PERFIL IMUNOLÓGICO PERFIL IMUNOLÓGICO DO HIV - AIDSDO HIV - AIDS

Profa. Renata Aparecida de Camargo BittencourtDisciplina: Imunologia Clínica

Curso: Farmácia - UNIP

A DESCOBERTA DO HIV

1981 – surgiram os primeiros casos de aids/sida: pacientes adultos do sexo masculino, homossexuais apresentavam sarcoma de Kaposi, pneumonia por P. carinii e comprometimento do sistema imune

1981 – aids/ sida foi reconhecida como uma entidade nova e distinta

1983 – o HIV-1 foi isolado de pacientes com aids pelos pesquisadores Luc Montaigner, na França e Robert Gallo, nos EUA

1986 – Descoberta do HIV-2

Comitê Internacional recomendou o termo HIV (Human Immunodeficiency Virus ou Vírus da Imunodeficiência Humana

AGENTE ETIOLÓGICO

gp120

gp41

p17

p24

RNA

T. Reversa

A ESTRUTURA DO HIV

CICLO BIOLÓGICO DO HIV

HIV infecta as Células CD4

CICLO BIOLÓGICO DO HIV

CD4

Infectadapelo HIV

OS VÁRIOS EFEITOS DEVIDO A PERDA DAS CÉLULAS TCD4+

CD4

CD8 B

Macrófago

NK

Aparentemente, o HIV-1 e o HIV-2 passaram a infectar o homem há poucas décadas; alguns trabalhos científicos recentes sugerem que isso tenha ocorrido entre os anos 40 e 50.

As principais formas de transmissão do HIV são:

sexual;

sangüínea (em receptores de sangue ou hemoderivados e em usuários de drogas injetáveis, ou UDI);

vertical (da mãe para o filho, durante a gestação, parto ou por aleitamento).

FORMAS DE TRANSMISSÃO

Transmissão ocupacional

Os testes para detecção da infecção pelo HIV podem ser divididos basicamente em quatro grupos:

detecção de anticorpos: ELISA, Western-blot, Imunofluorescência indireta, Radioimunoprecipitação;

detecção de antígenos: pesquisa de Antígeno p24;

cultura viral;

amplificação do genoma do vírus: Análise quantitativa direta da carga viral através de técnicas baseadas na amplificação de ácidos nucleícos.

TESTES DIAGNÓSTICOS

O diagnóstico laboratorial, que revela a presença de O diagnóstico laboratorial, que revela a presença de Acs contra o HIV no sangue, indica que a pessoa já teve Acs contra o HIV no sangue, indica que a pessoa já teve em contato com o vírus, mas não é suficiente para em contato com o vírus, mas não é suficiente para fazer o diagnóstico da aids;fazer o diagnóstico da aids;

Testes de Triagem para Detecção de Acs anti-HIV Testes de Triagem para Detecção de Acs anti-HIV (Testes Sorológicos):(Testes Sorológicos): ELISA, Ensaio Imunoenzimático ELISA, Ensaio Imunoenzimático com Micropartículas (com Micropartículas (Microparticle Enzyme Immuno Microparticle Enzyme Immuno AssayAssay - Meia) e ensaio imunoenzimático com - Meia) e ensaio imunoenzimático com quimioluminescência. quimioluminescência.

TESTES DIAGNÓSTICOS

Teste RápidoTeste Rápido Detecção de anticorpos anti-HIV na Detecção de anticorpos anti-HIV na

amostra de sangue do paciente em amostra de sangue do paciente em até 30 minutos;até 30 minutos;

O teste rápido é preferencialmente O teste rápido é preferencialmente adotado em populações que moram adotado em populações que moram em locais de difícil acesso, em em locais de difícil acesso, em gestantes que não fizeram o gestantes que não fizeram o acompanhamento no pré-natal e em acompanhamento no pré-natal e em situações de acidentes no trabalho.situações de acidentes no trabalho.

TESTES DIAGNÓSTICOS

Janela ImunológicaJanela Imunológica Janela imunológica é o intervalo de Janela imunológica é o intervalo de

tempo entre a infecção pelo vírus HIV e tempo entre a infecção pelo vírus HIV e a produção de anticorpos anti-HIV no a produção de anticorpos anti-HIV no sangue.sangue.

Na maioria dos casos, a sorologia Na maioria dos casos, a sorologia positiva é constatada de 30 a 60 dias positiva é constatada de 30 a 60 dias após a exposição ao HIV. após a exposição ao HIV.

Janela ImunológicaJanela Imunológica Porém, existem casos em que esse tempo é Porém, existem casos em que esse tempo é

maior: o teste realizado 120 dias após a relação maior: o teste realizado 120 dias após a relação de risco serve apenas para detectar os casos de risco serve apenas para detectar os casos raros de soroconversão – quando há mudança raros de soroconversão – quando há mudança no resultado.no resultado.

