ESCOLA SECUNDÁRIA AUGUSTO GOMES, MATOSINHOS

FORMAÇÃO DE ADULTOS | CURSO EFA DUPLA CERTIFICAÇÃO | 2013-14

Curso Técnico de Controlo de Qualidade AlimentarFormação tecnológica Módulo 25h – Análise microbiológica das águasFormadora – Sofia Pimenta

Visita de estudo

Formando: ______________________ Turma EFA J

Local: IAREN - Instituto da Água da Região Norte, Matosinhos

Preparação da visita

Organização:

Tema: Análise microbiológica das águas

Data: 24 de outubroHorário: 9.30 às 11.30hIntervenientes: Formandos EFAJ, Formadora Sofia PimentaTécnico da entidade: Diretora Fátima Alpendurada; Técnica Marta TeixeiraInstituição a visitar: IAREN - Instituto da Água da Região Norte. Rua Doutor Eduardo Torres 229, 4450 Matosinhos.

Objetivos:1-Conhecer as instalações, material e equipamento do laboratório ligado à análise microbiológica das águas.2- Conhecer as técnicas usadas na análise microbiológica das águas.

Atividades a desenvolver:1- Manipulação de equipamentos e técnicas usadas na análise microbiológica das águas.2- Levantamento e registo da atividade.3- Relatório reflexivo da visita pedagógica

Material apoio:Bata, bloco de notas, lápis, máquina fotográfica.

Realização da visita

Atividades realizadas (apontamentos):

Após a receção e apresentação da Técnica Drª. Marta Teixeira, foi-nos pedido que nos dividíssemos em dois grupos para prosseguimos a visita. Cumprindo o protocolo do Laboratório de Qualidade Alimentar e Segurança, equipamo-nos todos com bata e o grupo que integrei deu início à visita.

- Sala de receção de amostras e registo informático, onde se recebem amostras de água de diversas origens, lamas, solos e sedimentos.

De seguida dirigimo-nos ao Laboratório de Microbiologia, que se encontra dividido em várias salas.

1ª Sala – sala de sementeiras – é constituída por três bancadas:

1ª bancada - efetua-se a análise das águas limpas através da técnica das membranas filtrantes. Procedimentos:- No início esteriliza-se a bancada e as mãos com álcool a 70%, as rampas são esterilizados com álcool a 96%, depois queima-se um pouco de álcool em cada rampa e termina-se passando água esterilizada.- Ao iniciar o processo acendem-se todos os bicos de Busen de forma a garantir a assepsia do local.- Esta bancada tem uma máquina dispensadora de membranas que permite a garantia de assepsia e a rapidez de trabalho.- Coloca-se com uma pinça uma membrana em cada rampa e verte-se a amostra de água que se vai analisar. Deixa-se terminar a filtração e leva-se a membrana para inoculação na segunda bancada.- Terminada a filtração a bancada possui um pequeno motor que retira toda a água excedentária para um contentor.

2ª bancada - procede-se à incorporação (inoculação e a diluições em meios de cultura).

Foi-nos explicado que se prepara também um meio específico para a pesquisa do número mais provável (contador de colónias. Colocando 100 ml de amostra de água num frasco com esta marca, à qual se adiciona 1 pó (meio de cultura), passa-se pelo selador e leva-se a incubar em estufa.

3ª bancada - analisa-se águas sujas e a metodologia é a mesma que se segue na primeira bancada.

2ª Sala – Sala de incubação

Neste local encontram-se quatro estufas a diversas temperaturas, consoante as exigências de crescimento dos microrganismos em estudo.Para os coliformes totais a incubação é de 37º C por 24h e para os coliformes fecais de 44ºC entre 24h e 48h.Observamos algumas placas que estavam em incubação e verificamos quais os meios de cultura específicos usados, o teste enterolert para os enterococos (método enzimático que usa a tecnologia de substrato definido para a identificação de enterococos) e o teste colilert para E.coli (método enzimático que usa a tecnologia de substrato definido para a identificação de bactérias Escherichia Coli).

