Gêneros bacterianos, suas espécies e identificação

Streptococcus sp.

Streptococcus sp

HISTÓRICO:

Os estreptococos patogênicos foram descobertos por BILLROTH em 1874;

Tecidos de um caso de erisipela;

O nome genérico dos estreptococos foi utilizado, pela primeira vez, por ROSENBACH (1884);

Descreveu uma bactéria esférica que crescia em cadeias e que fora isolado, de lesões supurativas no Homem.

Características

Os estreptococos são Gram +;

Imóveis (poucas exceções);

Não formam esporos;

Forma esférica;

Dispõe-se em cadeias ou aos pares

Características

Esfregaços em meios sólidos formam cadeias curtas ou aos pares;

Em caldo cadeias longas ou agrupadas;

Algumas espécies possuem cápsula na fase lag ou estacionária;

Características

São aeróbios;

Anaeróbios facultativos;

Catalase negativa;

Oxidase negativa;

Fermentam açúcares;

Habitat

Distribuídos na natureza como comensais (animais);

Causam uma série de doenças no Homem e nos animais;

Saprófitos leite e produtos lácteos;

Habitat

Espécies patogênicas ou não patogênicas presentes na pele;

Mucosas do trato digestivo;

Genital e respiratório;

Pode causar doenças;

Classificação

SHERMAN (1937);

Dividiu os estreptococos piogênicos, viridans, lacti e enterococci;

Sorologia que é de importância na identificação dos estreptococos;

Substância C antigenicamente diferente de um grupo para outro;

Classificação

REBECCA LANCEFIELD (1933);

Teste de precipitação utilizaram estas diferenças antigênicas estabelecer 6

grupos;

A até E e N;

Outros grupos foram incorporados

Importância dos estreptococos

As amostras de estreptococos são também classificadas, conforme os tipos de hemólise:

1) alfa: hemólise parcial de cor esverdeada;

2) beta: uma zona descorada devido à hemólise total;

3) gama: esta hemólise não é detectável;

Tipos de hemólises

Características culturais e bioquímicas

Os estreptococos exigentes em relação as suas necessidades nutritivas;

Não crescem meios com extrato de carne;

Meios enriquecido com sangue;

Os estreptococos patogênicos cresce bem, em meio quimicamente definido;

Características culturais e bioquímicas

Todas as cepas de estreptococos colônias translúcidas, pequenas e delicadas meio sólido;

A superfície do crescimento é lisa, brilhante e com contorno circular;

Cepas que produzem cadeias longas produzem sedimento no fundo do tubo;

Amostras capsuladas ou com cadeias curtas permanecem mais tempo em suspensão;

Características culturais e bioquímicas

Todos os estreptococos crescem bem no leite;

Maioria produz ácido láctico neste substrato;

Cresce bem em aerobiose e anaerobiose;

Poucas cepas em anaerobiose;

Isolados AS e AChoc;

Fermentam açúcares lactato;

Catalase

Positiva Negativa

Estreptococos do grupo A (S. pyogenes)

Faringite; Impetigo; Septicemia; Beta-hemólise; AS; Sensibilidade à

bacitracina em CO2; Outras patologias.

Estreptococos do grupo B (S. agalactiae)

Meningite;

Septicemia;

Beta-hemólise;

Bacitracina resistente;

Flora vaginal;

Estreptococos do grupo B (S. pneumoniae)

Pneumococo; Alfa-hemolíticos; Pneumonia; Meningite; Endocardite; AChoc; Optoquina; Anaerobiose; Outras patologias.

Estreptococos do grupo D (Enterococcus)

Oportunistas; Infecções urinárias; Septicemias; AS; Infecções hospitalares; Alfa-hemolíticos; Bile esculina e NaCl

6,5% positiva;

Bile esculina e NaCl 6,5%

Estreptococos do grupo viridans (S. mutans)

Dentes; Abcessos dentais; Endocardites; Cárie;

Staphylococcus sp.

