Embed Size (px)
Citation preview
UNIVERSIDADE FEDERAL DO ESPIacuteRITO SANTO
CENTRO DE CIEcircNCIAS AGRAacuteRIAS
PROGRAMA DE POacuteS-GRADUACcedilAtildeO EM PRODUCcedilAtildeO VEGETAL
KHAREN PRISCILLA DE OLIVEIRA SILVA SALOMAtildeO
EXTRATOS VEGETAIS E Bacillus thuringiensis VISANDO O
MANEJO DE Duponchelia fovealis ZELLER (LEPIDOPTERA
CRAMBIDAE)
ALEGRE ndash ES
2014
KHAREN PRISCILLA DE OLIVEIRA SILVA SALOMAtildeO
EXTRATOS VEGETAIS E Bacillus thuringiensis VISANDO O
MANEJO DE Duponchelia fovealis ZELLER (LEPIDOPTERA
CRAMBIDAE)
Dissertaccedilatildeo apresentada ao Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal da Universidade Federal do Espiacuterito Santo como requisito parcial para obtenccedilatildeo do tiacutetulo de Mestre em Produccedilatildeo Vegetal na aacuterea Fitossanidade
Orientador Prof Dr Dirceu Pratissoli
Coorientadores Prof Dr Hugo Joseacute Gonccedilalves dos Santos Junior e Profordf Drordf Patriacutecia Fontes Pinheiro
ALEGRE ndash ES
2014
Dados Internacionais de Catalogaccedilatildeo-na-publicaccedilatildeo (CIP)
(Biblioteca Setorial de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Espiacuterito Santo ES Brasil)
Salomatildeo Kharen Priscilla de Oliveira Silva 1986-
S174e Extratos vegetais e Bacillus thuringiensis visando o manejo de
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) Kharen Priscilla de
Oliveira Silva Salomatildeo ndash 2014
60 f il
Orientador Dirceu Pratissoli
Coorientadores Hugo Joseacute Gonccedilalves dos Santos Junior Patriacutecia
Fontes Pinheiro
Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Universidade Federal do
Espiacuterito Santo Centro de Ciecircncias Agraacuterias
1 Controle microbiano 2 Morango 3 Plantas inceticidas 4 Manejo
fitossanitaacuterio de pragas I Pratissoli Dirceu II Santos Junior Hugo Joseacute
Gonccedilalves dos III Pinheiro Patriacutecia Fontes IV Universidade Federal do
Espiacuterito Santo Centro de Ciecircncias Agraacuterias V Tiacutetulo
CDU 63
DEDICATOacuteRIA
Dedico este trabalho a Deus que me capacita a cada dia
Aos meus pais Neacir e Regilaine pelo amor e pelo ensinamento ao longo da vida
Ao meu amor Felipe
AGRADECIMENTOS Agradeccedilo a Deus por este sonho realizado por me capacitar e por me abenccediloar
com uma famiacutelia maravilhosa e amigos tatildeo queridos
Aos meus pais Neacir e Regilaine e aos meus irmatildeos Monique Leonardo Anna e
David pelo apoio e carinho em todos os momentos da minha vida fazendo o
possiacutevel e o impossiacutevel para que este sonho fosse realizado Pela compreensatildeo
conselhos e incentivo nos momentos difiacuteceis
Ao meu amor Felipe por todo apoio e incentivo durante essa jornada Pelas horas
de ligaccedilatildeo e companheirismo em todos os momentos
Ao Prof Dr Dirceu Pratissoli pela oportunidade de estaacutegio durante minha
graduaccedilatildeo pela orientaccedilatildeo e a oportunidade de cursar o mestrado em Produccedilatildeo
Vegetal no NUDEMAFI
Ao meu coorientador Prof Dr Hugo Joseacute Gonccedilalves dos Santos Junior pela grande
colaboraccedilatildeo amizade e conselhos ao longo desta etapa
Aos meus amigos e funcionaacuterios do Laboratoacuterio de entomologia do NUDEMAFI que
estiveram presentes em todos os momentos
Ao meu amigo Leonardo Mardgan pelo apoio e amizade
Agrave minha amiga e irmatilde do coraccedilatildeo Lauana pelo carinho e amizade durante toda
minha estadia em Alegre
Ao meu amigo Vitor pela amizade e apoio nas revisotildees
Aos meus amigos Lorena Ingrid Amanda Priscila e Joatildeo que investiram parte de
seus dias comigo na Torre e na Cacircmara de fluxo fazendo bem mais agradaacutevel a
montagem dos experimentos
Agrave minha companheira de escrita Deacutebora F M Fragoso pela amizade carinho e
incentivo
Agrave minha amiga Rebeca pelas oraccedilotildees e conselhos
Ao amigo Joseacute Romaacuterio pelo enorme apoio e pelas horas investidas ao meu auxiacutelio
Agrave galera da Duponchelia fovealis Marcel Joatildeo Ingrid Hiacutegor Francieli Victor P
Romaacuterio Alixelhe pelas brincadeiras durante as muitas horas de manutenccedilatildeo
Ao Programa de Produccedilatildeo Vegetal do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo e aos professores Edvaldo Turi (Joseacute Augusto) e Dirceu
Aos professores da minha banca examinadora Hugo Bolsoni Zago Anderson
Mathias Holtz e Leandro Pin Dalvi pela prontidatildeo e disponibilidade
Agrave Coordenaccedilatildeo de Aperfeiccediloamento de Pessoal de Niacutevel Superior (CAPES) pelo
concedimento da bolsa de estudo ao CNPq e a FAPES pelo auxiacutelio financeiro
ldquoAs palavras dos meus laacutebios e o meditar do meu coraccedilatildeo sejam agradaacuteveis na tua presenccedila Senhor rocha minha e redentor meurdquo
Salmos 1914
BIOGRAFIA
Kharen Priscilla de Oliveira Silva Salomatildeo nascida em Aimoreacutes Estado de Minas
Gerais em 04 de novembro de 1986 filha de Neacir de Oliveira Silva e Regilaine
Salomatildeo da Silva Cursou o estudo fundamental nas escolas Escola Estadual
Machado de Assis e Escola Estadual Frei Afonso Maria Jordaacute e o ensino meacutedio no
Centro Federal de Ensino Tecnoloacutegico ndash Unidade Descentralizada de Colatina ES
onde concluiu o ensino meacutedio em 2005 Aos 20 anos ingressou no curso de
Agronomia do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade Federal do Espiacuterito
Santo em Alegre-ES Durante a graduaccedilatildeo fez parte do Laboratoacuterio de entomologia
como estagiaacuteria voluntaacuteria e posteriormente ingressou na pesquisa atraveacutes do
programa de Iniciaccedilatildeo Cientiacutefica Aos 26 anos de idade obteve o tiacutetulo de Bacharel
em Agronomia e ingressou no Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal
do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade Federal do Espiacuterito Santo atuando
na aacuterea de controle bioloacutegico sob a orientaccedilatildeo do Prof Dr Dirceu Pratissoli Aos 21
de fevereiro de 2014 defendeu sua dissertaccedilatildeo para obtenccedilatildeo do tiacutetulo de Mestre
em Produccedilatildeo Vegetal Aacuterea de Concentraccedilatildeo em Fitossanidade (Entomologia)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) foi relatada em
plantios comerciais do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando
grandes problemas agrave cultura Poreacutem por ser uma praga recente natildeo haacute registro de
produtos para o seu controle A cada dia aumenta a demanda por alimentos e outros
produtos livres de resiacuteduos aleacutem da necessidade de uma agricultura mais
desenvolvida e sustentaacutevel Pesquisas com agentes de controle bioloacutegico e extratos
vegetais surgem como alternativa para o manejo desse inseto-praga Este trabalho
teve como objetivo avaliar a eficiecircncia de formulados comerciais agrave base de Bacillus
thuringiensis e a atividade do uso dos extratos aquosos de alho e fumo visando sua
adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle de D fovealis Nos bioensaios para
avaliar a patogenicidade e virulecircncia de duas formulaccedilotildees comerciais agrave base de B
thuringiensis Agreereg e Dipel WPreg sobre a dieta artificial adaptada agrave base de farelo
de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta por King e Hartley (1985) para Diatraea
saccharalis (Lepidoptera Crambidae) foram inoculados 70 microL de cada formulado
comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 Em seguida avaliou-se a
virulecircncia dos respectivos formulados isso atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo
letal (CL50) para o estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados
encontrados observou-se que o estaacutegio 1 de desenvolvimento apresentou 9588 e
8676 de mortalidades para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente
demonstrando patogenicidade e virulecircncia agrave D fovealis No bioensaio para avaliar a
atividade dos extratos aquosos de alho e fumo estes foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) Todos os tratamentos foram pulverizados com Torre de
Potter calibrada a pressatildeo de 15 lbpolsup2 Posteriormente estimou-se a concentraccedilatildeo
letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou 95 de mortalidade no
teste de suscetibilidade Desta forma com os resultados obtidos na presente
pesquisa concluiu-se que a utilizaccedilatildeo de formulados comerciais agrave base de B
thuringiensis e extrato de fumo podem ser uma alternativa no manejo fitossanitaacuterio
de D fovealis
Palavras-Chave Controle microbiano Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de
Pragas Morango
ABSTRACT
PLANT EXTRACTS AND Bacillus thuringiensis Berliner ON Duponchelia fovealis
ZELLER (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE) MANAGEMENT
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) caterpillar was recently
reported in commercial strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing
major problems to the crops but by being a recent plague there is no products
registration for its control The demand for food and other products free of waste
increases every day plus the need for a more developed and sustainable agriculture
In this scenario researches with biological control agents and plant extracts are an
alternative for the management of this insect pest This study was carried out to
assess the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis and the
activity of garlic and tobacco aqueous extracts as alternative methods of D fovealis
control In the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of two
commercial formulations of B Thuringiensis Agree reg and Dipel reg WP were
inoculated 70 microL of each commercial formula on the diet at a concentration 1 x 108
sporesmL-1 Then the virulence of each formulated was evaluated by estimating the
lethal concentration (LC50) for the stage with the greatest susceptibility In view of
the results it was observed that the development stage 1 showed 9588 and 8676
of mortalities for Agreereg and Dipelreg WP respectively products Both formulated
based on B thuringiensis showed pathogenicity and virulence to D fovealis In the
bioassay to evaluate the activity of garlic and tobacco aqueous extracts these were
applied at a 10 concentration (mv) All treatments were sprayed with Potterrsquos
Tower calibrated at 15lbinsup2 Later it was estimated lethal concentration (LC50) of the
tobacco aqueous extract which showed 95 mortality in susceptibility testing Thus
it was concluded that the use of commercial formulated based on B thuringiensis
and tobacco extract may be an alternative on phytosanitary control of D fovealis
Keywords Microbial control Insecticidal plants Phytosanitary Pest Management
Strawberry
LISTA DE TABELAS
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) 38
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) 380
Tabela 3 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingretiente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) 52
Tabela 4 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)Erro Indicador natildeo definido5
SUMAacuteRIO
CAPIacuteTULO 1 14
1 INTRODUCcedilAtildeO 14
2 REVISAtildeO DE LITERATURA 16
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE) 16
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis 18
221 Controle cultural 19
222 Controle Quiacutemico 19
223 Controle Comportamental 19
224 Controle Bioloacutegico 20
225 Extratos Vegetais 24
3 REFEREcircNCIAS 27
CAPIacuteTULO 2 32
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 32
RESUMO 32
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (LepidopteraCrambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 33
4 INTRODUCcedilAtildeO 34
41 MATERIAL E MEacuteTODOS 35
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 35
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis 36
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) 37
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO 37
43 CONCLUSAtildeO 41
44 REFEREcircNCIAS 42
CAPIacuteTULO 3 45
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis Zeller
(Lepidoptera Crambidae) 45
RESUMO 45
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) 46
5 INTRODUCcedilAtildeO 47
51 MATERIAL E MEacuteTODOS 48
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 48
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho 49
513 Suscetibilidade de D fovealis agrave extrato aquoso de fumo e alho 50
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL) 51
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO 51
53 CONCLUSAtildeO 55
54 REFEREcircNCIAS 56
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 59
14
CAPIacuteTULO 1
1 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro (Fragaria x ananassa Duch) eacute produzida nas mais
variadas regiotildees do mundo Pertencente agrave famiacutelia Rosaceae a espeacutecie foi originada
do cruzamento entre espeacutecies silvestres (F chiloensis L e F virginiana Duchesne)
(CASTRO 2004) No Brasil a cultura encontra-se difundida em regiotildees de clima
temperado e subtropical sendo a produccedilatildeo destinada agrave induacutestria e ao consumo in
natura Trata-se de uma cultura altamente exigente em praacuteticas culturais em toda
sua cadeia produtiva desde a implantaccedilatildeo ateacute a poacutes-colheita contudo se destaca
pela alta rentabilidade e intensa demanda por matildeo-de-obra (OLIVEIRA
SCIVITTARO 2009)
No estado do Espiacuterito Santo essa cultura foi implantada comercialmente no meado
do seacuteculo XX e expandiu-se significativamente a partir da metade da deacutecada de 90
sendo entatildeo considerada uma cultura de destaque no estado (BALNINO MARIN
2006) Em meacutedia satildeo produzidas 5960 toneladas de morango ao ano ocupando
uma extensatildeo de 185 hectares envolvendo praticamente 1500 propriedades de
base familiar assumindo um relevante fator de distribuiccedilatildeo de renda no meio rural
Mediante a importacircncia da cultura do morangueiro e a necessidade de organizaccedilatildeo
do processo produtivo e comercial criou-se um polo o qual tem como ecircnfase o uso
de sistemas de produccedilatildeo sustentaacuteveis por meio da utilizaccedilatildeo de tecnologias
apropriadas Desse polo participam principalmente os municiacutepios da regiatildeo das
montanhas capixabas com destaque para Santa Maria de Jetibaacute Domingos Martins
e Venda Nova do Imigrante (INCAPER 2010)
Contudo a cultura do morangueiro apresenta inuacutemeros problemas fitossanitaacuterios
Segundo Fornazier e Pratissoli (2006) um dos principais problemas na referida
cultura satildeo os aacutecaros No entanto em 2010 foi registrada a ocorrecircncia de
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) no municiacutepio de Santa Maria
de Jetibaacute destacando-se pela capacidade de dano raacutepido crescimento populacional
e alta capacidade de dispersatildeo (FORNAZIER et al 2011)
15
Por se tratar de uma praga que natildeo haacute registro de produtos para seu controle no
Ministeacuterio da Agricultura Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) produtores tecircm
recorrido ao uso de produtos quiacutemicos registrados para outras culturas o que vai
contra a legislaccedilatildeo aleacutem acarretar seacuterios prejuiacutezos ao agroecossistema (ALHO
2011) tais como altos niacuteveis de resiacuteduos toacutexicos nos produtos intoxicaccedilotildees ao
homem e mamiacuteferos resistecircncia de pragas a inseticidas contaminaccedilatildeo ambiental
aleacutem de elevar o custo de produccedilatildeo
Sendo assim uma alternativa para diminuir os impactos causados pelo meacutetodo
convencional eacute a adoccedilatildeo de medidas fitossanitaacuterias que reduzam a populaccedilatildeo de
insetos-praga e natildeo ocasionem impactos negativos sobre o meio ambiente e aos
inimigos naturais presentes na aacuterea Uma dessas medidas eacute o Manejo Fitossanitaacuterio
de Pragas (MFP) que engloba princiacutepios e meacutetodos isolados ou em conjunto que
visam garantir maior produtividade e menor agressividade ao meio ambiente visando
manejar o inseto-praga reduzindo seu niacutevel de dano (ALVEZ et al 2007)
Entre as medidas adotadas no MFP o uso de produtos formulados a partir de
agentes bioloacutegicos como a bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner
(Eubacteriales Bacillaceae) se mostra como alternativa eficiente devido agrave
especificidade com relaccedilatildeo a pragas-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e
animais (POLANCZYK ALVES 2003)
Aleacutem desses agentes bioloacutegicos a utilizaccedilatildeo de inseticidas botacircnicos derivados de
plantas ou parte das mesmas obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo
podem exercer atividade toacutexica aos insetos interferindo no desenvolvimento haacutebito
alimentar oviposiccedilatildeo repelecircncia ou mesmo morte (WIESBROOK 2004 SOUZA
ARAUacuteJO NASCIMENTO 2007) No passado o mercado de inseticidas botacircnicos
era dominado pelas piretrinas azadiractina e as rotenonas poreacutem outros inseticidas
botacircnicos vecircm ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) e o alho
(Allium sativum L) entre outras espeacutecies botacircnicas (ISMAN 1997)
A necessidade da implementaccedilatildeo de pesquisas que visam avaliar a eficiecircncia de
meacutetodos de manejo alternativo aplicaacuteveis agrave D fovealis satildeo de grande importacircncia
Nesse sentido este estudo teve por meta avaliar a eficiecircncia do agente de controle
bioloacutegico B thuringiensis e dos extratos aquosos de Fumo e Alho sob condiccedilotildees de
laboratoacuterio visando proporcionar alternativas de manejo viaacuteveis para a implantaccedilatildeo
de programas de manejo fitossanitaacuterio de D fovealis
16
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE)
A Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) tem sua origem na regiatildeo
do Mediterracircneo e nas Ilhas Canaacuterias poreacutem pode ser encontrada em diversas
partes na Aacutefrica Oriente Meacutedio Europa Canadaacute e Estados Unidos da Ameacuterica
(HOFFMAN 2010) O primeiro relato dessa praga fora da sua aacuterea nativa foi em
estufas na Finlacircndia em 1984 e posteriormente em 1989 encontrado na Holanda
fora das estufas (CFIA 2005) Nos Estados Unidos foi detectada pela primeira vez
em 2004 em plantios de begocircnia na Califoacuternia e em 2005 no Canadaacute (GILL 2013)
No Brasil foi constatada em 2008 no estado do Paranaacute e posteriormente no estado
do Espiacuterito Santo Poreacutem apenas em 2010 a espeacutecie foi identificada por uma
especialista do USDA (United States Department of Agriculture) (ZAWADNEAK et
al 2011) Os mesmos autores citam que os primeiros relatos reportam que a praga
foi encontrada no estado do Paranaacute em lavouras comerciais de morango em
condiccedilotildees de cultivo protegido tipo tuacutenel alto nos cultivares Albion e Camino real
Posteriormente a mesma foi encontrada na cultivar Portola no estado do Espiacuterito
Santo Os produtores capixabas tambeacutem constataram a presenccedila de D fovealis nos
cultivares Aromas Albion e Camino Real produzidos em tuacutenel baixo
A lagarta D fovealis eacute uma praga poliacutefaga que gera grandes problemas em diversas
variedades de cultivos de plantas ornamentais e culturas agriacutecolas especialmente
em cultivos em estufa Essa espeacutecie foi relatada em mais de 70 espeacutecies
hospedeiras em cerca de 38 famiacutelias de plantas como ornamentais dos gecircneros
Amaranthus Anthurium Begonia e culturas comercialmente cultivadas como
Capsicum annuum L e Solanum lycopersicum L Fragaria x ananassa entre outras
(GILL 2013)
Com relaccedilatildeo ao ciclo de vida de D fovealis pode-se salientar que eacute um inseto com
desenvolvimento holometaboacutelico Os adultos medem cerca de 19 a 21 mm de
comprimento satildeo de coloraccedilatildeo castanho acinzentado com aneacuteis mais claros no
abdocircmen e possuem uma linha irregular branco-amarelada atraveacutes das asas Os
17
adultos ficam sob as folhas possuem haacutebito noturno e durante o dia podem realizar
voos curtos (MURPHY 2008 RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010) Em
repouso o adulto manteacutem as asas planas em forma triangular e o abdocircmen se
posiciona voltado para cima (HOFFMAN 2010) Os machos possuem o abdocircmen
mais longo e delgado que o da fecircmea (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010)
Os adultos podem viver durante uma a duas semanas sendo que a fecircmea adulta
potildee ateacute 200 ovos durante esse periacuteodo Os ovos possuem formato oval e
inicialmente apresentam coloraccedilatildeo verde-esbranquiccedilada ficando vermelho com o
desenvolvimento do embriatildeo ateacute apresentarem pontuaccedilotildees marrons que ocorrem
antes da eclosatildeo das lagartas (FRANCO BAPTISTA 2010) Satildeo ovipositados
isoladamente ou em massas de trecircs a dez ovos sobrepostos seja na parte inferior
das folhas perto das veias na base do talo na base da planta ou na camada
superior do solo (RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010 HOFFMAN 2010)
O periacuteodo de incubaccedilatildeo dos ovos varia em torno de seis dias dependendo da
temperatura local
As lagartas medem entre 20 a 30 mm de comprimento possuem coloraccedilatildeo branca
amarelada com pontos marrons longitudinalmente distribuiacutedos pelo corpo com pelo
menos um pelo em cada ponto e com cabeccedila de coloraccedilatildeo marrom-escura
(RICHTER 2009 GILL 2013) Alimentam-se de folhas flores brotos frutos e restos
de folhasplanta em decomposiccedilatildeo e em culturas plantadas com maior densidade
podem ser encontradas se alimentando de qualquer parte da planta (BRAMBILA
STOCKS 2010) As lagartas se desenvolvem rapidamente satildeo muito aacutegeis e
preferem locais uacutemidos na base da planta proacuteximo ao solo na camada superior do
solo ou em raiacutezes expostas das plantas (HOFFMAN 2010) As lagartas satildeo
adaptadas a condiccedilotildees de alta umidade e podem tolerar ateacute mesmo condiccedilotildees de
alagamento podendo ser encontradas em plantas aquaacuteticas e em lugares salinos
(BRAMBILA STOCKS 2010)
As lagartas tendem a ficar em locais protegidos como no colo da planta tuacuteneis nos
caules e em estaacutedios mais avanccedilados podem se alimentar da haste principal
inclusive abaixo da linha do solo (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010) Alimentam-se dos tecidos da coroa da planta provocando a
interrupccedilatildeo da circulaccedilatildeo de seiva o que ocasiona o aparecimento de necrose nas
18
bordas das folhas e posteriormente a morte da planta (FRANCO BAPTISTA
2010) Durante a alimentaccedilatildeo tecem teias entre as folhas baixeiras (aquelas que
ficam em contato com o canteiro) nas quais ficam protegidas e posteriormente
empupam (MURPHY 2008) Devido seu ataque a D fovealis pode danificar caules
folhas e frutos reduzindo a produccedilatildeo e inviabilizando o produto para o mercado in
natura aleacutem disso a injuacuteria causada pelo ataque pode servir como meio de entrada
para diferentes patoacutegenos (GILL 2013)
As pupas satildeo marrom-claro com aproximadamente 9 a 10 mm de comprimento O
casulo que as envolve eacute oval feito de seda fezes e partiacuteculas do solo e eacute construiacutedo
no solo (BETHKE VANDER MEY 2010) Natildeo haacute relatos de toleracircncia ao frio ou
qualquer tipo de diapausa durante qualquer parte do ciclo de vida Portanto poderia
completar vaacuterias geraccedilotildees anualmente sob condiccedilotildees ideais (HOFFMAN 2010)
Desta forma considerando o ciclo de desenvolvimento e consequentemente o
nuacutemero de geraccedilotildees anuais a presenccedila de plantios escalonados dentro de uma
mesma aacuterea pode resultar no aumento da populaccedilatildeo de D fovealis como tambeacutem
interferir em praacuteticas de controle existentes como Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas
(MFP) e de biocontrole que podem ser interrompidos pela necessidade de aplicaccedilatildeo
de inseticidas para controlar o inseto (CFIA 2005)
A disseminaccedilatildeo dessa praga pode ocorrer atraveacutes do comeacutercio de material vegetal
propagativo e natildeo propagativo logo medidas quarentenaacuterias satildeo necessaacuterias para
evitar a introduccedilatildeo dessa praga em aacutereas livres de ocorrecircncia (BRAMBILA
STOCKS 2010)
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis
O manejo dessa praga inclui controle cultural quiacutemico comportamental e bioloacutegico
devendo ser coordenado de acordo com o monitoramento da populaccedilatildeo
19
221 Controle cultural
Embora D fovealis esteja geralmente escondida inspeccedilotildees visuais regulares podem
auxiliar na detecccedilatildeo de sua presenccedila da fase jovem que pode ser constatada pela
existecircncia de danos nas folhas flores bototildees florais e hastes bem como dejetos e
buracos na superfiacutecie do solo (BRAMBILA STOCKS 2010) Fornazier et al (2011)
recomendam a retirada e a destruiccedilatildeo de folhas velhas se possiacutevel semanalmente
visando a reduccedilatildeo do nuacutemero de ovos e pupas evitando o raacutepido crescimento e
dispersatildeo populacional da praga
222 Controle Quiacutemico
No Brasil ainda natildeo haacute nenhum produto registrado no Ministeacuterio da Agricultura
Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) Poreacutem em outros paiacuteses os produtos relatados
para o controle de lagartas D fovealis satildeo Spinosade Bifentrina Fluvalinato
Deltametrina Esfenvalerato Orthene Lambdacialotrina Imidaclopride Metomil
Ethoprop Acefato Emamectina Permetrina Clorantraniliprol e Azadirachtin
(PIJNAKKER 2001 CFIA 2005 BETHKE VANDER MEY 2010) Aleacutem disso
Bethke e Vander Mey (2010) ainda recomendam que em ambiente de estufa para
controle dos adultos as aplicaccedilotildees tipo aerossol ou neacutevoa sejam realizadas no
periacuteodo noturno isso devido a maior atividade dos adultos
223 Controle Comportamental
Armadilhas luminosas com luz ultravioleta (UV) podem ser usadas para monitorar a
atividade da mariposa adulta em aacutereas em que a D fovealis estaacute estabelecida
Hoffman (2010) relata o sucesso da utilizaccedilatildeo dessas armadilhas em plantios nos
Estados Unidos Haacute relatos no Reino Unido de coletas de insetos adultos cerca de
20
10 km das estufas infestadas jaacute na Holanda foram encontrados insetos em
armadilhas luminosas a 100 km de sua ocorrecircncia (CFIA 2005)
Outra alternativa eacute a utilizaccedilatildeo de armadilhas tipo Delta com feromocircnio sexual ou
armadilhas que associem aacutegua e feromocircnio sendo estas especiacuteficas para adultos
machos de D fovealis (MURPHY 2008 DEVENTER 2009)
224 Controle Bioloacutegico
a Entomoacutefagos
Parasitoides de ovos do gecircnero Trichogramma (Hymenoptera Trichogrammatidae)
destacam-se pela ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica e pela vasta quantidade de
hospedeiros principalmente da ordem Lepidoptera (PRATISSOLI et al 2002) Na
Alemanha Zimmermann (2004) e Jaumlckel e Kurzhals (1995) relataram a ocorrecircncia
das espeacutecies Trichogramma evanescens Westwood Trichogramma cacoeciae
Marchal e Trichogramma brassicae Bezdenko parasitando ovos de D fovealis
Os agentes de controle bioloacutegico presentes no solo tambeacutem podem ser utilizados
entre eles estatildeo o besouro Atheta coriaria (Kraatz) (Coleoptera Staphylinidae) um
predador de ovos e lagartas neonatas o percevejo Podisius sp (Hemiptera
Pentatomidae) um predador de lagartas (MURPHY 2008) e aacutecaros predadores de
ovos Hypoaspis miles (Berlese) e Hypoaspis aculeifer (Canestrini) (Acari
Laelapidae) (CFIA 2013) Outro agente utilizado com sucesso em programas de
controle bioloacutegico de lagartas da famiacutelia Crambidae eacute a vespa endoparasitoide
Cotesia flavipes (Cameron) (Hymenoptera Braconidae) (SALLAM et al 2001) que
jaacute foi relatada por Zawadneak et al (2011) em lavouras de morango no estado do
Paranaacute na qual apresentou potencial para o controle de D fovealis
21
b Entomopatoacutegenos
b1 Nematoides
Os nematoides mais utilizados no controle de insetos pertencem agrave famiacutelia
Steinernematidae Estes tecircm sido aplicados em diversas culturas e mesmo em
outras situaccedilotildees para controle de um grande nuacutemero de insetos (ALVEZ 1998)
Nematoides entomopatogecircnicos jaacute vecircm sendo utilizados em outros paiacuteses no
manejo de D fovealis Stocks e Hodges (2013) citam a utilizaccedilatildeo da espeacutecie
Heterorhabditis bacteriophora (Poinar) (Nematoda Heterorhabditidae) jaacute Jaumlckel e
Kurzhals (1995) relatam que as espeacutecies Steinernema carpocapsae (Weiser) e S
feltiae (Filipjev) (Nematoda Steinernematidae) foram eficientes no controle de D
fovealis em diferentes estaacutedios larvais sendo que no estaacutedio 3 de desenvolvimento
essas espeacutecies proporcionaram 60 e 20 de mortalidade respectivamente
b2 Fungos entomopatogecircnicos
Os fungos entomopatogecircnicos Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok
(Hypocreales Clavicipitaceae) e Beauveria bassiana (Bals) Vuill (Hypocreales
Cordycipitaceae) satildeo muito utilizados devido agrave facilidade de produccedilatildeo ampla
distribuiccedilatildeo geograacutefica variedade de hospedeiros e ocorrecircncia em condiccedilotildees
naturais enzooacuteticas ou epizooacuteticas sendo ainda comumente encontrados no solo
mostrando-se como uma alternativa eficiente devido agrave especificidade com relaccedilatildeo agrave
praga-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e animais (ALVES 1998)
b3 Bacteacuteria entomopatogecircnica
A bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner eacute uma bacteacuteria
naturalmente encontrada no solo aeroacutebia ou facultativamente anaeroacutebia gram
22
positiva pertencente agrave famiacutelia Bacillaceae (BOBROWSKI et al 2003) formadora de
esporos pertencentes ao grupo Bacillus cereus (READ et al 2003) que eacute formado
por um complexo de vaacuterias espeacutecies (Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus
mycoides B thuringiensis e Bacillus weihenstephanensis) (POLANCZYK ALVES
2003)
Bacillus thuringiensis foi originalmente descoberto em 1902 por um bioacutelogo japonecircs
Shigetane Ishiwatari poreacutem foi caracterizado em 1911 por Ernst Berliner da
Alemanha quando este pesquisador isolou o bacilo de Anagasta kuehniella Zeller
(Lepidoptera Pyralidae) (POLANCZYK ALVES 2003 LIMA 2010) Desde entatildeo
essa espeacutecie eacute a mais utilizada mundialmente como biopesticida (CAPALBO et al
2008) A espeacutecie B thuringiensis se desenvolve rapidamente em condiccedilotildees
favoraacuteveis como temperatura e disponibilidade de nutrientes (HILBERT PIGGOT
2004) Em circunstacircncias de ausecircncia de nutrientes ou acuacutemulo de metaboacutelitos
indesejaacuteveis essa bacteacuteria entra em processo de esporulaccedilatildeo durante a fase
estacionaacuteria (POLANCZYK ALVES 2003)
Durante a fase de esporulaccedilatildeo essas bacteacuterias produzem proteiacutenas inseticidas
como cristais parasporais sendo estes compostos por uma ou mais proteiacutenas Cry
tambeacutem conhecidas como part-endotoxinas (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) Essas
toxinas denominadas Cry hidrolisadas atravessam a membrana peritroacutefica e
ligam-se a receptores especiacuteficos presentes nas microvilosidades apicais da
membrana das ceacutelulas colunares presentes no intestino meacutedio causando a
formaccedilatildeo de poros que aumentam a permeabilidade da membrana interferindo no
gradiente iocircnico e no balanccedilo osmoacutetico Dessa maneira ocorre aumento da absorccedilatildeo
de aacutegua o que leva agrave lise e eventual ruptura e desintegraccedilatildeo das ceacutelulas do
intestino meacutedio fazendo o inseto cessar a alimentaccedilatildeo e morrer logo apoacutes por
inaniccedilatildeo ou ainda apoacutes a lise das ceacutelulas do intestino meacutedio o ambiente torna-se
favoraacutevel agrave germinaccedilatildeo dos esporos (POLANCZYK VALICENTE BARETO 2008) e
nesse novo ambiente devido a mistura do conteuacutedo da hemolinfa e do intestino
meacutedio o pH torna-se aacutecido e os esporos se multiplicam de tal forma que o inseto
morre por septicemia (COPPING MENN 2000)
Proteiacutenas Cry satildeo altamente especiacuteficas para o inseto-alvo satildeo inoacutecuos para os
seres humanos animais vertebrados e plantas e satildeo completamente
biodegradaacuteveis (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) sendo considerada portanto um
23
agente seguro para o controle bioloacutegico de insetos na agricultura (LIMA 2010
POLANCZYK ALVES 2003) As diferentes cepas de bacteacuteria produzem vaacuterias
combinaccedilotildees de proteiacutenas Cry que satildeo proteiacutenas consideradas seletivas e
geralmente afetam insetos-alvo de ordens especiacuteficas (CLARK PHILLIPS COATS
2005)
O primeiro biopesticida agrave base de B thuringiensis foi lanccedilado na Franccedila em 1938 e
desde entatildeo mais de 100 formulaccedilotildees foram colocados no mercado mundial devido
agrave eficaacutecia e especificidade (POLANCZYK ALVES 2003) Devido agraves vantagens do
uso do B thuringiensis como agente de controle bioloacutegico sobre insetos-praga das
ordens Coleoptera Diptera Hymenoptera e Lepidoptera aleacutem de espeacutecies de
nematoides aumentando nos uacuteltimos anos o nuacutemero de estirpes isoladas a busca
por cepas mais toacutexicas eacute crescente no mundo inteiro (GEORGE CRICKMORE
2012)
Ateacute o iniacutecio de 1990 apenas trecircs produtos comerciais estavam disponiacuteveis no
mercado brasileiro sendo todos baseados em B thuringiensis Kurstaki com
destaque para o produto Dipelreg que eacute altamente eficiente para mais de 170
lepidoacutepteros-praga (LIMA 2010) Aleacutem deste outros produtos como Ablereg Agreereg
Bac-Control WPreg Bacturreg Dipel WPreg Dipel WGreg Thuricidereg e Xentarireg podem ser
encontrados em formulaccedilotildees de base soacutelida (poacute ou granulada) ou liacutequida (AGROFIT
2003)
Em paiacuteses como a Holanda o Canadaacute e os Paiacuteses Baixos produtos quiacutemicos e
formulados comerciais agrave base de B thuringiensis foram testados sobre lagartas de
D fovealis sob condiccedilotildees de estufa e verificou-se que ambos tiveram accedilatildeo sobre as
lagartas de D fovealis poreacutem observou-se que os formulados agrave base de Bt
mostraram maior eficiecircncia que os produtos quiacutemicos (CFIA 2013) Jaumlckel e
Kurzhals (1995) e Bethke et al (2012) observaram tambeacutem que a eficiecircncia de
produtos comercias agrave base de Bt no controle de lagartas de D fovealis eacute maior nos
estaacutegios de desenvolvimento iniciais
Outra forma de utilizaccedilatildeo de B thuringiensis tem sido por meio da inserccedilatildeo de genes
de toxinas Cry em cultivos transgecircnicos dando origem a plantas Bt o que
proporciona eficaacutecia na forma de controlar insetos-praga e na reduccedilatildeo das
aplicaccedilotildees de produtos quiacutemicos Em plantas transgecircnicas a proteiacutena Cry eacute
produzida continuamente no interior das ceacutelulas protegida da inativaccedilatildeo da luz
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
KHAREN PRISCILLA DE OLIVEIRA SILVA SALOMAtildeO
EXTRATOS VEGETAIS E Bacillus thuringiensis VISANDO O
MANEJO DE Duponchelia fovealis ZELLER (LEPIDOPTERA
CRAMBIDAE)
Dissertaccedilatildeo apresentada ao Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal da Universidade Federal do Espiacuterito Santo como requisito parcial para obtenccedilatildeo do tiacutetulo de Mestre em Produccedilatildeo Vegetal na aacuterea Fitossanidade
Orientador Prof Dr Dirceu Pratissoli
Coorientadores Prof Dr Hugo Joseacute Gonccedilalves dos Santos Junior e Profordf Drordf Patriacutecia Fontes Pinheiro
ALEGRE ndash ES
2014
Dados Internacionais de Catalogaccedilatildeo-na-publicaccedilatildeo (CIP)
(Biblioteca Setorial de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Espiacuterito Santo ES Brasil)
Salomatildeo Kharen Priscilla de Oliveira Silva 1986-
S174e Extratos vegetais e Bacillus thuringiensis visando o manejo de
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) Kharen Priscilla de
Oliveira Silva Salomatildeo ndash 2014
60 f il
Orientador Dirceu Pratissoli
Coorientadores Hugo Joseacute Gonccedilalves dos Santos Junior Patriacutecia
Fontes Pinheiro
Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Universidade Federal do
Espiacuterito Santo Centro de Ciecircncias Agraacuterias
1 Controle microbiano 2 Morango 3 Plantas inceticidas 4 Manejo
fitossanitaacuterio de pragas I Pratissoli Dirceu II Santos Junior Hugo Joseacute
Gonccedilalves dos III Pinheiro Patriacutecia Fontes IV Universidade Federal do
Espiacuterito Santo Centro de Ciecircncias Agraacuterias V Tiacutetulo
CDU 63
DEDICATOacuteRIA
Dedico este trabalho a Deus que me capacita a cada dia
Aos meus pais Neacir e Regilaine pelo amor e pelo ensinamento ao longo da vida
Ao meu amor Felipe
AGRADECIMENTOS Agradeccedilo a Deus por este sonho realizado por me capacitar e por me abenccediloar
com uma famiacutelia maravilhosa e amigos tatildeo queridos
Aos meus pais Neacir e Regilaine e aos meus irmatildeos Monique Leonardo Anna e
David pelo apoio e carinho em todos os momentos da minha vida fazendo o
possiacutevel e o impossiacutevel para que este sonho fosse realizado Pela compreensatildeo
conselhos e incentivo nos momentos difiacuteceis
Ao meu amor Felipe por todo apoio e incentivo durante essa jornada Pelas horas
de ligaccedilatildeo e companheirismo em todos os momentos
Ao Prof Dr Dirceu Pratissoli pela oportunidade de estaacutegio durante minha
graduaccedilatildeo pela orientaccedilatildeo e a oportunidade de cursar o mestrado em Produccedilatildeo
Vegetal no NUDEMAFI
Ao meu coorientador Prof Dr Hugo Joseacute Gonccedilalves dos Santos Junior pela grande
colaboraccedilatildeo amizade e conselhos ao longo desta etapa
Aos meus amigos e funcionaacuterios do Laboratoacuterio de entomologia do NUDEMAFI que
estiveram presentes em todos os momentos
Ao meu amigo Leonardo Mardgan pelo apoio e amizade
Agrave minha amiga e irmatilde do coraccedilatildeo Lauana pelo carinho e amizade durante toda
minha estadia em Alegre
Ao meu amigo Vitor pela amizade e apoio nas revisotildees
Aos meus amigos Lorena Ingrid Amanda Priscila e Joatildeo que investiram parte de
seus dias comigo na Torre e na Cacircmara de fluxo fazendo bem mais agradaacutevel a
montagem dos experimentos
Agrave minha companheira de escrita Deacutebora F M Fragoso pela amizade carinho e
incentivo
Agrave minha amiga Rebeca pelas oraccedilotildees e conselhos
Ao amigo Joseacute Romaacuterio pelo enorme apoio e pelas horas investidas ao meu auxiacutelio
Agrave galera da Duponchelia fovealis Marcel Joatildeo Ingrid Hiacutegor Francieli Victor P
Romaacuterio Alixelhe pelas brincadeiras durante as muitas horas de manutenccedilatildeo
Ao Programa de Produccedilatildeo Vegetal do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo e aos professores Edvaldo Turi (Joseacute Augusto) e Dirceu
Aos professores da minha banca examinadora Hugo Bolsoni Zago Anderson
Mathias Holtz e Leandro Pin Dalvi pela prontidatildeo e disponibilidade
Agrave Coordenaccedilatildeo de Aperfeiccediloamento de Pessoal de Niacutevel Superior (CAPES) pelo
concedimento da bolsa de estudo ao CNPq e a FAPES pelo auxiacutelio financeiro
ldquoAs palavras dos meus laacutebios e o meditar do meu coraccedilatildeo sejam agradaacuteveis na tua presenccedila Senhor rocha minha e redentor meurdquo
Salmos 1914
BIOGRAFIA
Kharen Priscilla de Oliveira Silva Salomatildeo nascida em Aimoreacutes Estado de Minas
Gerais em 04 de novembro de 1986 filha de Neacir de Oliveira Silva e Regilaine
Salomatildeo da Silva Cursou o estudo fundamental nas escolas Escola Estadual
Machado de Assis e Escola Estadual Frei Afonso Maria Jordaacute e o ensino meacutedio no
Centro Federal de Ensino Tecnoloacutegico ndash Unidade Descentralizada de Colatina ES
onde concluiu o ensino meacutedio em 2005 Aos 20 anos ingressou no curso de
Agronomia do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade Federal do Espiacuterito
Santo em Alegre-ES Durante a graduaccedilatildeo fez parte do Laboratoacuterio de entomologia
como estagiaacuteria voluntaacuteria e posteriormente ingressou na pesquisa atraveacutes do
programa de Iniciaccedilatildeo Cientiacutefica Aos 26 anos de idade obteve o tiacutetulo de Bacharel
em Agronomia e ingressou no Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal
do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade Federal do Espiacuterito Santo atuando
na aacuterea de controle bioloacutegico sob a orientaccedilatildeo do Prof Dr Dirceu Pratissoli Aos 21
de fevereiro de 2014 defendeu sua dissertaccedilatildeo para obtenccedilatildeo do tiacutetulo de Mestre
em Produccedilatildeo Vegetal Aacuterea de Concentraccedilatildeo em Fitossanidade (Entomologia)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) foi relatada em
plantios comerciais do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando
grandes problemas agrave cultura Poreacutem por ser uma praga recente natildeo haacute registro de
produtos para o seu controle A cada dia aumenta a demanda por alimentos e outros
produtos livres de resiacuteduos aleacutem da necessidade de uma agricultura mais
desenvolvida e sustentaacutevel Pesquisas com agentes de controle bioloacutegico e extratos
vegetais surgem como alternativa para o manejo desse inseto-praga Este trabalho
teve como objetivo avaliar a eficiecircncia de formulados comerciais agrave base de Bacillus
thuringiensis e a atividade do uso dos extratos aquosos de alho e fumo visando sua
adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle de D fovealis Nos bioensaios para
avaliar a patogenicidade e virulecircncia de duas formulaccedilotildees comerciais agrave base de B
thuringiensis Agreereg e Dipel WPreg sobre a dieta artificial adaptada agrave base de farelo
de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta por King e Hartley (1985) para Diatraea
saccharalis (Lepidoptera Crambidae) foram inoculados 70 microL de cada formulado
comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 Em seguida avaliou-se a
virulecircncia dos respectivos formulados isso atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo
letal (CL50) para o estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados
encontrados observou-se que o estaacutegio 1 de desenvolvimento apresentou 9588 e
8676 de mortalidades para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente
demonstrando patogenicidade e virulecircncia agrave D fovealis No bioensaio para avaliar a
atividade dos extratos aquosos de alho e fumo estes foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) Todos os tratamentos foram pulverizados com Torre de
Potter calibrada a pressatildeo de 15 lbpolsup2 Posteriormente estimou-se a concentraccedilatildeo
letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou 95 de mortalidade no
teste de suscetibilidade Desta forma com os resultados obtidos na presente
pesquisa concluiu-se que a utilizaccedilatildeo de formulados comerciais agrave base de B
thuringiensis e extrato de fumo podem ser uma alternativa no manejo fitossanitaacuterio
de D fovealis
Palavras-Chave Controle microbiano Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de
Pragas Morango
ABSTRACT
PLANT EXTRACTS AND Bacillus thuringiensis Berliner ON Duponchelia fovealis
ZELLER (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE) MANAGEMENT
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) caterpillar was recently
reported in commercial strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing
major problems to the crops but by being a recent plague there is no products
registration for its control The demand for food and other products free of waste
increases every day plus the need for a more developed and sustainable agriculture
In this scenario researches with biological control agents and plant extracts are an
alternative for the management of this insect pest This study was carried out to
assess the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis and the
activity of garlic and tobacco aqueous extracts as alternative methods of D fovealis
control In the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of two
commercial formulations of B Thuringiensis Agree reg and Dipel reg WP were
inoculated 70 microL of each commercial formula on the diet at a concentration 1 x 108
sporesmL-1 Then the virulence of each formulated was evaluated by estimating the
lethal concentration (LC50) for the stage with the greatest susceptibility In view of
the results it was observed that the development stage 1 showed 9588 and 8676
of mortalities for Agreereg and Dipelreg WP respectively products Both formulated
based on B thuringiensis showed pathogenicity and virulence to D fovealis In the
bioassay to evaluate the activity of garlic and tobacco aqueous extracts these were
applied at a 10 concentration (mv) All treatments were sprayed with Potterrsquos
Tower calibrated at 15lbinsup2 Later it was estimated lethal concentration (LC50) of the
tobacco aqueous extract which showed 95 mortality in susceptibility testing Thus
it was concluded that the use of commercial formulated based on B thuringiensis
and tobacco extract may be an alternative on phytosanitary control of D fovealis
Keywords Microbial control Insecticidal plants Phytosanitary Pest Management
Strawberry
LISTA DE TABELAS
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) 38
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) 380
Tabela 3 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingretiente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) 52
Tabela 4 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)Erro Indicador natildeo definido5
SUMAacuteRIO
CAPIacuteTULO 1 14
1 INTRODUCcedilAtildeO 14
2 REVISAtildeO DE LITERATURA 16
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE) 16
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis 18
221 Controle cultural 19
222 Controle Quiacutemico 19
223 Controle Comportamental 19
224 Controle Bioloacutegico 20
225 Extratos Vegetais 24
3 REFEREcircNCIAS 27
CAPIacuteTULO 2 32
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 32
RESUMO 32
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (LepidopteraCrambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 33
4 INTRODUCcedilAtildeO 34
41 MATERIAL E MEacuteTODOS 35
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 35
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis 36
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) 37
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO 37
43 CONCLUSAtildeO 41
44 REFEREcircNCIAS 42
CAPIacuteTULO 3 45
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis Zeller
(Lepidoptera Crambidae) 45
RESUMO 45
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) 46
5 INTRODUCcedilAtildeO 47
51 MATERIAL E MEacuteTODOS 48
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 48
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho 49
513 Suscetibilidade de D fovealis agrave extrato aquoso de fumo e alho 50
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL) 51
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO 51
53 CONCLUSAtildeO 55
54 REFEREcircNCIAS 56
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 59
14
CAPIacuteTULO 1
1 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro (Fragaria x ananassa Duch) eacute produzida nas mais
variadas regiotildees do mundo Pertencente agrave famiacutelia Rosaceae a espeacutecie foi originada
do cruzamento entre espeacutecies silvestres (F chiloensis L e F virginiana Duchesne)
(CASTRO 2004) No Brasil a cultura encontra-se difundida em regiotildees de clima
temperado e subtropical sendo a produccedilatildeo destinada agrave induacutestria e ao consumo in
natura Trata-se de uma cultura altamente exigente em praacuteticas culturais em toda
sua cadeia produtiva desde a implantaccedilatildeo ateacute a poacutes-colheita contudo se destaca
pela alta rentabilidade e intensa demanda por matildeo-de-obra (OLIVEIRA
SCIVITTARO 2009)
No estado do Espiacuterito Santo essa cultura foi implantada comercialmente no meado
do seacuteculo XX e expandiu-se significativamente a partir da metade da deacutecada de 90
sendo entatildeo considerada uma cultura de destaque no estado (BALNINO MARIN
2006) Em meacutedia satildeo produzidas 5960 toneladas de morango ao ano ocupando
uma extensatildeo de 185 hectares envolvendo praticamente 1500 propriedades de
base familiar assumindo um relevante fator de distribuiccedilatildeo de renda no meio rural
Mediante a importacircncia da cultura do morangueiro e a necessidade de organizaccedilatildeo
do processo produtivo e comercial criou-se um polo o qual tem como ecircnfase o uso
de sistemas de produccedilatildeo sustentaacuteveis por meio da utilizaccedilatildeo de tecnologias
apropriadas Desse polo participam principalmente os municiacutepios da regiatildeo das
montanhas capixabas com destaque para Santa Maria de Jetibaacute Domingos Martins
e Venda Nova do Imigrante (INCAPER 2010)
Contudo a cultura do morangueiro apresenta inuacutemeros problemas fitossanitaacuterios
Segundo Fornazier e Pratissoli (2006) um dos principais problemas na referida
cultura satildeo os aacutecaros No entanto em 2010 foi registrada a ocorrecircncia de
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) no municiacutepio de Santa Maria
de Jetibaacute destacando-se pela capacidade de dano raacutepido crescimento populacional
e alta capacidade de dispersatildeo (FORNAZIER et al 2011)
15
Por se tratar de uma praga que natildeo haacute registro de produtos para seu controle no
Ministeacuterio da Agricultura Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) produtores tecircm
recorrido ao uso de produtos quiacutemicos registrados para outras culturas o que vai
contra a legislaccedilatildeo aleacutem acarretar seacuterios prejuiacutezos ao agroecossistema (ALHO
2011) tais como altos niacuteveis de resiacuteduos toacutexicos nos produtos intoxicaccedilotildees ao
homem e mamiacuteferos resistecircncia de pragas a inseticidas contaminaccedilatildeo ambiental
aleacutem de elevar o custo de produccedilatildeo
Sendo assim uma alternativa para diminuir os impactos causados pelo meacutetodo
convencional eacute a adoccedilatildeo de medidas fitossanitaacuterias que reduzam a populaccedilatildeo de
insetos-praga e natildeo ocasionem impactos negativos sobre o meio ambiente e aos
inimigos naturais presentes na aacuterea Uma dessas medidas eacute o Manejo Fitossanitaacuterio
de Pragas (MFP) que engloba princiacutepios e meacutetodos isolados ou em conjunto que
visam garantir maior produtividade e menor agressividade ao meio ambiente visando
manejar o inseto-praga reduzindo seu niacutevel de dano (ALVEZ et al 2007)
Entre as medidas adotadas no MFP o uso de produtos formulados a partir de
agentes bioloacutegicos como a bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner
(Eubacteriales Bacillaceae) se mostra como alternativa eficiente devido agrave
especificidade com relaccedilatildeo a pragas-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e
animais (POLANCZYK ALVES 2003)
Aleacutem desses agentes bioloacutegicos a utilizaccedilatildeo de inseticidas botacircnicos derivados de
plantas ou parte das mesmas obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo
podem exercer atividade toacutexica aos insetos interferindo no desenvolvimento haacutebito
alimentar oviposiccedilatildeo repelecircncia ou mesmo morte (WIESBROOK 2004 SOUZA
ARAUacuteJO NASCIMENTO 2007) No passado o mercado de inseticidas botacircnicos
era dominado pelas piretrinas azadiractina e as rotenonas poreacutem outros inseticidas
botacircnicos vecircm ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) e o alho
(Allium sativum L) entre outras espeacutecies botacircnicas (ISMAN 1997)
A necessidade da implementaccedilatildeo de pesquisas que visam avaliar a eficiecircncia de
meacutetodos de manejo alternativo aplicaacuteveis agrave D fovealis satildeo de grande importacircncia
Nesse sentido este estudo teve por meta avaliar a eficiecircncia do agente de controle
bioloacutegico B thuringiensis e dos extratos aquosos de Fumo e Alho sob condiccedilotildees de
laboratoacuterio visando proporcionar alternativas de manejo viaacuteveis para a implantaccedilatildeo
de programas de manejo fitossanitaacuterio de D fovealis
16
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE)
A Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) tem sua origem na regiatildeo
do Mediterracircneo e nas Ilhas Canaacuterias poreacutem pode ser encontrada em diversas
partes na Aacutefrica Oriente Meacutedio Europa Canadaacute e Estados Unidos da Ameacuterica
(HOFFMAN 2010) O primeiro relato dessa praga fora da sua aacuterea nativa foi em
estufas na Finlacircndia em 1984 e posteriormente em 1989 encontrado na Holanda
fora das estufas (CFIA 2005) Nos Estados Unidos foi detectada pela primeira vez
em 2004 em plantios de begocircnia na Califoacuternia e em 2005 no Canadaacute (GILL 2013)
No Brasil foi constatada em 2008 no estado do Paranaacute e posteriormente no estado
do Espiacuterito Santo Poreacutem apenas em 2010 a espeacutecie foi identificada por uma
especialista do USDA (United States Department of Agriculture) (ZAWADNEAK et
al 2011) Os mesmos autores citam que os primeiros relatos reportam que a praga
foi encontrada no estado do Paranaacute em lavouras comerciais de morango em
condiccedilotildees de cultivo protegido tipo tuacutenel alto nos cultivares Albion e Camino real
Posteriormente a mesma foi encontrada na cultivar Portola no estado do Espiacuterito
Santo Os produtores capixabas tambeacutem constataram a presenccedila de D fovealis nos
cultivares Aromas Albion e Camino Real produzidos em tuacutenel baixo
A lagarta D fovealis eacute uma praga poliacutefaga que gera grandes problemas em diversas
variedades de cultivos de plantas ornamentais e culturas agriacutecolas especialmente
em cultivos em estufa Essa espeacutecie foi relatada em mais de 70 espeacutecies
hospedeiras em cerca de 38 famiacutelias de plantas como ornamentais dos gecircneros
Amaranthus Anthurium Begonia e culturas comercialmente cultivadas como
Capsicum annuum L e Solanum lycopersicum L Fragaria x ananassa entre outras
(GILL 2013)
Com relaccedilatildeo ao ciclo de vida de D fovealis pode-se salientar que eacute um inseto com
desenvolvimento holometaboacutelico Os adultos medem cerca de 19 a 21 mm de
comprimento satildeo de coloraccedilatildeo castanho acinzentado com aneacuteis mais claros no
abdocircmen e possuem uma linha irregular branco-amarelada atraveacutes das asas Os
17
adultos ficam sob as folhas possuem haacutebito noturno e durante o dia podem realizar
voos curtos (MURPHY 2008 RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010) Em
repouso o adulto manteacutem as asas planas em forma triangular e o abdocircmen se
posiciona voltado para cima (HOFFMAN 2010) Os machos possuem o abdocircmen
mais longo e delgado que o da fecircmea (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010)
Os adultos podem viver durante uma a duas semanas sendo que a fecircmea adulta
potildee ateacute 200 ovos durante esse periacuteodo Os ovos possuem formato oval e
inicialmente apresentam coloraccedilatildeo verde-esbranquiccedilada ficando vermelho com o
desenvolvimento do embriatildeo ateacute apresentarem pontuaccedilotildees marrons que ocorrem
antes da eclosatildeo das lagartas (FRANCO BAPTISTA 2010) Satildeo ovipositados
isoladamente ou em massas de trecircs a dez ovos sobrepostos seja na parte inferior
das folhas perto das veias na base do talo na base da planta ou na camada
superior do solo (RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010 HOFFMAN 2010)
O periacuteodo de incubaccedilatildeo dos ovos varia em torno de seis dias dependendo da
temperatura local
As lagartas medem entre 20 a 30 mm de comprimento possuem coloraccedilatildeo branca
amarelada com pontos marrons longitudinalmente distribuiacutedos pelo corpo com pelo
menos um pelo em cada ponto e com cabeccedila de coloraccedilatildeo marrom-escura
(RICHTER 2009 GILL 2013) Alimentam-se de folhas flores brotos frutos e restos
de folhasplanta em decomposiccedilatildeo e em culturas plantadas com maior densidade
podem ser encontradas se alimentando de qualquer parte da planta (BRAMBILA
STOCKS 2010) As lagartas se desenvolvem rapidamente satildeo muito aacutegeis e
preferem locais uacutemidos na base da planta proacuteximo ao solo na camada superior do
solo ou em raiacutezes expostas das plantas (HOFFMAN 2010) As lagartas satildeo
adaptadas a condiccedilotildees de alta umidade e podem tolerar ateacute mesmo condiccedilotildees de
alagamento podendo ser encontradas em plantas aquaacuteticas e em lugares salinos
(BRAMBILA STOCKS 2010)
As lagartas tendem a ficar em locais protegidos como no colo da planta tuacuteneis nos
caules e em estaacutedios mais avanccedilados podem se alimentar da haste principal
inclusive abaixo da linha do solo (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010) Alimentam-se dos tecidos da coroa da planta provocando a
interrupccedilatildeo da circulaccedilatildeo de seiva o que ocasiona o aparecimento de necrose nas
18
bordas das folhas e posteriormente a morte da planta (FRANCO BAPTISTA
2010) Durante a alimentaccedilatildeo tecem teias entre as folhas baixeiras (aquelas que
ficam em contato com o canteiro) nas quais ficam protegidas e posteriormente
empupam (MURPHY 2008) Devido seu ataque a D fovealis pode danificar caules
folhas e frutos reduzindo a produccedilatildeo e inviabilizando o produto para o mercado in
natura aleacutem disso a injuacuteria causada pelo ataque pode servir como meio de entrada
para diferentes patoacutegenos (GILL 2013)
As pupas satildeo marrom-claro com aproximadamente 9 a 10 mm de comprimento O
casulo que as envolve eacute oval feito de seda fezes e partiacuteculas do solo e eacute construiacutedo
no solo (BETHKE VANDER MEY 2010) Natildeo haacute relatos de toleracircncia ao frio ou
qualquer tipo de diapausa durante qualquer parte do ciclo de vida Portanto poderia
completar vaacuterias geraccedilotildees anualmente sob condiccedilotildees ideais (HOFFMAN 2010)
Desta forma considerando o ciclo de desenvolvimento e consequentemente o
nuacutemero de geraccedilotildees anuais a presenccedila de plantios escalonados dentro de uma
mesma aacuterea pode resultar no aumento da populaccedilatildeo de D fovealis como tambeacutem
interferir em praacuteticas de controle existentes como Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas
(MFP) e de biocontrole que podem ser interrompidos pela necessidade de aplicaccedilatildeo
de inseticidas para controlar o inseto (CFIA 2005)
A disseminaccedilatildeo dessa praga pode ocorrer atraveacutes do comeacutercio de material vegetal
propagativo e natildeo propagativo logo medidas quarentenaacuterias satildeo necessaacuterias para
evitar a introduccedilatildeo dessa praga em aacutereas livres de ocorrecircncia (BRAMBILA
STOCKS 2010)
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis
O manejo dessa praga inclui controle cultural quiacutemico comportamental e bioloacutegico
devendo ser coordenado de acordo com o monitoramento da populaccedilatildeo
19
221 Controle cultural
Embora D fovealis esteja geralmente escondida inspeccedilotildees visuais regulares podem
auxiliar na detecccedilatildeo de sua presenccedila da fase jovem que pode ser constatada pela
existecircncia de danos nas folhas flores bototildees florais e hastes bem como dejetos e
buracos na superfiacutecie do solo (BRAMBILA STOCKS 2010) Fornazier et al (2011)
recomendam a retirada e a destruiccedilatildeo de folhas velhas se possiacutevel semanalmente
visando a reduccedilatildeo do nuacutemero de ovos e pupas evitando o raacutepido crescimento e
dispersatildeo populacional da praga
222 Controle Quiacutemico
No Brasil ainda natildeo haacute nenhum produto registrado no Ministeacuterio da Agricultura
Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) Poreacutem em outros paiacuteses os produtos relatados
para o controle de lagartas D fovealis satildeo Spinosade Bifentrina Fluvalinato
Deltametrina Esfenvalerato Orthene Lambdacialotrina Imidaclopride Metomil
Ethoprop Acefato Emamectina Permetrina Clorantraniliprol e Azadirachtin
(PIJNAKKER 2001 CFIA 2005 BETHKE VANDER MEY 2010) Aleacutem disso
Bethke e Vander Mey (2010) ainda recomendam que em ambiente de estufa para
controle dos adultos as aplicaccedilotildees tipo aerossol ou neacutevoa sejam realizadas no
periacuteodo noturno isso devido a maior atividade dos adultos
223 Controle Comportamental
Armadilhas luminosas com luz ultravioleta (UV) podem ser usadas para monitorar a
atividade da mariposa adulta em aacutereas em que a D fovealis estaacute estabelecida
Hoffman (2010) relata o sucesso da utilizaccedilatildeo dessas armadilhas em plantios nos
Estados Unidos Haacute relatos no Reino Unido de coletas de insetos adultos cerca de
20
10 km das estufas infestadas jaacute na Holanda foram encontrados insetos em
armadilhas luminosas a 100 km de sua ocorrecircncia (CFIA 2005)
Outra alternativa eacute a utilizaccedilatildeo de armadilhas tipo Delta com feromocircnio sexual ou
armadilhas que associem aacutegua e feromocircnio sendo estas especiacuteficas para adultos
machos de D fovealis (MURPHY 2008 DEVENTER 2009)
224 Controle Bioloacutegico
a Entomoacutefagos
Parasitoides de ovos do gecircnero Trichogramma (Hymenoptera Trichogrammatidae)
destacam-se pela ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica e pela vasta quantidade de
hospedeiros principalmente da ordem Lepidoptera (PRATISSOLI et al 2002) Na
Alemanha Zimmermann (2004) e Jaumlckel e Kurzhals (1995) relataram a ocorrecircncia
das espeacutecies Trichogramma evanescens Westwood Trichogramma cacoeciae
Marchal e Trichogramma brassicae Bezdenko parasitando ovos de D fovealis
Os agentes de controle bioloacutegico presentes no solo tambeacutem podem ser utilizados
entre eles estatildeo o besouro Atheta coriaria (Kraatz) (Coleoptera Staphylinidae) um
predador de ovos e lagartas neonatas o percevejo Podisius sp (Hemiptera
Pentatomidae) um predador de lagartas (MURPHY 2008) e aacutecaros predadores de
ovos Hypoaspis miles (Berlese) e Hypoaspis aculeifer (Canestrini) (Acari
Laelapidae) (CFIA 2013) Outro agente utilizado com sucesso em programas de
controle bioloacutegico de lagartas da famiacutelia Crambidae eacute a vespa endoparasitoide
Cotesia flavipes (Cameron) (Hymenoptera Braconidae) (SALLAM et al 2001) que
jaacute foi relatada por Zawadneak et al (2011) em lavouras de morango no estado do
Paranaacute na qual apresentou potencial para o controle de D fovealis
21
b Entomopatoacutegenos
b1 Nematoides
Os nematoides mais utilizados no controle de insetos pertencem agrave famiacutelia
Steinernematidae Estes tecircm sido aplicados em diversas culturas e mesmo em
outras situaccedilotildees para controle de um grande nuacutemero de insetos (ALVEZ 1998)
Nematoides entomopatogecircnicos jaacute vecircm sendo utilizados em outros paiacuteses no
manejo de D fovealis Stocks e Hodges (2013) citam a utilizaccedilatildeo da espeacutecie
Heterorhabditis bacteriophora (Poinar) (Nematoda Heterorhabditidae) jaacute Jaumlckel e
Kurzhals (1995) relatam que as espeacutecies Steinernema carpocapsae (Weiser) e S
feltiae (Filipjev) (Nematoda Steinernematidae) foram eficientes no controle de D
fovealis em diferentes estaacutedios larvais sendo que no estaacutedio 3 de desenvolvimento
essas espeacutecies proporcionaram 60 e 20 de mortalidade respectivamente
b2 Fungos entomopatogecircnicos
Os fungos entomopatogecircnicos Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok
(Hypocreales Clavicipitaceae) e Beauveria bassiana (Bals) Vuill (Hypocreales
Cordycipitaceae) satildeo muito utilizados devido agrave facilidade de produccedilatildeo ampla
distribuiccedilatildeo geograacutefica variedade de hospedeiros e ocorrecircncia em condiccedilotildees
naturais enzooacuteticas ou epizooacuteticas sendo ainda comumente encontrados no solo
mostrando-se como uma alternativa eficiente devido agrave especificidade com relaccedilatildeo agrave
praga-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e animais (ALVES 1998)
b3 Bacteacuteria entomopatogecircnica
A bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner eacute uma bacteacuteria
naturalmente encontrada no solo aeroacutebia ou facultativamente anaeroacutebia gram
22
positiva pertencente agrave famiacutelia Bacillaceae (BOBROWSKI et al 2003) formadora de
esporos pertencentes ao grupo Bacillus cereus (READ et al 2003) que eacute formado
por um complexo de vaacuterias espeacutecies (Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus
mycoides B thuringiensis e Bacillus weihenstephanensis) (POLANCZYK ALVES
2003)
Bacillus thuringiensis foi originalmente descoberto em 1902 por um bioacutelogo japonecircs
Shigetane Ishiwatari poreacutem foi caracterizado em 1911 por Ernst Berliner da
Alemanha quando este pesquisador isolou o bacilo de Anagasta kuehniella Zeller
(Lepidoptera Pyralidae) (POLANCZYK ALVES 2003 LIMA 2010) Desde entatildeo
essa espeacutecie eacute a mais utilizada mundialmente como biopesticida (CAPALBO et al
2008) A espeacutecie B thuringiensis se desenvolve rapidamente em condiccedilotildees
favoraacuteveis como temperatura e disponibilidade de nutrientes (HILBERT PIGGOT
2004) Em circunstacircncias de ausecircncia de nutrientes ou acuacutemulo de metaboacutelitos