Visualizamos uma cultura de E.coli em Agar laurel sulfato (amarelo) para um controlo positivo. Na presença de E.coli (lactose positiva) dá-se a fermentação do açúcar e acidificação do meio (pH ácido). Observamos ainda um saco anaeróbio, que continha um mecanismo gerador de anaerobiose (retira o oxigénio) específico para a cultura de microrganismos anaeróbicos estritos.Nesta sala há um frigorífico para guardar culturas contaminadas que aguardam novos testes e um painel de medição de pressão atmosférica (a variação de pressão atmosférica nas salas do laboratório é utilizada para manter as condições de assepsia, para que não ocorra contaminação pela atmosfera, mantem-se alta pressão nas salas limpas e baixa nas salas sujas).

3ª Sala – Sala de Leitura e Repicagem

- Nesta sala faz-se a contagem de colónias e a confirmação positiva/ negativa de microrganismos.- A contagem de colónias faz-se através da observação na lupa eletrónica da placa. Com um marcador pica-se cada colónia para efetuar a contagem. Se o teste for positivo (ou seja o número de colónias for relevante), a amostra segue para repicagem em meio de cultura desidratado. É colocado numa galeria de quadrados grandes e pequenos, que contêm um indicador específico à fermentação do microrganismo. O resultado é comparado com uma tabela que determina os valores do critério positivo, se for o caso, coloca-se a galeria numa câmara de luz florescente que possibilita visualizar e contar quantos dos quadrados grandes e pequenos apresentam desenvolvimento de colónias. Este resultado é comparado com uma tabela (tabela do número mais provável, técnica idealizada por Mc Crady onde se faz a estimativa da densidade média de microrganismos na amostra) que permite estabelecer se está ou não dentro dos parâmetros legais.

- A visualização das galerias fluorescentes (cultura enterococos, cultura E. coli) realiza-se na câmara de raios UV (visualização de poços fluorescentes sob luz UV, corresponde ao resultado positivo).

- Há sempre um formulário que deve ser preenchido durante todas as operações de análise desde a receção da amostra até ao resultado final, pela necessidade de controlar a rastreabilidade dos procedimentos, o controlo e a fiabilidade dos processos e apresentação dos resultados finais.

4ª Sala – Sala de preparação de meios de cultura

- Nesta sala preparam-se meios de cultura com controlo de pH, meios de cultura que vão à autoclave para estilizar e são guardados em arca frigorífica para posterior utilização.

5ª Sala – Sala de estilização e armazenamento

-Nesta sala há autoclaves, uma pia de lavagem, um aparelho de produção de água destilada e um frigorífico onde se armazenam os meios de cultura, oscilando entre 2ºC a 8ºC, garantindo uma tª de 5ºC.

- Neste local procede-se à limpeza e esterilização do material utilizado. Todo o material é descontaminado em autoclave a 121ºC durante 30 minutos, depois os plásticos seguem para o lixo comum e a vidraria vai para lavagem sendo no fim passada por água destilada.

O laboratório funciona como um ciclo de «marcha à frente» ou seja, caminhamos sempre da sala mais limpa para a mais suja, assim como as temperaturas a que habitualmente costumam estar as salas, segundo a técnica, nas salas mais limpas a temperatura costuma estar mais alta, nas mais sujas a temperatura costuma estar mais baixa.

Suporte de registo (fotos):Pasta em anexo

Novas aprendizagens:Nesta visita tive a oportunidade de consolidar muitos dos conhecimentos que até agora adquiri, permitiu ainda conhecer as técnicas usadas na análise microbiológica das águas, contactar com as instalações, material e equipamento do laboratório.

Após a visita

A visita correspondeu às expectativas:Excedeu as nossas melhores expectativas.

Aspetos positivos:A visita foi muito didática, possibilitou-nos o conhecimento real de um laboratório de análise de águas e de adquirir mais conhecimentos para o nosso percurso como futuros técnicos de controlo de qualidade alimentar.

Aspetos negativos:Divisão em grupos, retirando tempo de explicação e interação.