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7/23/2019 BROMELINA BIOCATALISADORES
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Extrao, imobilizao e aplicao da enzima bromelina do abacaxi (Ananas comosus) na carne bovina.
Arthur Prado
Gabrielle CarolineJaqueline Costa
Lucas Gabriel
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AbacaxizeiroO abacaxizeiro uma monocotilednea herbcea perene
pertencente famlia Bromeliaceae com distribuio
neotropical. Apresenta cerca de !"! espcies distribudas em
#$ %&neros.
O %&nero mais importante de ponto de 'ista econmica da
famlia Bromeliaceae( o %en&roAnanas( no )ual se en)uadra o
%&neroAnanas comosus*. +errill.
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+orfolo%ia,lanta de pe)ueno porte( )ue pode che%ar a -!
centmetros de altura( com folhas lon%as e duras( dispostas em
espiral( formando uma roseta.
uas flores so pe)uenas( )ue 'o de uma colorao
r/sea ao roxo0p1rpura( a%lomeradas numa haste( formando uma
espcie de espi%a( )ue mais tarde dar ori%em fruta( )ue 'em
acompanhada de uma coroa espinhenta.
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2onte3 4ncaper( 5!"!.
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6onstituintes 7umicos
Bromelina
6inarina
8riterpenos
aponinas
2la'on/ides
9licosdeos
acardeos
8aninos
+ucila%ens
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BromelinaA bromelina uma enzima encontrada no talo(
folhas( razes ( casca e polpa de todas as espcies de
abacaxi da famlia Bromeliaceae.Onde a mesma( encontra0se no %rupo das proteases(
na classe das hidrolases.
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Bromelina A especificidade das proteases ampla e
classificada de acordo com a constituio de seu stio
ati'o em tr&s %rupos principais3
erina protease
:cido asprtico protease
Cistena protease
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6istena ,rotease,ossuem aminocido cistena con;u%ado com
histidina em seu stio ati'o
o mais ati'as em p< neutroO mecanismo de ao das cistena protease
usualmente se%ue uma reao em dois passos3
Acilao
=esacilao
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4mobilizao enzimticaA imobilizao de enzimas representa uma alternati'a
para a conduo de bioprocessos uma 'ez )ue( os
biocatalisadores imobilizados ficam retidos para seremutilizados por tempo indefinido.
>xistem dois tipos diferentes de imobiliza?es3
7umica
2sica
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8cnicas de 4mobilizao
2onte3 6A@+>*A8O( "#.
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8cnica por AdsoroA adsoro de enzimas em suportes insol1'eis
resulta %eralmente em intera?es do tipo inica( polar(
pontes de hidro%&nio ou hidrof/bicas
>sses suportes incluem a alumina( resinas de troca
inica( 'idro( celulose( feltro e outros
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Vantagens
Simplicidade
Nenhum reagente
Mnimo de passos
Desvantagens
p8D.
E obtido a partir do etileno CetenoD( possuindo alta resist&ncia
umidade e ao ata)ue )umico.E um dos polmeros mais usados pela ind1stria( sendo muito
empre%ado na fabricao de3
2olhas Ctoalhas( cortinas( en'/lucros( embala%ens( sacos de lixo( etcD
@ecipientes Csacos( %arrafas( baldes etcD
6anos plsticos( brin)uedos infantis( no isolamento de fios eltricos(
etc.
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4mportFncia da Bromelina>st relacionada com a produo de frmacos e a
sua utilizao na ind1stria alimentcia como3
6larificao de cer'e;as
2abricao de )uei;os
Amaciamento de carnes
,reparo de alimentos infantis e dietticos
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4mportFnciaendo tambm utilizada38ratamento de dist1rbios di%esti'os
2eridas4nflama?es
,reparo de col%enos hidrolisados
>m ind1strias t&xteis( para amaciamento de fibras
,roduo de deter%entes
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+ateriais AbacaxiG 2acaG B)ueres de "#! m*( 5#! m*G #!! m*G *i)uidificadorG
Balo 'olumtrico de "!! m*G BalanaG Basto de 'idroG 2ita de p
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+etodolo%ia1 arte ! "bteno das amostras
O abacaxi foi ad)uirido no mercado de 4tumbiara( e o
fruto encontra'a0se em um est%io de maturao ade)uado
para o consumo.
Ap/s a hi%ienizao do fruto( este foi separado em
partes3 casca( polpa e talo e as amostras foram cortadas em
cubos de aproximadamente " cm para estudo.
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,esou0se 5!% de casca( polpa e talo em b)ueres
separados com a a;uda de uma balana. O restante dasamostras obtidas foram armazenadas em pacotes e
acondicionadas no con%elador( caso fosse necessrio para
outros ensaios( a uma temperatura de 0#I6.
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Ap/s a pesa%em foi le'ado para a bancada e adicionou0
se #! m* de soluo tampo fosfato "(! + p< H( e deixou
as amostras em repouso( imersos na soluo por # minutos.