indesejaacuteveis essa bacteacuteria entra em processo de esporulaccedilatildeo durante a fase
estacionaacuteria (POLANCZYK ALVES 2003)
Durante a fase de esporulaccedilatildeo essas bacteacuterias produzem proteiacutenas inseticidas
como cristais parasporais sendo estes compostos por uma ou mais proteiacutenas Cry
tambeacutem conhecidas como part-endotoxinas (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) Essas
toxinas denominadas Cry hidrolisadas atravessam a membrana peritroacutefica e
ligam-se a receptores especiacuteficos presentes nas microvilosidades apicais da
membrana das ceacutelulas colunares presentes no intestino meacutedio causando a
formaccedilatildeo de poros que aumentam a permeabilidade da membrana interferindo no
gradiente iocircnico e no balanccedilo osmoacutetico Dessa maneira ocorre aumento da absorccedilatildeo
de aacutegua o que leva agrave lise e eventual ruptura e desintegraccedilatildeo das ceacutelulas do
intestino meacutedio fazendo o inseto cessar a alimentaccedilatildeo e morrer logo apoacutes por
inaniccedilatildeo ou ainda apoacutes a lise das ceacutelulas do intestino meacutedio o ambiente torna-se
favoraacutevel agrave germinaccedilatildeo dos esporos (POLANCZYK VALICENTE BARETO 2008) e
nesse novo ambiente devido a mistura do conteuacutedo da hemolinfa e do intestino
meacutedio o pH torna-se aacutecido e os esporos se multiplicam de tal forma que o inseto
morre por septicemia (COPPING MENN 2000)
Proteiacutenas Cry satildeo altamente especiacuteficas para o inseto-alvo satildeo inoacutecuos para os
seres humanos animais vertebrados e plantas e satildeo completamente
biodegradaacuteveis (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) sendo considerada portanto um
23
agente seguro para o controle bioloacutegico de insetos na agricultura (LIMA 2010
POLANCZYK ALVES 2003) As diferentes cepas de bacteacuteria produzem vaacuterias
combinaccedilotildees de proteiacutenas Cry que satildeo proteiacutenas consideradas seletivas e
geralmente afetam insetos-alvo de ordens especiacuteficas (CLARK PHILLIPS COATS
2005)
O primeiro biopesticida agrave base de B thuringiensis foi lanccedilado na Franccedila em 1938 e
desde entatildeo mais de 100 formulaccedilotildees foram colocados no mercado mundial devido
agrave eficaacutecia e especificidade (POLANCZYK ALVES 2003) Devido agraves vantagens do
uso do B thuringiensis como agente de controle bioloacutegico sobre insetos-praga das
ordens Coleoptera Diptera Hymenoptera e Lepidoptera aleacutem de espeacutecies de
nematoides aumentando nos uacuteltimos anos o nuacutemero de estirpes isoladas a busca
por cepas mais toacutexicas eacute crescente no mundo inteiro (GEORGE CRICKMORE
2012)
Ateacute o iniacutecio de 1990 apenas trecircs produtos comerciais estavam disponiacuteveis no
mercado brasileiro sendo todos baseados em B thuringiensis Kurstaki com
destaque para o produto Dipelreg que eacute altamente eficiente para mais de 170
lepidoacutepteros-praga (LIMA 2010) Aleacutem deste outros produtos como Ablereg Agreereg
Bac-Control WPreg Bacturreg Dipel WPreg Dipel WGreg Thuricidereg e Xentarireg podem ser
encontrados em formulaccedilotildees de base soacutelida (poacute ou granulada) ou liacutequida (AGROFIT
2003)
Em paiacuteses como a Holanda o Canadaacute e os Paiacuteses Baixos produtos quiacutemicos e
formulados comerciais agrave base de B thuringiensis foram testados sobre lagartas de
D fovealis sob condiccedilotildees de estufa e verificou-se que ambos tiveram accedilatildeo sobre as
lagartas de D fovealis poreacutem observou-se que os formulados agrave base de Bt
mostraram maior eficiecircncia que os produtos quiacutemicos (CFIA 2013) Jaumlckel e
Kurzhals (1995) e Bethke et al (2012) observaram tambeacutem que a eficiecircncia de
produtos comercias agrave base de Bt no controle de lagartas de D fovealis eacute maior nos
estaacutegios de desenvolvimento iniciais
Outra forma de utilizaccedilatildeo de B thuringiensis tem sido por meio da inserccedilatildeo de genes
de toxinas Cry em cultivos transgecircnicos dando origem a plantas Bt o que
proporciona eficaacutecia na forma de controlar insetos-praga e na reduccedilatildeo das
aplicaccedilotildees de produtos quiacutemicos Em plantas transgecircnicas a proteiacutena Cry eacute
produzida continuamente no interior das ceacutelulas protegida da inativaccedilatildeo da luz
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
Dados Internacionais de Catalogaccedilatildeo-na-publicaccedilatildeo (CIP)
(Biblioteca Setorial de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Espiacuterito Santo ES Brasil)
Salomatildeo Kharen Priscilla de Oliveira Silva 1986-
S174e Extratos vegetais e Bacillus thuringiensis visando o manejo de
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) Kharen Priscilla de
Oliveira Silva Salomatildeo ndash 2014
60 f il
Orientador Dirceu Pratissoli
Coorientadores Hugo Joseacute Gonccedilalves dos Santos Junior Patriacutecia
Fontes Pinheiro
Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Universidade Federal do
Espiacuterito Santo Centro de Ciecircncias Agraacuterias
1 Controle microbiano 2 Morango 3 Plantas inceticidas 4 Manejo
fitossanitaacuterio de pragas I Pratissoli Dirceu II Santos Junior Hugo Joseacute
Gonccedilalves dos III Pinheiro Patriacutecia Fontes IV Universidade Federal do
Espiacuterito Santo Centro de Ciecircncias Agraacuterias V Tiacutetulo
CDU 63
DEDICATOacuteRIA
Dedico este trabalho a Deus que me capacita a cada dia
Aos meus pais Neacir e Regilaine pelo amor e pelo ensinamento ao longo da vida
Ao meu amor Felipe
AGRADECIMENTOS Agradeccedilo a Deus por este sonho realizado por me capacitar e por me abenccediloar
com uma famiacutelia maravilhosa e amigos tatildeo queridos
Aos meus pais Neacir e Regilaine e aos meus irmatildeos Monique Leonardo Anna e
David pelo apoio e carinho em todos os momentos da minha vida fazendo o
possiacutevel e o impossiacutevel para que este sonho fosse realizado Pela compreensatildeo
conselhos e incentivo nos momentos difiacuteceis
Ao meu amor Felipe por todo apoio e incentivo durante essa jornada Pelas horas
de ligaccedilatildeo e companheirismo em todos os momentos
Ao Prof Dr Dirceu Pratissoli pela oportunidade de estaacutegio durante minha
graduaccedilatildeo pela orientaccedilatildeo e a oportunidade de cursar o mestrado em Produccedilatildeo
Vegetal no NUDEMAFI
Ao meu coorientador Prof Dr Hugo Joseacute Gonccedilalves dos Santos Junior pela grande
colaboraccedilatildeo amizade e conselhos ao longo desta etapa
Aos meus amigos e funcionaacuterios do Laboratoacuterio de entomologia do NUDEMAFI que
estiveram presentes em todos os momentos
Ao meu amigo Leonardo Mardgan pelo apoio e amizade
Agrave minha amiga e irmatilde do coraccedilatildeo Lauana pelo carinho e amizade durante toda
minha estadia em Alegre
Ao meu amigo Vitor pela amizade e apoio nas revisotildees
Aos meus amigos Lorena Ingrid Amanda Priscila e Joatildeo que investiram parte de
seus dias comigo na Torre e na Cacircmara de fluxo fazendo bem mais agradaacutevel a
montagem dos experimentos
Agrave minha companheira de escrita Deacutebora F M Fragoso pela amizade carinho e
incentivo
Agrave minha amiga Rebeca pelas oraccedilotildees e conselhos
Ao amigo Joseacute Romaacuterio pelo enorme apoio e pelas horas investidas ao meu auxiacutelio
Agrave galera da Duponchelia fovealis Marcel Joatildeo Ingrid Hiacutegor Francieli Victor P
Romaacuterio Alixelhe pelas brincadeiras durante as muitas horas de manutenccedilatildeo
Ao Programa de Produccedilatildeo Vegetal do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo e aos professores Edvaldo Turi (Joseacute Augusto) e Dirceu
Aos professores da minha banca examinadora Hugo Bolsoni Zago Anderson
Mathias Holtz e Leandro Pin Dalvi pela prontidatildeo e disponibilidade
Agrave Coordenaccedilatildeo de Aperfeiccediloamento de Pessoal de Niacutevel Superior (CAPES) pelo
concedimento da bolsa de estudo ao CNPq e a FAPES pelo auxiacutelio financeiro
ldquoAs palavras dos meus laacutebios e o meditar do meu coraccedilatildeo sejam agradaacuteveis na tua presenccedila Senhor rocha minha e redentor meurdquo
Salmos 1914
BIOGRAFIA
Kharen Priscilla de Oliveira Silva Salomatildeo nascida em Aimoreacutes Estado de Minas
Gerais em 04 de novembro de 1986 filha de Neacir de Oliveira Silva e Regilaine
Salomatildeo da Silva Cursou o estudo fundamental nas escolas Escola Estadual
Machado de Assis e Escola Estadual Frei Afonso Maria Jordaacute e o ensino meacutedio no
Centro Federal de Ensino Tecnoloacutegico ndash Unidade Descentralizada de Colatina ES
onde concluiu o ensino meacutedio em 2005 Aos 20 anos ingressou no curso de
Agronomia do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade Federal do Espiacuterito
Santo em Alegre-ES Durante a graduaccedilatildeo fez parte do Laboratoacuterio de entomologia
como estagiaacuteria voluntaacuteria e posteriormente ingressou na pesquisa atraveacutes do
programa de Iniciaccedilatildeo Cientiacutefica Aos 26 anos de idade obteve o tiacutetulo de Bacharel
em Agronomia e ingressou no Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal
do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade Federal do Espiacuterito Santo atuando
na aacuterea de controle bioloacutegico sob a orientaccedilatildeo do Prof Dr Dirceu Pratissoli Aos 21
de fevereiro de 2014 defendeu sua dissertaccedilatildeo para obtenccedilatildeo do tiacutetulo de Mestre
em Produccedilatildeo Vegetal Aacuterea de Concentraccedilatildeo em Fitossanidade (Entomologia)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) foi relatada em
plantios comerciais do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando
grandes problemas agrave cultura Poreacutem por ser uma praga recente natildeo haacute registro de
produtos para o seu controle A cada dia aumenta a demanda por alimentos e outros
produtos livres de resiacuteduos aleacutem da necessidade de uma agricultura mais
desenvolvida e sustentaacutevel Pesquisas com agentes de controle bioloacutegico e extratos
vegetais surgem como alternativa para o manejo desse inseto-praga Este trabalho
teve como objetivo avaliar a eficiecircncia de formulados comerciais agrave base de Bacillus
thuringiensis e a atividade do uso dos extratos aquosos de alho e fumo visando sua
adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle de D fovealis Nos bioensaios para
avaliar a patogenicidade e virulecircncia de duas formulaccedilotildees comerciais agrave base de B
thuringiensis Agreereg e Dipel WPreg sobre a dieta artificial adaptada agrave base de farelo
de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta por King e Hartley (1985) para Diatraea
saccharalis (Lepidoptera Crambidae) foram inoculados 70 microL de cada formulado
comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 Em seguida avaliou-se a
virulecircncia dos respectivos formulados isso atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo
letal (CL50) para o estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados
encontrados observou-se que o estaacutegio 1 de desenvolvimento apresentou 9588 e
8676 de mortalidades para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente
demonstrando patogenicidade e virulecircncia agrave D fovealis No bioensaio para avaliar a
atividade dos extratos aquosos de alho e fumo estes foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) Todos os tratamentos foram pulverizados com Torre de
Potter calibrada a pressatildeo de 15 lbpolsup2 Posteriormente estimou-se a concentraccedilatildeo
letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou 95 de mortalidade no
teste de suscetibilidade Desta forma com os resultados obtidos na presente
pesquisa concluiu-se que a utilizaccedilatildeo de formulados comerciais agrave base de B
thuringiensis e extrato de fumo podem ser uma alternativa no manejo fitossanitaacuterio
de D fovealis
Palavras-Chave Controle microbiano Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de
Pragas Morango
ABSTRACT
PLANT EXTRACTS AND Bacillus thuringiensis Berliner ON Duponchelia fovealis
ZELLER (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE) MANAGEMENT
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) caterpillar was recently
reported in commercial strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing
major problems to the crops but by being a recent plague there is no products
registration for its control The demand for food and other products free of waste
increases every day plus the need for a more developed and sustainable agriculture
In this scenario researches with biological control agents and plant extracts are an
alternative for the management of this insect pest This study was carried out to
assess the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis and the
activity of garlic and tobacco aqueous extracts as alternative methods of D fovealis
control In the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of two
commercial formulations of B Thuringiensis Agree reg and Dipel reg WP were
inoculated 70 microL of each commercial formula on the diet at a concentration 1 x 108
sporesmL-1 Then the virulence of each formulated was evaluated by estimating the
lethal concentration (LC50) for the stage with the greatest susceptibility In view of
the results it was observed that the development stage 1 showed 9588 and 8676
of mortalities for Agreereg and Dipelreg WP respectively products Both formulated
based on B thuringiensis showed pathogenicity and virulence to D fovealis In the
bioassay to evaluate the activity of garlic and tobacco aqueous extracts these were
applied at a 10 concentration (mv) All treatments were sprayed with Potterrsquos
Tower calibrated at 15lbinsup2 Later it was estimated lethal concentration (LC50) of the
tobacco aqueous extract which showed 95 mortality in susceptibility testing Thus
it was concluded that the use of commercial formulated based on B thuringiensis
and tobacco extract may be an alternative on phytosanitary control of D fovealis
Keywords Microbial control Insecticidal plants Phytosanitary Pest Management
Strawberry
LISTA DE TABELAS
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) 38
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) 380
Tabela 3 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingretiente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) 52
Tabela 4 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)Erro Indicador natildeo definido5
SUMAacuteRIO
CAPIacuteTULO 1 14
1 INTRODUCcedilAtildeO 14
2 REVISAtildeO DE LITERATURA 16
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE) 16
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis 18
221 Controle cultural 19
222 Controle Quiacutemico 19
223 Controle Comportamental 19
224 Controle Bioloacutegico 20
225 Extratos Vegetais 24
3 REFEREcircNCIAS 27
CAPIacuteTULO 2 32
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 32
RESUMO 32
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (LepidopteraCrambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 33
4 INTRODUCcedilAtildeO 34
41 MATERIAL E MEacuteTODOS 35
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 35
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis 36
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) 37
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO 37
43 CONCLUSAtildeO 41
44 REFEREcircNCIAS 42
CAPIacuteTULO 3 45
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis Zeller
(Lepidoptera Crambidae) 45
RESUMO 45
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) 46
5 INTRODUCcedilAtildeO 47
51 MATERIAL E MEacuteTODOS 48
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 48
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho 49
513 Suscetibilidade de D fovealis agrave extrato aquoso de fumo e alho 50
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL) 51
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO 51
53 CONCLUSAtildeO 55
54 REFEREcircNCIAS 56
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 59
14
CAPIacuteTULO 1
1 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro (Fragaria x ananassa Duch) eacute produzida nas mais
variadas regiotildees do mundo Pertencente agrave famiacutelia Rosaceae a espeacutecie foi originada
do cruzamento entre espeacutecies silvestres (F chiloensis L e F virginiana Duchesne)
(CASTRO 2004) No Brasil a cultura encontra-se difundida em regiotildees de clima
temperado e subtropical sendo a produccedilatildeo destinada agrave induacutestria e ao consumo in
natura Trata-se de uma cultura altamente exigente em praacuteticas culturais em toda
sua cadeia produtiva desde a implantaccedilatildeo ateacute a poacutes-colheita contudo se destaca
pela alta rentabilidade e intensa demanda por matildeo-de-obra (OLIVEIRA
SCIVITTARO 2009)
No estado do Espiacuterito Santo essa cultura foi implantada comercialmente no meado
do seacuteculo XX e expandiu-se significativamente a partir da metade da deacutecada de 90
sendo entatildeo considerada uma cultura de destaque no estado (BALNINO MARIN
2006) Em meacutedia satildeo produzidas 5960 toneladas de morango ao ano ocupando
uma extensatildeo de 185 hectares envolvendo praticamente 1500 propriedades de
base familiar assumindo um relevante fator de distribuiccedilatildeo de renda no meio rural
Mediante a importacircncia da cultura do morangueiro e a necessidade de organizaccedilatildeo
do processo produtivo e comercial criou-se um polo o qual tem como ecircnfase o uso
de sistemas de produccedilatildeo sustentaacuteveis por meio da utilizaccedilatildeo de tecnologias
apropriadas Desse polo participam principalmente os municiacutepios da regiatildeo das
montanhas capixabas com destaque para Santa Maria de Jetibaacute Domingos Martins
e Venda Nova do Imigrante (INCAPER 2010)
Contudo a cultura do morangueiro apresenta inuacutemeros problemas fitossanitaacuterios
Segundo Fornazier e Pratissoli (2006) um dos principais problemas na referida
cultura satildeo os aacutecaros No entanto em 2010 foi registrada a ocorrecircncia de
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) no municiacutepio de Santa Maria
de Jetibaacute destacando-se pela capacidade de dano raacutepido crescimento populacional
e alta capacidade de dispersatildeo (FORNAZIER et al 2011)
15
Por se tratar de uma praga que natildeo haacute registro de produtos para seu controle no
Ministeacuterio da Agricultura Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) produtores tecircm
recorrido ao uso de produtos quiacutemicos registrados para outras culturas o que vai
contra a legislaccedilatildeo aleacutem acarretar seacuterios prejuiacutezos ao agroecossistema (ALHO
2011) tais como altos niacuteveis de resiacuteduos toacutexicos nos produtos intoxicaccedilotildees ao
homem e mamiacuteferos resistecircncia de pragas a inseticidas contaminaccedilatildeo ambiental
aleacutem de elevar o custo de produccedilatildeo
Sendo assim uma alternativa para diminuir os impactos causados pelo meacutetodo
convencional eacute a adoccedilatildeo de medidas fitossanitaacuterias que reduzam a populaccedilatildeo de
insetos-praga e natildeo ocasionem impactos negativos sobre o meio ambiente e aos
inimigos naturais presentes na aacuterea Uma dessas medidas eacute o Manejo Fitossanitaacuterio
de Pragas (MFP) que engloba princiacutepios e meacutetodos isolados ou em conjunto que
visam garantir maior produtividade e menor agressividade ao meio ambiente visando
manejar o inseto-praga reduzindo seu niacutevel de dano (ALVEZ et al 2007)
Entre as medidas adotadas no MFP o uso de produtos formulados a partir de
agentes bioloacutegicos como a bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner
(Eubacteriales Bacillaceae) se mostra como alternativa eficiente devido agrave
especificidade com relaccedilatildeo a pragas-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e
animais (POLANCZYK ALVES 2003)
Aleacutem desses agentes bioloacutegicos a utilizaccedilatildeo de inseticidas botacircnicos derivados de
plantas ou parte das mesmas obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo
podem exercer atividade toacutexica aos insetos interferindo no desenvolvimento haacutebito
alimentar oviposiccedilatildeo repelecircncia ou mesmo morte (WIESBROOK 2004 SOUZA
ARAUacuteJO NASCIMENTO 2007) No passado o mercado de inseticidas botacircnicos
era dominado pelas piretrinas azadiractina e as rotenonas poreacutem outros inseticidas
botacircnicos vecircm ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) e o alho
(Allium sativum L) entre outras espeacutecies botacircnicas (ISMAN 1997)
A necessidade da implementaccedilatildeo de pesquisas que visam avaliar a eficiecircncia de
meacutetodos de manejo alternativo aplicaacuteveis agrave D fovealis satildeo de grande importacircncia
Nesse sentido este estudo teve por meta avaliar a eficiecircncia do agente de controle
bioloacutegico B thuringiensis e dos extratos aquosos de Fumo e Alho sob condiccedilotildees de
laboratoacuterio visando proporcionar alternativas de manejo viaacuteveis para a implantaccedilatildeo
de programas de manejo fitossanitaacuterio de D fovealis
16
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE)
A Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) tem sua origem na regiatildeo
do Mediterracircneo e nas Ilhas Canaacuterias poreacutem pode ser encontrada em diversas
partes na Aacutefrica Oriente Meacutedio Europa Canadaacute e Estados Unidos da Ameacuterica
(HOFFMAN 2010) O primeiro relato dessa praga fora da sua aacuterea nativa foi em
estufas na Finlacircndia em 1984 e posteriormente em 1989 encontrado na Holanda
fora das estufas (CFIA 2005) Nos Estados Unidos foi detectada pela primeira vez
em 2004 em plantios de begocircnia na Califoacuternia e em 2005 no Canadaacute (GILL 2013)
No Brasil foi constatada em 2008 no estado do Paranaacute e posteriormente no estado
do Espiacuterito Santo Poreacutem apenas em 2010 a espeacutecie foi identificada por uma
especialista do USDA (United States Department of Agriculture) (ZAWADNEAK et
al 2011) Os mesmos autores citam que os primeiros relatos reportam que a praga
foi encontrada no estado do Paranaacute em lavouras comerciais de morango em
condiccedilotildees de cultivo protegido tipo tuacutenel alto nos cultivares Albion e Camino real
Posteriormente a mesma foi encontrada na cultivar Portola no estado do Espiacuterito
Santo Os produtores capixabas tambeacutem constataram a presenccedila de D fovealis nos
cultivares Aromas Albion e Camino Real produzidos em tuacutenel baixo
A lagarta D fovealis eacute uma praga poliacutefaga que gera grandes problemas em diversas
variedades de cultivos de plantas ornamentais e culturas agriacutecolas especialmente
em cultivos em estufa Essa espeacutecie foi relatada em mais de 70 espeacutecies
hospedeiras em cerca de 38 famiacutelias de plantas como ornamentais dos gecircneros
Amaranthus Anthurium Begonia e culturas comercialmente cultivadas como
Capsicum annuum L e Solanum lycopersicum L Fragaria x ananassa entre outras
(GILL 2013)
Com relaccedilatildeo ao ciclo de vida de D fovealis pode-se salientar que eacute um inseto com
desenvolvimento holometaboacutelico Os adultos medem cerca de 19 a 21 mm de
comprimento satildeo de coloraccedilatildeo castanho acinzentado com aneacuteis mais claros no
abdocircmen e possuem uma linha irregular branco-amarelada atraveacutes das asas Os
17
adultos ficam sob as folhas possuem haacutebito noturno e durante o dia podem realizar
voos curtos (MURPHY 2008 RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010) Em
repouso o adulto manteacutem as asas planas em forma triangular e o abdocircmen se
posiciona voltado para cima (HOFFMAN 2010) Os machos possuem o abdocircmen
mais longo e delgado que o da fecircmea (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010)
Os adultos podem viver durante uma a duas semanas sendo que a fecircmea adulta
potildee ateacute 200 ovos durante esse periacuteodo Os ovos possuem formato oval e
inicialmente apresentam coloraccedilatildeo verde-esbranquiccedilada ficando vermelho com o
desenvolvimento do embriatildeo ateacute apresentarem pontuaccedilotildees marrons que ocorrem
antes da eclosatildeo das lagartas (FRANCO BAPTISTA 2010) Satildeo ovipositados
isoladamente ou em massas de trecircs a dez ovos sobrepostos seja na parte inferior
das folhas perto das veias na base do talo na base da planta ou na camada
superior do solo (RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010 HOFFMAN 2010)
O periacuteodo de incubaccedilatildeo dos ovos varia em torno de seis dias dependendo da
temperatura local
As lagartas medem entre 20 a 30 mm de comprimento possuem coloraccedilatildeo branca
amarelada com pontos marrons longitudinalmente distribuiacutedos pelo corpo com pelo
menos um pelo em cada ponto e com cabeccedila de coloraccedilatildeo marrom-escura
(RICHTER 2009 GILL 2013) Alimentam-se de folhas flores brotos frutos e restos
de folhasplanta em decomposiccedilatildeo e em culturas plantadas com maior densidade
podem ser encontradas se alimentando de qualquer parte da planta (BRAMBILA
STOCKS 2010) As lagartas se desenvolvem rapidamente satildeo muito aacutegeis e
preferem locais uacutemidos na base da planta proacuteximo ao solo na camada superior do
solo ou em raiacutezes expostas das plantas (HOFFMAN 2010) As lagartas satildeo
adaptadas a condiccedilotildees de alta umidade e podem tolerar ateacute mesmo condiccedilotildees de
alagamento podendo ser encontradas em plantas aquaacuteticas e em lugares salinos
(BRAMBILA STOCKS 2010)
As lagartas tendem a ficar em locais protegidos como no colo da planta tuacuteneis nos
caules e em estaacutedios mais avanccedilados podem se alimentar da haste principal
inclusive abaixo da linha do solo (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010) Alimentam-se dos tecidos da coroa da planta provocando a
interrupccedilatildeo da circulaccedilatildeo de seiva o que ocasiona o aparecimento de necrose nas
18
bordas das folhas e posteriormente a morte da planta (FRANCO BAPTISTA
2010) Durante a alimentaccedilatildeo tecem teias entre as folhas baixeiras (aquelas que
ficam em contato com o canteiro) nas quais ficam protegidas e posteriormente
empupam (MURPHY 2008) Devido seu ataque a D fovealis pode danificar caules
folhas e frutos reduzindo a produccedilatildeo e inviabilizando o produto para o mercado in
natura aleacutem disso a injuacuteria causada pelo ataque pode servir como meio de entrada
para diferentes patoacutegenos (GILL 2013)
As pupas satildeo marrom-claro com aproximadamente 9 a 10 mm de comprimento O
casulo que as envolve eacute oval feito de seda fezes e partiacuteculas do solo e eacute construiacutedo
no solo (BETHKE VANDER MEY 2010) Natildeo haacute relatos de toleracircncia ao frio ou
qualquer tipo de diapausa durante qualquer parte do ciclo de vida Portanto poderia
completar vaacuterias geraccedilotildees anualmente sob condiccedilotildees ideais (HOFFMAN 2010)
Desta forma considerando o ciclo de desenvolvimento e consequentemente o
nuacutemero de geraccedilotildees anuais a presenccedila de plantios escalonados dentro de uma
mesma aacuterea pode resultar no aumento da populaccedilatildeo de D fovealis como tambeacutem
interferir em praacuteticas de controle existentes como Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas
(MFP) e de biocontrole que podem ser interrompidos pela necessidade de aplicaccedilatildeo
de inseticidas para controlar o inseto (CFIA 2005)
A disseminaccedilatildeo dessa praga pode ocorrer atraveacutes do comeacutercio de material vegetal
propagativo e natildeo propagativo logo medidas quarentenaacuterias satildeo necessaacuterias para
evitar a introduccedilatildeo dessa praga em aacutereas livres de ocorrecircncia (BRAMBILA
STOCKS 2010)
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis
O manejo dessa praga inclui controle cultural quiacutemico comportamental e bioloacutegico
devendo ser coordenado de acordo com o monitoramento da populaccedilatildeo
19
221 Controle cultural
Embora D fovealis esteja geralmente escondida inspeccedilotildees visuais regulares podem
auxiliar na detecccedilatildeo de sua presenccedila da fase jovem que pode ser constatada pela
existecircncia de danos nas folhas flores bototildees florais e hastes bem como dejetos e
buracos na superfiacutecie do solo (BRAMBILA STOCKS 2010) Fornazier et al (2011)
recomendam a retirada e a destruiccedilatildeo de folhas velhas se possiacutevel semanalmente
visando a reduccedilatildeo do nuacutemero de ovos e pupas evitando o raacutepido crescimento e
dispersatildeo populacional da praga
222 Controle Quiacutemico
No Brasil ainda natildeo haacute nenhum produto registrado no Ministeacuterio da Agricultura
Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) Poreacutem em outros paiacuteses os produtos relatados
para o controle de lagartas D fovealis satildeo Spinosade Bifentrina Fluvalinato
Deltametrina Esfenvalerato Orthene Lambdacialotrina Imidaclopride Metomil
Ethoprop Acefato Emamectina Permetrina Clorantraniliprol e Azadirachtin
(PIJNAKKER 2001 CFIA 2005 BETHKE VANDER MEY 2010) Aleacutem disso
Bethke e Vander Mey (2010) ainda recomendam que em ambiente de estufa para
controle dos adultos as aplicaccedilotildees tipo aerossol ou neacutevoa sejam realizadas no
periacuteodo noturno isso devido a maior atividade dos adultos
223 Controle Comportamental
Armadilhas luminosas com luz ultravioleta (UV) podem ser usadas para monitorar a
atividade da mariposa adulta em aacutereas em que a D fovealis estaacute estabelecida
Hoffman (2010) relata o sucesso da utilizaccedilatildeo dessas armadilhas em plantios nos
Estados Unidos Haacute relatos no Reino Unido de coletas de insetos adultos cerca de
20
10 km das estufas infestadas jaacute na Holanda foram encontrados insetos em
armadilhas luminosas a 100 km de sua ocorrecircncia (CFIA 2005)
Outra alternativa eacute a utilizaccedilatildeo de armadilhas tipo Delta com feromocircnio sexual ou
armadilhas que associem aacutegua e feromocircnio sendo estas especiacuteficas para adultos
machos de D fovealis (MURPHY 2008 DEVENTER 2009)
224 Controle Bioloacutegico
a Entomoacutefagos
Parasitoides de ovos do gecircnero Trichogramma (Hymenoptera Trichogrammatidae)
destacam-se pela ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica e pela vasta quantidade de
hospedeiros principalmente da ordem Lepidoptera (PRATISSOLI et al 2002) Na
Alemanha Zimmermann (2004) e Jaumlckel e Kurzhals (1995) relataram a ocorrecircncia
das espeacutecies Trichogramma evanescens Westwood Trichogramma cacoeciae
Marchal e Trichogramma brassicae Bezdenko parasitando ovos de D fovealis
Os agentes de controle bioloacutegico presentes no solo tambeacutem podem ser utilizados
entre eles estatildeo o besouro Atheta coriaria (Kraatz) (Coleoptera Staphylinidae) um
predador de ovos e lagartas neonatas o percevejo Podisius sp (Hemiptera
Pentatomidae) um predador de lagartas (MURPHY 2008) e aacutecaros predadores de
ovos Hypoaspis miles (Berlese) e Hypoaspis aculeifer (Canestrini) (Acari
Laelapidae) (CFIA 2013) Outro agente utilizado com sucesso em programas de
controle bioloacutegico de lagartas da famiacutelia Crambidae eacute a vespa endoparasitoide
Cotesia flavipes (Cameron) (Hymenoptera Braconidae) (SALLAM et al 2001) que
jaacute foi relatada por Zawadneak et al (2011) em lavouras de morango no estado do
Paranaacute na qual apresentou potencial para o controle de D fovealis
21
b Entomopatoacutegenos
b1 Nematoides
Os nematoides mais utilizados no controle de insetos pertencem agrave famiacutelia
Steinernematidae Estes tecircm sido aplicados em diversas culturas e mesmo em
outras situaccedilotildees para controle de um grande nuacutemero de insetos (ALVEZ 1998)
Nematoides entomopatogecircnicos jaacute vecircm sendo utilizados em outros paiacuteses no
manejo de D fovealis Stocks e Hodges (2013) citam a utilizaccedilatildeo da espeacutecie
Heterorhabditis bacteriophora (Poinar) (Nematoda Heterorhabditidae) jaacute Jaumlckel e
Kurzhals (1995) relatam que as espeacutecies Steinernema carpocapsae (Weiser) e S
feltiae (Filipjev) (Nematoda Steinernematidae) foram eficientes no controle de D
fovealis em diferentes estaacutedios larvais sendo que no estaacutedio 3 de desenvolvimento
essas espeacutecies proporcionaram 60 e 20 de mortalidade respectivamente
b2 Fungos entomopatogecircnicos
Os fungos entomopatogecircnicos Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok
(Hypocreales Clavicipitaceae) e Beauveria bassiana (Bals) Vuill (Hypocreales
Cordycipitaceae) satildeo muito utilizados devido agrave facilidade de produccedilatildeo ampla
distribuiccedilatildeo geograacutefica variedade de hospedeiros e ocorrecircncia em condiccedilotildees
naturais enzooacuteticas ou epizooacuteticas sendo ainda comumente encontrados no solo
mostrando-se como uma alternativa eficiente devido agrave especificidade com relaccedilatildeo agrave
praga-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e animais (ALVES 1998)
b3 Bacteacuteria entomopatogecircnica
A bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner eacute uma bacteacuteria
naturalmente encontrada no solo aeroacutebia ou facultativamente anaeroacutebia gram
22
positiva pertencente agrave famiacutelia Bacillaceae (BOBROWSKI et al 2003) formadora de
esporos pertencentes ao grupo Bacillus cereus (READ et al 2003) que eacute formado
por um complexo de vaacuterias espeacutecies (Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus
mycoides B thuringiensis e Bacillus weihenstephanensis) (POLANCZYK ALVES
2003)
Bacillus thuringiensis foi originalmente descoberto em 1902 por um bioacutelogo japonecircs
Shigetane Ishiwatari poreacutem foi caracterizado em 1911 por Ernst Berliner da
Alemanha quando este pesquisador isolou o bacilo de Anagasta kuehniella Zeller
(Lepidoptera Pyralidae) (POLANCZYK ALVES 2003 LIMA 2010) Desde entatildeo
essa espeacutecie eacute a mais utilizada mundialmente como biopesticida (CAPALBO et al
2008) A espeacutecie B thuringiensis se desenvolve rapidamente em condiccedilotildees
favoraacuteveis como temperatura e disponibilidade de nutrientes (HILBERT PIGGOT
2004) Em circunstacircncias de ausecircncia de nutrientes ou acuacutemulo de metaboacutelitos
indesejaacuteveis essa bacteacuteria entra em processo de esporulaccedilatildeo durante a fase
estacionaacuteria (POLANCZYK ALVES 2003)
Durante a fase de esporulaccedilatildeo essas bacteacuterias produzem proteiacutenas inseticidas
como cristais parasporais sendo estes compostos por uma ou mais proteiacutenas Cry
tambeacutem conhecidas como part-endotoxinas (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) Essas
toxinas denominadas Cry hidrolisadas atravessam a membrana peritroacutefica e
ligam-se a receptores especiacuteficos presentes nas microvilosidades apicais da
membrana das ceacutelulas colunares presentes no intestino meacutedio causando a
formaccedilatildeo de poros que aumentam a permeabilidade da membrana interferindo no
gradiente iocircnico e no balanccedilo osmoacutetico Dessa maneira ocorre aumento da absorccedilatildeo
de aacutegua o que leva agrave lise e eventual ruptura e desintegraccedilatildeo das ceacutelulas do
intestino meacutedio fazendo o inseto cessar a alimentaccedilatildeo e morrer logo apoacutes por
inaniccedilatildeo ou ainda apoacutes a lise das ceacutelulas do intestino meacutedio o ambiente torna-se
favoraacutevel agrave germinaccedilatildeo dos esporos (POLANCZYK VALICENTE BARETO 2008) e
nesse novo ambiente devido a mistura do conteuacutedo da hemolinfa e do intestino
meacutedio o pH torna-se aacutecido e os esporos se multiplicam de tal forma que o inseto
morre por septicemia (COPPING MENN 2000)
Proteiacutenas Cry satildeo altamente especiacuteficas para o inseto-alvo satildeo inoacutecuos para os
seres humanos animais vertebrados e plantas e satildeo completamente
biodegradaacuteveis (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) sendo considerada portanto um
23
agente seguro para o controle bioloacutegico de insetos na agricultura (LIMA 2010
POLANCZYK ALVES 2003) As diferentes cepas de bacteacuteria produzem vaacuterias
combinaccedilotildees de proteiacutenas Cry que satildeo proteiacutenas consideradas seletivas e
geralmente afetam insetos-alvo de ordens especiacuteficas (CLARK PHILLIPS COATS
2005)
O primeiro biopesticida agrave base de B thuringiensis foi lanccedilado na Franccedila em 1938 e
desde entatildeo mais de 100 formulaccedilotildees foram colocados no mercado mundial devido
agrave eficaacutecia e especificidade (POLANCZYK ALVES 2003) Devido agraves vantagens do
uso do B thuringiensis como agente de controle bioloacutegico sobre insetos-praga das
ordens Coleoptera Diptera Hymenoptera e Lepidoptera aleacutem de espeacutecies de
nematoides aumentando nos uacuteltimos anos o nuacutemero de estirpes isoladas a busca
por cepas mais toacutexicas eacute crescente no mundo inteiro (GEORGE CRICKMORE
2012)
Ateacute o iniacutecio de 1990 apenas trecircs produtos comerciais estavam disponiacuteveis no
mercado brasileiro sendo todos baseados em B thuringiensis Kurstaki com
destaque para o produto Dipelreg que eacute altamente eficiente para mais de 170
lepidoacutepteros-praga (LIMA 2010) Aleacutem deste outros produtos como Ablereg Agreereg
Bac-Control WPreg Bacturreg Dipel WPreg Dipel WGreg Thuricidereg e Xentarireg podem ser
encontrados em formulaccedilotildees de base soacutelida (poacute ou granulada) ou liacutequida (AGROFIT
2003)
Em paiacuteses como a Holanda o Canadaacute e os Paiacuteses Baixos produtos quiacutemicos e
formulados comerciais agrave base de B thuringiensis foram testados sobre lagartas de
D fovealis sob condiccedilotildees de estufa e verificou-se que ambos tiveram accedilatildeo sobre as
lagartas de D fovealis poreacutem observou-se que os formulados agrave base de Bt
mostraram maior eficiecircncia que os produtos quiacutemicos (CFIA 2013) Jaumlckel e
Kurzhals (1995) e Bethke et al (2012) observaram tambeacutem que a eficiecircncia de
produtos comercias agrave base de Bt no controle de lagartas de D fovealis eacute maior nos
estaacutegios de desenvolvimento iniciais
Outra forma de utilizaccedilatildeo de B thuringiensis tem sido por meio da inserccedilatildeo de genes
de toxinas Cry em cultivos transgecircnicos dando origem a plantas Bt o que
proporciona eficaacutecia na forma de controlar insetos-praga e na reduccedilatildeo das
aplicaccedilotildees de produtos quiacutemicos Em plantas transgecircnicas a proteiacutena Cry eacute
produzida continuamente no interior das ceacutelulas protegida da inativaccedilatildeo da luz
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
DEDICATOacuteRIA
Dedico este trabalho a Deus que me capacita a cada dia
Aos meus pais Neacir e Regilaine pelo amor e pelo ensinamento ao longo da vida
Ao meu amor Felipe
AGRADECIMENTOS Agradeccedilo a Deus por este sonho realizado por me capacitar e por me abenccediloar
com uma famiacutelia maravilhosa e amigos tatildeo queridos
Aos meus pais Neacir e Regilaine e aos meus irmatildeos Monique Leonardo Anna e
David pelo apoio e carinho em todos os momentos da minha vida fazendo o
possiacutevel e o impossiacutevel para que este sonho fosse realizado Pela compreensatildeo
conselhos e incentivo nos momentos difiacuteceis
Ao meu amor Felipe por todo apoio e incentivo durante essa jornada Pelas horas
de ligaccedilatildeo e companheirismo em todos os momentos
Ao Prof Dr Dirceu Pratissoli pela oportunidade de estaacutegio durante minha
graduaccedilatildeo pela orientaccedilatildeo e a oportunidade de cursar o mestrado em Produccedilatildeo
Vegetal no NUDEMAFI
Ao meu coorientador Prof Dr Hugo Joseacute Gonccedilalves dos Santos Junior pela grande
colaboraccedilatildeo amizade e conselhos ao longo desta etapa
Aos meus amigos e funcionaacuterios do Laboratoacuterio de entomologia do NUDEMAFI que
estiveram presentes em todos os momentos
Ao meu amigo Leonardo Mardgan pelo apoio e amizade
Agrave minha amiga e irmatilde do coraccedilatildeo Lauana pelo carinho e amizade durante toda
minha estadia em Alegre
Ao meu amigo Vitor pela amizade e apoio nas revisotildees
Aos meus amigos Lorena Ingrid Amanda Priscila e Joatildeo que investiram parte de
seus dias comigo na Torre e na Cacircmara de fluxo fazendo bem mais agradaacutevel a
montagem dos experimentos
Agrave minha companheira de escrita Deacutebora F M Fragoso pela amizade carinho e
incentivo
Agrave minha amiga Rebeca pelas oraccedilotildees e conselhos
Ao amigo Joseacute Romaacuterio pelo enorme apoio e pelas horas investidas ao meu auxiacutelio
Agrave galera da Duponchelia fovealis Marcel Joatildeo Ingrid Hiacutegor Francieli Victor P
Romaacuterio Alixelhe pelas brincadeiras durante as muitas horas de manutenccedilatildeo
Ao Programa de Produccedilatildeo Vegetal do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo e aos professores Edvaldo Turi (Joseacute Augusto) e Dirceu
Aos professores da minha banca examinadora Hugo Bolsoni Zago Anderson
Mathias Holtz e Leandro Pin Dalvi pela prontidatildeo e disponibilidade
Agrave Coordenaccedilatildeo de Aperfeiccediloamento de Pessoal de Niacutevel Superior (CAPES) pelo
concedimento da bolsa de estudo ao CNPq e a FAPES pelo auxiacutelio financeiro
ldquoAs palavras dos meus laacutebios e o meditar do meu coraccedilatildeo sejam agradaacuteveis na tua presenccedila Senhor rocha minha e redentor meurdquo
Salmos 1914
BIOGRAFIA
Kharen Priscilla de Oliveira Silva Salomatildeo nascida em Aimoreacutes Estado de Minas
Gerais em 04 de novembro de 1986 filha de Neacir de Oliveira Silva e Regilaine
Salomatildeo da Silva Cursou o estudo fundamental nas escolas Escola Estadual
Machado de Assis e Escola Estadual Frei Afonso Maria Jordaacute e o ensino meacutedio no
Centro Federal de Ensino Tecnoloacutegico ndash Unidade Descentralizada de Colatina ES
onde concluiu o ensino meacutedio em 2005 Aos 20 anos ingressou no curso de
Agronomia do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade Federal do Espiacuterito
Santo em Alegre-ES Durante a graduaccedilatildeo fez parte do Laboratoacuterio de entomologia
como estagiaacuteria voluntaacuteria e posteriormente ingressou na pesquisa atraveacutes do
programa de Iniciaccedilatildeo Cientiacutefica Aos 26 anos de idade obteve o tiacutetulo de Bacharel
em Agronomia e ingressou no Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal
do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade Federal do Espiacuterito Santo atuando
na aacuterea de controle bioloacutegico sob a orientaccedilatildeo do Prof Dr Dirceu Pratissoli Aos 21
de fevereiro de 2014 defendeu sua dissertaccedilatildeo para obtenccedilatildeo do tiacutetulo de Mestre
em Produccedilatildeo Vegetal Aacuterea de Concentraccedilatildeo em Fitossanidade (Entomologia)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) foi relatada em
plantios comerciais do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando
grandes problemas agrave cultura Poreacutem por ser uma praga recente natildeo haacute registro de
produtos para o seu controle A cada dia aumenta a demanda por alimentos e outros
produtos livres de resiacuteduos aleacutem da necessidade de uma agricultura mais
desenvolvida e sustentaacutevel Pesquisas com agentes de controle bioloacutegico e extratos
vegetais surgem como alternativa para o manejo desse inseto-praga Este trabalho
teve como objetivo avaliar a eficiecircncia de formulados comerciais agrave base de Bacillus
thuringiensis e a atividade do uso dos extratos aquosos de alho e fumo visando sua
adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle de D fovealis Nos bioensaios para
avaliar a patogenicidade e virulecircncia de duas formulaccedilotildees comerciais agrave base de B
thuringiensis Agreereg e Dipel WPreg sobre a dieta artificial adaptada agrave base de farelo
de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta por King e Hartley (1985) para Diatraea
saccharalis (Lepidoptera Crambidae) foram inoculados 70 microL de cada formulado
comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 Em seguida avaliou-se a
virulecircncia dos respectivos formulados isso atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo
letal (CL50) para o estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados
encontrados observou-se que o estaacutegio 1 de desenvolvimento apresentou 9588 e
8676 de mortalidades para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente
demonstrando patogenicidade e virulecircncia agrave D fovealis No bioensaio para avaliar a
atividade dos extratos aquosos de alho e fumo estes foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) Todos os tratamentos foram pulverizados com Torre de
Potter calibrada a pressatildeo de 15 lbpolsup2 Posteriormente estimou-se a concentraccedilatildeo
letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou 95 de mortalidade no
teste de suscetibilidade Desta forma com os resultados obtidos na presente
pesquisa concluiu-se que a utilizaccedilatildeo de formulados comerciais agrave base de B
thuringiensis e extrato de fumo podem ser uma alternativa no manejo fitossanitaacuterio
de D fovealis
Palavras-Chave Controle microbiano Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de
Pragas Morango
ABSTRACT
PLANT EXTRACTS AND Bacillus thuringiensis Berliner ON Duponchelia fovealis
ZELLER (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE) MANAGEMENT
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) caterpillar was recently
reported in commercial strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing
major problems to the crops but by being a recent plague there is no products
registration for its control The demand for food and other products free of waste
increases every day plus the need for a more developed and sustainable agriculture
In this scenario researches with biological control agents and plant extracts are an
alternative for the management of this insect pest This study was carried out to
assess the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis and the
activity of garlic and tobacco aqueous extracts as alternative methods of D fovealis
control In the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of two
commercial formulations of B Thuringiensis Agree reg and Dipel reg WP were
inoculated 70 microL of each commercial formula on the diet at a concentration 1 x 108
sporesmL-1 Then the virulence of each formulated was evaluated by estimating the
lethal concentration (LC50) for the stage with the greatest susceptibility In view of
the results it was observed that the development stage 1 showed 9588 and 8676
of mortalities for Agreereg and Dipelreg WP respectively products Both formulated
based on B thuringiensis showed pathogenicity and virulence to D fovealis In the
bioassay to evaluate the activity of garlic and tobacco aqueous extracts these were
applied at a 10 concentration (mv) All treatments were sprayed with Potterrsquos
Tower calibrated at 15lbinsup2 Later it was estimated lethal concentration (LC50) of the
tobacco aqueous extract which showed 95 mortality in susceptibility testing Thus
it was concluded that the use of commercial formulated based on B thuringiensis
and tobacco extract may be an alternative on phytosanitary control of D fovealis
Keywords Microbial control Insecticidal plants Phytosanitary Pest Management
Strawberry
LISTA DE TABELAS
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) 38
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) 380
Tabela 3 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingretiente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) 52
Tabela 4 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)Erro Indicador natildeo definido5
SUMAacuteRIO
CAPIacuteTULO 1 14
1 INTRODUCcedilAtildeO 14
2 REVISAtildeO DE LITERATURA 16
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE) 16
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis 18
221 Controle cultural 19
222 Controle Quiacutemico 19
223 Controle Comportamental 19
224 Controle Bioloacutegico 20
225 Extratos Vegetais 24
3 REFEREcircNCIAS 27
CAPIacuteTULO 2 32
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 32
RESUMO 32
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (LepidopteraCrambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 33
4 INTRODUCcedilAtildeO 34
41 MATERIAL E MEacuteTODOS 35
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 35
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis 36
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) 37
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO 37
43 CONCLUSAtildeO 41
44 REFEREcircNCIAS 42
CAPIacuteTULO 3 45
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis Zeller
(Lepidoptera Crambidae) 45
RESUMO 45
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) 46
5 INTRODUCcedilAtildeO 47
51 MATERIAL E MEacuteTODOS 48
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 48
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho 49
513 Suscetibilidade de D fovealis agrave extrato aquoso de fumo e alho 50
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL) 51
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO 51
53 CONCLUSAtildeO 55
54 REFEREcircNCIAS 56
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 59
14
CAPIacuteTULO 1
1 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro (Fragaria x ananassa Duch) eacute produzida nas mais
variadas regiotildees do mundo Pertencente agrave famiacutelia Rosaceae a espeacutecie foi originada
do cruzamento entre espeacutecies silvestres (F chiloensis L e F virginiana Duchesne)
(CASTRO 2004) No Brasil a cultura encontra-se difundida em regiotildees de clima
temperado e subtropical sendo a produccedilatildeo destinada agrave induacutestria e ao consumo in
natura Trata-se de uma cultura altamente exigente em praacuteticas culturais em toda
sua cadeia produtiva desde a implantaccedilatildeo ateacute a poacutes-colheita contudo se destaca
pela alta rentabilidade e intensa demanda por matildeo-de-obra (OLIVEIRA
SCIVITTARO 2009)
No estado do Espiacuterito Santo essa cultura foi implantada comercialmente no meado
do seacuteculo XX e expandiu-se significativamente a partir da metade da deacutecada de 90
sendo entatildeo considerada uma cultura de destaque no estado (BALNINO MARIN
2006) Em meacutedia satildeo produzidas 5960 toneladas de morango ao ano ocupando
uma extensatildeo de 185 hectares envolvendo praticamente 1500 propriedades de
base familiar assumindo um relevante fator de distribuiccedilatildeo de renda no meio rural
Mediante a importacircncia da cultura do morangueiro e a necessidade de organizaccedilatildeo
do processo produtivo e comercial criou-se um polo o qual tem como ecircnfase o uso
de sistemas de produccedilatildeo sustentaacuteveis por meio da utilizaccedilatildeo de tecnologias
apropriadas Desse polo participam principalmente os municiacutepios da regiatildeo das
montanhas capixabas com destaque para Santa Maria de Jetibaacute Domingos Martins
e Venda Nova do Imigrante (INCAPER 2010)
Contudo a cultura do morangueiro apresenta inuacutemeros problemas fitossanitaacuterios
Segundo Fornazier e Pratissoli (2006) um dos principais problemas na referida
cultura satildeo os aacutecaros No entanto em 2010 foi registrada a ocorrecircncia de
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) no municiacutepio de Santa Maria
de Jetibaacute destacando-se pela capacidade de dano raacutepido crescimento populacional
e alta capacidade de dispersatildeo (FORNAZIER et al 2011)
15
Por se tratar de uma praga que natildeo haacute registro de produtos para seu controle no
Ministeacuterio da Agricultura Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) produtores tecircm
recorrido ao uso de produtos quiacutemicos registrados para outras culturas o que vai
contra a legislaccedilatildeo aleacutem acarretar seacuterios prejuiacutezos ao agroecossistema (ALHO
2011) tais como altos niacuteveis de resiacuteduos toacutexicos nos produtos intoxicaccedilotildees ao
homem e mamiacuteferos resistecircncia de pragas a inseticidas contaminaccedilatildeo ambiental
aleacutem de elevar o custo de produccedilatildeo
Sendo assim uma alternativa para diminuir os impactos causados pelo meacutetodo
convencional eacute a adoccedilatildeo de medidas fitossanitaacuterias que reduzam a populaccedilatildeo de
insetos-praga e natildeo ocasionem impactos negativos sobre o meio ambiente e aos
inimigos naturais presentes na aacuterea Uma dessas medidas eacute o Manejo Fitossanitaacuterio
de Pragas (MFP) que engloba princiacutepios e meacutetodos isolados ou em conjunto que
visam garantir maior produtividade e menor agressividade ao meio ambiente visando
manejar o inseto-praga reduzindo seu niacutevel de dano (ALVEZ et al 2007)
Entre as medidas adotadas no MFP o uso de produtos formulados a partir de
agentes bioloacutegicos como a bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner
(Eubacteriales Bacillaceae) se mostra como alternativa eficiente devido agrave
especificidade com relaccedilatildeo a pragas-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e
animais (POLANCZYK ALVES 2003)
Aleacutem desses agentes bioloacutegicos a utilizaccedilatildeo de inseticidas botacircnicos derivados de
plantas ou parte das mesmas obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo
podem exercer atividade toacutexica aos insetos interferindo no desenvolvimento haacutebito
alimentar oviposiccedilatildeo repelecircncia ou mesmo morte (WIESBROOK 2004 SOUZA
ARAUacuteJO NASCIMENTO 2007) No passado o mercado de inseticidas botacircnicos
era dominado pelas piretrinas azadiractina e as rotenonas poreacutem outros inseticidas
botacircnicos vecircm ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) e o alho
(Allium sativum L) entre outras espeacutecies botacircnicas (ISMAN 1997)
A necessidade da implementaccedilatildeo de pesquisas que visam avaliar a eficiecircncia de
meacutetodos de manejo alternativo aplicaacuteveis agrave D fovealis satildeo de grande importacircncia
Nesse sentido este estudo teve por meta avaliar a eficiecircncia do agente de controle
bioloacutegico B thuringiensis e dos extratos aquosos de Fumo e Alho sob condiccedilotildees de
laboratoacuterio visando proporcionar alternativas de manejo viaacuteveis para a implantaccedilatildeo
de programas de manejo fitossanitaacuterio de D fovealis
16
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE)
A Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) tem sua origem na regiatildeo
do Mediterracircneo e nas Ilhas Canaacuterias poreacutem pode ser encontrada em diversas
partes na Aacutefrica Oriente Meacutedio Europa Canadaacute e Estados Unidos da Ameacuterica
(HOFFMAN 2010) O primeiro relato dessa praga fora da sua aacuterea nativa foi em
estufas na Finlacircndia em 1984 e posteriormente em 1989 encontrado na Holanda
fora das estufas (CFIA 2005) Nos Estados Unidos foi detectada pela primeira vez
em 2004 em plantios de begocircnia na Califoacuternia e em 2005 no Canadaacute (GILL 2013)
No Brasil foi constatada em 2008 no estado do Paranaacute e posteriormente no estado
do Espiacuterito Santo Poreacutem apenas em 2010 a espeacutecie foi identificada por uma
especialista do USDA (United States Department of Agriculture) (ZAWADNEAK et
al 2011) Os mesmos autores citam que os primeiros relatos reportam que a praga
foi encontrada no estado do Paranaacute em lavouras comerciais de morango em
condiccedilotildees de cultivo protegido tipo tuacutenel alto nos cultivares Albion e Camino real
Posteriormente a mesma foi encontrada na cultivar Portola no estado do Espiacuterito
Santo Os produtores capixabas tambeacutem constataram a presenccedila de D fovealis nos
cultivares Aromas Albion e Camino Real produzidos em tuacutenel baixo
A lagarta D fovealis eacute uma praga poliacutefaga que gera grandes problemas em diversas
variedades de cultivos de plantas ornamentais e culturas agriacutecolas especialmente
em cultivos em estufa Essa espeacutecie foi relatada em mais de 70 espeacutecies
hospedeiras em cerca de 38 famiacutelias de plantas como ornamentais dos gecircneros
Amaranthus Anthurium Begonia e culturas comercialmente cultivadas como
Capsicum annuum L e Solanum lycopersicum L Fragaria x ananassa entre outras
(GILL 2013)
Com relaccedilatildeo ao ciclo de vida de D fovealis pode-se salientar que eacute um inseto com
desenvolvimento holometaboacutelico Os adultos medem cerca de 19 a 21 mm de
comprimento satildeo de coloraccedilatildeo castanho acinzentado com aneacuteis mais claros no
abdocircmen e possuem uma linha irregular branco-amarelada atraveacutes das asas Os
17
adultos ficam sob as folhas possuem haacutebito noturno e durante o dia podem realizar
voos curtos (MURPHY 2008 RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010) Em
repouso o adulto manteacutem as asas planas em forma triangular e o abdocircmen se
posiciona voltado para cima (HOFFMAN 2010) Os machos possuem o abdocircmen
mais longo e delgado que o da fecircmea (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010)
Os adultos podem viver durante uma a duas semanas sendo que a fecircmea adulta
potildee ateacute 200 ovos durante esse periacuteodo Os ovos possuem formato oval e
inicialmente apresentam coloraccedilatildeo verde-esbranquiccedilada ficando vermelho com o
desenvolvimento do embriatildeo ateacute apresentarem pontuaccedilotildees marrons que ocorrem
antes da eclosatildeo das lagartas (FRANCO BAPTISTA 2010) Satildeo ovipositados
isoladamente ou em massas de trecircs a dez ovos sobrepostos seja na parte inferior
das folhas perto das veias na base do talo na base da planta ou na camada
superior do solo (RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010 HOFFMAN 2010)
O periacuteodo de incubaccedilatildeo dos ovos varia em torno de seis dias dependendo da
temperatura local
As lagartas medem entre 20 a 30 mm de comprimento possuem coloraccedilatildeo branca
amarelada com pontos marrons longitudinalmente distribuiacutedos pelo corpo com pelo
menos um pelo em cada ponto e com cabeccedila de coloraccedilatildeo marrom-escura
(RICHTER 2009 GILL 2013) Alimentam-se de folhas flores brotos frutos e restos
de folhasplanta em decomposiccedilatildeo e em culturas plantadas com maior densidade
podem ser encontradas se alimentando de qualquer parte da planta (BRAMBILA
STOCKS 2010) As lagartas se desenvolvem rapidamente satildeo muito aacutegeis e
preferem locais uacutemidos na base da planta proacuteximo ao solo na camada superior do
solo ou em raiacutezes expostas das plantas (HOFFMAN 2010) As lagartas satildeo
adaptadas a condiccedilotildees de alta umidade e podem tolerar ateacute mesmo condiccedilotildees de
alagamento podendo ser encontradas em plantas aquaacuteticas e em lugares salinos
(BRAMBILA STOCKS 2010)
As lagartas tendem a ficar em locais protegidos como no colo da planta tuacuteneis nos
caules e em estaacutedios mais avanccedilados podem se alimentar da haste principal
inclusive abaixo da linha do solo (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010) Alimentam-se dos tecidos da coroa da planta provocando a
interrupccedilatildeo da circulaccedilatildeo de seiva o que ocasiona o aparecimento de necrose nas
18
bordas das folhas e posteriormente a morte da planta (FRANCO BAPTISTA
2010) Durante a alimentaccedilatildeo tecem teias entre as folhas baixeiras (aquelas que
ficam em contato com o canteiro) nas quais ficam protegidas e posteriormente
empupam (MURPHY 2008) Devido seu ataque a D fovealis pode danificar caules
folhas e frutos reduzindo a produccedilatildeo e inviabilizando o produto para o mercado in
natura aleacutem disso a injuacuteria causada pelo ataque pode servir como meio de entrada
para diferentes patoacutegenos (GILL 2013)
As pupas satildeo marrom-claro com aproximadamente 9 a 10 mm de comprimento O
casulo que as envolve eacute oval feito de seda fezes e partiacuteculas do solo e eacute construiacutedo
no solo (BETHKE VANDER MEY 2010) Natildeo haacute relatos de toleracircncia ao frio ou
qualquer tipo de diapausa durante qualquer parte do ciclo de vida Portanto poderia
completar vaacuterias geraccedilotildees anualmente sob condiccedilotildees ideais (HOFFMAN 2010)
Desta forma considerando o ciclo de desenvolvimento e consequentemente o
nuacutemero de geraccedilotildees anuais a presenccedila de plantios escalonados dentro de uma
mesma aacuterea pode resultar no aumento da populaccedilatildeo de D fovealis como tambeacutem
interferir em praacuteticas de controle existentes como Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas
(MFP) e de biocontrole que podem ser interrompidos pela necessidade de aplicaccedilatildeo
de inseticidas para controlar o inseto (CFIA 2005)
A disseminaccedilatildeo dessa praga pode ocorrer atraveacutes do comeacutercio de material vegetal
propagativo e natildeo propagativo logo medidas quarentenaacuterias satildeo necessaacuterias para
evitar a introduccedilatildeo dessa praga em aacutereas livres de ocorrecircncia (BRAMBILA
STOCKS 2010)
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis
O manejo dessa praga inclui controle cultural quiacutemico comportamental e bioloacutegico
devendo ser coordenado de acordo com o monitoramento da populaccedilatildeo
19
221 Controle cultural
Embora D fovealis esteja geralmente escondida inspeccedilotildees visuais regulares podem
auxiliar na detecccedilatildeo de sua presenccedila da fase jovem que pode ser constatada pela
existecircncia de danos nas folhas flores bototildees florais e hastes bem como dejetos e
buracos na superfiacutecie do solo (BRAMBILA STOCKS 2010) Fornazier et al (2011)
recomendam a retirada e a destruiccedilatildeo de folhas velhas se possiacutevel semanalmente
visando a reduccedilatildeo do nuacutemero de ovos e pupas evitando o raacutepido crescimento e
dispersatildeo populacional da praga
222 Controle Quiacutemico
No Brasil ainda natildeo haacute nenhum produto registrado no Ministeacuterio da Agricultura
Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) Poreacutem em outros paiacuteses os produtos relatados
para o controle de lagartas D fovealis satildeo Spinosade Bifentrina Fluvalinato
Deltametrina Esfenvalerato Orthene Lambdacialotrina Imidaclopride Metomil
Ethoprop Acefato Emamectina Permetrina Clorantraniliprol e Azadirachtin
(PIJNAKKER 2001 CFIA 2005 BETHKE VANDER MEY 2010) Aleacutem disso
Bethke e Vander Mey (2010) ainda recomendam que em ambiente de estufa para
controle dos adultos as aplicaccedilotildees tipo aerossol ou neacutevoa sejam realizadas no
periacuteodo noturno isso devido a maior atividade dos adultos
223 Controle Comportamental
Armadilhas luminosas com luz ultravioleta (UV) podem ser usadas para monitorar a
atividade da mariposa adulta em aacutereas em que a D fovealis estaacute estabelecida
Hoffman (2010) relata o sucesso da utilizaccedilatildeo dessas armadilhas em plantios nos
Estados Unidos Haacute relatos no Reino Unido de coletas de insetos adultos cerca de
20
10 km das estufas infestadas jaacute na Holanda foram encontrados insetos em
armadilhas luminosas a 100 km de sua ocorrecircncia (CFIA 2005)
Outra alternativa eacute a utilizaccedilatildeo de armadilhas tipo Delta com feromocircnio sexual ou
armadilhas que associem aacutegua e feromocircnio sendo estas especiacuteficas para adultos
machos de D fovealis (MURPHY 2008 DEVENTER 2009)
224 Controle Bioloacutegico
a Entomoacutefagos
Parasitoides de ovos do gecircnero Trichogramma (Hymenoptera Trichogrammatidae)
destacam-se pela ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica e pela vasta quantidade de
hospedeiros principalmente da ordem Lepidoptera (PRATISSOLI et al 2002) Na
Alemanha Zimmermann (2004) e Jaumlckel e Kurzhals (1995) relataram a ocorrecircncia
das espeacutecies Trichogramma evanescens Westwood Trichogramma cacoeciae
Marchal e Trichogramma brassicae Bezdenko parasitando ovos de D fovealis
Os agentes de controle bioloacutegico presentes no solo tambeacutem podem ser utilizados
entre eles estatildeo o besouro Atheta coriaria (Kraatz) (Coleoptera Staphylinidae) um
predador de ovos e lagartas neonatas o percevejo Podisius sp (Hemiptera
Pentatomidae) um predador de lagartas (MURPHY 2008) e aacutecaros predadores de
ovos Hypoaspis miles (Berlese) e Hypoaspis aculeifer (Canestrini) (Acari
Laelapidae) (CFIA 2013) Outro agente utilizado com sucesso em programas de
controle bioloacutegico de lagartas da famiacutelia Crambidae eacute a vespa endoparasitoide
Cotesia flavipes (Cameron) (Hymenoptera Braconidae) (SALLAM et al 2001) que
jaacute foi relatada por Zawadneak et al (2011) em lavouras de morango no estado do
Paranaacute na qual apresentou potencial para o controle de D fovealis
21
b Entomopatoacutegenos
b1 Nematoides
Os nematoides mais utilizados no controle de insetos pertencem agrave famiacutelia
Steinernematidae Estes tecircm sido aplicados em diversas culturas e mesmo em
outras situaccedilotildees para controle de um grande nuacutemero de insetos (ALVEZ 1998)
Nematoides entomopatogecircnicos jaacute vecircm sendo utilizados em outros paiacuteses no
manejo de D fovealis Stocks e Hodges (2013) citam a utilizaccedilatildeo da espeacutecie
Heterorhabditis bacteriophora (Poinar) (Nematoda Heterorhabditidae) jaacute Jaumlckel e
Kurzhals (1995) relatam que as espeacutecies Steinernema carpocapsae (Weiser) e S
feltiae (Filipjev) (Nematoda Steinernematidae) foram eficientes no controle de D
fovealis em diferentes estaacutedios larvais sendo que no estaacutedio 3 de desenvolvimento
essas espeacutecies proporcionaram 60 e 20 de mortalidade respectivamente
