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Micropropagação

Prof. Sergio F. Schwarz

Caracteriza-se por ser uma

forma de propagação em grande

escala de material livre de moléstias.

MICROPROPAGAÇÃO = propagação vegetativa MICROPROPAGAÇÃO = propagação vegetativa MICROPROPAGAÇÃO = propagação vegetativa MICROPROPAGAÇÃO = propagação vegetativa inininin vitrovitrovitrovitro

I. Seleção de explantes adequados, sua assepsia e

transferência para meios nutritivos

ETAPAS DA MICROPROPAGAÇÃO

• Assepsia do material vegetal:

Escovação com detergente neutro

Álcool 70% - 1 minuto

Hipoclorito de sódio 0,5 - 1 % por 10 min.

Triplo enxágüe com água deionizada

autoclavada

I. Seleção de explantes adequados, sua assepsia e

transferência para meios nutritivos

ETAPAS DA MICROPROPAGAÇÃO

I. Seleção de explantes adequados, sua assepsia e

transferência para meios nutritivos

ETAPAS DA MICROPROPAGAÇÃO

I. Seleção de explantes adequados, sua esterilização e

transferência para meios nutritivos

ETAPAS DA MICROPROPAGAÇÃO

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II. Proliferação de brotos em meios de multiplicação

ETAPAS DA MICROPROPAGAÇÃO

III. Transferência dos brotos para um meio de

enraizamento (ou manutenção)

ETAPAS DA MICROPROPAGAÇÃO

III. Transferência dos brotos para um meio de

enraizamento (ou manutenção)

ETAPAS DA MICROPROPAGAÇÃO ETAPAS DA MICROPROPAGAÇÃO

Etapas I, II e III em latifólia:

IV. Processo de aclimatização (adaptação ao cultivo ex

vitro)

ETAPAS DA MICROPROPAGAÇÃO

IV. Processo de aclimatização (adaptação ao cultivo ex

vitro)

ETAPAS DA MICROPROPAGAÇÃO

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IV. Processo de aclimatização (adaptação ao cultivo ex

vitro)

ETAPAS DA MICROPROPAGAÇÃO

IV. Processo de aclimatização (adaptação ao cultivo ex

vitro)

ETAPAS DA MICROPROPAGAÇÃO

IV. Processo de aclimatização (adaptação ao cultivo ex

vitro)

ETAPAS DA MICROPROPAGAÇÃO INFRAESTRUTURA

INFRAESTRUTURA INFRAESTRUTURA

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INFRAESTRUTURA INFRAESTRUTURA

INFRAESTRUTURA INFRAESTRUTURA

• Manutenção da limpeza e resguardo do ambiente de

trabalho

• Roupas e aventais limpos e de manga curta

• Lavagens das mãos e braços antes de iniciar o trabalho

• Utilização de luvas cirúrgicas

• Esterilização de utensílios como: pinças, bisturi papel e

água deionizada (autoclavagem ou formol)

• Limpeza interna da câmara de fluxo com álcool 70%

CUIDADOS COM A ASSEPSIA APLICAÇÕES DA MICROPROPAGAÇÃO

• Propagação em massa

• Produção de plantas livres de patógenos

• Produção de sementes sintéticas

• Pesquisa básica de fisiologia vegetal

• Produção de metabólitos secundários

• Armazenamento e manejo de germoplasma

• Seleção in vitro

• Aumento da variabilidade genética

• Resgate de embriões imaturos

• Quebra de barreiras de incompatibilidade genéticas

• Clonagem em pequena escala de genótipos especiais

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MULTIPLICAÇÃO EM MASSAAPLICAÇÕES DA MICROPROPAGAÇÃO

• Propagação em massa

• Produção de plantas livres de patógenos

• Produção de sementes sintéticas

• Pesquisa básica de fisiologia vegetal

• Produção de metabólitos secundários

• Armazenamento e manejo de germoplasma

• Seleção in vitro

• Aumento da variabilidade genética

• Resgate de embriões imaturos

• Quebra de barreiras de incompatibilidade genéticas

• Clonagem em pequena escala de genótipos especiais

CULTURA DE ÁPICES CAULINARES E MICROENXERTIA→→→→ Normalmente os tecidos do ápice

meristemático estão livres de patógenos. Mesmo

que os demais tecidos da planta estejam

contaminados. Isto devido em grande parte a falta

de ligações vasculares das células do ápice

meristemático com o resto da planta.

