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MANUAL DE AULAS PRÁTICAS DO LAB. DE BIOLOGIA COMPARANDO CÉLULAS PROCARIOTAS E EUCARIOTAS. Os seres vivos podem ser classificados em dois grandes grupos: os procariontes e os eucariontes, conforme a organização da célula que os compõe. Um dos objetivos desta prática é comparar células procariotas e eucariotas, suas semelhanças e diferenças. Ao microscópio óptico, o que mais chama a atenção é a grande diferença de tamanho que existe entre as células procarióticas e eucarióticas típicas. É claro que podemos encontrar células procariontes, como algumas algas cianofíceas, que possuem tamanho próximo ou mesmo maior que algumas células eucariontes. Entretanto, a regra é que os procariontes geralmente têm células bem menores que os eucariontes. Todos os seres que possuem células procarióticas pertencem ao antigo reino Monera; embora os livros ainda tragam este reino, estudos têm demonstrado profundas diferenças metabólicas entre dois grupos de bactérias, chamadas de Archaea e Eubacter. Com a criação da categoria de Domínio, acima de Reino, esses grupos formarão diferentes Reinos. A diferença mais marcante, além da dimensão, é a presença do núcleo provido de membrana nuclear ou carioteca nas células eucarióticas e a ausência da mesma nas procarióticas. Internamente, não só a estrutura do núcleo difere, mas sim uma intensa compartimentalização das diversas funções celulares em organelas envoltas por membranas, o sistema de endomembranas, que caracteriza as células eucarióticas. Porém, o sistema de endomembranas é de difícil visualização ao microscópio óptico, sendo bem observado ao microscópio eletrônico. Nesta atividade, vamos colocar lado-a-lado células da película das folhas da cebola e da mucosa da bochecha humana (ambas eucarióticas). Material necessário (1ªparte):

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MANUAL DE AULAS PRÁTICAS DO LAB. DE BIOLOGIA

COMPARANDO CÉLULAS PROCARIOTAS E EUCARIOTAS.

Os seres vivos podem ser classificados em dois grandes grupos: os procariontes e os eucariontes, conforme a organização da célula que os compõe. Um dos objetivos desta prática é comparar células procariotas e eucariotas, suas semelhanças e diferenças. Ao microscópio óptico, o que mais chama a atenção é a grande diferença de tamanho que existe entre as células procarióticas e eucarióticas típicas. É claro que podemos encontrar células procariontes, como algumas algas cianofíceas, que possuem tamanho próximo ou mesmo maior que algumas células eucariontes. Entretanto, a regra é que os procariontes geralmente têm células bem menores que os eucariontes. Todos os seres que possuem células procarióticas pertencem ao antigo reino Monera; embora os livros ainda tragam este reino, estudos têm demonstrado profundas diferenças metabólicas entre dois grupos de bactérias, chamadas de Archaea e Eubacter. Com a criação da categoria de Domínio, acima de Reino, esses grupos formarão diferentes Reinos.

A diferença mais marcante, além da dimensão, é a presença do núcleo provido de membrana nuclear ou carioteca nas células eucarióticas e a ausência da mesma nas procarióticas. Internamente, não só a estrutura do núcleo difere, mas sim uma intensa compartimentalização das diversas funções celulares em organelas envoltas por membranas, o sistema de endomembranas, que caracteriza as células eucarióticas. Porém, o sistema de endomembranas é de difícil visualização ao microscópio óptico, sendo bem observado ao microscópio eletrônico.

Nesta atividade, vamos colocar lado-a-lado células da película das folhas da cebola e da mucosa da bochecha humana (ambas eucarióticas).

Material necessário (1ªparte):

Lâminas, lamínulas, espátula de madeira, gaze, borracha de dinheiro, corante azul de metileno 0,05%, papel filtro, pipeta de Pasteur com bulbo de borracha, frasco de vidro com gargalo, amostra de água para infusão, folhas de capim, pinça, cebola branca e microscópio.