b2 Fungos entomopatogecircnicos
Os fungos entomopatogecircnicos Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok
(Hypocreales Clavicipitaceae) e Beauveria bassiana (Bals) Vuill (Hypocreales
Cordycipitaceae) satildeo muito utilizados devido agrave facilidade de produccedilatildeo ampla
distribuiccedilatildeo geograacutefica variedade de hospedeiros e ocorrecircncia em condiccedilotildees
naturais enzooacuteticas ou epizooacuteticas sendo ainda comumente encontrados no solo
mostrando-se como uma alternativa eficiente devido agrave especificidade com relaccedilatildeo agrave
praga-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e animais (ALVES 1998)
b3 Bacteacuteria entomopatogecircnica
A bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner eacute uma bacteacuteria
naturalmente encontrada no solo aeroacutebia ou facultativamente anaeroacutebia gram
22
positiva pertencente agrave famiacutelia Bacillaceae (BOBROWSKI et al 2003) formadora de
esporos pertencentes ao grupo Bacillus cereus (READ et al 2003) que eacute formado
por um complexo de vaacuterias espeacutecies (Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus
mycoides B thuringiensis e Bacillus weihenstephanensis) (POLANCZYK ALVES
2003)
Bacillus thuringiensis foi originalmente descoberto em 1902 por um bioacutelogo japonecircs
Shigetane Ishiwatari poreacutem foi caracterizado em 1911 por Ernst Berliner da
Alemanha quando este pesquisador isolou o bacilo de Anagasta kuehniella Zeller
(Lepidoptera Pyralidae) (POLANCZYK ALVES 2003 LIMA 2010) Desde entatildeo
essa espeacutecie eacute a mais utilizada mundialmente como biopesticida (CAPALBO et al
2008) A espeacutecie B thuringiensis se desenvolve rapidamente em condiccedilotildees
favoraacuteveis como temperatura e disponibilidade de nutrientes (HILBERT PIGGOT
2004) Em circunstacircncias de ausecircncia de nutrientes ou acuacutemulo de metaboacutelitos
indesejaacuteveis essa bacteacuteria entra em processo de esporulaccedilatildeo durante a fase
estacionaacuteria (POLANCZYK ALVES 2003)
Durante a fase de esporulaccedilatildeo essas bacteacuterias produzem proteiacutenas inseticidas
como cristais parasporais sendo estes compostos por uma ou mais proteiacutenas Cry
tambeacutem conhecidas como part-endotoxinas (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) Essas
toxinas denominadas Cry hidrolisadas atravessam a membrana peritroacutefica e
ligam-se a receptores especiacuteficos presentes nas microvilosidades apicais da
membrana das ceacutelulas colunares presentes no intestino meacutedio causando a
formaccedilatildeo de poros que aumentam a permeabilidade da membrana interferindo no
gradiente iocircnico e no balanccedilo osmoacutetico Dessa maneira ocorre aumento da absorccedilatildeo
de aacutegua o que leva agrave lise e eventual ruptura e desintegraccedilatildeo das ceacutelulas do
intestino meacutedio fazendo o inseto cessar a alimentaccedilatildeo e morrer logo apoacutes por
inaniccedilatildeo ou ainda apoacutes a lise das ceacutelulas do intestino meacutedio o ambiente torna-se
favoraacutevel agrave germinaccedilatildeo dos esporos (POLANCZYK VALICENTE BARETO 2008) e
nesse novo ambiente devido a mistura do conteuacutedo da hemolinfa e do intestino
meacutedio o pH torna-se aacutecido e os esporos se multiplicam de tal forma que o inseto
morre por septicemia (COPPING MENN 2000)
Proteiacutenas Cry satildeo altamente especiacuteficas para o inseto-alvo satildeo inoacutecuos para os
seres humanos animais vertebrados e plantas e satildeo completamente
biodegradaacuteveis (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) sendo considerada portanto um
23
agente seguro para o controle bioloacutegico de insetos na agricultura (LIMA 2010
POLANCZYK ALVES 2003) As diferentes cepas de bacteacuteria produzem vaacuterias
combinaccedilotildees de proteiacutenas Cry que satildeo proteiacutenas consideradas seletivas e
geralmente afetam insetos-alvo de ordens especiacuteficas (CLARK PHILLIPS COATS
2005)
O primeiro biopesticida agrave base de B thuringiensis foi lanccedilado na Franccedila em 1938 e
desde entatildeo mais de 100 formulaccedilotildees foram colocados no mercado mundial devido
agrave eficaacutecia e especificidade (POLANCZYK ALVES 2003) Devido agraves vantagens do
uso do B thuringiensis como agente de controle bioloacutegico sobre insetos-praga das
ordens Coleoptera Diptera Hymenoptera e Lepidoptera aleacutem de espeacutecies de
nematoides aumentando nos uacuteltimos anos o nuacutemero de estirpes isoladas a busca
por cepas mais toacutexicas eacute crescente no mundo inteiro (GEORGE CRICKMORE
2012)
Ateacute o iniacutecio de 1990 apenas trecircs produtos comerciais estavam disponiacuteveis no
mercado brasileiro sendo todos baseados em B thuringiensis Kurstaki com
destaque para o produto Dipelreg que eacute altamente eficiente para mais de 170
lepidoacutepteros-praga (LIMA 2010) Aleacutem deste outros produtos como Ablereg Agreereg
Bac-Control WPreg Bacturreg Dipel WPreg Dipel WGreg Thuricidereg e Xentarireg podem ser
encontrados em formulaccedilotildees de base soacutelida (poacute ou granulada) ou liacutequida (AGROFIT
2003)
Em paiacuteses como a Holanda o Canadaacute e os Paiacuteses Baixos produtos quiacutemicos e
formulados comerciais agrave base de B thuringiensis foram testados sobre lagartas de
D fovealis sob condiccedilotildees de estufa e verificou-se que ambos tiveram accedilatildeo sobre as
lagartas de D fovealis poreacutem observou-se que os formulados agrave base de Bt
mostraram maior eficiecircncia que os produtos quiacutemicos (CFIA 2013) Jaumlckel e
Kurzhals (1995) e Bethke et al (2012) observaram tambeacutem que a eficiecircncia de
produtos comercias agrave base de Bt no controle de lagartas de D fovealis eacute maior nos
estaacutegios de desenvolvimento iniciais
Outra forma de utilizaccedilatildeo de B thuringiensis tem sido por meio da inserccedilatildeo de genes
de toxinas Cry em cultivos transgecircnicos dando origem a plantas Bt o que
proporciona eficaacutecia na forma de controlar insetos-praga e na reduccedilatildeo das
aplicaccedilotildees de produtos quiacutemicos Em plantas transgecircnicas a proteiacutena Cry eacute
produzida continuamente no interior das ceacutelulas protegida da inativaccedilatildeo da luz
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
AGRADECIMENTOS Agradeccedilo a Deus por este sonho realizado por me capacitar e por me abenccediloar
com uma famiacutelia maravilhosa e amigos tatildeo queridos
Aos meus pais Neacir e Regilaine e aos meus irmatildeos Monique Leonardo Anna e
David pelo apoio e carinho em todos os momentos da minha vida fazendo o
possiacutevel e o impossiacutevel para que este sonho fosse realizado Pela compreensatildeo
conselhos e incentivo nos momentos difiacuteceis
Ao meu amor Felipe por todo apoio e incentivo durante essa jornada Pelas horas
de ligaccedilatildeo e companheirismo em todos os momentos
Ao Prof Dr Dirceu Pratissoli pela oportunidade de estaacutegio durante minha
graduaccedilatildeo pela orientaccedilatildeo e a oportunidade de cursar o mestrado em Produccedilatildeo
Vegetal no NUDEMAFI
Ao meu coorientador Prof Dr Hugo Joseacute Gonccedilalves dos Santos Junior pela grande
colaboraccedilatildeo amizade e conselhos ao longo desta etapa
Aos meus amigos e funcionaacuterios do Laboratoacuterio de entomologia do NUDEMAFI que
estiveram presentes em todos os momentos
Ao meu amigo Leonardo Mardgan pelo apoio e amizade
Agrave minha amiga e irmatilde do coraccedilatildeo Lauana pelo carinho e amizade durante toda
minha estadia em Alegre
Ao meu amigo Vitor pela amizade e apoio nas revisotildees
Aos meus amigos Lorena Ingrid Amanda Priscila e Joatildeo que investiram parte de
seus dias comigo na Torre e na Cacircmara de fluxo fazendo bem mais agradaacutevel a
montagem dos experimentos
Agrave minha companheira de escrita Deacutebora F M Fragoso pela amizade carinho e
incentivo
Agrave minha amiga Rebeca pelas oraccedilotildees e conselhos
Ao amigo Joseacute Romaacuterio pelo enorme apoio e pelas horas investidas ao meu auxiacutelio
Agrave galera da Duponchelia fovealis Marcel Joatildeo Ingrid Hiacutegor Francieli Victor P
Romaacuterio Alixelhe pelas brincadeiras durante as muitas horas de manutenccedilatildeo
Ao Programa de Produccedilatildeo Vegetal do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo e aos professores Edvaldo Turi (Joseacute Augusto) e Dirceu
Aos professores da minha banca examinadora Hugo Bolsoni Zago Anderson
Mathias Holtz e Leandro Pin Dalvi pela prontidatildeo e disponibilidade
Agrave Coordenaccedilatildeo de Aperfeiccediloamento de Pessoal de Niacutevel Superior (CAPES) pelo
concedimento da bolsa de estudo ao CNPq e a FAPES pelo auxiacutelio financeiro
ldquoAs palavras dos meus laacutebios e o meditar do meu coraccedilatildeo sejam agradaacuteveis na tua presenccedila Senhor rocha minha e redentor meurdquo
Salmos 1914
BIOGRAFIA
Kharen Priscilla de Oliveira Silva Salomatildeo nascida em Aimoreacutes Estado de Minas
Gerais em 04 de novembro de 1986 filha de Neacir de Oliveira Silva e Regilaine
Salomatildeo da Silva Cursou o estudo fundamental nas escolas Escola Estadual
Machado de Assis e Escola Estadual Frei Afonso Maria Jordaacute e o ensino meacutedio no
Centro Federal de Ensino Tecnoloacutegico ndash Unidade Descentralizada de Colatina ES
onde concluiu o ensino meacutedio em 2005 Aos 20 anos ingressou no curso de
Agronomia do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade Federal do Espiacuterito
Santo em Alegre-ES Durante a graduaccedilatildeo fez parte do Laboratoacuterio de entomologia
como estagiaacuteria voluntaacuteria e posteriormente ingressou na pesquisa atraveacutes do
programa de Iniciaccedilatildeo Cientiacutefica Aos 26 anos de idade obteve o tiacutetulo de Bacharel
em Agronomia e ingressou no Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal
do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade Federal do Espiacuterito Santo atuando
na aacuterea de controle bioloacutegico sob a orientaccedilatildeo do Prof Dr Dirceu Pratissoli Aos 21
de fevereiro de 2014 defendeu sua dissertaccedilatildeo para obtenccedilatildeo do tiacutetulo de Mestre
em Produccedilatildeo Vegetal Aacuterea de Concentraccedilatildeo em Fitossanidade (Entomologia)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) foi relatada em
plantios comerciais do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando
grandes problemas agrave cultura Poreacutem por ser uma praga recente natildeo haacute registro de
produtos para o seu controle A cada dia aumenta a demanda por alimentos e outros
produtos livres de resiacuteduos aleacutem da necessidade de uma agricultura mais
desenvolvida e sustentaacutevel Pesquisas com agentes de controle bioloacutegico e extratos
vegetais surgem como alternativa para o manejo desse inseto-praga Este trabalho
teve como objetivo avaliar a eficiecircncia de formulados comerciais agrave base de Bacillus
thuringiensis e a atividade do uso dos extratos aquosos de alho e fumo visando sua
adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle de D fovealis Nos bioensaios para
avaliar a patogenicidade e virulecircncia de duas formulaccedilotildees comerciais agrave base de B
thuringiensis Agreereg e Dipel WPreg sobre a dieta artificial adaptada agrave base de farelo
de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta por King e Hartley (1985) para Diatraea
saccharalis (Lepidoptera Crambidae) foram inoculados 70 microL de cada formulado
comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 Em seguida avaliou-se a
virulecircncia dos respectivos formulados isso atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo
letal (CL50) para o estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados
encontrados observou-se que o estaacutegio 1 de desenvolvimento apresentou 9588 e
8676 de mortalidades para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente
demonstrando patogenicidade e virulecircncia agrave D fovealis No bioensaio para avaliar a
atividade dos extratos aquosos de alho e fumo estes foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) Todos os tratamentos foram pulverizados com Torre de
Potter calibrada a pressatildeo de 15 lbpolsup2 Posteriormente estimou-se a concentraccedilatildeo
letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou 95 de mortalidade no
teste de suscetibilidade Desta forma com os resultados obtidos na presente
pesquisa concluiu-se que a utilizaccedilatildeo de formulados comerciais agrave base de B
thuringiensis e extrato de fumo podem ser uma alternativa no manejo fitossanitaacuterio
de D fovealis
Palavras-Chave Controle microbiano Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de
Pragas Morango
ABSTRACT
PLANT EXTRACTS AND Bacillus thuringiensis Berliner ON Duponchelia fovealis
ZELLER (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE) MANAGEMENT
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) caterpillar was recently
reported in commercial strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing
major problems to the crops but by being a recent plague there is no products
registration for its control The demand for food and other products free of waste
increases every day plus the need for a more developed and sustainable agriculture
In this scenario researches with biological control agents and plant extracts are an
alternative for the management of this insect pest This study was carried out to
assess the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis and the
activity of garlic and tobacco aqueous extracts as alternative methods of D fovealis
control In the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of two
commercial formulations of B Thuringiensis Agree reg and Dipel reg WP were
inoculated 70 microL of each commercial formula on the diet at a concentration 1 x 108
sporesmL-1 Then the virulence of each formulated was evaluated by estimating the
lethal concentration (LC50) for the stage with the greatest susceptibility In view of
the results it was observed that the development stage 1 showed 9588 and 8676
of mortalities for Agreereg and Dipelreg WP respectively products Both formulated
based on B thuringiensis showed pathogenicity and virulence to D fovealis In the
bioassay to evaluate the activity of garlic and tobacco aqueous extracts these were
applied at a 10 concentration (mv) All treatments were sprayed with Potterrsquos
Tower calibrated at 15lbinsup2 Later it was estimated lethal concentration (LC50) of the
tobacco aqueous extract which showed 95 mortality in susceptibility testing Thus
it was concluded that the use of commercial formulated based on B thuringiensis
and tobacco extract may be an alternative on phytosanitary control of D fovealis
Keywords Microbial control Insecticidal plants Phytosanitary Pest Management
Strawberry
LISTA DE TABELAS
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) 38
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) 380
Tabela 3 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingretiente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) 52
Tabela 4 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)Erro Indicador natildeo definido5
SUMAacuteRIO
CAPIacuteTULO 1 14
1 INTRODUCcedilAtildeO 14
2 REVISAtildeO DE LITERATURA 16
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE) 16
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis 18
221 Controle cultural 19
222 Controle Quiacutemico 19
223 Controle Comportamental 19
224 Controle Bioloacutegico 20
225 Extratos Vegetais 24
3 REFEREcircNCIAS 27
CAPIacuteTULO 2 32
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 32
RESUMO 32
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (LepidopteraCrambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 33
4 INTRODUCcedilAtildeO 34
41 MATERIAL E MEacuteTODOS 35
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 35
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis 36
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) 37
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO 37
43 CONCLUSAtildeO 41
44 REFEREcircNCIAS 42
CAPIacuteTULO 3 45
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis Zeller
(Lepidoptera Crambidae) 45
RESUMO 45
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) 46
5 INTRODUCcedilAtildeO 47
51 MATERIAL E MEacuteTODOS 48
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 48
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho 49
513 Suscetibilidade de D fovealis agrave extrato aquoso de fumo e alho 50
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL) 51
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO 51
53 CONCLUSAtildeO 55
54 REFEREcircNCIAS 56
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 59
14
CAPIacuteTULO 1
1 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro (Fragaria x ananassa Duch) eacute produzida nas mais
variadas regiotildees do mundo Pertencente agrave famiacutelia Rosaceae a espeacutecie foi originada
do cruzamento entre espeacutecies silvestres (F chiloensis L e F virginiana Duchesne)
(CASTRO 2004) No Brasil a cultura encontra-se difundida em regiotildees de clima
temperado e subtropical sendo a produccedilatildeo destinada agrave induacutestria e ao consumo in
natura Trata-se de uma cultura altamente exigente em praacuteticas culturais em toda
sua cadeia produtiva desde a implantaccedilatildeo ateacute a poacutes-colheita contudo se destaca
pela alta rentabilidade e intensa demanda por matildeo-de-obra (OLIVEIRA
SCIVITTARO 2009)
No estado do Espiacuterito Santo essa cultura foi implantada comercialmente no meado
do seacuteculo XX e expandiu-se significativamente a partir da metade da deacutecada de 90
sendo entatildeo considerada uma cultura de destaque no estado (BALNINO MARIN
2006) Em meacutedia satildeo produzidas 5960 toneladas de morango ao ano ocupando
uma extensatildeo de 185 hectares envolvendo praticamente 1500 propriedades de
base familiar assumindo um relevante fator de distribuiccedilatildeo de renda no meio rural
Mediante a importacircncia da cultura do morangueiro e a necessidade de organizaccedilatildeo
do processo produtivo e comercial criou-se um polo o qual tem como ecircnfase o uso
de sistemas de produccedilatildeo sustentaacuteveis por meio da utilizaccedilatildeo de tecnologias
apropriadas Desse polo participam principalmente os municiacutepios da regiatildeo das
montanhas capixabas com destaque para Santa Maria de Jetibaacute Domingos Martins
e Venda Nova do Imigrante (INCAPER 2010)
Contudo a cultura do morangueiro apresenta inuacutemeros problemas fitossanitaacuterios
Segundo Fornazier e Pratissoli (2006) um dos principais problemas na referida
cultura satildeo os aacutecaros No entanto em 2010 foi registrada a ocorrecircncia de
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) no municiacutepio de Santa Maria
de Jetibaacute destacando-se pela capacidade de dano raacutepido crescimento populacional
e alta capacidade de dispersatildeo (FORNAZIER et al 2011)
15
Por se tratar de uma praga que natildeo haacute registro de produtos para seu controle no
Ministeacuterio da Agricultura Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) produtores tecircm
recorrido ao uso de produtos quiacutemicos registrados para outras culturas o que vai
contra a legislaccedilatildeo aleacutem acarretar seacuterios prejuiacutezos ao agroecossistema (ALHO
2011) tais como altos niacuteveis de resiacuteduos toacutexicos nos produtos intoxicaccedilotildees ao
homem e mamiacuteferos resistecircncia de pragas a inseticidas contaminaccedilatildeo ambiental
aleacutem de elevar o custo de produccedilatildeo
Sendo assim uma alternativa para diminuir os impactos causados pelo meacutetodo
convencional eacute a adoccedilatildeo de medidas fitossanitaacuterias que reduzam a populaccedilatildeo de
insetos-praga e natildeo ocasionem impactos negativos sobre o meio ambiente e aos
inimigos naturais presentes na aacuterea Uma dessas medidas eacute o Manejo Fitossanitaacuterio
de Pragas (MFP) que engloba princiacutepios e meacutetodos isolados ou em conjunto que
visam garantir maior produtividade e menor agressividade ao meio ambiente visando
manejar o inseto-praga reduzindo seu niacutevel de dano (ALVEZ et al 2007)
Entre as medidas adotadas no MFP o uso de produtos formulados a partir de
agentes bioloacutegicos como a bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner
(Eubacteriales Bacillaceae) se mostra como alternativa eficiente devido agrave
especificidade com relaccedilatildeo a pragas-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e
animais (POLANCZYK ALVES 2003)
Aleacutem desses agentes bioloacutegicos a utilizaccedilatildeo de inseticidas botacircnicos derivados de
plantas ou parte das mesmas obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo
podem exercer atividade toacutexica aos insetos interferindo no desenvolvimento haacutebito
alimentar oviposiccedilatildeo repelecircncia ou mesmo morte (WIESBROOK 2004 SOUZA
ARAUacuteJO NASCIMENTO 2007) No passado o mercado de inseticidas botacircnicos
era dominado pelas piretrinas azadiractina e as rotenonas poreacutem outros inseticidas
botacircnicos vecircm ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) e o alho
(Allium sativum L) entre outras espeacutecies botacircnicas (ISMAN 1997)
A necessidade da implementaccedilatildeo de pesquisas que visam avaliar a eficiecircncia de
meacutetodos de manejo alternativo aplicaacuteveis agrave D fovealis satildeo de grande importacircncia
Nesse sentido este estudo teve por meta avaliar a eficiecircncia do agente de controle
bioloacutegico B thuringiensis e dos extratos aquosos de Fumo e Alho sob condiccedilotildees de
laboratoacuterio visando proporcionar alternativas de manejo viaacuteveis para a implantaccedilatildeo
de programas de manejo fitossanitaacuterio de D fovealis
16
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE)
A Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) tem sua origem na regiatildeo
do Mediterracircneo e nas Ilhas Canaacuterias poreacutem pode ser encontrada em diversas
partes na Aacutefrica Oriente Meacutedio Europa Canadaacute e Estados Unidos da Ameacuterica
(HOFFMAN 2010) O primeiro relato dessa praga fora da sua aacuterea nativa foi em
estufas na Finlacircndia em 1984 e posteriormente em 1989 encontrado na Holanda
fora das estufas (CFIA 2005) Nos Estados Unidos foi detectada pela primeira vez
em 2004 em plantios de begocircnia na Califoacuternia e em 2005 no Canadaacute (GILL 2013)
No Brasil foi constatada em 2008 no estado do Paranaacute e posteriormente no estado
do Espiacuterito Santo Poreacutem apenas em 2010 a espeacutecie foi identificada por uma
especialista do USDA (United States Department of Agriculture) (ZAWADNEAK et
al 2011) Os mesmos autores citam que os primeiros relatos reportam que a praga
foi encontrada no estado do Paranaacute em lavouras comerciais de morango em
condiccedilotildees de cultivo protegido tipo tuacutenel alto nos cultivares Albion e Camino real
Posteriormente a mesma foi encontrada na cultivar Portola no estado do Espiacuterito
Santo Os produtores capixabas tambeacutem constataram a presenccedila de D fovealis nos
cultivares Aromas Albion e Camino Real produzidos em tuacutenel baixo
A lagarta D fovealis eacute uma praga poliacutefaga que gera grandes problemas em diversas
variedades de cultivos de plantas ornamentais e culturas agriacutecolas especialmente
em cultivos em estufa Essa espeacutecie foi relatada em mais de 70 espeacutecies
hospedeiras em cerca de 38 famiacutelias de plantas como ornamentais dos gecircneros
Amaranthus Anthurium Begonia e culturas comercialmente cultivadas como
Capsicum annuum L e Solanum lycopersicum L Fragaria x ananassa entre outras
(GILL 2013)
Com relaccedilatildeo ao ciclo de vida de D fovealis pode-se salientar que eacute um inseto com
desenvolvimento holometaboacutelico Os adultos medem cerca de 19 a 21 mm de
comprimento satildeo de coloraccedilatildeo castanho acinzentado com aneacuteis mais claros no
abdocircmen e possuem uma linha irregular branco-amarelada atraveacutes das asas Os
17
adultos ficam sob as folhas possuem haacutebito noturno e durante o dia podem realizar
voos curtos (MURPHY 2008 RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010) Em
repouso o adulto manteacutem as asas planas em forma triangular e o abdocircmen se
posiciona voltado para cima (HOFFMAN 2010) Os machos possuem o abdocircmen
mais longo e delgado que o da fecircmea (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010)
Os adultos podem viver durante uma a duas semanas sendo que a fecircmea adulta
potildee ateacute 200 ovos durante esse periacuteodo Os ovos possuem formato oval e
inicialmente apresentam coloraccedilatildeo verde-esbranquiccedilada ficando vermelho com o
desenvolvimento do embriatildeo ateacute apresentarem pontuaccedilotildees marrons que ocorrem
antes da eclosatildeo das lagartas (FRANCO BAPTISTA 2010) Satildeo ovipositados
isoladamente ou em massas de trecircs a dez ovos sobrepostos seja na parte inferior
das folhas perto das veias na base do talo na base da planta ou na camada
superior do solo (RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010 HOFFMAN 2010)
O periacuteodo de incubaccedilatildeo dos ovos varia em torno de seis dias dependendo da
temperatura local
As lagartas medem entre 20 a 30 mm de comprimento possuem coloraccedilatildeo branca
amarelada com pontos marrons longitudinalmente distribuiacutedos pelo corpo com pelo
menos um pelo em cada ponto e com cabeccedila de coloraccedilatildeo marrom-escura
(RICHTER 2009 GILL 2013) Alimentam-se de folhas flores brotos frutos e restos
de folhasplanta em decomposiccedilatildeo e em culturas plantadas com maior densidade
podem ser encontradas se alimentando de qualquer parte da planta (BRAMBILA
STOCKS 2010) As lagartas se desenvolvem rapidamente satildeo muito aacutegeis e
preferem locais uacutemidos na base da planta proacuteximo ao solo na camada superior do
solo ou em raiacutezes expostas das plantas (HOFFMAN 2010) As lagartas satildeo
adaptadas a condiccedilotildees de alta umidade e podem tolerar ateacute mesmo condiccedilotildees de
alagamento podendo ser encontradas em plantas aquaacuteticas e em lugares salinos
(BRAMBILA STOCKS 2010)
As lagartas tendem a ficar em locais protegidos como no colo da planta tuacuteneis nos
caules e em estaacutedios mais avanccedilados podem se alimentar da haste principal
inclusive abaixo da linha do solo (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010) Alimentam-se dos tecidos da coroa da planta provocando a
interrupccedilatildeo da circulaccedilatildeo de seiva o que ocasiona o aparecimento de necrose nas
18
bordas das folhas e posteriormente a morte da planta (FRANCO BAPTISTA
2010) Durante a alimentaccedilatildeo tecem teias entre as folhas baixeiras (aquelas que
ficam em contato com o canteiro) nas quais ficam protegidas e posteriormente
empupam (MURPHY 2008) Devido seu ataque a D fovealis pode danificar caules
folhas e frutos reduzindo a produccedilatildeo e inviabilizando o produto para o mercado in
natura aleacutem disso a injuacuteria causada pelo ataque pode servir como meio de entrada
para diferentes patoacutegenos (GILL 2013)
As pupas satildeo marrom-claro com aproximadamente 9 a 10 mm de comprimento O
casulo que as envolve eacute oval feito de seda fezes e partiacuteculas do solo e eacute construiacutedo
no solo (BETHKE VANDER MEY 2010) Natildeo haacute relatos de toleracircncia ao frio ou
qualquer tipo de diapausa durante qualquer parte do ciclo de vida Portanto poderia
completar vaacuterias geraccedilotildees anualmente sob condiccedilotildees ideais (HOFFMAN 2010)
Desta forma considerando o ciclo de desenvolvimento e consequentemente o
nuacutemero de geraccedilotildees anuais a presenccedila de plantios escalonados dentro de uma
mesma aacuterea pode resultar no aumento da populaccedilatildeo de D fovealis como tambeacutem
interferir em praacuteticas de controle existentes como Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas
(MFP) e de biocontrole que podem ser interrompidos pela necessidade de aplicaccedilatildeo
de inseticidas para controlar o inseto (CFIA 2005)
A disseminaccedilatildeo dessa praga pode ocorrer atraveacutes do comeacutercio de material vegetal
propagativo e natildeo propagativo logo medidas quarentenaacuterias satildeo necessaacuterias para
evitar a introduccedilatildeo dessa praga em aacutereas livres de ocorrecircncia (BRAMBILA
STOCKS 2010)
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis
O manejo dessa praga inclui controle cultural quiacutemico comportamental e bioloacutegico
devendo ser coordenado de acordo com o monitoramento da populaccedilatildeo
19
221 Controle cultural
Embora D fovealis esteja geralmente escondida inspeccedilotildees visuais regulares podem
auxiliar na detecccedilatildeo de sua presenccedila da fase jovem que pode ser constatada pela
existecircncia de danos nas folhas flores bototildees florais e hastes bem como dejetos e
buracos na superfiacutecie do solo (BRAMBILA STOCKS 2010) Fornazier et al (2011)
recomendam a retirada e a destruiccedilatildeo de folhas velhas se possiacutevel semanalmente
visando a reduccedilatildeo do nuacutemero de ovos e pupas evitando o raacutepido crescimento e
dispersatildeo populacional da praga
222 Controle Quiacutemico
No Brasil ainda natildeo haacute nenhum produto registrado no Ministeacuterio da Agricultura
Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) Poreacutem em outros paiacuteses os produtos relatados
para o controle de lagartas D fovealis satildeo Spinosade Bifentrina Fluvalinato
Deltametrina Esfenvalerato Orthene Lambdacialotrina Imidaclopride Metomil
Ethoprop Acefato Emamectina Permetrina Clorantraniliprol e Azadirachtin
(PIJNAKKER 2001 CFIA 2005 BETHKE VANDER MEY 2010) Aleacutem disso
Bethke e Vander Mey (2010) ainda recomendam que em ambiente de estufa para
controle dos adultos as aplicaccedilotildees tipo aerossol ou neacutevoa sejam realizadas no
periacuteodo noturno isso devido a maior atividade dos adultos
223 Controle Comportamental
Armadilhas luminosas com luz ultravioleta (UV) podem ser usadas para monitorar a
atividade da mariposa adulta em aacutereas em que a D fovealis estaacute estabelecida
Hoffman (2010) relata o sucesso da utilizaccedilatildeo dessas armadilhas em plantios nos
Estados Unidos Haacute relatos no Reino Unido de coletas de insetos adultos cerca de
20
10 km das estufas infestadas jaacute na Holanda foram encontrados insetos em
armadilhas luminosas a 100 km de sua ocorrecircncia (CFIA 2005)
Outra alternativa eacute a utilizaccedilatildeo de armadilhas tipo Delta com feromocircnio sexual ou
armadilhas que associem aacutegua e feromocircnio sendo estas especiacuteficas para adultos
machos de D fovealis (MURPHY 2008 DEVENTER 2009)
224 Controle Bioloacutegico
a Entomoacutefagos
Parasitoides de ovos do gecircnero Trichogramma (Hymenoptera Trichogrammatidae)
destacam-se pela ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica e pela vasta quantidade de
hospedeiros principalmente da ordem Lepidoptera (PRATISSOLI et al 2002) Na
Alemanha Zimmermann (2004) e Jaumlckel e Kurzhals (1995) relataram a ocorrecircncia
das espeacutecies Trichogramma evanescens Westwood Trichogramma cacoeciae
Marchal e Trichogramma brassicae Bezdenko parasitando ovos de D fovealis
Os agentes de controle bioloacutegico presentes no solo tambeacutem podem ser utilizados
entre eles estatildeo o besouro Atheta coriaria (Kraatz) (Coleoptera Staphylinidae) um
predador de ovos e lagartas neonatas o percevejo Podisius sp (Hemiptera
Pentatomidae) um predador de lagartas (MURPHY 2008) e aacutecaros predadores de
ovos Hypoaspis miles (Berlese) e Hypoaspis aculeifer (Canestrini) (Acari
Laelapidae) (CFIA 2013) Outro agente utilizado com sucesso em programas de
controle bioloacutegico de lagartas da famiacutelia Crambidae eacute a vespa endoparasitoide
Cotesia flavipes (Cameron) (Hymenoptera Braconidae) (SALLAM et al 2001) que
jaacute foi relatada por Zawadneak et al (2011) em lavouras de morango no estado do
Paranaacute na qual apresentou potencial para o controle de D fovealis
21
b Entomopatoacutegenos
b1 Nematoides
Os nematoides mais utilizados no controle de insetos pertencem agrave famiacutelia
Steinernematidae Estes tecircm sido aplicados em diversas culturas e mesmo em
outras situaccedilotildees para controle de um grande nuacutemero de insetos (ALVEZ 1998)
Nematoides entomopatogecircnicos jaacute vecircm sendo utilizados em outros paiacuteses no
manejo de D fovealis Stocks e Hodges (2013) citam a utilizaccedilatildeo da espeacutecie
Heterorhabditis bacteriophora (Poinar) (Nematoda Heterorhabditidae) jaacute Jaumlckel e
Kurzhals (1995) relatam que as espeacutecies Steinernema carpocapsae (Weiser) e S
feltiae (Filipjev) (Nematoda Steinernematidae) foram eficientes no controle de D
fovealis em diferentes estaacutedios larvais sendo que no estaacutedio 3 de desenvolvimento
essas espeacutecies proporcionaram 60 e 20 de mortalidade respectivamente
b2 Fungos entomopatogecircnicos
Os fungos entomopatogecircnicos Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok
(Hypocreales Clavicipitaceae) e Beauveria bassiana (Bals) Vuill (Hypocreales
Cordycipitaceae) satildeo muito utilizados devido agrave facilidade de produccedilatildeo ampla
distribuiccedilatildeo geograacutefica variedade de hospedeiros e ocorrecircncia em condiccedilotildees
naturais enzooacuteticas ou epizooacuteticas sendo ainda comumente encontrados no solo
mostrando-se como uma alternativa eficiente devido agrave especificidade com relaccedilatildeo agrave
praga-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e animais (ALVES 1998)
b3 Bacteacuteria entomopatogecircnica
A bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner eacute uma bacteacuteria
naturalmente encontrada no solo aeroacutebia ou facultativamente anaeroacutebia gram
22
positiva pertencente agrave famiacutelia Bacillaceae (BOBROWSKI et al 2003) formadora de
esporos pertencentes ao grupo Bacillus cereus (READ et al 2003) que eacute formado
por um complexo de vaacuterias espeacutecies (Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus
mycoides B thuringiensis e Bacillus weihenstephanensis) (POLANCZYK ALVES
2003)
Bacillus thuringiensis foi originalmente descoberto em 1902 por um bioacutelogo japonecircs
Shigetane Ishiwatari poreacutem foi caracterizado em 1911 por Ernst Berliner da
Alemanha quando este pesquisador isolou o bacilo de Anagasta kuehniella Zeller
(Lepidoptera Pyralidae) (POLANCZYK ALVES 2003 LIMA 2010) Desde entatildeo
essa espeacutecie eacute a mais utilizada mundialmente como biopesticida (CAPALBO et al
2008) A espeacutecie B thuringiensis se desenvolve rapidamente em condiccedilotildees
favoraacuteveis como temperatura e disponibilidade de nutrientes (HILBERT PIGGOT
2004) Em circunstacircncias de ausecircncia de nutrientes ou acuacutemulo de metaboacutelitos
indesejaacuteveis essa bacteacuteria entra em processo de esporulaccedilatildeo durante a fase
estacionaacuteria (POLANCZYK ALVES 2003)
Durante a fase de esporulaccedilatildeo essas bacteacuterias produzem proteiacutenas inseticidas
como cristais parasporais sendo estes compostos por uma ou mais proteiacutenas Cry
tambeacutem conhecidas como part-endotoxinas (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) Essas
toxinas denominadas Cry hidrolisadas atravessam a membrana peritroacutefica e
ligam-se a receptores especiacuteficos presentes nas microvilosidades apicais da
membrana das ceacutelulas colunares presentes no intestino meacutedio causando a
formaccedilatildeo de poros que aumentam a permeabilidade da membrana interferindo no
gradiente iocircnico e no balanccedilo osmoacutetico Dessa maneira ocorre aumento da absorccedilatildeo
de aacutegua o que leva agrave lise e eventual ruptura e desintegraccedilatildeo das ceacutelulas do
intestino meacutedio fazendo o inseto cessar a alimentaccedilatildeo e morrer logo apoacutes por
inaniccedilatildeo ou ainda apoacutes a lise das ceacutelulas do intestino meacutedio o ambiente torna-se
favoraacutevel agrave germinaccedilatildeo dos esporos (POLANCZYK VALICENTE BARETO 2008) e
nesse novo ambiente devido a mistura do conteuacutedo da hemolinfa e do intestino
meacutedio o pH torna-se aacutecido e os esporos se multiplicam de tal forma que o inseto
morre por septicemia (COPPING MENN 2000)
Proteiacutenas Cry satildeo altamente especiacuteficas para o inseto-alvo satildeo inoacutecuos para os
seres humanos animais vertebrados e plantas e satildeo completamente
biodegradaacuteveis (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) sendo considerada portanto um
23
agente seguro para o controle bioloacutegico de insetos na agricultura (LIMA 2010
POLANCZYK ALVES 2003) As diferentes cepas de bacteacuteria produzem vaacuterias
combinaccedilotildees de proteiacutenas Cry que satildeo proteiacutenas consideradas seletivas e
geralmente afetam insetos-alvo de ordens especiacuteficas (CLARK PHILLIPS COATS
2005)
O primeiro biopesticida agrave base de B thuringiensis foi lanccedilado na Franccedila em 1938 e
desde entatildeo mais de 100 formulaccedilotildees foram colocados no mercado mundial devido
agrave eficaacutecia e especificidade (POLANCZYK ALVES 2003) Devido agraves vantagens do
uso do B thuringiensis como agente de controle bioloacutegico sobre insetos-praga das
ordens Coleoptera Diptera Hymenoptera e Lepidoptera aleacutem de espeacutecies de
nematoides aumentando nos uacuteltimos anos o nuacutemero de estirpes isoladas a busca
por cepas mais toacutexicas eacute crescente no mundo inteiro (GEORGE CRICKMORE
2012)
Ateacute o iniacutecio de 1990 apenas trecircs produtos comerciais estavam disponiacuteveis no
mercado brasileiro sendo todos baseados em B thuringiensis Kurstaki com
destaque para o produto Dipelreg que eacute altamente eficiente para mais de 170
lepidoacutepteros-praga (LIMA 2010) Aleacutem deste outros produtos como Ablereg Agreereg
Bac-Control WPreg Bacturreg Dipel WPreg Dipel WGreg Thuricidereg e Xentarireg podem ser
encontrados em formulaccedilotildees de base soacutelida (poacute ou granulada) ou liacutequida (AGROFIT
2003)
Em paiacuteses como a Holanda o Canadaacute e os Paiacuteses Baixos produtos quiacutemicos e
formulados comerciais agrave base de B thuringiensis foram testados sobre lagartas de
D fovealis sob condiccedilotildees de estufa e verificou-se que ambos tiveram accedilatildeo sobre as
lagartas de D fovealis poreacutem observou-se que os formulados agrave base de Bt
mostraram maior eficiecircncia que os produtos quiacutemicos (CFIA 2013) Jaumlckel e
Kurzhals (1995) e Bethke et al (2012) observaram tambeacutem que a eficiecircncia de
produtos comercias agrave base de Bt no controle de lagartas de D fovealis eacute maior nos
estaacutegios de desenvolvimento iniciais
Outra forma de utilizaccedilatildeo de B thuringiensis tem sido por meio da inserccedilatildeo de genes
de toxinas Cry em cultivos transgecircnicos dando origem a plantas Bt o que
proporciona eficaacutecia na forma de controlar insetos-praga e na reduccedilatildeo das
aplicaccedilotildees de produtos quiacutemicos Em plantas transgecircnicas a proteiacutena Cry eacute
produzida continuamente no interior das ceacutelulas protegida da inativaccedilatildeo da luz
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
Ao amigo Joseacute Romaacuterio pelo enorme apoio e pelas horas investidas ao meu auxiacutelio
Agrave galera da Duponchelia fovealis Marcel Joatildeo Ingrid Hiacutegor Francieli Victor P
Romaacuterio Alixelhe pelas brincadeiras durante as muitas horas de manutenccedilatildeo
Ao Programa de Produccedilatildeo Vegetal do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo e aos professores Edvaldo Turi (Joseacute Augusto) e Dirceu
Aos professores da minha banca examinadora Hugo Bolsoni Zago Anderson
Mathias Holtz e Leandro Pin Dalvi pela prontidatildeo e disponibilidade
Agrave Coordenaccedilatildeo de Aperfeiccediloamento de Pessoal de Niacutevel Superior (CAPES) pelo
concedimento da bolsa de estudo ao CNPq e a FAPES pelo auxiacutelio financeiro
ldquoAs palavras dos meus laacutebios e o meditar do meu coraccedilatildeo sejam agradaacuteveis na tua presenccedila Senhor rocha minha e redentor meurdquo
Salmos 1914
BIOGRAFIA
Kharen Priscilla de Oliveira Silva Salomatildeo nascida em Aimoreacutes Estado de Minas
Gerais em 04 de novembro de 1986 filha de Neacir de Oliveira Silva e Regilaine
Salomatildeo da Silva Cursou o estudo fundamental nas escolas Escola Estadual
Machado de Assis e Escola Estadual Frei Afonso Maria Jordaacute e o ensino meacutedio no
Centro Federal de Ensino Tecnoloacutegico ndash Unidade Descentralizada de Colatina ES
onde concluiu o ensino meacutedio em 2005 Aos 20 anos ingressou no curso de
Agronomia do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade Federal do Espiacuterito
Santo em Alegre-ES Durante a graduaccedilatildeo fez parte do Laboratoacuterio de entomologia
como estagiaacuteria voluntaacuteria e posteriormente ingressou na pesquisa atraveacutes do
programa de Iniciaccedilatildeo Cientiacutefica Aos 26 anos de idade obteve o tiacutetulo de Bacharel
em Agronomia e ingressou no Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal
do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade Federal do Espiacuterito Santo atuando
na aacuterea de controle bioloacutegico sob a orientaccedilatildeo do Prof Dr Dirceu Pratissoli Aos 21
de fevereiro de 2014 defendeu sua dissertaccedilatildeo para obtenccedilatildeo do tiacutetulo de Mestre
em Produccedilatildeo Vegetal Aacuterea de Concentraccedilatildeo em Fitossanidade (Entomologia)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) foi relatada em
plantios comerciais do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando
grandes problemas agrave cultura Poreacutem por ser uma praga recente natildeo haacute registro de
produtos para o seu controle A cada dia aumenta a demanda por alimentos e outros
produtos livres de resiacuteduos aleacutem da necessidade de uma agricultura mais
desenvolvida e sustentaacutevel Pesquisas com agentes de controle bioloacutegico e extratos
vegetais surgem como alternativa para o manejo desse inseto-praga Este trabalho
teve como objetivo avaliar a eficiecircncia de formulados comerciais agrave base de Bacillus
thuringiensis e a atividade do uso dos extratos aquosos de alho e fumo visando sua
adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle de D fovealis Nos bioensaios para
avaliar a patogenicidade e virulecircncia de duas formulaccedilotildees comerciais agrave base de B
thuringiensis Agreereg e Dipel WPreg sobre a dieta artificial adaptada agrave base de farelo
de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta por King e Hartley (1985) para Diatraea
saccharalis (Lepidoptera Crambidae) foram inoculados 70 microL de cada formulado
comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 Em seguida avaliou-se a
virulecircncia dos respectivos formulados isso atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo
letal (CL50) para o estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados
encontrados observou-se que o estaacutegio 1 de desenvolvimento apresentou 9588 e
8676 de mortalidades para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente
demonstrando patogenicidade e virulecircncia agrave D fovealis No bioensaio para avaliar a
atividade dos extratos aquosos de alho e fumo estes foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) Todos os tratamentos foram pulverizados com Torre de
Potter calibrada a pressatildeo de 15 lbpolsup2 Posteriormente estimou-se a concentraccedilatildeo
letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou 95 de mortalidade no
teste de suscetibilidade Desta forma com os resultados obtidos na presente
pesquisa concluiu-se que a utilizaccedilatildeo de formulados comerciais agrave base de B
thuringiensis e extrato de fumo podem ser uma alternativa no manejo fitossanitaacuterio
de D fovealis
Palavras-Chave Controle microbiano Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de
Pragas Morango
ABSTRACT
PLANT EXTRACTS AND Bacillus thuringiensis Berliner ON Duponchelia fovealis
ZELLER (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE) MANAGEMENT
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) caterpillar was recently
reported in commercial strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing
major problems to the crops but by being a recent plague there is no products
registration for its control The demand for food and other products free of waste
increases every day plus the need for a more developed and sustainable agriculture
In this scenario researches with biological control agents and plant extracts are an
alternative for the management of this insect pest This study was carried out to
assess the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis and the
activity of garlic and tobacco aqueous extracts as alternative methods of D fovealis
control In the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of two
commercial formulations of B Thuringiensis Agree reg and Dipel reg WP were
inoculated 70 microL of each commercial formula on the diet at a concentration 1 x 108
sporesmL-1 Then the virulence of each formulated was evaluated by estimating the
lethal concentration (LC50) for the stage with the greatest susceptibility In view of
the results it was observed that the development stage 1 showed 9588 and 8676
of mortalities for Agreereg and Dipelreg WP respectively products Both formulated
based on B thuringiensis showed pathogenicity and virulence to D fovealis In the
bioassay to evaluate the activity of garlic and tobacco aqueous extracts these were
applied at a 10 concentration (mv) All treatments were sprayed with Potterrsquos
Tower calibrated at 15lbinsup2 Later it was estimated lethal concentration (LC50) of the
tobacco aqueous extract which showed 95 mortality in susceptibility testing Thus
it was concluded that the use of commercial formulated based on B thuringiensis
and tobacco extract may be an alternative on phytosanitary control of D fovealis
Keywords Microbial control Insecticidal plants Phytosanitary Pest Management
Strawberry
LISTA DE TABELAS
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) 38
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) 380
Tabela 3 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingretiente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) 52
Tabela 4 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)Erro Indicador natildeo definido5
SUMAacuteRIO
CAPIacuteTULO 1 14
1 INTRODUCcedilAtildeO 14
2 REVISAtildeO DE LITERATURA 16
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE) 16
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis 18
221 Controle cultural 19
222 Controle Quiacutemico 19
223 Controle Comportamental 19
224 Controle Bioloacutegico 20
225 Extratos Vegetais 24
3 REFEREcircNCIAS 27
CAPIacuteTULO 2 32
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 32
RESUMO 32
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (LepidopteraCrambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 33
4 INTRODUCcedilAtildeO 34
41 MATERIAL E MEacuteTODOS 35
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 35
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis 36
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) 37
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO 37
43 CONCLUSAtildeO 41
44 REFEREcircNCIAS 42
CAPIacuteTULO 3 45
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis Zeller
(Lepidoptera Crambidae) 45
RESUMO 45
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) 46
5 INTRODUCcedilAtildeO 47
51 MATERIAL E MEacuteTODOS 48
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 48
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho 49
513 Suscetibilidade de D fovealis agrave extrato aquoso de fumo e alho 50
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL) 51
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO 51
53 CONCLUSAtildeO 55
54 REFEREcircNCIAS 56
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 59
14
CAPIacuteTULO 1
1 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro (Fragaria x ananassa Duch) eacute produzida nas mais
variadas regiotildees do mundo Pertencente agrave famiacutelia Rosaceae a espeacutecie foi originada
do cruzamento entre espeacutecies silvestres (F chiloensis L e F virginiana Duchesne)
(CASTRO 2004) No Brasil a cultura encontra-se difundida em regiotildees de clima
temperado e subtropical sendo a produccedilatildeo destinada agrave induacutestria e ao consumo in
natura Trata-se de uma cultura altamente exigente em praacuteticas culturais em toda
sua cadeia produtiva desde a implantaccedilatildeo ateacute a poacutes-colheita contudo se destaca
pela alta rentabilidade e intensa demanda por matildeo-de-obra (OLIVEIRA
SCIVITTARO 2009)
No estado do Espiacuterito Santo essa cultura foi implantada comercialmente no meado
do seacuteculo XX e expandiu-se significativamente a partir da metade da deacutecada de 90
sendo entatildeo considerada uma cultura de destaque no estado (BALNINO MARIN
2006) Em meacutedia satildeo produzidas 5960 toneladas de morango ao ano ocupando
uma extensatildeo de 185 hectares envolvendo praticamente 1500 propriedades de
base familiar assumindo um relevante fator de distribuiccedilatildeo de renda no meio rural
Mediante a importacircncia da cultura do morangueiro e a necessidade de organizaccedilatildeo
do processo produtivo e comercial criou-se um polo o qual tem como ecircnfase o uso
de sistemas de produccedilatildeo sustentaacuteveis por meio da utilizaccedilatildeo de tecnologias
apropriadas Desse polo participam principalmente os municiacutepios da regiatildeo das
montanhas capixabas com destaque para Santa Maria de Jetibaacute Domingos Martins
e Venda Nova do Imigrante (INCAPER 2010)
Contudo a cultura do morangueiro apresenta inuacutemeros problemas fitossanitaacuterios
Segundo Fornazier e Pratissoli (2006) um dos principais problemas na referida
cultura satildeo os aacutecaros No entanto em 2010 foi registrada a ocorrecircncia de
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) no municiacutepio de Santa Maria
de Jetibaacute destacando-se pela capacidade de dano raacutepido crescimento populacional
e alta capacidade de dispersatildeo (FORNAZIER et al 2011)
15
Por se tratar de uma praga que natildeo haacute registro de produtos para seu controle no
Ministeacuterio da Agricultura Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) produtores tecircm
recorrido ao uso de produtos quiacutemicos registrados para outras culturas o que vai
contra a legislaccedilatildeo aleacutem acarretar seacuterios prejuiacutezos ao agroecossistema (ALHO
2011) tais como altos niacuteveis de resiacuteduos toacutexicos nos produtos intoxicaccedilotildees ao
homem e mamiacuteferos resistecircncia de pragas a inseticidas contaminaccedilatildeo ambiental
aleacutem de elevar o custo de produccedilatildeo
Sendo assim uma alternativa para diminuir os impactos causados pelo meacutetodo
convencional eacute a adoccedilatildeo de medidas fitossanitaacuterias que reduzam a populaccedilatildeo de
insetos-praga e natildeo ocasionem impactos negativos sobre o meio ambiente e aos
inimigos naturais presentes na aacuterea Uma dessas medidas eacute o Manejo Fitossanitaacuterio
de Pragas (MFP) que engloba princiacutepios e meacutetodos isolados ou em conjunto que
visam garantir maior produtividade e menor agressividade ao meio ambiente visando
manejar o inseto-praga reduzindo seu niacutevel de dano (ALVEZ et al 2007)
Entre as medidas adotadas no MFP o uso de produtos formulados a partir de
agentes bioloacutegicos como a bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner
(Eubacteriales Bacillaceae) se mostra como alternativa eficiente devido agrave
especificidade com relaccedilatildeo a pragas-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e
animais (POLANCZYK ALVES 2003)
Aleacutem desses agentes bioloacutegicos a utilizaccedilatildeo de inseticidas botacircnicos derivados de
plantas ou parte das mesmas obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo
podem exercer atividade toacutexica aos insetos interferindo no desenvolvimento haacutebito
alimentar oviposiccedilatildeo repelecircncia ou mesmo morte (WIESBROOK 2004 SOUZA
ARAUacuteJO NASCIMENTO 2007) No passado o mercado de inseticidas botacircnicos
era dominado pelas piretrinas azadiractina e as rotenonas poreacutem outros inseticidas
botacircnicos vecircm ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) e o alho
(Allium sativum L) entre outras espeacutecies botacircnicas (ISMAN 1997)
A necessidade da implementaccedilatildeo de pesquisas que visam avaliar a eficiecircncia de
meacutetodos de manejo alternativo aplicaacuteveis agrave D fovealis satildeo de grande importacircncia
Nesse sentido este estudo teve por meta avaliar a eficiecircncia do agente de controle
bioloacutegico B thuringiensis e dos extratos aquosos de Fumo e Alho sob condiccedilotildees de
laboratoacuterio visando proporcionar alternativas de manejo viaacuteveis para a implantaccedilatildeo
de programas de manejo fitossanitaacuterio de D fovealis
16
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE)
A Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) tem sua origem na regiatildeo
do Mediterracircneo e nas Ilhas Canaacuterias poreacutem pode ser encontrada em diversas
partes na Aacutefrica Oriente Meacutedio Europa Canadaacute e Estados Unidos da Ameacuterica
(HOFFMAN 2010) O primeiro relato dessa praga fora da sua aacuterea nativa foi em
estufas na Finlacircndia em 1984 e posteriormente em 1989 encontrado na Holanda
fora das estufas (CFIA 2005) Nos Estados Unidos foi detectada pela primeira vez
em 2004 em plantios de begocircnia na Califoacuternia e em 2005 no Canadaacute (GILL 2013)
No Brasil foi constatada em 2008 no estado do Paranaacute e posteriormente no estado
do Espiacuterito Santo Poreacutem apenas em 2010 a espeacutecie foi identificada por uma
especialista do USDA (United States Department of Agriculture) (ZAWADNEAK et
al 2011) Os mesmos autores citam que os primeiros relatos reportam que a praga
foi encontrada no estado do Paranaacute em lavouras comerciais de morango em
condiccedilotildees de cultivo protegido tipo tuacutenel alto nos cultivares Albion e Camino real
Posteriormente a mesma foi encontrada na cultivar Portola no estado do Espiacuterito
Santo Os produtores capixabas tambeacutem constataram a presenccedila de D fovealis nos
cultivares Aromas Albion e Camino Real produzidos em tuacutenel baixo
A lagarta D fovealis eacute uma praga poliacutefaga que gera grandes problemas em diversas
variedades de cultivos de plantas ornamentais e culturas agriacutecolas especialmente
em cultivos em estufa Essa espeacutecie foi relatada em mais de 70 espeacutecies
hospedeiras em cerca de 38 famiacutelias de plantas como ornamentais dos gecircneros
Amaranthus Anthurium Begonia e culturas comercialmente cultivadas como
Capsicum annuum L e Solanum lycopersicum L Fragaria x ananassa entre outras
(GILL 2013)
Com relaccedilatildeo ao ciclo de vida de D fovealis pode-se salientar que eacute um inseto com
desenvolvimento holometaboacutelico Os adultos medem cerca de 19 a 21 mm de
comprimento satildeo de coloraccedilatildeo castanho acinzentado com aneacuteis mais claros no
abdocircmen e possuem uma linha irregular branco-amarelada atraveacutes das asas Os
17
adultos ficam sob as folhas possuem haacutebito noturno e durante o dia podem realizar
voos curtos (MURPHY 2008 RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010) Em
repouso o adulto manteacutem as asas planas em forma triangular e o abdocircmen se
posiciona voltado para cima (HOFFMAN 2010) Os machos possuem o abdocircmen
mais longo e delgado que o da fecircmea (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010)
Os adultos podem viver durante uma a duas semanas sendo que a fecircmea adulta
potildee ateacute 200 ovos durante esse periacuteodo Os ovos possuem formato oval e
inicialmente apresentam coloraccedilatildeo verde-esbranquiccedilada ficando vermelho com o
desenvolvimento do embriatildeo ateacute apresentarem pontuaccedilotildees marrons que ocorrem
antes da eclosatildeo das lagartas (FRANCO BAPTISTA 2010) Satildeo ovipositados
isoladamente ou em massas de trecircs a dez ovos sobrepostos seja na parte inferior
das folhas perto das veias na base do talo na base da planta ou na camada
superior do solo (RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010 HOFFMAN 2010)
O periacuteodo de incubaccedilatildeo dos ovos varia em torno de seis dias dependendo da
temperatura local
As lagartas medem entre 20 a 30 mm de comprimento possuem coloraccedilatildeo branca
amarelada com pontos marrons longitudinalmente distribuiacutedos pelo corpo com pelo
menos um pelo em cada ponto e com cabeccedila de coloraccedilatildeo marrom-escura
(RICHTER 2009 GILL 2013) Alimentam-se de folhas flores brotos frutos e restos
de folhasplanta em decomposiccedilatildeo e em culturas plantadas com maior densidade
podem ser encontradas se alimentando de qualquer parte da planta (BRAMBILA
STOCKS 2010) As lagartas se desenvolvem rapidamente satildeo muito aacutegeis e
preferem locais uacutemidos na base da planta proacuteximo ao solo na camada superior do
solo ou em raiacutezes expostas das plantas (HOFFMAN 2010) As lagartas satildeo
adaptadas a condiccedilotildees de alta umidade e podem tolerar ateacute mesmo condiccedilotildees de
alagamento podendo ser encontradas em plantas aquaacuteticas e em lugares salinos
(BRAMBILA STOCKS 2010)
As lagartas tendem a ficar em locais protegidos como no colo da planta tuacuteneis nos
caules e em estaacutedios mais avanccedilados podem se alimentar da haste principal
inclusive abaixo da linha do solo (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010) Alimentam-se dos tecidos da coroa da planta provocando a
interrupccedilatildeo da circulaccedilatildeo de seiva o que ocasiona o aparecimento de necrose nas
18
bordas das folhas e posteriormente a morte da planta (FRANCO BAPTISTA
2010) Durante a alimentaccedilatildeo tecem teias entre as folhas baixeiras (aquelas que
ficam em contato com o canteiro) nas quais ficam protegidas e posteriormente
empupam (MURPHY 2008) Devido seu ataque a D fovealis pode danificar caules
folhas e frutos reduzindo a produccedilatildeo e inviabilizando o produto para o mercado in
natura aleacutem disso a injuacuteria causada pelo ataque pode servir como meio de entrada
para diferentes patoacutegenos (GILL 2013)
As pupas satildeo marrom-claro com aproximadamente 9 a 10 mm de comprimento O
casulo que as envolve eacute oval feito de seda fezes e partiacuteculas do solo e eacute construiacutedo
no solo (BETHKE VANDER MEY 2010) Natildeo haacute relatos de toleracircncia ao frio ou
qualquer tipo de diapausa durante qualquer parte do ciclo de vida Portanto poderia
completar vaacuterias geraccedilotildees anualmente sob condiccedilotildees ideais (HOFFMAN 2010)
Desta forma considerando o ciclo de desenvolvimento e consequentemente o
nuacutemero de geraccedilotildees anuais a presenccedila de plantios escalonados dentro de uma
mesma aacuterea pode resultar no aumento da populaccedilatildeo de D fovealis como tambeacutem
interferir em praacuteticas de controle existentes como Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas
(MFP) e de biocontrole que podem ser interrompidos pela necessidade de aplicaccedilatildeo
de inseticidas para controlar o inseto (CFIA 2005)
A disseminaccedilatildeo dessa praga pode ocorrer atraveacutes do comeacutercio de material vegetal
propagativo e natildeo propagativo logo medidas quarentenaacuterias satildeo necessaacuterias para
evitar a introduccedilatildeo dessa praga em aacutereas livres de ocorrecircncia (BRAMBILA
STOCKS 2010)
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis
O manejo dessa praga inclui controle cultural quiacutemico comportamental e bioloacutegico
devendo ser coordenado de acordo com o monitoramento da populaccedilatildeo
19
221 Controle cultural
Embora D fovealis esteja geralmente escondida inspeccedilotildees visuais regulares podem
auxiliar na detecccedilatildeo de sua presenccedila da fase jovem que pode ser constatada pela
existecircncia de danos nas folhas flores bototildees florais e hastes bem como dejetos e
buracos na superfiacutecie do solo (BRAMBILA STOCKS 2010) Fornazier et al (2011)
recomendam a retirada e a destruiccedilatildeo de folhas velhas se possiacutevel semanalmente
visando a reduccedilatildeo do nuacutemero de ovos e pupas evitando o raacutepido crescimento e
dispersatildeo populacional da praga
222 Controle Quiacutemico
No Brasil ainda natildeo haacute nenhum produto registrado no Ministeacuterio da Agricultura
Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) Poreacutem em outros paiacuteses os produtos relatados
para o controle de lagartas D fovealis satildeo Spinosade Bifentrina Fluvalinato
Deltametrina Esfenvalerato Orthene Lambdacialotrina Imidaclopride Metomil
Ethoprop Acefato Emamectina Permetrina Clorantraniliprol e Azadirachtin
(PIJNAKKER 2001 CFIA 2005 BETHKE VANDER MEY 2010) Aleacutem disso
Bethke e Vander Mey (2010) ainda recomendam que em ambiente de estufa para
controle dos adultos as aplicaccedilotildees tipo aerossol ou neacutevoa sejam realizadas no
periacuteodo noturno isso devido a maior atividade dos adultos
223 Controle Comportamental
Armadilhas luminosas com luz ultravioleta (UV) podem ser usadas para monitorar a
atividade da mariposa adulta em aacutereas em que a D fovealis estaacute estabelecida
Hoffman (2010) relata o sucesso da utilizaccedilatildeo dessas armadilhas em plantios nos
Estados Unidos Haacute relatos no Reino Unido de coletas de insetos adultos cerca de
20
10 km das estufas infestadas jaacute na Holanda foram encontrados insetos em
armadilhas luminosas a 100 km de sua ocorrecircncia (CFIA 2005)
Outra alternativa eacute a utilizaccedilatildeo de armadilhas tipo Delta com feromocircnio sexual ou
armadilhas que associem aacutegua e feromocircnio sendo estas especiacuteficas para adultos
machos de D fovealis (MURPHY 2008 DEVENTER 2009)
224 Controle Bioloacutegico
a Entomoacutefagos
Parasitoides de ovos do gecircnero Trichogramma (Hymenoptera Trichogrammatidae)
destacam-se pela ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica e pela vasta quantidade de
hospedeiros principalmente da ordem Lepidoptera (PRATISSOLI et al 2002) Na
Alemanha Zimmermann (2004) e Jaumlckel e Kurzhals (1995) relataram a ocorrecircncia
das espeacutecies Trichogramma evanescens Westwood Trichogramma cacoeciae
Marchal e Trichogramma brassicae Bezdenko parasitando ovos de D fovealis
Os agentes de controle bioloacutegico presentes no solo tambeacutem podem ser utilizados
entre eles estatildeo o besouro Atheta coriaria (Kraatz) (Coleoptera Staphylinidae) um
predador de ovos e lagartas neonatas o percevejo Podisius sp (Hemiptera
Pentatomidae) um predador de lagartas (MURPHY 2008) e aacutecaros predadores de
ovos Hypoaspis miles (Berlese) e Hypoaspis aculeifer (Canestrini) (Acari
Laelapidae) (CFIA 2013) Outro agente utilizado com sucesso em programas de
controle bioloacutegico de lagartas da famiacutelia Crambidae eacute a vespa endoparasitoide
Cotesia flavipes (Cameron) (Hymenoptera Braconidae) (SALLAM et al 2001) que
jaacute foi relatada por Zawadneak et al (2011) em lavouras de morango no estado do
Paranaacute na qual apresentou potencial para o controle de D fovealis
21
b Entomopatoacutegenos
b1 Nematoides
Os nematoides mais utilizados no controle de insetos pertencem agrave famiacutelia
Steinernematidae Estes tecircm sido aplicados em diversas culturas e mesmo em
outras situaccedilotildees para controle de um grande nuacutemero de insetos (ALVEZ 1998)
Nematoides entomopatogecircnicos jaacute vecircm sendo utilizados em outros paiacuteses no
manejo de D fovealis Stocks e Hodges (2013) citam a utilizaccedilatildeo da espeacutecie
Heterorhabditis bacteriophora (Poinar) (Nematoda Heterorhabditidae) jaacute Jaumlckel e
Kurzhals (1995) relatam que as espeacutecies Steinernema carpocapsae (Weiser) e S
feltiae (Filipjev) (Nematoda Steinernematidae) foram eficientes no controle de D
fovealis em diferentes estaacutedios larvais sendo que no estaacutedio 3 de desenvolvimento
essas espeacutecies proporcionaram 60 e 20 de mortalidade respectivamente
b2 Fungos entomopatogecircnicos
Os fungos entomopatogecircnicos Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok
(Hypocreales Clavicipitaceae) e Beauveria bassiana (Bals) Vuill (Hypocreales
Cordycipitaceae) satildeo muito utilizados devido agrave facilidade de produccedilatildeo ampla
distribuiccedilatildeo geograacutefica variedade de hospedeiros e ocorrecircncia em condiccedilotildees
naturais enzooacuteticas ou epizooacuteticas sendo ainda comumente encontrados no solo
mostrando-se como uma alternativa eficiente devido agrave especificidade com relaccedilatildeo agrave
praga-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e animais (ALVES 1998)
b3 Bacteacuteria entomopatogecircnica
A bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner eacute uma bacteacuteria
naturalmente encontrada no solo aeroacutebia ou facultativamente anaeroacutebia gram
22
positiva pertencente agrave famiacutelia Bacillaceae (BOBROWSKI et al 2003) formadora de
esporos pertencentes ao grupo Bacillus cereus (READ et al 2003) que eacute formado
por um complexo de vaacuterias espeacutecies (Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus
