CULTURA DE MERISTEMAS OU DE ÁPICES CAULINARESCOMP - Cópia

CULTURA DE MERISTEMAS OU DE PICES CAULINARES

CULTURA DE MERISTEMA: Tcnica usada para liberar plantas de

infeces virais.

Explantes so retirados de gemas apicais ou laterais.

Compreende o pice caulinar (0,2 a 1,0 mm de comp.), consistindo

de meristema apical e 1 ou 2 primrdios foliares.

CULTURA DE PICES CAULINARES: Cultura de pices caulinares ou

gemas laterais maiores (5 a 10mm de comp.) com + de 3 primrdios

foliares

Mtodo eficiente de propagao de plantas.


APLICAES

Eliminao de vrus

Vrus se movem rapidamente atravs do sist. vascular da planta,

no qual nos meristemas est ausente;

A alta atividade metablica nas clulas dos meristemas que se

dividem ativamente no permite a multiplicao do vrus;


APLICAES

Eliminao de vrus

Altos nveis endgenos de auxinas nas gemas apicais poderiam

inibir a multiplicao do vrus.

Clulas meristemticas podem ter sistemas qumicos de

inativao, que podem ser potencializados em meristemas

isolados.


Exemplos de plantas nas quais vrus tem sido eliminados:

crisntemo, dlia, cana-de-acar, soja, alho, banana, Cymbidium,

morango, macieira, batata, aspargo, couve-flor.

RPIDA MULTIPLICAO CLONAL

CONSERVAO DO GERMOPLASMA

VANTAGEM: Manuteno da identidade do gentipo regenerado

clulas do meristema tem grande estabilidade gentica.


MTODOS DE ELIMINAO DE VRUS: TRATAMENTO DE CALOR

(TERMOTERAPIA) E CULTURA DE MERISTEMAS

Tratamento de calor: gua quente (gemas dormentes)

ar quente - Termoterapia (brotaes crescendo

ativamente) 35 -40 C 6 a 12 sem.

Principal limitao da termoterapia: nem todos os vrus so sensveis a

esse tratamento e baixa % de sobrevivncia das plantas.


CULTURA DE MERISTEMAS

TAMANHO DO EXPLANTE

(Quanto < o tamanho > chance de erradicao do vrus < chance

de sobrevivncia)

ISOLAMENTO DOS MERISTEMAS

- Fonte de explantes: gemas apicais, axilares, brotaes de estacasou de sementes germinadas.

- Desinfestao: Sem desinfestao ou tratamento fraco

- Isolamento: com auxlio de microscpio estereoscpico, pinas e

bisturis, o meristema retirado e inoculado no meio de cultura.


FATORES QUE AFETAM

Condies fisiolgicas da planta matriz

Estado fitossanitrio, fisiolgico e nutricional da planta doadora

Mantida em casa de vegetao, em fase de crescimento ativo


FATORES QUE AFETAM

Condies fisiolgicas do explante

Brotaes em crescimento vegetativo ativo

(posio do explante na planta doadora, tamanho do explante,

estao do ano)

Meristemas retirados de gemas terminais respondem melhor do

que os retirados de gemas axilares ( no ocorre com o morango)

Explante: meristema apical, com 1 ou 2 primrdios foliares

tamanho: 0,1 a 0,3 mm


Meio de cultura: MS*

Algumas sps txico meios de cultura com baixa

formulao salina

Reguladores vegetais: baixa conc. (0,1 -0,5 mg L-1) de

auxina, ou citocinina ou ambos benfico.

Para algumas sps GA3 (0,1 mg L-1) combinado com BAP e ANA

essencial para regenerao de plantas a partir de

meristemas.


Consistncia do meio de cultura: semi-slido ou liquido.

Induo de brotaes mltiplas: elevadas conc. de citocininas, combinadas ou no com auxinas.

Enraizamento: auxinas

Condies de cultivo: luz ou escuro (reduzir o efeito depolifenis), temperatura (25-28 C) e fotoperiodo de 12-16 h.

Transplantio e aclimatizao de mudas

CULTURA DE PICES CAULINARES

MICROENXERTIA OU ENXERTIA IN VITRO Consiste em enxertar, em condies asspticas, um meristema

apical ou pice caulinar sobre um porta-enxerto estabelecido in

vitro.