Características

CGP;

Normalmente em forma de cacho de uva;

Imóveis;

Sem esporos;

33 espécies;

11 infectam o homem;

Características

Patogênica a S. aureus;

10 mais conhecidas são : S.epidermidis e S. saprophyticus;

Eram sensíveis à penicilina;

Vancomicina e novobiocina mais usado;

Meio ASM;

Patologias

Septicemia; Furúnculo; Tersol; Impetigo; Infecções da mucosa : otites, amidalites,

conjuntivites, rinites; Osteomielite e outras;

S. aureus

Catalase positiva;

Coagulase positiva;

Manitol positivo;

Novobiocina sensível;

Coagulase positiva

S. aureus

DNase;

Detecta a degradação do DNA;

Enzima desoxirribonuclease;

S. epidermidis

Catalase positiva;

Coagulase negativa;

Comensal da pele;

Infecções hospitalares, através de catéteres, sondas (material de plástico);

Manitol negativo;

Novobiocina sensível;

Comparação dos Estafilococos de Seres Humanos

Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidisCoagulase positivo Coagulase negativo

Fermentador de manitol Não fermentador de manitolDNAse-positivo DNAse-negativoPatogênico Não patogênico

S. saprophyticus

Catalase positiva;

Coagulase negativa;

Manitol negativo;

Eritromicina, tetraciclina, clindamicina e vancomicina;

Novobiocina resistente;

Antibiograma - Novobiocina

S. saprophyticus S. epidermidis

Antibiograma - Novobiocina

S. saprophyticus S. epidermidis

Diferenciando...

Stafilo;

Strepto;

Haemophilus influenza

Características

Trato respiratório;

Somente em seres humanos;

Meningite e sepse em crianças;

Otite;

Características

BGN ou cocobacilo;

Capsulado;

Cepas não capsuladas causam doenças;

Invadem o sg pelo sistema respiratório;

Cultura

Adição de fator X heme;

Adição de fator V NAD;

Líquido espinhal;

Diagnóstico laboratorial

Ágar chocolate + fatores;

Testes bioquímicos;

Teste de aglutinação do látex;

características

Podem causar seqüelas neurológicas;

Matam se não for combatida;

Rifampicina e outros antibióticos;

Legionella pneumophila

Características

Responsável por epidemias;

Aerossóis sistemas de climatização;

Não é facilmente corado pelo Gram;

Coloração de prata;

Imunofluorescência direta;

Características

Pneumonia;

BGN;

Se coram fracamente pelo Gram;

Necessário aumentar o tempo da safranina;

Características

Biópsia de pulmão corar com hematoxilina-eosina;

Impregnação com prata;

Presença nos ralos, torneiras e chuveiros e ar condicionados;

Diagnóstico laboratorial

Elisa indireto;

Ágar-carvão-levedura escarro e sangue;

Dependente da presença de muitas bactérias;

Características

Meio de CYE (Cisteína,Yeast, Extract);

Incubação a 35ºC 2,5 % de CO2 durante 3 a 7 dias;

Colônias S;

Características

Acastanhadas;

Fluorescentes ao ultravioleta;

Pequenos bacilos móveis aeróbios estritos catalase positiva;

Plate ágar com ultravioleta

Bordetella pertussis

características

Gram negativo;

Cocobacilo;

Encapsulado;

Somente seres humanos;

características

Coqueluche ou tosse compulsiva;

Transmitido pelo ar;

Tosse intensa;

Não invasiva;

características

Atividade dos cílios reduzida;

Morte celular;

Altamente contagiosa;

Ocorre mais em crianças;

Diagnóstico laboratorial

Coleta de nasofaringe;

Swab;

Durante estágio paroxismal;

Meio de cultura 20 – 30% sg;

Bordet-Gengou;

Diagnóstico laboratorial

Meio com muito sangue inativa inibidores do ágar;

Testes de aglutinação;

PCR altamente específico;

Características

Toxina danifica mucosa respiratória;

Terapia com oxigênio;

Sucção de muco;

Eritromicina pouca eficácia;

Vacina com antígeno purificado;

Pseudomonas aeruginosa

Características

Otite média;

Sepse, pneumonia e infecções urinárias;

BGN;

Aeróbios estritos;

Não fermenta glicose;

Características

Oxidase positiva;

Cresce em sabão;

Cresce em água;

Resistente a cloro;

Características

Cora o ferimento de azul;

Em queimaduras cora de verde amarelado;

Verde azulado ágar;

Cheiro de uva;

Diagnóstico laboratorial

Colônias incolores;

Não fermenta lactose;

MacConkey e EMB;

Em TSI brilho metálico;

Testes bioquímicos;