mycoides B thuringiensis e Bacillus weihenstephanensis) (POLANCZYK ALVES
2003)
Bacillus thuringiensis foi originalmente descoberto em 1902 por um bioacutelogo japonecircs
Shigetane Ishiwatari poreacutem foi caracterizado em 1911 por Ernst Berliner da
Alemanha quando este pesquisador isolou o bacilo de Anagasta kuehniella Zeller
(Lepidoptera Pyralidae) (POLANCZYK ALVES 2003 LIMA 2010) Desde entatildeo
essa espeacutecie eacute a mais utilizada mundialmente como biopesticida (CAPALBO et al
2008) A espeacutecie B thuringiensis se desenvolve rapidamente em condiccedilotildees
favoraacuteveis como temperatura e disponibilidade de nutrientes (HILBERT PIGGOT
2004) Em circunstacircncias de ausecircncia de nutrientes ou acuacutemulo de metaboacutelitos
indesejaacuteveis essa bacteacuteria entra em processo de esporulaccedilatildeo durante a fase
estacionaacuteria (POLANCZYK ALVES 2003)
Durante a fase de esporulaccedilatildeo essas bacteacuterias produzem proteiacutenas inseticidas
como cristais parasporais sendo estes compostos por uma ou mais proteiacutenas Cry
tambeacutem conhecidas como part-endotoxinas (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) Essas
toxinas denominadas Cry hidrolisadas atravessam a membrana peritroacutefica e
ligam-se a receptores especiacuteficos presentes nas microvilosidades apicais da
membrana das ceacutelulas colunares presentes no intestino meacutedio causando a
formaccedilatildeo de poros que aumentam a permeabilidade da membrana interferindo no
gradiente iocircnico e no balanccedilo osmoacutetico Dessa maneira ocorre aumento da absorccedilatildeo
de aacutegua o que leva agrave lise e eventual ruptura e desintegraccedilatildeo das ceacutelulas do
intestino meacutedio fazendo o inseto cessar a alimentaccedilatildeo e morrer logo apoacutes por
inaniccedilatildeo ou ainda apoacutes a lise das ceacutelulas do intestino meacutedio o ambiente torna-se
favoraacutevel agrave germinaccedilatildeo dos esporos (POLANCZYK VALICENTE BARETO 2008) e
nesse novo ambiente devido a mistura do conteuacutedo da hemolinfa e do intestino
meacutedio o pH torna-se aacutecido e os esporos se multiplicam de tal forma que o inseto
morre por septicemia (COPPING MENN 2000)
Proteiacutenas Cry satildeo altamente especiacuteficas para o inseto-alvo satildeo inoacutecuos para os
seres humanos animais vertebrados e plantas e satildeo completamente
biodegradaacuteveis (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) sendo considerada portanto um
23
agente seguro para o controle bioloacutegico de insetos na agricultura (LIMA 2010
POLANCZYK ALVES 2003) As diferentes cepas de bacteacuteria produzem vaacuterias
combinaccedilotildees de proteiacutenas Cry que satildeo proteiacutenas consideradas seletivas e
geralmente afetam insetos-alvo de ordens especiacuteficas (CLARK PHILLIPS COATS
2005)
O primeiro biopesticida agrave base de B thuringiensis foi lanccedilado na Franccedila em 1938 e
desde entatildeo mais de 100 formulaccedilotildees foram colocados no mercado mundial devido
agrave eficaacutecia e especificidade (POLANCZYK ALVES 2003) Devido agraves vantagens do
uso do B thuringiensis como agente de controle bioloacutegico sobre insetos-praga das
ordens Coleoptera Diptera Hymenoptera e Lepidoptera aleacutem de espeacutecies de
nematoides aumentando nos uacuteltimos anos o nuacutemero de estirpes isoladas a busca
por cepas mais toacutexicas eacute crescente no mundo inteiro (GEORGE CRICKMORE
2012)
Ateacute o iniacutecio de 1990 apenas trecircs produtos comerciais estavam disponiacuteveis no
mercado brasileiro sendo todos baseados em B thuringiensis Kurstaki com
destaque para o produto Dipelreg que eacute altamente eficiente para mais de 170
lepidoacutepteros-praga (LIMA 2010) Aleacutem deste outros produtos como Ablereg Agreereg
Bac-Control WPreg Bacturreg Dipel WPreg Dipel WGreg Thuricidereg e Xentarireg podem ser
encontrados em formulaccedilotildees de base soacutelida (poacute ou granulada) ou liacutequida (AGROFIT
2003)
Em paiacuteses como a Holanda o Canadaacute e os Paiacuteses Baixos produtos quiacutemicos e
formulados comerciais agrave base de B thuringiensis foram testados sobre lagartas de
D fovealis sob condiccedilotildees de estufa e verificou-se que ambos tiveram accedilatildeo sobre as
lagartas de D fovealis poreacutem observou-se que os formulados agrave base de Bt
mostraram maior eficiecircncia que os produtos quiacutemicos (CFIA 2013) Jaumlckel e
Kurzhals (1995) e Bethke et al (2012) observaram tambeacutem que a eficiecircncia de
produtos comercias agrave base de Bt no controle de lagartas de D fovealis eacute maior nos
estaacutegios de desenvolvimento iniciais
Outra forma de utilizaccedilatildeo de B thuringiensis tem sido por meio da inserccedilatildeo de genes
de toxinas Cry em cultivos transgecircnicos dando origem a plantas Bt o que
proporciona eficaacutecia na forma de controlar insetos-praga e na reduccedilatildeo das
aplicaccedilotildees de produtos quiacutemicos Em plantas transgecircnicas a proteiacutena Cry eacute
produzida continuamente no interior das ceacutelulas protegida da inativaccedilatildeo da luz
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
ldquoAs palavras dos meus laacutebios e o meditar do meu coraccedilatildeo sejam agradaacuteveis na tua presenccedila Senhor rocha minha e redentor meurdquo
Salmos 1914
BIOGRAFIA
Kharen Priscilla de Oliveira Silva Salomatildeo nascida em Aimoreacutes Estado de Minas
Gerais em 04 de novembro de 1986 filha de Neacir de Oliveira Silva e Regilaine
Salomatildeo da Silva Cursou o estudo fundamental nas escolas Escola Estadual
Machado de Assis e Escola Estadual Frei Afonso Maria Jordaacute e o ensino meacutedio no
Centro Federal de Ensino Tecnoloacutegico ndash Unidade Descentralizada de Colatina ES
onde concluiu o ensino meacutedio em 2005 Aos 20 anos ingressou no curso de
Agronomia do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade Federal do Espiacuterito
Santo em Alegre-ES Durante a graduaccedilatildeo fez parte do Laboratoacuterio de entomologia
como estagiaacuteria voluntaacuteria e posteriormente ingressou na pesquisa atraveacutes do
programa de Iniciaccedilatildeo Cientiacutefica Aos 26 anos de idade obteve o tiacutetulo de Bacharel
em Agronomia e ingressou no Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal
do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade Federal do Espiacuterito Santo atuando
na aacuterea de controle bioloacutegico sob a orientaccedilatildeo do Prof Dr Dirceu Pratissoli Aos 21
de fevereiro de 2014 defendeu sua dissertaccedilatildeo para obtenccedilatildeo do tiacutetulo de Mestre
em Produccedilatildeo Vegetal Aacuterea de Concentraccedilatildeo em Fitossanidade (Entomologia)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) foi relatada em
plantios comerciais do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando
grandes problemas agrave cultura Poreacutem por ser uma praga recente natildeo haacute registro de
produtos para o seu controle A cada dia aumenta a demanda por alimentos e outros
produtos livres de resiacuteduos aleacutem da necessidade de uma agricultura mais
desenvolvida e sustentaacutevel Pesquisas com agentes de controle bioloacutegico e extratos
vegetais surgem como alternativa para o manejo desse inseto-praga Este trabalho
teve como objetivo avaliar a eficiecircncia de formulados comerciais agrave base de Bacillus
thuringiensis e a atividade do uso dos extratos aquosos de alho e fumo visando sua
adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle de D fovealis Nos bioensaios para
avaliar a patogenicidade e virulecircncia de duas formulaccedilotildees comerciais agrave base de B
thuringiensis Agreereg e Dipel WPreg sobre a dieta artificial adaptada agrave base de farelo
de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta por King e Hartley (1985) para Diatraea
saccharalis (Lepidoptera Crambidae) foram inoculados 70 microL de cada formulado
comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 Em seguida avaliou-se a
virulecircncia dos respectivos formulados isso atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo
letal (CL50) para o estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados
encontrados observou-se que o estaacutegio 1 de desenvolvimento apresentou 9588 e
8676 de mortalidades para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente
demonstrando patogenicidade e virulecircncia agrave D fovealis No bioensaio para avaliar a
atividade dos extratos aquosos de alho e fumo estes foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) Todos os tratamentos foram pulverizados com Torre de
Potter calibrada a pressatildeo de 15 lbpolsup2 Posteriormente estimou-se a concentraccedilatildeo
letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou 95 de mortalidade no
teste de suscetibilidade Desta forma com os resultados obtidos na presente
pesquisa concluiu-se que a utilizaccedilatildeo de formulados comerciais agrave base de B
thuringiensis e extrato de fumo podem ser uma alternativa no manejo fitossanitaacuterio
de D fovealis
Palavras-Chave Controle microbiano Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de
Pragas Morango
ABSTRACT
PLANT EXTRACTS AND Bacillus thuringiensis Berliner ON Duponchelia fovealis
ZELLER (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE) MANAGEMENT
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) caterpillar was recently
reported in commercial strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing
major problems to the crops but by being a recent plague there is no products
registration for its control The demand for food and other products free of waste
increases every day plus the need for a more developed and sustainable agriculture
In this scenario researches with biological control agents and plant extracts are an
alternative for the management of this insect pest This study was carried out to
assess the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis and the
activity of garlic and tobacco aqueous extracts as alternative methods of D fovealis
control In the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of two
commercial formulations of B Thuringiensis Agree reg and Dipel reg WP were
inoculated 70 microL of each commercial formula on the diet at a concentration 1 x 108
sporesmL-1 Then the virulence of each formulated was evaluated by estimating the
lethal concentration (LC50) for the stage with the greatest susceptibility In view of
the results it was observed that the development stage 1 showed 9588 and 8676
of mortalities for Agreereg and Dipelreg WP respectively products Both formulated
based on B thuringiensis showed pathogenicity and virulence to D fovealis In the
bioassay to evaluate the activity of garlic and tobacco aqueous extracts these were
applied at a 10 concentration (mv) All treatments were sprayed with Potterrsquos
Tower calibrated at 15lbinsup2 Later it was estimated lethal concentration (LC50) of the
tobacco aqueous extract which showed 95 mortality in susceptibility testing Thus
it was concluded that the use of commercial formulated based on B thuringiensis
and tobacco extract may be an alternative on phytosanitary control of D fovealis
Keywords Microbial control Insecticidal plants Phytosanitary Pest Management
Strawberry
LISTA DE TABELAS
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) 38
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) 380
Tabela 3 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingretiente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) 52
Tabela 4 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)Erro Indicador natildeo definido5
SUMAacuteRIO
CAPIacuteTULO 1 14
1 INTRODUCcedilAtildeO 14
2 REVISAtildeO DE LITERATURA 16
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE) 16
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis 18
221 Controle cultural 19
222 Controle Quiacutemico 19
223 Controle Comportamental 19
224 Controle Bioloacutegico 20
225 Extratos Vegetais 24
3 REFEREcircNCIAS 27
CAPIacuteTULO 2 32
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 32
RESUMO 32
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (LepidopteraCrambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 33
4 INTRODUCcedilAtildeO 34
41 MATERIAL E MEacuteTODOS 35
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 35
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis 36
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) 37
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO 37
43 CONCLUSAtildeO 41
44 REFEREcircNCIAS 42
CAPIacuteTULO 3 45
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis Zeller
(Lepidoptera Crambidae) 45
RESUMO 45
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) 46
5 INTRODUCcedilAtildeO 47
51 MATERIAL E MEacuteTODOS 48
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 48
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho 49
513 Suscetibilidade de D fovealis agrave extrato aquoso de fumo e alho 50
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL) 51
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO 51
53 CONCLUSAtildeO 55
54 REFEREcircNCIAS 56
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 59
14
CAPIacuteTULO 1
1 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro (Fragaria x ananassa Duch) eacute produzida nas mais
variadas regiotildees do mundo Pertencente agrave famiacutelia Rosaceae a espeacutecie foi originada
do cruzamento entre espeacutecies silvestres (F chiloensis L e F virginiana Duchesne)
(CASTRO 2004) No Brasil a cultura encontra-se difundida em regiotildees de clima
temperado e subtropical sendo a produccedilatildeo destinada agrave induacutestria e ao consumo in
natura Trata-se de uma cultura altamente exigente em praacuteticas culturais em toda
sua cadeia produtiva desde a implantaccedilatildeo ateacute a poacutes-colheita contudo se destaca
pela alta rentabilidade e intensa demanda por matildeo-de-obra (OLIVEIRA
SCIVITTARO 2009)
No estado do Espiacuterito Santo essa cultura foi implantada comercialmente no meado
do seacuteculo XX e expandiu-se significativamente a partir da metade da deacutecada de 90
sendo entatildeo considerada uma cultura de destaque no estado (BALNINO MARIN
2006) Em meacutedia satildeo produzidas 5960 toneladas de morango ao ano ocupando
uma extensatildeo de 185 hectares envolvendo praticamente 1500 propriedades de
base familiar assumindo um relevante fator de distribuiccedilatildeo de renda no meio rural
Mediante a importacircncia da cultura do morangueiro e a necessidade de organizaccedilatildeo
do processo produtivo e comercial criou-se um polo o qual tem como ecircnfase o uso
de sistemas de produccedilatildeo sustentaacuteveis por meio da utilizaccedilatildeo de tecnologias
apropriadas Desse polo participam principalmente os municiacutepios da regiatildeo das
montanhas capixabas com destaque para Santa Maria de Jetibaacute Domingos Martins
e Venda Nova do Imigrante (INCAPER 2010)
Contudo a cultura do morangueiro apresenta inuacutemeros problemas fitossanitaacuterios
Segundo Fornazier e Pratissoli (2006) um dos principais problemas na referida
cultura satildeo os aacutecaros No entanto em 2010 foi registrada a ocorrecircncia de
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) no municiacutepio de Santa Maria
de Jetibaacute destacando-se pela capacidade de dano raacutepido crescimento populacional
e alta capacidade de dispersatildeo (FORNAZIER et al 2011)
15
Por se tratar de uma praga que natildeo haacute registro de produtos para seu controle no
Ministeacuterio da Agricultura Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) produtores tecircm
recorrido ao uso de produtos quiacutemicos registrados para outras culturas o que vai
contra a legislaccedilatildeo aleacutem acarretar seacuterios prejuiacutezos ao agroecossistema (ALHO
2011) tais como altos niacuteveis de resiacuteduos toacutexicos nos produtos intoxicaccedilotildees ao
homem e mamiacuteferos resistecircncia de pragas a inseticidas contaminaccedilatildeo ambiental
aleacutem de elevar o custo de produccedilatildeo
Sendo assim uma alternativa para diminuir os impactos causados pelo meacutetodo
convencional eacute a adoccedilatildeo de medidas fitossanitaacuterias que reduzam a populaccedilatildeo de
insetos-praga e natildeo ocasionem impactos negativos sobre o meio ambiente e aos
inimigos naturais presentes na aacuterea Uma dessas medidas eacute o Manejo Fitossanitaacuterio
de Pragas (MFP) que engloba princiacutepios e meacutetodos isolados ou em conjunto que
visam garantir maior produtividade e menor agressividade ao meio ambiente visando
manejar o inseto-praga reduzindo seu niacutevel de dano (ALVEZ et al 2007)
Entre as medidas adotadas no MFP o uso de produtos formulados a partir de
agentes bioloacutegicos como a bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner
(Eubacteriales Bacillaceae) se mostra como alternativa eficiente devido agrave
especificidade com relaccedilatildeo a pragas-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e
animais (POLANCZYK ALVES 2003)
Aleacutem desses agentes bioloacutegicos a utilizaccedilatildeo de inseticidas botacircnicos derivados de
plantas ou parte das mesmas obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo
podem exercer atividade toacutexica aos insetos interferindo no desenvolvimento haacutebito
alimentar oviposiccedilatildeo repelecircncia ou mesmo morte (WIESBROOK 2004 SOUZA
ARAUacuteJO NASCIMENTO 2007) No passado o mercado de inseticidas botacircnicos
era dominado pelas piretrinas azadiractina e as rotenonas poreacutem outros inseticidas
botacircnicos vecircm ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) e o alho
(Allium sativum L) entre outras espeacutecies botacircnicas (ISMAN 1997)
A necessidade da implementaccedilatildeo de pesquisas que visam avaliar a eficiecircncia de
meacutetodos de manejo alternativo aplicaacuteveis agrave D fovealis satildeo de grande importacircncia
Nesse sentido este estudo teve por meta avaliar a eficiecircncia do agente de controle
bioloacutegico B thuringiensis e dos extratos aquosos de Fumo e Alho sob condiccedilotildees de
laboratoacuterio visando proporcionar alternativas de manejo viaacuteveis para a implantaccedilatildeo
de programas de manejo fitossanitaacuterio de D fovealis
16
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE)
A Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) tem sua origem na regiatildeo
do Mediterracircneo e nas Ilhas Canaacuterias poreacutem pode ser encontrada em diversas
partes na Aacutefrica Oriente Meacutedio Europa Canadaacute e Estados Unidos da Ameacuterica
(HOFFMAN 2010) O primeiro relato dessa praga fora da sua aacuterea nativa foi em
estufas na Finlacircndia em 1984 e posteriormente em 1989 encontrado na Holanda
fora das estufas (CFIA 2005) Nos Estados Unidos foi detectada pela primeira vez
em 2004 em plantios de begocircnia na Califoacuternia e em 2005 no Canadaacute (GILL 2013)
No Brasil foi constatada em 2008 no estado do Paranaacute e posteriormente no estado
do Espiacuterito Santo Poreacutem apenas em 2010 a espeacutecie foi identificada por uma
especialista do USDA (United States Department of Agriculture) (ZAWADNEAK et
al 2011) Os mesmos autores citam que os primeiros relatos reportam que a praga
foi encontrada no estado do Paranaacute em lavouras comerciais de morango em
condiccedilotildees de cultivo protegido tipo tuacutenel alto nos cultivares Albion e Camino real
Posteriormente a mesma foi encontrada na cultivar Portola no estado do Espiacuterito
Santo Os produtores capixabas tambeacutem constataram a presenccedila de D fovealis nos
cultivares Aromas Albion e Camino Real produzidos em tuacutenel baixo
A lagarta D fovealis eacute uma praga poliacutefaga que gera grandes problemas em diversas
variedades de cultivos de plantas ornamentais e culturas agriacutecolas especialmente
em cultivos em estufa Essa espeacutecie foi relatada em mais de 70 espeacutecies
hospedeiras em cerca de 38 famiacutelias de plantas como ornamentais dos gecircneros
Amaranthus Anthurium Begonia e culturas comercialmente cultivadas como
Capsicum annuum L e Solanum lycopersicum L Fragaria x ananassa entre outras
(GILL 2013)
Com relaccedilatildeo ao ciclo de vida de D fovealis pode-se salientar que eacute um inseto com
desenvolvimento holometaboacutelico Os adultos medem cerca de 19 a 21 mm de
comprimento satildeo de coloraccedilatildeo castanho acinzentado com aneacuteis mais claros no
abdocircmen e possuem uma linha irregular branco-amarelada atraveacutes das asas Os
17
adultos ficam sob as folhas possuem haacutebito noturno e durante o dia podem realizar
voos curtos (MURPHY 2008 RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010) Em
repouso o adulto manteacutem as asas planas em forma triangular e o abdocircmen se
posiciona voltado para cima (HOFFMAN 2010) Os machos possuem o abdocircmen
mais longo e delgado que o da fecircmea (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010)
Os adultos podem viver durante uma a duas semanas sendo que a fecircmea adulta
potildee ateacute 200 ovos durante esse periacuteodo Os ovos possuem formato oval e
inicialmente apresentam coloraccedilatildeo verde-esbranquiccedilada ficando vermelho com o
desenvolvimento do embriatildeo ateacute apresentarem pontuaccedilotildees marrons que ocorrem
antes da eclosatildeo das lagartas (FRANCO BAPTISTA 2010) Satildeo ovipositados
isoladamente ou em massas de trecircs a dez ovos sobrepostos seja na parte inferior
das folhas perto das veias na base do talo na base da planta ou na camada
superior do solo (RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010 HOFFMAN 2010)
O periacuteodo de incubaccedilatildeo dos ovos varia em torno de seis dias dependendo da
temperatura local
As lagartas medem entre 20 a 30 mm de comprimento possuem coloraccedilatildeo branca
amarelada com pontos marrons longitudinalmente distribuiacutedos pelo corpo com pelo
menos um pelo em cada ponto e com cabeccedila de coloraccedilatildeo marrom-escura
(RICHTER 2009 GILL 2013) Alimentam-se de folhas flores brotos frutos e restos
de folhasplanta em decomposiccedilatildeo e em culturas plantadas com maior densidade
podem ser encontradas se alimentando de qualquer parte da planta (BRAMBILA
STOCKS 2010) As lagartas se desenvolvem rapidamente satildeo muito aacutegeis e
preferem locais uacutemidos na base da planta proacuteximo ao solo na camada superior do
solo ou em raiacutezes expostas das plantas (HOFFMAN 2010) As lagartas satildeo
adaptadas a condiccedilotildees de alta umidade e podem tolerar ateacute mesmo condiccedilotildees de
alagamento podendo ser encontradas em plantas aquaacuteticas e em lugares salinos
(BRAMBILA STOCKS 2010)
As lagartas tendem a ficar em locais protegidos como no colo da planta tuacuteneis nos
caules e em estaacutedios mais avanccedilados podem se alimentar da haste principal
inclusive abaixo da linha do solo (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010) Alimentam-se dos tecidos da coroa da planta provocando a
interrupccedilatildeo da circulaccedilatildeo de seiva o que ocasiona o aparecimento de necrose nas
18
bordas das folhas e posteriormente a morte da planta (FRANCO BAPTISTA
2010) Durante a alimentaccedilatildeo tecem teias entre as folhas baixeiras (aquelas que
ficam em contato com o canteiro) nas quais ficam protegidas e posteriormente
empupam (MURPHY 2008) Devido seu ataque a D fovealis pode danificar caules
folhas e frutos reduzindo a produccedilatildeo e inviabilizando o produto para o mercado in
natura aleacutem disso a injuacuteria causada pelo ataque pode servir como meio de entrada
para diferentes patoacutegenos (GILL 2013)
As pupas satildeo marrom-claro com aproximadamente 9 a 10 mm de comprimento O
casulo que as envolve eacute oval feito de seda fezes e partiacuteculas do solo e eacute construiacutedo
no solo (BETHKE VANDER MEY 2010) Natildeo haacute relatos de toleracircncia ao frio ou
qualquer tipo de diapausa durante qualquer parte do ciclo de vida Portanto poderia
completar vaacuterias geraccedilotildees anualmente sob condiccedilotildees ideais (HOFFMAN 2010)
Desta forma considerando o ciclo de desenvolvimento e consequentemente o
nuacutemero de geraccedilotildees anuais a presenccedila de plantios escalonados dentro de uma
mesma aacuterea pode resultar no aumento da populaccedilatildeo de D fovealis como tambeacutem
interferir em praacuteticas de controle existentes como Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas
(MFP) e de biocontrole que podem ser interrompidos pela necessidade de aplicaccedilatildeo
de inseticidas para controlar o inseto (CFIA 2005)
A disseminaccedilatildeo dessa praga pode ocorrer atraveacutes do comeacutercio de material vegetal
propagativo e natildeo propagativo logo medidas quarentenaacuterias satildeo necessaacuterias para
evitar a introduccedilatildeo dessa praga em aacutereas livres de ocorrecircncia (BRAMBILA
STOCKS 2010)
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis
O manejo dessa praga inclui controle cultural quiacutemico comportamental e bioloacutegico
devendo ser coordenado de acordo com o monitoramento da populaccedilatildeo
19
221 Controle cultural
Embora D fovealis esteja geralmente escondida inspeccedilotildees visuais regulares podem
auxiliar na detecccedilatildeo de sua presenccedila da fase jovem que pode ser constatada pela
existecircncia de danos nas folhas flores bototildees florais e hastes bem como dejetos e
buracos na superfiacutecie do solo (BRAMBILA STOCKS 2010) Fornazier et al (2011)
recomendam a retirada e a destruiccedilatildeo de folhas velhas se possiacutevel semanalmente
visando a reduccedilatildeo do nuacutemero de ovos e pupas evitando o raacutepido crescimento e
dispersatildeo populacional da praga
222 Controle Quiacutemico
No Brasil ainda natildeo haacute nenhum produto registrado no Ministeacuterio da Agricultura
Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) Poreacutem em outros paiacuteses os produtos relatados
para o controle de lagartas D fovealis satildeo Spinosade Bifentrina Fluvalinato
Deltametrina Esfenvalerato Orthene Lambdacialotrina Imidaclopride Metomil
Ethoprop Acefato Emamectina Permetrina Clorantraniliprol e Azadirachtin
(PIJNAKKER 2001 CFIA 2005 BETHKE VANDER MEY 2010) Aleacutem disso
Bethke e Vander Mey (2010) ainda recomendam que em ambiente de estufa para
controle dos adultos as aplicaccedilotildees tipo aerossol ou neacutevoa sejam realizadas no
periacuteodo noturno isso devido a maior atividade dos adultos
223 Controle Comportamental
Armadilhas luminosas com luz ultravioleta (UV) podem ser usadas para monitorar a
atividade da mariposa adulta em aacutereas em que a D fovealis estaacute estabelecida
Hoffman (2010) relata o sucesso da utilizaccedilatildeo dessas armadilhas em plantios nos
Estados Unidos Haacute relatos no Reino Unido de coletas de insetos adultos cerca de
20
10 km das estufas infestadas jaacute na Holanda foram encontrados insetos em
armadilhas luminosas a 100 km de sua ocorrecircncia (CFIA 2005)
Outra alternativa eacute a utilizaccedilatildeo de armadilhas tipo Delta com feromocircnio sexual ou
armadilhas que associem aacutegua e feromocircnio sendo estas especiacuteficas para adultos
machos de D fovealis (MURPHY 2008 DEVENTER 2009)
224 Controle Bioloacutegico
a Entomoacutefagos
Parasitoides de ovos do gecircnero Trichogramma (Hymenoptera Trichogrammatidae)
destacam-se pela ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica e pela vasta quantidade de
hospedeiros principalmente da ordem Lepidoptera (PRATISSOLI et al 2002) Na
Alemanha Zimmermann (2004) e Jaumlckel e Kurzhals (1995) relataram a ocorrecircncia
das espeacutecies Trichogramma evanescens Westwood Trichogramma cacoeciae
Marchal e Trichogramma brassicae Bezdenko parasitando ovos de D fovealis
Os agentes de controle bioloacutegico presentes no solo tambeacutem podem ser utilizados
entre eles estatildeo o besouro Atheta coriaria (Kraatz) (Coleoptera Staphylinidae) um
predador de ovos e lagartas neonatas o percevejo Podisius sp (Hemiptera
Pentatomidae) um predador de lagartas (MURPHY 2008) e aacutecaros predadores de
ovos Hypoaspis miles (Berlese) e Hypoaspis aculeifer (Canestrini) (Acari
Laelapidae) (CFIA 2013) Outro agente utilizado com sucesso em programas de
controle bioloacutegico de lagartas da famiacutelia Crambidae eacute a vespa endoparasitoide
Cotesia flavipes (Cameron) (Hymenoptera Braconidae) (SALLAM et al 2001) que
jaacute foi relatada por Zawadneak et al (2011) em lavouras de morango no estado do
Paranaacute na qual apresentou potencial para o controle de D fovealis
21
b Entomopatoacutegenos
b1 Nematoides
Os nematoides mais utilizados no controle de insetos pertencem agrave famiacutelia
Steinernematidae Estes tecircm sido aplicados em diversas culturas e mesmo em
outras situaccedilotildees para controle de um grande nuacutemero de insetos (ALVEZ 1998)
Nematoides entomopatogecircnicos jaacute vecircm sendo utilizados em outros paiacuteses no
manejo de D fovealis Stocks e Hodges (2013) citam a utilizaccedilatildeo da espeacutecie
Heterorhabditis bacteriophora (Poinar) (Nematoda Heterorhabditidae) jaacute Jaumlckel e
Kurzhals (1995) relatam que as espeacutecies Steinernema carpocapsae (Weiser) e S
feltiae (Filipjev) (Nematoda Steinernematidae) foram eficientes no controle de D
fovealis em diferentes estaacutedios larvais sendo que no estaacutedio 3 de desenvolvimento
essas espeacutecies proporcionaram 60 e 20 de mortalidade respectivamente
b2 Fungos entomopatogecircnicos
Os fungos entomopatogecircnicos Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok
(Hypocreales Clavicipitaceae) e Beauveria bassiana (Bals) Vuill (Hypocreales
Cordycipitaceae) satildeo muito utilizados devido agrave facilidade de produccedilatildeo ampla
distribuiccedilatildeo geograacutefica variedade de hospedeiros e ocorrecircncia em condiccedilotildees
naturais enzooacuteticas ou epizooacuteticas sendo ainda comumente encontrados no solo
mostrando-se como uma alternativa eficiente devido agrave especificidade com relaccedilatildeo agrave
praga-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e animais (ALVES 1998)
b3 Bacteacuteria entomopatogecircnica
A bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner eacute uma bacteacuteria
naturalmente encontrada no solo aeroacutebia ou facultativamente anaeroacutebia gram
22
positiva pertencente agrave famiacutelia Bacillaceae (BOBROWSKI et al 2003) formadora de
esporos pertencentes ao grupo Bacillus cereus (READ et al 2003) que eacute formado
por um complexo de vaacuterias espeacutecies (Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus
mycoides B thuringiensis e Bacillus weihenstephanensis) (POLANCZYK ALVES
2003)
Bacillus thuringiensis foi originalmente descoberto em 1902 por um bioacutelogo japonecircs
Shigetane Ishiwatari poreacutem foi caracterizado em 1911 por Ernst Berliner da
Alemanha quando este pesquisador isolou o bacilo de Anagasta kuehniella Zeller
(Lepidoptera Pyralidae) (POLANCZYK ALVES 2003 LIMA 2010) Desde entatildeo
essa espeacutecie eacute a mais utilizada mundialmente como biopesticida (CAPALBO et al
2008) A espeacutecie B thuringiensis se desenvolve rapidamente em condiccedilotildees
favoraacuteveis como temperatura e disponibilidade de nutrientes (HILBERT PIGGOT
2004) Em circunstacircncias de ausecircncia de nutrientes ou acuacutemulo de metaboacutelitos
indesejaacuteveis essa bacteacuteria entra em processo de esporulaccedilatildeo durante a fase
estacionaacuteria (POLANCZYK ALVES 2003)
Durante a fase de esporulaccedilatildeo essas bacteacuterias produzem proteiacutenas inseticidas
como cristais parasporais sendo estes compostos por uma ou mais proteiacutenas Cry
tambeacutem conhecidas como part-endotoxinas (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) Essas
toxinas denominadas Cry hidrolisadas atravessam a membrana peritroacutefica e
ligam-se a receptores especiacuteficos presentes nas microvilosidades apicais da
membrana das ceacutelulas colunares presentes no intestino meacutedio causando a
formaccedilatildeo de poros que aumentam a permeabilidade da membrana interferindo no
gradiente iocircnico e no balanccedilo osmoacutetico Dessa maneira ocorre aumento da absorccedilatildeo
de aacutegua o que leva agrave lise e eventual ruptura e desintegraccedilatildeo das ceacutelulas do
intestino meacutedio fazendo o inseto cessar a alimentaccedilatildeo e morrer logo apoacutes por
inaniccedilatildeo ou ainda apoacutes a lise das ceacutelulas do intestino meacutedio o ambiente torna-se
favoraacutevel agrave germinaccedilatildeo dos esporos (POLANCZYK VALICENTE BARETO 2008) e
nesse novo ambiente devido a mistura do conteuacutedo da hemolinfa e do intestino
meacutedio o pH torna-se aacutecido e os esporos se multiplicam de tal forma que o inseto
morre por septicemia (COPPING MENN 2000)
Proteiacutenas Cry satildeo altamente especiacuteficas para o inseto-alvo satildeo inoacutecuos para os
seres humanos animais vertebrados e plantas e satildeo completamente
biodegradaacuteveis (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) sendo considerada portanto um
23
agente seguro para o controle bioloacutegico de insetos na agricultura (LIMA 2010
POLANCZYK ALVES 2003) As diferentes cepas de bacteacuteria produzem vaacuterias
combinaccedilotildees de proteiacutenas Cry que satildeo proteiacutenas consideradas seletivas e
geralmente afetam insetos-alvo de ordens especiacuteficas (CLARK PHILLIPS COATS
2005)
O primeiro biopesticida agrave base de B thuringiensis foi lanccedilado na Franccedila em 1938 e
desde entatildeo mais de 100 formulaccedilotildees foram colocados no mercado mundial devido
agrave eficaacutecia e especificidade (POLANCZYK ALVES 2003) Devido agraves vantagens do
uso do B thuringiensis como agente de controle bioloacutegico sobre insetos-praga das
ordens Coleoptera Diptera Hymenoptera e Lepidoptera aleacutem de espeacutecies de
nematoides aumentando nos uacuteltimos anos o nuacutemero de estirpes isoladas a busca
por cepas mais toacutexicas eacute crescente no mundo inteiro (GEORGE CRICKMORE
2012)
Ateacute o iniacutecio de 1990 apenas trecircs produtos comerciais estavam disponiacuteveis no
mercado brasileiro sendo todos baseados em B thuringiensis Kurstaki com
destaque para o produto Dipelreg que eacute altamente eficiente para mais de 170
lepidoacutepteros-praga (LIMA 2010) Aleacutem deste outros produtos como Ablereg Agreereg
Bac-Control WPreg Bacturreg Dipel WPreg Dipel WGreg Thuricidereg e Xentarireg podem ser
encontrados em formulaccedilotildees de base soacutelida (poacute ou granulada) ou liacutequida (AGROFIT
2003)
Em paiacuteses como a Holanda o Canadaacute e os Paiacuteses Baixos produtos quiacutemicos e
formulados comerciais agrave base de B thuringiensis foram testados sobre lagartas de
D fovealis sob condiccedilotildees de estufa e verificou-se que ambos tiveram accedilatildeo sobre as
lagartas de D fovealis poreacutem observou-se que os formulados agrave base de Bt
mostraram maior eficiecircncia que os produtos quiacutemicos (CFIA 2013) Jaumlckel e
Kurzhals (1995) e Bethke et al (2012) observaram tambeacutem que a eficiecircncia de
produtos comercias agrave base de Bt no controle de lagartas de D fovealis eacute maior nos
estaacutegios de desenvolvimento iniciais
Outra forma de utilizaccedilatildeo de B thuringiensis tem sido por meio da inserccedilatildeo de genes
de toxinas Cry em cultivos transgecircnicos dando origem a plantas Bt o que
proporciona eficaacutecia na forma de controlar insetos-praga e na reduccedilatildeo das
aplicaccedilotildees de produtos quiacutemicos Em plantas transgecircnicas a proteiacutena Cry eacute
produzida continuamente no interior das ceacutelulas protegida da inativaccedilatildeo da luz
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
BIOGRAFIA
Kharen Priscilla de Oliveira Silva Salomatildeo nascida em Aimoreacutes Estado de Minas
Gerais em 04 de novembro de 1986 filha de Neacir de Oliveira Silva e Regilaine
Salomatildeo da Silva Cursou o estudo fundamental nas escolas Escola Estadual
Machado de Assis e Escola Estadual Frei Afonso Maria Jordaacute e o ensino meacutedio no
Centro Federal de Ensino Tecnoloacutegico ndash Unidade Descentralizada de Colatina ES
onde concluiu o ensino meacutedio em 2005 Aos 20 anos ingressou no curso de
Agronomia do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade Federal do Espiacuterito
Santo em Alegre-ES Durante a graduaccedilatildeo fez parte do Laboratoacuterio de entomologia
como estagiaacuteria voluntaacuteria e posteriormente ingressou na pesquisa atraveacutes do
programa de Iniciaccedilatildeo Cientiacutefica Aos 26 anos de idade obteve o tiacutetulo de Bacharel
em Agronomia e ingressou no Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal
do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade Federal do Espiacuterito Santo atuando
na aacuterea de controle bioloacutegico sob a orientaccedilatildeo do Prof Dr Dirceu Pratissoli Aos 21
de fevereiro de 2014 defendeu sua dissertaccedilatildeo para obtenccedilatildeo do tiacutetulo de Mestre
em Produccedilatildeo Vegetal Aacuterea de Concentraccedilatildeo em Fitossanidade (Entomologia)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) foi relatada em
plantios comerciais do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando
grandes problemas agrave cultura Poreacutem por ser uma praga recente natildeo haacute registro de
produtos para o seu controle A cada dia aumenta a demanda por alimentos e outros
produtos livres de resiacuteduos aleacutem da necessidade de uma agricultura mais
desenvolvida e sustentaacutevel Pesquisas com agentes de controle bioloacutegico e extratos
vegetais surgem como alternativa para o manejo desse inseto-praga Este trabalho
teve como objetivo avaliar a eficiecircncia de formulados comerciais agrave base de Bacillus
thuringiensis e a atividade do uso dos extratos aquosos de alho e fumo visando sua
adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle de D fovealis Nos bioensaios para
avaliar a patogenicidade e virulecircncia de duas formulaccedilotildees comerciais agrave base de B
thuringiensis Agreereg e Dipel WPreg sobre a dieta artificial adaptada agrave base de farelo
de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta por King e Hartley (1985) para Diatraea
saccharalis (Lepidoptera Crambidae) foram inoculados 70 microL de cada formulado
comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 Em seguida avaliou-se a
virulecircncia dos respectivos formulados isso atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo
letal (CL50) para o estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados
encontrados observou-se que o estaacutegio 1 de desenvolvimento apresentou 9588 e
8676 de mortalidades para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente
demonstrando patogenicidade e virulecircncia agrave D fovealis No bioensaio para avaliar a
atividade dos extratos aquosos de alho e fumo estes foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) Todos os tratamentos foram pulverizados com Torre de
Potter calibrada a pressatildeo de 15 lbpolsup2 Posteriormente estimou-se a concentraccedilatildeo
letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou 95 de mortalidade no
teste de suscetibilidade Desta forma com os resultados obtidos na presente
pesquisa concluiu-se que a utilizaccedilatildeo de formulados comerciais agrave base de B
thuringiensis e extrato de fumo podem ser uma alternativa no manejo fitossanitaacuterio
de D fovealis
Palavras-Chave Controle microbiano Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de
Pragas Morango
ABSTRACT
PLANT EXTRACTS AND Bacillus thuringiensis Berliner ON Duponchelia fovealis
ZELLER (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE) MANAGEMENT
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) caterpillar was recently
reported in commercial strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing
major problems to the crops but by being a recent plague there is no products
registration for its control The demand for food and other products free of waste
increases every day plus the need for a more developed and sustainable agriculture
In this scenario researches with biological control agents and plant extracts are an
alternative for the management of this insect pest This study was carried out to
assess the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis and the
activity of garlic and tobacco aqueous extracts as alternative methods of D fovealis
control In the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of two
commercial formulations of B Thuringiensis Agree reg and Dipel reg WP were
inoculated 70 microL of each commercial formula on the diet at a concentration 1 x 108
sporesmL-1 Then the virulence of each formulated was evaluated by estimating the
lethal concentration (LC50) for the stage with the greatest susceptibility In view of
the results it was observed that the development stage 1 showed 9588 and 8676
of mortalities for Agreereg and Dipelreg WP respectively products Both formulated
based on B thuringiensis showed pathogenicity and virulence to D fovealis In the
bioassay to evaluate the activity of garlic and tobacco aqueous extracts these were
applied at a 10 concentration (mv) All treatments were sprayed with Potterrsquos
Tower calibrated at 15lbinsup2 Later it was estimated lethal concentration (LC50) of the
tobacco aqueous extract which showed 95 mortality in susceptibility testing Thus
it was concluded that the use of commercial formulated based on B thuringiensis
and tobacco extract may be an alternative on phytosanitary control of D fovealis
Keywords Microbial control Insecticidal plants Phytosanitary Pest Management
Strawberry
LISTA DE TABELAS
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) 38
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) 380
Tabela 3 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingretiente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) 52
Tabela 4 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)Erro Indicador natildeo definido5
SUMAacuteRIO
CAPIacuteTULO 1 14
1 INTRODUCcedilAtildeO 14
2 REVISAtildeO DE LITERATURA 16
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE) 16
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis 18
221 Controle cultural 19
222 Controle Quiacutemico 19
223 Controle Comportamental 19
224 Controle Bioloacutegico 20
225 Extratos Vegetais 24
3 REFEREcircNCIAS 27
CAPIacuteTULO 2 32
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 32
RESUMO 32
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (LepidopteraCrambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 33
4 INTRODUCcedilAtildeO 34
41 MATERIAL E MEacuteTODOS 35
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 35
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis 36
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) 37
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO 37
43 CONCLUSAtildeO 41
44 REFEREcircNCIAS 42
CAPIacuteTULO 3 45
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis Zeller
(Lepidoptera Crambidae) 45
RESUMO 45
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) 46
5 INTRODUCcedilAtildeO 47
51 MATERIAL E MEacuteTODOS 48
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 48
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho 49
513 Suscetibilidade de D fovealis agrave extrato aquoso de fumo e alho 50
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL) 51
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO 51
53 CONCLUSAtildeO 55
54 REFEREcircNCIAS 56
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 59
14
CAPIacuteTULO 1
1 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro (Fragaria x ananassa Duch) eacute produzida nas mais
variadas regiotildees do mundo Pertencente agrave famiacutelia Rosaceae a espeacutecie foi originada
do cruzamento entre espeacutecies silvestres (F chiloensis L e F virginiana Duchesne)
(CASTRO 2004) No Brasil a cultura encontra-se difundida em regiotildees de clima
temperado e subtropical sendo a produccedilatildeo destinada agrave induacutestria e ao consumo in
natura Trata-se de uma cultura altamente exigente em praacuteticas culturais em toda
sua cadeia produtiva desde a implantaccedilatildeo ateacute a poacutes-colheita contudo se destaca
pela alta rentabilidade e intensa demanda por matildeo-de-obra (OLIVEIRA
SCIVITTARO 2009)
No estado do Espiacuterito Santo essa cultura foi implantada comercialmente no meado
do seacuteculo XX e expandiu-se significativamente a partir da metade da deacutecada de 90
sendo entatildeo considerada uma cultura de destaque no estado (BALNINO MARIN
2006) Em meacutedia satildeo produzidas 5960 toneladas de morango ao ano ocupando
uma extensatildeo de 185 hectares envolvendo praticamente 1500 propriedades de
base familiar assumindo um relevante fator de distribuiccedilatildeo de renda no meio rural
Mediante a importacircncia da cultura do morangueiro e a necessidade de organizaccedilatildeo
do processo produtivo e comercial criou-se um polo o qual tem como ecircnfase o uso
de sistemas de produccedilatildeo sustentaacuteveis por meio da utilizaccedilatildeo de tecnologias
apropriadas Desse polo participam principalmente os municiacutepios da regiatildeo das
montanhas capixabas com destaque para Santa Maria de Jetibaacute Domingos Martins
e Venda Nova do Imigrante (INCAPER 2010)
Contudo a cultura do morangueiro apresenta inuacutemeros problemas fitossanitaacuterios
Segundo Fornazier e Pratissoli (2006) um dos principais problemas na referida
cultura satildeo os aacutecaros No entanto em 2010 foi registrada a ocorrecircncia de
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) no municiacutepio de Santa Maria
de Jetibaacute destacando-se pela capacidade de dano raacutepido crescimento populacional
e alta capacidade de dispersatildeo (FORNAZIER et al 2011)
15
Por se tratar de uma praga que natildeo haacute registro de produtos para seu controle no
Ministeacuterio da Agricultura Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) produtores tecircm
recorrido ao uso de produtos quiacutemicos registrados para outras culturas o que vai
contra a legislaccedilatildeo aleacutem acarretar seacuterios prejuiacutezos ao agroecossistema (ALHO
2011) tais como altos niacuteveis de resiacuteduos toacutexicos nos produtos intoxicaccedilotildees ao
homem e mamiacuteferos resistecircncia de pragas a inseticidas contaminaccedilatildeo ambiental
aleacutem de elevar o custo de produccedilatildeo
Sendo assim uma alternativa para diminuir os impactos causados pelo meacutetodo
convencional eacute a adoccedilatildeo de medidas fitossanitaacuterias que reduzam a populaccedilatildeo de
insetos-praga e natildeo ocasionem impactos negativos sobre o meio ambiente e aos
inimigos naturais presentes na aacuterea Uma dessas medidas eacute o Manejo Fitossanitaacuterio
de Pragas (MFP) que engloba princiacutepios e meacutetodos isolados ou em conjunto que
visam garantir maior produtividade e menor agressividade ao meio ambiente visando
manejar o inseto-praga reduzindo seu niacutevel de dano (ALVEZ et al 2007)
Entre as medidas adotadas no MFP o uso de produtos formulados a partir de
agentes bioloacutegicos como a bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner
(Eubacteriales Bacillaceae) se mostra como alternativa eficiente devido agrave
especificidade com relaccedilatildeo a pragas-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e
animais (POLANCZYK ALVES 2003)
Aleacutem desses agentes bioloacutegicos a utilizaccedilatildeo de inseticidas botacircnicos derivados de
plantas ou parte das mesmas obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo
podem exercer atividade toacutexica aos insetos interferindo no desenvolvimento haacutebito
alimentar oviposiccedilatildeo repelecircncia ou mesmo morte (WIESBROOK 2004 SOUZA
ARAUacuteJO NASCIMENTO 2007) No passado o mercado de inseticidas botacircnicos
era dominado pelas piretrinas azadiractina e as rotenonas poreacutem outros inseticidas
botacircnicos vecircm ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) e o alho
(Allium sativum L) entre outras espeacutecies botacircnicas (ISMAN 1997)
A necessidade da implementaccedilatildeo de pesquisas que visam avaliar a eficiecircncia de
meacutetodos de manejo alternativo aplicaacuteveis agrave D fovealis satildeo de grande importacircncia
Nesse sentido este estudo teve por meta avaliar a eficiecircncia do agente de controle
bioloacutegico B thuringiensis e dos extratos aquosos de Fumo e Alho sob condiccedilotildees de
laboratoacuterio visando proporcionar alternativas de manejo viaacuteveis para a implantaccedilatildeo
de programas de manejo fitossanitaacuterio de D fovealis
16
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE)
A Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) tem sua origem na regiatildeo
do Mediterracircneo e nas Ilhas Canaacuterias poreacutem pode ser encontrada em diversas
partes na Aacutefrica Oriente Meacutedio Europa Canadaacute e Estados Unidos da Ameacuterica
(HOFFMAN 2010) O primeiro relato dessa praga fora da sua aacuterea nativa foi em
estufas na Finlacircndia em 1984 e posteriormente em 1989 encontrado na Holanda
fora das estufas (CFIA 2005) Nos Estados Unidos foi detectada pela primeira vez
em 2004 em plantios de begocircnia na Califoacuternia e em 2005 no Canadaacute (GILL 2013)
No Brasil foi constatada em 2008 no estado do Paranaacute e posteriormente no estado
do Espiacuterito Santo Poreacutem apenas em 2010 a espeacutecie foi identificada por uma
especialista do USDA (United States Department of Agriculture) (ZAWADNEAK et
al 2011) Os mesmos autores citam que os primeiros relatos reportam que a praga
foi encontrada no estado do Paranaacute em lavouras comerciais de morango em
condiccedilotildees de cultivo protegido tipo tuacutenel alto nos cultivares Albion e Camino real
Posteriormente a mesma foi encontrada na cultivar Portola no estado do Espiacuterito
Santo Os produtores capixabas tambeacutem constataram a presenccedila de D fovealis nos
cultivares Aromas Albion e Camino Real produzidos em tuacutenel baixo
A lagarta D fovealis eacute uma praga poliacutefaga que gera grandes problemas em diversas
variedades de cultivos de plantas ornamentais e culturas agriacutecolas especialmente
em cultivos em estufa Essa espeacutecie foi relatada em mais de 70 espeacutecies
hospedeiras em cerca de 38 famiacutelias de plantas como ornamentais dos gecircneros
Amaranthus Anthurium Begonia e culturas comercialmente cultivadas como
Capsicum annuum L e Solanum lycopersicum L Fragaria x ananassa entre outras
(GILL 2013)
Com relaccedilatildeo ao ciclo de vida de D fovealis pode-se salientar que eacute um inseto com
desenvolvimento holometaboacutelico Os adultos medem cerca de 19 a 21 mm de
comprimento satildeo de coloraccedilatildeo castanho acinzentado com aneacuteis mais claros no
abdocircmen e possuem uma linha irregular branco-amarelada atraveacutes das asas Os
17
adultos ficam sob as folhas possuem haacutebito noturno e durante o dia podem realizar
voos curtos (MURPHY 2008 RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010) Em
repouso o adulto manteacutem as asas planas em forma triangular e o abdocircmen se
posiciona voltado para cima (HOFFMAN 2010) Os machos possuem o abdocircmen
mais longo e delgado que o da fecircmea (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010)
Os adultos podem viver durante uma a duas semanas sendo que a fecircmea adulta
potildee ateacute 200 ovos durante esse periacuteodo Os ovos possuem formato oval e
inicialmente apresentam coloraccedilatildeo verde-esbranquiccedilada ficando vermelho com o
desenvolvimento do embriatildeo ateacute apresentarem pontuaccedilotildees marrons que ocorrem
antes da eclosatildeo das lagartas (FRANCO BAPTISTA 2010) Satildeo ovipositados
isoladamente ou em massas de trecircs a dez ovos sobrepostos seja na parte inferior
das folhas perto das veias na base do talo na base da planta ou na camada
superior do solo (RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010 HOFFMAN 2010)
O periacuteodo de incubaccedilatildeo dos ovos varia em torno de seis dias dependendo da
temperatura local
As lagartas medem entre 20 a 30 mm de comprimento possuem coloraccedilatildeo branca
amarelada com pontos marrons longitudinalmente distribuiacutedos pelo corpo com pelo
menos um pelo em cada ponto e com cabeccedila de coloraccedilatildeo marrom-escura
(RICHTER 2009 GILL 2013) Alimentam-se de folhas flores brotos frutos e restos
de folhasplanta em decomposiccedilatildeo e em culturas plantadas com maior densidade
podem ser encontradas se alimentando de qualquer parte da planta (BRAMBILA
STOCKS 2010) As lagartas se desenvolvem rapidamente satildeo muito aacutegeis e
preferem locais uacutemidos na base da planta proacuteximo ao solo na camada superior do
solo ou em raiacutezes expostas das plantas (HOFFMAN 2010) As lagartas satildeo
adaptadas a condiccedilotildees de alta umidade e podem tolerar ateacute mesmo condiccedilotildees de
alagamento podendo ser encontradas em plantas aquaacuteticas e em lugares salinos
(BRAMBILA STOCKS 2010)
As lagartas tendem a ficar em locais protegidos como no colo da planta tuacuteneis nos
caules e em estaacutedios mais avanccedilados podem se alimentar da haste principal
inclusive abaixo da linha do solo (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010) Alimentam-se dos tecidos da coroa da planta provocando a
interrupccedilatildeo da circulaccedilatildeo de seiva o que ocasiona o aparecimento de necrose nas
18
bordas das folhas e posteriormente a morte da planta (FRANCO BAPTISTA
2010) Durante a alimentaccedilatildeo tecem teias entre as folhas baixeiras (aquelas que
ficam em contato com o canteiro) nas quais ficam protegidas e posteriormente
empupam (MURPHY 2008) Devido seu ataque a D fovealis pode danificar caules
folhas e frutos reduzindo a produccedilatildeo e inviabilizando o produto para o mercado in
natura aleacutem disso a injuacuteria causada pelo ataque pode servir como meio de entrada
para diferentes patoacutegenos (GILL 2013)
As pupas satildeo marrom-claro com aproximadamente 9 a 10 mm de comprimento O
casulo que as envolve eacute oval feito de seda fezes e partiacuteculas do solo e eacute construiacutedo
no solo (BETHKE VANDER MEY 2010) Natildeo haacute relatos de toleracircncia ao frio ou
qualquer tipo de diapausa durante qualquer parte do ciclo de vida Portanto poderia
completar vaacuterias geraccedilotildees anualmente sob condiccedilotildees ideais (HOFFMAN 2010)
Desta forma considerando o ciclo de desenvolvimento e consequentemente o
nuacutemero de geraccedilotildees anuais a presenccedila de plantios escalonados dentro de uma
mesma aacuterea pode resultar no aumento da populaccedilatildeo de D fovealis como tambeacutem
interferir em praacuteticas de controle existentes como Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas
(MFP) e de biocontrole que podem ser interrompidos pela necessidade de aplicaccedilatildeo
de inseticidas para controlar o inseto (CFIA 2005)
A disseminaccedilatildeo dessa praga pode ocorrer atraveacutes do comeacutercio de material vegetal
propagativo e natildeo propagativo logo medidas quarentenaacuterias satildeo necessaacuterias para
evitar a introduccedilatildeo dessa praga em aacutereas livres de ocorrecircncia (BRAMBILA
STOCKS 2010)
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis
O manejo dessa praga inclui controle cultural quiacutemico comportamental e bioloacutegico
devendo ser coordenado de acordo com o monitoramento da populaccedilatildeo
19
221 Controle cultural
Embora D fovealis esteja geralmente escondida inspeccedilotildees visuais regulares podem
auxiliar na detecccedilatildeo de sua presenccedila da fase jovem que pode ser constatada pela
existecircncia de danos nas folhas flores bototildees florais e hastes bem como dejetos e
buracos na superfiacutecie do solo (BRAMBILA STOCKS 2010) Fornazier et al (2011)
recomendam a retirada e a destruiccedilatildeo de folhas velhas se possiacutevel semanalmente
visando a reduccedilatildeo do nuacutemero de ovos e pupas evitando o raacutepido crescimento e
dispersatildeo populacional da praga
222 Controle Quiacutemico
No Brasil ainda natildeo haacute nenhum produto registrado no Ministeacuterio da Agricultura
Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) Poreacutem em outros paiacuteses os produtos relatados
para o controle de lagartas D fovealis satildeo Spinosade Bifentrina Fluvalinato
Deltametrina Esfenvalerato Orthene Lambdacialotrina Imidaclopride Metomil
Ethoprop Acefato Emamectina Permetrina Clorantraniliprol e Azadirachtin
(PIJNAKKER 2001 CFIA 2005 BETHKE VANDER MEY 2010) Aleacutem disso
Bethke e Vander Mey (2010) ainda recomendam que em ambiente de estufa para
controle dos adultos as aplicaccedilotildees tipo aerossol ou neacutevoa sejam realizadas no
periacuteodo noturno isso devido a maior atividade dos adultos
223 Controle Comportamental
Armadilhas luminosas com luz ultravioleta (UV) podem ser usadas para monitorar a
atividade da mariposa adulta em aacutereas em que a D fovealis estaacute estabelecida
Hoffman (2010) relata o sucesso da utilizaccedilatildeo dessas armadilhas em plantios nos
Estados Unidos Haacute relatos no Reino Unido de coletas de insetos adultos cerca de
20
10 km das estufas infestadas jaacute na Holanda foram encontrados insetos em
armadilhas luminosas a 100 km de sua ocorrecircncia (CFIA 2005)
Outra alternativa eacute a utilizaccedilatildeo de armadilhas tipo Delta com feromocircnio sexual ou
armadilhas que associem aacutegua e feromocircnio sendo estas especiacuteficas para adultos
machos de D fovealis (MURPHY 2008 DEVENTER 2009)
224 Controle Bioloacutegico
a Entomoacutefagos
Parasitoides de ovos do gecircnero Trichogramma (Hymenoptera Trichogrammatidae)
destacam-se pela ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica e pela vasta quantidade de
hospedeiros principalmente da ordem Lepidoptera (PRATISSOLI et al 2002) Na
Alemanha Zimmermann (2004) e Jaumlckel e Kurzhals (1995) relataram a ocorrecircncia
das espeacutecies Trichogramma evanescens Westwood Trichogramma cacoeciae
Marchal e Trichogramma brassicae Bezdenko parasitando ovos de D fovealis
Os agentes de controle bioloacutegico presentes no solo tambeacutem podem ser utilizados
entre eles estatildeo o besouro Atheta coriaria (Kraatz) (Coleoptera Staphylinidae) um
predador de ovos e lagartas neonatas o percevejo Podisius sp (Hemiptera
Pentatomidae) um predador de lagartas (MURPHY 2008) e aacutecaros predadores de
ovos Hypoaspis miles (Berlese) e Hypoaspis aculeifer (Canestrini) (Acari
Laelapidae) (CFIA 2013) Outro agente utilizado com sucesso em programas de
controle bioloacutegico de lagartas da famiacutelia Crambidae eacute a vespa endoparasitoide
Cotesia flavipes (Cameron) (Hymenoptera Braconidae) (SALLAM et al 2001) que
jaacute foi relatada por Zawadneak et al (2011) em lavouras de morango no estado do
Paranaacute na qual apresentou potencial para o controle de D fovealis
21
b Entomopatoacutegenos
b1 Nematoides
Os nematoides mais utilizados no controle de insetos pertencem agrave famiacutelia
Steinernematidae Estes tecircm sido aplicados em diversas culturas e mesmo em
outras situaccedilotildees para controle de um grande nuacutemero de insetos (ALVEZ 1998)
Nematoides entomopatogecircnicos jaacute vecircm sendo utilizados em outros paiacuteses no
manejo de D fovealis Stocks e Hodges (2013) citam a utilizaccedilatildeo da espeacutecie
Heterorhabditis bacteriophora (Poinar) (Nematoda Heterorhabditidae) jaacute Jaumlckel e
Kurzhals (1995) relatam que as espeacutecies Steinernema carpocapsae (Weiser) e S
feltiae (Filipjev) (Nematoda Steinernematidae) foram eficientes no controle de D
fovealis em diferentes estaacutedios larvais sendo que no estaacutedio 3 de desenvolvimento
essas espeacutecies proporcionaram 60 e 20 de mortalidade respectivamente
b2 Fungos entomopatogecircnicos
Os fungos entomopatogecircnicos Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok
(Hypocreales Clavicipitaceae) e Beauveria bassiana (Bals) Vuill (Hypocreales
Cordycipitaceae) satildeo muito utilizados devido agrave facilidade de produccedilatildeo ampla
distribuiccedilatildeo geograacutefica variedade de hospedeiros e ocorrecircncia em condiccedilotildees
naturais enzooacuteticas ou epizooacuteticas sendo ainda comumente encontrados no solo
mostrando-se como uma alternativa eficiente devido agrave especificidade com relaccedilatildeo agrave
praga-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e animais (ALVES 1998)
b3 Bacteacuteria entomopatogecircnica
A bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner eacute uma bacteacuteria
naturalmente encontrada no solo aeroacutebia ou facultativamente anaeroacutebia gram
22
positiva pertencente agrave famiacutelia Bacillaceae (BOBROWSKI et al 2003) formadora de
esporos pertencentes ao grupo Bacillus cereus (READ et al 2003) que eacute formado
por um complexo de vaacuterias espeacutecies (Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus
mycoides B thuringiensis e Bacillus weihenstephanensis) (POLANCZYK ALVES
2003)
Bacillus thuringiensis foi originalmente descoberto em 1902 por um bioacutelogo japonecircs
Shigetane Ishiwatari poreacutem foi caracterizado em 1911 por Ernst Berliner da
Alemanha quando este pesquisador isolou o bacilo de Anagasta kuehniella Zeller
(Lepidoptera Pyralidae) (POLANCZYK ALVES 2003 LIMA 2010) Desde entatildeo
essa espeacutecie eacute a mais utilizada mundialmente como biopesticida (CAPALBO et al
2008) A espeacutecie B thuringiensis se desenvolve rapidamente em condiccedilotildees
favoraacuteveis como temperatura e disponibilidade de nutrientes (HILBERT PIGGOT
2004) Em circunstacircncias de ausecircncia de nutrientes ou acuacutemulo de metaboacutelitos
indesejaacuteveis essa bacteacuteria entra em processo de esporulaccedilatildeo durante a fase
estacionaacuteria (POLANCZYK ALVES 2003)
Durante a fase de esporulaccedilatildeo essas bacteacuterias produzem proteiacutenas inseticidas
como cristais parasporais sendo estes compostos por uma ou mais proteiacutenas Cry
tambeacutem conhecidas como part-endotoxinas (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) Essas
toxinas denominadas Cry hidrolisadas atravessam a membrana peritroacutefica e
ligam-se a receptores especiacuteficos presentes nas microvilosidades apicais da
membrana das ceacutelulas colunares presentes no intestino meacutedio causando a
formaccedilatildeo de poros que aumentam a permeabilidade da membrana interferindo no
gradiente iocircnico e no balanccedilo osmoacutetico Dessa maneira ocorre aumento da absorccedilatildeo
de aacutegua o que leva agrave lise e eventual ruptura e desintegraccedilatildeo das ceacutelulas do
intestino meacutedio fazendo o inseto cessar a alimentaccedilatildeo e morrer logo apoacutes por
inaniccedilatildeo ou ainda apoacutes a lise das ceacutelulas do intestino meacutedio o ambiente torna-se
favoraacutevel agrave germinaccedilatildeo dos esporos (POLANCZYK VALICENTE BARETO 2008) e
nesse novo ambiente devido a mistura do conteuacutedo da hemolinfa e do intestino
meacutedio o pH torna-se aacutecido e os esporos se multiplicam de tal forma que o inseto
morre por septicemia (COPPING MENN 2000)
Proteiacutenas Cry satildeo altamente especiacuteficas para o inseto-alvo satildeo inoacutecuos para os
seres humanos animais vertebrados e plantas e satildeo completamente
biodegradaacuteveis (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) sendo considerada portanto um
23
agente seguro para o controle bioloacutegico de insetos na agricultura (LIMA 2010
POLANCZYK ALVES 2003) As diferentes cepas de bacteacuteria produzem vaacuterias
combinaccedilotildees de proteiacutenas Cry que satildeo proteiacutenas consideradas seletivas e
geralmente afetam insetos-alvo de ordens especiacuteficas (CLARK PHILLIPS COATS
2005)
O primeiro biopesticida agrave base de B thuringiensis foi lanccedilado na Franccedila em 1938 e
desde entatildeo mais de 100 formulaccedilotildees foram colocados no mercado mundial devido
agrave eficaacutecia e especificidade (POLANCZYK ALVES 2003) Devido agraves vantagens do
uso do B thuringiensis como agente de controle bioloacutegico sobre insetos-praga das
ordens Coleoptera Diptera Hymenoptera e Lepidoptera aleacutem de espeacutecies de
nematoides aumentando nos uacuteltimos anos o nuacutemero de estirpes isoladas a busca
por cepas mais toacutexicas eacute crescente no mundo inteiro (GEORGE CRICKMORE
2012)
Ateacute o iniacutecio de 1990 apenas trecircs produtos comerciais estavam disponiacuteveis no
mercado brasileiro sendo todos baseados em B thuringiensis Kurstaki com
destaque para o produto Dipelreg que eacute altamente eficiente para mais de 170
lepidoacutepteros-praga (LIMA 2010) Aleacutem deste outros produtos como Ablereg Agreereg
Bac-Control WPreg Bacturreg Dipel WPreg Dipel WGreg Thuricidereg e Xentarireg podem ser
encontrados em formulaccedilotildees de base soacutelida (poacute ou granulada) ou liacutequida (AGROFIT
2003)
Em paiacuteses como a Holanda o Canadaacute e os Paiacuteses Baixos produtos quiacutemicos e
formulados comerciais agrave base de B thuringiensis foram testados sobre lagartas de
D fovealis sob condiccedilotildees de estufa e verificou-se que ambos tiveram accedilatildeo sobre as
lagartas de D fovealis poreacutem observou-se que os formulados agrave base de Bt
