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COLORAÇÃO DE COLORAÇÃO DE GRAM GRAM

COLORAÇÃO DE GRAM

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Page 1: COLORAÇÃO DE GRAM

COLORAÇÃO DE COLORAÇÃO DE GRAMGRAM

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HISTÓRICOHISTÓRICO

• 1884, HANS CRISTIAN GRAM, DESCOBRUI QUE AS BACTÉRIAS PODIAM SER DIVIDIDAS EM DOIS GRANDES GRUPOS, PARTINDO DA CAPACIDADE QUE TÊM AS CÉLULAS CORADAS DE RESISTITEM OU NÃO A UMA DESCOLORAÇÃO PELO ÁLCOOL.

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•ESSA AÇÃO, PROVAVELMENTE, OCORRE PELA MAIOR QUANTIDADE DE LIPÍDIOS NA PARADE CELULAR DAS BACTÉRIAS.

•A PAREDE DA CÉLULA GRAM NEGATIVA TÊM UM CONTEÚDO LIPÍDICO MAIS ELEVADO QUE AS CÉLULAS GRAM POSITIVAS.

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FINALIDADEFINALIDADE

É UM MÉTODO USADO PARA DIFERENCIAR AS BACTÉRIAS:

• GRA-POSITIVA

• GRAM-NEGATIVAS

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ESTRUTURA ESTRUTURA BACTERIANABACTERIANA

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ESTRUTURA BACTERIANAESTRUTURA BACTERIANA

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ESTRUTURA GRAM POSITIVAESTRUTURA GRAM POSITIVA

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ESTRUTURA GRAM POSITIVAESTRUTURA GRAM POSITIVA

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ESTRUTURA GRAM ESTRUTURA GRAM POSITIVAPOSITIVA

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ESTRUTURA GRAM NEGATIVAESTRUTURA GRAM NEGATIVA

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ESTRUTURA GRAM ESTRUTURA GRAM NEGATIVANEGATIVA

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ESTRUTURA GRAM ESTRUTURA GRAM NEGATIVANEGATIVA

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DIFERENÇA ENTRE GRAM POSITIVA E DIFERENÇA ENTRE GRAM POSITIVA E GRAM NEGATIVAGRAM NEGATIVA

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CORANTES E REAGENTESCORANTES E REAGENTES

CRISTAL VIOLETA (VIOLETA DE METILA).

LUGOL.

ÁLCOOL.

SAFRANINA.

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MÉTODO DA MÉTODO DA COLORAÇÃO DE COLORAÇÃO DE

GRAMGRAM

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COLORAÇÃO PRIMÁRIACOLORAÇÃO PRIMÁRIA

ESFREGAÇO FIXADO COM SOLUÇÃO SOLUÇÃO DE CRISTAL VIOLETADE CRISTAL VIOLETA DURANTE 1 MINUTO.

LAVAR COM ÁGUA CORRENTE.

AS CÉLULAS NESTE ESTÁGIO ADQUIREM TONALIDADE AZUL-ESCURA OU PÚRPURA.

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MORDENTEMORDENTE

ESFREGAÇO É COBERTO POR UMA SOLUÇÃO DE IODOSOLUÇÃO DE IODO.

CRISTAL VIOLETA É FIXADO À CÉLULA PELO MORDENTE.

COMPLEXO VIOLETA-IODO É FORTEMENTE RETIDO POR UM GRUPO DE BACTÉRIAS.

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DESCOLORAÇÃODESCOLORAÇÃO

APLICAR ÁLCOOL ETILÍCOÁLCOOL ETILÍCO NO ESFREGAÇO.

A FUNÇÃO DO ÁLCOOL É DESIDRATAR OS CARBOITRADOS EXISTENTES NA PAREDE CELULAR DE BACTÉRIAS GRAM-POSITIVAS, RETENDO O CORANTE PRIMÁRIO.