MICROENXERTIA

MICROENXERTIA MICROENXERTIA

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MICROENXERTIA MICROENXERTIA

APLICAÇÕES DA MICROPROPAGAÇÃO

• Propagação em massa

• Produção de plantas livres de patógenos

• Produção de sementes sintéticas

• Pesquisa básica de fisiologia vegetal

• Produção de metabólitos secundários

• Armazenamento e manejo de germoplasma

• Seleção in vitro

• Aumento da variabilidade genética

• Resgate de embriões imaturos

• Quebra de barreiras de incompatibilidade genéticas

• Clonagem em pequena escala de genótipos especiais

EMBRIOGÊNESE

APLICAÇÕES DA MICROPROPAGAÇÃO

• Propagação em massa

• Produção de plantas livres de patógenos

• Produção de sementes sintéticas

• Pesquisa básica de fisiologia vegetal

• Produção de metabólitos secundários

• Armazenamento e manejo de germoplasma

• Seleção in vitro

• Aumento da variabilidade genética

• Resgate de embriões imaturos

• Quebra de barreiras de incompatibilidade genéticas

• Clonagem em pequena escala de genótipos especiais

ESTUDOS DE FISIOLOGIA

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APLICAÇÕES DA MICROPROPAGAÇÃO

• Propagação em massa

• Produção de plantas livres de patógenos

• Produção de sementes sintéticas

• Pesquisa básica de fisiologia vegetal

• Produção de metabólitos secundários

• Armazenamento e manejo de germoplasma

• Seleção in vitro

• Aumento da variabilidade genética

• Resgate de embriões imaturos

• Quebra de barreiras de incompatibilidade genéticas

• Clonagem em pequena escala de genótipos especiais

APLICAÇÕES DA MICROPROPAGAÇÃO

• Propagação em massa

• Produção de plantas livres de patógenos

• Produção de sementes sintéticas

• Pesquisa básica de fisiologia vegetal

• Produção de metabólitos secundários

• Armazenamento e manejo de germoplasma

• Seleção in vitro

• Aumento da variabilidade genética

• Resgate de embriões imaturos

• Quebra de barreiras de incompatibilidade genéticas

• Clonagem em pequena escala de genótipos especiais

APLICAÇÕES DA MICROPROPAGAÇÃO

• Propagação em massa

• Produção de plantas livres de patógenos

• Produção de sementes sintéticas

• Pesquisa básica de fisiologia vegetal

• Produção de metabólitos secundários

• Armazenamento e manejo de germoplasma

• Seleção in vitro

• Aumento da variabilidade genética

• Resgate de embriões imaturos

• Quebra de barreiras de incompatibilidade genéticas

• Clonagem em pequena escala de genótipos especiais

APLICAÇÕES DA MICROPROPAGAÇÃO

• Propagação em massa

• Produção de plantas livres de patógenos

• Produção de sementes sintéticas

• Pesquisa básica de fisiologia vegetal

• Produção de metabólitos secundários

• Armazenamento e manejo de germoplasma

• Seleção in vitro

• Aumento da variabilidade genética

• Resgate de embriões imaturos

• Quebra de barreiras de incompatibilidade genéticas

• Clonagem em pequena escala de genótipos especiais

TRANSFORMAÇÃO GENÉTICA

Plantas jovens Plantas adultas

15 meses de idade

maduro

juvenil

transgênico

TRANSFORMAÇÃO GENÉTICA

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- Brotação com gene LFY

TRANSFORMAÇÃO GENÉTICA TRANSFORMAÇÃO GENÉTICA

Citrange trangênico 35S::AP1 florescendo com alguns meses de idade

APLICAÇÕES DA MICROPROPAGAÇÃO

• Propagação em massa

• Produção de plantas livres de patógenos

• Produção de sementes sintéticas

• Pesquisa básica de fisiologia vegetal

• Produção de metabólitos secundários

• Armazenamento e manejo de germoplasma

• Seleção in vitro

• Aumento da variabilidade genética

• Resgate de embriões imaturos

• Quebra de barreiras de incompatibilidade genéticas

• Clonagem em pequena escala de genótipos especiais

RESGATE DE EMBRIÕES

APLICAÇÕES DA MICROPROPAGAÇÃO

• Propagação em massa

• Produção de plantas livres de patógenos

• Produção de sementes sintéticas

• Pesquisa básica de fisiologia vegetal

• Produção de metabólitos secundários

• Armazenamento e manejo de germoplasma

• Seleção in vitro

• Aumento da variabilidade genética

• Resgate de embriões imaturos

• Quebra de barreiras de incompatibilidade genéticas

• Clonagem em pequena escala de genótipos especiais

- Permite a combinação direta de parentaiscomplementares

- Permite superar barreiras sexuais

- Permite a obtenção de híbridos a partir deparentais poliembriônicos

- Permite a criação de novas combinações erecombinações de caracteres citoplasmáticos

- Permite a obtenção de tetraplóides para futuroscruzamentos

- Permite obtenção de triplóides de forma direta

HIBRIDAÇÃO SOMÁTICA

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HIBRIDAÇÃO SOMÁTICA Fusão de protoplastos e regeneração dos híbridos somáticos

APLICAÇÕES DA MICROPROPAGAÇÃO

• Propagação em massa

• Produção de plantas livres de patógenos

• Produção de sementes sintéticas

• Pesquisa básica de fisiologia vegetal

• Produção de metabólitos secundários

• Armazenamento e manejo de germoplasma

• Seleção in vitro

• Aumento da variabilidade genética

• Resgate de embriões imaturos

• Quebra de barreiras de incompatibilidade genéticas

• Clonagem em pequena escala de genótipos especiais