Finalidade . Sistema enzimático para a determinação da glicose nosangue, líquor e líquidos ascítico, pleural e sinovial por método cinético.

Uso profissional.

[Somente para uso diagnóstico in vitro.]

Princípio . A glicose oxidase catalisa a oxidação da glicose de acordocom a seguinte reação:

GODGlicose + O + H O Ácido Glucônico + H O2 2 2 2

O peróxido de hidrogênio formado reage com 4-aminoantipirina e fenol,sob ação catalisadora da peroxidase, através de uma reação oxidativa deacoplamento formando uma antipirilquinonimina vermelha cujaintensidade de cor é proporcional à concentração da glicose na amostra.

POD2H O + 4-Aminoantipirina + fenol Antipirilquinonimina + 4H O2 2 2

Características do sistema . O reagente é pronto para uso eutiliza metodologia enzimática de grande especificidade analítica, desimples e fácil aplicação no laboratório clínico.

A Labtest desenvolveu o sistema Glicose GOD otimizando asconcentrações de enzimas do reagente visando fornecer o melhordesempenho analítico e maior estabilidade.

Os dados de repetitividade e reprodutibilidade obtidos com o sistemaGlicose GOD demonstram que o método é capaz de fornecer resultadosque superam as metas de desempenho para as medidas de glicoseestabelecidas pela (ADA). A comparaçãoAmerican Diabetes Association

entre as imprecisões encontradas na repetitividade e na reprodutibilidadedemonstra que o sistema de medição é bastante robusto nas regiões deconcentrações significativas para uso clínico, indicando que tem umdesempenho muito estável no dia a dia.

O reagente foi desenvolvido para utilização em sistemas automáticos. Adeterminação da glicose é realizada por método cinético, obtendo-seresultados em um curto espaço de tempo, que proporciona maisagilidade para determinados analisadores bioquímicos.

O método é facilmente aplicável em analisadores automáticos capazesde medir com exatidão a absorbância entre 490 e 520 nm.

Metodologia . GOD-Trinder.

Reagentes

1. - Reagente 1 - Armazenar entre 2 - 8 ºC.

Contém tampão fosfato 30 mmol/L, pH 7,5; fenol 1 mmol/L; glicoseoxidase 1000 U/L; peroxidase 80 U/L; 4-aminoantipirina 290 mol/L;� � �

azida sódica 7,5 mmol/L e surfactantes.

O reagente não aberto, quando armazenado nas condições indicadas, éestável até a data de expiração impressa no rótulo. Durante o manuseio, oreagente está sujeito à contaminações de natureza química e microbianaque pode provocar redução da estabilidade.

Os cuidados habituais de segurança devem ser aplicados namanipulação do reagente.

O Reagente contém azida sódica que é tóxica. Deve-se tomar cuidadopara evitar a ingestão e no caso de contato com os olhos, deve-se lavarimediatamente com grande quantidade de água e procurar auxíliomédico. A azida pode formar compostos altamente explosivos comtubulações de chumbo e cobre. Portanto, utilizar grandes volumes deágua para descartar o reagente.

Não utilizar o Reagente 1 quando sua absorbância medida contra a águaem 505 nm for igual ou maior que 0,300 ou quando mostrar-se turvo oucom sinais de contaminação.

Materiais necessários e não fornecidos

1. Banho-maria mantido à temperatura constante (37 ºC ).

2. Fotômetro automático capaz de medir com exatidão a absorbânciaentre 490 e 520 nm.3. Pipetas para medir amostras e reagente.

4. Cronômetro.

Influências pré-analíticas . Por ser uma substância comcaracterística redutora o ácido ascórbico impede a formação docromógeno levando a obtenção de resultados falsamente diminuídos.Pacientes que fazem uso de ácido ascórbico (Cebion ®, Ernergil C ®,Redoxon ®, dentre outros) devem ser aconselhados a interromper seuuso por 24 horas antes da realização do exame .9

Nas 24 horas que sucedem a ingestão aguda de álcool ocorresignificativa redução da glicemia. As reduções podem também sersignificativas nos indivíduos submetidos a jejum prolongado ou emobesos tratados com dietas com baixo valor calórico .3

GLICOSE GODInstruções de Uso

Ref.: 134MS 10009010243

01 Português - Ref.: 134

Precauções e cuidados especiais

1

Parâmetros para analisadores automáticos

Parâmetros destinados ao Labmax 240.