Outras características

Resistente a muitos antibióticos;

Penicilina + aminoglicosídeos;

Podem causar infecções em todo corpo;

Corynebacterium diphtheriae

Características

Afeta o coração (miocardites);

Rins;

Fígado;

Sistema nervoso;

Características

BGP finos;

Ligeiramente encurvados;

Não esporolados;

Infecções oportunista;

Características

Infecção do trato respiratório superior;

Ar;

Infecção pele lesada;

Miocardite;

Diagnóstico laboratorial

Meio de Loeffler;

Swab coleta da garganta;

Catalase positiva;

Demostração da toxina;

AS;

Azul de metileno observa grânulos;

Fusobacterium sp.

Características

São anaeróbios;

Encontrados na cavidade oral, trato genital intestinal e respiratório superior;

Identificação por biologia molecular;

Causa grandes infecções abscessose bacteremias;

Treponema pallidum

Características

Exame a fresco em fundo escuro;

Sífilis;

Não foi cultivado;

Outros da flora foram cultivados;

Características

Produzem anticorpos específicos;

Testes de aglutinação;

Contato com lesão ou mucosas;

Mãe filho no parto;

Neisseria meningitidis

Características

Cocos gram negativos;

Causam meningite;

Semelhantes a grãos de feijão;

Possui cápsula ação antifagocítica;

Características

Homens são os únicos hospedeiros;

Contaminação pelo ar;

Cultura de sangue e líquor;

Diplococos que fermentam maltose e glicose;

Características

AChoc suplementado com vitaminas e antibióticos;

Incubação a 35ºC 5-10% de CO2;

Colônias acinzentadas;

Características

Bordas irregulares;

Oxidase e catalase positivas;

Não cresce em AS;

Características

São inibidos por metais e ácidos graxos;

Cônias pequenas;

A cor pode variar de cinza a amarelo;

N. meningitidis A e C capsuladas apresentam mucóides.

Características

Tolerante a variações de temperatura;

Acima de 37oC ou abaixo de 35oC;

A amostra não pode ser refrigerada;

Recomenda-se ágar chocolate enriquecido com suplemento com l-cisteína, NAD e vitaminas;

Cultura

Algumas cepas crescem em ágar sangue;

Incubar em jarra bola de algodão e água estéril) e CO2;

Semear em meio rico e em meio seletivo Thayer Martin modificado (TMM) ou meio New York City (NYC);

Cultura

Recomenda-se para transporte ambientes com CO2;

Meios seletivos inibem crescimento de enterobactérias;

Diagnóstico

BACTERIOSCOPIA;

LCR, biópsia, etc sempre reservar material para bacterioscopia;

Fazendo o esfregaço no momento da coleta;

Colhendo dois swabs;

Diagnóstico

Swab é único, no caso das Neisserias dá-se preferência à semeadura imediata;

Posteriormente fazer toda bacterioscopia;

http://srs.dl.ac.uk/Annual_Reports/AnRep99_00/Meningitis_Figure_1.jpg

Neisseria gonorrhoeae

Cultura

Semeadura imediata no meio de transporte ou meio de TMm;

Atmosfera de CO2 em torno de 3% a 7%;

Teor de umidade em cerca de 90%;

Incubação à temperatura de 35,5º a 36,5ºC;

Cultura

Suplemento VX;

Colônias são normalmente pequenas, brilhantes, viscosas e extremamente aderidas ao meio;

Difíceis de serem retiradas do meio;

Cultura

Às vezes colônias grandes, com aspecto e tonalidade acastanhada;

Cepas não possuem pili;

São facilmente removidas do meio;

Identificação

Após 24 a 48 horas de incubação verifique o crescimento;

Selecione uma colônia suspeita;

Transferir para a lâmina de vidro;

Corar;

Identificação

Pegar uma colônia uma gota de peróxido de hidrogênio;

Reação de catalase positiva;

Identificação oxidase

Solução aquosa a 1% de tetrametil-p-fenilenodiamina;

Solução aquosa a 1,5% de dimetil-p-fenilenodiamina;

Colocar o reativo sobre a colônia;

Deve ser preparado no momento do uso;

Fitas reativas de oxidase;

Identificação oxidase

Cor rosa ou púrpura 10 a 20 segundos;

Oxidase positiva utilizando o dimetil-p-fenilenodiamina;

