Número Publicação Data Publicação ' ' W O 2012/149622 W P O .... (2006.01) Fernanda [BR/BR];

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Text of Número Publicação Data Publicação ' ' W O 2012/149622 W P O .... (2006.01) Fernanda [BR/BR];

  • (12) PEDIDO INTERNACIONAL PUBLICADO SOB O TRATADO DE COOPERAO EM MATRIA DE PATENTES(PCT)

    (19) Organizao Mundial daPropriedade IntelectualSecretaria Internacional - - ,

    ) Nmero de Publicao Internacional(43) Data de Publicao Internacional ' ' WO 2012/149622 Al

    8 de Novembro de 2012 (08.11.2012) W P O I P C T

    (51) Classificao Internacional de Patentes : Almeida, 521, Apto 202, Bairro Santo Antnio, BeloA61K 49/00 (2006.01) C12N 1/20 (2006.01) Horizonte, MG (BR). SEYFFERT, Nbia [BR/BR]; RuaA61K 39/35 (2006.01) C12Q 1/00 (2006.01) Alameda dos Coqueiros, 690, Apto 12, Bairro So Luiz,A61K 39/05 (2006.01) C12R 1/15 (2006.01) Belo Horizonte, MG (BR). ALVES DORELLA,G01N 33/483 (2006.01) Fernanda [BR/BR]; Rua dos Bandolins, 215, Apto 602,

    Bairro Conjunto Califrinia I, Belo Horizonte, MG (BR).(21) Nmero do Pedido Internacional SILA DE ALMEIDA, Sintia [BR/BR]; Rua das

    PCT/BR20 12/000 134 Bnadeiras, 32 1, Bairro Indai, Cep:3 1270-090 Belo(22) Data do Depsito Internacional : Horizonte, MG (BR). MYIOSHI, Anderson [BR/BR];

    2 de Maio de 2012 (02.05.2012) Rua Hlio de Senna Figueiredo, 112, Apto 101, BairroSerrano, Cep:30882-600 Belo Horizonte, MG (BR).

    (25) Lngua de Depsito Internacional : Portugus GUIMARES GOUVEIA, Aurora Maria [BR/BR]; Rua

    (26) Lngua de Publicao : Portugus Dr. Alpio Goulart, 136, Bairro Serra, Belo Horizonte, MG(BR).

    (30) Dados Relativos Prioridade :PI1 102202-7 2 de Maio de 201 1 (02.05.201 1) BR (74) Mandatrio : DE CASTRO LEITE GORI, Ana Luiza;

    Avenida Antnio Carlos, 6627, Unidade Administrativa II,(71) Requerente (para todos os Estados designados, exceto 2o andar, sala 2008, Cep: 31270-901 Belo Horizonte, MG

    US) : UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS (BR).GERAIS - UFMG [BR/BR]; Avenida Antnio Carlos,6627, Unidade Administrativa II, 2o andar, sala 2013, (81) Estados Designados (sem indicao contrria, para todos

    Cep:3 1270-901 Belo Horizonte, MG (BR). os tipos de proteo nacional existentes) : AE, AG, AL,AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BR, BW, BY,

    (72) Inventores; e BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM,(75) Inventores/Requerentes (para US unicamente) : DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT,

    ARISTON DE CARVALHO AZEVEDO, Vasco HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP,[BR/BR]; Rua Padre Leopoldo Mertens, Bairro So KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD,Francisco, Cep:3 1255-200 Belo Horizonte, MG (BR). DE ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI,S GUIMARES, Alessandro [BR/BR]; Rua Santos, 80, NO, NZ, OM, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW,Apto 302, Bairro Jardim Amrica, Cep:30460-700 Belo SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM,Horizonte, MG (BR). AZEVEDO ANTUNES DE TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM,OLIVEIRA, Camila [BR/BR]; Rua Guilherme de ZW.