*A definição de modelo de calibração deve ser adequada a cada modelode equipamento. Em caso de dúvida entre em contato com o Serviço deApoio ao Cliente Labtest.

**Os volumes de amostra e reagentes podem ser modificadosproporcionalmente sem prejuízo para o desempenho do teste. Em casode redução dos volumes é fundamental que se observe o volume mínimonecessário para a medição fotométrica.

Calibração . A concentração do analito no material Calibra H érastreável ao (SRM) 917 doStandard Reference Material National

Institute of Standards and Technology (NIST).

Linearidade . O resultado da medição é linear até 600 mg/dL. Quandofor obtido valor igual ou maior que 600 mg/dL, diluir a amostra com NaCl150 mmol/L, realizar nova medição e multiplicar o resultado obtido pelofator de diluição. Sugerimos a verificação da linearidade metodológica efotométrica, no mínimo semestralmente utilizando amostra com valoresaté 600 mg/dL.

Controle interno da qualidade . O laboratório deve manter umprograma de controle interno da qualidade que defina claramente osobjetivos, procedimentos, normas, critérios para limites de tolerância,ações corretivas e registro das atividades. Materiais de controle devemser utilizados para monitorar a imprecisão da medição e desvios dacalibração.Sugere-se que as especificações para o coeficiente de variação e erro

Pacientes diabéticos em uso continuado de clorpropamida (Diabinese)podem desenvolver hipoglicemias importantes que são muito difíceis decorrigir.

A variação biológica intraindividual da glicose é 5,7% e a variaçãobiológica intragrupo é 6,9% .4

Deve ser criado um Procedimento Operacional Padrão (POP) para coleta,preparação e armazenamento da amostra. Enfatizamos que os errosdevidos à amostra podem ser muito maiores que os erros ocorridosdurante o procedimento analítico.A amostra de sangue deve ser obtida após jejum de no mínimo 8 horas ouem menor tempo de acordo com recomendação médica.

Usar plasma ou soro tomando as precauções a seguir. Realizar a coletado sangue utilizando um anticoagulante contendo um inibidor daglicólise. O uso do anticoagulante Glistab (Labtest Ref. 29) permite acoleta de uma só amostra para as dosagens de creatinina, glicose e uréia.

As amostras de sangue não contendo antiglicolítico devem sercentrifugadas imediatamente após a coleta, e o plasma ou soroseparados das células ou coágulo.

Em outros líquidos biológicos (líquor e líquidos ascítico, pleural e sinovial)adicionar anticoagulante contendo antiglicolítico na mesma proporçãousada para a amostra de sangue, e centrifugar antes de iniciar amedição .6

Nas amostras de sangue tratadas com antiglicolítico a concentração daglicose permanece estável até 8 horas. No plasma, soro e outros líquidosseparados das células, a glicose permanece estável 3 dias entre 2 - 8 ºC,quando não ocorre contaminação bacteriana e fungica .6

Como nenhum teste conhecido pode assegurar que amostras de sanguenão transmitem infecções, todas elas devem ser consideradas comopotencialmente infectantes. Portanto, ao manuseá-las devem-se seguiras normas estabelecidas para biossegurança.

Para descartar os reagentes e o material biológico sugerimos aplicar asnormas locais, estaduais ou federais de proteção ambiental.

Concentrações de hemoglobina até 200 mg/dL e triglicerídeos até1000 mg/dL não produzem interferências significativas. Não utilizaramostras ictéricas para o ensaio.

Para avaliar a concentração aproximada da hemoglobina em umaamostra hemolisada pode-se proceder do seguinte modo: Diluir 0,05 mLda amostra em 2,0 mL de NaCl 150 mmol/L (0,85%) e medir aabsorbância em 405 ou 415 nm, acertando o zero com água deionizadaou destilada.

