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7/26/2019 DIAGNSTICO LABORATORIAL.pdf
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FRUM DE ATUALIZAO EM TUBERCULOSE NA CRIANA E NOADOLESCENTE
TUBERCULOSE NA CRIANA E NO ADOLESCENTEDIAGNSTICO LABORATORIAL
Christiane Mello SchmidtPneumologista Peditrica HUAP - UFF
Professora Assistente em Pediatria
UFF2016
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I. INTRODUO
II. EXAMES INESPECFICOS
III. PROVA TUBERCULNICA
IV. BACTERIOLOGIA
V. HISTOPATOLOGIA
VI. ADENOSINA DEAMINASE
VII. SOROLOGIA ELISA
VIII. DOSAGEM DE INTERFERON GAMA
IX. PCR e TESTE RPIDO MOLECULAR
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INTRODUO
A tuberculose (TB) continua um importante
problema de sade pblica nos pases em desenvolvimento
A TB na infncia corresponde a 11 % do total de casos no mundo
Nas Amricas estima-se que ocorram anualmente de 25.000 a 29.000casos em crianas
Sant`anna CC. Pulmo RJ 2012
MS , Brasil. 2011
WHO 2015
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INTRODUO
Aps a infeco pelo Mycobacterium tuberculosis
- 90% TB latente (ILTB) 10 % TB doenamaioria formapulmonar
- 75% TB pulmonar e 25% TB extra-pulmonar
Na infncia , o diagnstico de TB pulmonar difcil*formas paucibacilferas
*crianas pequenas no expectoram
Adolescentes , costumam ter leses mais parecidas com adultos e
serem bacilferosMS , Brasil. 2011
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EXAMES INESPECFICOS
Hemograma
VHS
PCR
Anlise de lquidos pleural, articular, peritoneal e
lquor
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PROVA TUBERCULNICAReao intra -drmica de Mantoux :
0,1ml PPD RT23 (2UT), antebrao esquerdoleitura 48-72h aps
Resultado : >=10mm pacientes BCG < 2 anos
>= 5mm pacientes BCG > 2 anos
A vacinao BCG pode interferir no resultado
Podem ter resultados falsos positivos e negativos
No distingue infeco e doena
MS, 2011
Stark e, 2014
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Fonte: MS, 2011
CAUSAS DE RESULTADOS FALSO NEGATIVOS PROVA TUBERCULNICA
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BACTERIOLOGIA
O isolamento do bacilo o mais importante para a
confirmao diagnstica
Podem ser analisados secrees e tecidos acometidos
Exame direto ( pesquisa do Bacilo lcool cido resistente - BAAR)
Culturas para micobactrias em meio slido
Teste de Microscopia de observao com luz invertida (MODS)
MB/bact e MGIT960
PCR e XPERT MTB/RIF
Polimorfismo do comprimento dos fragmentos de restrio - RFLP
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PESQUISA DIRETA BAAR
Colorao de ZiehlNielsen
baixo custo, execuo simples e rapidez
Baixa sensibilidade - 10-15% ( maior em alguns casos)
EscarroEscarro induzido ( NBZ com NaCl 3% e brocodilatador)Lavado gstricocrianas menores de 5 anos (acurcia 20 -52%)Lavado broncoalveolar
Lquor, lquido pleural, urina e outros tecidos
Maciel EL et al, 2009
MS, 2011
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CULTURACultura : padro ouro, identificao da espcie
testes de sensibilidade (MDR e XMDR)
INDICAES PARA REALIZAO DE CULTURA PARA MICOBACTRIA
1-suspeitos de TB com baciloscopia repetidamente negativa
2- suspeitos de TB com amostras paucibacilares
3- suspeitos de TB com dificuldades de obteno da amostra
4- suspeitos de TB extrapulmonar
5- suspeitos de infeces causadas por micobactrias notuberculosasMNT
MS, 2011
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CULTURA DE M. TUBERCULOSIS MEIO SLIDOLOWENSTEINJENSEN
Meio mais utilizado no Brasil
10 a 100 bacilos/ml no espcime para ser positiva
Permite a identificao do M. tuberculosis ( testes bioqumicos e TSA)