    (Continua na pgina seguinte)

    (54) Title : SKIN TEST FOR DIAGNOSING SUBCLINICAL CASEOUS LYMPHADENITIS IN GOATS AND SHEEP

    (54) Ttulo TESTE DE PELE PARA DIAGNSTICO DA LINFADENITE CASEOSA SUBCLNICA EM CAPRINOS EOVINOS

    FIGURA 1

    (57) Abstract : The present invention describes a skin test characterised in that it comprises protein antigens secreted byCorynebacterium pseudotuberculosis for diagnosing subclinical caseous lymphadenitis in goats and sheep. This test allows goatsand sheep to be tested positive on the farm for caseous lymphadenitis (CL), assisting in combating the infection, since the test can beperformed by field veterinarians.

    (57) Resumo : A presente inveno descreve teste de pele caracterizado por compreender antgenos proticos secretados deCorynebacterium pseudotuberculosis para diagnstico da Iinfadenite caseosa subclnica em caprinos e ovinos. Este teste permite aavaliao de caprinos e ovinos em nvel de fazenda quanto positividade para Iinfadenite caseosa (LC), favorecendo controle dainfeco, visto que pode ser realizado por mdicos veterinrios atuantes no campo.

  • wo 2012/149622 Al I I II II I III I I I I I l llll ll l l l llll II I II(84) Estados Designados (sem indicao contrria, para RS, SE, SI, SK, SM, TR), OAPI (BF, BJ, CF, CG, Cl,

    todos os tipos de proteo regional existentes) : ARIPO CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).(BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL,

    Publicado:SZ, TZ, UG, ZM, ZW), Eurasitico (AM, AZ, BY, KG,KZ, RU, TJ, TM), Europeu (AL, AT, BE, BG, CH, CY, com relatrio de pesquisa internacional (Art. 21(3))CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, , LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO,

  • "Teste de pele para diagnstico da linfadenite caseosa subclnica em

    caprinos e ovinos"

    A presente inveno descreve teste de pele caracterizado por

    compreender antgenos proticos secretados de Corynebacterium

    pseudotuberculosis para diagnstico da linfadenite caseosa subclnica em

    caprinos e ovinos. Este teste permite a avaliao de caprinos e ovinos em nvel

    de fazenda quanto positividade para linfadenite caseosa (LC), favorecendo

    controle da infeco, visto que pode ser realizado por mdicos veterinrios

    atuantes no campo.

    A LC uma doena crnica causada por bactrias da espcie

    Corynebacterium pseudotuberculosis, que acomete principalmente pequenos

    ruminantes e responsvel por perdas econmicas significativas relacionadas

    reduo da produtividade e eficincia reprodutiva dos animais infectados

    (Arsenault, J.O.; Girard, C ; Dubreuil, P.; Daignault, D. O.; Galarneau, J.-R.;

    Boisclair, J., Simard, C ; Blanger, D. Prevalence of and carcass condemnation

    from maedi-visna, paratuberculosis and caseous lymphadenitis in culled sheep

    from Quebec, Canada, Prev. Vet. Med., v. 59 , p. 67-81 , 2003; Dorella, F.A.;

    Pacheco, L.G.C.; Oliveira, S.C; Miyoshi, A.; Azevedo, V. Corynebacterium

    pseudotuberculosis: microbiology, biochemical properties, pathogenesis and

    molecular studies of virulence, Vet. Res., v. 37, p. 201-21 8, 2006). Essa

    enfermidade prevalente em pases como Austrlia, Nova Zelndia, frica do

    Sul, Estados Unidos, Canad e Brasil, onde existe intensa atividade de ovino e

    caprinocultura (Guimares, A.S., Carmo, F.B. Pauletti, R.B. Seyffert, N.,

    Ribeiro, D., Lage, A.P. Heinemann, M.B. Miyoshi, A., Azevedo, V . Gouveia,

    A.M.G. Caseous Lymphadenitis: Epidemioiogy, Diagnosis, and Control, The

    IIOAB Journal, v. 2 , p. 33-43, 201 1) . Poucos so os trabalhos de

    soroprevalncia de linfadenite caseosa no Brasil, porm altas prevalncias j

    foram detectadas em alguns estados. Em Minas Gerais foram detectadas

    75,8% de prevalncia em ovinos e 95,9% de rebanhos positivos (Guimares,

    A.S. Seyffert, N., Bastos, B.L. Portela, R.W.D. Meyer, R., Carmo, F.B., Cruz,

    J.C.M.. McCulloch, J.A., Lage, A.P. Heinemann, M.B., Miyoshi, A., Azevedo, V.