Hemoglobina (mg/dL) Absorbância x 601� 405Hemoglobina (mg/dL) Absorbância x 467� 415

02 Português - Ref.: 134

Interferências

Procedimento

Direção da Reação� primário

� segundário

Tipo de Reação

Parâmetros Aplicação

Crescente505 nm660 nm

Temperatura

Calibração

37 ºC2 pontos

Ponto 0: Branco (Água deionizada)Ponto 1: Calibrador 1

Cinética

Leitura 1 (Absorbância 1) 30 segundos após adição de amostraLeitura 2 (Absorbância 2) 300 segundos após amostra

Modelo da Calibração*Volume de Amostra**

Volume de R1**

Linear3,0 L�

300 L�

R1: 300 L�

Amostra: 3,0 L�

37 ºC

0 505 nm 30 segundos

A1

300 segundos

A2

Amostra

total sejam baseadas nos componentes da variação biológica (VB) .4,10

Sugere-se utilizar os produtos da linha Qualitrol - Labtest para controleinterno da qualidade em ensaios de química clínica.

Intervalo de referência . Os intervalos devem ser usados apenascomo orientação. Recomenda-se que cada laboratório estabeleça suaprópria faixa de valores de referência na população atendida.

Os critérios para diagnóstico de pré diabetes podem ser obtidos em:American Diabetes Association. Diabetes Care 2006; (suppl 29):S43-S48.

Líquor . 2/3 da glicemia quando a medição é realizada em amostrascolhidas simultaneamente.

Em indivíduos sadios, a pequena quantidade de líquido presente nascavidades articular, pleural e peritoneal é originada do ultrafiltrado doplasma. Portanto, pode-se considerar que, praticamente, a glicose alipresente está na mesma concentração do plasma.

Conversão . Unidades convencionais (mg/dL) x 0,0556 = UnidadesSI(mmol/L).

Características do desempenho12

Exatidão . Em duas amostras com concentrações de glicose iguais a85 e 180 mg/dL foram adicionadas quantidades diferentes do analito,obtendo-se recuperações entre 102% e 103%. O erro sistemáticoproporcional médio obtido em um valor de 120 mg/dL é igual a 3,0 mg/dLou 2,5%.

Especificidade . O método proposto foi comparado com um métodosimilar apresentando os resultados abaixo:

Utilizando a equação da regressão, o erro sistemático total (constante eproporcional) verificado no limite de decisão (120 mg/dL) foi igual a0,14 mg/dL ou 0,12%.O erro total obtido no mesmo nível de decisão é2,08%. Os resultados do estudo comparativo atendem à especificaçãopara Erro Sistemático Total de 6,9% para a Variação Biológica.

03 Português - Ref.: 134

Como as amostras foram selecionadas aleatoriamente em pacientes deambulatório e pacientes hospitalizados, pode-se inferir que o método temuma especificidade metodológica adequada e atende aos requisitosespecificados pela American Diabetes Association (ADA) .5

Estudos de precisão . Os estudos de precisão foram realizadosutilizando 20 amostras com concentrações médias iguais a 47, 128 e196 mg/dL.

O erro total (erro aleatório + erro sistemático) estimado emconcentrações iguais a 45 mg/dL, 120 mg/dL e 180 mg/dL é igual a4,76%, 2,08% e 2,23%, respectivamente.

Os resultados indicam que o método atende a especificação desejávelpara o erro total ( 6,9%) baseada nos componentes desejável da�

Variação Biológica.

Sensibilidade metodológica . Uma amostra protéica contendo43 mg/dL de glicose foi utilizada para calcular o limite de detecção doensaio tendo sido encontrado um valor igual a 1,83 mg/dL, equivalente à3 vezes o desvio padrão das replicatas da amostra. Utilizando-se aabsorbância do padrão como parâmetro, o limite de detecção fotométricaé 0,28 mg/dL correspondendo a uma absorbância igual a 0,001.

Efeitos da diluição da matriz . Duas amostras com valoresiguais a 676 e 669 mg/dL foram utilizadas para avaliar a resposta dosistema nas diluições da matriz com NaCl 150 mmol/L (0,85%).Utilizando fatores de diluição que variaram de 2 a 8 foram encontradasrecuperações entre 102 e 107%. Utilizando-se a absorbância do padrãocomo parâmetro o limite de detecção fotométrica é 1,12 mg/dLcorrespondendo a uma absorbância de 0,001.

Significado clínico . Valores elevados de glicose ocorrem nosvários tipos de diabetes primárias, nos estados de intolerância à glicose enas diabetes secundárias à várias doenças (hiper tireoidismo,hiperpituitarismo, hiperadrenocorticismo, etc.).

