor que o aumento

de T4 estaria suprimindo a produção de TRH, e consequentemente, a de TSH.

O hipotálamo (Tartaglia 1997, Toste et al., 2006), a hipófise (Vicente et al., 2004)

e a glândula tireóide (Nowak et al., 2002) expressam receptores de leptina. Sugere-se

que a principal ação da leptina no eixo hipotálamo-hipófise-tireóide, ocorre no núcleo

paraventricular do hipotálamo, através de seu efeito estimulador na secreção de TRH

em roedores (Legradi et al., 1997; Nillni et al., 2000). Além disso, tanto em roedores

(Ortiga-Carvalho et al., 2002) quanto em seres humanos (Chan et al., 2003) a leptina

estimula a secreção de TSH na hipófise. Por outro lado, De Oliveira et al. (2007)

demonstraram em roedores que a leptina, através de seu efeito direto na tireóide,

Page 71: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

DISCUSSÃO

55

estimula a secreção de T4. Nowak et al. (2002) observaram, também, que após a

administração crônica de leptina, ocorre aumento de HTs e, conseqüente redução de

TSH.

Nossos dados mostraram que os obesos portadores do alelo G apresentaram

concentração média de TSH (2,29 mU/L) dentro de valores encontrados em 95% de

voluntários eutireoideos rigorosamente avaliados pela Academia Americana de

Bioquímica Clínica (0,4 a 2,5 mU/L) (Baloch et al., 2003). Em contrapartida, os obesos

homozigotos para o alelo A, exibiram concentrações médias de TSH (3,25 mU/L)

equivalentes aos encontrados nos 5% da distribuição de valores para eutireoidismo,

portanto mais próximos ao hipotireoidismo.

Assim, o conjunto destes resultados sugere que indivíduos obesos com genótipo

não polimórfico apresentariam tendência à redução da função tireoideana quando

comparados aos indivíduos portadores da variante no gene do LEPR. Caso esta

interpretação esteja correta, a presença do polimorfismo c.668A>G (p.Q223R) no gene

LEPR exerceria em indivíduos obesos um papel protetor quanto à preservação de uma

função tireoideana mais adequada, visto que este grupo apresentou maior TSH e

menor T4L, quando comparados aos eutróficos.

Quanto aos níveis de pressão arterial, observamos na tabela 7 que nos

indivíduos portadores do alelo G, os valores de PAS, PAD e PAM eram, em média,

numericamente menores, quando comparados aos indivíduos não portadores do alelo

G. Corroborando este achado, Rosmond et al. (2000) demonstraram menor PAS e PAD

em indivíduos portadores do alelo G para o polimorfismo c.668A>G (p.Q223R) quando

comparados aos indivíduos homozigotos para o alelo A.

Além de mais apropriadamente eutireóideos, os indivíduos portadores do alelo G,

apresentaram RCQ significativamente menor. Em vários estudos epidemiológicos a

RCQ é um importante fator preditivo de risco cardiovascular (Yusuf et al., 2005; Koning

et al., 2007). Indivíduos portadores do alelo G apresentaram concentrações

significativamente maiores de HDL-C, um importante fator de proteção para DCV

(NCEP, 2002). Corroborando nosssos achados Rosmond et al. (2000) observaram que

indivíduos portadores do alelo G apresentaram maior HDL-C comparados aos

indivíduos homozigotos para o alelo A.

Page 72: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

DISCUSSÃO

56

Os obesos apresentaram, também, maiores concentrações séricas de ácido

úrico comparados aos eutróficos, sendo que naqueles portadores do alelo G a uricemia

estava significativamente menor comparada à encontrada em obesos homozigotos para

o alelo A. A hiperuricemia é um fator de risco independente de DCV (Ishizaka et al.,

2005).

São necessários novos estudos para testar adequadamente a hipótese de uma

modulação seletiva e favorável do polimorfismo c.668A>G (p.Q223R) no gene LEPR na

função tireoideana.

Page 73: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

CONCLUSÕES

57

8. CONCLUSÕES

Page 74: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

CONCLUSÕES

58

8. CONCLUSÕES

A avaliação da função tireoideana mostrou que os indivíduos obesos,

comparados aos eutróficos, tiveram concentrações maiores de TSH e menores de T4L,

embora estejam dentro dos limites da normalidade, em ambos os grupos.

Nos indivíduos obesos, a presença do polimorfismo c.668A>G (p.Q223R) no

gene LEPR não alterou a leptina circulante, cujas concentrações foram quatro vezes

superiores às observadas nos eutróficos.

Os genótipos AG e GG se associaram a concentrações significativamente

menores de TSH e maiores de T4L, quando comparados aos indivíduos de genótipo

AA, sugerindo influência do alelo G na regulação seletiva das ações da leptina sobre

seu receptor tireoideano.

Os portadores do alelo G, além de mais apropriadamente eutireoideos,

apresentaram, menor RCQ, maior HDL-C e menor ácido úrico sérico, sugerindo que o

polimorfismo c.668A>G (p.Q223R) no gene LEPR estaria, também, associado à

redução do risco cardiometabólico relacionado à obesidade.

Page 75: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

REFERÊNCIAS

59

9. REFERÊNCIAS

Page 76: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

REFERÊNCIAS

60

9. REFERÊNCIAS ADA- American Diabetes Association. Standards of medical care in diabetes -2007.

Diabetes Care. 2007; 30:S4- S41. Adamczak M, Wiecek A, Funahashi T, Chudek J, Kokot F, Matsuzawa Y. Decreased

Plasma Adiponectin Concentration in Patients With Essential Hypertension. Am J Hypertens 2003; 16: 72–75.

Adami GF, Civalleri D, Cella F, Marinari G, Camerini G, Papadia F, Scopinaro N.

Relationships of Serum Leptin to Clinical and Anthropometric Findings in Obese Patients. Obesity Surgery 2002; 12: 623-627.

Ahima, RS. Adipose tissue as an endocrine organ. Obesity. 2006; 14: 242S–249S. Ahima RS & Flier JS. Adipose tissue as an endocrine organ.Trends Endocrinol

Metab 2000; 11: 327-332. Ahima RS & Osei SY. Leptin signaling. Physiology & Behavior 2004; 81: 223– 241. Ahima RS, Prabakaran D, Mantzoros C, Qu D, Lowell B, Maratos- Flier E, Flier, SJ.

Role of leptin in the neuroendocrine response to fasting. Nature 1996; 382: 250–252. Arita Y, Kihara S, Ouchi N, Takahashi M, Maeda K, Miyagawa J, Hotta K,

Shimomura I, Nakamura T, Miyaoka K, Kuriyama H, Nishida M, Yamashita S, Okubo K, Matsubara K, Muraguchi M, Ohmoto Y, Funahashi T, Matsuzawa Y. Paradoxical decrease of an adipose-specific protein, adiponectin, in obesity. Biochem Biophys Res Commun 1999; 257: 79–83.

Avignon A, Colette C, Monnier L. Assessment of insulin sensitivity from plasma

insulin and glucose in the fasting or post oral glucose-load state. Int J Obes 1999; 23: 512-517.

Bado A, Levasseur S, Attoub S, Kermorgant S, Laigneau JP, Bortoluzzi MN, Moizo L,

Lehy T, Guerre-Millo M, Marchand-Brustel Y, Lewin MJ. The stomach is a source of leptin. Nature 1998; 394: 790-793.

Baloch Z, Carayon P, Conte-Devolx B, Demers LM, Feldt-Rasmussen U, Henry JF,

LiVosli VA, Niccoli-Sire P, John R, Ruf J, Smyth PP, Spencer CA, Stockigt JR. Laboratory Medicine Practice Guidelines. Thyroid 2003; 13: 3-126.