Quando os microenxertos so bem sucedidos, o porta-enxerto e

enxerto crescem juntos para formar uma planta.

TERMO MICROENXERTIA: enxerto o meristema apical

No tem aplicao direta na micropropagao

Tcnica que consome muito tempo e a taxa de sucesso

geralmente muito baixa.

MICROENXERTIA OU ENXERTIA IN VITRO

Vantagens: Contornar problemas da enxertia ex vitro:

Deteco precoce da incompatibilidade

Limpeza clonal

Rejuvenescimento de clones

Diferenas da enxertia ex vitro: cond. asspticas e dimenses doenxerto e porta-enxerto


TCNICA DE ENXERTIA IN VITRO ETAPAS:

Obteno do porta-enxerto,

Obteno e preparo do enxerto,

Execuo da enxertia

Aclimatizao da planta enxertada na condio ex vitro

MICROENXERTIA OU ENXERTIA IN VITRO TCNICA DE ENXERTIA IN VITRO ETAPAS:

Obteno do porta-enxerto:

A partir de sementes germinadas in vitro * (custo reduzido,

variabilidade gentica diferenas de resposta quanto ao

crescimento e desenvolvimento do enxerto)

Algumas sps precisam de tratamentos especiais para superao

da dormncia das sementes:

- estratificao 3 a 4 C -30 a 120 dias para ameixa, damasco, pssego

- tratamento com BAP (200 mg L-1) ou GA3 (100 mg L-1) ou ambos por 24 h

Ou a partir de gemas alongadas da micropropagao (espcies com dificuldade na produo de sementes viveis) .


Execuo da enxertia in vitro:

Condies asspticas (cmara de fluxo laminar), com auxlio

de pinas e bisturis prepara o porta-enxerto (elimina os

cotildones e raiz e faz um corte em T invertido, sem atingir o

crtex) e depois o enxerto (meristema com 2 primrdios)


Obteno do microenxerto: pices meristemticos oumeristemas

Coleta: Podem ser retirados de gemas apicais ou axilares de

brot. crescendo ativamente em casa de vegetao ou no campo

ou podem ser removidos de brotaes crescendo in vitro

Ex: videira meristemas (0,1-0,2 mm)

pssego pice caulinar (0,5-1 mm)

Desinfestao

Oxidao pode ser reduzida por imerso em sol. anti-oxidante

ou colocar 1 gota de soluo no porta-enxerto na hora deinserir o enxerto (Sol. de 2 g L-1 de DIECA)


pices podem ser enxertados diretamente ou cultivados por

um curto perodo, com citocinina antes de serem transferidos.

Unio das partes, com auxlio de microscpio estereoscpico

Planta enxertada meio de cultura sala de crescimento


Transplantio da plntula microenxertada

45 dias de incubao, quando o microenxerto j emitiu 2 a 3

folhas transplantio para substrato esterilizado.

Desidratao a principal causa do fracasso dos enxertos

Micropropagao da planta obtida a partir do pice

microenxertado por meio da cultura de gemas aumenta a % de

plantas livres de vrus.


FATORES QUE AFETAM:

Espcie de planta (efeito do gentipo) e o tipo de enxertia;

Ex: algumas sps florestais so recalcitrantes micropropagao

Afinidade e analogia entre as plantas;

(idade do porta-enxerto tem que ser definida de acordo com o

tamanho do enxerto)

Contaminaes endgenas;

Presena de compostos fenlicos e

Habilidade manual do enxertador

( material vegetativo tenro, exige destreza e rapidez na

execuo da enxertia)


APLICAES NA REA FLORESTAL E FRUTFERAS

ESTRATGIAS DE MELHORAMENTO GENTICO DE DIFERENTESESPCIES

AUMENTO DA PRODUTIVIDADE EM PLANTIOS COMERCIAIS

LIMPEZA CLONAL

TCNICA DE REJUVENESCIMENTO: SERIADA

Exemplos: Acacia mangium,Quercus rubra, Sequoia sempervirens,

Larix decidua, Anacardium occcidentalle, Garcinia indica.

Frutferas: macieira, damasqueiro, videira, laranja, tangerina,

limo, pssego, abacate.

MICROENXERTIA DE Citrus

MTODOS ALTERNATIVOS DE MICROENXERTIA

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