mostraram maior eficiecircncia que os produtos quiacutemicos (CFIA 2013) Jaumlckel e
Kurzhals (1995) e Bethke et al (2012) observaram tambeacutem que a eficiecircncia de
produtos comercias agrave base de Bt no controle de lagartas de D fovealis eacute maior nos
estaacutegios de desenvolvimento iniciais
Outra forma de utilizaccedilatildeo de B thuringiensis tem sido por meio da inserccedilatildeo de genes
de toxinas Cry em cultivos transgecircnicos dando origem a plantas Bt o que
proporciona eficaacutecia na forma de controlar insetos-praga e na reduccedilatildeo das
aplicaccedilotildees de produtos quiacutemicos Em plantas transgecircnicas a proteiacutena Cry eacute
produzida continuamente no interior das ceacutelulas protegida da inativaccedilatildeo da luz
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) foi relatada em
plantios comerciais do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando
grandes problemas agrave cultura Poreacutem por ser uma praga recente natildeo haacute registro de
produtos para o seu controle A cada dia aumenta a demanda por alimentos e outros
produtos livres de resiacuteduos aleacutem da necessidade de uma agricultura mais
desenvolvida e sustentaacutevel Pesquisas com agentes de controle bioloacutegico e extratos
vegetais surgem como alternativa para o manejo desse inseto-praga Este trabalho
teve como objetivo avaliar a eficiecircncia de formulados comerciais agrave base de Bacillus
thuringiensis e a atividade do uso dos extratos aquosos de alho e fumo visando sua
adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle de D fovealis Nos bioensaios para
avaliar a patogenicidade e virulecircncia de duas formulaccedilotildees comerciais agrave base de B
thuringiensis Agreereg e Dipel WPreg sobre a dieta artificial adaptada agrave base de farelo
de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta por King e Hartley (1985) para Diatraea
saccharalis (Lepidoptera Crambidae) foram inoculados 70 microL de cada formulado
comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 Em seguida avaliou-se a
virulecircncia dos respectivos formulados isso atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo
letal (CL50) para o estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados
encontrados observou-se que o estaacutegio 1 de desenvolvimento apresentou 9588 e
8676 de mortalidades para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente
demonstrando patogenicidade e virulecircncia agrave D fovealis No bioensaio para avaliar a
atividade dos extratos aquosos de alho e fumo estes foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) Todos os tratamentos foram pulverizados com Torre de
Potter calibrada a pressatildeo de 15 lbpolsup2 Posteriormente estimou-se a concentraccedilatildeo
letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou 95 de mortalidade no
teste de suscetibilidade Desta forma com os resultados obtidos na presente
pesquisa concluiu-se que a utilizaccedilatildeo de formulados comerciais agrave base de B
thuringiensis e extrato de fumo podem ser uma alternativa no manejo fitossanitaacuterio
de D fovealis
Palavras-Chave Controle microbiano Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de
Pragas Morango
ABSTRACT
PLANT EXTRACTS AND Bacillus thuringiensis Berliner ON Duponchelia fovealis
ZELLER (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE) MANAGEMENT
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) caterpillar was recently
reported in commercial strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing
major problems to the crops but by being a recent plague there is no products
registration for its control The demand for food and other products free of waste
increases every day plus the need for a more developed and sustainable agriculture
In this scenario researches with biological control agents and plant extracts are an
alternative for the management of this insect pest This study was carried out to
assess the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis and the
activity of garlic and tobacco aqueous extracts as alternative methods of D fovealis
control In the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of two
commercial formulations of B Thuringiensis Agree reg and Dipel reg WP were
inoculated 70 microL of each commercial formula on the diet at a concentration 1 x 108
sporesmL-1 Then the virulence of each formulated was evaluated by estimating the
lethal concentration (LC50) for the stage with the greatest susceptibility In view of
the results it was observed that the development stage 1 showed 9588 and 8676
of mortalities for Agreereg and Dipelreg WP respectively products Both formulated
based on B thuringiensis showed pathogenicity and virulence to D fovealis In the
bioassay to evaluate the activity of garlic and tobacco aqueous extracts these were
applied at a 10 concentration (mv) All treatments were sprayed with Potterrsquos
Tower calibrated at 15lbinsup2 Later it was estimated lethal concentration (LC50) of the
tobacco aqueous extract which showed 95 mortality in susceptibility testing Thus
it was concluded that the use of commercial formulated based on B thuringiensis
and tobacco extract may be an alternative on phytosanitary control of D fovealis
Keywords Microbial control Insecticidal plants Phytosanitary Pest Management
Strawberry
LISTA DE TABELAS
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) 38
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) 380
Tabela 3 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingretiente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) 52
Tabela 4 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)Erro Indicador natildeo definido5
SUMAacuteRIO
CAPIacuteTULO 1 14
1 INTRODUCcedilAtildeO 14
2 REVISAtildeO DE LITERATURA 16
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE) 16
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis 18
221 Controle cultural 19
222 Controle Quiacutemico 19
223 Controle Comportamental 19
224 Controle Bioloacutegico 20
225 Extratos Vegetais 24
3 REFEREcircNCIAS 27
CAPIacuteTULO 2 32
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 32
RESUMO 32
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (LepidopteraCrambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 33
4 INTRODUCcedilAtildeO 34
41 MATERIAL E MEacuteTODOS 35
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 35
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis 36
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) 37
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO 37
43 CONCLUSAtildeO 41
44 REFEREcircNCIAS 42
CAPIacuteTULO 3 45
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis Zeller
(Lepidoptera Crambidae) 45
RESUMO 45
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) 46
5 INTRODUCcedilAtildeO 47
51 MATERIAL E MEacuteTODOS 48
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 48
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho 49
513 Suscetibilidade de D fovealis agrave extrato aquoso de fumo e alho 50
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL) 51
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO 51
53 CONCLUSAtildeO 55
54 REFEREcircNCIAS 56
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 59
14
CAPIacuteTULO 1
1 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro (Fragaria x ananassa Duch) eacute produzida nas mais
variadas regiotildees do mundo Pertencente agrave famiacutelia Rosaceae a espeacutecie foi originada
do cruzamento entre espeacutecies silvestres (F chiloensis L e F virginiana Duchesne)
(CASTRO 2004) No Brasil a cultura encontra-se difundida em regiotildees de clima
temperado e subtropical sendo a produccedilatildeo destinada agrave induacutestria e ao consumo in
natura Trata-se de uma cultura altamente exigente em praacuteticas culturais em toda
sua cadeia produtiva desde a implantaccedilatildeo ateacute a poacutes-colheita contudo se destaca
pela alta rentabilidade e intensa demanda por matildeo-de-obra (OLIVEIRA
SCIVITTARO 2009)
No estado do Espiacuterito Santo essa cultura foi implantada comercialmente no meado
do seacuteculo XX e expandiu-se significativamente a partir da metade da deacutecada de 90
sendo entatildeo considerada uma cultura de destaque no estado (BALNINO MARIN
2006) Em meacutedia satildeo produzidas 5960 toneladas de morango ao ano ocupando
uma extensatildeo de 185 hectares envolvendo praticamente 1500 propriedades de
base familiar assumindo um relevante fator de distribuiccedilatildeo de renda no meio rural
Mediante a importacircncia da cultura do morangueiro e a necessidade de organizaccedilatildeo
do processo produtivo e comercial criou-se um polo o qual tem como ecircnfase o uso
de sistemas de produccedilatildeo sustentaacuteveis por meio da utilizaccedilatildeo de tecnologias
apropriadas Desse polo participam principalmente os municiacutepios da regiatildeo das
montanhas capixabas com destaque para Santa Maria de Jetibaacute Domingos Martins
e Venda Nova do Imigrante (INCAPER 2010)
Contudo a cultura do morangueiro apresenta inuacutemeros problemas fitossanitaacuterios
Segundo Fornazier e Pratissoli (2006) um dos principais problemas na referida
cultura satildeo os aacutecaros No entanto em 2010 foi registrada a ocorrecircncia de
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) no municiacutepio de Santa Maria
de Jetibaacute destacando-se pela capacidade de dano raacutepido crescimento populacional
e alta capacidade de dispersatildeo (FORNAZIER et al 2011)
15
Por se tratar de uma praga que natildeo haacute registro de produtos para seu controle no
Ministeacuterio da Agricultura Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) produtores tecircm
recorrido ao uso de produtos quiacutemicos registrados para outras culturas o que vai
contra a legislaccedilatildeo aleacutem acarretar seacuterios prejuiacutezos ao agroecossistema (ALHO
2011) tais como altos niacuteveis de resiacuteduos toacutexicos nos produtos intoxicaccedilotildees ao
homem e mamiacuteferos resistecircncia de pragas a inseticidas contaminaccedilatildeo ambiental
aleacutem de elevar o custo de produccedilatildeo
Sendo assim uma alternativa para diminuir os impactos causados pelo meacutetodo
convencional eacute a adoccedilatildeo de medidas fitossanitaacuterias que reduzam a populaccedilatildeo de
insetos-praga e natildeo ocasionem impactos negativos sobre o meio ambiente e aos
inimigos naturais presentes na aacuterea Uma dessas medidas eacute o Manejo Fitossanitaacuterio
de Pragas (MFP) que engloba princiacutepios e meacutetodos isolados ou em conjunto que
visam garantir maior produtividade e menor agressividade ao meio ambiente visando
manejar o inseto-praga reduzindo seu niacutevel de dano (ALVEZ et al 2007)
Entre as medidas adotadas no MFP o uso de produtos formulados a partir de
agentes bioloacutegicos como a bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner
(Eubacteriales Bacillaceae) se mostra como alternativa eficiente devido agrave
especificidade com relaccedilatildeo a pragas-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e
animais (POLANCZYK ALVES 2003)
Aleacutem desses agentes bioloacutegicos a utilizaccedilatildeo de inseticidas botacircnicos derivados de
plantas ou parte das mesmas obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo
podem exercer atividade toacutexica aos insetos interferindo no desenvolvimento haacutebito
alimentar oviposiccedilatildeo repelecircncia ou mesmo morte (WIESBROOK 2004 SOUZA
ARAUacuteJO NASCIMENTO 2007) No passado o mercado de inseticidas botacircnicos
era dominado pelas piretrinas azadiractina e as rotenonas poreacutem outros inseticidas
botacircnicos vecircm ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) e o alho
(Allium sativum L) entre outras espeacutecies botacircnicas (ISMAN 1997)
A necessidade da implementaccedilatildeo de pesquisas que visam avaliar a eficiecircncia de
meacutetodos de manejo alternativo aplicaacuteveis agrave D fovealis satildeo de grande importacircncia
Nesse sentido este estudo teve por meta avaliar a eficiecircncia do agente de controle
bioloacutegico B thuringiensis e dos extratos aquosos de Fumo e Alho sob condiccedilotildees de
laboratoacuterio visando proporcionar alternativas de manejo viaacuteveis para a implantaccedilatildeo
de programas de manejo fitossanitaacuterio de D fovealis
16
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE)
A Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) tem sua origem na regiatildeo
do Mediterracircneo e nas Ilhas Canaacuterias poreacutem pode ser encontrada em diversas
partes na Aacutefrica Oriente Meacutedio Europa Canadaacute e Estados Unidos da Ameacuterica
(HOFFMAN 2010) O primeiro relato dessa praga fora da sua aacuterea nativa foi em
estufas na Finlacircndia em 1984 e posteriormente em 1989 encontrado na Holanda
fora das estufas (CFIA 2005) Nos Estados Unidos foi detectada pela primeira vez
em 2004 em plantios de begocircnia na Califoacuternia e em 2005 no Canadaacute (GILL 2013)
No Brasil foi constatada em 2008 no estado do Paranaacute e posteriormente no estado
do Espiacuterito Santo Poreacutem apenas em 2010 a espeacutecie foi identificada por uma
especialista do USDA (United States Department of Agriculture) (ZAWADNEAK et
al 2011) Os mesmos autores citam que os primeiros relatos reportam que a praga
foi encontrada no estado do Paranaacute em lavouras comerciais de morango em
condiccedilotildees de cultivo protegido tipo tuacutenel alto nos cultivares Albion e Camino real
Posteriormente a mesma foi encontrada na cultivar Portola no estado do Espiacuterito
Santo Os produtores capixabas tambeacutem constataram a presenccedila de D fovealis nos
cultivares Aromas Albion e Camino Real produzidos em tuacutenel baixo
A lagarta D fovealis eacute uma praga poliacutefaga que gera grandes problemas em diversas
variedades de cultivos de plantas ornamentais e culturas agriacutecolas especialmente
em cultivos em estufa Essa espeacutecie foi relatada em mais de 70 espeacutecies
hospedeiras em cerca de 38 famiacutelias de plantas como ornamentais dos gecircneros
Amaranthus Anthurium Begonia e culturas comercialmente cultivadas como
Capsicum annuum L e Solanum lycopersicum L Fragaria x ananassa entre outras
(GILL 2013)
Com relaccedilatildeo ao ciclo de vida de D fovealis pode-se salientar que eacute um inseto com
desenvolvimento holometaboacutelico Os adultos medem cerca de 19 a 21 mm de
comprimento satildeo de coloraccedilatildeo castanho acinzentado com aneacuteis mais claros no
abdocircmen e possuem uma linha irregular branco-amarelada atraveacutes das asas Os
17
adultos ficam sob as folhas possuem haacutebito noturno e durante o dia podem realizar
voos curtos (MURPHY 2008 RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010) Em
repouso o adulto manteacutem as asas planas em forma triangular e o abdocircmen se
posiciona voltado para cima (HOFFMAN 2010) Os machos possuem o abdocircmen
mais longo e delgado que o da fecircmea (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010)
Os adultos podem viver durante uma a duas semanas sendo que a fecircmea adulta
potildee ateacute 200 ovos durante esse periacuteodo Os ovos possuem formato oval e
inicialmente apresentam coloraccedilatildeo verde-esbranquiccedilada ficando vermelho com o
desenvolvimento do embriatildeo ateacute apresentarem pontuaccedilotildees marrons que ocorrem
antes da eclosatildeo das lagartas (FRANCO BAPTISTA 2010) Satildeo ovipositados
isoladamente ou em massas de trecircs a dez ovos sobrepostos seja na parte inferior
das folhas perto das veias na base do talo na base da planta ou na camada
superior do solo (RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010 HOFFMAN 2010)
O periacuteodo de incubaccedilatildeo dos ovos varia em torno de seis dias dependendo da
temperatura local
As lagartas medem entre 20 a 30 mm de comprimento possuem coloraccedilatildeo branca
amarelada com pontos marrons longitudinalmente distribuiacutedos pelo corpo com pelo
menos um pelo em cada ponto e com cabeccedila de coloraccedilatildeo marrom-escura
(RICHTER 2009 GILL 2013) Alimentam-se de folhas flores brotos frutos e restos
de folhasplanta em decomposiccedilatildeo e em culturas plantadas com maior densidade
podem ser encontradas se alimentando de qualquer parte da planta (BRAMBILA
STOCKS 2010) As lagartas se desenvolvem rapidamente satildeo muito aacutegeis e
preferem locais uacutemidos na base da planta proacuteximo ao solo na camada superior do
solo ou em raiacutezes expostas das plantas (HOFFMAN 2010) As lagartas satildeo
adaptadas a condiccedilotildees de alta umidade e podem tolerar ateacute mesmo condiccedilotildees de
alagamento podendo ser encontradas em plantas aquaacuteticas e em lugares salinos
(BRAMBILA STOCKS 2010)
As lagartas tendem a ficar em locais protegidos como no colo da planta tuacuteneis nos
caules e em estaacutedios mais avanccedilados podem se alimentar da haste principal
inclusive abaixo da linha do solo (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010) Alimentam-se dos tecidos da coroa da planta provocando a
interrupccedilatildeo da circulaccedilatildeo de seiva o que ocasiona o aparecimento de necrose nas
18
bordas das folhas e posteriormente a morte da planta (FRANCO BAPTISTA
2010) Durante a alimentaccedilatildeo tecem teias entre as folhas baixeiras (aquelas que
ficam em contato com o canteiro) nas quais ficam protegidas e posteriormente
empupam (MURPHY 2008) Devido seu ataque a D fovealis pode danificar caules
folhas e frutos reduzindo a produccedilatildeo e inviabilizando o produto para o mercado in
natura aleacutem disso a injuacuteria causada pelo ataque pode servir como meio de entrada
para diferentes patoacutegenos (GILL 2013)
As pupas satildeo marrom-claro com aproximadamente 9 a 10 mm de comprimento O
casulo que as envolve eacute oval feito de seda fezes e partiacuteculas do solo e eacute construiacutedo
no solo (BETHKE VANDER MEY 2010) Natildeo haacute relatos de toleracircncia ao frio ou
qualquer tipo de diapausa durante qualquer parte do ciclo de vida Portanto poderia
completar vaacuterias geraccedilotildees anualmente sob condiccedilotildees ideais (HOFFMAN 2010)
Desta forma considerando o ciclo de desenvolvimento e consequentemente o
nuacutemero de geraccedilotildees anuais a presenccedila de plantios escalonados dentro de uma
mesma aacuterea pode resultar no aumento da populaccedilatildeo de D fovealis como tambeacutem
interferir em praacuteticas de controle existentes como Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas
(MFP) e de biocontrole que podem ser interrompidos pela necessidade de aplicaccedilatildeo
de inseticidas para controlar o inseto (CFIA 2005)
A disseminaccedilatildeo dessa praga pode ocorrer atraveacutes do comeacutercio de material vegetal
propagativo e natildeo propagativo logo medidas quarentenaacuterias satildeo necessaacuterias para
evitar a introduccedilatildeo dessa praga em aacutereas livres de ocorrecircncia (BRAMBILA
STOCKS 2010)
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis
O manejo dessa praga inclui controle cultural quiacutemico comportamental e bioloacutegico
devendo ser coordenado de acordo com o monitoramento da populaccedilatildeo
19
221 Controle cultural
Embora D fovealis esteja geralmente escondida inspeccedilotildees visuais regulares podem
auxiliar na detecccedilatildeo de sua presenccedila da fase jovem que pode ser constatada pela
existecircncia de danos nas folhas flores bototildees florais e hastes bem como dejetos e
buracos na superfiacutecie do solo (BRAMBILA STOCKS 2010) Fornazier et al (2011)
recomendam a retirada e a destruiccedilatildeo de folhas velhas se possiacutevel semanalmente
visando a reduccedilatildeo do nuacutemero de ovos e pupas evitando o raacutepido crescimento e
dispersatildeo populacional da praga
222 Controle Quiacutemico
No Brasil ainda natildeo haacute nenhum produto registrado no Ministeacuterio da Agricultura
Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) Poreacutem em outros paiacuteses os produtos relatados
para o controle de lagartas D fovealis satildeo Spinosade Bifentrina Fluvalinato
Deltametrina Esfenvalerato Orthene Lambdacialotrina Imidaclopride Metomil
Ethoprop Acefato Emamectina Permetrina Clorantraniliprol e Azadirachtin
(PIJNAKKER 2001 CFIA 2005 BETHKE VANDER MEY 2010) Aleacutem disso
Bethke e Vander Mey (2010) ainda recomendam que em ambiente de estufa para
controle dos adultos as aplicaccedilotildees tipo aerossol ou neacutevoa sejam realizadas no
periacuteodo noturno isso devido a maior atividade dos adultos
223 Controle Comportamental
Armadilhas luminosas com luz ultravioleta (UV) podem ser usadas para monitorar a
atividade da mariposa adulta em aacutereas em que a D fovealis estaacute estabelecida
Hoffman (2010) relata o sucesso da utilizaccedilatildeo dessas armadilhas em plantios nos
Estados Unidos Haacute relatos no Reino Unido de coletas de insetos adultos cerca de
20
10 km das estufas infestadas jaacute na Holanda foram encontrados insetos em
armadilhas luminosas a 100 km de sua ocorrecircncia (CFIA 2005)
Outra alternativa eacute a utilizaccedilatildeo de armadilhas tipo Delta com feromocircnio sexual ou
armadilhas que associem aacutegua e feromocircnio sendo estas especiacuteficas para adultos
machos de D fovealis (MURPHY 2008 DEVENTER 2009)
224 Controle Bioloacutegico
a Entomoacutefagos
Parasitoides de ovos do gecircnero Trichogramma (Hymenoptera Trichogrammatidae)
destacam-se pela ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica e pela vasta quantidade de
hospedeiros principalmente da ordem Lepidoptera (PRATISSOLI et al 2002) Na
Alemanha Zimmermann (2004) e Jaumlckel e Kurzhals (1995) relataram a ocorrecircncia
das espeacutecies Trichogramma evanescens Westwood Trichogramma cacoeciae
Marchal e Trichogramma brassicae Bezdenko parasitando ovos de D fovealis
Os agentes de controle bioloacutegico presentes no solo tambeacutem podem ser utilizados
entre eles estatildeo o besouro Atheta coriaria (Kraatz) (Coleoptera Staphylinidae) um
predador de ovos e lagartas neonatas o percevejo Podisius sp (Hemiptera
Pentatomidae) um predador de lagartas (MURPHY 2008) e aacutecaros predadores de
ovos Hypoaspis miles (Berlese) e Hypoaspis aculeifer (Canestrini) (Acari
Laelapidae) (CFIA 2013) Outro agente utilizado com sucesso em programas de
controle bioloacutegico de lagartas da famiacutelia Crambidae eacute a vespa endoparasitoide
Cotesia flavipes (Cameron) (Hymenoptera Braconidae) (SALLAM et al 2001) que
jaacute foi relatada por Zawadneak et al (2011) em lavouras de morango no estado do
Paranaacute na qual apresentou potencial para o controle de D fovealis
21
b Entomopatoacutegenos
b1 Nematoides
Os nematoides mais utilizados no controle de insetos pertencem agrave famiacutelia
Steinernematidae Estes tecircm sido aplicados em diversas culturas e mesmo em
outras situaccedilotildees para controle de um grande nuacutemero de insetos (ALVEZ 1998)
Nematoides entomopatogecircnicos jaacute vecircm sendo utilizados em outros paiacuteses no
manejo de D fovealis Stocks e Hodges (2013) citam a utilizaccedilatildeo da espeacutecie
Heterorhabditis bacteriophora (Poinar) (Nematoda Heterorhabditidae) jaacute Jaumlckel e
Kurzhals (1995) relatam que as espeacutecies Steinernema carpocapsae (Weiser) e S
feltiae (Filipjev) (Nematoda Steinernematidae) foram eficientes no controle de D
fovealis em diferentes estaacutedios larvais sendo que no estaacutedio 3 de desenvolvimento
essas espeacutecies proporcionaram 60 e 20 de mortalidade respectivamente
b2 Fungos entomopatogecircnicos
Os fungos entomopatogecircnicos Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok
(Hypocreales Clavicipitaceae) e Beauveria bassiana (Bals) Vuill (Hypocreales
Cordycipitaceae) satildeo muito utilizados devido agrave facilidade de produccedilatildeo ampla
distribuiccedilatildeo geograacutefica variedade de hospedeiros e ocorrecircncia em condiccedilotildees
naturais enzooacuteticas ou epizooacuteticas sendo ainda comumente encontrados no solo
mostrando-se como uma alternativa eficiente devido agrave especificidade com relaccedilatildeo agrave
praga-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e animais (ALVES 1998)
b3 Bacteacuteria entomopatogecircnica
A bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner eacute uma bacteacuteria
naturalmente encontrada no solo aeroacutebia ou facultativamente anaeroacutebia gram
22
positiva pertencente agrave famiacutelia Bacillaceae (BOBROWSKI et al 2003) formadora de
esporos pertencentes ao grupo Bacillus cereus (READ et al 2003) que eacute formado
por um complexo de vaacuterias espeacutecies (Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus
mycoides B thuringiensis e Bacillus weihenstephanensis) (POLANCZYK ALVES
2003)
Bacillus thuringiensis foi originalmente descoberto em 1902 por um bioacutelogo japonecircs
Shigetane Ishiwatari poreacutem foi caracterizado em 1911 por Ernst Berliner da
Alemanha quando este pesquisador isolou o bacilo de Anagasta kuehniella Zeller
(Lepidoptera Pyralidae) (POLANCZYK ALVES 2003 LIMA 2010) Desde entatildeo
essa espeacutecie eacute a mais utilizada mundialmente como biopesticida (CAPALBO et al
2008) A espeacutecie B thuringiensis se desenvolve rapidamente em condiccedilotildees
favoraacuteveis como temperatura e disponibilidade de nutrientes (HILBERT PIGGOT
2004) Em circunstacircncias de ausecircncia de nutrientes ou acuacutemulo de metaboacutelitos
indesejaacuteveis essa bacteacuteria entra em processo de esporulaccedilatildeo durante a fase
estacionaacuteria (POLANCZYK ALVES 2003)
Durante a fase de esporulaccedilatildeo essas bacteacuterias produzem proteiacutenas inseticidas
como cristais parasporais sendo estes compostos por uma ou mais proteiacutenas Cry
tambeacutem conhecidas como part-endotoxinas (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) Essas
toxinas denominadas Cry hidrolisadas atravessam a membrana peritroacutefica e
ligam-se a receptores especiacuteficos presentes nas microvilosidades apicais da
membrana das ceacutelulas colunares presentes no intestino meacutedio causando a
formaccedilatildeo de poros que aumentam a permeabilidade da membrana interferindo no
gradiente iocircnico e no balanccedilo osmoacutetico Dessa maneira ocorre aumento da absorccedilatildeo
de aacutegua o que leva agrave lise e eventual ruptura e desintegraccedilatildeo das ceacutelulas do
intestino meacutedio fazendo o inseto cessar a alimentaccedilatildeo e morrer logo apoacutes por
inaniccedilatildeo ou ainda apoacutes a lise das ceacutelulas do intestino meacutedio o ambiente torna-se
favoraacutevel agrave germinaccedilatildeo dos esporos (POLANCZYK VALICENTE BARETO 2008) e
nesse novo ambiente devido a mistura do conteuacutedo da hemolinfa e do intestino
meacutedio o pH torna-se aacutecido e os esporos se multiplicam de tal forma que o inseto
morre por septicemia (COPPING MENN 2000)
Proteiacutenas Cry satildeo altamente especiacuteficas para o inseto-alvo satildeo inoacutecuos para os
seres humanos animais vertebrados e plantas e satildeo completamente
biodegradaacuteveis (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) sendo considerada portanto um
23
agente seguro para o controle bioloacutegico de insetos na agricultura (LIMA 2010
POLANCZYK ALVES 2003) As diferentes cepas de bacteacuteria produzem vaacuterias
combinaccedilotildees de proteiacutenas Cry que satildeo proteiacutenas consideradas seletivas e
geralmente afetam insetos-alvo de ordens especiacuteficas (CLARK PHILLIPS COATS
2005)
O primeiro biopesticida agrave base de B thuringiensis foi lanccedilado na Franccedila em 1938 e
desde entatildeo mais de 100 formulaccedilotildees foram colocados no mercado mundial devido
agrave eficaacutecia e especificidade (POLANCZYK ALVES 2003) Devido agraves vantagens do
uso do B thuringiensis como agente de controle bioloacutegico sobre insetos-praga das
ordens Coleoptera Diptera Hymenoptera e Lepidoptera aleacutem de espeacutecies de
nematoides aumentando nos uacuteltimos anos o nuacutemero de estirpes isoladas a busca
por cepas mais toacutexicas eacute crescente no mundo inteiro (GEORGE CRICKMORE
2012)
Ateacute o iniacutecio de 1990 apenas trecircs produtos comerciais estavam disponiacuteveis no
mercado brasileiro sendo todos baseados em B thuringiensis Kurstaki com
destaque para o produto Dipelreg que eacute altamente eficiente para mais de 170
lepidoacutepteros-praga (LIMA 2010) Aleacutem deste outros produtos como Ablereg Agreereg
Bac-Control WPreg Bacturreg Dipel WPreg Dipel WGreg Thuricidereg e Xentarireg podem ser
encontrados em formulaccedilotildees de base soacutelida (poacute ou granulada) ou liacutequida (AGROFIT
2003)
Em paiacuteses como a Holanda o Canadaacute e os Paiacuteses Baixos produtos quiacutemicos e
formulados comerciais agrave base de B thuringiensis foram testados sobre lagartas de
D fovealis sob condiccedilotildees de estufa e verificou-se que ambos tiveram accedilatildeo sobre as
lagartas de D fovealis poreacutem observou-se que os formulados agrave base de Bt
mostraram maior eficiecircncia que os produtos quiacutemicos (CFIA 2013) Jaumlckel e
Kurzhals (1995) e Bethke et al (2012) observaram tambeacutem que a eficiecircncia de
produtos comercias agrave base de Bt no controle de lagartas de D fovealis eacute maior nos
estaacutegios de desenvolvimento iniciais
Outra forma de utilizaccedilatildeo de B thuringiensis tem sido por meio da inserccedilatildeo de genes
de toxinas Cry em cultivos transgecircnicos dando origem a plantas Bt o que
proporciona eficaacutecia na forma de controlar insetos-praga e na reduccedilatildeo das
aplicaccedilotildees de produtos quiacutemicos Em plantas transgecircnicas a proteiacutena Cry eacute
produzida continuamente no interior das ceacutelulas protegida da inativaccedilatildeo da luz
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
ABSTRACT
PLANT EXTRACTS AND Bacillus thuringiensis Berliner ON Duponchelia fovealis
ZELLER (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE) MANAGEMENT
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) caterpillar was recently
reported in commercial strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing
major problems to the crops but by being a recent plague there is no products
registration for its control The demand for food and other products free of waste
increases every day plus the need for a more developed and sustainable agriculture
In this scenario researches with biological control agents and plant extracts are an
alternative for the management of this insect pest This study was carried out to
assess the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis and the
activity of garlic and tobacco aqueous extracts as alternative methods of D fovealis
control In the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of two
commercial formulations of B Thuringiensis Agree reg and Dipel reg WP were
inoculated 70 microL of each commercial formula on the diet at a concentration 1 x 108
sporesmL-1 Then the virulence of each formulated was evaluated by estimating the
lethal concentration (LC50) for the stage with the greatest susceptibility In view of
the results it was observed that the development stage 1 showed 9588 and 8676
of mortalities for Agreereg and Dipelreg WP respectively products Both formulated
based on B thuringiensis showed pathogenicity and virulence to D fovealis In the
bioassay to evaluate the activity of garlic and tobacco aqueous extracts these were
applied at a 10 concentration (mv) All treatments were sprayed with Potterrsquos
Tower calibrated at 15lbinsup2 Later it was estimated lethal concentration (LC50) of the
tobacco aqueous extract which showed 95 mortality in susceptibility testing Thus
it was concluded that the use of commercial formulated based on B thuringiensis
and tobacco extract may be an alternative on phytosanitary control of D fovealis
Keywords Microbial control Insecticidal plants Phytosanitary Pest Management
Strawberry
LISTA DE TABELAS
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) 38
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) 380
Tabela 3 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingretiente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) 52
Tabela 4 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)Erro Indicador natildeo definido5
SUMAacuteRIO
CAPIacuteTULO 1 14
1 INTRODUCcedilAtildeO 14
2 REVISAtildeO DE LITERATURA 16
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE) 16
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis 18
221 Controle cultural 19
222 Controle Quiacutemico 19
223 Controle Comportamental 19
224 Controle Bioloacutegico 20
225 Extratos Vegetais 24
3 REFEREcircNCIAS 27
CAPIacuteTULO 2 32
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 32
RESUMO 32
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (LepidopteraCrambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 33
4 INTRODUCcedilAtildeO 34
41 MATERIAL E MEacuteTODOS 35
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 35
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis 36
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) 37
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO 37
43 CONCLUSAtildeO 41
44 REFEREcircNCIAS 42
CAPIacuteTULO 3 45
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis Zeller
(Lepidoptera Crambidae) 45
RESUMO 45
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) 46
5 INTRODUCcedilAtildeO 47
51 MATERIAL E MEacuteTODOS 48
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 48
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho 49
513 Suscetibilidade de D fovealis agrave extrato aquoso de fumo e alho 50
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL) 51
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO 51
53 CONCLUSAtildeO 55
54 REFEREcircNCIAS 56
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 59
14
CAPIacuteTULO 1
1 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro (Fragaria x ananassa Duch) eacute produzida nas mais
variadas regiotildees do mundo Pertencente agrave famiacutelia Rosaceae a espeacutecie foi originada
do cruzamento entre espeacutecies silvestres (F chiloensis L e F virginiana Duchesne)
(CASTRO 2004) No Brasil a cultura encontra-se difundida em regiotildees de clima
temperado e subtropical sendo a produccedilatildeo destinada agrave induacutestria e ao consumo in
natura Trata-se de uma cultura altamente exigente em praacuteticas culturais em toda
sua cadeia produtiva desde a implantaccedilatildeo ateacute a poacutes-colheita contudo se destaca
pela alta rentabilidade e intensa demanda por matildeo-de-obra (OLIVEIRA
SCIVITTARO 2009)
No estado do Espiacuterito Santo essa cultura foi implantada comercialmente no meado
do seacuteculo XX e expandiu-se significativamente a partir da metade da deacutecada de 90
sendo entatildeo considerada uma cultura de destaque no estado (BALNINO MARIN
2006) Em meacutedia satildeo produzidas 5960 toneladas de morango ao ano ocupando
uma extensatildeo de 185 hectares envolvendo praticamente 1500 propriedades de
base familiar assumindo um relevante fator de distribuiccedilatildeo de renda no meio rural
Mediante a importacircncia da cultura do morangueiro e a necessidade de organizaccedilatildeo
do processo produtivo e comercial criou-se um polo o qual tem como ecircnfase o uso
de sistemas de produccedilatildeo sustentaacuteveis por meio da utilizaccedilatildeo de tecnologias
apropriadas Desse polo participam principalmente os municiacutepios da regiatildeo das
montanhas capixabas com destaque para Santa Maria de Jetibaacute Domingos Martins
e Venda Nova do Imigrante (INCAPER 2010)
Contudo a cultura do morangueiro apresenta inuacutemeros problemas fitossanitaacuterios
Segundo Fornazier e Pratissoli (2006) um dos principais problemas na referida
cultura satildeo os aacutecaros No entanto em 2010 foi registrada a ocorrecircncia de
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) no municiacutepio de Santa Maria
de Jetibaacute destacando-se pela capacidade de dano raacutepido crescimento populacional
e alta capacidade de dispersatildeo (FORNAZIER et al 2011)
15
Por se tratar de uma praga que natildeo haacute registro de produtos para seu controle no
Ministeacuterio da Agricultura Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) produtores tecircm
recorrido ao uso de produtos quiacutemicos registrados para outras culturas o que vai
contra a legislaccedilatildeo aleacutem acarretar seacuterios prejuiacutezos ao agroecossistema (ALHO
2011) tais como altos niacuteveis de resiacuteduos toacutexicos nos produtos intoxicaccedilotildees ao
homem e mamiacuteferos resistecircncia de pragas a inseticidas contaminaccedilatildeo ambiental
aleacutem de elevar o custo de produccedilatildeo
Sendo assim uma alternativa para diminuir os impactos causados pelo meacutetodo
convencional eacute a adoccedilatildeo de medidas fitossanitaacuterias que reduzam a populaccedilatildeo de
insetos-praga e natildeo ocasionem impactos negativos sobre o meio ambiente e aos
inimigos naturais presentes na aacuterea Uma dessas medidas eacute o Manejo Fitossanitaacuterio
de Pragas (MFP) que engloba princiacutepios e meacutetodos isolados ou em conjunto que
visam garantir maior produtividade e menor agressividade ao meio ambiente visando
manejar o inseto-praga reduzindo seu niacutevel de dano (ALVEZ et al 2007)
Entre as medidas adotadas no MFP o uso de produtos formulados a partir de
agentes bioloacutegicos como a bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner
(Eubacteriales Bacillaceae) se mostra como alternativa eficiente devido agrave
especificidade com relaccedilatildeo a pragas-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e
animais (POLANCZYK ALVES 2003)
Aleacutem desses agentes bioloacutegicos a utilizaccedilatildeo de inseticidas botacircnicos derivados de
plantas ou parte das mesmas obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo
podem exercer atividade toacutexica aos insetos interferindo no desenvolvimento haacutebito
alimentar oviposiccedilatildeo repelecircncia ou mesmo morte (WIESBROOK 2004 SOUZA
ARAUacuteJO NASCIMENTO 2007) No passado o mercado de inseticidas botacircnicos
era dominado pelas piretrinas azadiractina e as rotenonas poreacutem outros inseticidas
botacircnicos vecircm ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) e o alho
(Allium sativum L) entre outras espeacutecies botacircnicas (ISMAN 1997)
A necessidade da implementaccedilatildeo de pesquisas que visam avaliar a eficiecircncia de
meacutetodos de manejo alternativo aplicaacuteveis agrave D fovealis satildeo de grande importacircncia
Nesse sentido este estudo teve por meta avaliar a eficiecircncia do agente de controle
bioloacutegico B thuringiensis e dos extratos aquosos de Fumo e Alho sob condiccedilotildees de
laboratoacuterio visando proporcionar alternativas de manejo viaacuteveis para a implantaccedilatildeo
de programas de manejo fitossanitaacuterio de D fovealis
16
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE)
A Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) tem sua origem na regiatildeo
do Mediterracircneo e nas Ilhas Canaacuterias poreacutem pode ser encontrada em diversas
partes na Aacutefrica Oriente Meacutedio Europa Canadaacute e Estados Unidos da Ameacuterica
(HOFFMAN 2010) O primeiro relato dessa praga fora da sua aacuterea nativa foi em
estufas na Finlacircndia em 1984 e posteriormente em 1989 encontrado na Holanda
fora das estufas (CFIA 2005) Nos Estados Unidos foi detectada pela primeira vez
em 2004 em plantios de begocircnia na Califoacuternia e em 2005 no Canadaacute (GILL 2013)
No Brasil foi constatada em 2008 no estado do Paranaacute e posteriormente no estado
do Espiacuterito Santo Poreacutem apenas em 2010 a espeacutecie foi identificada por uma
especialista do USDA (United States Department of Agriculture) (ZAWADNEAK et
al 2011) Os mesmos autores citam que os primeiros relatos reportam que a praga
foi encontrada no estado do Paranaacute em lavouras comerciais de morango em
condiccedilotildees de cultivo protegido tipo tuacutenel alto nos cultivares Albion e Camino real
Posteriormente a mesma foi encontrada na cultivar Portola no estado do Espiacuterito
Santo Os produtores capixabas tambeacutem constataram a presenccedila de D fovealis nos
cultivares Aromas Albion e Camino Real produzidos em tuacutenel baixo
A lagarta D fovealis eacute uma praga poliacutefaga que gera grandes problemas em diversas
variedades de cultivos de plantas ornamentais e culturas agriacutecolas especialmente
em cultivos em estufa Essa espeacutecie foi relatada em mais de 70 espeacutecies
hospedeiras em cerca de 38 famiacutelias de plantas como ornamentais dos gecircneros
Amaranthus Anthurium Begonia e culturas comercialmente cultivadas como
Capsicum annuum L e Solanum lycopersicum L Fragaria x ananassa entre outras
(GILL 2013)
Com relaccedilatildeo ao ciclo de vida de D fovealis pode-se salientar que eacute um inseto com
desenvolvimento holometaboacutelico Os adultos medem cerca de 19 a 21 mm de
comprimento satildeo de coloraccedilatildeo castanho acinzentado com aneacuteis mais claros no
abdocircmen e possuem uma linha irregular branco-amarelada atraveacutes das asas Os
17
adultos ficam sob as folhas possuem haacutebito noturno e durante o dia podem realizar
voos curtos (MURPHY 2008 RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010) Em
repouso o adulto manteacutem as asas planas em forma triangular e o abdocircmen se
posiciona voltado para cima (HOFFMAN 2010) Os machos possuem o abdocircmen
mais longo e delgado que o da fecircmea (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010)
Os adultos podem viver durante uma a duas semanas sendo que a fecircmea adulta
potildee ateacute 200 ovos durante esse periacuteodo Os ovos possuem formato oval e
inicialmente apresentam coloraccedilatildeo verde-esbranquiccedilada ficando vermelho com o
desenvolvimento do embriatildeo ateacute apresentarem pontuaccedilotildees marrons que ocorrem
antes da eclosatildeo das lagartas (FRANCO BAPTISTA 2010) Satildeo ovipositados
isoladamente ou em massas de trecircs a dez ovos sobrepostos seja na parte inferior
das folhas perto das veias na base do talo na base da planta ou na camada
superior do solo (RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010 HOFFMAN 2010)
O periacuteodo de incubaccedilatildeo dos ovos varia em torno de seis dias dependendo da
temperatura local
As lagartas medem entre 20 a 30 mm de comprimento possuem coloraccedilatildeo branca
amarelada com pontos marrons longitudinalmente distribuiacutedos pelo corpo com pelo
menos um pelo em cada ponto e com cabeccedila de coloraccedilatildeo marrom-escura
(RICHTER 2009 GILL 2013) Alimentam-se de folhas flores brotos frutos e restos
de folhasplanta em decomposiccedilatildeo e em culturas plantadas com maior densidade
podem ser encontradas se alimentando de qualquer parte da planta (BRAMBILA
STOCKS 2010) As lagartas se desenvolvem rapidamente satildeo muito aacutegeis e
preferem locais uacutemidos na base da planta proacuteximo ao solo na camada superior do
solo ou em raiacutezes expostas das plantas (HOFFMAN 2010) As lagartas satildeo
adaptadas a condiccedilotildees de alta umidade e podem tolerar ateacute mesmo condiccedilotildees de
alagamento podendo ser encontradas em plantas aquaacuteticas e em lugares salinos
(BRAMBILA STOCKS 2010)
As lagartas tendem a ficar em locais protegidos como no colo da planta tuacuteneis nos
caules e em estaacutedios mais avanccedilados podem se alimentar da haste principal
inclusive abaixo da linha do solo (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010) Alimentam-se dos tecidos da coroa da planta provocando a
interrupccedilatildeo da circulaccedilatildeo de seiva o que ocasiona o aparecimento de necrose nas
18
bordas das folhas e posteriormente a morte da planta (FRANCO BAPTISTA
2010) Durante a alimentaccedilatildeo tecem teias entre as folhas baixeiras (aquelas que
ficam em contato com o canteiro) nas quais ficam protegidas e posteriormente
empupam (MURPHY 2008) Devido seu ataque a D fovealis pode danificar caules
folhas e frutos reduzindo a produccedilatildeo e inviabilizando o produto para o mercado in
natura aleacutem disso a injuacuteria causada pelo ataque pode servir como meio de entrada
para diferentes patoacutegenos (GILL 2013)
As pupas satildeo marrom-claro com aproximadamente 9 a 10 mm de comprimento O
casulo que as envolve eacute oval feito de seda fezes e partiacuteculas do solo e eacute construiacutedo
no solo (BETHKE VANDER MEY 2010) Natildeo haacute relatos de toleracircncia ao frio ou
qualquer tipo de diapausa durante qualquer parte do ciclo de vida Portanto poderia
completar vaacuterias geraccedilotildees anualmente sob condiccedilotildees ideais (HOFFMAN 2010)
Desta forma considerando o ciclo de desenvolvimento e consequentemente o
nuacutemero de geraccedilotildees anuais a presenccedila de plantios escalonados dentro de uma
mesma aacuterea pode resultar no aumento da populaccedilatildeo de D fovealis como tambeacutem
interferir em praacuteticas de controle existentes como Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas
(MFP) e de biocontrole que podem ser interrompidos pela necessidade de aplicaccedilatildeo
de inseticidas para controlar o inseto (CFIA 2005)
A disseminaccedilatildeo dessa praga pode ocorrer atraveacutes do comeacutercio de material vegetal
propagativo e natildeo propagativo logo medidas quarentenaacuterias satildeo necessaacuterias para
evitar a introduccedilatildeo dessa praga em aacutereas livres de ocorrecircncia (BRAMBILA
STOCKS 2010)
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis
O manejo dessa praga inclui controle cultural quiacutemico comportamental e bioloacutegico
devendo ser coordenado de acordo com o monitoramento da populaccedilatildeo
19
221 Controle cultural
Embora D fovealis esteja geralmente escondida inspeccedilotildees visuais regulares podem
auxiliar na detecccedilatildeo de sua presenccedila da fase jovem que pode ser constatada pela
existecircncia de danos nas folhas flores bototildees florais e hastes bem como dejetos e
buracos na superfiacutecie do solo (BRAMBILA STOCKS 2010) Fornazier et al (2011)
recomendam a retirada e a destruiccedilatildeo de folhas velhas se possiacutevel semanalmente
visando a reduccedilatildeo do nuacutemero de ovos e pupas evitando o raacutepido crescimento e
dispersatildeo populacional da praga
222 Controle Quiacutemico
No Brasil ainda natildeo haacute nenhum produto registrado no Ministeacuterio da Agricultura
Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) Poreacutem em outros paiacuteses os produtos relatados
para o controle de lagartas D fovealis satildeo Spinosade Bifentrina Fluvalinato
Deltametrina Esfenvalerato Orthene Lambdacialotrina Imidaclopride Metomil
Ethoprop Acefato Emamectina Permetrina Clorantraniliprol e Azadirachtin
(PIJNAKKER 2001 CFIA 2005 BETHKE VANDER MEY 2010) Aleacutem disso
Bethke e Vander Mey (2010) ainda recomendam que em ambiente de estufa para
controle dos adultos as aplicaccedilotildees tipo aerossol ou neacutevoa sejam realizadas no
periacuteodo noturno isso devido a maior atividade dos adultos
223 Controle Comportamental
Armadilhas luminosas com luz ultravioleta (UV) podem ser usadas para monitorar a
atividade da mariposa adulta em aacutereas em que a D fovealis estaacute estabelecida
Hoffman (2010) relata o sucesso da utilizaccedilatildeo dessas armadilhas em plantios nos
Estados Unidos Haacute relatos no Reino Unido de coletas de insetos adultos cerca de
20
10 km das estufas infestadas jaacute na Holanda foram encontrados insetos em
armadilhas luminosas a 100 km de sua ocorrecircncia (CFIA 2005)
Outra alternativa eacute a utilizaccedilatildeo de armadilhas tipo Delta com feromocircnio sexual ou
armadilhas que associem aacutegua e feromocircnio sendo estas especiacuteficas para adultos
machos de D fovealis (MURPHY 2008 DEVENTER 2009)
224 Controle Bioloacutegico
a Entomoacutefagos
Parasitoides de ovos do gecircnero Trichogramma (Hymenoptera Trichogrammatidae)
destacam-se pela ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica e pela vasta quantidade de
hospedeiros principalmente da ordem Lepidoptera (PRATISSOLI et al 2002) Na
Alemanha Zimmermann (2004) e Jaumlckel e Kurzhals (1995) relataram a ocorrecircncia
das espeacutecies Trichogramma evanescens Westwood Trichogramma cacoeciae
Marchal e Trichogramma brassicae Bezdenko parasitando ovos de D fovealis
Os agentes de controle bioloacutegico presentes no solo tambeacutem podem ser utilizados
entre eles estatildeo o besouro Atheta coriaria (Kraatz) (Coleoptera Staphylinidae) um
predador de ovos e lagartas neonatas o percevejo Podisius sp (Hemiptera
Pentatomidae) um predador de lagartas (MURPHY 2008) e aacutecaros predadores de
ovos Hypoaspis miles (Berlese) e Hypoaspis aculeifer (Canestrini) (Acari
Laelapidae) (CFIA 2013) Outro agente utilizado com sucesso em programas de
controle bioloacutegico de lagartas da famiacutelia Crambidae eacute a vespa endoparasitoide
Cotesia flavipes (Cameron) (Hymenoptera Braconidae) (SALLAM et al 2001) que
jaacute foi relatada por Zawadneak et al (2011) em lavouras de morango no estado do
Paranaacute na qual apresentou potencial para o controle de D fovealis
21
b Entomopatoacutegenos
b1 Nematoides
Os nematoides mais utilizados no controle de insetos pertencem agrave famiacutelia
Steinernematidae Estes tecircm sido aplicados em diversas culturas e mesmo em
outras situaccedilotildees para controle de um grande nuacutemero de insetos (ALVEZ 1998)
Nematoides entomopatogecircnicos jaacute vecircm sendo utilizados em outros paiacuteses no
manejo de D fovealis Stocks e Hodges (2013) citam a utilizaccedilatildeo da espeacutecie
Heterorhabditis bacteriophora (Poinar) (Nematoda Heterorhabditidae) jaacute Jaumlckel e
Kurzhals (1995) relatam que as espeacutecies Steinernema carpocapsae (Weiser) e S
feltiae (Filipjev) (Nematoda Steinernematidae) foram eficientes no controle de D
fovealis em diferentes estaacutedios larvais sendo que no estaacutedio 3 de desenvolvimento
essas espeacutecies proporcionaram 60 e 20 de mortalidade respectivamente
b2 Fungos entomopatogecircnicos
Os fungos entomopatogecircnicos Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok
(Hypocreales Clavicipitaceae) e Beauveria bassiana (Bals) Vuill (Hypocreales
Cordycipitaceae) satildeo muito utilizados devido agrave facilidade de produccedilatildeo ampla
distribuiccedilatildeo geograacutefica variedade de hospedeiros e ocorrecircncia em condiccedilotildees
naturais enzooacuteticas ou epizooacuteticas sendo ainda comumente encontrados no solo
mostrando-se como uma alternativa eficiente devido agrave especificidade com relaccedilatildeo agrave
praga-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e animais (ALVES 1998)
b3 Bacteacuteria entomopatogecircnica
A bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner eacute uma bacteacuteria
naturalmente encontrada no solo aeroacutebia ou facultativamente anaeroacutebia gram
22
positiva pertencente agrave famiacutelia Bacillaceae (BOBROWSKI et al 2003) formadora de
esporos pertencentes ao grupo Bacillus cereus (READ et al 2003) que eacute formado
por um complexo de vaacuterias espeacutecies (Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus
mycoides B thuringiensis e Bacillus weihenstephanensis) (POLANCZYK ALVES
2003)
Bacillus thuringiensis foi originalmente descoberto em 1902 por um bioacutelogo japonecircs
Shigetane Ishiwatari poreacutem foi caracterizado em 1911 por Ernst Berliner da
Alemanha quando este pesquisador isolou o bacilo de Anagasta kuehniella Zeller
(Lepidoptera Pyralidae) (POLANCZYK ALVES 2003 LIMA 2010) Desde entatildeo
essa espeacutecie eacute a mais utilizada mundialmente como biopesticida (CAPALBO et al
2008) A espeacutecie B thuringiensis se desenvolve rapidamente em condiccedilotildees
favoraacuteveis como temperatura e disponibilidade de nutrientes (HILBERT PIGGOT
2004) Em circunstacircncias de ausecircncia de nutrientes ou acuacutemulo de metaboacutelitos
indesejaacuteveis essa bacteacuteria entra em processo de esporulaccedilatildeo durante a fase
estacionaacuteria (POLANCZYK ALVES 2003)
Durante a fase de esporulaccedilatildeo essas bacteacuterias produzem proteiacutenas inseticidas
como cristais parasporais sendo estes compostos por uma ou mais proteiacutenas Cry
tambeacutem conhecidas como part-endotoxinas (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) Essas
toxinas denominadas Cry hidrolisadas atravessam a membrana peritroacutefica e
ligam-se a receptores especiacuteficos presentes nas microvilosidades apicais da
membrana das ceacutelulas colunares presentes no intestino meacutedio causando a
formaccedilatildeo de poros que aumentam a permeabilidade da membrana interferindo no
gradiente iocircnico e no balanccedilo osmoacutetico Dessa maneira ocorre aumento da absorccedilatildeo
de aacutegua o que leva agrave lise e eventual ruptura e desintegraccedilatildeo das ceacutelulas do
intestino meacutedio fazendo o inseto cessar a alimentaccedilatildeo e morrer logo apoacutes por
inaniccedilatildeo ou ainda apoacutes a lise das ceacutelulas do intestino meacutedio o ambiente torna-se
favoraacutevel agrave germinaccedilatildeo dos esporos (POLANCZYK VALICENTE BARETO 2008) e
nesse novo ambiente devido a mistura do conteuacutedo da hemolinfa e do intestino
meacutedio o pH torna-se aacutecido e os esporos se multiplicam de tal forma que o inseto
morre por septicemia (COPPING MENN 2000)
Proteiacutenas Cry satildeo altamente especiacuteficas para o inseto-alvo satildeo inoacutecuos para os
seres humanos animais vertebrados e plantas e satildeo completamente
biodegradaacuteveis (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) sendo considerada portanto um
23
agente seguro para o controle bioloacutegico de insetos na agricultura (LIMA 2010
POLANCZYK ALVES 2003) As diferentes cepas de bacteacuteria produzem vaacuterias
combinaccedilotildees de proteiacutenas Cry que satildeo proteiacutenas consideradas seletivas e
geralmente afetam insetos-alvo de ordens especiacuteficas (CLARK PHILLIPS COATS
2005)
O primeiro biopesticida agrave base de B thuringiensis foi lanccedilado na Franccedila em 1938 e
desde entatildeo mais de 100 formulaccedilotildees foram colocados no mercado mundial devido
agrave eficaacutecia e especificidade (POLANCZYK ALVES 2003) Devido agraves vantagens do
uso do B thuringiensis como agente de controle bioloacutegico sobre insetos-praga das
ordens Coleoptera Diptera Hymenoptera e Lepidoptera aleacutem de espeacutecies de
nematoides aumentando nos uacuteltimos anos o nuacutemero de estirpes isoladas a busca
por cepas mais toacutexicas eacute crescente no mundo inteiro (GEORGE CRICKMORE
2012)
Ateacute o iniacutecio de 1990 apenas trecircs produtos comerciais estavam disponiacuteveis no
mercado brasileiro sendo todos baseados em B thuringiensis Kurstaki com
destaque para o produto Dipelreg que eacute altamente eficiente para mais de 170
lepidoacutepteros-praga (LIMA 2010) Aleacutem deste outros produtos como Ablereg Agreereg
Bac-Control WPreg Bacturreg Dipel WPreg Dipel WGreg Thuricidereg e Xentarireg podem ser
encontrados em formulaccedilotildees de base soacutelida (poacute ou granulada) ou liacutequida (AGROFIT
2003)
Em paiacuteses como a Holanda o Canadaacute e os Paiacuteses Baixos produtos quiacutemicos e
formulados comerciais agrave base de B thuringiensis foram testados sobre lagartas de
D fovealis sob condiccedilotildees de estufa e verificou-se que ambos tiveram accedilatildeo sobre as
lagartas de D fovealis poreacutem observou-se que os formulados agrave base de Bt
mostraram maior eficiecircncia que os produtos quiacutemicos (CFIA 2013) Jaumlckel e
Kurzhals (1995) e Bethke et al (2012) observaram tambeacutem que a eficiecircncia de
produtos comercias agrave base de Bt no controle de lagartas de D fovealis eacute maior nos
estaacutegios de desenvolvimento iniciais
Outra forma de utilizaccedilatildeo de B thuringiensis tem sido por meio da inserccedilatildeo de genes
de toxinas Cry em cultivos transgecircnicos dando origem a plantas Bt o que
proporciona eficaacutecia na forma de controlar insetos-praga e na reduccedilatildeo das
aplicaccedilotildees de produtos quiacutemicos Em plantas transgecircnicas a proteiacutena Cry eacute
produzida continuamente no interior das ceacutelulas protegida da inativaccedilatildeo da luz
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
LISTA DE TABELAS
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) 38
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) 380
Tabela 3 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingretiente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) 52
Tabela 4 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)Erro Indicador natildeo definido5
SUMAacuteRIO
CAPIacuteTULO 1 14
1 INTRODUCcedilAtildeO 14
2 REVISAtildeO DE LITERATURA 16
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE) 16
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis 18
221 Controle cultural 19
222 Controle Quiacutemico 19
223 Controle Comportamental 19
224 Controle Bioloacutegico 20
225 Extratos Vegetais 24
3 REFEREcircNCIAS 27
CAPIacuteTULO 2 32
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 32
RESUMO 32
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (LepidopteraCrambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 33
4 INTRODUCcedilAtildeO 34
41 MATERIAL E MEacuteTODOS 35
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 35
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis 36
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) 37
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO 37
43 CONCLUSAtildeO 41
44 REFEREcircNCIAS 42
CAPIacuteTULO 3 45
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis Zeller
(Lepidoptera Crambidae) 45
RESUMO 45
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) 46
5 INTRODUCcedilAtildeO 47
51 MATERIAL E MEacuteTODOS 48
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 48
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho 49
513 Suscetibilidade de D fovealis agrave extrato aquoso de fumo e alho 50
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL) 51
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO 51
53 CONCLUSAtildeO 55
54 REFEREcircNCIAS 56
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 59
14
CAPIacuteTULO 1
1 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro (Fragaria x ananassa Duch) eacute produzida nas mais
variadas regiotildees do mundo Pertencente agrave famiacutelia Rosaceae a espeacutecie foi originada
do cruzamento entre espeacutecies silvestres (F chiloensis L e F virginiana Duchesne)
(CASTRO 2004) No Brasil a cultura encontra-se difundida em regiotildees de clima
temperado e subtropical sendo a produccedilatildeo destinada agrave induacutestria e ao consumo in
natura Trata-se de uma cultura altamente exigente em praacuteticas culturais em toda
sua cadeia produtiva desde a implantaccedilatildeo ateacute a poacutes-colheita contudo se destaca
pela alta rentabilidade e intensa demanda por matildeo-de-obra (OLIVEIRA
SCIVITTARO 2009)
No estado do Espiacuterito Santo essa cultura foi implantada comercialmente no meado
do seacuteculo XX e expandiu-se significativamente a partir da metade da deacutecada de 90
sendo entatildeo considerada uma cultura de destaque no estado (BALNINO MARIN
2006) Em meacutedia satildeo produzidas 5960 toneladas de morango ao ano ocupando
uma extensatildeo de 185 hectares envolvendo praticamente 1500 propriedades de
base familiar assumindo um relevante fator de distribuiccedilatildeo de renda no meio rural
Mediante a importacircncia da cultura do morangueiro e a necessidade de organizaccedilatildeo
do processo produtivo e comercial criou-se um polo o qual tem como ecircnfase o uso
de sistemas de produccedilatildeo sustentaacuteveis por meio da utilizaccedilatildeo de tecnologias
apropriadas Desse polo participam principalmente os municiacutepios da regiatildeo das
montanhas capixabas com destaque para Santa Maria de Jetibaacute Domingos Martins
e Venda Nova do Imigrante (INCAPER 2010)
Contudo a cultura do morangueiro apresenta inuacutemeros problemas fitossanitaacuterios
Segundo Fornazier e Pratissoli (2006) um dos principais problemas na referida
cultura satildeo os aacutecaros No entanto em 2010 foi registrada a ocorrecircncia de
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) no municiacutepio de Santa Maria
de Jetibaacute destacando-se pela capacidade de dano raacutepido crescimento populacional
e alta capacidade de dispersatildeo (FORNAZIER et al 2011)
15
Por se tratar de uma praga que natildeo haacute registro de produtos para seu controle no
Ministeacuterio da Agricultura Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) produtores tecircm
recorrido ao uso de produtos quiacutemicos registrados para outras culturas o que vai
contra a legislaccedilatildeo aleacutem acarretar seacuterios prejuiacutezos ao agroecossistema (ALHO
2011) tais como altos niacuteveis de resiacuteduos toacutexicos nos produtos intoxicaccedilotildees ao
homem e mamiacuteferos resistecircncia de pragas a inseticidas contaminaccedilatildeo ambiental
aleacutem de elevar o custo de produccedilatildeo
Sendo assim uma alternativa para diminuir os impactos causados pelo meacutetodo
convencional eacute a adoccedilatildeo de medidas fitossanitaacuterias que reduzam a populaccedilatildeo de
insetos-praga e natildeo ocasionem impactos negativos sobre o meio ambiente e aos
inimigos naturais presentes na aacuterea Uma dessas medidas eacute o Manejo Fitossanitaacuterio
de Pragas (MFP) que engloba princiacutepios e meacutetodos isolados ou em conjunto que
visam garantir maior produtividade e menor agressividade ao meio ambiente visando
manejar o inseto-praga reduzindo seu niacutevel de dano (ALVEZ et al 2007)
Entre as medidas adotadas no MFP o uso de produtos formulados a partir de
agentes bioloacutegicos como a bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner
(Eubacteriales Bacillaceae) se mostra como alternativa eficiente devido agrave
especificidade com relaccedilatildeo a pragas-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e
animais (POLANCZYK ALVES 2003)
Aleacutem desses agentes bioloacutegicos a utilizaccedilatildeo de inseticidas botacircnicos derivados de
plantas ou parte das mesmas obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo
podem exercer atividade toacutexica aos insetos interferindo no desenvolvimento haacutebito
alimentar oviposiccedilatildeo repelecircncia ou mesmo morte (WIESBROOK 2004 SOUZA
ARAUacuteJO NASCIMENTO 2007) No passado o mercado de inseticidas botacircnicos
era dominado pelas piretrinas azadiractina e as rotenonas poreacutem outros inseticidas
botacircnicos vecircm ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) e o alho
(Allium sativum L) entre outras espeacutecies botacircnicas (ISMAN 1997)
A necessidade da implementaccedilatildeo de pesquisas que visam avaliar a eficiecircncia de
meacutetodos de manejo alternativo aplicaacuteveis agrave D fovealis satildeo de grande importacircncia
Nesse sentido este estudo teve por meta avaliar a eficiecircncia do agente de controle
bioloacutegico B thuringiensis e dos extratos aquosos de Fumo e Alho sob condiccedilotildees de
laboratoacuterio visando proporcionar alternativas de manejo viaacuteveis para a implantaccedilatildeo
de programas de manejo fitossanitaacuterio de D fovealis
16
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE)
A Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) tem sua origem na regiatildeo
do Mediterracircneo e nas Ilhas Canaacuterias poreacutem pode ser encontrada em diversas
partes na Aacutefrica Oriente Meacutedio Europa Canadaacute e Estados Unidos da Ameacuterica
(HOFFMAN 2010) O primeiro relato dessa praga fora da sua aacuterea nativa foi em
estufas na Finlacircndia em 1984 e posteriormente em 1989 encontrado na Holanda
fora das estufas (CFIA 2005) Nos Estados Unidos foi detectada pela primeira vez
em 2004 em plantios de begocircnia na Califoacuternia e em 2005 no Canadaacute (GILL 2013)
No Brasil foi constatada em 2008 no estado do Paranaacute e posteriormente no estado
do Espiacuterito Santo Poreacutem apenas em 2010 a espeacutecie foi identificada por uma
especialista do USDA (United States Department of Agriculture) (ZAWADNEAK et
al 2011) Os mesmos autores citam que os primeiros relatos reportam que a praga
foi encontrada no estado do Paranaacute em lavouras comerciais de morango em
condiccedilotildees de cultivo protegido tipo tuacutenel alto nos cultivares Albion e Camino real
Posteriormente a mesma foi encontrada na cultivar Portola no estado do Espiacuterito
Santo Os produtores capixabas tambeacutem constataram a presenccedila de D fovealis nos
cultivares Aromas Albion e Camino Real produzidos em tuacutenel baixo
A lagarta D fovealis eacute uma praga poliacutefaga que gera grandes problemas em diversas
variedades de cultivos de plantas ornamentais e culturas agriacutecolas especialmente
em cultivos em estufa Essa espeacutecie foi relatada em mais de 70 espeacutecies
hospedeiras em cerca de 38 famiacutelias de plantas como ornamentais dos gecircneros
Amaranthus Anthurium Begonia e culturas comercialmente cultivadas como
Capsicum annuum L e Solanum lycopersicum L Fragaria x ananassa entre outras
(GILL 2013)
Com relaccedilatildeo ao ciclo de vida de D fovealis pode-se salientar que eacute um inseto com
desenvolvimento holometaboacutelico Os adultos medem cerca de 19 a 21 mm de