Page 77: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

REFERÊNCIAS

61

Barsh GS, Farooqi IS, O’Rahilly S. Genetics of body-weight regulation. Nature 2000; 404: 644-651.

Bastemir M, Akin F, Alkis E, Kaptanoglu B. Obesity is associated with increased

serum TSH level, independent of thyroid function. Swiss Med Wkly 2007; 137: 431-434. Bengtsson C, Lapidus L, Stendahl C, Waldenstrom J. Hyperuricaemia and risk of

cardiovascular disease and overall death. A 12-year follow-up of participants in the population study of women in Gothenburg, Sweden. Acta Med Scand 1988; 224: 549 –555.

Beltowski J. Leptin and atherosclerosis. Atherosclerosis. 2006; 189: 47-60. Berg AH, & Scherer PE. Adipose Tissue, Inflammation, and Cardiovascular Disease.

Cir Res 2005; 96; 939-949. Bjørbæck C, El Haschimi K, Frantz JD, Flier JS. The role of SOCS-3 in leptin

signaling and leptin resistance. J Biol Chem 1999; 274: 30059–30065. Brent G. Thyroid hormones (T4,T3) In: Conn P.M & Melmed S.Endocrinology, 1aed.,

New Jersey, 19: 291-306,1997. Brown CD, Higgins M, Donato KA, Rohde FC, Garrison R, Obarzanek E et al. Body

Mass Index and the Prevalence of Hypertension and Dyslipidemia. Obes Res 2000; 8: 605- 619.

Campbell GA, Kurcz M, Marshall S, Meites J. Effects of starvation in rats on serum

levels of follicle stimulating hormone, luteinizing hormone, thyrotropin, growth hormone and prolactin; response to LH-releasing hormone and thyrotropin-releasing hormone. Endocrinology 1977; 100: 580-587.

Campfield LA, Smith FJ, Guisez Y, Devos R, Burn P. Recombinant mouse OB

protein: evidence for a peripheral signal linking adiposity and central neural networks. Science 1995; 269: 546-549.

Carmo I, Santos CO, Camolas J, Vieira J, Carreira M, Medina L, Reis L, Myatt J,

Galvão-Teles A. Overweight and obesity in Portugal: national prevalence in 2003-2005. Obes Rev 2008; 9: 11-19.

Caro JF, Sinha MK, Kolaczynski JW, Zhang PL, Considine RV. Leptin: the tale of an

obesity gene. Diabetes 1996; 45:1455-1463.

Page 78: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

REFERÊNCIAS

62

Carr DB, Utzschneider KM, Hull RL, Kodama K, Retzlaff BM, Brunzell JD, Shofer JB, Fish BE, Knopp RH, Kahn SE Carr DB, Utzschneider KM, Hull RL, Kodama K, Retzlaff BM, Brunzell JD, Shofer JB, Fish BE, Knopp RH, Kahn SE. Intra-Abdominal Fat Is a Major Determinant of the National Cholesterol Education Program Adult Treatment Panel III Criteria for the Metabolic Syndrome. Diabetes 2004; 53: 2087-2094.

Carro E, Seoane LM, Senaris R, Casanueva FF, Dieguez C. Leptin increases in vivo

GH responses to GHRH and GH-releasing peptide-6 in food-deprived rats. Eur J Endocrinol 2000; 142: 66–70.

Cercato C, Mancini MC, Arguello AMC, Passos AQ, Villares SMF, Halpern A.

Systemic hypertension, diabetes mellitus, and dyslipidemia in relation to body mass index: evaluation of a brazilian population. Rev Hosp Clín Fac Med 2004; 59: 113- 118.

Chagnon YC, Chung WK, Pérusse L, Chagnon M, Leibel RL, Bouchard C. Linkages

and associations between the leptin receptor LEPR and huma body composition in the Quebec Family Study. Int J Obes 1999; 23: 278–286.

Chagnon YC, Wilmore JH, Borecki IB, Gagnon J, Pérusse L, Chagnon M, Collier GR,

Leon AS, Skinner JS, Rao DC, Bouchard C. Associations between the Leptin Receptor Gene and Adiposity in Middle-Aged Caucasian Males from the HERITAGE Family Study. J Clin Endocrinol Metab 2000; 85: 29-34.

Chan JL, Heist K, DePaoli AM, Veldhuis JD, Mantzoros CS. The role of falling leptin

levels in the neuroendocrine and metabolic adaptation to short-term starvation in healthy men. J Clin Inves 2003; 111: 1409–1421.

Chan JM, Rimm EB, Colditz GA, Stampfer MJ, Willett WC. Obesity, fat distribution,

and weight gain as risk factors for clinical diabetes in men. Diabetes Care 1994; 17: 961-969.

Chen H, Charlat O, Tartaglia LA, Woolf EA, Weng X, Ellis SJ, Lakey ND, Culpepper

J, Moore KJ, Breitbart RE, Duyk GM, Tepper R I, Morgenstern JP. Evidence That the Diabetes Gene Encodes the Leptin Receptor: Identification of a Mutation in the Leptin Receptor Gene in db/db Mice. Cell 1996; 84: 491–495.

Chobanian AV, Bakris GL, Black HR, et al. Joint National Committee on Prevention,

Detection, Evaluation, and Treatment of High Blood Pressure. National Heart, Lung, and Blood Institute; National High Blood Pressure Education Program Coordinating Committee. Seventh report of the Joint National Committee on Prevention, Detection, Evaluation, and Treatment of High Blood Pressure. Hypertension 2003; 42: 1206-1252.

Page 79: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

REFERÊNCIAS

63

Chua SC Jr, Chung WK, Wu-Peng XS, Zhang Y, Liu SM, Tartaglia L, Leibel RL. Phenotypes of mouse diabetes and rat fatty due to mutations in the OB (leptin) receptor. Science 1996;271:994-6.

Chung WK, Power-Kehoe L, Chua M, Florence C, Louis A, Zilla H, Melinda S, John

UM, Bowie K, Rudolph LL. Exonic and intronic variation in the leptin receptor (OBR) of obese humans. Diabetes 1997; 46: 1509–1511.

Clement K,Vaisse C, Lahlous N, Cabrol S, Pelloux V., Cassuto D., Gourmelen M,

Dina C, Chambaz J, Lacorte JM, Basdevant A, Bougneres P, Lebouc Y, Froguel P, Guy-Grand B. A mutation in the human leptin receptor gene cause obesity and pituitary dysfuncion. Nature 1998; 392: 398-401.

Colditz GA, Willet WC, Rotnitzky A, Manson JE. Weight gain as a risk factor for

clinical diabetes mellitus in women. Ann Int Med 1995; 122: 481-486. Cone RD. The Central Melanocortin System and Energy Homeostasis. Trends

Endocrinol Metab 1999; 10: 211-216. Considine RV, Sinha MK, Heiman ML, et al. Serum immunoreactive- leptin

concentrations in normal-weight and obese humans. N Engl J Med 1996a; 334: 292–295.

Considine RV, Considine EL, Williams CJ, Hyde TM, Caro JF. The hypothalamic leptin receptor in humans: identification of incidental sequence polymorphisms and absence of the db/db mouse and fa/fa rat mutations. Diabetes 1996b; 45: 992-994.

Corbetta S, Englaro P, Giambona S, Persani L, Blum WF, Beck-Peccoz P. Lack of effects of circulating thyroid hormone levels on serum leptin concentrations. Eur J Endocrinol 1997;137;659-663.

Côté M, MaurièGe P, Bergeron J, Alméras N, Tremblay A, Lemieux I, Després JP. Adiponectinemia in visceral obesity: impact on glucose tolerance and plasma lipoprotein and lipid levels in men. J Clin Endocrinol Metab 2005; 90: 1434–1439.

