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Enzimas e minerais na nutrição de ruminantes Luis Fernando Tamassia Diretor de Inovação e Ciência Aplicada para a América Latina DSM - Brasil

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Enzimas e minerais na nutrição de

ruminantes

Luis Fernando Tamassia

Diretor de Inovação e Ciência Aplicada para a América Latina

DSM - Brasil

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O que é inovação?

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Em 50 anos, a população mundial precisará de:

• 100% mais alimentos

• 70% destes alimentos deverão ser provenientes

da utilização de tecnologias para incremento

da produtividade

O crescimento populacional será maior que nossa

capacidade de produzir alimentos????

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Saúde

Animal

Eficiência

Alimentar

Exigência dos

Mercados

Gases Efeito

Estufa Otimização dos

custos de produção

Focos de interesse em melhorias

na produção de carne e leite

Fertilidade /

reprodução

Qualidade do

Produto Final

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Saúde

Animal

Eficiência

Alimentar

Exigência dos

Mercados

Gases Efeito

Estufa Otimização dos

custos de produção

Focos de interesse em melhorias

na produção de carne e leite

Vitaminas Minerais

Vitamina A

Vitamina D

Vitamina E

Vitamina B1

Niacina

Biotina

Beta Caroteno

Calcio

Fósforo

Sódio

Magnésio

Potássio

Enxofre

Cobalto

Cobre

Cromo

Iodo

Manganês

Selênio

Zinco

Fertilidade /

reprodução

Qualidade do

Produto Final

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Saúde

Animal

Eficiência

Alimentar

Exigência dos

Mercados

Gases Efeito

Estufa Otimização dos

custos de produção

P

Carboidratos Parede

Leveduras

Fósforo

Leveduras

Aminoácidos

Zn

Minerais Tortuga

Fertilidade /

reprodução

Qualidade do

Produto Final

Focos de interesse em melhorias na

produção de carne e leite

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Minerais Tortuga

Modo de ação Carbo-amino-fosfoquelatos

• Interações antagônicas mínimas;

• Melhor absorção pelos enterócitos;

• Maior biodisponibilidade;

• Melhor utilizado pelos micro-organismos ruminais;

• Menor risco de intoxicação.

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Minerais Tortuga

Caco-2-cell/ Transwell®-model-system

Tamassia & Greiner, 2010. MRI – Department of Food Technology and Bioprocess Engineering

Gut model

Biodisponibilidade do CQ Fe

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+ 25% de ferritina* produzida pelas células intestinais para

o CQ de ferro em relação ao sulfato de ferro

Caco-2-cell/ Transwell®-model-system

+25%

*Ferritina = proteína de reserva de ferro

1 molécula de ferritina = 4.000 átomos de ferro

A maior produção de ferritina, comprova a

maior absorção de ferro via CQ!

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Minerais Tortuga

Resposta em desempenho animal

• Desempenho zootécnico: GMD e LEITE;

• Conversão alimentar;

• Reprodução (machos e fêmeas);

• Resposta imune;

• Stress térmico;

• Qualidade do produto;

• Alterações fisiológicas e bioquímicas;

• Meio ambiente.

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Espécie Resultado Referência

Leite

Maior taxa concepção ao 1º serviço

Benedetti et al. (2003) Maior GMD

Menor retenção de anexos embrionários

Leite Menor retenção de placenta

Batista et al. (2009) Melhor qualidade do colostro

Leite Menor CCS Maior teor de PB no leite

Benedetti et al. (2003)

Leite Menor CCS Menor ocorrência de mastite

Cortinhas et al. (2010)

Leite Maior teor de gordura no leite Maior produção de LCG

Dell Valle et al. (2015)

Corte

Maior GMD vacas e bezerros

Sá Filho et al. (2005) Menor ocorrência de cistos ovarianos

Menor ocorrência de endometrite

Maior diâmetro folículo

Corte Maior GMD (Minerais Tortuga – cromo) Bizinoto et al. (2006); Polizel Neto

et al. (2009); Melo et. al (2008)

Confinamento Maior quantidade de protozoário

Saran Netto et al. (2009) Melhor CA início confinamento

Corte Maior GMD (Minerais Tortuga) Acedo et al. (2015)

Resultados Minerais Tortuga

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50

10,7

39,2

66,66

14,8 18,5

0

10

20

30

40

50

60

70

Excelente Boa Ruim

% v

acas

Qualidade do colostro

Minerais inorgânicos

Minerais Tortuga

Fonte: Batista et al., 2009

Tratamentos 30 dias pre parto

• Inorgânico - 69 vacas

• Minerais Tortuga (Se, Mn, Co,

Cu, e Zn) - 66 vacas

Resultados de Pesquisa

Qualidade de colostro de vacas suplementadas com minerais sob a

forma inorgânica ou Minerais Tortuga no período pré-parto.