Valores diminuídos de glicose ocorrem nas hipoglicemias que podem serdevidas a várias causas. Quando a ocorrência de sintomas dehipoglicemia é relacionada à alimentação, duas formas de hipoglicemiapodem ser definidas: hipoglicemia do jejum e pós-prandial.

As causas mais comuns de hipoglicemia do jejum são: hiperinsulinismoendógeno (insulinoma e sulfonilurea), hiperinsulinismo exógeno(factício), tumores extrapancreáticos, síndrome auto imune (formaçãoespontânea de anticorpos para receptores da insulina), insuficiência

Número de amostrasIntervalo de concentração(mg/dL)

MétodoComparativo

40

42 - 609 mg/dL

Método Labtest

Equação da regressão

Coeficiente de correlação

Método Labtest (mg/dL) = 0,9962xComparativo + 0,5931

0,999

Repetitividade - Imprecisão intraensaio

Média DP CV (%)N

Amostra 2Amostra 3

Amostra 18080

128196

0,891,75

0,891,02

80 47 0,59 2,10Plasma (jejum de 8 horas)

Idade (mg/dL)Prematuro0 a 1 dia

20 a 6040 a 60

> 1 diaCrianças e adultos

50 a 8065 a 99 Reprodutibilidade - Imprecisão total

Média DP CV (%)N

Amostra 2Amostra 3

Amostra 18080

128196

1,321,82

1,191,32

80 47 0,82 2,31

04 Português - Ref.: 134

supra-renal e ou hipofisária, doença hepática grave e alcoolismo.

A hipoglicemia pós-prandial dependendo da história clínica e da respostaao teste oral de tolerância à glicose, é classificada em hipoglicemiaalimentar, hipoglicemia do diabético tipo II e do paciente com intolerânciaà glicose, hipoglicemia funcional ou reativa.

Para uma revisão dos critérios diagnósticos e classificação do diabetesmellitus consultar Diabetes Care 1997; 20:1183-94, disponívelem:<http://care.diabetesjournals.org/cgi/content/full/27/suppl_1/s5>.

A redução da concentração de glicose nos líquidos corporais encontra-seusualmente relacionada a processos inflamatórios ou infecciosos.A determinação da concentração de glicose no líquor representa um dosparâmetros para a distinção entre meningite bacteriana e virótica, porémtendo sensibilidade inferior à avaliação da celularidade no mesmomaterial.

Observações

1. A limpeza e secagem adequadas do material utilizado são fatoresfundamentais para a estabilidade dos reagentes e obtenção de resultadoscorretos.

2. O laboratório clínico tem como objetivo fornecer resultados exatos eprecisos. A utilização de água de qualidade inadequada é uma causapotencial de erros analíticos. A água utilizada no laboratório deve ter aqualidade adequada a cada aplicação. Assim, para preparar reagentes,usar nas medições e para uso no enxágue final da vidraria, a água deve terresistividade 1 megaohm.cm ou condutividade 1 microsiemens/cm e� �

concentração de silicatos <0,1 mg/L. Quando a coluna deionizadora estácom sua capacidade saturada ocorre liberação de vários íons, silicatos esubstâncias com grande poder de oxidação ou redução que deterioramos reagentes em poucos dias ou mesmo horas, alterando os resultadosde modo imprevisível. Assim, é fundamental estabelecer um programa decontrole da qualidade da água.

3. Várias publicações demonstram que a urina contém numerosassubstâncias, principalmente o ácido úrico, que interferem nos métodosutilizando a reação GOD-POD, levando a resultados falsamentediminuídos.

Referências

1. Bergmeyer HU. Methods of Enzimatic Analysis, 3a. edição, Vol VI,Deerfield Beach:VCH, 1986:178-184.

2. Blaedel WJ, Uhl JM. Clin Chem 1975;21:119-124.

3. Young DS. Effects of Preanalytical Variables on Clinical LaboratoryTests, 1a. edição, Washington: AACC Press, 1993.

4. Biological Variation Database specifications Westgard QC.-Disponível em:<http://www.westgard.com/biodatabase1.htm>(acesso em 28/10/2011).