Crabbe P, Goemaere S, Zmierczak H, Pottelbergh IV, Bacquer DD, Kaufman J. Are serum leptin and the Glu223Arg polymorphism of the leptin receptor determinants of bone homeostasis in elderly men? Eur J Endocrinol 2006; 154: 707-714.

Page 80: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

REFERÊNCIAS

64

Cusin I, Rouru J, Visser T, Burger AG, and Rohner- Jeanrenaud F. Involvement of thyroid hormones in the effect of intracerebroventricular leptin infusion on uncoupling protein-3 expression in rat muscle. Diabetes 2000; 49: 1101–1105.

Dagenais GR, Yi Q, Mann JFE, Bosch J, Pogue J, Yusuf S. Prognostic impact of

body weight and abdominal obesity in women and men with cardiovascular disease. Am Heart J 2005; 149: 54-60.

Dalton M, Cameron AJ, Zimmet PZ, Shaw JE, Dolley J, Dunstan DW, Welborn TA.

Waist circumference, waist–hip ratio and body mass index and their correlation with cardiovascular disease risk factors in Australian adults. J Intern Med 2003; 254: 555– 563.

de Oliveira E, Teixeira Silva Fagundes A, Teixeira Bonomo I, Curty FH, Fonseca Passos MC, de Moura EG, Lisboa PC. Acute and chronic leptin effect upon in vivo and in vitro rat thyroid iodide uptake. Life Sci 2007; 81: 1241-1246.

de Pergola G, Ciampolillo A, Paolotti S, Trerotoli P, Giorgino R. Free triiodothyronine and thyroid stimulating hormone are directly associated with waist circumference, independently of insulin resistance, metabolic parameters and blood pressure in overweight and obese women. Clin Endocrinol 2007; 67: 265–269.

Després JP, Moorjani S, Lupien PJ, Tremblay A, Nadeau A, Bouchard C. Regional

distribution of body fat, plasma lipoproteins, and cardiovascular disease. Arteriosclerosis 1990; 10: 497-511.

Deprés JP, Lemieuw I, Prud´homme D. Treatment of obesity : need to focus on high

risk abdominally obese patients. BMJ 2001; 322: 716-720. Doll S, Paccaud F, Bovet P, Burnier M, Wietlisbach V. Body mass index, abdominal

adiposity and blood pressure: consistency of their association across developing and developed countries. Int J Obes 2002; 26: 48– 57.

Dorn JM, Schisterman EF, Winkelstein W Jr, Trevisan M. Body mass index and

mortality in a general population sample of men and women. The Buffalo Health Study. Am J Epidemiol 1997; 146: 919–931.

Drewnowski A & Popkin BM. The nutrition transition: new trends in the global diet.

Nutr Rev 1997; 55: 31–43.

Page 81: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

REFERÊNCIAS

65

Duarte SFP, Francischetti EA, Genelhu-Abreu V, Barroso SG, Braga JU, Cabello PH, Pimentel MMG. p.Q223R leptin receptor polymorphism associated with obesity in Brazilian multiethnic subjects. Am J Hum Biol 2006; 18: 448-453

Dutra SCP, Moura EG, Rodrigues AL, Lisboa PC, Bonomo I, Toste FP, Passos

MCF. Cold exposure restores the decrease in leptin receptors (OB-Rb) caused in 30-day-old rats by neonatal leptin treatment. J Endocrinol 2007; 195: 1–9.

Echwald SM, Sorensen TD, Sorensen TIA. Amino acid variants in the human leptin

receptor: lack of association to juvenile onset of obesity. Biochem Biophys Res Commun 1997;233: 248–252.

Emilsson V, Liu YL, Cawthorne MA, Morton NM, Davenport M. Expression of the

functional leptin receptor mRNA in pancreatic islets and direct inhibitory action of leptin on insulin secretion. Diabetes 1997; 46: 313-316.

Erickson JC, Clegg KE, Palmiter RD. Sensitivity to leptin and susceptibility to seizures in mice lacking neuropeptide Y. Nature 1996; 381: 415-418.

Flier JS & Maratos-Flier E. Obesity and the hypothalamus: novel peptides for new pathways. Cell 1998; 92: 437–440.

Fontaine KR, Redden DT, Wang C, Westfall AO, Allison DB. Years of life lost due to

obesity. JAMA 2003; 289: 187-193. Ford ES, Giles WH, Dietz WH. Prevalence of the metabolic syndrome among US

adults: findings from the third National Health and Nutrition Examination Survey. JAMA 2002; 287: 356–359.

Francischetti EA, Celoria BMJ, Duarte SFP, Silva EG, Santos IJ, Cabello PH, Genelhu VA. Hypoadiponectinemia is associated with blood pressure increase in obese insulin-resistant individuals. Metab Clin Exp 2007; 56: 1464–1469.

Francischetti EA & Genelhu VA. Obesity-hypertension: an ongoing pandemic. Int J

Clin Pract 2007; 61: 268-280. Friedman JM. A war on obesity, not the obese. Science 2003; 299: 856–858. Friedman JM & Halaas JL. Leptin and the regulation of body weight in mammals.

Nature 1998; 395: 763-770.

Page 82: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

REFERÊNCIAS

66

Friedwald WT, Levy RI, Frederickson DS. Estimation of low-density lipoprotein cholesterol in plasma , without use of the preparative ultracentrifuge. Clin Chem 1972; 18: 499-502.

Fruhbeck G. Intracellular signalling pathways activated by leptin. Biochem. J 2006;

393: 7–20. Galassi A, Reynolds K, He J. Metabolic syndrome and risk of cardiovascular disease:

a meta-analysis. Am J Med 2006; 119: 812- 819. Gee CE, Chen CL, Roberts JL, Thompson R, Watson SJ. Identification of

proopiomelanocortin neurones in rat hypothalamus by in situ cDNA-Mrna hybridization. Nature 1983; 306: 374-6.

Ghilardi N. & Skoda RC. The leptin receptor activates janus kinase 2 and signals for proliferation in a factor-dependent cell line. Mol Endocrinol 1997; 11: 393–399.

Ghilardi N, Ziegler S, Wiestner A, Stoffel R, Heimt Mh, Skoda RC. Defective STAT

signaling by the leptin receptor in diabetic mice. Proc Natl Acad Sci USA 1996; 93: 6231-6235.

Gotoda T, Manning BS, Goldstone AP, Imrie H, Evans AL, Strosberg AD, mckeigue

PM, Scott J, Aitman TJ. Leptin receptor gebe variation and obesity: lack of association in a white British malr population. Hum Mol Genet 1997; 6: 869-76.

Groop LC, Bonadonna RC, Simonson DC, Petrides AS, Shank M, DeFronzo RA.

Effects of insulin on oxidative and nonosidative pathways of free fatty acid metabolism in human obesity. Am J Physiol 1992; 263: E79-E84.

Grundy SM, Hansen B, Smith SC, Cleeman JI, Kahn RA. Clinical management of

metabolic syndrome. Circulation. 2004; 109: 551- 556.

Guan X-M, Hess JF, Yu H, Hey PJ, van der Ploeg LHT. Differential expression of mRNA for leptin receptor isoforms in the rat brain. Mol Cell Endocrinol 1997; 133: 1-7.

Hakansson ML & Meister B. Transcription factor STAT3 in leptin target neurons of the rat hypothalamus. Neuroendocrinology 1998; 68: 420–427.

Halaas JL, Boozer C, Blair-West J, Fidahusein N, Denton DA, Friedman JM. Physiological response to long-term peripheral and central leptin infusion in lean and obese mice. Proc Natl Acad Sci USA 1997; 94: 8878-8883.