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20,28

12,12

0

5

10

15

20

25

Com retención

Re

ten

çã

o d

e p

lac

en

ta (

%)

Minerais inorgânicos Minerais Tortuga

Fonte: Batista et al., 2009

Redução de 40,24%

Tratamentos 30 dias pré-parto

• Inorgânico - 69 vacas

• Minerais Tortuga (Se, Mn, Co,

Cu, e Zn) - 66 vacas

Resultados de Pesquisa

Ocorrência de retenção de placenta em vacas suplementadas com

minerais sob a forma inorgânica ou Minerais Tortuga no período pré-

parto.

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Utilização de minerais Tortuga em vacas mestiças leiteiras.

Tratamento Proteína Escore Peso

0 g 2,92 3,08 478,00

10 g 3,07 2,94 472,00

15 g 3,10 3,22 513,00

20 g 3,15 2,97 485,00

P < 0,05, r² = 88%.

Tratamentos: 60 dias pré-parto aos 120 dias

pós-parto

• 1) Inorgânico

• 2) Inorgânico + 10g Minerais Tortuga

• 3) Inorgânico + 15g Minerais Tortuga

• 4) Inorgânico + 20g Minerais Tortuga

Fonte: Benedeti et al., 2003

Resultados de Pesquisa

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237,37

55,58

0

50

100

150

200

250

Mil

Inorgânico

Minerais Tortuga

Fonte: Adaptado de Cortinhas et al., 2010

Redução de 76,6 %

Contagem de células somáticas (P = 0,056).

Tratamentos: 60 dias pré-parto aos 80

dias de lactação

• Inorgânico

• Minerais Tortuga (Se,Cu e Zn)

Resultados de Pesquisa

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Parâmetros de saúde da glândula mamária Fontes de Zn, Cu e Se

Minerais

Tortuga Inorgânica P¹

Novos casos de mastite subclínica 1 8 0,014

Número de vacas com CCS > 200,000 céls/ml 1 13 0,001

Casos clínicos 2 4 -

¹Análise estadística realizada pelo teste do qui-Quadrado.

Qualidade do leite e saúde da

glândula mamária

Fonte: Cortinhas et al., 2010

Resultados de Pesquisa

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21

Produção de leite

(kg/dia)

+1,57kg

* P <0,05

Minerais Tortuga

Inorgânicos

• Minerais Inorgânicos (sulfatos)

• Minerais Tortuga (Zn, Cu, Se, Cr,

Mn, Co, Fe e S)

Resultados de Pesquisa

Fonte: Adaptado de Del Valle et al., 2015

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1,37

1,03

1,29

0,98

0,7

0,8

0,9

1

1,1

1,2

1,3

1,4

Gordura Proteina

Composição

(kg/dia) *

4,18%

4,02%

3,14%

3,06%

Minerais Tortuga

Inorgânicos

Composição do leite

Resultados de Pesquisa

Fonte: Adaptado de Del Valle et al., 2015

* P <0,05

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Saúde

Animal

Eficiência

Alimentar

Exigência dos

Mercados

Gases Efeito

Estufa Otimização dos

custos de produção

Focos de interesse em melhorias

na produção de carne e leite

Fertilidade /

reprodução

Qualidade do

Produto Final

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Saúde

Animal

Eficiência

Alimentar

Exigência dos

Mercados

Gases Efeito

Estufa Otimização dos

custos de produção

Focos de interesse em melhorias na produção

de carne e leite

Energia

Proteína

Fibra

Melhorar utilização

dos alimentos

Enzimas - Amilase

Fertilidade /

reprodução

Qualidade do

Produto Final

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O amido é armazenado como grânulos nas células

do endosperma

– O amido é armazenado como grânulos

nas células do endosperma

– Cada célula do endosperma é cercada

por uma parede celular

O QUE É O AMIDO?