Sensibilidade em crianas : 25-50%
Resultados: 4 a 8 semanas
Sant`Anna & Loboguerrero, 2015
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https://www.google.com.br/search?q=CULTURA+MICOBACTERIA+MEIO+SOLIDO&espv=
2&biw=1366&bih
CULTURA DE M. TUBERCULOSISMEIO SLIDO (LJ)
https://www.google.com.br/search?q=CULTURA+MICOBACTERIA+MEIO+SOLIDO&espv=2&biw=1366&bihhttps://www.google.com.br/search?q=CULTURA+MICOBACTERIA+MEIO+SOLIDO&espv=2&biw=1366&bihhttps://www.google.com.br/search?q=CULTURA+MICOBACTERIA+MEIO+SOLIDO&espv=2&biw=1366&bihhttps://www.google.com.br/search?q=CULTURA+MICOBACTERIA+MEIO+SOLIDO&espv=2&biw=1366&bih7/26/2019 DIAGNSTICO LABORATORIAL.pdf
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MICROSCOPIA DE OBSERVAO COM LUZ INVERTIDAMODS
Meio lquido enriquecido (Middlebrook, 7H9)
Permite a identificao do bacilo e TSA
Crescimento em corda tpico do M. tuberculosis
Resultados mais rpidos ( 5-7 dias)
Sensibilidade maior que o a cultura meio slido LJ
Custo menor que o MGIT
Lighter, 2009
Cuevas et al, 2012
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Aspecto em corda do M. tuberculosis
MICROSCOPIA DE OBSERVAO COM LUZ INVERTIDAMODS
https://openi.nlm.nih.gov/detailedresult.php?img=PMC2064961_pone.0001173.g004&req=4
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MGIT 960TUBO INDICADOR DE CRESCIMENTO DE MICOBACTRIAS
Meio lquido de cultura, automatizado , luminescncia alaranjada
Resultado rpido10 a 15 dias (Gray, 2004)
Pode ser semeado qualquer espcime clnico (Chan, 2008)
Sensibilidade maior que o LJ e MODS, mesmo se tratamentoiniciado
Sistemas lquidos so mais propensos contaminao ,necessrio maior biossegurana (Who, 2010)
Sistemas automatizados no permitem identificao morfolgica
- necessidade esfregao ZN ou de testes bioqumicos
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TUBO INDICADOR DE CRESCIMENTO DE MICOBACTRIAS
https://www.google.com.br/search?q=mgit960&espv=2&biw=1366&bi
MGIT 960
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HISTOPATOLOGIA
indicado, principalmente , nos casos de TB extrapulmonar
O granuloma com necrose caseosa a leso sugestiva de TB
Pacientes imunocompetentes - a baciloscopia do tecidousualmente negativa e observa-se a presena de granuloma, comnecrose de caseificao
Pacientes imunossuprimidos - menos frequente a presena de
granuloma com necrose caseosa, porm maior positividade dabaciloscopia no material de biopsia
MS, 2011
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Int. J. Morphol., 27(1):193-200, 2009.
TB pleural
TB pleural
ATIVIDADE DE ADENOSINA DEAMINASE ADA
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ATIVIDADE DE ADENOSINA DEAMINASEADA
enzima presente na superfcie de linfcitos e macrfagos
Adenosina ADA Inosina
Est elevada em locais de grande proliferao de mononucleares
Lquidos pleural , pericrdico, peritoneal , lquor *(prognstico)
Mtodo simples , feito em duplicata
Valores > 38 U/L
positivos ( Mishra et al., 2006)
Sensibilidade at 88% e especificidade at 90% - Cas TB pleural( Martire et al.,2012.)
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SOROLOGIA ELISA
mtodo rpido ( resultado 24 a 36h)
No recomendado atualmente pela OMS, devido a resultadosdistintos com relao sensibilidade e especificidade (OMS, 2011)
Martire, 2008Ag MPT-64, ESAT-6, CFP-10S= 47% ( similar cultura )
E= 95%
Novos antgenos lipdicos e proteicos, da parede celular dasmicobactrias - promissores ???
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Sant`Anna & Lo boguerrero, 2015
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OBRIGADA