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Métodos Imunológicos III Curso de Férias em Imunologia e Biologia Molecular
Nicole Menezes de Souza Florianópolis, 2010
IMUNOCOMPLEXO
Imunocomplexo: Ag Ac
Anticorpos: contra praticamente qualquer tipo de molécula química, de grande e pequeno porte;
Técnicas praticamente qualquer tipo de molécula em solução ou em células.
IMUNOCOMPLEXO
Molécula simétrica;
Amino-terminal (V): reconhecimento do antígeno;
Carboxi-terminal (C): funções efetoras.
ANTICORPO POLICLONAL
Mistura de moléculas de imunoglobulinas secretadas contra um antígeno específico, cada uma reconhecendo um epítopo diferente.
ANTICORPO MONOCLONAL
Alta especificidade e afinidade;
Um só epítopo de um antígeno;
Ausência de anticorpos não específicos;
Maior facilidade de caracterização.
ANTICORPO MONOCLONAL
ANTICORPO MONOCLONAL
Purificação e seleção para identificação e isolamento de clones que secretam um anticorpo que interage com o antígeno desejado;
Determinado anticorpo monoclonal por técnicas imunoquímicas (ELISA).
MÉTODOS IMUNOLÓGICOS
Métodos imunológicos tornaram-se padrão para as técnicas de pesquisa e aplicações clínicas.
Baseiam-se em um reagente e um analito que pode ser medido por uma molécula indicadora.
ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay)
Ensaio “Sanduíche”
ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay)
Ensaio “Sanduíche Indireto”
ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay)
Fase sólida Reagente Analito Anticorpo marcado com enzima (Horseradish peroxidase –
HRP) Substrato para a enzima Leitor de placas de ELISA (D.O.)
ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay)
Ensaio “Sanduíche”
http://highered.mcgraw-hill.com/sites/0072556781/student_view0/chapter33/animation_quiz_1.html
ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay)
Ensaio “Sanduíche”
http://highered.mcgraw-hill.com/sites/0072556781/student_view0/chapter33/animation_quiz_1.html
ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay)
Ensaio “Sanduíche”
http://highered.mcgraw-hill.com/sites/0072556781/student_view0/chapter33/animation_quiz_1.html
ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay)
Ensaio “Sanduíche”
http://highered.mcgraw-hill.com/sites/0072556781/student_view0/chapter33/animation_quiz_1.html
ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay)
Ensaio “Sanduíche”
http://highered.mcgraw-hill.com/sites/0072556781/student_view0/chapter33/animation_quiz_1.html
ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay)
Ensaio “Sanduíche”
http://highered.mcgraw-hill.com/sites/0072556781/student_view0/chapter33/animation_quiz_1.html
ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay)
Ensaio “Sanduíche”
http://highered.mcgraw-hill.com/sites/0072556781/student_view0/chapter33/animation_quiz_1.html
ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay)
Ensaio “Sanduíche”
http://highered.mcgraw-hill.com/sites/0072556781/student_view0/chapter33/animation_quiz_1.html
ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay)
Ensaio “Sanduíche”
http://highered.mcgraw-hill.com/sites/0072556781/student_view0/chapter33/animation_quiz_1.html
ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay)
Avaliação do resultado:
ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay)
Avaliação do resultado:
IMUNOFLUORESCÊNCIA
Fase sólida Substrato (p.ex. Tripanossoma cruzi) Amostra Anticorpo Fluorescente Micróscopio de Fluorescência
IMUNOFLUORESCÊNCIA
Anticorpo secundário ligado a uma molécula fluorescente (Isotiocianato de fluoresceína - FITC);
Fluorescência direta e indireta;
IMUNOFLUORESCÊNCIA
Molécula Fluorescente FITC:
http://www.invitrogen.com/site/us/en/home/support/Tutorials.html
IMUNOFLUORESCÊNCIA
Molécula Fluorescente FITC:
IMUNOFLUORESCÊNCIA
http://www.microscopyu.com/articles/flurescence/fluorescenceintro.html
IMUNOFLUORESCÊNCIA
Donça de Chagas: Imunofluorescência Hemaglutinação ELISA
Fluorescência indireta:
OBRIGADA!!!