As células vermelhas mostram os grânulos

de amido aprisionados nas células do

endosperma de milho e as linhas azuis

indicam as paredes das células que

dificultam o acesso ao amido

1

1

2

Microscopy

2

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Os grânulos de amido, encapsulados no interior das células intactas do endosperma limitam o acesso à atividade das enzimas

Source: Peron et al., 2007, Br. Poult. Sci. 48, 370-380

Pontos brancos mostram o amido não digerido

Grânulos aprisionados nas células do endosperma

Imagem microscópica do amido não digerido na dieta de frangos de corte

(conteúdo ileal)

Grânulos de amido

encapsulados permanecem

não digeridos pelo animal,

o que limita a absorção de

energia

O QUE É O AMIDO?

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Modo de ação do RumiStar

RONOZYME® RumiStar é uma α-amylase pura.

Cataliza a hidrólise do amido no rúmen em oligossacarídeos.

RumiStar é estável e altamente ativa em condições ruminais (pH, temperatura).

Muda a digestão do amido, aumentando no rúmen e, consequentemente,

aumentando a atividade microbiana.

Bactérias fibrolíticastambém se beneficiam desta ação de quebra enzimática do

amido (cross-feeding), aumentando a degradação ruminal da fibra.

Resposta expressiva na produção de leite, especialmente no início da lactação,

resultando em efeito positivo no metabolismo energético.

RumiStar

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É preciso fornecer amilase exógena?

RumiStar

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A estrutura do amido das variedades de milho é variável

Endosperma duro/vítreo Endosperma macio

Hoseney, 1986, Principles of Cereal Science and Technology

Foto Internet

RumiStar

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Digestibilidade X Vitreosidade

Fonte: Correa et al., 2012

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20

22

24

26

28

30

32

34

Control 264 780 1320

To

tal S

CF

A (

mM

ol)

Floury corn

Dent corn

Flint corn

Flint: endosperma duro

Floury: endosperma mole

KNU/kg corn DM

Fonte: Klingerman et al, 2008

Desempenho do RumiStar™ sobre diferentes tipos de

grão - in vitro

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Rumistar aumenta a digestibilidade do amido

A amilase exógena faz a digestão do amido mais fácil or grânulos de amido

Mais energia pode ser obtida através da adição de uma amilase exógena à dieta

tornando os grânulos de amido mais fáceis de serem digeridos

In-vitro teste do efeito da amilase no amido de milho

Controle, Amido de milho Amido de milho com

tratamento de amilase

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RumiStar alterou o padrão de degradação ruminal da dieta

Dieta Alto Amido(30%) Dieta Baixo Amido (20%)

Controle Amilase Controle Amilase

Digestibilidade ruminal verdadeira, %

MO 64.6 67.3* 62.6 67.9*

Digestibilidade ruminal aparente, %

FDN 44.6 47.5 48.8 49.9

Amido 73.9 81.1** 76.2 82.0**

RumiStar aumentou significativamente a digestibilidade do amido e da

matéria orgânica.

Fonte: Nozière et al, 2012

* P <0.01

** P <0.03

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Desempenho produtivo

RumiStar melhora significativamente a digestibilidade da MS, MO e FDN

em dietas baseadas em silagem de milho como volumoso. Isso resultou

em aumento do leite corrigido para gordura em 3,6 kg e melhor

eficiência na produção de leite.

RumiStar

Fonte: Klingerman et al, 2008

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Melhora na eficiência alimentar

RumiStarTM melhorou eficiência alimentar em 26%

* P <0,10

Fonte: Klingerman et al, 2008

RumiStar

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Aumento na produção de leite corrigido para gordura

Vacas no início da

lactação Controle RumiStar Diferença

Produção de leite

(kg/d) 42.9a 46.0b + 3.1

Gordura (%) 3.17a 3.35b + 0.18

LCG (kg) 37.1A 41.5B + 4.4

a, b: P< 0,01

A, B: P< 0,001

ROI: 4.4 kg *0.35 € - 0.125€/0.125€

ROI >10:1

RumiStar

Fonte: Masoero et al., 2011

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Melhora a produção durante toda a lactação

RumiStar

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Níveis de glicose sanguínea

Source: Bach 2012

RumiStar

Blood glucose concentrations were significantly greater in RumiStar than in Control cows. This

was mainly due to a relatively large difference between values observed 7 d after calving. The

increase of blood glucose could indicate an amylase activity also in the small intestine.

NEFA, ß-OH-butyrate and insulin concentrations in blood were not affected by RumiStar.