Page 83: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

REFERÊNCIAS

67

Halaas JL, Gajiwala KS, Maffei M, Cohen SL, Chait BT, Rabinowitz D, et al. Weight-reducing effects of the plasma protein encoded by the obese gene. Science 1995; 269: 543-546.

Han TS, Van Leer EM, Seidell JC, Lean EM. Waist circumference as a screening tool

for cardiovascular risk factors: evaluation of receiver operating characteristics (ROC). Obes Res 1996; 4: 533-554.

Hansen PS, Brix TH, Sorensen TI, Kyvik KO, Hegedus L. Major genetic influence on

the regulation of the pituitary-thyroid axis: a study of healthy Danish twins. J Clin Endocrinol Metab 2004; 89: 1181–1187.

Hardie L, Trayhurn P, Abramovich D, Fowler P. Circulating leptin in women: a longitudinal study in the menstrual cycle and during pregnancy. Clin Endocrinol 1997;47: 101–106.

Hauner H. The new concept of adipose tissue function. Physiol Behav 2004; 83:653-

658. Havel PJ. Update on adipocyte hormones: regulation of energy balance and

carbohydrate/lipid metabolism. Diabetes 2004; 53: S143-51. Heim MH. The Jak-STAT pathway: specific signal transduction from the cell

membrane to the nucleus. Eur J Clin Invest 1996; 26: 1–12. Heiman ML, Ahima RS, Craft LS, Schoner B, Stephens TW, Flier FS. Leptin

inhibition of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis in response to stress. Endocrinology 1997; 138: 3859-3863.

Heo M, Leibel RL, Fontaine KR, Boyer BB, Chung WK, Koulu M, Karvonen MK,

Pesonen U, Rissanen A, Laakso M, Uusitupa MIJ, Chagnon Y, Bouchard C, Donohoue PA, Burns TL, Shuldiner AR, Silver K, Andersen RE, Pedersen O, Echwald S, Sørensen TIA, Behn P, Permutt MA, Jacobs KB, Elston RC, Hoffman DJ, Gropp E, Allison DB. A meta-analytic investigation of linkage and association of common leptin receptor (LEPR) polymorphisms with body mass index and waist circumference. Int J Obes 2002; 26: 640–646.

Hickey MS, Israel RG, Gardiner SN, Considine RV, McCammon MR, Tyndall GL,

Houmard JA, Marks RHL, Caro JF. Gender differences in serum leptin levels in humans. Biochem Mol Med 1996;59:1–6.

Page 84: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

REFERÊNCIAS

68

Hoggard N, Hunter L, Duncan JS, Williams LM, Trayhurn P, Mercer JG. Leptin and leptin receptor mRNA and protein expression in the murine fetus and placenta. Proc Natl Acad Sci U S A 1997; 94: 11073-11078.

Hotta K, Funahashi T, Arita Y, Takahashi M, Matsuda M, Okamoto Y, Iwahashi H, Kuriyama H, Ouchi N, Maeda K, Nishida M, Kihara S, Sakai N, Nakajima T, Hasegawa K, Muraguchi M, Ohmoto Y, Nakamura T, Yamashita S, Hanafusa T, Matsuzawa Y: Plasma concentrations of a novel, adipose-specific protein, adiponectin, in type 2 diabetic patients. Arterioscler Thromb Vasc Biol 2000; 20: 1595–1599.

Hu FB, Manson JE, Stampfer MJ, Colditz G, Liu S, Solomon CG, Willett WC. Diet,

lifestyle, and the risk of type 2 diabetes mellitus in women. N Engl J Med 2001; 345: 790-797.

Huang Z, Willet WC, Manson JE, Rosner B, Stampfer MJ, Speizer FE, Colditz GA.

Body weight, weight change, and risk for hypertension in women. Ann Intern Med 1998; 128: 81-88.

Iacobellis G, Ribaudo MC, Zappaterreno A, Iannucci CV, Leonetti F. Relationship of

thyroid function with body mass index, leptin, insulin sensitivity and adiponectin in euthyroid obese women. Clin Endocrinol 2005; 62: 487–491.

IBGE - Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística – Pesquisa de Orçamentos

Familiares 2002-2003. 2004 [acesso em 2007 Nov 04]. Disponível em http://www.ibge.gov.br.

Ishizaka N, Ishizaka Y, Toda E, Nagai R, Yamakado M. Association Between Serum

Uric Acid, Metabolic Syndrome, and Carotid Atherosclerosis in Japanese Individuals. Arterioscler Thromb Vasc Biol 2005; 25: 1038-1044.

Isozaki O, Tsushima T, Nozoe Y, Miyakawa M, Takano K. Leptin regulation of the

thyroids: negative regulation on thyroid hormone levels in euthyroid subjects and inhibitory effects on iodide uptake and Na+/I- symporter mRNA expression in rat FRTL-5 cells. Endocrine J 2004; 51: 415-423.

Jin L, Zhang S, Burguera BG, Couce ME, Osamura RY, Kulig E, Lloyd RV. Leptin

and leptin expression in rat and mouse pituitary cells. Endocrinology 2000; 141: 333-339.

Page 85: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

REFERÊNCIAS

69

Karlsson C, Lindell K, Svensson E, Bergh C, Lind P, Billig H, Carlsson LMS, Carlsson B. Expression of functional leptin receptors in the human ovary. J Clin Endocrinol Metab 1997; 82: 4144-4148.

Kern P, Ranganathan S, Li C, Wood L, Ranganathan G. Adipose tissue tumor

necrosis factor and interleukin-6 expression in human obesity and insulin resistance. Am J Physiol Endocrinol Metab 2001; 280: E745–E751.

Kern PA, Saghizadeh M, Ong JM, Bosch RJ, Deem R, Simsolo RB. The expression

of tumor necrosis factor in human adipose tissue. Regulation by obesity, weight loss, and relationship to lipoprotein lipase. J Clin Invest 1995; 95: 2111–2119.

Kettaneh A, Heude B, Romon M, Oppert J, Borys J, Balkau B, Ducimetière P,

Charles M. High plasma leptin predicts an increase in subcutaneous adiposity in children and adults. Eur J Clin Nutr 2007; 61: 719–726.

Kiortsis DN, Durack I, Turpin G. Effects of a low-calorie diet on resting metabolic rate

and serum tri-iodothyronine levels in obese children. Eur J Pediatr 1999; 158: 446-450. Knudsen N, Laurberg P, Rasmussen LB, Bulow I, Perrild H, Ovesen L, Jørgensen T.

Small Differences in Thyroid Function May Be Important for Body Mass Index and the Occurrence of Obesity in the Population. J Clin Endocrinol Metab 2005; 90: 4019–4024.

Kobayashi J, Sasaki T, Watanabe M. The relationship of abdominal fat mass

assessed by helical or conventional computed tomography to serum leptin concentration. J Atheroscler Thromb 2004; 11: 173-179.

Koning L, Merchant AT, Pogue J, Anand SS. Waist circumference and waist-to-hip

ratio as predictors of cardiovascular events: meta-regression analysis of prospective studies. Eur Heart J 2007; 28: 850– 856.

Korbonits M. Leptin and the thyroid – A puzzle with missing pieces. Clin Endocrinol

1998; 49: 569–572. Kristensen P, Judge ME, Thim L, Ribel U, Christjansen KN, Wulff BS, Clausen JT,

Jensen PB, Madsen OD, Vrang N, Larsen PJ, Hastrup S. HypothalamicCART is anewanorecticpeptide regulated by leptin. Nature 1998; 393: 72-76.