comprimento satildeo de coloraccedilatildeo castanho acinzentado com aneacuteis mais claros no
abdocircmen e possuem uma linha irregular branco-amarelada atraveacutes das asas Os
17
adultos ficam sob as folhas possuem haacutebito noturno e durante o dia podem realizar
voos curtos (MURPHY 2008 RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010) Em
repouso o adulto manteacutem as asas planas em forma triangular e o abdocircmen se
posiciona voltado para cima (HOFFMAN 2010) Os machos possuem o abdocircmen
mais longo e delgado que o da fecircmea (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010)
Os adultos podem viver durante uma a duas semanas sendo que a fecircmea adulta
potildee ateacute 200 ovos durante esse periacuteodo Os ovos possuem formato oval e
inicialmente apresentam coloraccedilatildeo verde-esbranquiccedilada ficando vermelho com o
desenvolvimento do embriatildeo ateacute apresentarem pontuaccedilotildees marrons que ocorrem
antes da eclosatildeo das lagartas (FRANCO BAPTISTA 2010) Satildeo ovipositados
isoladamente ou em massas de trecircs a dez ovos sobrepostos seja na parte inferior
das folhas perto das veias na base do talo na base da planta ou na camada
superior do solo (RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010 HOFFMAN 2010)
O periacuteodo de incubaccedilatildeo dos ovos varia em torno de seis dias dependendo da
temperatura local
As lagartas medem entre 20 a 30 mm de comprimento possuem coloraccedilatildeo branca
amarelada com pontos marrons longitudinalmente distribuiacutedos pelo corpo com pelo
menos um pelo em cada ponto e com cabeccedila de coloraccedilatildeo marrom-escura
(RICHTER 2009 GILL 2013) Alimentam-se de folhas flores brotos frutos e restos
de folhasplanta em decomposiccedilatildeo e em culturas plantadas com maior densidade
podem ser encontradas se alimentando de qualquer parte da planta (BRAMBILA
STOCKS 2010) As lagartas se desenvolvem rapidamente satildeo muito aacutegeis e
preferem locais uacutemidos na base da planta proacuteximo ao solo na camada superior do
solo ou em raiacutezes expostas das plantas (HOFFMAN 2010) As lagartas satildeo
adaptadas a condiccedilotildees de alta umidade e podem tolerar ateacute mesmo condiccedilotildees de
alagamento podendo ser encontradas em plantas aquaacuteticas e em lugares salinos
(BRAMBILA STOCKS 2010)
As lagartas tendem a ficar em locais protegidos como no colo da planta tuacuteneis nos
caules e em estaacutedios mais avanccedilados podem se alimentar da haste principal
inclusive abaixo da linha do solo (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010) Alimentam-se dos tecidos da coroa da planta provocando a
interrupccedilatildeo da circulaccedilatildeo de seiva o que ocasiona o aparecimento de necrose nas
18
bordas das folhas e posteriormente a morte da planta (FRANCO BAPTISTA
2010) Durante a alimentaccedilatildeo tecem teias entre as folhas baixeiras (aquelas que
ficam em contato com o canteiro) nas quais ficam protegidas e posteriormente
empupam (MURPHY 2008) Devido seu ataque a D fovealis pode danificar caules
folhas e frutos reduzindo a produccedilatildeo e inviabilizando o produto para o mercado in
natura aleacutem disso a injuacuteria causada pelo ataque pode servir como meio de entrada
para diferentes patoacutegenos (GILL 2013)
As pupas satildeo marrom-claro com aproximadamente 9 a 10 mm de comprimento O
casulo que as envolve eacute oval feito de seda fezes e partiacuteculas do solo e eacute construiacutedo
no solo (BETHKE VANDER MEY 2010) Natildeo haacute relatos de toleracircncia ao frio ou
qualquer tipo de diapausa durante qualquer parte do ciclo de vida Portanto poderia
completar vaacuterias geraccedilotildees anualmente sob condiccedilotildees ideais (HOFFMAN 2010)
Desta forma considerando o ciclo de desenvolvimento e consequentemente o
nuacutemero de geraccedilotildees anuais a presenccedila de plantios escalonados dentro de uma
mesma aacuterea pode resultar no aumento da populaccedilatildeo de D fovealis como tambeacutem
interferir em praacuteticas de controle existentes como Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas
(MFP) e de biocontrole que podem ser interrompidos pela necessidade de aplicaccedilatildeo
de inseticidas para controlar o inseto (CFIA 2005)
A disseminaccedilatildeo dessa praga pode ocorrer atraveacutes do comeacutercio de material vegetal
propagativo e natildeo propagativo logo medidas quarentenaacuterias satildeo necessaacuterias para
evitar a introduccedilatildeo dessa praga em aacutereas livres de ocorrecircncia (BRAMBILA
STOCKS 2010)
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis
O manejo dessa praga inclui controle cultural quiacutemico comportamental e bioloacutegico
devendo ser coordenado de acordo com o monitoramento da populaccedilatildeo
19
221 Controle cultural
Embora D fovealis esteja geralmente escondida inspeccedilotildees visuais regulares podem
auxiliar na detecccedilatildeo de sua presenccedila da fase jovem que pode ser constatada pela
existecircncia de danos nas folhas flores bototildees florais e hastes bem como dejetos e
buracos na superfiacutecie do solo (BRAMBILA STOCKS 2010) Fornazier et al (2011)
recomendam a retirada e a destruiccedilatildeo de folhas velhas se possiacutevel semanalmente
visando a reduccedilatildeo do nuacutemero de ovos e pupas evitando o raacutepido crescimento e
dispersatildeo populacional da praga
222 Controle Quiacutemico
No Brasil ainda natildeo haacute nenhum produto registrado no Ministeacuterio da Agricultura
Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) Poreacutem em outros paiacuteses os produtos relatados
para o controle de lagartas D fovealis satildeo Spinosade Bifentrina Fluvalinato
Deltametrina Esfenvalerato Orthene Lambdacialotrina Imidaclopride Metomil
Ethoprop Acefato Emamectina Permetrina Clorantraniliprol e Azadirachtin
(PIJNAKKER 2001 CFIA 2005 BETHKE VANDER MEY 2010) Aleacutem disso
Bethke e Vander Mey (2010) ainda recomendam que em ambiente de estufa para
controle dos adultos as aplicaccedilotildees tipo aerossol ou neacutevoa sejam realizadas no
periacuteodo noturno isso devido a maior atividade dos adultos
223 Controle Comportamental
Armadilhas luminosas com luz ultravioleta (UV) podem ser usadas para monitorar a
atividade da mariposa adulta em aacutereas em que a D fovealis estaacute estabelecida
Hoffman (2010) relata o sucesso da utilizaccedilatildeo dessas armadilhas em plantios nos
Estados Unidos Haacute relatos no Reino Unido de coletas de insetos adultos cerca de
20
10 km das estufas infestadas jaacute na Holanda foram encontrados insetos em
armadilhas luminosas a 100 km de sua ocorrecircncia (CFIA 2005)
Outra alternativa eacute a utilizaccedilatildeo de armadilhas tipo Delta com feromocircnio sexual ou
armadilhas que associem aacutegua e feromocircnio sendo estas especiacuteficas para adultos
machos de D fovealis (MURPHY 2008 DEVENTER 2009)
224 Controle Bioloacutegico
a Entomoacutefagos
Parasitoides de ovos do gecircnero Trichogramma (Hymenoptera Trichogrammatidae)
destacam-se pela ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica e pela vasta quantidade de
hospedeiros principalmente da ordem Lepidoptera (PRATISSOLI et al 2002) Na
Alemanha Zimmermann (2004) e Jaumlckel e Kurzhals (1995) relataram a ocorrecircncia
das espeacutecies Trichogramma evanescens Westwood Trichogramma cacoeciae
Marchal e Trichogramma brassicae Bezdenko parasitando ovos de D fovealis
Os agentes de controle bioloacutegico presentes no solo tambeacutem podem ser utilizados
entre eles estatildeo o besouro Atheta coriaria (Kraatz) (Coleoptera Staphylinidae) um
predador de ovos e lagartas neonatas o percevejo Podisius sp (Hemiptera
Pentatomidae) um predador de lagartas (MURPHY 2008) e aacutecaros predadores de
ovos Hypoaspis miles (Berlese) e Hypoaspis aculeifer (Canestrini) (Acari
Laelapidae) (CFIA 2013) Outro agente utilizado com sucesso em programas de
controle bioloacutegico de lagartas da famiacutelia Crambidae eacute a vespa endoparasitoide
Cotesia flavipes (Cameron) (Hymenoptera Braconidae) (SALLAM et al 2001) que
jaacute foi relatada por Zawadneak et al (2011) em lavouras de morango no estado do
Paranaacute na qual apresentou potencial para o controle de D fovealis
21
b Entomopatoacutegenos
b1 Nematoides
Os nematoides mais utilizados no controle de insetos pertencem agrave famiacutelia
Steinernematidae Estes tecircm sido aplicados em diversas culturas e mesmo em
outras situaccedilotildees para controle de um grande nuacutemero de insetos (ALVEZ 1998)
Nematoides entomopatogecircnicos jaacute vecircm sendo utilizados em outros paiacuteses no
manejo de D fovealis Stocks e Hodges (2013) citam a utilizaccedilatildeo da espeacutecie
Heterorhabditis bacteriophora (Poinar) (Nematoda Heterorhabditidae) jaacute Jaumlckel e
Kurzhals (1995) relatam que as espeacutecies Steinernema carpocapsae (Weiser) e S
feltiae (Filipjev) (Nematoda Steinernematidae) foram eficientes no controle de D
fovealis em diferentes estaacutedios larvais sendo que no estaacutedio 3 de desenvolvimento
essas espeacutecies proporcionaram 60 e 20 de mortalidade respectivamente
b2 Fungos entomopatogecircnicos
Os fungos entomopatogecircnicos Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok
(Hypocreales Clavicipitaceae) e Beauveria bassiana (Bals) Vuill (Hypocreales
Cordycipitaceae) satildeo muito utilizados devido agrave facilidade de produccedilatildeo ampla
distribuiccedilatildeo geograacutefica variedade de hospedeiros e ocorrecircncia em condiccedilotildees
naturais enzooacuteticas ou epizooacuteticas sendo ainda comumente encontrados no solo
mostrando-se como uma alternativa eficiente devido agrave especificidade com relaccedilatildeo agrave
praga-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e animais (ALVES 1998)
b3 Bacteacuteria entomopatogecircnica
A bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner eacute uma bacteacuteria
naturalmente encontrada no solo aeroacutebia ou facultativamente anaeroacutebia gram
22
positiva pertencente agrave famiacutelia Bacillaceae (BOBROWSKI et al 2003) formadora de
esporos pertencentes ao grupo Bacillus cereus (READ et al 2003) que eacute formado
por um complexo de vaacuterias espeacutecies (Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus
mycoides B thuringiensis e Bacillus weihenstephanensis) (POLANCZYK ALVES
2003)
Bacillus thuringiensis foi originalmente descoberto em 1902 por um bioacutelogo japonecircs
Shigetane Ishiwatari poreacutem foi caracterizado em 1911 por Ernst Berliner da
Alemanha quando este pesquisador isolou o bacilo de Anagasta kuehniella Zeller
(Lepidoptera Pyralidae) (POLANCZYK ALVES 2003 LIMA 2010) Desde entatildeo
essa espeacutecie eacute a mais utilizada mundialmente como biopesticida (CAPALBO et al
2008) A espeacutecie B thuringiensis se desenvolve rapidamente em condiccedilotildees
favoraacuteveis como temperatura e disponibilidade de nutrientes (HILBERT PIGGOT
2004) Em circunstacircncias de ausecircncia de nutrientes ou acuacutemulo de metaboacutelitos
indesejaacuteveis essa bacteacuteria entra em processo de esporulaccedilatildeo durante a fase
estacionaacuteria (POLANCZYK ALVES 2003)
Durante a fase de esporulaccedilatildeo essas bacteacuterias produzem proteiacutenas inseticidas
como cristais parasporais sendo estes compostos por uma ou mais proteiacutenas Cry
tambeacutem conhecidas como part-endotoxinas (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) Essas
toxinas denominadas Cry hidrolisadas atravessam a membrana peritroacutefica e
ligam-se a receptores especiacuteficos presentes nas microvilosidades apicais da
membrana das ceacutelulas colunares presentes no intestino meacutedio causando a
formaccedilatildeo de poros que aumentam a permeabilidade da membrana interferindo no
gradiente iocircnico e no balanccedilo osmoacutetico Dessa maneira ocorre aumento da absorccedilatildeo
de aacutegua o que leva agrave lise e eventual ruptura e desintegraccedilatildeo das ceacutelulas do
intestino meacutedio fazendo o inseto cessar a alimentaccedilatildeo e morrer logo apoacutes por
inaniccedilatildeo ou ainda apoacutes a lise das ceacutelulas do intestino meacutedio o ambiente torna-se
favoraacutevel agrave germinaccedilatildeo dos esporos (POLANCZYK VALICENTE BARETO 2008) e
nesse novo ambiente devido a mistura do conteuacutedo da hemolinfa e do intestino
meacutedio o pH torna-se aacutecido e os esporos se multiplicam de tal forma que o inseto
morre por septicemia (COPPING MENN 2000)
Proteiacutenas Cry satildeo altamente especiacuteficas para o inseto-alvo satildeo inoacutecuos para os
seres humanos animais vertebrados e plantas e satildeo completamente
biodegradaacuteveis (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) sendo considerada portanto um
23
agente seguro para o controle bioloacutegico de insetos na agricultura (LIMA 2010
POLANCZYK ALVES 2003) As diferentes cepas de bacteacuteria produzem vaacuterias
combinaccedilotildees de proteiacutenas Cry que satildeo proteiacutenas consideradas seletivas e
geralmente afetam insetos-alvo de ordens especiacuteficas (CLARK PHILLIPS COATS
2005)
O primeiro biopesticida agrave base de B thuringiensis foi lanccedilado na Franccedila em 1938 e
desde entatildeo mais de 100 formulaccedilotildees foram colocados no mercado mundial devido
agrave eficaacutecia e especificidade (POLANCZYK ALVES 2003) Devido agraves vantagens do
uso do B thuringiensis como agente de controle bioloacutegico sobre insetos-praga das
ordens Coleoptera Diptera Hymenoptera e Lepidoptera aleacutem de espeacutecies de
nematoides aumentando nos uacuteltimos anos o nuacutemero de estirpes isoladas a busca
por cepas mais toacutexicas eacute crescente no mundo inteiro (GEORGE CRICKMORE
2012)
Ateacute o iniacutecio de 1990 apenas trecircs produtos comerciais estavam disponiacuteveis no
mercado brasileiro sendo todos baseados em B thuringiensis Kurstaki com
destaque para o produto Dipelreg que eacute altamente eficiente para mais de 170
lepidoacutepteros-praga (LIMA 2010) Aleacutem deste outros produtos como Ablereg Agreereg
Bac-Control WPreg Bacturreg Dipel WPreg Dipel WGreg Thuricidereg e Xentarireg podem ser
encontrados em formulaccedilotildees de base soacutelida (poacute ou granulada) ou liacutequida (AGROFIT
2003)
Em paiacuteses como a Holanda o Canadaacute e os Paiacuteses Baixos produtos quiacutemicos e
formulados comerciais agrave base de B thuringiensis foram testados sobre lagartas de
D fovealis sob condiccedilotildees de estufa e verificou-se que ambos tiveram accedilatildeo sobre as
lagartas de D fovealis poreacutem observou-se que os formulados agrave base de Bt
mostraram maior eficiecircncia que os produtos quiacutemicos (CFIA 2013) Jaumlckel e
Kurzhals (1995) e Bethke et al (2012) observaram tambeacutem que a eficiecircncia de
produtos comercias agrave base de Bt no controle de lagartas de D fovealis eacute maior nos
estaacutegios de desenvolvimento iniciais
Outra forma de utilizaccedilatildeo de B thuringiensis tem sido por meio da inserccedilatildeo de genes
de toxinas Cry em cultivos transgecircnicos dando origem a plantas Bt o que
proporciona eficaacutecia na forma de controlar insetos-praga e na reduccedilatildeo das
aplicaccedilotildees de produtos quiacutemicos Em plantas transgecircnicas a proteiacutena Cry eacute
produzida continuamente no interior das ceacutelulas protegida da inativaccedilatildeo da luz
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
SUMAacuteRIO
CAPIacuteTULO 1 14
1 INTRODUCcedilAtildeO 14
2 REVISAtildeO DE LITERATURA 16
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE) 16
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis 18
221 Controle cultural 19
222 Controle Quiacutemico 19
223 Controle Comportamental 19
224 Controle Bioloacutegico 20
225 Extratos Vegetais 24
3 REFEREcircNCIAS 27
CAPIacuteTULO 2 32
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 32
RESUMO 32
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (LepidopteraCrambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE) 33
4 INTRODUCcedilAtildeO 34
41 MATERIAL E MEacuteTODOS 35
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 35
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis 36
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) 37
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO 37
43 CONCLUSAtildeO 41
44 REFEREcircNCIAS 42
CAPIacuteTULO 3 45
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis Zeller
(Lepidoptera Crambidae) 45
RESUMO 45
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) 46
5 INTRODUCcedilAtildeO 47
51 MATERIAL E MEacuteTODOS 48
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 48
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho 49
513 Suscetibilidade de D fovealis agrave extrato aquoso de fumo e alho 50
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL) 51
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO 51
53 CONCLUSAtildeO 55
54 REFEREcircNCIAS 56
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 59
14
CAPIacuteTULO 1
1 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro (Fragaria x ananassa Duch) eacute produzida nas mais
variadas regiotildees do mundo Pertencente agrave famiacutelia Rosaceae a espeacutecie foi originada
do cruzamento entre espeacutecies silvestres (F chiloensis L e F virginiana Duchesne)
(CASTRO 2004) No Brasil a cultura encontra-se difundida em regiotildees de clima
temperado e subtropical sendo a produccedilatildeo destinada agrave induacutestria e ao consumo in
natura Trata-se de uma cultura altamente exigente em praacuteticas culturais em toda
sua cadeia produtiva desde a implantaccedilatildeo ateacute a poacutes-colheita contudo se destaca
pela alta rentabilidade e intensa demanda por matildeo-de-obra (OLIVEIRA
SCIVITTARO 2009)
No estado do Espiacuterito Santo essa cultura foi implantada comercialmente no meado
do seacuteculo XX e expandiu-se significativamente a partir da metade da deacutecada de 90
sendo entatildeo considerada uma cultura de destaque no estado (BALNINO MARIN
2006) Em meacutedia satildeo produzidas 5960 toneladas de morango ao ano ocupando
uma extensatildeo de 185 hectares envolvendo praticamente 1500 propriedades de
base familiar assumindo um relevante fator de distribuiccedilatildeo de renda no meio rural
Mediante a importacircncia da cultura do morangueiro e a necessidade de organizaccedilatildeo
do processo produtivo e comercial criou-se um polo o qual tem como ecircnfase o uso
de sistemas de produccedilatildeo sustentaacuteveis por meio da utilizaccedilatildeo de tecnologias
apropriadas Desse polo participam principalmente os municiacutepios da regiatildeo das
montanhas capixabas com destaque para Santa Maria de Jetibaacute Domingos Martins
e Venda Nova do Imigrante (INCAPER 2010)
Contudo a cultura do morangueiro apresenta inuacutemeros problemas fitossanitaacuterios
Segundo Fornazier e Pratissoli (2006) um dos principais problemas na referida
cultura satildeo os aacutecaros No entanto em 2010 foi registrada a ocorrecircncia de
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) no municiacutepio de Santa Maria
de Jetibaacute destacando-se pela capacidade de dano raacutepido crescimento populacional
e alta capacidade de dispersatildeo (FORNAZIER et al 2011)
15
Por se tratar de uma praga que natildeo haacute registro de produtos para seu controle no
Ministeacuterio da Agricultura Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) produtores tecircm
recorrido ao uso de produtos quiacutemicos registrados para outras culturas o que vai
contra a legislaccedilatildeo aleacutem acarretar seacuterios prejuiacutezos ao agroecossistema (ALHO
2011) tais como altos niacuteveis de resiacuteduos toacutexicos nos produtos intoxicaccedilotildees ao
homem e mamiacuteferos resistecircncia de pragas a inseticidas contaminaccedilatildeo ambiental
aleacutem de elevar o custo de produccedilatildeo
Sendo assim uma alternativa para diminuir os impactos causados pelo meacutetodo
convencional eacute a adoccedilatildeo de medidas fitossanitaacuterias que reduzam a populaccedilatildeo de
insetos-praga e natildeo ocasionem impactos negativos sobre o meio ambiente e aos
inimigos naturais presentes na aacuterea Uma dessas medidas eacute o Manejo Fitossanitaacuterio
de Pragas (MFP) que engloba princiacutepios e meacutetodos isolados ou em conjunto que
visam garantir maior produtividade e menor agressividade ao meio ambiente visando
manejar o inseto-praga reduzindo seu niacutevel de dano (ALVEZ et al 2007)
Entre as medidas adotadas no MFP o uso de produtos formulados a partir de
agentes bioloacutegicos como a bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner
(Eubacteriales Bacillaceae) se mostra como alternativa eficiente devido agrave
especificidade com relaccedilatildeo a pragas-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e
animais (POLANCZYK ALVES 2003)
Aleacutem desses agentes bioloacutegicos a utilizaccedilatildeo de inseticidas botacircnicos derivados de
plantas ou parte das mesmas obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo
podem exercer atividade toacutexica aos insetos interferindo no desenvolvimento haacutebito
alimentar oviposiccedilatildeo repelecircncia ou mesmo morte (WIESBROOK 2004 SOUZA
ARAUacuteJO NASCIMENTO 2007) No passado o mercado de inseticidas botacircnicos
era dominado pelas piretrinas azadiractina e as rotenonas poreacutem outros inseticidas
botacircnicos vecircm ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) e o alho
(Allium sativum L) entre outras espeacutecies botacircnicas (ISMAN 1997)
A necessidade da implementaccedilatildeo de pesquisas que visam avaliar a eficiecircncia de
meacutetodos de manejo alternativo aplicaacuteveis agrave D fovealis satildeo de grande importacircncia
Nesse sentido este estudo teve por meta avaliar a eficiecircncia do agente de controle
bioloacutegico B thuringiensis e dos extratos aquosos de Fumo e Alho sob condiccedilotildees de
laboratoacuterio visando proporcionar alternativas de manejo viaacuteveis para a implantaccedilatildeo
de programas de manejo fitossanitaacuterio de D fovealis
16
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE)
A Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) tem sua origem na regiatildeo
do Mediterracircneo e nas Ilhas Canaacuterias poreacutem pode ser encontrada em diversas
partes na Aacutefrica Oriente Meacutedio Europa Canadaacute e Estados Unidos da Ameacuterica
(HOFFMAN 2010) O primeiro relato dessa praga fora da sua aacuterea nativa foi em
estufas na Finlacircndia em 1984 e posteriormente em 1989 encontrado na Holanda
fora das estufas (CFIA 2005) Nos Estados Unidos foi detectada pela primeira vez
em 2004 em plantios de begocircnia na Califoacuternia e em 2005 no Canadaacute (GILL 2013)
No Brasil foi constatada em 2008 no estado do Paranaacute e posteriormente no estado
do Espiacuterito Santo Poreacutem apenas em 2010 a espeacutecie foi identificada por uma
especialista do USDA (United States Department of Agriculture) (ZAWADNEAK et
al 2011) Os mesmos autores citam que os primeiros relatos reportam que a praga
foi encontrada no estado do Paranaacute em lavouras comerciais de morango em
condiccedilotildees de cultivo protegido tipo tuacutenel alto nos cultivares Albion e Camino real
Posteriormente a mesma foi encontrada na cultivar Portola no estado do Espiacuterito
Santo Os produtores capixabas tambeacutem constataram a presenccedila de D fovealis nos
cultivares Aromas Albion e Camino Real produzidos em tuacutenel baixo
A lagarta D fovealis eacute uma praga poliacutefaga que gera grandes problemas em diversas
variedades de cultivos de plantas ornamentais e culturas agriacutecolas especialmente
em cultivos em estufa Essa espeacutecie foi relatada em mais de 70 espeacutecies
hospedeiras em cerca de 38 famiacutelias de plantas como ornamentais dos gecircneros
Amaranthus Anthurium Begonia e culturas comercialmente cultivadas como
Capsicum annuum L e Solanum lycopersicum L Fragaria x ananassa entre outras
(GILL 2013)
Com relaccedilatildeo ao ciclo de vida de D fovealis pode-se salientar que eacute um inseto com
desenvolvimento holometaboacutelico Os adultos medem cerca de 19 a 21 mm de
comprimento satildeo de coloraccedilatildeo castanho acinzentado com aneacuteis mais claros no
abdocircmen e possuem uma linha irregular branco-amarelada atraveacutes das asas Os
17
adultos ficam sob as folhas possuem haacutebito noturno e durante o dia podem realizar
voos curtos (MURPHY 2008 RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010) Em
repouso o adulto manteacutem as asas planas em forma triangular e o abdocircmen se
posiciona voltado para cima (HOFFMAN 2010) Os machos possuem o abdocircmen
mais longo e delgado que o da fecircmea (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010)
Os adultos podem viver durante uma a duas semanas sendo que a fecircmea adulta
potildee ateacute 200 ovos durante esse periacuteodo Os ovos possuem formato oval e
inicialmente apresentam coloraccedilatildeo verde-esbranquiccedilada ficando vermelho com o
desenvolvimento do embriatildeo ateacute apresentarem pontuaccedilotildees marrons que ocorrem
antes da eclosatildeo das lagartas (FRANCO BAPTISTA 2010) Satildeo ovipositados
isoladamente ou em massas de trecircs a dez ovos sobrepostos seja na parte inferior
das folhas perto das veias na base do talo na base da planta ou na camada
superior do solo (RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010 HOFFMAN 2010)
O periacuteodo de incubaccedilatildeo dos ovos varia em torno de seis dias dependendo da
temperatura local
As lagartas medem entre 20 a 30 mm de comprimento possuem coloraccedilatildeo branca
amarelada com pontos marrons longitudinalmente distribuiacutedos pelo corpo com pelo
menos um pelo em cada ponto e com cabeccedila de coloraccedilatildeo marrom-escura
(RICHTER 2009 GILL 2013) Alimentam-se de folhas flores brotos frutos e restos
de folhasplanta em decomposiccedilatildeo e em culturas plantadas com maior densidade
podem ser encontradas se alimentando de qualquer parte da planta (BRAMBILA
STOCKS 2010) As lagartas se desenvolvem rapidamente satildeo muito aacutegeis e
preferem locais uacutemidos na base da planta proacuteximo ao solo na camada superior do
solo ou em raiacutezes expostas das plantas (HOFFMAN 2010) As lagartas satildeo
adaptadas a condiccedilotildees de alta umidade e podem tolerar ateacute mesmo condiccedilotildees de
alagamento podendo ser encontradas em plantas aquaacuteticas e em lugares salinos
(BRAMBILA STOCKS 2010)
As lagartas tendem a ficar em locais protegidos como no colo da planta tuacuteneis nos
caules e em estaacutedios mais avanccedilados podem se alimentar da haste principal
inclusive abaixo da linha do solo (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010) Alimentam-se dos tecidos da coroa da planta provocando a
interrupccedilatildeo da circulaccedilatildeo de seiva o que ocasiona o aparecimento de necrose nas
18
bordas das folhas e posteriormente a morte da planta (FRANCO BAPTISTA
2010) Durante a alimentaccedilatildeo tecem teias entre as folhas baixeiras (aquelas que
ficam em contato com o canteiro) nas quais ficam protegidas e posteriormente
empupam (MURPHY 2008) Devido seu ataque a D fovealis pode danificar caules
folhas e frutos reduzindo a produccedilatildeo e inviabilizando o produto para o mercado in
natura aleacutem disso a injuacuteria causada pelo ataque pode servir como meio de entrada
para diferentes patoacutegenos (GILL 2013)
As pupas satildeo marrom-claro com aproximadamente 9 a 10 mm de comprimento O
casulo que as envolve eacute oval feito de seda fezes e partiacuteculas do solo e eacute construiacutedo
no solo (BETHKE VANDER MEY 2010) Natildeo haacute relatos de toleracircncia ao frio ou
qualquer tipo de diapausa durante qualquer parte do ciclo de vida Portanto poderia
completar vaacuterias geraccedilotildees anualmente sob condiccedilotildees ideais (HOFFMAN 2010)
Desta forma considerando o ciclo de desenvolvimento e consequentemente o
nuacutemero de geraccedilotildees anuais a presenccedila de plantios escalonados dentro de uma
mesma aacuterea pode resultar no aumento da populaccedilatildeo de D fovealis como tambeacutem
interferir em praacuteticas de controle existentes como Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas
(MFP) e de biocontrole que podem ser interrompidos pela necessidade de aplicaccedilatildeo
de inseticidas para controlar o inseto (CFIA 2005)
A disseminaccedilatildeo dessa praga pode ocorrer atraveacutes do comeacutercio de material vegetal
propagativo e natildeo propagativo logo medidas quarentenaacuterias satildeo necessaacuterias para
evitar a introduccedilatildeo dessa praga em aacutereas livres de ocorrecircncia (BRAMBILA
STOCKS 2010)
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis
O manejo dessa praga inclui controle cultural quiacutemico comportamental e bioloacutegico
devendo ser coordenado de acordo com o monitoramento da populaccedilatildeo
19
221 Controle cultural
Embora D fovealis esteja geralmente escondida inspeccedilotildees visuais regulares podem
auxiliar na detecccedilatildeo de sua presenccedila da fase jovem que pode ser constatada pela
existecircncia de danos nas folhas flores bototildees florais e hastes bem como dejetos e
buracos na superfiacutecie do solo (BRAMBILA STOCKS 2010) Fornazier et al (2011)
recomendam a retirada e a destruiccedilatildeo de folhas velhas se possiacutevel semanalmente
visando a reduccedilatildeo do nuacutemero de ovos e pupas evitando o raacutepido crescimento e
dispersatildeo populacional da praga
222 Controle Quiacutemico
No Brasil ainda natildeo haacute nenhum produto registrado no Ministeacuterio da Agricultura
Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) Poreacutem em outros paiacuteses os produtos relatados
para o controle de lagartas D fovealis satildeo Spinosade Bifentrina Fluvalinato
Deltametrina Esfenvalerato Orthene Lambdacialotrina Imidaclopride Metomil
Ethoprop Acefato Emamectina Permetrina Clorantraniliprol e Azadirachtin
(PIJNAKKER 2001 CFIA 2005 BETHKE VANDER MEY 2010) Aleacutem disso
Bethke e Vander Mey (2010) ainda recomendam que em ambiente de estufa para
controle dos adultos as aplicaccedilotildees tipo aerossol ou neacutevoa sejam realizadas no
periacuteodo noturno isso devido a maior atividade dos adultos
223 Controle Comportamental
Armadilhas luminosas com luz ultravioleta (UV) podem ser usadas para monitorar a
atividade da mariposa adulta em aacutereas em que a D fovealis estaacute estabelecida
Hoffman (2010) relata o sucesso da utilizaccedilatildeo dessas armadilhas em plantios nos
Estados Unidos Haacute relatos no Reino Unido de coletas de insetos adultos cerca de
20
10 km das estufas infestadas jaacute na Holanda foram encontrados insetos em
armadilhas luminosas a 100 km de sua ocorrecircncia (CFIA 2005)
Outra alternativa eacute a utilizaccedilatildeo de armadilhas tipo Delta com feromocircnio sexual ou
armadilhas que associem aacutegua e feromocircnio sendo estas especiacuteficas para adultos
machos de D fovealis (MURPHY 2008 DEVENTER 2009)
224 Controle Bioloacutegico
a Entomoacutefagos
Parasitoides de ovos do gecircnero Trichogramma (Hymenoptera Trichogrammatidae)
destacam-se pela ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica e pela vasta quantidade de
hospedeiros principalmente da ordem Lepidoptera (PRATISSOLI et al 2002) Na
Alemanha Zimmermann (2004) e Jaumlckel e Kurzhals (1995) relataram a ocorrecircncia
das espeacutecies Trichogramma evanescens Westwood Trichogramma cacoeciae
Marchal e Trichogramma brassicae Bezdenko parasitando ovos de D fovealis
Os agentes de controle bioloacutegico presentes no solo tambeacutem podem ser utilizados
entre eles estatildeo o besouro Atheta coriaria (Kraatz) (Coleoptera Staphylinidae) um
predador de ovos e lagartas neonatas o percevejo Podisius sp (Hemiptera
Pentatomidae) um predador de lagartas (MURPHY 2008) e aacutecaros predadores de
ovos Hypoaspis miles (Berlese) e Hypoaspis aculeifer (Canestrini) (Acari
Laelapidae) (CFIA 2013) Outro agente utilizado com sucesso em programas de
controle bioloacutegico de lagartas da famiacutelia Crambidae eacute a vespa endoparasitoide
Cotesia flavipes (Cameron) (Hymenoptera Braconidae) (SALLAM et al 2001) que
jaacute foi relatada por Zawadneak et al (2011) em lavouras de morango no estado do
Paranaacute na qual apresentou potencial para o controle de D fovealis
21
b Entomopatoacutegenos
b1 Nematoides
Os nematoides mais utilizados no controle de insetos pertencem agrave famiacutelia
Steinernematidae Estes tecircm sido aplicados em diversas culturas e mesmo em
outras situaccedilotildees para controle de um grande nuacutemero de insetos (ALVEZ 1998)
Nematoides entomopatogecircnicos jaacute vecircm sendo utilizados em outros paiacuteses no
manejo de D fovealis Stocks e Hodges (2013) citam a utilizaccedilatildeo da espeacutecie
Heterorhabditis bacteriophora (Poinar) (Nematoda Heterorhabditidae) jaacute Jaumlckel e
Kurzhals (1995) relatam que as espeacutecies Steinernema carpocapsae (Weiser) e S
feltiae (Filipjev) (Nematoda Steinernematidae) foram eficientes no controle de D
fovealis em diferentes estaacutedios larvais sendo que no estaacutedio 3 de desenvolvimento
essas espeacutecies proporcionaram 60 e 20 de mortalidade respectivamente
b2 Fungos entomopatogecircnicos
Os fungos entomopatogecircnicos Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok
(Hypocreales Clavicipitaceae) e Beauveria bassiana (Bals) Vuill (Hypocreales
Cordycipitaceae) satildeo muito utilizados devido agrave facilidade de produccedilatildeo ampla
distribuiccedilatildeo geograacutefica variedade de hospedeiros e ocorrecircncia em condiccedilotildees
naturais enzooacuteticas ou epizooacuteticas sendo ainda comumente encontrados no solo
mostrando-se como uma alternativa eficiente devido agrave especificidade com relaccedilatildeo agrave
praga-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e animais (ALVES 1998)
b3 Bacteacuteria entomopatogecircnica
A bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner eacute uma bacteacuteria
naturalmente encontrada no solo aeroacutebia ou facultativamente anaeroacutebia gram
22
positiva pertencente agrave famiacutelia Bacillaceae (BOBROWSKI et al 2003) formadora de
esporos pertencentes ao grupo Bacillus cereus (READ et al 2003) que eacute formado
por um complexo de vaacuterias espeacutecies (Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus
mycoides B thuringiensis e Bacillus weihenstephanensis) (POLANCZYK ALVES
2003)
Bacillus thuringiensis foi originalmente descoberto em 1902 por um bioacutelogo japonecircs
Shigetane Ishiwatari poreacutem foi caracterizado em 1911 por Ernst Berliner da
Alemanha quando este pesquisador isolou o bacilo de Anagasta kuehniella Zeller
(Lepidoptera Pyralidae) (POLANCZYK ALVES 2003 LIMA 2010) Desde entatildeo
essa espeacutecie eacute a mais utilizada mundialmente como biopesticida (CAPALBO et al
2008) A espeacutecie B thuringiensis se desenvolve rapidamente em condiccedilotildees
favoraacuteveis como temperatura e disponibilidade de nutrientes (HILBERT PIGGOT
2004) Em circunstacircncias de ausecircncia de nutrientes ou acuacutemulo de metaboacutelitos
indesejaacuteveis essa bacteacuteria entra em processo de esporulaccedilatildeo durante a fase
estacionaacuteria (POLANCZYK ALVES 2003)
Durante a fase de esporulaccedilatildeo essas bacteacuterias produzem proteiacutenas inseticidas
como cristais parasporais sendo estes compostos por uma ou mais proteiacutenas Cry
tambeacutem conhecidas como part-endotoxinas (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) Essas
toxinas denominadas Cry hidrolisadas atravessam a membrana peritroacutefica e
ligam-se a receptores especiacuteficos presentes nas microvilosidades apicais da
membrana das ceacutelulas colunares presentes no intestino meacutedio causando a
formaccedilatildeo de poros que aumentam a permeabilidade da membrana interferindo no
gradiente iocircnico e no balanccedilo osmoacutetico Dessa maneira ocorre aumento da absorccedilatildeo
de aacutegua o que leva agrave lise e eventual ruptura e desintegraccedilatildeo das ceacutelulas do
intestino meacutedio fazendo o inseto cessar a alimentaccedilatildeo e morrer logo apoacutes por
inaniccedilatildeo ou ainda apoacutes a lise das ceacutelulas do intestino meacutedio o ambiente torna-se
favoraacutevel agrave germinaccedilatildeo dos esporos (POLANCZYK VALICENTE BARETO 2008) e
nesse novo ambiente devido a mistura do conteuacutedo da hemolinfa e do intestino
meacutedio o pH torna-se aacutecido e os esporos se multiplicam de tal forma que o inseto
morre por septicemia (COPPING MENN 2000)
Proteiacutenas Cry satildeo altamente especiacuteficas para o inseto-alvo satildeo inoacutecuos para os
seres humanos animais vertebrados e plantas e satildeo completamente
biodegradaacuteveis (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) sendo considerada portanto um
23
agente seguro para o controle bioloacutegico de insetos na agricultura (LIMA 2010
POLANCZYK ALVES 2003) As diferentes cepas de bacteacuteria produzem vaacuterias
combinaccedilotildees de proteiacutenas Cry que satildeo proteiacutenas consideradas seletivas e
geralmente afetam insetos-alvo de ordens especiacuteficas (CLARK PHILLIPS COATS
2005)
O primeiro biopesticida agrave base de B thuringiensis foi lanccedilado na Franccedila em 1938 e
desde entatildeo mais de 100 formulaccedilotildees foram colocados no mercado mundial devido
agrave eficaacutecia e especificidade (POLANCZYK ALVES 2003) Devido agraves vantagens do
uso do B thuringiensis como agente de controle bioloacutegico sobre insetos-praga das
ordens Coleoptera Diptera Hymenoptera e Lepidoptera aleacutem de espeacutecies de
nematoides aumentando nos uacuteltimos anos o nuacutemero de estirpes isoladas a busca
por cepas mais toacutexicas eacute crescente no mundo inteiro (GEORGE CRICKMORE
2012)
Ateacute o iniacutecio de 1990 apenas trecircs produtos comerciais estavam disponiacuteveis no
mercado brasileiro sendo todos baseados em B thuringiensis Kurstaki com
destaque para o produto Dipelreg que eacute altamente eficiente para mais de 170
lepidoacutepteros-praga (LIMA 2010) Aleacutem deste outros produtos como Ablereg Agreereg
Bac-Control WPreg Bacturreg Dipel WPreg Dipel WGreg Thuricidereg e Xentarireg podem ser
encontrados em formulaccedilotildees de base soacutelida (poacute ou granulada) ou liacutequida (AGROFIT
2003)
Em paiacuteses como a Holanda o Canadaacute e os Paiacuteses Baixos produtos quiacutemicos e
formulados comerciais agrave base de B thuringiensis foram testados sobre lagartas de
D fovealis sob condiccedilotildees de estufa e verificou-se que ambos tiveram accedilatildeo sobre as
lagartas de D fovealis poreacutem observou-se que os formulados agrave base de Bt
mostraram maior eficiecircncia que os produtos quiacutemicos (CFIA 2013) Jaumlckel e
Kurzhals (1995) e Bethke et al (2012) observaram tambeacutem que a eficiecircncia de
produtos comercias agrave base de Bt no controle de lagartas de D fovealis eacute maior nos
estaacutegios de desenvolvimento iniciais
Outra forma de utilizaccedilatildeo de B thuringiensis tem sido por meio da inserccedilatildeo de genes
de toxinas Cry em cultivos transgecircnicos dando origem a plantas Bt o que
proporciona eficaacutecia na forma de controlar insetos-praga e na reduccedilatildeo das
aplicaccedilotildees de produtos quiacutemicos Em plantas transgecircnicas a proteiacutena Cry eacute
produzida continuamente no interior das ceacutelulas protegida da inativaccedilatildeo da luz
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae) 48
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho 49
513 Suscetibilidade de D fovealis agrave extrato aquoso de fumo e alho 50
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL) 51
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO 51
53 CONCLUSAtildeO 55
54 REFEREcircNCIAS 56
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 59
14
CAPIacuteTULO 1
1 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro (Fragaria x ananassa Duch) eacute produzida nas mais
variadas regiotildees do mundo Pertencente agrave famiacutelia Rosaceae a espeacutecie foi originada
do cruzamento entre espeacutecies silvestres (F chiloensis L e F virginiana Duchesne)
(CASTRO 2004) No Brasil a cultura encontra-se difundida em regiotildees de clima
temperado e subtropical sendo a produccedilatildeo destinada agrave induacutestria e ao consumo in
natura Trata-se de uma cultura altamente exigente em praacuteticas culturais em toda
sua cadeia produtiva desde a implantaccedilatildeo ateacute a poacutes-colheita contudo se destaca
pela alta rentabilidade e intensa demanda por matildeo-de-obra (OLIVEIRA
SCIVITTARO 2009)
No estado do Espiacuterito Santo essa cultura foi implantada comercialmente no meado
do seacuteculo XX e expandiu-se significativamente a partir da metade da deacutecada de 90
sendo entatildeo considerada uma cultura de destaque no estado (BALNINO MARIN
2006) Em meacutedia satildeo produzidas 5960 toneladas de morango ao ano ocupando
uma extensatildeo de 185 hectares envolvendo praticamente 1500 propriedades de
base familiar assumindo um relevante fator de distribuiccedilatildeo de renda no meio rural
Mediante a importacircncia da cultura do morangueiro e a necessidade de organizaccedilatildeo
do processo produtivo e comercial criou-se um polo o qual tem como ecircnfase o uso
de sistemas de produccedilatildeo sustentaacuteveis por meio da utilizaccedilatildeo de tecnologias
apropriadas Desse polo participam principalmente os municiacutepios da regiatildeo das
montanhas capixabas com destaque para Santa Maria de Jetibaacute Domingos Martins
e Venda Nova do Imigrante (INCAPER 2010)
Contudo a cultura do morangueiro apresenta inuacutemeros problemas fitossanitaacuterios
Segundo Fornazier e Pratissoli (2006) um dos principais problemas na referida
cultura satildeo os aacutecaros No entanto em 2010 foi registrada a ocorrecircncia de
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) no municiacutepio de Santa Maria
de Jetibaacute destacando-se pela capacidade de dano raacutepido crescimento populacional
e alta capacidade de dispersatildeo (FORNAZIER et al 2011)
15
Por se tratar de uma praga que natildeo haacute registro de produtos para seu controle no
Ministeacuterio da Agricultura Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) produtores tecircm
recorrido ao uso de produtos quiacutemicos registrados para outras culturas o que vai
contra a legislaccedilatildeo aleacutem acarretar seacuterios prejuiacutezos ao agroecossistema (ALHO
2011) tais como altos niacuteveis de resiacuteduos toacutexicos nos produtos intoxicaccedilotildees ao
homem e mamiacuteferos resistecircncia de pragas a inseticidas contaminaccedilatildeo ambiental
aleacutem de elevar o custo de produccedilatildeo
Sendo assim uma alternativa para diminuir os impactos causados pelo meacutetodo
convencional eacute a adoccedilatildeo de medidas fitossanitaacuterias que reduzam a populaccedilatildeo de
insetos-praga e natildeo ocasionem impactos negativos sobre o meio ambiente e aos
inimigos naturais presentes na aacuterea Uma dessas medidas eacute o Manejo Fitossanitaacuterio
de Pragas (MFP) que engloba princiacutepios e meacutetodos isolados ou em conjunto que
visam garantir maior produtividade e menor agressividade ao meio ambiente visando
manejar o inseto-praga reduzindo seu niacutevel de dano (ALVEZ et al 2007)
Entre as medidas adotadas no MFP o uso de produtos formulados a partir de
agentes bioloacutegicos como a bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner
(Eubacteriales Bacillaceae) se mostra como alternativa eficiente devido agrave
especificidade com relaccedilatildeo a pragas-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e
animais (POLANCZYK ALVES 2003)
Aleacutem desses agentes bioloacutegicos a utilizaccedilatildeo de inseticidas botacircnicos derivados de
plantas ou parte das mesmas obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo
podem exercer atividade toacutexica aos insetos interferindo no desenvolvimento haacutebito
alimentar oviposiccedilatildeo repelecircncia ou mesmo morte (WIESBROOK 2004 SOUZA
ARAUacuteJO NASCIMENTO 2007) No passado o mercado de inseticidas botacircnicos
era dominado pelas piretrinas azadiractina e as rotenonas poreacutem outros inseticidas
botacircnicos vecircm ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) e o alho
(Allium sativum L) entre outras espeacutecies botacircnicas (ISMAN 1997)
A necessidade da implementaccedilatildeo de pesquisas que visam avaliar a eficiecircncia de
meacutetodos de manejo alternativo aplicaacuteveis agrave D fovealis satildeo de grande importacircncia
Nesse sentido este estudo teve por meta avaliar a eficiecircncia do agente de controle
bioloacutegico B thuringiensis e dos extratos aquosos de Fumo e Alho sob condiccedilotildees de
laboratoacuterio visando proporcionar alternativas de manejo viaacuteveis para a implantaccedilatildeo
de programas de manejo fitossanitaacuterio de D fovealis
16
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE)
A Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) tem sua origem na regiatildeo
do Mediterracircneo e nas Ilhas Canaacuterias poreacutem pode ser encontrada em diversas
partes na Aacutefrica Oriente Meacutedio Europa Canadaacute e Estados Unidos da Ameacuterica
(HOFFMAN 2010) O primeiro relato dessa praga fora da sua aacuterea nativa foi em
estufas na Finlacircndia em 1984 e posteriormente em 1989 encontrado na Holanda
fora das estufas (CFIA 2005) Nos Estados Unidos foi detectada pela primeira vez
em 2004 em plantios de begocircnia na Califoacuternia e em 2005 no Canadaacute (GILL 2013)
No Brasil foi constatada em 2008 no estado do Paranaacute e posteriormente no estado
do Espiacuterito Santo Poreacutem apenas em 2010 a espeacutecie foi identificada por uma
especialista do USDA (United States Department of Agriculture) (ZAWADNEAK et
al 2011) Os mesmos autores citam que os primeiros relatos reportam que a praga
foi encontrada no estado do Paranaacute em lavouras comerciais de morango em
condiccedilotildees de cultivo protegido tipo tuacutenel alto nos cultivares Albion e Camino real
Posteriormente a mesma foi encontrada na cultivar Portola no estado do Espiacuterito
Santo Os produtores capixabas tambeacutem constataram a presenccedila de D fovealis nos
cultivares Aromas Albion e Camino Real produzidos em tuacutenel baixo
A lagarta D fovealis eacute uma praga poliacutefaga que gera grandes problemas em diversas
variedades de cultivos de plantas ornamentais e culturas agriacutecolas especialmente
em cultivos em estufa Essa espeacutecie foi relatada em mais de 70 espeacutecies
hospedeiras em cerca de 38 famiacutelias de plantas como ornamentais dos gecircneros
Amaranthus Anthurium Begonia e culturas comercialmente cultivadas como
Capsicum annuum L e Solanum lycopersicum L Fragaria x ananassa entre outras
(GILL 2013)
Com relaccedilatildeo ao ciclo de vida de D fovealis pode-se salientar que eacute um inseto com
desenvolvimento holometaboacutelico Os adultos medem cerca de 19 a 21 mm de
comprimento satildeo de coloraccedilatildeo castanho acinzentado com aneacuteis mais claros no
abdocircmen e possuem uma linha irregular branco-amarelada atraveacutes das asas Os
17
adultos ficam sob as folhas possuem haacutebito noturno e durante o dia podem realizar
voos curtos (MURPHY 2008 RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010) Em
repouso o adulto manteacutem as asas planas em forma triangular e o abdocircmen se
posiciona voltado para cima (HOFFMAN 2010) Os machos possuem o abdocircmen
mais longo e delgado que o da fecircmea (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010)
Os adultos podem viver durante uma a duas semanas sendo que a fecircmea adulta
potildee ateacute 200 ovos durante esse periacuteodo Os ovos possuem formato oval e
inicialmente apresentam coloraccedilatildeo verde-esbranquiccedilada ficando vermelho com o
desenvolvimento do embriatildeo ateacute apresentarem pontuaccedilotildees marrons que ocorrem
antes da eclosatildeo das lagartas (FRANCO BAPTISTA 2010) Satildeo ovipositados
isoladamente ou em massas de trecircs a dez ovos sobrepostos seja na parte inferior
das folhas perto das veias na base do talo na base da planta ou na camada
superior do solo (RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010 HOFFMAN 2010)
O periacuteodo de incubaccedilatildeo dos ovos varia em torno de seis dias dependendo da
temperatura local
As lagartas medem entre 20 a 30 mm de comprimento possuem coloraccedilatildeo branca
amarelada com pontos marrons longitudinalmente distribuiacutedos pelo corpo com pelo
menos um pelo em cada ponto e com cabeccedila de coloraccedilatildeo marrom-escura
(RICHTER 2009 GILL 2013) Alimentam-se de folhas flores brotos frutos e restos
de folhasplanta em decomposiccedilatildeo e em culturas plantadas com maior densidade
podem ser encontradas se alimentando de qualquer parte da planta (BRAMBILA
STOCKS 2010) As lagartas se desenvolvem rapidamente satildeo muito aacutegeis e
preferem locais uacutemidos na base da planta proacuteximo ao solo na camada superior do
solo ou em raiacutezes expostas das plantas (HOFFMAN 2010) As lagartas satildeo
adaptadas a condiccedilotildees de alta umidade e podem tolerar ateacute mesmo condiccedilotildees de
alagamento podendo ser encontradas em plantas aquaacuteticas e em lugares salinos
(BRAMBILA STOCKS 2010)
As lagartas tendem a ficar em locais protegidos como no colo da planta tuacuteneis nos
caules e em estaacutedios mais avanccedilados podem se alimentar da haste principal
inclusive abaixo da linha do solo (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010) Alimentam-se dos tecidos da coroa da planta provocando a
interrupccedilatildeo da circulaccedilatildeo de seiva o que ocasiona o aparecimento de necrose nas
18
bordas das folhas e posteriormente a morte da planta (FRANCO BAPTISTA
2010) Durante a alimentaccedilatildeo tecem teias entre as folhas baixeiras (aquelas que
ficam em contato com o canteiro) nas quais ficam protegidas e posteriormente
empupam (MURPHY 2008) Devido seu ataque a D fovealis pode danificar caules
folhas e frutos reduzindo a produccedilatildeo e inviabilizando o produto para o mercado in
natura aleacutem disso a injuacuteria causada pelo ataque pode servir como meio de entrada
para diferentes patoacutegenos (GILL 2013)
As pupas satildeo marrom-claro com aproximadamente 9 a 10 mm de comprimento O
casulo que as envolve eacute oval feito de seda fezes e partiacuteculas do solo e eacute construiacutedo
no solo (BETHKE VANDER MEY 2010) Natildeo haacute relatos de toleracircncia ao frio ou
qualquer tipo de diapausa durante qualquer parte do ciclo de vida Portanto poderia
completar vaacuterias geraccedilotildees anualmente sob condiccedilotildees ideais (HOFFMAN 2010)
Desta forma considerando o ciclo de desenvolvimento e consequentemente o
nuacutemero de geraccedilotildees anuais a presenccedila de plantios escalonados dentro de uma
mesma aacuterea pode resultar no aumento da populaccedilatildeo de D fovealis como tambeacutem
interferir em praacuteticas de controle existentes como Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas
(MFP) e de biocontrole que podem ser interrompidos pela necessidade de aplicaccedilatildeo
de inseticidas para controlar o inseto (CFIA 2005)
A disseminaccedilatildeo dessa praga pode ocorrer atraveacutes do comeacutercio de material vegetal
propagativo e natildeo propagativo logo medidas quarentenaacuterias satildeo necessaacuterias para
evitar a introduccedilatildeo dessa praga em aacutereas livres de ocorrecircncia (BRAMBILA
STOCKS 2010)
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis
O manejo dessa praga inclui controle cultural quiacutemico comportamental e bioloacutegico
devendo ser coordenado de acordo com o monitoramento da populaccedilatildeo
19
221 Controle cultural
Embora D fovealis esteja geralmente escondida inspeccedilotildees visuais regulares podem
auxiliar na detecccedilatildeo de sua presenccedila da fase jovem que pode ser constatada pela
existecircncia de danos nas folhas flores bototildees florais e hastes bem como dejetos e
buracos na superfiacutecie do solo (BRAMBILA STOCKS 2010) Fornazier et al (2011)
recomendam a retirada e a destruiccedilatildeo de folhas velhas se possiacutevel semanalmente
visando a reduccedilatildeo do nuacutemero de ovos e pupas evitando o raacutepido crescimento e
dispersatildeo populacional da praga
222 Controle Quiacutemico
No Brasil ainda natildeo haacute nenhum produto registrado no Ministeacuterio da Agricultura
Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) Poreacutem em outros paiacuteses os produtos relatados
para o controle de lagartas D fovealis satildeo Spinosade Bifentrina Fluvalinato
Deltametrina Esfenvalerato Orthene Lambdacialotrina Imidaclopride Metomil
Ethoprop Acefato Emamectina Permetrina Clorantraniliprol e Azadirachtin
(PIJNAKKER 2001 CFIA 2005 BETHKE VANDER MEY 2010) Aleacutem disso
Bethke e Vander Mey (2010) ainda recomendam que em ambiente de estufa para
controle dos adultos as aplicaccedilotildees tipo aerossol ou neacutevoa sejam realizadas no
periacuteodo noturno isso devido a maior atividade dos adultos
223 Controle Comportamental
Armadilhas luminosas com luz ultravioleta (UV) podem ser usadas para monitorar a
atividade da mariposa adulta em aacutereas em que a D fovealis estaacute estabelecida
Hoffman (2010) relata o sucesso da utilizaccedilatildeo dessas armadilhas em plantios nos
Estados Unidos Haacute relatos no Reino Unido de coletas de insetos adultos cerca de
20
10 km das estufas infestadas jaacute na Holanda foram encontrados insetos em
armadilhas luminosas a 100 km de sua ocorrecircncia (CFIA 2005)
Outra alternativa eacute a utilizaccedilatildeo de armadilhas tipo Delta com feromocircnio sexual ou
armadilhas que associem aacutegua e feromocircnio sendo estas especiacuteficas para adultos
machos de D fovealis (MURPHY 2008 DEVENTER 2009)
224 Controle Bioloacutegico
a Entomoacutefagos
Parasitoides de ovos do gecircnero Trichogramma (Hymenoptera Trichogrammatidae)
destacam-se pela ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica e pela vasta quantidade de
hospedeiros principalmente da ordem Lepidoptera (PRATISSOLI et al 2002) Na
Alemanha Zimmermann (2004) e Jaumlckel e Kurzhals (1995) relataram a ocorrecircncia
das espeacutecies Trichogramma evanescens Westwood Trichogramma cacoeciae
Marchal e Trichogramma brassicae Bezdenko parasitando ovos de D fovealis
Os agentes de controle bioloacutegico presentes no solo tambeacutem podem ser utilizados
entre eles estatildeo o besouro Atheta coriaria (Kraatz) (Coleoptera Staphylinidae) um
predador de ovos e lagartas neonatas o percevejo Podisius sp (Hemiptera
Pentatomidae) um predador de lagartas (MURPHY 2008) e aacutecaros predadores de
ovos Hypoaspis miles (Berlese) e Hypoaspis aculeifer (Canestrini) (Acari
Laelapidae) (CFIA 2013) Outro agente utilizado com sucesso em programas de
controle bioloacutegico de lagartas da famiacutelia Crambidae eacute a vespa endoparasitoide
Cotesia flavipes (Cameron) (Hymenoptera Braconidae) (SALLAM et al 2001) que
jaacute foi relatada por Zawadneak et al (2011) em lavouras de morango no estado do
Paranaacute na qual apresentou potencial para o controle de D fovealis
21
b Entomopatoacutegenos
b1 Nematoides
Os nematoides mais utilizados no controle de insetos pertencem agrave famiacutelia
Steinernematidae Estes tecircm sido aplicados em diversas culturas e mesmo em
outras situaccedilotildees para controle de um grande nuacutemero de insetos (ALVEZ 1998)
Nematoides entomopatogecircnicos jaacute vecircm sendo utilizados em outros paiacuteses no
manejo de D fovealis Stocks e Hodges (2013) citam a utilizaccedilatildeo da espeacutecie
Heterorhabditis bacteriophora (Poinar) (Nematoda Heterorhabditidae) jaacute Jaumlckel e
Kurzhals (1995) relatam que as espeacutecies Steinernema carpocapsae (Weiser) e S
feltiae (Filipjev) (Nematoda Steinernematidae) foram eficientes no controle de D
fovealis em diferentes estaacutedios larvais sendo que no estaacutedio 3 de desenvolvimento
essas espeacutecies proporcionaram 60 e 20 de mortalidade respectivamente
b2 Fungos entomopatogecircnicos
Os fungos entomopatogecircnicos Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok
(Hypocreales Clavicipitaceae) e Beauveria bassiana (Bals) Vuill (Hypocreales
Cordycipitaceae) satildeo muito utilizados devido agrave facilidade de produccedilatildeo ampla
distribuiccedilatildeo geograacutefica variedade de hospedeiros e ocorrecircncia em condiccedilotildees
naturais enzooacuteticas ou epizooacuteticas sendo ainda comumente encontrados no solo
mostrando-se como uma alternativa eficiente devido agrave especificidade com relaccedilatildeo agrave
praga-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e animais (ALVES 1998)
b3 Bacteacuteria entomopatogecircnica
A bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner eacute uma bacteacuteria
naturalmente encontrada no solo aeroacutebia ou facultativamente anaeroacutebia gram
22
positiva pertencente agrave famiacutelia Bacillaceae (BOBROWSKI et al 2003) formadora de
esporos pertencentes ao grupo Bacillus cereus (READ et al 2003) que eacute formado
por um complexo de vaacuterias espeacutecies (Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus
mycoides B thuringiensis e Bacillus weihenstephanensis) (POLANCZYK ALVES
2003)
Bacillus thuringiensis foi originalmente descoberto em 1902 por um bioacutelogo japonecircs
Shigetane Ishiwatari poreacutem foi caracterizado em 1911 por Ernst Berliner da
Alemanha quando este pesquisador isolou o bacilo de Anagasta kuehniella Zeller
(Lepidoptera Pyralidae) (POLANCZYK ALVES 2003 LIMA 2010) Desde entatildeo
essa espeacutecie eacute a mais utilizada mundialmente como biopesticida (CAPALBO et al
2008) A espeacutecie B thuringiensis se desenvolve rapidamente em condiccedilotildees
favoraacuteveis como temperatura e disponibilidade de nutrientes (HILBERT PIGGOT
2004) Em circunstacircncias de ausecircncia de nutrientes ou acuacutemulo de metaboacutelitos
indesejaacuteveis essa bacteacuteria entra em processo de esporulaccedilatildeo durante a fase
estacionaacuteria (POLANCZYK ALVES 2003)
Durante a fase de esporulaccedilatildeo essas bacteacuterias produzem proteiacutenas inseticidas
como cristais parasporais sendo estes compostos por uma ou mais proteiacutenas Cry
tambeacutem conhecidas como part-endotoxinas (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) Essas
toxinas denominadas Cry hidrolisadas atravessam a membrana peritroacutefica e
ligam-se a receptores especiacuteficos presentes nas microvilosidades apicais da
membrana das ceacutelulas colunares presentes no intestino meacutedio causando a
formaccedilatildeo de poros que aumentam a permeabilidade da membrana interferindo no
gradiente iocircnico e no balanccedilo osmoacutetico Dessa maneira ocorre aumento da absorccedilatildeo
de aacutegua o que leva agrave lise e eventual ruptura e desintegraccedilatildeo das ceacutelulas do
intestino meacutedio fazendo o inseto cessar a alimentaccedilatildeo e morrer logo apoacutes por
inaniccedilatildeo ou ainda apoacutes a lise das ceacutelulas do intestino meacutedio o ambiente torna-se
favoraacutevel agrave germinaccedilatildeo dos esporos (POLANCZYK VALICENTE BARETO 2008) e
nesse novo ambiente devido a mistura do conteuacutedo da hemolinfa e do intestino
meacutedio o pH torna-se aacutecido e os esporos se multiplicam de tal forma que o inseto
morre por septicemia (COPPING MENN 2000)
Proteiacutenas Cry satildeo altamente especiacuteficas para o inseto-alvo satildeo inoacutecuos para os
seres humanos animais vertebrados e plantas e satildeo completamente
biodegradaacuteveis (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) sendo considerada portanto um
23
agente seguro para o controle bioloacutegico de insetos na agricultura (LIMA 2010
POLANCZYK ALVES 2003) As diferentes cepas de bacteacuteria produzem vaacuterias
combinaccedilotildees de proteiacutenas Cry que satildeo proteiacutenas consideradas seletivas e
geralmente afetam insetos-alvo de ordens especiacuteficas (CLARK PHILLIPS COATS
2005)
O primeiro biopesticida agrave base de B thuringiensis foi lanccedilado na Franccedila em 1938 e
desde entatildeo mais de 100 formulaccedilotildees foram colocados no mercado mundial devido
agrave eficaacutecia e especificidade (POLANCZYK ALVES 2003) Devido agraves vantagens do
uso do B thuringiensis como agente de controle bioloacutegico sobre insetos-praga das
ordens Coleoptera Diptera Hymenoptera e Lepidoptera aleacutem de espeacutecies de
nematoides aumentando nos uacuteltimos anos o nuacutemero de estirpes isoladas a busca
por cepas mais toacutexicas eacute crescente no mundo inteiro (GEORGE CRICKMORE
2012)
Ateacute o iniacutecio de 1990 apenas trecircs produtos comerciais estavam disponiacuteveis no
mercado brasileiro sendo todos baseados em B thuringiensis Kurstaki com
destaque para o produto Dipelreg que eacute altamente eficiente para mais de 170
lepidoacutepteros-praga (LIMA 2010) Aleacutem deste outros produtos como Ablereg Agreereg
Bac-Control WPreg Bacturreg Dipel WPreg Dipel WGreg Thuricidereg e Xentarireg podem ser
encontrados em formulaccedilotildees de base soacutelida (poacute ou granulada) ou liacutequida (AGROFIT
2003)
Em paiacuteses como a Holanda o Canadaacute e os Paiacuteses Baixos produtos quiacutemicos e
formulados comerciais agrave base de B thuringiensis foram testados sobre lagartas de
D fovealis sob condiccedilotildees de estufa e verificou-se que ambos tiveram accedilatildeo sobre as
lagartas de D fovealis poreacutem observou-se que os formulados agrave base de Bt
mostraram maior eficiecircncia que os produtos quiacutemicos (CFIA 2013) Jaumlckel e
Kurzhals (1995) e Bethke et al (2012) observaram tambeacutem que a eficiecircncia de
produtos comercias agrave base de Bt no controle de lagartas de D fovealis eacute maior nos
estaacutegios de desenvolvimento iniciais
Outra forma de utilizaccedilatildeo de B thuringiensis tem sido por meio da inserccedilatildeo de genes
de toxinas Cry em cultivos transgecircnicos dando origem a plantas Bt o que
proporciona eficaacutecia na forma de controlar insetos-praga e na reduccedilatildeo das
aplicaccedilotildees de produtos quiacutemicos Em plantas transgecircnicas a proteiacutena Cry eacute
produzida continuamente no interior das ceacutelulas protegida da inativaccedilatildeo da luz
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
14
CAPIacuteTULO 1
1 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro (Fragaria x ananassa Duch) eacute produzida nas mais
variadas regiotildees do mundo Pertencente agrave famiacutelia Rosaceae a espeacutecie foi originada
do cruzamento entre espeacutecies silvestres (F chiloensis L e F virginiana Duchesne)
(CASTRO 2004) No Brasil a cultura encontra-se difundida em regiotildees de clima
temperado e subtropical sendo a produccedilatildeo destinada agrave induacutestria e ao consumo in
natura Trata-se de uma cultura altamente exigente em praacuteticas culturais em toda
sua cadeia produtiva desde a implantaccedilatildeo ateacute a poacutes-colheita contudo se destaca
pela alta rentabilidade e intensa demanda por matildeo-de-obra (OLIVEIRA
SCIVITTARO 2009)
No estado do Espiacuterito Santo essa cultura foi implantada comercialmente no meado
do seacuteculo XX e expandiu-se significativamente a partir da metade da deacutecada de 90
sendo entatildeo considerada uma cultura de destaque no estado (BALNINO MARIN
2006) Em meacutedia satildeo produzidas 5960 toneladas de morango ao ano ocupando
uma extensatildeo de 185 hectares envolvendo praticamente 1500 propriedades de
base familiar assumindo um relevante fator de distribuiccedilatildeo de renda no meio rural
Mediante a importacircncia da cultura do morangueiro e a necessidade de organizaccedilatildeo
do processo produtivo e comercial criou-se um polo o qual tem como ecircnfase o uso
de sistemas de produccedilatildeo sustentaacuteveis por meio da utilizaccedilatildeo de tecnologias
apropriadas Desse polo participam principalmente os municiacutepios da regiatildeo das
montanhas capixabas com destaque para Santa Maria de Jetibaacute Domingos Martins
e Venda Nova do Imigrante (INCAPER 2010)
Contudo a cultura do morangueiro apresenta inuacutemeros problemas fitossanitaacuterios
Segundo Fornazier e Pratissoli (2006) um dos principais problemas na referida
cultura satildeo os aacutecaros No entanto em 2010 foi registrada a ocorrecircncia de
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) no municiacutepio de Santa Maria
de Jetibaacute destacando-se pela capacidade de dano raacutepido crescimento populacional
e alta capacidade de dispersatildeo (FORNAZIER et al 2011)
15
Por se tratar de uma praga que natildeo haacute registro de produtos para seu controle no
Ministeacuterio da Agricultura Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) produtores tecircm
recorrido ao uso de produtos quiacutemicos registrados para outras culturas o que vai
contra a legislaccedilatildeo aleacutem acarretar seacuterios prejuiacutezos ao agroecossistema (ALHO
2011) tais como altos niacuteveis de resiacuteduos toacutexicos nos produtos intoxicaccedilotildees ao
homem e mamiacuteferos resistecircncia de pragas a inseticidas contaminaccedilatildeo ambiental
aleacutem de elevar o custo de produccedilatildeo
Sendo assim uma alternativa para diminuir os impactos causados pelo meacutetodo