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Revisões ou experimentação:

Efeitos positivos no uso de enzimas exógenas na dieta de

ruminantes (Krause et al., 2003; Beauchemin et al., 2004;

Beauchemin and Holtshausen, 2011; Tricarico et al., 2008)

Inconsistência nos resultados publicados: variações

diferentes dietas, métodos de aplicação da enzima,

estabilidade e atividade das enzimas (Meale et al., 2014,

McAllister et al., 1999, Beauchemin et al., 1997)

O uso de enzima na nutrição de ruminantes

Diversos estudos...

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Compilação de 21 experimentos revisados em 19 artigos publicados

Gerando um total de 77 comparações de tratamentos

(Beachemin et al., 1995; McAllister et al., 1999; Krueger et al., 2014; Gomez-Vasquez et al., 2003; Salem et

al., 2013; Miller et al., 2008; Titi and Tabbaa, 2004; Gado et al., 2009; Beauchemin et al., 1999; Gencoglu

et al., 2010; Klingerman et al., 2009; Weiss et al., 2011; Arriola et al., 2011; Yang et al., 2000; Yang et al.,

1999; Rode et al., 1999; Lewis et al., 1999; Bowman et al., 2002; Noizere et al., 2014)

Dados de digestibilidade: bovinos de corte e leite

Fonte: Acedo et al., 2015

Meta-análise: Enzimas

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Meta-análise: efeito da amilase sob o DFDN

da dieta de ruminantes

46.15b 48.43a

0,0

10,0

20,0

30,0

40,0

50,0

60,0

Controle Enzima

Amilolítica

Dig

est

ibilid

ade d

a F

DN

(%

)

P = 0.0372

5,0%

Fonte: Acedo et al., 2015

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Meta-análise: efeito da amilase sob o DMS

da dieta de ruminantes

68.83b 70.09a

60,0

62,0

64,0

66,0

68,0

70,0

72,0

74,0

76,0

78,0

80,0

Controle Enzima

Amilolítica

Dig

est

ibilid

ade d

a M

S (

%)

P = 0.0062

3,0%

Fonte: Acedo et al., 2015

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Publicados entre 1995 e 2015:

Bovinos de corte – 20 experimentos

Bovinos de leite – 21 experimentos

Divididos pelo tipo de enzima utilizada:

Amilolítica ou Fibrolíticas (Xilanases, endoglucanases, celulases

e hemicelulases)

Interação testada:

Tratamento - Controle vs Enzima

Doses: “0” como “controle” e a média das doses “enzima”

Os estudos foram considerados efeitos aleatórios no modelo e a

interação Tratamento*Enzima foi considerada efeito fixo.

EPM - foi considerado na análise e incluso no “steatment weight”,

PROC Mixed SAS

Meta-análise: Enzimas

St. Pierre (2001)

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Bovinos de Leite

Análise descritiva dos dados compilados para realização da meta-análise

SD= desvio padrão, PC=peso corporal, 1= amido e FDN das dietas

PC

(kg)

Amido1

(%)

FDN1

(%)

CMS

(kg/d)

Prod. leite

(kg/d)

Gord.

(%)

Prot.

(%)

Lactose

(%)

Média 621 26,6 32,7 22,4 35,1 3,67 3,14 4,69

SD 76 4,8 3,4 4,8 8,8 0,35 0,23 0,48

Máx. 759 36,5 44,0 29,8 52,1 4,78 3,68 5,19

Mín. 439 19,7 29,1 10,3 12,8 2,98 2,73 2,00

Fonte: Acedo et al., 2015

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Bovinos de Leite – Produção de Leite

39,2b 39,7a

30,5b 31,4a

0,0

5,0

10,0

15,0

20,0

25,0

30,0

35,0

40,0

45,0

50,0

Controle Enzima Controle Enzima

Amilolítica Fibrolítica

Pro

dução d

e leit

e (

kg/d

) P = 0,0384

Efeito da adição de enzima exógena sobre a produção de leite

0,5 kg/dia

0,9 kg/dia

Fonte: Acedo et al., 2015

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Bovinos de Leite – Composição do leite

Gráficos 9 e 10 - Efeito da adição de enzima exógena sobre o teor de gordura (9) e

proteína (10)

3,61 3,64 3,67 3,67

0,00,51,01,52,02,53,03,54,04,55,0

Controle Enzima Controle Enzima

Amilolítica Fibrolítica

Gord

ura

no leit

e (

%) P = 0,9400

3,00 3.03 3,21 3,23

0,00,51,01,52,02,53,03,54,04,55,0

Controle Enzima Controle Enzima

Amilolítica Fibrolítica

Pro

teín

a n

o leit

e (

%) P = 0,0628

Não houve efeitos significativos na

composição do leite (gordura,

P=0,9400; e proteína, P=0,0628)

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Bovinos de Leite – Consumo de MS

Gráfico 7 - Efeito da adição de enzima exógena sobre o consumo de

MS.

