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Outbreaks of Multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa in Community Hospitals Japan Andréa Lanzara Ianni Daniela Soares Mariana Lemos Verônica Boeira Reina

Outbreaks of Multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa in Community Hospitals Japan

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Outbreaks of Multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa in Community Hospitals Japan. Andréa Lanzara Ianni Daniela Soares Mariana Lemos Verônica Boeira Reina. Pseudomonas aeruginosa. -bactéria gram negativa, aeróbia, baciliforme -patógeno oportunista -infecções nosocomiais - PowerPoint PPT Presentation

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Page 1: Outbreaks of Multidrug-resistant  Pseudomonas aeruginosa  in Community Hospitals Japan

Outbreaks of Multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa in Community

Hospitals Japan

Andréa Lanzara IanniDaniela SoaresMariana Lemos

Verônica Boeira Reina

Page 2: Outbreaks of Multidrug-resistant  Pseudomonas aeruginosa  in Community Hospitals Japan

Pseudomonas aeruginosa

-bactéria gram negativa, aeróbia, baciliforme-patógeno oportunista-infecções nosocomiais-sobrevive em muitos ambientes-resistência a muitos antibióticos e antisépticos

-beta-lactamicos-aminoglicosideos-quinolonas

Page 3: Outbreaks of Multidrug-resistant  Pseudomonas aeruginosa  in Community Hospitals Japan

Introdução

-infecção no trato urinário envolvendo P. aeruginosa (cepa IMCJ2.S1) resistente a vários medicamentos em um hospital do Japão

-possui novo integron classe 1(In113) contendo 3 genes cassetes:

Gene Metalo-β-lactamase(MBL) blaIMP-1

Gene aminoglicosídeo 6’-acetiltransferase aac(6’)-Iae Gene aminoglicosídeo 3’-adneliltransferase aadA1

- mutação nos genes gyrA e parC (substituição de aminoácidos) resistência a fluoroquinolonas

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Material e Métodos - 13 hospitais do Japão - outubro de 2003 a setembro de 2004 - 284 isolados clínicos de P. aeruginosa

-214 isolados clínicos - MDR

214 isolados - MDR

70 isolados - não MDR

72 – urina 55 - cateter urinário

18 – trato respiratório

5 – fezes

2 – ponta de cateter

2 – feridas

99/214

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Material e MétodosTeste bioquímico - confirmação da identidade das espécies através de métodos colorimétricos com kit API20NESorotipagem – teste de aglutinação Suscetibilidade antimicrobiana – através do MIC50 e MIC90

Screening para produção de MBL (multiresistência a β-lactâmicos)Detecção imunológica de AAC(´6) – Iae – através da aglutinação com Ac conjugadoPCR de integron classe 1 (já foi descrito previamente e a identificação do mesmo, na estrutura, caracteriza a multiresistência a drogas)PCR de QRDRs - identifica regiões determinantes de resistência a quinolonasLAMP (amplificação isotérmica de DNA)Sequenciamento de DNAEletroforese em gel de campo pulsátil - PFGE

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Resultados

Sorotipagem

-10 sorotipos identificados - O11, O1, O10, B, M, O4, O3, O6, O9, C

-214 MDR 212 O11 (99%)

-70 não MDR – variável O1, O3, O4, O6, O9, O10, O11, B, C, M

- O11 – predominante para MDR P. aeruginosa nesta população

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Resultados Suscetibilidade Microbiana

MDR P. aeruginosa

- Resistência - maioria dos isolados MDR P.aeruginosa apresentou resistência a todos os antimicrobianos

- Sensibilidade

Não MDR P. aeruginosa

-Resistência – menos de 63%, exceto para STR ( 98,6%)

Gentamicina (GEN) – 57,5% de resistência

Polimixina B ( PL-B) – 28,0% de resistência

Page 8: Outbreaks of Multidrug-resistant  Pseudomonas aeruginosa  in Community Hospitals Japan

Resultados Screening para verificação de produção de MBL - 214 MDR – 212 produziram MBL

Detecção imunológica de AAC(6´)Iae

Page 9: Outbreaks of Multidrug-resistant  Pseudomonas aeruginosa  in Community Hospitals Japan