AS GRAM-NEGATIVAS, ATRAVÉS DA DISSOLUÇÃO DOS LIPÍDIOS, TÊM A POROSIDADE OU PERMEABILIDADE DA PAREDE CELULAR AUMENTADA, EVITANDO QUE O COMPLEXO CORANTE SEJA RETIDO.

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CONTRASTECONTRASTE

FUCSINA DILUÍDA OU SAFRANINAFUCSINA DILUÍDA OU SAFRANINA CONSTITUI O CORANTE SECUNDÁRIO.

SE AS CÉLULAS PERMITEM O DESCORAMENTO PELO ÁLCCOL, ELAS FIXAM O CORANTE SECUNDÁRIO NESTA SEGUNDA ETAPA.

COLORAÇÃO DAS BACTÉRIAS DE ROXO: GRAM-POSITIVAS.

COLORAÇÃO DAS BACTÉRIAS DE VERMELHO: GRAM-NEGATIVAS.

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PASSOS PARA COLORAÇÃO DE PASSOS PARA COLORAÇÃO DE GRAMGRAM

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RESULTADOSRESULTADOS

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RESULTADORESULTADO

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RESULTADORESULTADO

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PRANCHAS PRANCHAS COLORIDASCOLORIDAS

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GRAM POSITIVASGRAM POSITIVAS

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GRAM NEGATIVASGRAM NEGATIVAS

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CLASSIFICAÇÃO CLASSIFICAÇÃO DAS BACTÉRIASDAS BACTÉRIAS

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AERÓBIOSAERÓBIOS

1) COCOS

GRAM-POSITIVOS: Staphylococcus, Streptococcus.

GRAM-NEGATIVOS: Neisseria.

2) BACILOS

GRAM-POSITIVOS: Corynebacterium, Lactobacillus, Listeria,etc.

GRAM-NEGATIVOS: Enterobactérias (Escherichia, Proteus, Klebsiella, Salmonella, Shigella), Pseudomonas, Bordetella, Haemophilus, etc.

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ANAERÓBIOSANAERÓBIOS

1) COCOS

GRAM-POSITIVOS: Peptococcus, etc.

GRAM-NEGATIVOS: Veilonella, etc.

2)BACILOS

GRAM-POSITIVOS: Clostridium, etc.

GRAM-NEGATIVOS: Bacteroides, etc.

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OBSERVAÇÃOOBSERVAÇÃO

REGRA GERAL:REGRA GERAL:

OS COCOS, COM EXCEÇÃO DA Neisseria, SÃO GERALMENTE GRAM (+).

OS BASTONETES, COM EXCEÇÃO DAS CORINEBACTÉRIAS, Listeria, Bacillus E CLOSTRÍDIOS, GRAM (-).

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BIBLIOGRAFIABIBLIOGRAFIAANTUNES, G.S. MANUAL DE DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO. 2ªEDIÇÃO, PORTO ALEGRE, EDITORA UNIVERSIDADE/UFRGS, 1995.

BIDDLE, W. GUIA DE BATALHA CONTRA OS GERMES. RIO DEJANEIRO, EDITORA RECORD, 1998.

MENEZES, C.H.P. BACTERIOLOGIA, UM TEXTO ILUSTRADO.TERESÓPOLIS, RIO DE JANEIRO, EDITORA EVENTOS, 1999.

PILONETTO M. MANUAL DE PROCEDIMENTOS LABORATORIAIS EMMICROBIOLOGIA. CURITIBA, MICROSCIENCE ASSESSORIA PARALABORATÓRIOS LTDA, 1998.

SANTOS, L.F. MANUAL DE MICROBIOLOGIA CLÍNICA. JOÃOPESSOA, ED. UNIVERSITÁRIA/UFPB, 1996.

VALLADA, E.P. MANUAL DE COPROCULTURA. 2ª EDIÇÃO, SÃOPAULO, EDITORA ATHENEU, 1996.