Lamon-Fava S, Wilson PWF, Schaefer EJ. Impact of body mass index on coronary

heart disease risk factors in men and women. The Framingham Offspring Study. Arterioscler Thromb Vasc Biol 1996; 16: 1509- 1515.

Page 86: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

REFERÊNCIAS

70

Larsson H, Elmstahl S, Ahren B. Plasma leptin levels correlate to islet function independently of body fat in postmenopausal women. Diabetes 1996; 45: 1580 –1584.

Laurberg P, Bulow Pederson I, Knudsen N, Ovesen L, Andersen S. Environmental

iodine intake affects the type of nonmalignant thyroid disease. Thyroid 2001; 11: 457–469.

Lee GH, Proenca R, Montez JM, Carroll KM, Darvishzadeh JG, Lee JI, Friedman JM.

Abnormal splicing of the leptin receptor in diabetic mice. Nature 1996; 379: 632–635. Lee J, Sparrow D, Vokonas PS, Landsberg L, Weiss ST. Uric acid and coronary

heart disease risk: evidence for a role of uric acid in the obesity-insulin resistance syndrome. Am J Epidemiol 1995; 142: 288-294.

Legradi G, Emerson CH, Ahima RS, Flier JS, Lechan RM. Leptin prevents fasting-

induced suppression of prothyrotropinreleasing hormone messenger ribonucleic acid in neurons of the hypothalamic paraventricular nucleus. Endocrinology 1997; 138: 2569–2576.

Legradi G, Emerson CH, Ahima RS, Rand WM, Flier JS, Lechan RM. Arcuate

nucleus ablation prevents fasting-induced suppression of ProTRH mRNA in the hypothalamic paraventricular nucleus. Neuroendocrinology 1998; 68: 89–97.

Leonhardt U, Ritzel U, Schafer G, Becker W & Ramadori G. Serum leptin levels in

hypo- and hyperthyroidism. J Endocrinol 1998; 157: 75–79. Lindsay RS, Funahashi T, Hanson RL, Matsuzawa Y, Tanaka S, Tataranni PA,

Knowler WC, Krakoff J: Adiponectin and development of type 2 diabetes in the Pima Indian population. Lancet 2002; 360: 57–58.

Lisboa PC, Oliveira KJ, Cabanelas A, Ortiga-Carvalho TM, Pazos-Moura CC. Acute

cold exposure, leptin, and somatostatin analog (octreotide) modulate thyroid 50-deiodinase activity. Am J Physiol Endocrinol Metab 2003; 284: E1172–E1176.

Loos RJF & Bouchard C. Obesity – is it a genetic disorder? J Intern Med 2003; 254:

401–425. Loskutoff DJ & Samad F. The Adipocyte and Hemostatic Balance in Obesity :

Studies of PAI-1. Arterioscler Thromb Vasc Biol 1998; 18; 1-6.

Page 87: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

REFERÊNCIAS

71

Maffei M, Halaas J, Ravussin E, Pratley RE, Lee GH, Zhang Y, Fai Y, Kim S, Lallone R, Ranganathan S, Kern PA, Friedman JM. Leptin levels in human and rodent: measurement of plasma leptin and Ob RNA in obese and weight-reduced subjects. Nat Med 1995; 1: 1155-1161.

Manji N, Boelaert K, Sheppard MC, Holder RL, Gough SC, Franklyn JA. Lack of

association between serum TSH or free T4 and body mass index in euthyroid subjects. Clin Endocrinol 2006; 64: 125–128.

Mantzoros CS. Role of leptin in reproduction. Annals of the New York Academy of

Sciences 2000; 900: 174–183. Mantzoros CS, Rosen HN, Greenspan SL, Flier JS, Moses AC. Short-term

hyperthyroidism has no effect on leptin levels in man. J Clin Endocrinol Metab 1997; 82: 497-499.

Mantzoros CS, Ozata M, Negrao AB, Suchard MA, Ziotopoulou M, Caglayan S, Elashoff RM, Cogswell RJ, Negro P, Liberty V, Wong M, Veldhuis J, Ozdemir IA, Gold PW, Flier JS, Licinio J. Synchonicity of frequently sampled thyroytopin (TSH) and leptin concentrations in healthy adults and leptin-deficient subjects: evidence for possible partial TSH regulation by leptin in humans. J Clin Endocrinol Metab 2001; 86: 3284-3291.

Matkovic V, Ilich JZ, Badenhop NE, Skugor M, Clairmont A, Klisovic D, Landoll JD.Gain in body fat is inversely related to the nocturnal rise in serum leptin level in young females. J Clin Endocrinol Metab 1997; 82: 1368-1372

Matsuoka N, Ogawa Y, Hosoda K, Matsuda J, Masuzaki H, Miyawaki T, Azuma N,

Natsui K, Nishimura H, Yoshimasa Y, Nishi S, Thompson DB, Nakao K. Human leptin receptor gene in obese Japanese subjects: evidence against either obesity-causing mutations or association of sequence variants with obesity. Diabetologia 1997; 40: 1204-1210.

Mattevi VS, Zembrzuski VM & Hutz MH. Association analysis of genes involved in

the leptinsignaling pathway with obesity in Brazil. Int J Obes 2002; 26: 1179–1185. Matthews DR, Hosker JP, Rudenski AS. Homeostasis model assessment: insulin

resistance and β-cell function from fasting plasma glucose and insulin concentrations in man. Diabetologia 1985; 28: 412-419.

Page 88: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

REFERÊNCIAS

72

Menendez C, Baldelli R, Camiña JP, Escudero B, Peino R, Dieguez C, Casanueva FF. TSH stimulates leptin secretion by a direct effect on adipocytes. J Endocrinol 2003; 176: 7–12.

Mergen H, Karaaslan Ç, Mergen M, Ozsoy ED, Metin O. LEPR, ADBR3, IRS-1 and 5-HTT genes polymorphisms do not associate with obesity. Endocrine J 2007; 54: 89-94.

Miller SA, Dykes DD, Polesky HK. A simple salting out procedure for extracting DNA

from human nucleated cells. Nucl Acids Res 1988; 16: 1215. Miyakawa M, Tsushima T, Murakami H, Isozaki O, Takano K. Serum leptin levels

and bioelectrical impedance assessment of body composition in patients with Grave’s disease and hypothyroidism. Endocrine J 1999; 46: 665-673.

Morash B, Li A, Murphy PR, Wilkinson M, Ur E. Leptin gene expression in the brain

and pituitary gland. Endocrinology. 1999; 140: 5995-5998. Morgan CR & Lazarow A. Immunoassay of insulin: two antibody system: plasma

insulin levels in normal, subdiabetic and diabetic rats. Diabetes 1963; 12: 115-116. Must A, Spadan J, Goakley EH, Field AE, Colditz G, Dietz WH. The disease burden

associated with overweight and obesity. JAMA 1999; 282: 1523- 1529. Nedvídková J, Smitka K, Kopský V, Hainer V. Adiponectin, an adipocyte-derived

protein. Physiol Res 2005; 54: 133-140. Nillni EA, Vaslet C, Harris M, Hollenberg A, Bjørbæk C, Flier JS. Leptin Regulates

Prothyrotropin-releasing Hormone Biosynthesis. Evidence for direct and indirect pathways. J Biol Chem 2000; 274: 36124-36133.

Nowak KW, Kaczmarek P, Mackowiak P, Ziolkowska A, Albertin G, Ginda WJ, Trejter

M, Nussdorfer GG, Malendowicz LK. Rat thyroid gland expresses the long form of leptin receptors, and leptin stimulates the function of the gland in euthyroid non-fasted animals. Int J Mol Med 2002; 9: 31-34.