convencional eacute a adoccedilatildeo de medidas fitossanitaacuterias que reduzam a populaccedilatildeo de
insetos-praga e natildeo ocasionem impactos negativos sobre o meio ambiente e aos
inimigos naturais presentes na aacuterea Uma dessas medidas eacute o Manejo Fitossanitaacuterio
de Pragas (MFP) que engloba princiacutepios e meacutetodos isolados ou em conjunto que
visam garantir maior produtividade e menor agressividade ao meio ambiente visando
manejar o inseto-praga reduzindo seu niacutevel de dano (ALVEZ et al 2007)
Entre as medidas adotadas no MFP o uso de produtos formulados a partir de
agentes bioloacutegicos como a bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner
(Eubacteriales Bacillaceae) se mostra como alternativa eficiente devido agrave
especificidade com relaccedilatildeo a pragas-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e
animais (POLANCZYK ALVES 2003)
Aleacutem desses agentes bioloacutegicos a utilizaccedilatildeo de inseticidas botacircnicos derivados de
plantas ou parte das mesmas obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo
podem exercer atividade toacutexica aos insetos interferindo no desenvolvimento haacutebito
alimentar oviposiccedilatildeo repelecircncia ou mesmo morte (WIESBROOK 2004 SOUZA
ARAUacuteJO NASCIMENTO 2007) No passado o mercado de inseticidas botacircnicos
era dominado pelas piretrinas azadiractina e as rotenonas poreacutem outros inseticidas
botacircnicos vecircm ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) e o alho
(Allium sativum L) entre outras espeacutecies botacircnicas (ISMAN 1997)
A necessidade da implementaccedilatildeo de pesquisas que visam avaliar a eficiecircncia de
meacutetodos de manejo alternativo aplicaacuteveis agrave D fovealis satildeo de grande importacircncia
Nesse sentido este estudo teve por meta avaliar a eficiecircncia do agente de controle
bioloacutegico B thuringiensis e dos extratos aquosos de Fumo e Alho sob condiccedilotildees de
laboratoacuterio visando proporcionar alternativas de manejo viaacuteveis para a implantaccedilatildeo
de programas de manejo fitossanitaacuterio de D fovealis
16
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE)
A Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) tem sua origem na regiatildeo
do Mediterracircneo e nas Ilhas Canaacuterias poreacutem pode ser encontrada em diversas
partes na Aacutefrica Oriente Meacutedio Europa Canadaacute e Estados Unidos da Ameacuterica
(HOFFMAN 2010) O primeiro relato dessa praga fora da sua aacuterea nativa foi em
estufas na Finlacircndia em 1984 e posteriormente em 1989 encontrado na Holanda
fora das estufas (CFIA 2005) Nos Estados Unidos foi detectada pela primeira vez
em 2004 em plantios de begocircnia na Califoacuternia e em 2005 no Canadaacute (GILL 2013)
No Brasil foi constatada em 2008 no estado do Paranaacute e posteriormente no estado
do Espiacuterito Santo Poreacutem apenas em 2010 a espeacutecie foi identificada por uma
especialista do USDA (United States Department of Agriculture) (ZAWADNEAK et
al 2011) Os mesmos autores citam que os primeiros relatos reportam que a praga
foi encontrada no estado do Paranaacute em lavouras comerciais de morango em
condiccedilotildees de cultivo protegido tipo tuacutenel alto nos cultivares Albion e Camino real
Posteriormente a mesma foi encontrada na cultivar Portola no estado do Espiacuterito
Santo Os produtores capixabas tambeacutem constataram a presenccedila de D fovealis nos
cultivares Aromas Albion e Camino Real produzidos em tuacutenel baixo
A lagarta D fovealis eacute uma praga poliacutefaga que gera grandes problemas em diversas
variedades de cultivos de plantas ornamentais e culturas agriacutecolas especialmente
em cultivos em estufa Essa espeacutecie foi relatada em mais de 70 espeacutecies
hospedeiras em cerca de 38 famiacutelias de plantas como ornamentais dos gecircneros
Amaranthus Anthurium Begonia e culturas comercialmente cultivadas como
Capsicum annuum L e Solanum lycopersicum L Fragaria x ananassa entre outras
(GILL 2013)
Com relaccedilatildeo ao ciclo de vida de D fovealis pode-se salientar que eacute um inseto com
desenvolvimento holometaboacutelico Os adultos medem cerca de 19 a 21 mm de
comprimento satildeo de coloraccedilatildeo castanho acinzentado com aneacuteis mais claros no
abdocircmen e possuem uma linha irregular branco-amarelada atraveacutes das asas Os
17
adultos ficam sob as folhas possuem haacutebito noturno e durante o dia podem realizar
voos curtos (MURPHY 2008 RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010) Em
repouso o adulto manteacutem as asas planas em forma triangular e o abdocircmen se
posiciona voltado para cima (HOFFMAN 2010) Os machos possuem o abdocircmen
mais longo e delgado que o da fecircmea (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010)
Os adultos podem viver durante uma a duas semanas sendo que a fecircmea adulta
potildee ateacute 200 ovos durante esse periacuteodo Os ovos possuem formato oval e
inicialmente apresentam coloraccedilatildeo verde-esbranquiccedilada ficando vermelho com o
desenvolvimento do embriatildeo ateacute apresentarem pontuaccedilotildees marrons que ocorrem
antes da eclosatildeo das lagartas (FRANCO BAPTISTA 2010) Satildeo ovipositados
isoladamente ou em massas de trecircs a dez ovos sobrepostos seja na parte inferior
das folhas perto das veias na base do talo na base da planta ou na camada
superior do solo (RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010 HOFFMAN 2010)
O periacuteodo de incubaccedilatildeo dos ovos varia em torno de seis dias dependendo da
temperatura local
As lagartas medem entre 20 a 30 mm de comprimento possuem coloraccedilatildeo branca
amarelada com pontos marrons longitudinalmente distribuiacutedos pelo corpo com pelo
menos um pelo em cada ponto e com cabeccedila de coloraccedilatildeo marrom-escura
(RICHTER 2009 GILL 2013) Alimentam-se de folhas flores brotos frutos e restos
de folhasplanta em decomposiccedilatildeo e em culturas plantadas com maior densidade
podem ser encontradas se alimentando de qualquer parte da planta (BRAMBILA
STOCKS 2010) As lagartas se desenvolvem rapidamente satildeo muito aacutegeis e
preferem locais uacutemidos na base da planta proacuteximo ao solo na camada superior do
solo ou em raiacutezes expostas das plantas (HOFFMAN 2010) As lagartas satildeo
adaptadas a condiccedilotildees de alta umidade e podem tolerar ateacute mesmo condiccedilotildees de
alagamento podendo ser encontradas em plantas aquaacuteticas e em lugares salinos
(BRAMBILA STOCKS 2010)
As lagartas tendem a ficar em locais protegidos como no colo da planta tuacuteneis nos
caules e em estaacutedios mais avanccedilados podem se alimentar da haste principal
inclusive abaixo da linha do solo (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010) Alimentam-se dos tecidos da coroa da planta provocando a
interrupccedilatildeo da circulaccedilatildeo de seiva o que ocasiona o aparecimento de necrose nas
18
bordas das folhas e posteriormente a morte da planta (FRANCO BAPTISTA
2010) Durante a alimentaccedilatildeo tecem teias entre as folhas baixeiras (aquelas que
ficam em contato com o canteiro) nas quais ficam protegidas e posteriormente
empupam (MURPHY 2008) Devido seu ataque a D fovealis pode danificar caules
folhas e frutos reduzindo a produccedilatildeo e inviabilizando o produto para o mercado in
natura aleacutem disso a injuacuteria causada pelo ataque pode servir como meio de entrada
para diferentes patoacutegenos (GILL 2013)
As pupas satildeo marrom-claro com aproximadamente 9 a 10 mm de comprimento O
casulo que as envolve eacute oval feito de seda fezes e partiacuteculas do solo e eacute construiacutedo
no solo (BETHKE VANDER MEY 2010) Natildeo haacute relatos de toleracircncia ao frio ou
qualquer tipo de diapausa durante qualquer parte do ciclo de vida Portanto poderia
completar vaacuterias geraccedilotildees anualmente sob condiccedilotildees ideais (HOFFMAN 2010)
Desta forma considerando o ciclo de desenvolvimento e consequentemente o
nuacutemero de geraccedilotildees anuais a presenccedila de plantios escalonados dentro de uma
mesma aacuterea pode resultar no aumento da populaccedilatildeo de D fovealis como tambeacutem
interferir em praacuteticas de controle existentes como Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas
(MFP) e de biocontrole que podem ser interrompidos pela necessidade de aplicaccedilatildeo
de inseticidas para controlar o inseto (CFIA 2005)
A disseminaccedilatildeo dessa praga pode ocorrer atraveacutes do comeacutercio de material vegetal
propagativo e natildeo propagativo logo medidas quarentenaacuterias satildeo necessaacuterias para
evitar a introduccedilatildeo dessa praga em aacutereas livres de ocorrecircncia (BRAMBILA
STOCKS 2010)
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis
O manejo dessa praga inclui controle cultural quiacutemico comportamental e bioloacutegico
devendo ser coordenado de acordo com o monitoramento da populaccedilatildeo
19
221 Controle cultural
Embora D fovealis esteja geralmente escondida inspeccedilotildees visuais regulares podem
auxiliar na detecccedilatildeo de sua presenccedila da fase jovem que pode ser constatada pela
existecircncia de danos nas folhas flores bototildees florais e hastes bem como dejetos e
buracos na superfiacutecie do solo (BRAMBILA STOCKS 2010) Fornazier et al (2011)
recomendam a retirada e a destruiccedilatildeo de folhas velhas se possiacutevel semanalmente
visando a reduccedilatildeo do nuacutemero de ovos e pupas evitando o raacutepido crescimento e
dispersatildeo populacional da praga
222 Controle Quiacutemico
No Brasil ainda natildeo haacute nenhum produto registrado no Ministeacuterio da Agricultura
Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) Poreacutem em outros paiacuteses os produtos relatados
para o controle de lagartas D fovealis satildeo Spinosade Bifentrina Fluvalinato
Deltametrina Esfenvalerato Orthene Lambdacialotrina Imidaclopride Metomil
Ethoprop Acefato Emamectina Permetrina Clorantraniliprol e Azadirachtin
(PIJNAKKER 2001 CFIA 2005 BETHKE VANDER MEY 2010) Aleacutem disso
Bethke e Vander Mey (2010) ainda recomendam que em ambiente de estufa para
controle dos adultos as aplicaccedilotildees tipo aerossol ou neacutevoa sejam realizadas no
periacuteodo noturno isso devido a maior atividade dos adultos
223 Controle Comportamental
Armadilhas luminosas com luz ultravioleta (UV) podem ser usadas para monitorar a
atividade da mariposa adulta em aacutereas em que a D fovealis estaacute estabelecida
Hoffman (2010) relata o sucesso da utilizaccedilatildeo dessas armadilhas em plantios nos
Estados Unidos Haacute relatos no Reino Unido de coletas de insetos adultos cerca de
20
10 km das estufas infestadas jaacute na Holanda foram encontrados insetos em
armadilhas luminosas a 100 km de sua ocorrecircncia (CFIA 2005)
Outra alternativa eacute a utilizaccedilatildeo de armadilhas tipo Delta com feromocircnio sexual ou
armadilhas que associem aacutegua e feromocircnio sendo estas especiacuteficas para adultos
machos de D fovealis (MURPHY 2008 DEVENTER 2009)
224 Controle Bioloacutegico
a Entomoacutefagos
Parasitoides de ovos do gecircnero Trichogramma (Hymenoptera Trichogrammatidae)
destacam-se pela ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica e pela vasta quantidade de
hospedeiros principalmente da ordem Lepidoptera (PRATISSOLI et al 2002) Na
Alemanha Zimmermann (2004) e Jaumlckel e Kurzhals (1995) relataram a ocorrecircncia
das espeacutecies Trichogramma evanescens Westwood Trichogramma cacoeciae
Marchal e Trichogramma brassicae Bezdenko parasitando ovos de D fovealis
Os agentes de controle bioloacutegico presentes no solo tambeacutem podem ser utilizados
entre eles estatildeo o besouro Atheta coriaria (Kraatz) (Coleoptera Staphylinidae) um
predador de ovos e lagartas neonatas o percevejo Podisius sp (Hemiptera
Pentatomidae) um predador de lagartas (MURPHY 2008) e aacutecaros predadores de
ovos Hypoaspis miles (Berlese) e Hypoaspis aculeifer (Canestrini) (Acari
Laelapidae) (CFIA 2013) Outro agente utilizado com sucesso em programas de
controle bioloacutegico de lagartas da famiacutelia Crambidae eacute a vespa endoparasitoide
Cotesia flavipes (Cameron) (Hymenoptera Braconidae) (SALLAM et al 2001) que
jaacute foi relatada por Zawadneak et al (2011) em lavouras de morango no estado do
Paranaacute na qual apresentou potencial para o controle de D fovealis
21
b Entomopatoacutegenos
b1 Nematoides
Os nematoides mais utilizados no controle de insetos pertencem agrave famiacutelia
Steinernematidae Estes tecircm sido aplicados em diversas culturas e mesmo em
outras situaccedilotildees para controle de um grande nuacutemero de insetos (ALVEZ 1998)
Nematoides entomopatogecircnicos jaacute vecircm sendo utilizados em outros paiacuteses no
manejo de D fovealis Stocks e Hodges (2013) citam a utilizaccedilatildeo da espeacutecie
Heterorhabditis bacteriophora (Poinar) (Nematoda Heterorhabditidae) jaacute Jaumlckel e
Kurzhals (1995) relatam que as espeacutecies Steinernema carpocapsae (Weiser) e S
feltiae (Filipjev) (Nematoda Steinernematidae) foram eficientes no controle de D
fovealis em diferentes estaacutedios larvais sendo que no estaacutedio 3 de desenvolvimento
essas espeacutecies proporcionaram 60 e 20 de mortalidade respectivamente
b2 Fungos entomopatogecircnicos
Os fungos entomopatogecircnicos Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok
(Hypocreales Clavicipitaceae) e Beauveria bassiana (Bals) Vuill (Hypocreales
Cordycipitaceae) satildeo muito utilizados devido agrave facilidade de produccedilatildeo ampla
distribuiccedilatildeo geograacutefica variedade de hospedeiros e ocorrecircncia em condiccedilotildees
naturais enzooacuteticas ou epizooacuteticas sendo ainda comumente encontrados no solo
mostrando-se como uma alternativa eficiente devido agrave especificidade com relaccedilatildeo agrave
praga-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e animais (ALVES 1998)
b3 Bacteacuteria entomopatogecircnica
A bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner eacute uma bacteacuteria
naturalmente encontrada no solo aeroacutebia ou facultativamente anaeroacutebia gram
22
positiva pertencente agrave famiacutelia Bacillaceae (BOBROWSKI et al 2003) formadora de
esporos pertencentes ao grupo Bacillus cereus (READ et al 2003) que eacute formado
por um complexo de vaacuterias espeacutecies (Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus
mycoides B thuringiensis e Bacillus weihenstephanensis) (POLANCZYK ALVES
2003)
Bacillus thuringiensis foi originalmente descoberto em 1902 por um bioacutelogo japonecircs
Shigetane Ishiwatari poreacutem foi caracterizado em 1911 por Ernst Berliner da
Alemanha quando este pesquisador isolou o bacilo de Anagasta kuehniella Zeller
(Lepidoptera Pyralidae) (POLANCZYK ALVES 2003 LIMA 2010) Desde entatildeo
essa espeacutecie eacute a mais utilizada mundialmente como biopesticida (CAPALBO et al
2008) A espeacutecie B thuringiensis se desenvolve rapidamente em condiccedilotildees
favoraacuteveis como temperatura e disponibilidade de nutrientes (HILBERT PIGGOT
2004) Em circunstacircncias de ausecircncia de nutrientes ou acuacutemulo de metaboacutelitos
indesejaacuteveis essa bacteacuteria entra em processo de esporulaccedilatildeo durante a fase
estacionaacuteria (POLANCZYK ALVES 2003)
Durante a fase de esporulaccedilatildeo essas bacteacuterias produzem proteiacutenas inseticidas
como cristais parasporais sendo estes compostos por uma ou mais proteiacutenas Cry
tambeacutem conhecidas como part-endotoxinas (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) Essas
toxinas denominadas Cry hidrolisadas atravessam a membrana peritroacutefica e
ligam-se a receptores especiacuteficos presentes nas microvilosidades apicais da
membrana das ceacutelulas colunares presentes no intestino meacutedio causando a
formaccedilatildeo de poros que aumentam a permeabilidade da membrana interferindo no
gradiente iocircnico e no balanccedilo osmoacutetico Dessa maneira ocorre aumento da absorccedilatildeo
de aacutegua o que leva agrave lise e eventual ruptura e desintegraccedilatildeo das ceacutelulas do
intestino meacutedio fazendo o inseto cessar a alimentaccedilatildeo e morrer logo apoacutes por
inaniccedilatildeo ou ainda apoacutes a lise das ceacutelulas do intestino meacutedio o ambiente torna-se
favoraacutevel agrave germinaccedilatildeo dos esporos (POLANCZYK VALICENTE BARETO 2008) e
nesse novo ambiente devido a mistura do conteuacutedo da hemolinfa e do intestino
meacutedio o pH torna-se aacutecido e os esporos se multiplicam de tal forma que o inseto
morre por septicemia (COPPING MENN 2000)
Proteiacutenas Cry satildeo altamente especiacuteficas para o inseto-alvo satildeo inoacutecuos para os
seres humanos animais vertebrados e plantas e satildeo completamente
biodegradaacuteveis (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) sendo considerada portanto um
23
agente seguro para o controle bioloacutegico de insetos na agricultura (LIMA 2010
POLANCZYK ALVES 2003) As diferentes cepas de bacteacuteria produzem vaacuterias
combinaccedilotildees de proteiacutenas Cry que satildeo proteiacutenas consideradas seletivas e
geralmente afetam insetos-alvo de ordens especiacuteficas (CLARK PHILLIPS COATS
2005)
O primeiro biopesticida agrave base de B thuringiensis foi lanccedilado na Franccedila em 1938 e
desde entatildeo mais de 100 formulaccedilotildees foram colocados no mercado mundial devido
agrave eficaacutecia e especificidade (POLANCZYK ALVES 2003) Devido agraves vantagens do
uso do B thuringiensis como agente de controle bioloacutegico sobre insetos-praga das
ordens Coleoptera Diptera Hymenoptera e Lepidoptera aleacutem de espeacutecies de
nematoides aumentando nos uacuteltimos anos o nuacutemero de estirpes isoladas a busca
por cepas mais toacutexicas eacute crescente no mundo inteiro (GEORGE CRICKMORE
2012)
Ateacute o iniacutecio de 1990 apenas trecircs produtos comerciais estavam disponiacuteveis no
mercado brasileiro sendo todos baseados em B thuringiensis Kurstaki com
destaque para o produto Dipelreg que eacute altamente eficiente para mais de 170
lepidoacutepteros-praga (LIMA 2010) Aleacutem deste outros produtos como Ablereg Agreereg
Bac-Control WPreg Bacturreg Dipel WPreg Dipel WGreg Thuricidereg e Xentarireg podem ser
encontrados em formulaccedilotildees de base soacutelida (poacute ou granulada) ou liacutequida (AGROFIT
2003)
Em paiacuteses como a Holanda o Canadaacute e os Paiacuteses Baixos produtos quiacutemicos e
formulados comerciais agrave base de B thuringiensis foram testados sobre lagartas de
D fovealis sob condiccedilotildees de estufa e verificou-se que ambos tiveram accedilatildeo sobre as
lagartas de D fovealis poreacutem observou-se que os formulados agrave base de Bt
mostraram maior eficiecircncia que os produtos quiacutemicos (CFIA 2013) Jaumlckel e
Kurzhals (1995) e Bethke et al (2012) observaram tambeacutem que a eficiecircncia de
produtos comercias agrave base de Bt no controle de lagartas de D fovealis eacute maior nos
estaacutegios de desenvolvimento iniciais
Outra forma de utilizaccedilatildeo de B thuringiensis tem sido por meio da inserccedilatildeo de genes
de toxinas Cry em cultivos transgecircnicos dando origem a plantas Bt o que
proporciona eficaacutecia na forma de controlar insetos-praga e na reduccedilatildeo das
aplicaccedilotildees de produtos quiacutemicos Em plantas transgecircnicas a proteiacutena Cry eacute
produzida continuamente no interior das ceacutelulas protegida da inativaccedilatildeo da luz
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
15
Por se tratar de uma praga que natildeo haacute registro de produtos para seu controle no
Ministeacuterio da Agricultura Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) produtores tecircm
recorrido ao uso de produtos quiacutemicos registrados para outras culturas o que vai
contra a legislaccedilatildeo aleacutem acarretar seacuterios prejuiacutezos ao agroecossistema (ALHO
2011) tais como altos niacuteveis de resiacuteduos toacutexicos nos produtos intoxicaccedilotildees ao
homem e mamiacuteferos resistecircncia de pragas a inseticidas contaminaccedilatildeo ambiental
aleacutem de elevar o custo de produccedilatildeo
Sendo assim uma alternativa para diminuir os impactos causados pelo meacutetodo
convencional eacute a adoccedilatildeo de medidas fitossanitaacuterias que reduzam a populaccedilatildeo de
insetos-praga e natildeo ocasionem impactos negativos sobre o meio ambiente e aos
inimigos naturais presentes na aacuterea Uma dessas medidas eacute o Manejo Fitossanitaacuterio
de Pragas (MFP) que engloba princiacutepios e meacutetodos isolados ou em conjunto que
visam garantir maior produtividade e menor agressividade ao meio ambiente visando
manejar o inseto-praga reduzindo seu niacutevel de dano (ALVEZ et al 2007)
Entre as medidas adotadas no MFP o uso de produtos formulados a partir de
agentes bioloacutegicos como a bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner
(Eubacteriales Bacillaceae) se mostra como alternativa eficiente devido agrave
especificidade com relaccedilatildeo a pragas-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e
animais (POLANCZYK ALVES 2003)
Aleacutem desses agentes bioloacutegicos a utilizaccedilatildeo de inseticidas botacircnicos derivados de
plantas ou parte das mesmas obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo
podem exercer atividade toacutexica aos insetos interferindo no desenvolvimento haacutebito
alimentar oviposiccedilatildeo repelecircncia ou mesmo morte (WIESBROOK 2004 SOUZA
ARAUacuteJO NASCIMENTO 2007) No passado o mercado de inseticidas botacircnicos
era dominado pelas piretrinas azadiractina e as rotenonas poreacutem outros inseticidas
botacircnicos vecircm ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) e o alho
(Allium sativum L) entre outras espeacutecies botacircnicas (ISMAN 1997)
A necessidade da implementaccedilatildeo de pesquisas que visam avaliar a eficiecircncia de
meacutetodos de manejo alternativo aplicaacuteveis agrave D fovealis satildeo de grande importacircncia
Nesse sentido este estudo teve por meta avaliar a eficiecircncia do agente de controle
bioloacutegico B thuringiensis e dos extratos aquosos de Fumo e Alho sob condiccedilotildees de
laboratoacuterio visando proporcionar alternativas de manejo viaacuteveis para a implantaccedilatildeo
de programas de manejo fitossanitaacuterio de D fovealis
16
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE)
A Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) tem sua origem na regiatildeo
do Mediterracircneo e nas Ilhas Canaacuterias poreacutem pode ser encontrada em diversas
partes na Aacutefrica Oriente Meacutedio Europa Canadaacute e Estados Unidos da Ameacuterica
(HOFFMAN 2010) O primeiro relato dessa praga fora da sua aacuterea nativa foi em
estufas na Finlacircndia em 1984 e posteriormente em 1989 encontrado na Holanda
fora das estufas (CFIA 2005) Nos Estados Unidos foi detectada pela primeira vez
em 2004 em plantios de begocircnia na Califoacuternia e em 2005 no Canadaacute (GILL 2013)
No Brasil foi constatada em 2008 no estado do Paranaacute e posteriormente no estado
do Espiacuterito Santo Poreacutem apenas em 2010 a espeacutecie foi identificada por uma
especialista do USDA (United States Department of Agriculture) (ZAWADNEAK et
al 2011) Os mesmos autores citam que os primeiros relatos reportam que a praga
foi encontrada no estado do Paranaacute em lavouras comerciais de morango em
condiccedilotildees de cultivo protegido tipo tuacutenel alto nos cultivares Albion e Camino real
Posteriormente a mesma foi encontrada na cultivar Portola no estado do Espiacuterito
Santo Os produtores capixabas tambeacutem constataram a presenccedila de D fovealis nos
cultivares Aromas Albion e Camino Real produzidos em tuacutenel baixo
A lagarta D fovealis eacute uma praga poliacutefaga que gera grandes problemas em diversas
variedades de cultivos de plantas ornamentais e culturas agriacutecolas especialmente
em cultivos em estufa Essa espeacutecie foi relatada em mais de 70 espeacutecies
hospedeiras em cerca de 38 famiacutelias de plantas como ornamentais dos gecircneros
Amaranthus Anthurium Begonia e culturas comercialmente cultivadas como
Capsicum annuum L e Solanum lycopersicum L Fragaria x ananassa entre outras
(GILL 2013)
Com relaccedilatildeo ao ciclo de vida de D fovealis pode-se salientar que eacute um inseto com
desenvolvimento holometaboacutelico Os adultos medem cerca de 19 a 21 mm de
comprimento satildeo de coloraccedilatildeo castanho acinzentado com aneacuteis mais claros no
abdocircmen e possuem uma linha irregular branco-amarelada atraveacutes das asas Os
17
adultos ficam sob as folhas possuem haacutebito noturno e durante o dia podem realizar
voos curtos (MURPHY 2008 RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010) Em
repouso o adulto manteacutem as asas planas em forma triangular e o abdocircmen se
posiciona voltado para cima (HOFFMAN 2010) Os machos possuem o abdocircmen
mais longo e delgado que o da fecircmea (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010)
Os adultos podem viver durante uma a duas semanas sendo que a fecircmea adulta
potildee ateacute 200 ovos durante esse periacuteodo Os ovos possuem formato oval e
inicialmente apresentam coloraccedilatildeo verde-esbranquiccedilada ficando vermelho com o
desenvolvimento do embriatildeo ateacute apresentarem pontuaccedilotildees marrons que ocorrem
antes da eclosatildeo das lagartas (FRANCO BAPTISTA 2010) Satildeo ovipositados
isoladamente ou em massas de trecircs a dez ovos sobrepostos seja na parte inferior
das folhas perto das veias na base do talo na base da planta ou na camada
superior do solo (RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010 HOFFMAN 2010)
O periacuteodo de incubaccedilatildeo dos ovos varia em torno de seis dias dependendo da
temperatura local
As lagartas medem entre 20 a 30 mm de comprimento possuem coloraccedilatildeo branca
amarelada com pontos marrons longitudinalmente distribuiacutedos pelo corpo com pelo
menos um pelo em cada ponto e com cabeccedila de coloraccedilatildeo marrom-escura
(RICHTER 2009 GILL 2013) Alimentam-se de folhas flores brotos frutos e restos
de folhasplanta em decomposiccedilatildeo e em culturas plantadas com maior densidade
podem ser encontradas se alimentando de qualquer parte da planta (BRAMBILA
STOCKS 2010) As lagartas se desenvolvem rapidamente satildeo muito aacutegeis e
preferem locais uacutemidos na base da planta proacuteximo ao solo na camada superior do
solo ou em raiacutezes expostas das plantas (HOFFMAN 2010) As lagartas satildeo
adaptadas a condiccedilotildees de alta umidade e podem tolerar ateacute mesmo condiccedilotildees de
alagamento podendo ser encontradas em plantas aquaacuteticas e em lugares salinos
(BRAMBILA STOCKS 2010)
As lagartas tendem a ficar em locais protegidos como no colo da planta tuacuteneis nos
caules e em estaacutedios mais avanccedilados podem se alimentar da haste principal
inclusive abaixo da linha do solo (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010) Alimentam-se dos tecidos da coroa da planta provocando a
interrupccedilatildeo da circulaccedilatildeo de seiva o que ocasiona o aparecimento de necrose nas
18
bordas das folhas e posteriormente a morte da planta (FRANCO BAPTISTA
2010) Durante a alimentaccedilatildeo tecem teias entre as folhas baixeiras (aquelas que
ficam em contato com o canteiro) nas quais ficam protegidas e posteriormente
empupam (MURPHY 2008) Devido seu ataque a D fovealis pode danificar caules
folhas e frutos reduzindo a produccedilatildeo e inviabilizando o produto para o mercado in
natura aleacutem disso a injuacuteria causada pelo ataque pode servir como meio de entrada
para diferentes patoacutegenos (GILL 2013)
As pupas satildeo marrom-claro com aproximadamente 9 a 10 mm de comprimento O
casulo que as envolve eacute oval feito de seda fezes e partiacuteculas do solo e eacute construiacutedo
no solo (BETHKE VANDER MEY 2010) Natildeo haacute relatos de toleracircncia ao frio ou
qualquer tipo de diapausa durante qualquer parte do ciclo de vida Portanto poderia
completar vaacuterias geraccedilotildees anualmente sob condiccedilotildees ideais (HOFFMAN 2010)
Desta forma considerando o ciclo de desenvolvimento e consequentemente o
nuacutemero de geraccedilotildees anuais a presenccedila de plantios escalonados dentro de uma
mesma aacuterea pode resultar no aumento da populaccedilatildeo de D fovealis como tambeacutem
interferir em praacuteticas de controle existentes como Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas
(MFP) e de biocontrole que podem ser interrompidos pela necessidade de aplicaccedilatildeo
de inseticidas para controlar o inseto (CFIA 2005)
A disseminaccedilatildeo dessa praga pode ocorrer atraveacutes do comeacutercio de material vegetal
propagativo e natildeo propagativo logo medidas quarentenaacuterias satildeo necessaacuterias para
evitar a introduccedilatildeo dessa praga em aacutereas livres de ocorrecircncia (BRAMBILA
STOCKS 2010)
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis
O manejo dessa praga inclui controle cultural quiacutemico comportamental e bioloacutegico
devendo ser coordenado de acordo com o monitoramento da populaccedilatildeo
19
221 Controle cultural
Embora D fovealis esteja geralmente escondida inspeccedilotildees visuais regulares podem
auxiliar na detecccedilatildeo de sua presenccedila da fase jovem que pode ser constatada pela
existecircncia de danos nas folhas flores bototildees florais e hastes bem como dejetos e
buracos na superfiacutecie do solo (BRAMBILA STOCKS 2010) Fornazier et al (2011)
recomendam a retirada e a destruiccedilatildeo de folhas velhas se possiacutevel semanalmente
visando a reduccedilatildeo do nuacutemero de ovos e pupas evitando o raacutepido crescimento e
dispersatildeo populacional da praga
222 Controle Quiacutemico
No Brasil ainda natildeo haacute nenhum produto registrado no Ministeacuterio da Agricultura
Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) Poreacutem em outros paiacuteses os produtos relatados
para o controle de lagartas D fovealis satildeo Spinosade Bifentrina Fluvalinato
Deltametrina Esfenvalerato Orthene Lambdacialotrina Imidaclopride Metomil
Ethoprop Acefato Emamectina Permetrina Clorantraniliprol e Azadirachtin
(PIJNAKKER 2001 CFIA 2005 BETHKE VANDER MEY 2010) Aleacutem disso
Bethke e Vander Mey (2010) ainda recomendam que em ambiente de estufa para
controle dos adultos as aplicaccedilotildees tipo aerossol ou neacutevoa sejam realizadas no
periacuteodo noturno isso devido a maior atividade dos adultos
223 Controle Comportamental
Armadilhas luminosas com luz ultravioleta (UV) podem ser usadas para monitorar a
atividade da mariposa adulta em aacutereas em que a D fovealis estaacute estabelecida
Hoffman (2010) relata o sucesso da utilizaccedilatildeo dessas armadilhas em plantios nos
Estados Unidos Haacute relatos no Reino Unido de coletas de insetos adultos cerca de
20
10 km das estufas infestadas jaacute na Holanda foram encontrados insetos em
armadilhas luminosas a 100 km de sua ocorrecircncia (CFIA 2005)
Outra alternativa eacute a utilizaccedilatildeo de armadilhas tipo Delta com feromocircnio sexual ou
armadilhas que associem aacutegua e feromocircnio sendo estas especiacuteficas para adultos
machos de D fovealis (MURPHY 2008 DEVENTER 2009)
224 Controle Bioloacutegico
a Entomoacutefagos
Parasitoides de ovos do gecircnero Trichogramma (Hymenoptera Trichogrammatidae)
destacam-se pela ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica e pela vasta quantidade de
hospedeiros principalmente da ordem Lepidoptera (PRATISSOLI et al 2002) Na
Alemanha Zimmermann (2004) e Jaumlckel e Kurzhals (1995) relataram a ocorrecircncia
das espeacutecies Trichogramma evanescens Westwood Trichogramma cacoeciae
Marchal e Trichogramma brassicae Bezdenko parasitando ovos de D fovealis
Os agentes de controle bioloacutegico presentes no solo tambeacutem podem ser utilizados
entre eles estatildeo o besouro Atheta coriaria (Kraatz) (Coleoptera Staphylinidae) um
predador de ovos e lagartas neonatas o percevejo Podisius sp (Hemiptera
Pentatomidae) um predador de lagartas (MURPHY 2008) e aacutecaros predadores de
ovos Hypoaspis miles (Berlese) e Hypoaspis aculeifer (Canestrini) (Acari
Laelapidae) (CFIA 2013) Outro agente utilizado com sucesso em programas de
controle bioloacutegico de lagartas da famiacutelia Crambidae eacute a vespa endoparasitoide
Cotesia flavipes (Cameron) (Hymenoptera Braconidae) (SALLAM et al 2001) que
jaacute foi relatada por Zawadneak et al (2011) em lavouras de morango no estado do
Paranaacute na qual apresentou potencial para o controle de D fovealis
21
b Entomopatoacutegenos
b1 Nematoides
Os nematoides mais utilizados no controle de insetos pertencem agrave famiacutelia
Steinernematidae Estes tecircm sido aplicados em diversas culturas e mesmo em
outras situaccedilotildees para controle de um grande nuacutemero de insetos (ALVEZ 1998)
Nematoides entomopatogecircnicos jaacute vecircm sendo utilizados em outros paiacuteses no
manejo de D fovealis Stocks e Hodges (2013) citam a utilizaccedilatildeo da espeacutecie
Heterorhabditis bacteriophora (Poinar) (Nematoda Heterorhabditidae) jaacute Jaumlckel e
Kurzhals (1995) relatam que as espeacutecies Steinernema carpocapsae (Weiser) e S
feltiae (Filipjev) (Nematoda Steinernematidae) foram eficientes no controle de D
fovealis em diferentes estaacutedios larvais sendo que no estaacutedio 3 de desenvolvimento
essas espeacutecies proporcionaram 60 e 20 de mortalidade respectivamente
b2 Fungos entomopatogecircnicos
Os fungos entomopatogecircnicos Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok
(Hypocreales Clavicipitaceae) e Beauveria bassiana (Bals) Vuill (Hypocreales
Cordycipitaceae) satildeo muito utilizados devido agrave facilidade de produccedilatildeo ampla
distribuiccedilatildeo geograacutefica variedade de hospedeiros e ocorrecircncia em condiccedilotildees
naturais enzooacuteticas ou epizooacuteticas sendo ainda comumente encontrados no solo
mostrando-se como uma alternativa eficiente devido agrave especificidade com relaccedilatildeo agrave
praga-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e animais (ALVES 1998)
b3 Bacteacuteria entomopatogecircnica
A bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner eacute uma bacteacuteria
naturalmente encontrada no solo aeroacutebia ou facultativamente anaeroacutebia gram
22
positiva pertencente agrave famiacutelia Bacillaceae (BOBROWSKI et al 2003) formadora de
esporos pertencentes ao grupo Bacillus cereus (READ et al 2003) que eacute formado
por um complexo de vaacuterias espeacutecies (Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus
mycoides B thuringiensis e Bacillus weihenstephanensis) (POLANCZYK ALVES
2003)
Bacillus thuringiensis foi originalmente descoberto em 1902 por um bioacutelogo japonecircs
Shigetane Ishiwatari poreacutem foi caracterizado em 1911 por Ernst Berliner da
Alemanha quando este pesquisador isolou o bacilo de Anagasta kuehniella Zeller
(Lepidoptera Pyralidae) (POLANCZYK ALVES 2003 LIMA 2010) Desde entatildeo
essa espeacutecie eacute a mais utilizada mundialmente como biopesticida (CAPALBO et al
2008) A espeacutecie B thuringiensis se desenvolve rapidamente em condiccedilotildees
favoraacuteveis como temperatura e disponibilidade de nutrientes (HILBERT PIGGOT
2004) Em circunstacircncias de ausecircncia de nutrientes ou acuacutemulo de metaboacutelitos
indesejaacuteveis essa bacteacuteria entra em processo de esporulaccedilatildeo durante a fase
estacionaacuteria (POLANCZYK ALVES 2003)
Durante a fase de esporulaccedilatildeo essas bacteacuterias produzem proteiacutenas inseticidas
como cristais parasporais sendo estes compostos por uma ou mais proteiacutenas Cry
tambeacutem conhecidas como part-endotoxinas (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) Essas
toxinas denominadas Cry hidrolisadas atravessam a membrana peritroacutefica e
ligam-se a receptores especiacuteficos presentes nas microvilosidades apicais da
membrana das ceacutelulas colunares presentes no intestino meacutedio causando a
formaccedilatildeo de poros que aumentam a permeabilidade da membrana interferindo no
gradiente iocircnico e no balanccedilo osmoacutetico Dessa maneira ocorre aumento da absorccedilatildeo
de aacutegua o que leva agrave lise e eventual ruptura e desintegraccedilatildeo das ceacutelulas do
intestino meacutedio fazendo o inseto cessar a alimentaccedilatildeo e morrer logo apoacutes por
inaniccedilatildeo ou ainda apoacutes a lise das ceacutelulas do intestino meacutedio o ambiente torna-se
favoraacutevel agrave germinaccedilatildeo dos esporos (POLANCZYK VALICENTE BARETO 2008) e
nesse novo ambiente devido a mistura do conteuacutedo da hemolinfa e do intestino
meacutedio o pH torna-se aacutecido e os esporos se multiplicam de tal forma que o inseto
morre por septicemia (COPPING MENN 2000)
Proteiacutenas Cry satildeo altamente especiacuteficas para o inseto-alvo satildeo inoacutecuos para os
seres humanos animais vertebrados e plantas e satildeo completamente
biodegradaacuteveis (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) sendo considerada portanto um
23
agente seguro para o controle bioloacutegico de insetos na agricultura (LIMA 2010
POLANCZYK ALVES 2003) As diferentes cepas de bacteacuteria produzem vaacuterias
combinaccedilotildees de proteiacutenas Cry que satildeo proteiacutenas consideradas seletivas e
geralmente afetam insetos-alvo de ordens especiacuteficas (CLARK PHILLIPS COATS
2005)
O primeiro biopesticida agrave base de B thuringiensis foi lanccedilado na Franccedila em 1938 e
desde entatildeo mais de 100 formulaccedilotildees foram colocados no mercado mundial devido
agrave eficaacutecia e especificidade (POLANCZYK ALVES 2003) Devido agraves vantagens do
uso do B thuringiensis como agente de controle bioloacutegico sobre insetos-praga das
ordens Coleoptera Diptera Hymenoptera e Lepidoptera aleacutem de espeacutecies de
nematoides aumentando nos uacuteltimos anos o nuacutemero de estirpes isoladas a busca
por cepas mais toacutexicas eacute crescente no mundo inteiro (GEORGE CRICKMORE
2012)
Ateacute o iniacutecio de 1990 apenas trecircs produtos comerciais estavam disponiacuteveis no
mercado brasileiro sendo todos baseados em B thuringiensis Kurstaki com
destaque para o produto Dipelreg que eacute altamente eficiente para mais de 170
lepidoacutepteros-praga (LIMA 2010) Aleacutem deste outros produtos como Ablereg Agreereg
Bac-Control WPreg Bacturreg Dipel WPreg Dipel WGreg Thuricidereg e Xentarireg podem ser
encontrados em formulaccedilotildees de base soacutelida (poacute ou granulada) ou liacutequida (AGROFIT
2003)
Em paiacuteses como a Holanda o Canadaacute e os Paiacuteses Baixos produtos quiacutemicos e
formulados comerciais agrave base de B thuringiensis foram testados sobre lagartas de
D fovealis sob condiccedilotildees de estufa e verificou-se que ambos tiveram accedilatildeo sobre as
lagartas de D fovealis poreacutem observou-se que os formulados agrave base de Bt
mostraram maior eficiecircncia que os produtos quiacutemicos (CFIA 2013) Jaumlckel e
Kurzhals (1995) e Bethke et al (2012) observaram tambeacutem que a eficiecircncia de
produtos comercias agrave base de Bt no controle de lagartas de D fovealis eacute maior nos
estaacutegios de desenvolvimento iniciais
Outra forma de utilizaccedilatildeo de B thuringiensis tem sido por meio da inserccedilatildeo de genes
de toxinas Cry em cultivos transgecircnicos dando origem a plantas Bt o que
proporciona eficaacutecia na forma de controlar insetos-praga e na reduccedilatildeo das
aplicaccedilotildees de produtos quiacutemicos Em plantas transgecircnicas a proteiacutena Cry eacute
produzida continuamente no interior das ceacutelulas protegida da inativaccedilatildeo da luz
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
16
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Duponchelia fovealis Zeller (LEPIDOPTERA CRAMBIDAE)
A Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) tem sua origem na regiatildeo
do Mediterracircneo e nas Ilhas Canaacuterias poreacutem pode ser encontrada em diversas
partes na Aacutefrica Oriente Meacutedio Europa Canadaacute e Estados Unidos da Ameacuterica
(HOFFMAN 2010) O primeiro relato dessa praga fora da sua aacuterea nativa foi em
estufas na Finlacircndia em 1984 e posteriormente em 1989 encontrado na Holanda
fora das estufas (CFIA 2005) Nos Estados Unidos foi detectada pela primeira vez
em 2004 em plantios de begocircnia na Califoacuternia e em 2005 no Canadaacute (GILL 2013)
No Brasil foi constatada em 2008 no estado do Paranaacute e posteriormente no estado
do Espiacuterito Santo Poreacutem apenas em 2010 a espeacutecie foi identificada por uma
especialista do USDA (United States Department of Agriculture) (ZAWADNEAK et
al 2011) Os mesmos autores citam que os primeiros relatos reportam que a praga
foi encontrada no estado do Paranaacute em lavouras comerciais de morango em
condiccedilotildees de cultivo protegido tipo tuacutenel alto nos cultivares Albion e Camino real
Posteriormente a mesma foi encontrada na cultivar Portola no estado do Espiacuterito
Santo Os produtores capixabas tambeacutem constataram a presenccedila de D fovealis nos
cultivares Aromas Albion e Camino Real produzidos em tuacutenel baixo
A lagarta D fovealis eacute uma praga poliacutefaga que gera grandes problemas em diversas
variedades de cultivos de plantas ornamentais e culturas agriacutecolas especialmente
em cultivos em estufa Essa espeacutecie foi relatada em mais de 70 espeacutecies
hospedeiras em cerca de 38 famiacutelias de plantas como ornamentais dos gecircneros
Amaranthus Anthurium Begonia e culturas comercialmente cultivadas como
Capsicum annuum L e Solanum lycopersicum L Fragaria x ananassa entre outras
(GILL 2013)
Com relaccedilatildeo ao ciclo de vida de D fovealis pode-se salientar que eacute um inseto com
desenvolvimento holometaboacutelico Os adultos medem cerca de 19 a 21 mm de
comprimento satildeo de coloraccedilatildeo castanho acinzentado com aneacuteis mais claros no
abdocircmen e possuem uma linha irregular branco-amarelada atraveacutes das asas Os
17
adultos ficam sob as folhas possuem haacutebito noturno e durante o dia podem realizar
voos curtos (MURPHY 2008 RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010) Em
repouso o adulto manteacutem as asas planas em forma triangular e o abdocircmen se
posiciona voltado para cima (HOFFMAN 2010) Os machos possuem o abdocircmen
mais longo e delgado que o da fecircmea (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010)
Os adultos podem viver durante uma a duas semanas sendo que a fecircmea adulta
potildee ateacute 200 ovos durante esse periacuteodo Os ovos possuem formato oval e
inicialmente apresentam coloraccedilatildeo verde-esbranquiccedilada ficando vermelho com o
desenvolvimento do embriatildeo ateacute apresentarem pontuaccedilotildees marrons que ocorrem
antes da eclosatildeo das lagartas (FRANCO BAPTISTA 2010) Satildeo ovipositados
isoladamente ou em massas de trecircs a dez ovos sobrepostos seja na parte inferior
das folhas perto das veias na base do talo na base da planta ou na camada
superior do solo (RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010 HOFFMAN 2010)
O periacuteodo de incubaccedilatildeo dos ovos varia em torno de seis dias dependendo da
temperatura local
As lagartas medem entre 20 a 30 mm de comprimento possuem coloraccedilatildeo branca
amarelada com pontos marrons longitudinalmente distribuiacutedos pelo corpo com pelo
menos um pelo em cada ponto e com cabeccedila de coloraccedilatildeo marrom-escura
(RICHTER 2009 GILL 2013) Alimentam-se de folhas flores brotos frutos e restos
de folhasplanta em decomposiccedilatildeo e em culturas plantadas com maior densidade
podem ser encontradas se alimentando de qualquer parte da planta (BRAMBILA
STOCKS 2010) As lagartas se desenvolvem rapidamente satildeo muito aacutegeis e
preferem locais uacutemidos na base da planta proacuteximo ao solo na camada superior do
solo ou em raiacutezes expostas das plantas (HOFFMAN 2010) As lagartas satildeo
adaptadas a condiccedilotildees de alta umidade e podem tolerar ateacute mesmo condiccedilotildees de
alagamento podendo ser encontradas em plantas aquaacuteticas e em lugares salinos
(BRAMBILA STOCKS 2010)
As lagartas tendem a ficar em locais protegidos como no colo da planta tuacuteneis nos
caules e em estaacutedios mais avanccedilados podem se alimentar da haste principal
inclusive abaixo da linha do solo (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010) Alimentam-se dos tecidos da coroa da planta provocando a
interrupccedilatildeo da circulaccedilatildeo de seiva o que ocasiona o aparecimento de necrose nas
18
bordas das folhas e posteriormente a morte da planta (FRANCO BAPTISTA
2010) Durante a alimentaccedilatildeo tecem teias entre as folhas baixeiras (aquelas que
ficam em contato com o canteiro) nas quais ficam protegidas e posteriormente
empupam (MURPHY 2008) Devido seu ataque a D fovealis pode danificar caules
folhas e frutos reduzindo a produccedilatildeo e inviabilizando o produto para o mercado in
natura aleacutem disso a injuacuteria causada pelo ataque pode servir como meio de entrada
para diferentes patoacutegenos (GILL 2013)
As pupas satildeo marrom-claro com aproximadamente 9 a 10 mm de comprimento O
casulo que as envolve eacute oval feito de seda fezes e partiacuteculas do solo e eacute construiacutedo
no solo (BETHKE VANDER MEY 2010) Natildeo haacute relatos de toleracircncia ao frio ou
qualquer tipo de diapausa durante qualquer parte do ciclo de vida Portanto poderia
completar vaacuterias geraccedilotildees anualmente sob condiccedilotildees ideais (HOFFMAN 2010)
Desta forma considerando o ciclo de desenvolvimento e consequentemente o
nuacutemero de geraccedilotildees anuais a presenccedila de plantios escalonados dentro de uma
mesma aacuterea pode resultar no aumento da populaccedilatildeo de D fovealis como tambeacutem
interferir em praacuteticas de controle existentes como Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas
(MFP) e de biocontrole que podem ser interrompidos pela necessidade de aplicaccedilatildeo
de inseticidas para controlar o inseto (CFIA 2005)
A disseminaccedilatildeo dessa praga pode ocorrer atraveacutes do comeacutercio de material vegetal
propagativo e natildeo propagativo logo medidas quarentenaacuterias satildeo necessaacuterias para
evitar a introduccedilatildeo dessa praga em aacutereas livres de ocorrecircncia (BRAMBILA
STOCKS 2010)
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis
O manejo dessa praga inclui controle cultural quiacutemico comportamental e bioloacutegico
devendo ser coordenado de acordo com o monitoramento da populaccedilatildeo
19
221 Controle cultural
Embora D fovealis esteja geralmente escondida inspeccedilotildees visuais regulares podem
auxiliar na detecccedilatildeo de sua presenccedila da fase jovem que pode ser constatada pela
existecircncia de danos nas folhas flores bototildees florais e hastes bem como dejetos e
buracos na superfiacutecie do solo (BRAMBILA STOCKS 2010) Fornazier et al (2011)
recomendam a retirada e a destruiccedilatildeo de folhas velhas se possiacutevel semanalmente
visando a reduccedilatildeo do nuacutemero de ovos e pupas evitando o raacutepido crescimento e
dispersatildeo populacional da praga
222 Controle Quiacutemico
No Brasil ainda natildeo haacute nenhum produto registrado no Ministeacuterio da Agricultura
Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) Poreacutem em outros paiacuteses os produtos relatados
para o controle de lagartas D fovealis satildeo Spinosade Bifentrina Fluvalinato
Deltametrina Esfenvalerato Orthene Lambdacialotrina Imidaclopride Metomil
Ethoprop Acefato Emamectina Permetrina Clorantraniliprol e Azadirachtin
(PIJNAKKER 2001 CFIA 2005 BETHKE VANDER MEY 2010) Aleacutem disso
Bethke e Vander Mey (2010) ainda recomendam que em ambiente de estufa para
controle dos adultos as aplicaccedilotildees tipo aerossol ou neacutevoa sejam realizadas no
periacuteodo noturno isso devido a maior atividade dos adultos
223 Controle Comportamental
Armadilhas luminosas com luz ultravioleta (UV) podem ser usadas para monitorar a
atividade da mariposa adulta em aacutereas em que a D fovealis estaacute estabelecida
Hoffman (2010) relata o sucesso da utilizaccedilatildeo dessas armadilhas em plantios nos
Estados Unidos Haacute relatos no Reino Unido de coletas de insetos adultos cerca de
20
10 km das estufas infestadas jaacute na Holanda foram encontrados insetos em
armadilhas luminosas a 100 km de sua ocorrecircncia (CFIA 2005)
Outra alternativa eacute a utilizaccedilatildeo de armadilhas tipo Delta com feromocircnio sexual ou
armadilhas que associem aacutegua e feromocircnio sendo estas especiacuteficas para adultos
machos de D fovealis (MURPHY 2008 DEVENTER 2009)
224 Controle Bioloacutegico
a Entomoacutefagos
Parasitoides de ovos do gecircnero Trichogramma (Hymenoptera Trichogrammatidae)
destacam-se pela ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica e pela vasta quantidade de
hospedeiros principalmente da ordem Lepidoptera (PRATISSOLI et al 2002) Na
Alemanha Zimmermann (2004) e Jaumlckel e Kurzhals (1995) relataram a ocorrecircncia
das espeacutecies Trichogramma evanescens Westwood Trichogramma cacoeciae
Marchal e Trichogramma brassicae Bezdenko parasitando ovos de D fovealis
Os agentes de controle bioloacutegico presentes no solo tambeacutem podem ser utilizados
entre eles estatildeo o besouro Atheta coriaria (Kraatz) (Coleoptera Staphylinidae) um
predador de ovos e lagartas neonatas o percevejo Podisius sp (Hemiptera
Pentatomidae) um predador de lagartas (MURPHY 2008) e aacutecaros predadores de
ovos Hypoaspis miles (Berlese) e Hypoaspis aculeifer (Canestrini) (Acari
Laelapidae) (CFIA 2013) Outro agente utilizado com sucesso em programas de
controle bioloacutegico de lagartas da famiacutelia Crambidae eacute a vespa endoparasitoide
Cotesia flavipes (Cameron) (Hymenoptera Braconidae) (SALLAM et al 2001) que
jaacute foi relatada por Zawadneak et al (2011) em lavouras de morango no estado do
Paranaacute na qual apresentou potencial para o controle de D fovealis
21
b Entomopatoacutegenos
b1 Nematoides
Os nematoides mais utilizados no controle de insetos pertencem agrave famiacutelia
Steinernematidae Estes tecircm sido aplicados em diversas culturas e mesmo em
outras situaccedilotildees para controle de um grande nuacutemero de insetos (ALVEZ 1998)
Nematoides entomopatogecircnicos jaacute vecircm sendo utilizados em outros paiacuteses no
manejo de D fovealis Stocks e Hodges (2013) citam a utilizaccedilatildeo da espeacutecie
Heterorhabditis bacteriophora (Poinar) (Nematoda Heterorhabditidae) jaacute Jaumlckel e
Kurzhals (1995) relatam que as espeacutecies Steinernema carpocapsae (Weiser) e S
feltiae (Filipjev) (Nematoda Steinernematidae) foram eficientes no controle de D
fovealis em diferentes estaacutedios larvais sendo que no estaacutedio 3 de desenvolvimento
essas espeacutecies proporcionaram 60 e 20 de mortalidade respectivamente
b2 Fungos entomopatogecircnicos
Os fungos entomopatogecircnicos Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok
(Hypocreales Clavicipitaceae) e Beauveria bassiana (Bals) Vuill (Hypocreales
Cordycipitaceae) satildeo muito utilizados devido agrave facilidade de produccedilatildeo ampla
distribuiccedilatildeo geograacutefica variedade de hospedeiros e ocorrecircncia em condiccedilotildees
naturais enzooacuteticas ou epizooacuteticas sendo ainda comumente encontrados no solo
mostrando-se como uma alternativa eficiente devido agrave especificidade com relaccedilatildeo agrave
praga-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e animais (ALVES 1998)
b3 Bacteacuteria entomopatogecircnica
A bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner eacute uma bacteacuteria
naturalmente encontrada no solo aeroacutebia ou facultativamente anaeroacutebia gram
22
positiva pertencente agrave famiacutelia Bacillaceae (BOBROWSKI et al 2003) formadora de
esporos pertencentes ao grupo Bacillus cereus (READ et al 2003) que eacute formado
por um complexo de vaacuterias espeacutecies (Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus
mycoides B thuringiensis e Bacillus weihenstephanensis) (POLANCZYK ALVES
2003)
Bacillus thuringiensis foi originalmente descoberto em 1902 por um bioacutelogo japonecircs
Shigetane Ishiwatari poreacutem foi caracterizado em 1911 por Ernst Berliner da
Alemanha quando este pesquisador isolou o bacilo de Anagasta kuehniella Zeller
(Lepidoptera Pyralidae) (POLANCZYK ALVES 2003 LIMA 2010) Desde entatildeo
essa espeacutecie eacute a mais utilizada mundialmente como biopesticida (CAPALBO et al
2008) A espeacutecie B thuringiensis se desenvolve rapidamente em condiccedilotildees
favoraacuteveis como temperatura e disponibilidade de nutrientes (HILBERT PIGGOT
2004) Em circunstacircncias de ausecircncia de nutrientes ou acuacutemulo de metaboacutelitos
indesejaacuteveis essa bacteacuteria entra em processo de esporulaccedilatildeo durante a fase
estacionaacuteria (POLANCZYK ALVES 2003)
Durante a fase de esporulaccedilatildeo essas bacteacuterias produzem proteiacutenas inseticidas
como cristais parasporais sendo estes compostos por uma ou mais proteiacutenas Cry
tambeacutem conhecidas como part-endotoxinas (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) Essas
toxinas denominadas Cry hidrolisadas atravessam a membrana peritroacutefica e
ligam-se a receptores especiacuteficos presentes nas microvilosidades apicais da
membrana das ceacutelulas colunares presentes no intestino meacutedio causando a
formaccedilatildeo de poros que aumentam a permeabilidade da membrana interferindo no
gradiente iocircnico e no balanccedilo osmoacutetico Dessa maneira ocorre aumento da absorccedilatildeo
de aacutegua o que leva agrave lise e eventual ruptura e desintegraccedilatildeo das ceacutelulas do
intestino meacutedio fazendo o inseto cessar a alimentaccedilatildeo e morrer logo apoacutes por
inaniccedilatildeo ou ainda apoacutes a lise das ceacutelulas do intestino meacutedio o ambiente torna-se
favoraacutevel agrave germinaccedilatildeo dos esporos (POLANCZYK VALICENTE BARETO 2008) e
nesse novo ambiente devido a mistura do conteuacutedo da hemolinfa e do intestino
meacutedio o pH torna-se aacutecido e os esporos se multiplicam de tal forma que o inseto
morre por septicemia (COPPING MENN 2000)
Proteiacutenas Cry satildeo altamente especiacuteficas para o inseto-alvo satildeo inoacutecuos para os
seres humanos animais vertebrados e plantas e satildeo completamente
biodegradaacuteveis (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) sendo considerada portanto um
23
agente seguro para o controle bioloacutegico de insetos na agricultura (LIMA 2010
POLANCZYK ALVES 2003) As diferentes cepas de bacteacuteria produzem vaacuterias
combinaccedilotildees de proteiacutenas Cry que satildeo proteiacutenas consideradas seletivas e
geralmente afetam insetos-alvo de ordens especiacuteficas (CLARK PHILLIPS COATS
2005)
O primeiro biopesticida agrave base de B thuringiensis foi lanccedilado na Franccedila em 1938 e
desde entatildeo mais de 100 formulaccedilotildees foram colocados no mercado mundial devido
agrave eficaacutecia e especificidade (POLANCZYK ALVES 2003) Devido agraves vantagens do
uso do B thuringiensis como agente de controle bioloacutegico sobre insetos-praga das
ordens Coleoptera Diptera Hymenoptera e Lepidoptera aleacutem de espeacutecies de
nematoides aumentando nos uacuteltimos anos o nuacutemero de estirpes isoladas a busca
por cepas mais toacutexicas eacute crescente no mundo inteiro (GEORGE CRICKMORE
2012)
Ateacute o iniacutecio de 1990 apenas trecircs produtos comerciais estavam disponiacuteveis no
mercado brasileiro sendo todos baseados em B thuringiensis Kurstaki com
destaque para o produto Dipelreg que eacute altamente eficiente para mais de 170
lepidoacutepteros-praga (LIMA 2010) Aleacutem deste outros produtos como Ablereg Agreereg
Bac-Control WPreg Bacturreg Dipel WPreg Dipel WGreg Thuricidereg e Xentarireg podem ser
encontrados em formulaccedilotildees de base soacutelida (poacute ou granulada) ou liacutequida (AGROFIT
2003)
Em paiacuteses como a Holanda o Canadaacute e os Paiacuteses Baixos produtos quiacutemicos e
formulados comerciais agrave base de B thuringiensis foram testados sobre lagartas de
D fovealis sob condiccedilotildees de estufa e verificou-se que ambos tiveram accedilatildeo sobre as
lagartas de D fovealis poreacutem observou-se que os formulados agrave base de Bt
mostraram maior eficiecircncia que os produtos quiacutemicos (CFIA 2013) Jaumlckel e
Kurzhals (1995) e Bethke et al (2012) observaram tambeacutem que a eficiecircncia de
produtos comercias agrave base de Bt no controle de lagartas de D fovealis eacute maior nos
estaacutegios de desenvolvimento iniciais
Outra forma de utilizaccedilatildeo de B thuringiensis tem sido por meio da inserccedilatildeo de genes
de toxinas Cry em cultivos transgecircnicos dando origem a plantas Bt o que
proporciona eficaacutecia na forma de controlar insetos-praga e na reduccedilatildeo das
aplicaccedilotildees de produtos quiacutemicos Em plantas transgecircnicas a proteiacutena Cry eacute
produzida continuamente no interior das ceacutelulas protegida da inativaccedilatildeo da luz
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
17
adultos ficam sob as folhas possuem haacutebito noturno e durante o dia podem realizar
voos curtos (MURPHY 2008 RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010) Em
repouso o adulto manteacutem as asas planas em forma triangular e o abdocircmen se
posiciona voltado para cima (HOFFMAN 2010) Os machos possuem o abdocircmen
mais longo e delgado que o da fecircmea (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010)
Os adultos podem viver durante uma a duas semanas sendo que a fecircmea adulta
potildee ateacute 200 ovos durante esse periacuteodo Os ovos possuem formato oval e
inicialmente apresentam coloraccedilatildeo verde-esbranquiccedilada ficando vermelho com o
desenvolvimento do embriatildeo ateacute apresentarem pontuaccedilotildees marrons que ocorrem
antes da eclosatildeo das lagartas (FRANCO BAPTISTA 2010) Satildeo ovipositados
isoladamente ou em massas de trecircs a dez ovos sobrepostos seja na parte inferior
das folhas perto das veias na base do talo na base da planta ou na camada
superior do solo (RICHTER 2009 BRAMBILA STOCKS 2010 HOFFMAN 2010)
O periacuteodo de incubaccedilatildeo dos ovos varia em torno de seis dias dependendo da
temperatura local
As lagartas medem entre 20 a 30 mm de comprimento possuem coloraccedilatildeo branca
amarelada com pontos marrons longitudinalmente distribuiacutedos pelo corpo com pelo
menos um pelo em cada ponto e com cabeccedila de coloraccedilatildeo marrom-escura
(RICHTER 2009 GILL 2013) Alimentam-se de folhas flores brotos frutos e restos
de folhasplanta em decomposiccedilatildeo e em culturas plantadas com maior densidade
podem ser encontradas se alimentando de qualquer parte da planta (BRAMBILA
STOCKS 2010) As lagartas se desenvolvem rapidamente satildeo muito aacutegeis e
preferem locais uacutemidos na base da planta proacuteximo ao solo na camada superior do
solo ou em raiacutezes expostas das plantas (HOFFMAN 2010) As lagartas satildeo
adaptadas a condiccedilotildees de alta umidade e podem tolerar ateacute mesmo condiccedilotildees de
alagamento podendo ser encontradas em plantas aquaacuteticas e em lugares salinos
(BRAMBILA STOCKS 2010)
As lagartas tendem a ficar em locais protegidos como no colo da planta tuacuteneis nos
caules e em estaacutedios mais avanccedilados podem se alimentar da haste principal
inclusive abaixo da linha do solo (BETHKE VANDER MEY 2010 BRAMBILA
STOCKS 2010) Alimentam-se dos tecidos da coroa da planta provocando a
interrupccedilatildeo da circulaccedilatildeo de seiva o que ocasiona o aparecimento de necrose nas
18
bordas das folhas e posteriormente a morte da planta (FRANCO BAPTISTA
2010) Durante a alimentaccedilatildeo tecem teias entre as folhas baixeiras (aquelas que
ficam em contato com o canteiro) nas quais ficam protegidas e posteriormente
empupam (MURPHY 2008) Devido seu ataque a D fovealis pode danificar caules
folhas e frutos reduzindo a produccedilatildeo e inviabilizando o produto para o mercado in
natura aleacutem disso a injuacuteria causada pelo ataque pode servir como meio de entrada
para diferentes patoacutegenos (GILL 2013)
As pupas satildeo marrom-claro com aproximadamente 9 a 10 mm de comprimento O
casulo que as envolve eacute oval feito de seda fezes e partiacuteculas do solo e eacute construiacutedo
no solo (BETHKE VANDER MEY 2010) Natildeo haacute relatos de toleracircncia ao frio ou
qualquer tipo de diapausa durante qualquer parte do ciclo de vida Portanto poderia
completar vaacuterias geraccedilotildees anualmente sob condiccedilotildees ideais (HOFFMAN 2010)
Desta forma considerando o ciclo de desenvolvimento e consequentemente o
nuacutemero de geraccedilotildees anuais a presenccedila de plantios escalonados dentro de uma
mesma aacuterea pode resultar no aumento da populaccedilatildeo de D fovealis como tambeacutem
interferir em praacuteticas de controle existentes como Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas
(MFP) e de biocontrole que podem ser interrompidos pela necessidade de aplicaccedilatildeo
de inseticidas para controlar o inseto (CFIA 2005)
A disseminaccedilatildeo dessa praga pode ocorrer atraveacutes do comeacutercio de material vegetal
propagativo e natildeo propagativo logo medidas quarentenaacuterias satildeo necessaacuterias para
evitar a introduccedilatildeo dessa praga em aacutereas livres de ocorrecircncia (BRAMBILA
STOCKS 2010)
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis
O manejo dessa praga inclui controle cultural quiacutemico comportamental e bioloacutegico
devendo ser coordenado de acordo com o monitoramento da populaccedilatildeo
19
221 Controle cultural
Embora D fovealis esteja geralmente escondida inspeccedilotildees visuais regulares podem
auxiliar na detecccedilatildeo de sua presenccedila da fase jovem que pode ser constatada pela
existecircncia de danos nas folhas flores bototildees florais e hastes bem como dejetos e
buracos na superfiacutecie do solo (BRAMBILA STOCKS 2010) Fornazier et al (2011)
recomendam a retirada e a destruiccedilatildeo de folhas velhas se possiacutevel semanalmente
visando a reduccedilatildeo do nuacutemero de ovos e pupas evitando o raacutepido crescimento e
dispersatildeo populacional da praga
222 Controle Quiacutemico
No Brasil ainda natildeo haacute nenhum produto registrado no Ministeacuterio da Agricultura
Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) Poreacutem em outros paiacuteses os produtos relatados
para o controle de lagartas D fovealis satildeo Spinosade Bifentrina Fluvalinato
Deltametrina Esfenvalerato Orthene Lambdacialotrina Imidaclopride Metomil
Ethoprop Acefato Emamectina Permetrina Clorantraniliprol e Azadirachtin
(PIJNAKKER 2001 CFIA 2005 BETHKE VANDER MEY 2010) Aleacutem disso
Bethke e Vander Mey (2010) ainda recomendam que em ambiente de estufa para
controle dos adultos as aplicaccedilotildees tipo aerossol ou neacutevoa sejam realizadas no
periacuteodo noturno isso devido a maior atividade dos adultos
223 Controle Comportamental
Armadilhas luminosas com luz ultravioleta (UV) podem ser usadas para monitorar a
atividade da mariposa adulta em aacutereas em que a D fovealis estaacute estabelecida
Hoffman (2010) relata o sucesso da utilizaccedilatildeo dessas armadilhas em plantios nos
Estados Unidos Haacute relatos no Reino Unido de coletas de insetos adultos cerca de
20
10 km das estufas infestadas jaacute na Holanda foram encontrados insetos em
armadilhas luminosas a 100 km de sua ocorrecircncia (CFIA 2005)
Outra alternativa eacute a utilizaccedilatildeo de armadilhas tipo Delta com feromocircnio sexual ou
armadilhas que associem aacutegua e feromocircnio sendo estas especiacuteficas para adultos
machos de D fovealis (MURPHY 2008 DEVENTER 2009)
224 Controle Bioloacutegico
a Entomoacutefagos
Parasitoides de ovos do gecircnero Trichogramma (Hymenoptera Trichogrammatidae)
destacam-se pela ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica e pela vasta quantidade de
hospedeiros principalmente da ordem Lepidoptera (PRATISSOLI et al 2002) Na
Alemanha Zimmermann (2004) e Jaumlckel e Kurzhals (1995) relataram a ocorrecircncia
das espeacutecies Trichogramma evanescens Westwood Trichogramma cacoeciae
Marchal e Trichogramma brassicae Bezdenko parasitando ovos de D fovealis
Os agentes de controle bioloacutegico presentes no solo tambeacutem podem ser utilizados
entre eles estatildeo o besouro Atheta coriaria (Kraatz) (Coleoptera Staphylinidae) um
predador de ovos e lagartas neonatas o percevejo Podisius sp (Hemiptera
Pentatomidae) um predador de lagartas (MURPHY 2008) e aacutecaros predadores de
ovos Hypoaspis miles (Berlese) e Hypoaspis aculeifer (Canestrini) (Acari
Laelapidae) (CFIA 2013) Outro agente utilizado com sucesso em programas de
controle bioloacutegico de lagartas da famiacutelia Crambidae eacute a vespa endoparasitoide
Cotesia flavipes (Cameron) (Hymenoptera Braconidae) (SALLAM et al 2001) que