Se um teste de HIV é feito durante o período da Se um teste de HIV é feito durante o período da janela imunológica, há a possibilidade de janela imunológica, há a possibilidade de apresentar um falso resultado negativo. apresentar um falso resultado negativo. Portanto, é recomendado esperar mais 30 dias e Portanto, é recomendado esperar mais 30 dias e fazer o teste novamente.fazer o teste novamente.

Testes Confirmatórios: Testes Confirmatórios:

1) Testes Sorológicos (detecção de Acs anti-HIV): 1) Testes Sorológicos (detecção de Acs anti-HIV):

Imunofluorescência Indireta;Imunofluorescência Indireta; Imunoblot;Imunoblot; Western Blot Western Blot

TESTES DIAGNÓSTICOS

Testes Confirmatórios: Testes Confirmatórios:

2) Testes Virais (detecção de RNA ou DNA do HIV):2) Testes Virais (detecção de RNA ou DNA do HIV):

Teste de amplificação de ácidos nucleícos, como a Reação Teste de amplificação de ácidos nucleícos, como a Reação em Cadeia da Polimerase (em Cadeia da Polimerase (Polimerase Chain Reaction – Polimerase Chain Reaction – PCRPCR););

Amplificação seqüencial de ácidos nucleícos (Amplificação seqüencial de ácidos nucleícos (Nucleic Acid Nucleic Acid Sequence Based Amplification – NasbaSequence Based Amplification – Nasba).).

TESTES DIAGNÓSTICOS

Monitoramento LaboratorialMonitoramento Laboratorial

Contagem CD4/CD8•Função: monitorar perfil imunológico e a eficácia do tratamento antiretroviral.

•Periodicidade: Em média 3 X por ano

•Metodologia: Citometria de Fluxo

•Diferenciação das populações de linfócitos T através da identificação de moléculas expressas na superfície (CD), com uso de anticorpos monoclonais

Preparação da Amostras de CD3/CD4/CD8

50uL sangue total

20uL reagente Tritest® (BD) – AcMm (Anti-CD3/CD4/CD8)

Vortex

Incubação 15 minutos (temperatura ambiente / escuro)

450uL solução de lise

Vortex

Incubação 15 minutos (temperatura ambiente / escuro)

Leitura no citômetro de fluxo

Anticorpo MonoclonalAnticorpo MonoclonalCD3 CD3 PerCPPerCPCD4 CD4 FITCFITC

CD8 CD8 PEPE

Contagem de células CD4 em sangue periférico:

maior que 500 células/mm3: estágio da infecção pelo HIV com baixo risco de doença;

entre 200 e 500 células/mm3: estágio caracterizado por surgimento de sinais e sintomas menores ou alterações constitucionais

entre 50 e 200 células/mm3: estágio com alta probabilidade de surgimento de doenças oportunistas

menor que 50 células/mm3: estágio com grave comprometimento de resposta imunitária.

Monitoramento LaboratorialMonitoramento LaboratorialGenotipagem: identifica quais são as mutações potencialmente responsáveis pela falha da terapia com ARV.

Com o aparecimento de variantes resistentes do HIV a eficácia da política de tratamento (padrão ouro no mundo) ficou em risco, uma vez que os pacientes não respondem adequadamente aos ARV.

Metodologia:Metodologia: Técnica de Técnica de

Sequenciamento Sequenciamento Automático de Automático de

DNADNA

Rede Nacional de Laboratórios para Contagem de Rede Nacional de Laboratórios para Contagem de Linfócitos T (CD4+/CD8+) e para quantificação Linfócitos T (CD4+/CD8+) e para quantificação

viral do HIV ( carga viral)viral do HIV ( carga viral)

Visando ao monitoramento da evolução clínica de indivíduos Visando ao monitoramento da evolução clínica de indivíduos infectados pelo HIV, a introdução de terapias anti-retroviral e infectados pelo HIV, a introdução de terapias anti-retroviral e preventivas das infecções oportunistas, assim como sua preventivas das infecções oportunistas, assim como sua efetividade, o Programa Nacional de DST/AIDS implantou e efetividade, o Programa Nacional de DST/AIDS implantou e implementou a Rede Nacional de Laboratórios para implementou a Rede Nacional de Laboratórios para contagem de linfócitos T (CD4+/CD8+) e carga viral do HIV. contagem de linfócitos T (CD4+/CD8+) e carga viral do HIV.

ASPECTOS CLÍNICOS

A infecção pelo HIV pode ser dividida em quatro fases clínicas:

1) infecção aguda: ocorre em cerca de 50% a 90% dos pacientes, o tempo entre a exposição e os sintomas é de cinco a 30 dias;

2) fase assintomática, também conhecida como latência clínica;

3) fase sintomática inicial ou precoce;

4) Aids.

EVOLUÇÃO TÍPICA DE UM INDIVÍDUO INFECTADO PELO

HIV