Nyrnes A, Jorde R, Sundsfjord J. Serum TSH is positively associated with BMI. Intern

J Obes 2006; 30: 100-105. Ogden CL, Carroll MD, Curtin LR, McDowell MA, Tabak CJ, Flegal KM. Prevalence

of overweight and obesity in the United States 1999-2004. JAMA 2006; 295: 1549–1555.

Page 89: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

REFERÊNCIAS

73

Ogden CL, Yanovski SZ, Carroll MD, Flegal K. The Epidemiology of Obesity. Gastroenterology 2007; 132: 2087-2102.

Ohlson LO, Larsson B, Svardsudd K, Welin L, Eriksson H, Wilhelmsen H, Bjorntorp

P, Tibblin G. The influence of body fat distribution on the incidence of diabetes mellitus. 13.5 years of follow-up of the participants in the study of men born in 1913. Diabetes 1985; 34: 1055-1058.

Ortiga-Carvalho TM, Oliveira KJ, Soares BA, Pazos-Moura CC, 2002. 426 Leptin role

in the regulation of thyrotropin secretion in fed state- in vivo and 427 in vitro studies. J Endocrinol 2002; 174: 121–125.

Peeters, A, Mamum, AA, Willekens, F, Bonneux, BA Cardiovascular Life History. A life course analysis of the original framingham heart study cohort. Eur Heart J 2002; 23: 458-466.

Pelleymounter MA, Cullen MJ, Baker MB, Hecht R, Winters D, Boone T, Collins F:

Effects of the obese gene produce on body weight regulation in ob/ob mice. Science 1995; 269: 540—543.

Pérusse L & Bouchard C. Bases génétiques e l’obésité amiliale u Québec. Med Sci 2003; 19: 37-42.

Pouliot M, Després J, Lemieux S, Moorjani S, Bouchard C, Tremblay A, Nadeau A, Lupien PJ. Waist circumference and abdominal saggital diameter: best simple anthropometric indices of abdominal visceral adipose tissue accumulation and related cardiovascular risk in men and women. Am J Cardiol 1994; 73: 460– 468.

Quinton ND, Laird SN, Okon MA, Li TC, Smith RF, Ross RJM, Blakemore AIF.

Serum leptin levels during the menstrual cycle of healthy fertile women. Br J Biomed Sci 1999; 56: 16–19.

Quinton ND, Lee AJ, Ross RJ, Eastell R, Blackemore AI. A single nucleotide polymorphism (SNP) in the leptin receptor is associated with BMI, fat mass and leptin levels in postmenopausal Caucasian women. Hum Genet 2001; 108: 233-236.

Rankinen T, Zuberi A, Chagnon YC, Weisnage SJl, Argyropoulos G, Walts B, Pérusse L, Bouchard C. The Human Obesity Gene Map: The 2005 Update. Obesity 2006; 14: 529–644.

Page 90: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

REFERÊNCIAS

74

Rennie KL & Jebb SA. Prevalence of obesity in Great Britain. Obes Rev 2005; 6: 11–12.

Roissi M, Kim MS, Morgan DGA, Small CJ, Edwards CMB, Sunter D, Abusnana S,

Goldstone AP, Russell SH, Stanley SA, Smith DM, Yagaloff K, Ghatei MA, Bloom SR. AC- terminal fragment of Agouti-related protein increases feeding and antagonists the effect of alfa-melanocyte stimulating hormone in vivo. Endocrinology 1998; 139: 4428-4431.

Ronti T, Lupattelli G, Mannarino E. The endocrine function of adipose tissue: an

update. Clin Endocrinol 2006; 64: 355–365. Rosenbaum M,Nicolson M, Hirsch J, Heymsfield SB, Gallagher D, Chu F, Leibel RL.

Effects of gender, body composition, and menopause on plasma concentrations of leptin. J Clin Endocrinol Metab 1996; 81: 3424-3427.

Rosmond R, Chagnon YC, Holm G, Chagnon M, Pérusse L, Lindell K, Carlsson B,

Bouchard C, Bjorntorp P. Hypertension in obesity and the leptin receptor gene lócus. J Clin Endocrinol Metab 2000; 85: 3126-3131.

Santos FR, Pena SD, Epplen JT. Genetic and population study of a Y-linked

tetranucleotide repeat DNA polymorphism with a simple non-isotopic technique. Hum Genet 1993; 90: 655-656.

Sari R, Balci MK, Altunbas H, Karayalcin U. The effect of body weight and weight

loss on thyroid volume and function in obese women. Clin Endocrinol 2003; 59: 258–262.

Schwartz MW, Seeley RJ, Campfield LA, Burn P, Baskin DG. Identification of Targets

of Leptin Action in Rat Hypothalamus. J Clin Invest 1996; 98: 1101-1106. Schwartz MW, Woods SC, Porte D, Seeley RJ, Baskin DG. Central nervous system

control of food intake. Nature 2000; 404: 661-671.

Sesmilo G, Casamijana R, Halperin I, Gomis R, Vilardell E. Role of thyroid hormones on serum leptin levels. European J Endocrinol 1998; 139: 428-430.

Sinha MK, Ohannesian JP, Heiman ML, Kriauciunas A, Stephens TW, Magosin S,

Marco C, Caro J: Nocturnal rise of leptin in lean, obese, and non-insulin-dependent diabetes mellitus subjects. J Clin Invest 1996; 97: 1344—1347.

Page 91: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

REFERÊNCIAS

75

Smith-Kirwin S, O’Connor DM, Johnston J, Lancey E, Hassink SG, Funanage VL. Leptin expression in human mammary epithelial cells and breast milk. J Clin Endocrinol Metab 1998; 83: 1810-1813.

Sorisky A, Bell A, Gagnon A. TSH Receptor in Adipose Cells. Horm Metab Res 2000;

32: 468-474. Sorisky A, Pardasani D, Gagnon A, Smith TJ. Evidence of adipocyte differentiation in

human orbital fibroblasts in primary culture. J Clin Endocrinol Metab 1996; 81: 3428–3431.

Spiegelman BM & Flier JS. Adipogenesis and obesisty rounding out the big picture.

Cell 1996; 87: 377-89.

Spranger J, Kroke A, Mohlig M. Adiponectin and protection against type 2 diabetes mellitus. Lancet 2002; 361: 226–228.

Stephens TW, Basinski M, Brstow PK, Bue-Valleskey JM, Burgett SG, Craft L, Hale

J, Hoffmann J, Hsiung HM, Kriauciunas A, Mackellar W, Rosteck PR, Schoner B, Smith D, Tinsley FC, Zhang X-Y, Heiman M. The role of neuropeptide Y in the antiobesity action of the obese gene product. Nature 1995; 377: 530-532.

Stichel H, l'Allemand D, Grüters A. Thyroid Function and Obesity in Children and

Adolescents. Horm Res 2000; 54: 14-19. Tagliaferri M, Berselli ME, Calo G, Minocci A, Savia G, Petroni ML, Viberti GC, Liuzzi

A. Subclinical hypothyroidism in obese patients: relation to resting energy expenditure, serum leptin, body composition, and lipid profile. Obes Res 2001; 9: 196 –201.

Tartaglia LA. The leptin receptor. J Biol Chem 1997; 272: 6093– 6096.

Tartaglia LA, Dembski M, Weng X, Deng N, Culpepper J, Devos R, Richards GJ,

Campfield LA, Clark FT, Deeds J, Muir C, Sanker S, Moriarty A, Moore KJ, Smutko JS, Mays GG, Woolf EA, Monroe CA, Tepper RI. Identification and expression cloning of a leptin receptor, OBR. Cell 1995; 83: 1263– 1271.