    Gouveia, A.M.G. Caseous lymphadenitis in sheep flocks of the state of Minas

  • Gerais, Brazil: Prevalence and management surveys, Small Ruminant

    Research v. 87, p. 86-91 , 2009). Em caprinos foi detectada prevalncia animal

    de 78,9% e 98% de rebanhos positivos (Seyffert, N., Guimares, A.S.

    Pacheco, LG.C. Portela, R.W. Bastos, B.L, Dorella, F.A., Heinemann, M.B.,

    Lage, A.P., Gouveia, A.M.G., Meyer, R., Miyoshi, A., Azevedo, V. High

    seroprevalence of caseous lymphadenitis in Brazilian goat herds

    revealed by Corynebacterium pseudotuberculosis secreted proteins-based

    ELISA, Research in Veterinary Science, v. 88, p. 50-55, 2010).

    Alguns ensaios de diagnsticos para a LC foram testados, porm

    apresentaram resultados pouco satisfatrios. Alm de necessitarem da coleta

    das amostras nas propriedades, demandando tempo para serem realizados, o

    custo alto e os testes necessitam de mo-de-obra especializada (Dercksen,

    D.P., Brinkhof, J.M.A., Dekker-Nooren, T., Van Maanen, K., Bode, C.F., Baird,

    G., Kamp, E.M. A comparison of four serological tests for the diagnosis of

    caseous lymphadenitis in sheep and goats, Vet. Microbiol. 75, 167-1 75, 2000;

    Williamson, L.H. Caseous lymphadenitis in small ruminants, Vet. Clin. North

    Am. Food Anim. Pract., v. 17, p. 359-371 , 2001 ; Menzies, P.I.; Hwang, T.-l.;

    Prescott, J.F. Comparison of an interferon-gamma to a phospholipase D

    enzyme-linked immunosorbent assay for diagnosis of Corynebacterium

    pseudotuberculosis infection in experimentally infected goats, Vet. Microbiol., v.

    100, p.129-137, 2004; Dorella, F. A.; Pacheco, L. G. C ; Oliveira, S. C ; Myoshi,

    A.; Azevedo, V . Corynebacterium pseudotuberculosis: microbiology,

    biochemical properties, pathogenesis and molecular studies of virulence.

    Veterinary Research, v. 37, n . 2, p. 201 -21 8 , 2006.).

    Encontra-se na literatura uma metodologia, baseada em uma reao de

    PCR multiplex (mPCR), para deteco mais rpida e eficiente de C.

    pseudotuberculosis em amostras clnicas de animais portadores de LC

    (Pacheco, LG.C, Pena, R.R., Castro, T.L.P., Dorella, F.A., Bahia, R.C.,

    Carminati, R., Frota, M.N.L, Oliveira, S.C., Meyer, R., Alves, F.S.F., Miyoshi,

    A., AZEVEDO, V. Multiplex PCR Assay for Identification of Corynebacterium

    pseudotuberculosis from Pure Cultures and for Rapid Detection of this

    Pathogen in Clinicai Samples. J . Med. Microbiol., v. 56, p. 480-486, 2007).

  • Atravs da utilizao da mPCR associada a um mtodo de extrao de DNA

    bacteriano diretamente de material purulento, consegue-se detectar C.

    pseudotuberculosis mais rapidamente e de maneira to especfica quanto seria

    feito utilizando-se cultura bacteriolgica e identificao bioqumica de isolados,

    que atualmente o padro-ouro para o diagnstico da LC. Porm, pesar da

    alta sensibilidade e especificidade, esta tcnica laboratorial demanda material

    de alto custo e pessoal c