Procedimento:

1) Com uma espátula de madeira, raspe a bochecha e, posteriormente, esfregue a espátula em cima da região da lâmina.

2) Coloque uma gota de corante (azul de metileno 0,05%) e espere 1 minuto.

3) Cubra com lamínula, seque os lados da lâmina com o papel filtro e observe ao microscópio.

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4) Retire algumas folhas externas da cebola branca.

5) Com a pinça, retire um pequeno pedaço da película transparente que envolve a folha.

6) Coloque o fragmento aberto na lâmina e pingue uma gota do azul de metileno.

7) Cubra com a lamínula e leve ao microscópio; use a objetiva de menor aumento para as visualizações iniciais.

8) Coloque um pouco da água que você trouxe no frasco com gargalo, sacuda e jogue fora;

9) Recorte folhas de capim e coloque no frasco, preenchendo em seguida com a água até cobrir as folhas.

10) Cubra o frasco com gaze, prenda com borracha-de-dinheiro e rotule com fita adesiva adicionando a data e local de coleta da água.

OBSERVANDO CÍLIOS E SISTEMA DE ENDOMEMBRANAS (2ª parte)

Paramecium sp. é o nome genérico de um protozoário ciliado muito comum em mananciais de água como os açudes e riachos. Estes protozoários são de fácil cultivo alimentando-se principalmente de bactérias, pequenas algas e outros protozoários menores.

Por ser de fácil cultivo, apresentar cílios, sistema de endomembranas facilmente observável, além de ter uma taxa de reprodução assexuada bem alta, este protozoário é um excelente recurso para atividades práticas de Biologia Celular. As espécies mais comuns de Paramecium sp. possuem em torno de 0,5 mm de comprimento.

Os ciliados são excepcionais entre os eucariontes uma vez que possuem, no mínimo, dois núcleos com funções distintas. O macronúcleo participa das atividades do dia a dia como crescimento, metabolismo e reprodução; o micronúcleo permanece relativamente dormente até que a célula entre em reprodução sexuada. Os Paramecium sp. possuem dois tipos de reprodução; a) divisão binária: em condições favoráveis a célula se divide em duas; estas são geneticamente idênticas, crescem rapidamente e voltam a se dividir. Mantendo as condições favoráveis estes organismos podem se dividir duas a três vezes em um dia; b) conjugação: em condições ambientais desfavoráveis, dois indivíduos de sexos diferentes entram em contato e formam uma ponte citoplasmática temporária, por meio da qual trocam micronúcleos.

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Nesta atividade, vamos colocar lado-a-lado células bacterianas (célula procariótica), e células de protozoários e algas (células eucarióticas).

Material necessário:

Cultura de Paramecium sp.; microscópio, lâmina – lamínula; algodão, ovo de galinha, pipeta de Pasteur.

Procedimento:

1) Coloque um chumaço de algodão na lâmina e em seguida uma gota de clara de ovo.

2) Usando a pipeta de Pasteur com bulbo, retire uma amostra da parte de cima da infusão e pingue na lâmina preparada.

3) Cubra com a lamínula e leve ao microscópio percorrendo todo o campo com a objetiva de menor aumento.

4) Quando centralizar um protozoário movimentando os cílios, aumente até 400x para observar o movimento das células bacterianas.

Questionário:

1) Compare as células procariotas e eucariotas:

a) Quanto ao tamanho.

b) Quanto à forma.

c) Quanto à presença de núcleo.

2) Quais são os seres vivos chamamos de procariontes? Quais os que representam os eucariontes?

3) Que outras diferenças existem entre as células procariotas e as eucariotas, mas não puderam ser vistas ao microscópio óptico? O que precisamos fazer para poder detectar estas diferenças?

4) Observe o batimento dos cílios e desenhe (observe e descreva os tricocistos)

5) Identifique e observe a contração dos vacúolos contráteis.

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6) Identifique os vacúolos digestivos.

7) Identifique o citóstoma e a citofaringe. (O que são fagossomas e onde estes se formam nos Paramecium sp.?)

ANOTAÇÕES

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