5. Sachs DB, Bruns DE, Goldstein DE, Maclaren NK, McDonald JM, ParrotM. Clin Chem 2002;48:436-72.

6. Tietz NW. Fundamentals of Clinical Chemistry, Philadelphia: W.B.Saunders, 1970:154-166.

7. Tonks DB Quality Control in Clinical Laboratories, Warner-ChilcotLaboratories, Diagnostic Reagents Division, Scarborough, Canada,1972.

8. Westgard JO, Barry PL, Hunt MR, Groth T. Clin Chem 1981;27:493-501.

9. Martinello F, Silva E.L. Interferência do ácido ascórbico nasdeterminações de parâmetros bioquímicos séricos: estudos in vivo ein vitro. Jorn. Bras. Pat. Med. Lab, 2003;39:323-334.

10. Basques JC. Especificações da Qualidade Analítica. LabtestDiagnóstica 2005.

11. Burtis CA, Ashwood ER. Textbook of Clinical Chemistry, 2a. edição,Philadelphia: W.B. Saunders, 1986:2175-2211.

12. Labtest: Dados de Arquivo.

13. American Diabetes Association et al. 2. Classification and Diagnosisof Diabetes. , v. 40, n. Supplement 1, p. S11 - S24, 2017.Diabetes Care

Estão disponíveis aplicações para sistemas automáticos.

O número de teste em aplicações automáticas depende dos

parâmetros de programação.

Informações ao consumidor

[Termos e Condições de Garantia]

A Labtest Diagnóstica garante o desempenho deste produto, dentro dasespecificações, até a data de expiração indicada nos rótulos, desde queos cuidados de utilização e armazenamento indicados nos rótulos enestas instruções sejam seguidos corretamente.

Apresentação

Produto ReferênciaEquipamento

Labmax 240

Labmax 560

134-10/40

134-10/65

134-4/70Glicose GOD

Linha CS134-4/70

134-10/70

Conteúdo

10 X 40 mL11

11

11

10 X 65 mL

4 X 70 mL

4 X 70 mL1

10 X 70 mL1

05 Português - Ref.: 134

CNPJ: 16.516.296 / 0001 - 38Av. Paulo Ferreira da Costa, 600 - Vista Alegre - CEP 33400-000Lagoa Santa . Minas Gerais Brasil - www.labtest.com.br

Labtest Diagnóstica S.A.

Serviço de Apoio ao Cliente 0800 031 34 11 (Ligação Gratuita)e-mail: sac@labtest.com.br

Edição: Fevereiro, 2012Ref.: 100517

Copyright by Labtest Diagnóstica S.A.Reprodução sob prévia autorização

06 Português - Ref.: 134

Símbolos utilizados com produtos diagnósticos in vitroSímbolos usados con productos diagnósticos in vitro

Symbols used with ivd devices

Representante Autorizado na Comunidade EuropeiaRepresentante autorizado en la Comunidad EuropeaAuthorized Representative in the European Community

Conteúdo suficiente para < n > testesContenido suficiente para < n > testsContains sufficient for < n > tests

Data limite de utilização (aaaa-mm-dd ou mm/aaaa)Estable hasta (aaaa-mm-dd o mm/aaaa)Use by (yyyy-mm-dd or mm/yyyy)

Limite de temperatura (conservar a)Temperatura limite (conservar a)Temperature limitation (store at)

Material CalibradorMaterial CalibradorCalibrator Material

Material CalibradorMaterial CalibradorCalibrator Material

Consultar instruções de usoConsultar instrucciones de usoConsult instructions for use

Adições ou alterações significativasCambios o suplementos significativosSignificant additions or changes

LiofilizadoLiofilizadoLyophilized

Produto diagnóstico in vitroDispositivo de diagnóstico in vitroIn vitro diagnostic device

Número do catálogoNúmero de catálogoCatalog Number

Ref.: 140214

CorrosivoCorrosivoCorrosive

Controle negativoControl negativoNegative control

Controle positivoControl positivoPositive control

ControleControlControl

ControleControlControl

Marca CEMarcado CECE Mark

TóxicoTóxicoPoison

ReagenteReactivoReagent

Número do loteDenominación de loteBatch code

Risco biológicoRiesgo biológicoBiological risk

Fabricado porElaborado porManufactured by

Período após aberturaPeríodo post-aberturaPeriod after-opening

Instalar atéInstalar hastaInstall before

Uso veterinárioUso veterinarioVeterinary use