Resultados Detecção de integrons classe 1 (PCR) - 230/284 – positivo para integron classe1 - 212/230 – apresentaram mesmo tamanho de banda comparado

ao integron classe 1 In113

Resistência a fluorquinolonas GyrA -254/284 isolados clínicos - substituição de aminoácido ParC -244/284 isolados clínicos - substituição de aminoácido GyrB -70/284 isolados clínicos - substituição de aminoácido ParE -30/284 isolados clínicos - substituição de aminoácido

Page 10: Outbreaks of Multidrug-resistant  Pseudomonas aeruginosa  in Community Hospitals Japan

Resultados Análise do gene aac(6’)-Iae (Método de LAMP)

-Laranja para verde = amplificação positiva

-212/284 positivo

-Concordância com os resultados de PCR

-presença de gene aac (6’)-Iae – MDR cepas

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Resultados PCR=LAMP

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Resultados Genotipagem por PFGE

MDR P.aeruginosa 211/214 – cluster A – associação com a resistência a múltiplas

drogas

Não MDR P.aeruginosa genótipos variáveis

Page 13: Outbreaks of Multidrug-resistant  Pseudomonas aeruginosa  in Community Hospitals Japan

Discussão Demonstrou expansão clonal de MDR P. areuginosa em

hospitais no Japão.

Esta é a primeira descrição de um surto em larga escala de infecção nosocomial causada por um único clone de P. aeruginosa, com alto nível de resistência a um grande número de antibióticos.

Page 14: Outbreaks of Multidrug-resistant  Pseudomonas aeruginosa  in Community Hospitals Japan

Discussão A maioria dos isolados MDR testados (205 de 214)

apresentavam sorotipo O11.

Os sorotipos O11 e O12 tem sido mais associados com surtos de P. aeruginosa.

Surtos de P. aeruginosa, sorotipo O11:- 1980 – Estados Unidos;- 1994 e 1995 – Grécia;- Recentemente: Bélgica e Japão

Não se sabe porque estes dois sorotipos específicos estão envolvidos em mais surtos de P. aeruginosa.

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Discussão

Aac(6’)-Iae - bom candidato para marcador de infecção por MDR P. aeruginosa, já que 99% das MDR isoladas apresentaram o gene aac(6’)-Iae.

Detecção de aac(6’)-Iae e seu produto: - LAMP (amplificação isotérmica do DNA): método simples e com

alta especificidade; - Aglutinação com Ac-conjugado: menos específico, mas

suficientemente preciso para detectar MDR de P. areuginosa.

Page 16: Outbreaks of Multidrug-resistant  Pseudomonas aeruginosa  in Community Hospitals Japan

Discussão MDR P. aeruginosa pode ter se espalhado no Japão devido

ao crescente uso de carbapenemos, aminoglicosídeos e fluoroquinolonas.

Vigilância nacional para MDR P. aeruginosa está sendo planejada.

Medidas consideradas eficazes na prevenção de infecção nosocomial por P. aeruginosa em hospitais:• Monitorar fontes ambientais de bactérias;• Limpeza de locais contaminados;• Revisão das medidas de controle de infecções no

tratamento da urina.

Page 17: Outbreaks of Multidrug-resistant  Pseudomonas aeruginosa  in Community Hospitals Japan

Discussão

Modo de transmissão de MDR P. areuginosa entre hospitais – desconhecido

Transferência de pacientes infectados entre hospitais pode ser uma causa.

31 pacientes infectados com MDR P. areuginosa foram transferidos de outros hospitais para os hospitais participantes do estudo.

Page 18: Outbreaks of Multidrug-resistant  Pseudomonas aeruginosa  in Community Hospitals Japan

Análise Crítica Trabalho com uma quantidade grande de informações

Vários métodos de identificação e caracterização foram utilizados - estão dispostos de maneira ordenada na descrição de Materiais e Métodos;- em Resultados as informações ficaram um pouco dispersas, às vezes, trazendo confusão para o entendimento.

Na discussão não houve aprofundamento dos assuntos abordados e não há uma conclusão finalizando esta discussão.