23,5 23,2

20,7 21,3

0,0

5,0

10,0

15,0

20,0

25,0

30,0

Controle Enzima Controle Enzima

Amilolítica Fibrolítica

Consu

mo d

e M

S (

kg/d

)

P = 0,4148

Não foi afetado pela uso de enzimas

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Andreazzi et al. (2013)

28 vacas (171 ±80 DEL)

Tramentos:

• Controle vs Ronozyme RumiStarTM

Milho moído fino (semidentado ou tipo duro)

0,5 g de enzima/kg de MS (300 KNU/kg de MS)

Experimentos de desempenho realizados no Brasil

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50

Dietas

Andreazzi et al., 2013

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Desempenho produtivo – bovinos de leite

Parâmetro Controle Amilase* P value EPM

CMS, kg/dia 20,7 19,7 <0,01 0,16

Leite, kg/dia 32,3 33,0 0,02 0,18

Gordura, kg/dia 1,11 1,10 0,66 0,01

Proteína,kg/dia 1,01 1,02 0,35 0,01

Lactose, kg/dia 1,49 1,53 0,01 0,01

Peso vivo, kg 647 645 0,90 11,4

ECC, 1 a 5 3,45 3,41 0,44 0,03

Leite/CMS 1,58 1,70 <0,01 0,012

LCE/CMS 1,52 1,63 <0,01 0,013

Tabela 7 – Desempenho e consumo de vacas leiteiras suplementadas ou não com

amilase.

EPM = Erro padrão da média, CMS = consumo de matéria seca. LCE = leite corrigido para energia. ECC = escore de

condição corporal.*Ronozyme RumiStar™, DSM Produtos Nutricionais Brasil S.A.

Andreazzi et al., 2013

0,7 kg

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Parâmetros plasmáticos – bovinos de leite

Parâmetro Controle Enzima EPM P value

NUP, mg/dL 14,7 13,6 0,36 0,05

Nitrogênio uréico no plasma (NUP) 12 horas após alimentação de vacas

leiteiras com ou sem amilase exógena nas dietas.

Concentração de nitrogênio uréico no plasma (NUP) de

vacas leiteiras com ou sem amilase exógena nas dietas.

Andreazzi et al., 2013

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Parâmetros plasmáticos– bovinos de leite

Parâmetro Controle Enzima EPM P value

Glicose, mg/dL 59,3 68,6 3,16 0,07

Glicose plasmática 12 horas após alimentação de vacas leiteiras com ou

sem amilase exógena nas dietas.

Concentração de glicose no plasma de vacas

leiteiras com ou sem amilase exógena nas dietas.

Andreazzi et al., 2013

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Os menores valores de NUP, maiores de glicose plasmática

e as alterações no comportamento ingestivo das vacas que

receberam amilase: sugerem o aumento de fermentação da

matéria orgânica no rúmen.

Maior teor de glicose plasmática, este é resultado de uma

possível maior atividade dos microrganismos ruminais e

consequente maior produção ruminal de AGV.

Mais glicose - maior lactose - maior

produção de leite

Desempenho produtivo – bovinos de leite

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Programa Internacional

Qualidade do Leite Começa Aqui!

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propriedades inscritas

vacas avaliadas

propriedades premiadas

2013 2014 2015

430 549 850

2012 2013 2014

15.000 30.000 50.000

2013 2014 2015

22 27 27

2013 2014 2015

30.000 50.000 58.000

O Programa

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2013

Proteína (%)

3,20

Gordura (%)

3,72

CCS (x1000/ml)

343

2014

Proteína (%)

3,23

Gordura (%)

3,66

CCS (x1000/ml)

373

2015

Proteína (%)

3,4

Gordura (%)

3,9

CCS (x1000/ml)

390

Média geral dos resultados

O Programa

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A ciência tem permitido o desenvolvimento

de tecnologias destinadas a aumentar a

produtividade com otimização do uso dos

recursos produção.

Desta forma, estas tecnologias têm

proporcionado, ao longo dos anos, aumento

na produção de alimentos de forma

sustentável.

Considerações finais

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