Third Report of the National Cholesterol Education Program (NCEP) Expert Panel on

detection, evaluation and Treatment of High Blood Cholesterol in Adults (Adult treatment panel III) Final report. Circulation.2002; 106: 3143-3421.

Page 92: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

REFERÊNCIAS

76

Thomas F, Bean K, Painnier B, Oppert J-M, Guize L., Benetos, A. Cardiovascular mortality in overweight subjects. Hypertension 2005; 46: 654-661.

Thompson DB, et al. Association of the GLN223ARG polymorphism in the leptin receptor gene with plasma leptin levels, insulin secretion and NIDDM in Pima Indians. Diabetologia. 1997; 40: 693–693

Thornton JE, Cheung CC, Clifton DK, Steiner RA. Regulation of hypothalamic

proopiomelanocortin mRNA by leptin in ob/ob gene. Endocrinology 1997; 138: 5063-5066.

Toste FP, de Moura EG, Lisboa PC, Fagundes AT, de Oliveira E & Passos MC.

Neonatal leptin treatment programmes leptin hypothalamic resistance and intermediary metabolic parameters in adult rats. Br J Nutr 2006; 95: 830–837.

Uysal KT, Wiesbrock SM, Marino MW, Hotamisligil GS. Protection from obesity-

induced insulin resistance in mice lacking TNF-alpha function. Nature 1994; 389: 610-614.

Vaisse C, Halaas JL, Horvath CM, Darnell Jr JE, Stoffel M, Friedman JM. Leptin

activation of Stat3 in the hypothalamus of wild-type and ob/ob mice but not db/db mice. Nat Genet 1996; 14: 95–97.

Valcavi R, Zini M, Peino R, Casanueva FF, Dieguez C. Influence of thyroid status on

serum immunoreactive leptin levels. J Clin Endocrinol Mebab 1997; 82; 1632-1634. Valyasevi RW, Erickson DZ, Harteneck DA, Dutton CM, Heufelder AE, Jyonouchi

SC, Bahn RS. Differentiation of human orbital preadipocyte fibroblasts induces expression of functional thyrotropin receptor. J Clin Endocrinol Metab 1999; 84: 2557–2562.

Valyasevi RW, Harteneck DA, Dutton CM, Bahn RS. Stimulation of Adipogenesis,

Peroxisome Proliferator- Activated Receptor-_ (PPAR_), and Thyrotropin Receptor by PPAR_ Agonist in Human Orbital Preadipocyte Fibroblasts. J Clin Endocrinol Metab 2002; 87: 2352–2358.

Vicente LL, Moura EG, Lisboa PC, Costa AMA, Lacerda CAM, Passos MCF.

Malnutrition during lactation is associated with higher expression of leptin receptor in pituitary of the adult rats. Nutrition 2004; 20: 924–928.

Page 93: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

REFERÊNCIAS

77

Warne JP. Tumour necrosis factor alpha: a key regulator of adipose tissue mass. J Endocrinol 2003; 177: 351-355.

Wauters M, Mertens I, Chagnon M, Rankinen T, Considine RV, Chagnon YC, Van

Gaal LF, Bouchard C. Polymorphisms in the leptin receptor gene, body composition and fat distribution in overweight and obese women. Int J Obes 2001; 25: 714-720.

Weyer C, Funahashi T, Tanaka S, Hotta K, Matsuzawa Y, Pratley RE, Tataranni PA.

Hypoadiponectinemia in Obesity and Type 2 Diabetes: Close Association with Insulin Resistance and Hyperinsulinemia. J Clinical Endocrinol Metab 2001; 86: 1930-1935.

WHO- World Health Organization. Obesity and overweight. Geneva, 2006. [acesso

em 2007 Nov 04]. Disponível em: http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs311/en/

WHO- World Health Organization. The world health report 2002: reducing risks, promoting healthy life. Geneva, 2002.

WHO- World Health Organization. Obesity: preventing and managing the global

epidemic. Report of a WHO Consultation. WHO Technical Report Series (894). Geneva, 2000.

Yiannakouris N, Yannakoulia M, Melistas L, Chan JL, Klimis-Zacas D, Mantzoros CS.

The Q223R polymorphism of the leptin receptor gene is significantly associated with obesity and predicts a small percentage of body weight and body composition variability. J Clin Endocrinol Metab 2001; 86: 4434–4439.

Yusuf S, Hawken S, Ôunpuu S, Bautista L, Franzosi MG, Commerford P, Lang

CC, Rumboldt Z, Onen CL, Lisheng L, Tanomsup S, Wangai P, Razak F, Sharma AM, Anand SS, on behalf of the INTERHEART Study Investigators. Obesity and the risk of myocardial infarction in 27 000 participants from 52 countries: a case-control study. Lancet 2005; 366: 1640–1649.

Zabeau L, Lavens D, Peelman F, Eyckerman S, Vandekerckhove J, Tavernier J. The

ins and outs of leptin receptor activation. FEBS Lett 2003;546:45–50. Zhang Y & Scarpace PJ. The role of leptin in leptin resistance and obesity.

Physiology & Behavior 2006; 88: 249–256. Zhang Y, Proenca R, Maffei M, Barone M, Leopold L, Friedman JM. Positional

cloning of the mouse obese gene and its human homologue. Nature 1994; 372: 425-432.

Page 94: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

REFERÊNCIAS

78

Zimmermann-Belsing T, Dreyer M, Holst JJ & Feldt-Rasmussen U. The relationship between the serum leptin concentrations of thyrotoxic patients during treatment and their total fat mass is different from that of normal subjects. Clin Endocrinol 1998; 49: 589–595.

Zimmet P, Hodge A, Nicolson M, Staten M, de Courten M, Moore J, Morawiecki A,

Lubina J, Collier G, Alberti G, Dowse G. Serum leptin concentration, obesity, and insulin resistance in Western Samoans: cross sectional study. BMJ 1996; 313: 965-969.

Page 95: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

ANEXOS

79

ANEXOS

Page 96: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

ANEXOS

80

Anexo 1 UNIVERSIDADE DO ESTADO DO RIO DE JANEIRO

CENTRO BIOMÉDICO - FCM Programa de Pós-graduação em Fisiopatologia

Clínica e Experimental - PG-FISCLINEX

Ficha de Identificação

Paciente:______________________________________________________________ Reg. HUPE: ______________________ Endereço:______________________________________________________________ Bairro:_________________________________Município:_______________________ CEP: _____________ - ______ Telefones: ( ) próprio ( ) outro ________________________ DDD: ___ ___ ___ TEL: ___ ___ ___ ___ ___ ___ ___ ___ CEL: ___ ___ ___ ___ ___ ___ ___ ___ Data de Nascimento: ___ / ___ / _______ Idade: _______ anos Nacionalidade: ( ) Brasileira ( ) outra ________________________ Naturalidade: ( ) Rio de Janeiro ( ) outra ________________________ Cor (especifique): ( ) branco ( ) não-branco, _______________________ Sexo: ( ) masculino ( ) feminino - Profissão: _______________________ Grau de Instrução: ( ) 1º grau incompleto ( ) 2º grau incompleto ( ) 3º grau incompleto ( ) 1º grau completo ( ) 2º grau completo ( ) 3º grau completo Estado civil: ( ) solteiro(a) ( ) casado(a) ( ) divorciado(a) ( ) viúvo(a) Freqüência de atividade física: ( ) raramente / nunca ( ) < uma vez por semana ( ) uma vez por semana ( ) 2-3 vezes por semana ( ) 4-6 vezes por semana diariamente: ____________________ Fumante: ( ) sim ( ) não Uso de álcool no ultimo ano: (quatro drinks por mês, por semana ou por dia): ___________________ Exame Físico (se houver qualquer anormalidade especifique): ____________________________________________________________________________________________________________________________________________