Adicionou0se inicialmente a casca com a soluo
tampo fosfato "(! + ,h H( no li)uidificador domstico e
homo%eneizou por " minuto na 'elocidade mxima e
transferiu0se para um b)uer( coando0a com uma peneira
fina.
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>m se%uida( fez0se a homo%eneizao da polpa(
adicionando0a( com a soluo tampo fosfato "(! + p< H(no li)uidificador domstico e homo%eneizou0se por "
minuto na 'elocidade mxima e transferiu0se para um
b)uer( coando0a com uma peneira fina.
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,or fim( transferiu0se o talo com a soluo tampo
fosfato "(! + p< H( para o li)uidificador domstico e
homo%eneizou0se por " minuto na 'elocidade mxima e
transferiu0se para um b)uer( coando0a com uma peneira
fina.
Assim )ue coou0se as solu?es homo%eneizadas(
resultou0se em amostras com aproximadamente ! m* dcasca( $! m* de talo e ## m* de polpa( de aspecto um pouco
espesso. >m se%uida( mediu0se o p< de cada soluo e
obte'e0se3
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Parte do abacaxi pH
Polpa 6
Talo 7
Casca 6
8abela "0 p< das solu?es de cada amostra( antes de neutralizar.2onte3 pr/prio autor
,osteriormente( o p< de cada meio foi a;ustado para H(#
com a base aO< "(! +( utilizando0se al%umas %otas desta.Ap/s ter a;ustado o p
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# arte ! $mobilizao enzim%tica
Ktilizou0se como suporte para imobilizao o tecido feltro de
colao branca( e com este fez0se $ suportes( para as placas de
petri de 'idro no esterelizadas( com $ cm de diFmetro e outras
para as placas de petri de plstico estrelizadas( com cm de
diFmetro.
>m cada placa de petri de 'idro no esterilizada( colocou0se o
feltro como imobilizador( e adicionou0se aproximadamente #
m* de cada amostra( polpa( talo e casca em cada uma das
placas.
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as placas de petri de plstico esterilizada( colocou0se o
feltro como imobilizador( e adicionou0se aproximadamente"! m* de cada amostra( polpa( talo e casca em cada uma das
placas.
,osteriormente le'ou0se todas as placas de petri ao
dissecador com slica para a seca%em total do material( para
)ue as amostras no sofressem nenhuma alterao
pro'eniente do meio externo( )ue pudessem interferir de
modo si%nificati'o na ati'idade enzimtica da bromelina.
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& arte ! 'este enzim%tico
Ap/s uma semana acondicionadas no dissecador( as placas
de petri foram retiradas e le'adas para a bancada( encontrando0
se todas secas.
Obte'e0se $ bifes de carne bo'ina( sendo acm e antes de
colocar a enzima em contato com a carne( obser'ou0se seus
aspectos( como colorao( presena de %ordura e ner'os e
ri%idez.
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>m se%uida( fez0se um corte trans'ersal na parte interna
de cada bife e adicionou0se a enzima imobilizada no feltroCcasca( polpa e taloD contido nas placas de petri e deixou0se em
repouso durante " hora.
,or fim( temperaram0se as carnes e le'ou0se ao cozimento
para a de%ustao realizada pelos docentes do $I perodo de
farmcia e pela discente +aria +adalena de AlcFntara.
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@esultados e =iscuss?esAp/s repouso por uma hora na carne bo'ina( a
ati'idade enzimtica da bromelina foi confirmada( pelos
docentes e discente( atra's da de%ustao das mesmas.,orm( sua efeti'idade se deu somente nas placas de
petri )ue esta'am esterilizadas( concluindo )ue a
presena de poss'eis impurezas e micro0or%anismos
interfira na ati'idade deste biocatalizador inibindo0a.
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Alm disso( hou'e melhor eficcia da enzima ad)uirida da
casca( podendo constatar )ue h maior presena desta na
casca do fruto.
>m cada amostra de carne( foi a'aliada a presena de
%ordura e iner'ao( aspectos )ue tambm interferiram naati'idade enzimtica( atrapalhando esta( pois partes das
carnes )ue continham maior )uantidade de %ordura e
iner'ao no ad)uiriram a maciez dese;ada( ; )ue esta uma enzima proteoltica e no apresenta ati'idade )uando
aplicada em cidos %raxos.
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6onclusoO material utilizado para imobilizao apresentou
resultado satisfat/rio( onde se pde constatar a ati'idade
enzimtica da bromelina na carne bo'ina.
6oncluiu0se tambm )ue a eficcia da ati'idadeenzimtica depende de fatores externos )ue acabam por
pre;udicar( inibindo a ao da enzima bromelina.
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@efer&nciasA@O( @. ,apain. 4n3 ,>@*+A( 9.G *O@A2( *. etods in
Enzimolog*. o'a LorM3 Academic ,ress( p. 55$05JJ("H!.
BA>N( N.
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