Violeta tetrametil-p-fenilenodiamina;

Negativo reagente no papel de filtro permanecerá inalterada;

Existem fitas de oxidase, prontas para uso;

Moraxella catharralis

Características

Cocobacilos;

Gram negativos;

Flora normal;

Sinusite e otite média;

Características

Transmissão pelo ar;

Encontrada em seres humanos somente;

Produz Beta lactamases;

Oxidase positiva;

Características

Tolera temperatura ambiente;

Cresce bem em ágar sangue;

Pode usar meio não seletivo

Prova de carboidratos negativa

http://www.infek.lu.se/bakt/english/picture5.htm

Bacteroides fragilis

Características

Anaeróbia;

Cocobacilo gram negativo;

Menor quantidade na microbiota intestinal = 2%;

Infecções intra-abdominais, abcsessos e bacterimias;

Diagnóstico laboratorial

Transporte e semeadura devem ser rápidos;

Ágar sangue suplementado com hemina e menadione = agar Bacterioides;

Incubação de 48 horas;

Diagnóstico laboratorial

Indol negativo;

Catalase positiva;

Fermental arabinose e ramnose;

Teste especifico e confiavel = PCR;

Peptococcus sp.

Características

Cocos gram positivos anaeróbios;

Microbiota humana;

Pele, orofaringe, intestino, etc;

São comuns na saliva com ou sem infecção;

Pode causar aborto e infecções puerperais;

Características

Infecções de trato genital feminino;

Amostra de membrana placentária;

Outras patologias encontramos essa bactéria;

Otite, sinusite e abscessos;

Peptococcus e Bacteroides

Mycobacterium tuberculosis

Diagnóstico

Colheta

Repetidas durante 3 dias;

Tratamento da amostra

Fluidificação e descontaminação;

Diagnóstico

Exame direto

Coloração Ziehl-Neelson (fucsina fenicada a quente);

Pesquisa de Bacilos Álcool Ácido Resistentes (BAAR);

Diagnóstico

Cultura

Meio de Loewenstein-Jensen;

Incubação a 37ºC durante 3 a 10 semanas;

Colônias rugosas (em couve-flor) de cor mate;

Mycobacterium leprae

Características

Bastonentes retos ou curvos; Crescimento lento 2 dias até 8 semanas; Temperatura de 30 a 40 graus; Hanseníase;

Diagnóstico laboratorial

Exame bacterioscópico; Raspada de lesões ou mucosas; Líquido de exsudato Ziehl-Neelsen; Reação de Mitsuda bacilos reação

intradérmica; Leitura após 30 dias;

Actinomyces israelii

Características

Semelhantes a hifas; Filamentos ramificados; Gram positivas; Algumas álcool-ácido resistentes; Flora bocal;

Características

Lesão de face e pescoço; Actinomicose pélvica mulheres com DIU; Não transmissível;

Diagnóstico laboratorial

Microscopia; Cultivo de secreção em anaerobiose; Identificados por imunoflorecsência;

Nocardia asteroides

Características

Aeróbias encontradas no ambiente solo; Infecções pulmonares; Fracamente álcool-ácido resistente; Usar solução de ácido clorídrico; Se usar ácido normal não se cora;

Diagnóstico laboratorial

Observação de bastonetes ramificados gram positivos ou álcool-ácido resistente;

Cultivar em anaerobiose meio bacteriológico poucos dia;

Gardnerella spp.

Características

Pequenos bacilos ou coco-bacilos irregulares;

Gram variáveis;

Coram irregularmente pela violeta;

Principal espécie é a Gardnerella vaginalis;

Microbiota vaginal 70% das mulheres em idade reprodutiva;

Características

Vaginose bacteriana substitui Lactobacillus de Doderlein;

Gardnerella parto prematuro;

Febre puerperal e pós-aborto;

Pode causar sepse em recém-nascidos;

Rararamente infecção urinária em adultos;

Características

AS;

Sangue de coellho beta-hemólise;

Sangue de carneiro sem hemólise;

Visualizadas exame citológico;

Características

Gram “clue cells” células epiteliais abarrotadas de pequenos bacilos Gram lábeis;

Imóvel e sem cápsula;

Anaeróbio facultativo;

Catalase e oxidase negativas;

Diagnóstico

Bacterioscopia a fresco;

Coloração de gram;