Page 97: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

ANEXOS

81

Ficha de Avaliação Clínica

Nome do paciente:_______________________________________________________ Reg. HUPE: ______________________ Grupo sanguíneo: ( ) A ( ) B ( ) AB ( ) O RH: ( ) + ( ) - Medidas antropométricas: Peso: __________ Kg Altura: __________ IMC: __________ Grau de obesidade: ( ) OB1 ( ) OB2 ( ) OB3 Circunferência de Cintura: __________ Circunferência de Quadril: __________ Razão cintura / quadril: __________ Pressão arterial (sentado): 1ª ________ / ________ mm Hg Braço 2ª ________ / ________ mm Hg Braço ______ 3ª ________ / ________ mm Hg Braço ______ Média das 3 leituras: ________ / ________ mm Hg Pressão arterial média: ________ mm Hg Frequancia cardíaca: ________ bpm Pressão arterial (leitura em pé): ________ / _______mm Hg Peso ao nascer: ________ Kg Altura: ________ Anamnese e história pregressa: (S) sim (N) não (D) desconhece ( ) DM ( ) intolerância à glicose ( ) dislipidemia ( ) HAS – estágio: _______ ( ) ICC ( ) angina ( ) AVE ou IAM recente ( ) tabagismo ( ) alcoolismo ( ) endocrinopatia ( ) nefropatia ( ) hepatopatia ( ) doença psiquiátrica ( ) hiperuricemia / gota ( ) queixas osteoarticulares – citar: _________________________________________ ( ) sintomas respiratórios – citar: __________________________________________ ( ) outras doenças – citar: ________________________________________________ ( ) uso regular de medicação: _____________________________________________

Page 98: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

ANEXOS

82

Ficha de Avaliação Clínica História familiar: (S) sim (N) não - especificar parentesco e idade ( ) obesidade: _________________________________________________________ ( ) dislipidemia: ________________________________________________________ ( ) DM: _______________________________________________________________ ( ) HAS: ______________________________________________________________ ( ) AVE: ______________________________________________________________ ( ) IAM: _______________________________________________________________ Comentários relevantes: ____________________________________________________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________ ______________________________________________________________________ Data: ______________________ Assinatura e Carimbo: _______________

Page 99: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

ANEXOS

83

Anexo 2 TERMO DE CONSENTIMENTO

Título do estudo: ESTUDO DE POLIMORFISMOS GENÉTICOS ASSOCIADOS À OBESIDADE - PPARγ, LepR, Lep e β3R. AVALIAÇÃO DA FREQUÊNCIA E REPERCUSSÕES NEUROENDÓCRINAS (LEPTINA, ADIPONECTINA, T3, T4, TSH), METABÓLICAS (GLICOSE, INSULINA, LIPÍDIOS) E HEMODINÂMICAS (PRESSÃO ARTERIAL E DENSIDADE CAPILAR CUTÂNEA) EM UMA AMOSTRA POPULACIONAL DO RIO DE JANEIRO. Instituição: Universidade do Estado do Rio de Janeiro Pesquisadores: Stênio Fernando Pimentel Duarte Márcia Mattos Gonçalves Pimentel Emílio Antônio Francischetti Virgínia Genelhu de Abreu Nome do paciente:___________________________________________________ Data de nascimento:______________ Número:____________ Eu, ____________________________________________________ identidade nº _________________________, estou ciente e concordo livremente em participar na pesquisa do Serviço de Genética Humana (SERVGEN) e da Clínica de Hipertensão (CKINEX) da Universidade do Estado do Rio de Janeiro visando, investigação de genes associados à obesidade, utilizando técnicas de biologia molecular através de amostra de sangue. Além disso, me foi informado que serão feitas avaliações metabólicas e hemodinâmicas através de dosagens de leptina, adiponectina, glicose, insulina e lipídios, T3, T4, TSH e avaliação da pressão arterial e da densidade capilar cutânea. Declaro que entendi que este trabalho tem como objetivo a implementação de novas técnicas laboratoriais, na investigação de doenças genéticas a partir de indivíduos com sintomas de obesidade. De acordo com o que me foi informado este estudo beneficiará os pacientes através dos diagnósticos encontrados e também suas famílias com relação ao aconselhamento genético mais apropriado. Para a realização dos exames serão extraídos 10 mL de sangue periférico. Esta quantidade é suficiente para as análises em questão, mas, caso não haja obtenção de células necessárias para a análise, o paciente poderá ser solicitado, futuramente, para nova coleta de sangue. O material a ser examinado será somente para fins deste projeto. Declaro que me foi informado, que o referido exame não apresenta risco ao paciente, sendo realizado com material descartável e acompanhado pelo pesquisador responsável.

Page 100: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos portadores de polimorfismo no gene do receptor da leptina.

ANEXOS

84

A participação do paciente neste estudo é voluntária e o responsável poderá recusar-se a participar ou se afastar dele a qualquer momento. O sigilo e a confidencialidade das informações coletadas serão preservadas, assim como suas identidades não serão reveladas. Cada amostra de material biológico fará parte de um banco de dados identificados por códigos específicos. Os resultados, tanto positivos como negativos, serão entregues a cada família participante e também serão utilizados com fins científicos, podendo ser publicados em revistas científicas, estando os registros disponíveis para uso da pesquisa. O responsável terá todo e qualquer esclarecimento sobre este estudo durante e após a duração da pesquisa. Declaro que li e entendi o que me foi explicado.

Rio de Janeiro, _____de ___________________________de _____________.

Universidade do Estado do Rio de Janeiro Assinatura do responsável/ paciente: _______________________________________________

Assinatura do pesquisador:

_______________________________________________

Page 101: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Livros Grátis( http://www.livrosgratis.com.br )

Milhares de Livros para Download: Baixar livros de AdministraçãoBaixar livros de AgronomiaBaixar livros de ArquiteturaBaixar livros de ArtesBaixar livros de AstronomiaBaixar livros de Biologia GeralBaixar livros de Ciência da ComputaçãoBaixar livros de Ciência da InformaçãoBaixar livros de Ciência PolíticaBaixar livros de Ciências da SaúdeBaixar livros de ComunicaçãoBaixar livros do Conselho Nacional de Educação - CNEBaixar livros de Defesa civilBaixar livros de DireitoBaixar livros de Direitos humanosBaixar livros de EconomiaBaixar livros de Economia DomésticaBaixar livros de EducaçãoBaixar livros de Educação - TrânsitoBaixar livros de Educação FísicaBaixar livros de Engenharia AeroespacialBaixar livros de FarmáciaBaixar livros de FilosofiaBaixar livros de FísicaBaixar livros de GeociênciasBaixar livros de GeografiaBaixar livros de HistóriaBaixar livros de Línguas

Page 102: Avaliação da função tireoideana em indivíduos obesos ...livros01.livrosgratis.com.br/cp067075.pdf · lepr- Leptin receptor gene (gene do receptor da leptina em roedores) MC4R-

Baixar livros de LiteraturaBaixar livros de Literatura de CordelBaixar livros de Literatura InfantilBaixar livros de MatemáticaBaixar livros de MedicinaBaixar livros de Medicina VeterináriaBaixar livros de Meio AmbienteBaixar livros de MeteorologiaBaixar Monografias e TCCBaixar livros MultidisciplinarBaixar livros de MúsicaBaixar livros de PsicologiaBaixar livros de QuímicaBaixar livros de Saúde ColetivaBaixar livros de Serviço SocialBaixar livros de SociologiaBaixar livros de TeologiaBaixar livros de TrabalhoBaixar livros de Turismo