jaacute foi relatada por Zawadneak et al (2011) em lavouras de morango no estado do
Paranaacute na qual apresentou potencial para o controle de D fovealis
21
b Entomopatoacutegenos
b1 Nematoides
Os nematoides mais utilizados no controle de insetos pertencem agrave famiacutelia
Steinernematidae Estes tecircm sido aplicados em diversas culturas e mesmo em
outras situaccedilotildees para controle de um grande nuacutemero de insetos (ALVEZ 1998)
Nematoides entomopatogecircnicos jaacute vecircm sendo utilizados em outros paiacuteses no
manejo de D fovealis Stocks e Hodges (2013) citam a utilizaccedilatildeo da espeacutecie
Heterorhabditis bacteriophora (Poinar) (Nematoda Heterorhabditidae) jaacute Jaumlckel e
Kurzhals (1995) relatam que as espeacutecies Steinernema carpocapsae (Weiser) e S
feltiae (Filipjev) (Nematoda Steinernematidae) foram eficientes no controle de D
fovealis em diferentes estaacutedios larvais sendo que no estaacutedio 3 de desenvolvimento
essas espeacutecies proporcionaram 60 e 20 de mortalidade respectivamente
b2 Fungos entomopatogecircnicos
Os fungos entomopatogecircnicos Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok
(Hypocreales Clavicipitaceae) e Beauveria bassiana (Bals) Vuill (Hypocreales
Cordycipitaceae) satildeo muito utilizados devido agrave facilidade de produccedilatildeo ampla
distribuiccedilatildeo geograacutefica variedade de hospedeiros e ocorrecircncia em condiccedilotildees
naturais enzooacuteticas ou epizooacuteticas sendo ainda comumente encontrados no solo
mostrando-se como uma alternativa eficiente devido agrave especificidade com relaccedilatildeo agrave
praga-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e animais (ALVES 1998)
b3 Bacteacuteria entomopatogecircnica
A bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner eacute uma bacteacuteria
naturalmente encontrada no solo aeroacutebia ou facultativamente anaeroacutebia gram
22
positiva pertencente agrave famiacutelia Bacillaceae (BOBROWSKI et al 2003) formadora de
esporos pertencentes ao grupo Bacillus cereus (READ et al 2003) que eacute formado
por um complexo de vaacuterias espeacutecies (Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus
mycoides B thuringiensis e Bacillus weihenstephanensis) (POLANCZYK ALVES
2003)
Bacillus thuringiensis foi originalmente descoberto em 1902 por um bioacutelogo japonecircs
Shigetane Ishiwatari poreacutem foi caracterizado em 1911 por Ernst Berliner da
Alemanha quando este pesquisador isolou o bacilo de Anagasta kuehniella Zeller
(Lepidoptera Pyralidae) (POLANCZYK ALVES 2003 LIMA 2010) Desde entatildeo
essa espeacutecie eacute a mais utilizada mundialmente como biopesticida (CAPALBO et al
2008) A espeacutecie B thuringiensis se desenvolve rapidamente em condiccedilotildees
favoraacuteveis como temperatura e disponibilidade de nutrientes (HILBERT PIGGOT
2004) Em circunstacircncias de ausecircncia de nutrientes ou acuacutemulo de metaboacutelitos
indesejaacuteveis essa bacteacuteria entra em processo de esporulaccedilatildeo durante a fase
estacionaacuteria (POLANCZYK ALVES 2003)
Durante a fase de esporulaccedilatildeo essas bacteacuterias produzem proteiacutenas inseticidas
como cristais parasporais sendo estes compostos por uma ou mais proteiacutenas Cry
tambeacutem conhecidas como part-endotoxinas (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) Essas
toxinas denominadas Cry hidrolisadas atravessam a membrana peritroacutefica e
ligam-se a receptores especiacuteficos presentes nas microvilosidades apicais da
membrana das ceacutelulas colunares presentes no intestino meacutedio causando a
formaccedilatildeo de poros que aumentam a permeabilidade da membrana interferindo no
gradiente iocircnico e no balanccedilo osmoacutetico Dessa maneira ocorre aumento da absorccedilatildeo
de aacutegua o que leva agrave lise e eventual ruptura e desintegraccedilatildeo das ceacutelulas do
intestino meacutedio fazendo o inseto cessar a alimentaccedilatildeo e morrer logo apoacutes por
inaniccedilatildeo ou ainda apoacutes a lise das ceacutelulas do intestino meacutedio o ambiente torna-se
favoraacutevel agrave germinaccedilatildeo dos esporos (POLANCZYK VALICENTE BARETO 2008) e
nesse novo ambiente devido a mistura do conteuacutedo da hemolinfa e do intestino
meacutedio o pH torna-se aacutecido e os esporos se multiplicam de tal forma que o inseto
morre por septicemia (COPPING MENN 2000)
Proteiacutenas Cry satildeo altamente especiacuteficas para o inseto-alvo satildeo inoacutecuos para os
seres humanos animais vertebrados e plantas e satildeo completamente
biodegradaacuteveis (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) sendo considerada portanto um
23
agente seguro para o controle bioloacutegico de insetos na agricultura (LIMA 2010
POLANCZYK ALVES 2003) As diferentes cepas de bacteacuteria produzem vaacuterias
combinaccedilotildees de proteiacutenas Cry que satildeo proteiacutenas consideradas seletivas e
geralmente afetam insetos-alvo de ordens especiacuteficas (CLARK PHILLIPS COATS
2005)
O primeiro biopesticida agrave base de B thuringiensis foi lanccedilado na Franccedila em 1938 e
desde entatildeo mais de 100 formulaccedilotildees foram colocados no mercado mundial devido
agrave eficaacutecia e especificidade (POLANCZYK ALVES 2003) Devido agraves vantagens do
uso do B thuringiensis como agente de controle bioloacutegico sobre insetos-praga das
ordens Coleoptera Diptera Hymenoptera e Lepidoptera aleacutem de espeacutecies de
nematoides aumentando nos uacuteltimos anos o nuacutemero de estirpes isoladas a busca
por cepas mais toacutexicas eacute crescente no mundo inteiro (GEORGE CRICKMORE
2012)
Ateacute o iniacutecio de 1990 apenas trecircs produtos comerciais estavam disponiacuteveis no
mercado brasileiro sendo todos baseados em B thuringiensis Kurstaki com
destaque para o produto Dipelreg que eacute altamente eficiente para mais de 170
lepidoacutepteros-praga (LIMA 2010) Aleacutem deste outros produtos como Ablereg Agreereg
Bac-Control WPreg Bacturreg Dipel WPreg Dipel WGreg Thuricidereg e Xentarireg podem ser
encontrados em formulaccedilotildees de base soacutelida (poacute ou granulada) ou liacutequida (AGROFIT
2003)
Em paiacuteses como a Holanda o Canadaacute e os Paiacuteses Baixos produtos quiacutemicos e
formulados comerciais agrave base de B thuringiensis foram testados sobre lagartas de
D fovealis sob condiccedilotildees de estufa e verificou-se que ambos tiveram accedilatildeo sobre as
lagartas de D fovealis poreacutem observou-se que os formulados agrave base de Bt
mostraram maior eficiecircncia que os produtos quiacutemicos (CFIA 2013) Jaumlckel e
Kurzhals (1995) e Bethke et al (2012) observaram tambeacutem que a eficiecircncia de
produtos comercias agrave base de Bt no controle de lagartas de D fovealis eacute maior nos
estaacutegios de desenvolvimento iniciais
Outra forma de utilizaccedilatildeo de B thuringiensis tem sido por meio da inserccedilatildeo de genes
de toxinas Cry em cultivos transgecircnicos dando origem a plantas Bt o que
proporciona eficaacutecia na forma de controlar insetos-praga e na reduccedilatildeo das
aplicaccedilotildees de produtos quiacutemicos Em plantas transgecircnicas a proteiacutena Cry eacute
produzida continuamente no interior das ceacutelulas protegida da inativaccedilatildeo da luz
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
18
bordas das folhas e posteriormente a morte da planta (FRANCO BAPTISTA
2010) Durante a alimentaccedilatildeo tecem teias entre as folhas baixeiras (aquelas que
ficam em contato com o canteiro) nas quais ficam protegidas e posteriormente
empupam (MURPHY 2008) Devido seu ataque a D fovealis pode danificar caules
folhas e frutos reduzindo a produccedilatildeo e inviabilizando o produto para o mercado in
natura aleacutem disso a injuacuteria causada pelo ataque pode servir como meio de entrada
para diferentes patoacutegenos (GILL 2013)
As pupas satildeo marrom-claro com aproximadamente 9 a 10 mm de comprimento O
casulo que as envolve eacute oval feito de seda fezes e partiacuteculas do solo e eacute construiacutedo
no solo (BETHKE VANDER MEY 2010) Natildeo haacute relatos de toleracircncia ao frio ou
qualquer tipo de diapausa durante qualquer parte do ciclo de vida Portanto poderia
completar vaacuterias geraccedilotildees anualmente sob condiccedilotildees ideais (HOFFMAN 2010)
Desta forma considerando o ciclo de desenvolvimento e consequentemente o
nuacutemero de geraccedilotildees anuais a presenccedila de plantios escalonados dentro de uma
mesma aacuterea pode resultar no aumento da populaccedilatildeo de D fovealis como tambeacutem
interferir em praacuteticas de controle existentes como Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas
(MFP) e de biocontrole que podem ser interrompidos pela necessidade de aplicaccedilatildeo
de inseticidas para controlar o inseto (CFIA 2005)
A disseminaccedilatildeo dessa praga pode ocorrer atraveacutes do comeacutercio de material vegetal
propagativo e natildeo propagativo logo medidas quarentenaacuterias satildeo necessaacuterias para
evitar a introduccedilatildeo dessa praga em aacutereas livres de ocorrecircncia (BRAMBILA
STOCKS 2010)
22 MEacuteTODOS DE MANEJO DE Duponchelia fovealis
O manejo dessa praga inclui controle cultural quiacutemico comportamental e bioloacutegico
devendo ser coordenado de acordo com o monitoramento da populaccedilatildeo
19
221 Controle cultural
Embora D fovealis esteja geralmente escondida inspeccedilotildees visuais regulares podem
auxiliar na detecccedilatildeo de sua presenccedila da fase jovem que pode ser constatada pela
existecircncia de danos nas folhas flores bototildees florais e hastes bem como dejetos e
buracos na superfiacutecie do solo (BRAMBILA STOCKS 2010) Fornazier et al (2011)
recomendam a retirada e a destruiccedilatildeo de folhas velhas se possiacutevel semanalmente
visando a reduccedilatildeo do nuacutemero de ovos e pupas evitando o raacutepido crescimento e
dispersatildeo populacional da praga
222 Controle Quiacutemico
No Brasil ainda natildeo haacute nenhum produto registrado no Ministeacuterio da Agricultura
Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) Poreacutem em outros paiacuteses os produtos relatados
para o controle de lagartas D fovealis satildeo Spinosade Bifentrina Fluvalinato
Deltametrina Esfenvalerato Orthene Lambdacialotrina Imidaclopride Metomil
Ethoprop Acefato Emamectina Permetrina Clorantraniliprol e Azadirachtin
(PIJNAKKER 2001 CFIA 2005 BETHKE VANDER MEY 2010) Aleacutem disso
Bethke e Vander Mey (2010) ainda recomendam que em ambiente de estufa para
controle dos adultos as aplicaccedilotildees tipo aerossol ou neacutevoa sejam realizadas no
periacuteodo noturno isso devido a maior atividade dos adultos
223 Controle Comportamental
Armadilhas luminosas com luz ultravioleta (UV) podem ser usadas para monitorar a
atividade da mariposa adulta em aacutereas em que a D fovealis estaacute estabelecida
Hoffman (2010) relata o sucesso da utilizaccedilatildeo dessas armadilhas em plantios nos
Estados Unidos Haacute relatos no Reino Unido de coletas de insetos adultos cerca de
20
10 km das estufas infestadas jaacute na Holanda foram encontrados insetos em
armadilhas luminosas a 100 km de sua ocorrecircncia (CFIA 2005)
Outra alternativa eacute a utilizaccedilatildeo de armadilhas tipo Delta com feromocircnio sexual ou
armadilhas que associem aacutegua e feromocircnio sendo estas especiacuteficas para adultos
machos de D fovealis (MURPHY 2008 DEVENTER 2009)
224 Controle Bioloacutegico
a Entomoacutefagos
Parasitoides de ovos do gecircnero Trichogramma (Hymenoptera Trichogrammatidae)
destacam-se pela ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica e pela vasta quantidade de
hospedeiros principalmente da ordem Lepidoptera (PRATISSOLI et al 2002) Na
Alemanha Zimmermann (2004) e Jaumlckel e Kurzhals (1995) relataram a ocorrecircncia
das espeacutecies Trichogramma evanescens Westwood Trichogramma cacoeciae
Marchal e Trichogramma brassicae Bezdenko parasitando ovos de D fovealis
Os agentes de controle bioloacutegico presentes no solo tambeacutem podem ser utilizados
entre eles estatildeo o besouro Atheta coriaria (Kraatz) (Coleoptera Staphylinidae) um
predador de ovos e lagartas neonatas o percevejo Podisius sp (Hemiptera
Pentatomidae) um predador de lagartas (MURPHY 2008) e aacutecaros predadores de
ovos Hypoaspis miles (Berlese) e Hypoaspis aculeifer (Canestrini) (Acari
Laelapidae) (CFIA 2013) Outro agente utilizado com sucesso em programas de
controle bioloacutegico de lagartas da famiacutelia Crambidae eacute a vespa endoparasitoide
Cotesia flavipes (Cameron) (Hymenoptera Braconidae) (SALLAM et al 2001) que
jaacute foi relatada por Zawadneak et al (2011) em lavouras de morango no estado do
Paranaacute na qual apresentou potencial para o controle de D fovealis
21
b Entomopatoacutegenos
b1 Nematoides
Os nematoides mais utilizados no controle de insetos pertencem agrave famiacutelia
Steinernematidae Estes tecircm sido aplicados em diversas culturas e mesmo em
outras situaccedilotildees para controle de um grande nuacutemero de insetos (ALVEZ 1998)
Nematoides entomopatogecircnicos jaacute vecircm sendo utilizados em outros paiacuteses no
manejo de D fovealis Stocks e Hodges (2013) citam a utilizaccedilatildeo da espeacutecie
Heterorhabditis bacteriophora (Poinar) (Nematoda Heterorhabditidae) jaacute Jaumlckel e
Kurzhals (1995) relatam que as espeacutecies Steinernema carpocapsae (Weiser) e S
feltiae (Filipjev) (Nematoda Steinernematidae) foram eficientes no controle de D
fovealis em diferentes estaacutedios larvais sendo que no estaacutedio 3 de desenvolvimento
essas espeacutecies proporcionaram 60 e 20 de mortalidade respectivamente
b2 Fungos entomopatogecircnicos
Os fungos entomopatogecircnicos Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok
(Hypocreales Clavicipitaceae) e Beauveria bassiana (Bals) Vuill (Hypocreales
Cordycipitaceae) satildeo muito utilizados devido agrave facilidade de produccedilatildeo ampla
distribuiccedilatildeo geograacutefica variedade de hospedeiros e ocorrecircncia em condiccedilotildees
naturais enzooacuteticas ou epizooacuteticas sendo ainda comumente encontrados no solo
mostrando-se como uma alternativa eficiente devido agrave especificidade com relaccedilatildeo agrave
praga-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e animais (ALVES 1998)
b3 Bacteacuteria entomopatogecircnica
A bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner eacute uma bacteacuteria
naturalmente encontrada no solo aeroacutebia ou facultativamente anaeroacutebia gram
22
positiva pertencente agrave famiacutelia Bacillaceae (BOBROWSKI et al 2003) formadora de
esporos pertencentes ao grupo Bacillus cereus (READ et al 2003) que eacute formado
por um complexo de vaacuterias espeacutecies (Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus
mycoides B thuringiensis e Bacillus weihenstephanensis) (POLANCZYK ALVES
2003)
Bacillus thuringiensis foi originalmente descoberto em 1902 por um bioacutelogo japonecircs
Shigetane Ishiwatari poreacutem foi caracterizado em 1911 por Ernst Berliner da
Alemanha quando este pesquisador isolou o bacilo de Anagasta kuehniella Zeller
(Lepidoptera Pyralidae) (POLANCZYK ALVES 2003 LIMA 2010) Desde entatildeo
essa espeacutecie eacute a mais utilizada mundialmente como biopesticida (CAPALBO et al
2008) A espeacutecie B thuringiensis se desenvolve rapidamente em condiccedilotildees
favoraacuteveis como temperatura e disponibilidade de nutrientes (HILBERT PIGGOT
2004) Em circunstacircncias de ausecircncia de nutrientes ou acuacutemulo de metaboacutelitos
indesejaacuteveis essa bacteacuteria entra em processo de esporulaccedilatildeo durante a fase
estacionaacuteria (POLANCZYK ALVES 2003)
Durante a fase de esporulaccedilatildeo essas bacteacuterias produzem proteiacutenas inseticidas
como cristais parasporais sendo estes compostos por uma ou mais proteiacutenas Cry
tambeacutem conhecidas como part-endotoxinas (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) Essas
toxinas denominadas Cry hidrolisadas atravessam a membrana peritroacutefica e
ligam-se a receptores especiacuteficos presentes nas microvilosidades apicais da
membrana das ceacutelulas colunares presentes no intestino meacutedio causando a
formaccedilatildeo de poros que aumentam a permeabilidade da membrana interferindo no
gradiente iocircnico e no balanccedilo osmoacutetico Dessa maneira ocorre aumento da absorccedilatildeo
de aacutegua o que leva agrave lise e eventual ruptura e desintegraccedilatildeo das ceacutelulas do
intestino meacutedio fazendo o inseto cessar a alimentaccedilatildeo e morrer logo apoacutes por
inaniccedilatildeo ou ainda apoacutes a lise das ceacutelulas do intestino meacutedio o ambiente torna-se
favoraacutevel agrave germinaccedilatildeo dos esporos (POLANCZYK VALICENTE BARETO 2008) e
nesse novo ambiente devido a mistura do conteuacutedo da hemolinfa e do intestino
meacutedio o pH torna-se aacutecido e os esporos se multiplicam de tal forma que o inseto
morre por septicemia (COPPING MENN 2000)
Proteiacutenas Cry satildeo altamente especiacuteficas para o inseto-alvo satildeo inoacutecuos para os
seres humanos animais vertebrados e plantas e satildeo completamente
biodegradaacuteveis (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) sendo considerada portanto um
23
agente seguro para o controle bioloacutegico de insetos na agricultura (LIMA 2010
POLANCZYK ALVES 2003) As diferentes cepas de bacteacuteria produzem vaacuterias
combinaccedilotildees de proteiacutenas Cry que satildeo proteiacutenas consideradas seletivas e
geralmente afetam insetos-alvo de ordens especiacuteficas (CLARK PHILLIPS COATS
2005)
O primeiro biopesticida agrave base de B thuringiensis foi lanccedilado na Franccedila em 1938 e
desde entatildeo mais de 100 formulaccedilotildees foram colocados no mercado mundial devido
agrave eficaacutecia e especificidade (POLANCZYK ALVES 2003) Devido agraves vantagens do
uso do B thuringiensis como agente de controle bioloacutegico sobre insetos-praga das
ordens Coleoptera Diptera Hymenoptera e Lepidoptera aleacutem de espeacutecies de
nematoides aumentando nos uacuteltimos anos o nuacutemero de estirpes isoladas a busca
por cepas mais toacutexicas eacute crescente no mundo inteiro (GEORGE CRICKMORE
2012)
Ateacute o iniacutecio de 1990 apenas trecircs produtos comerciais estavam disponiacuteveis no
mercado brasileiro sendo todos baseados em B thuringiensis Kurstaki com
destaque para o produto Dipelreg que eacute altamente eficiente para mais de 170
lepidoacutepteros-praga (LIMA 2010) Aleacutem deste outros produtos como Ablereg Agreereg
Bac-Control WPreg Bacturreg Dipel WPreg Dipel WGreg Thuricidereg e Xentarireg podem ser
encontrados em formulaccedilotildees de base soacutelida (poacute ou granulada) ou liacutequida (AGROFIT
2003)
Em paiacuteses como a Holanda o Canadaacute e os Paiacuteses Baixos produtos quiacutemicos e
formulados comerciais agrave base de B thuringiensis foram testados sobre lagartas de
D fovealis sob condiccedilotildees de estufa e verificou-se que ambos tiveram accedilatildeo sobre as
lagartas de D fovealis poreacutem observou-se que os formulados agrave base de Bt
mostraram maior eficiecircncia que os produtos quiacutemicos (CFIA 2013) Jaumlckel e
Kurzhals (1995) e Bethke et al (2012) observaram tambeacutem que a eficiecircncia de
produtos comercias agrave base de Bt no controle de lagartas de D fovealis eacute maior nos
estaacutegios de desenvolvimento iniciais
Outra forma de utilizaccedilatildeo de B thuringiensis tem sido por meio da inserccedilatildeo de genes
de toxinas Cry em cultivos transgecircnicos dando origem a plantas Bt o que
proporciona eficaacutecia na forma de controlar insetos-praga e na reduccedilatildeo das
aplicaccedilotildees de produtos quiacutemicos Em plantas transgecircnicas a proteiacutena Cry eacute
produzida continuamente no interior das ceacutelulas protegida da inativaccedilatildeo da luz
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
19
221 Controle cultural
Embora D fovealis esteja geralmente escondida inspeccedilotildees visuais regulares podem
auxiliar na detecccedilatildeo de sua presenccedila da fase jovem que pode ser constatada pela
existecircncia de danos nas folhas flores bototildees florais e hastes bem como dejetos e
buracos na superfiacutecie do solo (BRAMBILA STOCKS 2010) Fornazier et al (2011)
recomendam a retirada e a destruiccedilatildeo de folhas velhas se possiacutevel semanalmente
visando a reduccedilatildeo do nuacutemero de ovos e pupas evitando o raacutepido crescimento e
dispersatildeo populacional da praga
222 Controle Quiacutemico
No Brasil ainda natildeo haacute nenhum produto registrado no Ministeacuterio da Agricultura
Pecuaacuteria e Abastecimento (MAPA) Poreacutem em outros paiacuteses os produtos relatados
para o controle de lagartas D fovealis satildeo Spinosade Bifentrina Fluvalinato
Deltametrina Esfenvalerato Orthene Lambdacialotrina Imidaclopride Metomil
Ethoprop Acefato Emamectina Permetrina Clorantraniliprol e Azadirachtin
(PIJNAKKER 2001 CFIA 2005 BETHKE VANDER MEY 2010) Aleacutem disso
Bethke e Vander Mey (2010) ainda recomendam que em ambiente de estufa para
controle dos adultos as aplicaccedilotildees tipo aerossol ou neacutevoa sejam realizadas no
periacuteodo noturno isso devido a maior atividade dos adultos
223 Controle Comportamental
Armadilhas luminosas com luz ultravioleta (UV) podem ser usadas para monitorar a
atividade da mariposa adulta em aacutereas em que a D fovealis estaacute estabelecida
Hoffman (2010) relata o sucesso da utilizaccedilatildeo dessas armadilhas em plantios nos
Estados Unidos Haacute relatos no Reino Unido de coletas de insetos adultos cerca de
20
10 km das estufas infestadas jaacute na Holanda foram encontrados insetos em
armadilhas luminosas a 100 km de sua ocorrecircncia (CFIA 2005)
Outra alternativa eacute a utilizaccedilatildeo de armadilhas tipo Delta com feromocircnio sexual ou
armadilhas que associem aacutegua e feromocircnio sendo estas especiacuteficas para adultos
machos de D fovealis (MURPHY 2008 DEVENTER 2009)
224 Controle Bioloacutegico
a Entomoacutefagos
Parasitoides de ovos do gecircnero Trichogramma (Hymenoptera Trichogrammatidae)
destacam-se pela ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica e pela vasta quantidade de
hospedeiros principalmente da ordem Lepidoptera (PRATISSOLI et al 2002) Na
Alemanha Zimmermann (2004) e Jaumlckel e Kurzhals (1995) relataram a ocorrecircncia
das espeacutecies Trichogramma evanescens Westwood Trichogramma cacoeciae
Marchal e Trichogramma brassicae Bezdenko parasitando ovos de D fovealis
Os agentes de controle bioloacutegico presentes no solo tambeacutem podem ser utilizados
entre eles estatildeo o besouro Atheta coriaria (Kraatz) (Coleoptera Staphylinidae) um
predador de ovos e lagartas neonatas o percevejo Podisius sp (Hemiptera
Pentatomidae) um predador de lagartas (MURPHY 2008) e aacutecaros predadores de
ovos Hypoaspis miles (Berlese) e Hypoaspis aculeifer (Canestrini) (Acari
Laelapidae) (CFIA 2013) Outro agente utilizado com sucesso em programas de
controle bioloacutegico de lagartas da famiacutelia Crambidae eacute a vespa endoparasitoide
Cotesia flavipes (Cameron) (Hymenoptera Braconidae) (SALLAM et al 2001) que
jaacute foi relatada por Zawadneak et al (2011) em lavouras de morango no estado do
Paranaacute na qual apresentou potencial para o controle de D fovealis
21
b Entomopatoacutegenos
b1 Nematoides
Os nematoides mais utilizados no controle de insetos pertencem agrave famiacutelia
Steinernematidae Estes tecircm sido aplicados em diversas culturas e mesmo em
outras situaccedilotildees para controle de um grande nuacutemero de insetos (ALVEZ 1998)
Nematoides entomopatogecircnicos jaacute vecircm sendo utilizados em outros paiacuteses no
manejo de D fovealis Stocks e Hodges (2013) citam a utilizaccedilatildeo da espeacutecie
Heterorhabditis bacteriophora (Poinar) (Nematoda Heterorhabditidae) jaacute Jaumlckel e
Kurzhals (1995) relatam que as espeacutecies Steinernema carpocapsae (Weiser) e S
feltiae (Filipjev) (Nematoda Steinernematidae) foram eficientes no controle de D
fovealis em diferentes estaacutedios larvais sendo que no estaacutedio 3 de desenvolvimento
essas espeacutecies proporcionaram 60 e 20 de mortalidade respectivamente
b2 Fungos entomopatogecircnicos
Os fungos entomopatogecircnicos Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok
(Hypocreales Clavicipitaceae) e Beauveria bassiana (Bals) Vuill (Hypocreales
Cordycipitaceae) satildeo muito utilizados devido agrave facilidade de produccedilatildeo ampla
distribuiccedilatildeo geograacutefica variedade de hospedeiros e ocorrecircncia em condiccedilotildees
naturais enzooacuteticas ou epizooacuteticas sendo ainda comumente encontrados no solo
mostrando-se como uma alternativa eficiente devido agrave especificidade com relaccedilatildeo agrave
praga-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e animais (ALVES 1998)
b3 Bacteacuteria entomopatogecircnica
A bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner eacute uma bacteacuteria
naturalmente encontrada no solo aeroacutebia ou facultativamente anaeroacutebia gram
22
positiva pertencente agrave famiacutelia Bacillaceae (BOBROWSKI et al 2003) formadora de
esporos pertencentes ao grupo Bacillus cereus (READ et al 2003) que eacute formado
por um complexo de vaacuterias espeacutecies (Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus
mycoides B thuringiensis e Bacillus weihenstephanensis) (POLANCZYK ALVES
2003)
Bacillus thuringiensis foi originalmente descoberto em 1902 por um bioacutelogo japonecircs
Shigetane Ishiwatari poreacutem foi caracterizado em 1911 por Ernst Berliner da
Alemanha quando este pesquisador isolou o bacilo de Anagasta kuehniella Zeller
(Lepidoptera Pyralidae) (POLANCZYK ALVES 2003 LIMA 2010) Desde entatildeo
essa espeacutecie eacute a mais utilizada mundialmente como biopesticida (CAPALBO et al
2008) A espeacutecie B thuringiensis se desenvolve rapidamente em condiccedilotildees
favoraacuteveis como temperatura e disponibilidade de nutrientes (HILBERT PIGGOT
2004) Em circunstacircncias de ausecircncia de nutrientes ou acuacutemulo de metaboacutelitos
indesejaacuteveis essa bacteacuteria entra em processo de esporulaccedilatildeo durante a fase
estacionaacuteria (POLANCZYK ALVES 2003)
Durante a fase de esporulaccedilatildeo essas bacteacuterias produzem proteiacutenas inseticidas
como cristais parasporais sendo estes compostos por uma ou mais proteiacutenas Cry
tambeacutem conhecidas como part-endotoxinas (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) Essas
toxinas denominadas Cry hidrolisadas atravessam a membrana peritroacutefica e
ligam-se a receptores especiacuteficos presentes nas microvilosidades apicais da
membrana das ceacutelulas colunares presentes no intestino meacutedio causando a
formaccedilatildeo de poros que aumentam a permeabilidade da membrana interferindo no
gradiente iocircnico e no balanccedilo osmoacutetico Dessa maneira ocorre aumento da absorccedilatildeo
de aacutegua o que leva agrave lise e eventual ruptura e desintegraccedilatildeo das ceacutelulas do
intestino meacutedio fazendo o inseto cessar a alimentaccedilatildeo e morrer logo apoacutes por
inaniccedilatildeo ou ainda apoacutes a lise das ceacutelulas do intestino meacutedio o ambiente torna-se
favoraacutevel agrave germinaccedilatildeo dos esporos (POLANCZYK VALICENTE BARETO 2008) e
nesse novo ambiente devido a mistura do conteuacutedo da hemolinfa e do intestino
meacutedio o pH torna-se aacutecido e os esporos se multiplicam de tal forma que o inseto
morre por septicemia (COPPING MENN 2000)
Proteiacutenas Cry satildeo altamente especiacuteficas para o inseto-alvo satildeo inoacutecuos para os
seres humanos animais vertebrados e plantas e satildeo completamente
biodegradaacuteveis (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) sendo considerada portanto um
23
agente seguro para o controle bioloacutegico de insetos na agricultura (LIMA 2010
POLANCZYK ALVES 2003) As diferentes cepas de bacteacuteria produzem vaacuterias
combinaccedilotildees de proteiacutenas Cry que satildeo proteiacutenas consideradas seletivas e
geralmente afetam insetos-alvo de ordens especiacuteficas (CLARK PHILLIPS COATS
2005)
O primeiro biopesticida agrave base de B thuringiensis foi lanccedilado na Franccedila em 1938 e
desde entatildeo mais de 100 formulaccedilotildees foram colocados no mercado mundial devido
agrave eficaacutecia e especificidade (POLANCZYK ALVES 2003) Devido agraves vantagens do
uso do B thuringiensis como agente de controle bioloacutegico sobre insetos-praga das
ordens Coleoptera Diptera Hymenoptera e Lepidoptera aleacutem de espeacutecies de
nematoides aumentando nos uacuteltimos anos o nuacutemero de estirpes isoladas a busca
por cepas mais toacutexicas eacute crescente no mundo inteiro (GEORGE CRICKMORE
2012)
Ateacute o iniacutecio de 1990 apenas trecircs produtos comerciais estavam disponiacuteveis no
mercado brasileiro sendo todos baseados em B thuringiensis Kurstaki com
destaque para o produto Dipelreg que eacute altamente eficiente para mais de 170
lepidoacutepteros-praga (LIMA 2010) Aleacutem deste outros produtos como Ablereg Agreereg
Bac-Control WPreg Bacturreg Dipel WPreg Dipel WGreg Thuricidereg e Xentarireg podem ser
encontrados em formulaccedilotildees de base soacutelida (poacute ou granulada) ou liacutequida (AGROFIT
2003)
Em paiacuteses como a Holanda o Canadaacute e os Paiacuteses Baixos produtos quiacutemicos e
formulados comerciais agrave base de B thuringiensis foram testados sobre lagartas de
D fovealis sob condiccedilotildees de estufa e verificou-se que ambos tiveram accedilatildeo sobre as
lagartas de D fovealis poreacutem observou-se que os formulados agrave base de Bt
mostraram maior eficiecircncia que os produtos quiacutemicos (CFIA 2013) Jaumlckel e
Kurzhals (1995) e Bethke et al (2012) observaram tambeacutem que a eficiecircncia de
produtos comercias agrave base de Bt no controle de lagartas de D fovealis eacute maior nos
estaacutegios de desenvolvimento iniciais
Outra forma de utilizaccedilatildeo de B thuringiensis tem sido por meio da inserccedilatildeo de genes
de toxinas Cry em cultivos transgecircnicos dando origem a plantas Bt o que
proporciona eficaacutecia na forma de controlar insetos-praga e na reduccedilatildeo das
aplicaccedilotildees de produtos quiacutemicos Em plantas transgecircnicas a proteiacutena Cry eacute
produzida continuamente no interior das ceacutelulas protegida da inativaccedilatildeo da luz
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
20
10 km das estufas infestadas jaacute na Holanda foram encontrados insetos em
armadilhas luminosas a 100 km de sua ocorrecircncia (CFIA 2005)
Outra alternativa eacute a utilizaccedilatildeo de armadilhas tipo Delta com feromocircnio sexual ou
armadilhas que associem aacutegua e feromocircnio sendo estas especiacuteficas para adultos
machos de D fovealis (MURPHY 2008 DEVENTER 2009)
224 Controle Bioloacutegico
a Entomoacutefagos
Parasitoides de ovos do gecircnero Trichogramma (Hymenoptera Trichogrammatidae)
destacam-se pela ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica e pela vasta quantidade de
hospedeiros principalmente da ordem Lepidoptera (PRATISSOLI et al 2002) Na
Alemanha Zimmermann (2004) e Jaumlckel e Kurzhals (1995) relataram a ocorrecircncia
das espeacutecies Trichogramma evanescens Westwood Trichogramma cacoeciae
Marchal e Trichogramma brassicae Bezdenko parasitando ovos de D fovealis
Os agentes de controle bioloacutegico presentes no solo tambeacutem podem ser utilizados
entre eles estatildeo o besouro Atheta coriaria (Kraatz) (Coleoptera Staphylinidae) um
predador de ovos e lagartas neonatas o percevejo Podisius sp (Hemiptera
Pentatomidae) um predador de lagartas (MURPHY 2008) e aacutecaros predadores de
ovos Hypoaspis miles (Berlese) e Hypoaspis aculeifer (Canestrini) (Acari
Laelapidae) (CFIA 2013) Outro agente utilizado com sucesso em programas de
controle bioloacutegico de lagartas da famiacutelia Crambidae eacute a vespa endoparasitoide
Cotesia flavipes (Cameron) (Hymenoptera Braconidae) (SALLAM et al 2001) que
jaacute foi relatada por Zawadneak et al (2011) em lavouras de morango no estado do
Paranaacute na qual apresentou potencial para o controle de D fovealis
21
b Entomopatoacutegenos
b1 Nematoides
Os nematoides mais utilizados no controle de insetos pertencem agrave famiacutelia
Steinernematidae Estes tecircm sido aplicados em diversas culturas e mesmo em
outras situaccedilotildees para controle de um grande nuacutemero de insetos (ALVEZ 1998)
Nematoides entomopatogecircnicos jaacute vecircm sendo utilizados em outros paiacuteses no
manejo de D fovealis Stocks e Hodges (2013) citam a utilizaccedilatildeo da espeacutecie
Heterorhabditis bacteriophora (Poinar) (Nematoda Heterorhabditidae) jaacute Jaumlckel e
Kurzhals (1995) relatam que as espeacutecies Steinernema carpocapsae (Weiser) e S
feltiae (Filipjev) (Nematoda Steinernematidae) foram eficientes no controle de D
fovealis em diferentes estaacutedios larvais sendo que no estaacutedio 3 de desenvolvimento
essas espeacutecies proporcionaram 60 e 20 de mortalidade respectivamente
b2 Fungos entomopatogecircnicos
Os fungos entomopatogecircnicos Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok
(Hypocreales Clavicipitaceae) e Beauveria bassiana (Bals) Vuill (Hypocreales
Cordycipitaceae) satildeo muito utilizados devido agrave facilidade de produccedilatildeo ampla
distribuiccedilatildeo geograacutefica variedade de hospedeiros e ocorrecircncia em condiccedilotildees
naturais enzooacuteticas ou epizooacuteticas sendo ainda comumente encontrados no solo
mostrando-se como uma alternativa eficiente devido agrave especificidade com relaccedilatildeo agrave
praga-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e animais (ALVES 1998)
b3 Bacteacuteria entomopatogecircnica
A bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner eacute uma bacteacuteria
naturalmente encontrada no solo aeroacutebia ou facultativamente anaeroacutebia gram
22
positiva pertencente agrave famiacutelia Bacillaceae (BOBROWSKI et al 2003) formadora de
esporos pertencentes ao grupo Bacillus cereus (READ et al 2003) que eacute formado
por um complexo de vaacuterias espeacutecies (Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus
mycoides B thuringiensis e Bacillus weihenstephanensis) (POLANCZYK ALVES
2003)
Bacillus thuringiensis foi originalmente descoberto em 1902 por um bioacutelogo japonecircs
Shigetane Ishiwatari poreacutem foi caracterizado em 1911 por Ernst Berliner da
Alemanha quando este pesquisador isolou o bacilo de Anagasta kuehniella Zeller
(Lepidoptera Pyralidae) (POLANCZYK ALVES 2003 LIMA 2010) Desde entatildeo
essa espeacutecie eacute a mais utilizada mundialmente como biopesticida (CAPALBO et al
2008) A espeacutecie B thuringiensis se desenvolve rapidamente em condiccedilotildees
favoraacuteveis como temperatura e disponibilidade de nutrientes (HILBERT PIGGOT
2004) Em circunstacircncias de ausecircncia de nutrientes ou acuacutemulo de metaboacutelitos
indesejaacuteveis essa bacteacuteria entra em processo de esporulaccedilatildeo durante a fase
estacionaacuteria (POLANCZYK ALVES 2003)
Durante a fase de esporulaccedilatildeo essas bacteacuterias produzem proteiacutenas inseticidas
como cristais parasporais sendo estes compostos por uma ou mais proteiacutenas Cry
tambeacutem conhecidas como part-endotoxinas (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) Essas
toxinas denominadas Cry hidrolisadas atravessam a membrana peritroacutefica e
ligam-se a receptores especiacuteficos presentes nas microvilosidades apicais da
membrana das ceacutelulas colunares presentes no intestino meacutedio causando a
formaccedilatildeo de poros que aumentam a permeabilidade da membrana interferindo no
gradiente iocircnico e no balanccedilo osmoacutetico Dessa maneira ocorre aumento da absorccedilatildeo
de aacutegua o que leva agrave lise e eventual ruptura e desintegraccedilatildeo das ceacutelulas do
intestino meacutedio fazendo o inseto cessar a alimentaccedilatildeo e morrer logo apoacutes por
inaniccedilatildeo ou ainda apoacutes a lise das ceacutelulas do intestino meacutedio o ambiente torna-se
favoraacutevel agrave germinaccedilatildeo dos esporos (POLANCZYK VALICENTE BARETO 2008) e
nesse novo ambiente devido a mistura do conteuacutedo da hemolinfa e do intestino
meacutedio o pH torna-se aacutecido e os esporos se multiplicam de tal forma que o inseto
morre por septicemia (COPPING MENN 2000)
Proteiacutenas Cry satildeo altamente especiacuteficas para o inseto-alvo satildeo inoacutecuos para os
seres humanos animais vertebrados e plantas e satildeo completamente
biodegradaacuteveis (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) sendo considerada portanto um
23
agente seguro para o controle bioloacutegico de insetos na agricultura (LIMA 2010
POLANCZYK ALVES 2003) As diferentes cepas de bacteacuteria produzem vaacuterias
combinaccedilotildees de proteiacutenas Cry que satildeo proteiacutenas consideradas seletivas e
geralmente afetam insetos-alvo de ordens especiacuteficas (CLARK PHILLIPS COATS
2005)
O primeiro biopesticida agrave base de B thuringiensis foi lanccedilado na Franccedila em 1938 e
desde entatildeo mais de 100 formulaccedilotildees foram colocados no mercado mundial devido
agrave eficaacutecia e especificidade (POLANCZYK ALVES 2003) Devido agraves vantagens do
uso do B thuringiensis como agente de controle bioloacutegico sobre insetos-praga das
ordens Coleoptera Diptera Hymenoptera e Lepidoptera aleacutem de espeacutecies de
nematoides aumentando nos uacuteltimos anos o nuacutemero de estirpes isoladas a busca
por cepas mais toacutexicas eacute crescente no mundo inteiro (GEORGE CRICKMORE
2012)
Ateacute o iniacutecio de 1990 apenas trecircs produtos comerciais estavam disponiacuteveis no
mercado brasileiro sendo todos baseados em B thuringiensis Kurstaki com
destaque para o produto Dipelreg que eacute altamente eficiente para mais de 170
lepidoacutepteros-praga (LIMA 2010) Aleacutem deste outros produtos como Ablereg Agreereg
Bac-Control WPreg Bacturreg Dipel WPreg Dipel WGreg Thuricidereg e Xentarireg podem ser
encontrados em formulaccedilotildees de base soacutelida (poacute ou granulada) ou liacutequida (AGROFIT
2003)
Em paiacuteses como a Holanda o Canadaacute e os Paiacuteses Baixos produtos quiacutemicos e
formulados comerciais agrave base de B thuringiensis foram testados sobre lagartas de
D fovealis sob condiccedilotildees de estufa e verificou-se que ambos tiveram accedilatildeo sobre as
lagartas de D fovealis poreacutem observou-se que os formulados agrave base de Bt
mostraram maior eficiecircncia que os produtos quiacutemicos (CFIA 2013) Jaumlckel e
Kurzhals (1995) e Bethke et al (2012) observaram tambeacutem que a eficiecircncia de
produtos comercias agrave base de Bt no controle de lagartas de D fovealis eacute maior nos
estaacutegios de desenvolvimento iniciais
Outra forma de utilizaccedilatildeo de B thuringiensis tem sido por meio da inserccedilatildeo de genes
de toxinas Cry em cultivos transgecircnicos dando origem a plantas Bt o que
proporciona eficaacutecia na forma de controlar insetos-praga e na reduccedilatildeo das
aplicaccedilotildees de produtos quiacutemicos Em plantas transgecircnicas a proteiacutena Cry eacute
produzida continuamente no interior das ceacutelulas protegida da inativaccedilatildeo da luz
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
21
b Entomopatoacutegenos
b1 Nematoides
Os nematoides mais utilizados no controle de insetos pertencem agrave famiacutelia
Steinernematidae Estes tecircm sido aplicados em diversas culturas e mesmo em
outras situaccedilotildees para controle de um grande nuacutemero de insetos (ALVEZ 1998)
Nematoides entomopatogecircnicos jaacute vecircm sendo utilizados em outros paiacuteses no
manejo de D fovealis Stocks e Hodges (2013) citam a utilizaccedilatildeo da espeacutecie
Heterorhabditis bacteriophora (Poinar) (Nematoda Heterorhabditidae) jaacute Jaumlckel e
Kurzhals (1995) relatam que as espeacutecies Steinernema carpocapsae (Weiser) e S
feltiae (Filipjev) (Nematoda Steinernematidae) foram eficientes no controle de D
fovealis em diferentes estaacutedios larvais sendo que no estaacutedio 3 de desenvolvimento
essas espeacutecies proporcionaram 60 e 20 de mortalidade respectivamente
b2 Fungos entomopatogecircnicos
Os fungos entomopatogecircnicos Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok
(Hypocreales Clavicipitaceae) e Beauveria bassiana (Bals) Vuill (Hypocreales
Cordycipitaceae) satildeo muito utilizados devido agrave facilidade de produccedilatildeo ampla
distribuiccedilatildeo geograacutefica variedade de hospedeiros e ocorrecircncia em condiccedilotildees
naturais enzooacuteticas ou epizooacuteticas sendo ainda comumente encontrados no solo
mostrando-se como uma alternativa eficiente devido agrave especificidade com relaccedilatildeo agrave
praga-alvo natildeo afetando outros insetos plantas e animais (ALVES 1998)
b3 Bacteacuteria entomopatogecircnica
A bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner eacute uma bacteacuteria
naturalmente encontrada no solo aeroacutebia ou facultativamente anaeroacutebia gram
22
positiva pertencente agrave famiacutelia Bacillaceae (BOBROWSKI et al 2003) formadora de
esporos pertencentes ao grupo Bacillus cereus (READ et al 2003) que eacute formado
por um complexo de vaacuterias espeacutecies (Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus
mycoides B thuringiensis e Bacillus weihenstephanensis) (POLANCZYK ALVES
2003)
Bacillus thuringiensis foi originalmente descoberto em 1902 por um bioacutelogo japonecircs
Shigetane Ishiwatari poreacutem foi caracterizado em 1911 por Ernst Berliner da
Alemanha quando este pesquisador isolou o bacilo de Anagasta kuehniella Zeller
(Lepidoptera Pyralidae) (POLANCZYK ALVES 2003 LIMA 2010) Desde entatildeo
essa espeacutecie eacute a mais utilizada mundialmente como biopesticida (CAPALBO et al
2008) A espeacutecie B thuringiensis se desenvolve rapidamente em condiccedilotildees
favoraacuteveis como temperatura e disponibilidade de nutrientes (HILBERT PIGGOT
2004) Em circunstacircncias de ausecircncia de nutrientes ou acuacutemulo de metaboacutelitos
indesejaacuteveis essa bacteacuteria entra em processo de esporulaccedilatildeo durante a fase
estacionaacuteria (POLANCZYK ALVES 2003)
Durante a fase de esporulaccedilatildeo essas bacteacuterias produzem proteiacutenas inseticidas
como cristais parasporais sendo estes compostos por uma ou mais proteiacutenas Cry
tambeacutem conhecidas como part-endotoxinas (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) Essas
toxinas denominadas Cry hidrolisadas atravessam a membrana peritroacutefica e
ligam-se a receptores especiacuteficos presentes nas microvilosidades apicais da
membrana das ceacutelulas colunares presentes no intestino meacutedio causando a
formaccedilatildeo de poros que aumentam a permeabilidade da membrana interferindo no
gradiente iocircnico e no balanccedilo osmoacutetico Dessa maneira ocorre aumento da absorccedilatildeo
de aacutegua o que leva agrave lise e eventual ruptura e desintegraccedilatildeo das ceacutelulas do
intestino meacutedio fazendo o inseto cessar a alimentaccedilatildeo e morrer logo apoacutes por
inaniccedilatildeo ou ainda apoacutes a lise das ceacutelulas do intestino meacutedio o ambiente torna-se
favoraacutevel agrave germinaccedilatildeo dos esporos (POLANCZYK VALICENTE BARETO 2008) e
nesse novo ambiente devido a mistura do conteuacutedo da hemolinfa e do intestino
meacutedio o pH torna-se aacutecido e os esporos se multiplicam de tal forma que o inseto
morre por septicemia (COPPING MENN 2000)
Proteiacutenas Cry satildeo altamente especiacuteficas para o inseto-alvo satildeo inoacutecuos para os
seres humanos animais vertebrados e plantas e satildeo completamente
biodegradaacuteveis (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) sendo considerada portanto um
23
agente seguro para o controle bioloacutegico de insetos na agricultura (LIMA 2010
POLANCZYK ALVES 2003) As diferentes cepas de bacteacuteria produzem vaacuterias
combinaccedilotildees de proteiacutenas Cry que satildeo proteiacutenas consideradas seletivas e
geralmente afetam insetos-alvo de ordens especiacuteficas (CLARK PHILLIPS COATS
2005)
O primeiro biopesticida agrave base de B thuringiensis foi lanccedilado na Franccedila em 1938 e
desde entatildeo mais de 100 formulaccedilotildees foram colocados no mercado mundial devido
agrave eficaacutecia e especificidade (POLANCZYK ALVES 2003) Devido agraves vantagens do
uso do B thuringiensis como agente de controle bioloacutegico sobre insetos-praga das
ordens Coleoptera Diptera Hymenoptera e Lepidoptera aleacutem de espeacutecies de
nematoides aumentando nos uacuteltimos anos o nuacutemero de estirpes isoladas a busca
por cepas mais toacutexicas eacute crescente no mundo inteiro (GEORGE CRICKMORE
2012)
Ateacute o iniacutecio de 1990 apenas trecircs produtos comerciais estavam disponiacuteveis no
mercado brasileiro sendo todos baseados em B thuringiensis Kurstaki com
destaque para o produto Dipelreg que eacute altamente eficiente para mais de 170
lepidoacutepteros-praga (LIMA 2010) Aleacutem deste outros produtos como Ablereg Agreereg
Bac-Control WPreg Bacturreg Dipel WPreg Dipel WGreg Thuricidereg e Xentarireg podem ser
encontrados em formulaccedilotildees de base soacutelida (poacute ou granulada) ou liacutequida (AGROFIT
2003)
Em paiacuteses como a Holanda o Canadaacute e os Paiacuteses Baixos produtos quiacutemicos e
formulados comerciais agrave base de B thuringiensis foram testados sobre lagartas de
D fovealis sob condiccedilotildees de estufa e verificou-se que ambos tiveram accedilatildeo sobre as
lagartas de D fovealis poreacutem observou-se que os formulados agrave base de Bt
mostraram maior eficiecircncia que os produtos quiacutemicos (CFIA 2013) Jaumlckel e
Kurzhals (1995) e Bethke et al (2012) observaram tambeacutem que a eficiecircncia de
produtos comercias agrave base de Bt no controle de lagartas de D fovealis eacute maior nos
estaacutegios de desenvolvimento iniciais
Outra forma de utilizaccedilatildeo de B thuringiensis tem sido por meio da inserccedilatildeo de genes
de toxinas Cry em cultivos transgecircnicos dando origem a plantas Bt o que
proporciona eficaacutecia na forma de controlar insetos-praga e na reduccedilatildeo das
aplicaccedilotildees de produtos quiacutemicos Em plantas transgecircnicas a proteiacutena Cry eacute
produzida continuamente no interior das ceacutelulas protegida da inativaccedilatildeo da luz
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
22
positiva pertencente agrave famiacutelia Bacillaceae (BOBROWSKI et al 2003) formadora de
esporos pertencentes ao grupo Bacillus cereus (READ et al 2003) que eacute formado
por um complexo de vaacuterias espeacutecies (Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus
mycoides B thuringiensis e Bacillus weihenstephanensis) (POLANCZYK ALVES
2003)
Bacillus thuringiensis foi originalmente descoberto em 1902 por um bioacutelogo japonecircs
Shigetane Ishiwatari poreacutem foi caracterizado em 1911 por Ernst Berliner da
Alemanha quando este pesquisador isolou o bacilo de Anagasta kuehniella Zeller
(Lepidoptera Pyralidae) (POLANCZYK ALVES 2003 LIMA 2010) Desde entatildeo
essa espeacutecie eacute a mais utilizada mundialmente como biopesticida (CAPALBO et al
2008) A espeacutecie B thuringiensis se desenvolve rapidamente em condiccedilotildees
favoraacuteveis como temperatura e disponibilidade de nutrientes (HILBERT PIGGOT
2004) Em circunstacircncias de ausecircncia de nutrientes ou acuacutemulo de metaboacutelitos
indesejaacuteveis essa bacteacuteria entra em processo de esporulaccedilatildeo durante a fase
estacionaacuteria (POLANCZYK ALVES 2003)
Durante a fase de esporulaccedilatildeo essas bacteacuterias produzem proteiacutenas inseticidas
como cristais parasporais sendo estes compostos por uma ou mais proteiacutenas Cry
tambeacutem conhecidas como part-endotoxinas (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) Essas
toxinas denominadas Cry hidrolisadas atravessam a membrana peritroacutefica e
ligam-se a receptores especiacuteficos presentes nas microvilosidades apicais da
membrana das ceacutelulas colunares presentes no intestino meacutedio causando a
formaccedilatildeo de poros que aumentam a permeabilidade da membrana interferindo no
gradiente iocircnico e no balanccedilo osmoacutetico Dessa maneira ocorre aumento da absorccedilatildeo
de aacutegua o que leva agrave lise e eventual ruptura e desintegraccedilatildeo das ceacutelulas do
intestino meacutedio fazendo o inseto cessar a alimentaccedilatildeo e morrer logo apoacutes por
inaniccedilatildeo ou ainda apoacutes a lise das ceacutelulas do intestino meacutedio o ambiente torna-se
favoraacutevel agrave germinaccedilatildeo dos esporos (POLANCZYK VALICENTE BARETO 2008) e
nesse novo ambiente devido a mistura do conteuacutedo da hemolinfa e do intestino
meacutedio o pH torna-se aacutecido e os esporos se multiplicam de tal forma que o inseto
morre por septicemia (COPPING MENN 2000)
Proteiacutenas Cry satildeo altamente especiacuteficas para o inseto-alvo satildeo inoacutecuos para os
seres humanos animais vertebrados e plantas e satildeo completamente
biodegradaacuteveis (BRAVO GILL SOBEROacuteN 2007) sendo considerada portanto um
23
agente seguro para o controle bioloacutegico de insetos na agricultura (LIMA 2010
POLANCZYK ALVES 2003) As diferentes cepas de bacteacuteria produzem vaacuterias
combinaccedilotildees de proteiacutenas Cry que satildeo proteiacutenas consideradas seletivas e
geralmente afetam insetos-alvo de ordens especiacuteficas (CLARK PHILLIPS COATS
2005)
O primeiro biopesticida agrave base de B thuringiensis foi lanccedilado na Franccedila em 1938 e
desde entatildeo mais de 100 formulaccedilotildees foram colocados no mercado mundial devido
agrave eficaacutecia e especificidade (POLANCZYK ALVES 2003) Devido agraves vantagens do
uso do B thuringiensis como agente de controle bioloacutegico sobre insetos-praga das
ordens Coleoptera Diptera Hymenoptera e Lepidoptera aleacutem de espeacutecies de
nematoides aumentando nos uacuteltimos anos o nuacutemero de estirpes isoladas a busca
por cepas mais toacutexicas eacute crescente no mundo inteiro (GEORGE CRICKMORE
2012)
Ateacute o iniacutecio de 1990 apenas trecircs produtos comerciais estavam disponiacuteveis no
mercado brasileiro sendo todos baseados em B thuringiensis Kurstaki com
destaque para o produto Dipelreg que eacute altamente eficiente para mais de 170
lepidoacutepteros-praga (LIMA 2010) Aleacutem deste outros produtos como Ablereg Agreereg
Bac-Control WPreg Bacturreg Dipel WPreg Dipel WGreg Thuricidereg e Xentarireg podem ser
encontrados em formulaccedilotildees de base soacutelida (poacute ou granulada) ou liacutequida (AGROFIT
2003)
Em paiacuteses como a Holanda o Canadaacute e os Paiacuteses Baixos produtos quiacutemicos e
formulados comerciais agrave base de B thuringiensis foram testados sobre lagartas de
D fovealis sob condiccedilotildees de estufa e verificou-se que ambos tiveram accedilatildeo sobre as
lagartas de D fovealis poreacutem observou-se que os formulados agrave base de Bt
mostraram maior eficiecircncia que os produtos quiacutemicos (CFIA 2013) Jaumlckel e
Kurzhals (1995) e Bethke et al (2012) observaram tambeacutem que a eficiecircncia de
produtos comercias agrave base de Bt no controle de lagartas de D fovealis eacute maior nos
estaacutegios de desenvolvimento iniciais
Outra forma de utilizaccedilatildeo de B thuringiensis tem sido por meio da inserccedilatildeo de genes
de toxinas Cry em cultivos transgecircnicos dando origem a plantas Bt o que
proporciona eficaacutecia na forma de controlar insetos-praga e na reduccedilatildeo das
aplicaccedilotildees de produtos quiacutemicos Em plantas transgecircnicas a proteiacutena Cry eacute
produzida continuamente no interior das ceacutelulas protegida da inativaccedilatildeo da luz
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
23
agente seguro para o controle bioloacutegico de insetos na agricultura (LIMA 2010
POLANCZYK ALVES 2003) As diferentes cepas de bacteacuteria produzem vaacuterias
combinaccedilotildees de proteiacutenas Cry que satildeo proteiacutenas consideradas seletivas e
geralmente afetam insetos-alvo de ordens especiacuteficas (CLARK PHILLIPS COATS
2005)
O primeiro biopesticida agrave base de B thuringiensis foi lanccedilado na Franccedila em 1938 e
desde entatildeo mais de 100 formulaccedilotildees foram colocados no mercado mundial devido
agrave eficaacutecia e especificidade (POLANCZYK ALVES 2003) Devido agraves vantagens do
uso do B thuringiensis como agente de controle bioloacutegico sobre insetos-praga das
ordens Coleoptera Diptera Hymenoptera e Lepidoptera aleacutem de espeacutecies de
nematoides aumentando nos uacuteltimos anos o nuacutemero de estirpes isoladas a busca
por cepas mais toacutexicas eacute crescente no mundo inteiro (GEORGE CRICKMORE
2012)
Ateacute o iniacutecio de 1990 apenas trecircs produtos comerciais estavam disponiacuteveis no
mercado brasileiro sendo todos baseados em B thuringiensis Kurstaki com
destaque para o produto Dipelreg que eacute altamente eficiente para mais de 170
lepidoacutepteros-praga (LIMA 2010) Aleacutem deste outros produtos como Ablereg Agreereg
Bac-Control WPreg Bacturreg Dipel WPreg Dipel WGreg Thuricidereg e Xentarireg podem ser
encontrados em formulaccedilotildees de base soacutelida (poacute ou granulada) ou liacutequida (AGROFIT
2003)
Em paiacuteses como a Holanda o Canadaacute e os Paiacuteses Baixos produtos quiacutemicos e
formulados comerciais agrave base de B thuringiensis foram testados sobre lagartas de
D fovealis sob condiccedilotildees de estufa e verificou-se que ambos tiveram accedilatildeo sobre as
lagartas de D fovealis poreacutem observou-se que os formulados agrave base de Bt
mostraram maior eficiecircncia que os produtos quiacutemicos (CFIA 2013) Jaumlckel e
Kurzhals (1995) e Bethke et al (2012) observaram tambeacutem que a eficiecircncia de
produtos comercias agrave base de Bt no controle de lagartas de D fovealis eacute maior nos
estaacutegios de desenvolvimento iniciais
Outra forma de utilizaccedilatildeo de B thuringiensis tem sido por meio da inserccedilatildeo de genes
de toxinas Cry em cultivos transgecircnicos dando origem a plantas Bt o que
proporciona eficaacutecia na forma de controlar insetos-praga e na reduccedilatildeo das
aplicaccedilotildees de produtos quiacutemicos Em plantas transgecircnicas a proteiacutena Cry eacute
produzida continuamente no interior das ceacutelulas protegida da inativaccedilatildeo da luz
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
24
ultravioleta sendo altamente eficaz contra insetos mastigadores e insetos que
possuem o haacutebito de permanecerem no interior do tecido da planta (PARDO-
LOacutePEZ SOBEROacuteN BRAVO 2012) Em 2010 o Brasil foi liacuteder no crescimento das
aacutereas plantadas pelo quarto ano consecutivo aumentando a sua aacuterea de plantaccedilotildees
biotecnoloacutegicas mais do que qualquer outro paiacutes (JAMES 2012) Poreacutem para a
cultura do morangueiro essa tecnologia ainda natildeo eacute aplicada
225 Extratos Vegetais
As substacircncias quiacutemicas extraiacutedas das plantas normalmente satildeo classificadas em
metaboacutelitos primaacuterios e secundaacuterios (VIVAN 2005) Os diversos compostos
orgacircnicos produzidos pelas plantas que natildeo possuem funccedilatildeo direta no seu
crescimento e desenvolvimento satildeo chamados de metaboacutelitos secundaacuterios esses
frequentemente satildeo sintetizados para exercerem atividade de atraccedilatildeo de
polinizadores adaptaccedilatildeo ambiental e fitoproteccedilatildeo (TAIZ ZEIGHER 2004) Essa
diversidade quiacutemica eacute o resultado do processo evolutivo das plantas que estaacute
relacionado em parte pela sua imobilidade (AGUIAR-MENEZES 2005)
Os inseticidas botacircnicos satildeo derivados de plantas ou partes das mesmas podendo
ser obtidos por diferentes metodologias de extraccedilatildeo como a preparaccedilatildeo do material
vegetal bruto a partir de extratos de plantas resinas formuladas e isolamento de
produtos quiacutemicos puros (WIESBROOK 2004)
Vendramim e Castiglioni (2000) relataram que jaacute foram identificados em mais de
200000 espeacutecies de plantas 100000 metaboacutelitos secundaacuterios e estes variam
amplamente em estrutura quiacutemica e funccedilatildeo sendo constituiacutedos por compostos
fenoacutelicos incluindo em sua subcategoria os flavonoides fitoestroacutegenos compostos
organossulfurados (COS) fibras soluacuteveis isotiocianatos e monoterpenos
(STRINGHETA et al 2007) Esses compostos podem ser encontrados em raiacutezes
folhas e sementes ou produzidos durante o crescimento e o desenvolvimento de
determinadas plantas apresentando accedilatildeo sobre o metabolismo de outros
organismos (TAIZ ZEIGHER 2004)
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
25
Extratos vegetais possuem a vantagem de serem compatiacuteveis com as outras opccedilotildees
de manejo de insetos como o uso de feromocircnios oacuteleos sabonetes
entomopatoacutegenos predadores e parasitoides o que aumenta as possibilidades de
integraccedilatildeo em um programa de Manejo Integrado de Pragas (MOLINA 2001 CELIS
et al 2008)
Numerosos pesticidas botacircnicos tecircm sido colocados no mercado durante os uacuteltimos
10 anos (TIILIKKALA et al 2011) As plantas inseticidas mais promissoras
encontram-se nas famiacutelias Meliaceae Rutaceae Asteraceae Annonaceae
Labiatae Canellaceae Myrtaceae e Piperaceae (FERNANDES RIBEIRO AGUIAR-
MENEZES 2005) Poreacutem outras plantas com atividade inseticida vecircm se
destacando e ganhando espaccedilo como o fumo (Nicotiana tabacum L) (Solanaceae) e
o alho (Allium sativum L) (Liliaceae)
As propriedades inseticidas do fumo foram reconhecidas na primeira metade do
seacuteculo XVI (CELIS et al 2008) A eficiecircncia do extrato de fumo N tabacum deve-se
agrave presenccedila de substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina sendo esta
uacuteltima encontrada em maior concentraccedilatildeo (SAITO LUCCHINI 1998) Em 1890 a
nicotina foi reconhecida como o principal ingrediente ativo do fumo (GRUBER
LOacutePEZ 2004)
A nicotina eacute um alcaloide derivado de vaacuterias plantas principalmente N tabacum L
Nicotina rustica L Nicotina glutinosa L e outras Solanaceae Os extratos de folhas
de N tabacum e N rustica apresentam uma concentraccedilatildeo de 2-5 e 5-14 de
nicotina respectivamente (GRUBER LOacutePEZ 2004) A nicotina eacute uma toxina que
atua no sistema nervoso central agindo de maneira a imitar a ligaccedilatildeo da acetilcolina
competindo com esta pelos receptores na membrana poacutes-sinaacuteptica da junccedilatildeo
neuromuscular gerando novos impulsos que causam contraccedilotildees espasmos
convulsotildees e finalmente a morte (WIESBROOK 2004 AGUIAR-MENEZES 2005
CELIS et al 2008)
No mercado inseticidas conhecidos como neonicotinoides por exemplo
Imidacloprid Tiacloprida Nitempiram Acetamiprida Tiametoxam entre outros tecircm
como princiacutepio ativo coacutepias sinteacuteticas ou decorrentes da estrutura da nicotina (CELIS
et al 2008) Alguns produtos comercializados apresentam na formulaccedilatildeo liacutequida
concentrada 40 de sulfato de nicotina sendo diluiacutedo e pulverizado (GRUBER
LOacutePEZ 2004 AGUIAR-MENEZES 2005)
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
26
O alho (A sativum L) por sua vez eacute utilizado principalmente como planta aromaacutetica
e condimentar Poreacutem seus constituintes ativos lhe conferem propriedades
medicinais favoraacuteveis agrave sauacutede humana aleacutem de apresentar atividade bactericida
antifuacutengica e repelente de pragas de espeacutecies vegetais de interesse agronocircmico
sendo empregado em muitos paiacuteses como defensivo natural (SOUZA ARAUacuteJO
NASCIMENTO 2007 AGUIAR-MENEZES 2005)
Na composiccedilatildeo fitoquiacutemica ativa do alho haacute mais de 100 compostos biologicamente
ativos destacando-se compostos sulfurados como o ajoeno os organossulfurados
o tiosulfinatos e a alicina sendo este uacuteltimo considerado um dos compostos
bioloacutegicos mais importantes produzidos pelo alho (LEDEZMA APITZ-CASTRO
2006)
A propriedade inseticida do alho eacute atribuiacuteda agrave complexaccedilatildeo da aliinase e aliina
processo no qual eacute formado a alicina responsaacutevel pelo aroma tiacutepico do alho e que
funciona como meio de defesa da planta contra herbiacutevoros sendo a estrutura
quiacutemica da alicina descoberta em 1947 (TALAMINI STADNIK 2004)
A alicina eacute produzida pela interaccedilatildeo do aminoaacutecido natildeo proteico aliina [(+)-S-allil-L-
sulfoacutexido cisteiacutena] abundante nos dentes de alho com a enzima aliinase Sua
formaccedilatildeo eacute influenciada pela moagem do alho durante o processo de secagem
pela temperatura que este eacute seco e pela umidade aleacutem de diferenccedilas varietais e de
tratos culturais (KRIS-ETHERTON et al 2002) A alicina pura eacute uma moleacutecula
volaacutetil sendo pouco soluacutevel em soluccedilotildees aquosas e altamente instaacutevel convertendo-
-se rapidamente em mono- di- e trissulfeto e outros compostos como o ajoeno
(SINGH SINGH 2008)
Aleacutem da mortalidade os produtos botacircnicos podem ter diferentes efeitos sobre os
insetos como a inibiccedilatildeo da alimentaccedilatildeo ou deterrecircncia a reduccedilatildeo do consumo
alimentar o atraso no desenvolvimento as deformaccedilotildees e a esterilidade O uso de
produtos botacircnicos surge como uma opccedilatildeo de manejo de pragas e que associado a
outras praacuteticas pode contribuir para a reduccedilatildeo de doses e aplicaccedilotildees de inseticidas
quiacutemicos que apresentam problemas aos organismos beneacuteficos e ao meio ambiente
(ONODY 2009)
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
27
3 REFEREcircNCIAS
AGROFIT Sistema de Agrotoacutexicos Fitossanitaacuterios Copyright copy 2003 Disponiacutevel em lthttpagrofitagriculturagovbragrofit_consprincipal_agrofit_consgt Acesso em 13 jan 2014
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documento 205) 2005
ALHO C J R Concluding remarks overall impacts on biodiversity and future perspectives for conservation in the Pantanal biome Brazilian Journal of Biology v 71 p 337-341 2011
ALVES F R JESUS JUNIOR W C de PRATISSOLI D POLANCZYK R A ZANUacuteNCIO JUNIOR J S HOLTZ A M VIANNA U R Manejo Fitossanitaacuterio de doenccedilas e pragas ndash Novas perspectivas In JESUS JUNIOR et al Atualidades em defesa fitossanitaacuteria Alegre-ES 2007 p 383 ndash 415
ALVES S B Controle microbiano de insetos Piracicaba FEALQ 1998
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS S D MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
BRAMBILA J STOCKS I The European Pepper Moth Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) a Mediterranean Pest Moth Discovered in Central Florida Pest Alert created p 1-4 2010
BRAVO A GILL S S SOBEROacuteN M Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon v 49 n 4 p 423-435 2007
CAPALBO D M F MORAES I O ARANTES O M N REGIS L N VEGA O F BENINTENDE G B GUIMARAtildeES S E ARRUDA R O M MORAES R O Produccedilatildeo de bacteacuterias entomopatogecircnicas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 239-256
CASTRO R L de Melhoramento Geneacutetico do Morangueiro Avanccedilos no Brasil Embrapa Clima Temperado 296p (Documentos 124) 2004
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
28
CELIS A MENDOZA C PACHOacuteN M CARDONA J DELGADO W CUCA L E Extractos vegetales utilizados como biocontroladores con eacutenfasis en la familia Piperaceae Una revisioacuten Agronomiacutea Colombiana v 26 n 1 p 97-106 2008
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
CLARK B W PHILLIPS T A COATS J R Environmental Fate and Effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Proteins from Transgenic Crops a Review Journal of Agricultural and Food Chemistry v 53 n12 p 4643-4653 2005
COPPING L G MENN J J Review biopesticides a review of their action apllications and efficacy Pest Management Science v 56 n5 p 651-676 2000
DEVENTER P V Water trap best for catching Duponchelia In the greenhouse Fruit and Veg Tech 91 p 19-19 2009
FERNANDES M C A RIBEIRO R L D AGUIAR-MENEZES E L Manejo agroecoloacutegico de fitoparasitas In AQUINO A M de ASSIS R L Agroecologia Princiacutepios e teacutecnicas para uma agricultura orgacircnica sustentaacutevel Brasiacutelia Embrapa Informaccedilatildeo Tecnoloacutegica 2005 p 273-322
FORNAZIER M J PRATISSOLI D Pragas do morangueiro In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 59- 68
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GEORGE Z CRICKMORE N Bacillus thuringiensis applications in Agriculture England Springer Science 2012
GILL S European Pepper Moth Found in Maryland Integrated Pest Management for Commercial Horticulture University of Maryland Extension ndash Solutions in your community Pest Alert Created p 1-4 2013
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
HILBERT D W PIGGOT P J Compartmentalization of gene expression during Bacillus subtilis spore formation Microbiology and Molecular Biology Reviews v 68 n 2 p 234-262 2004
HOFFMAN K Plant Health And Pest Prevention Services Pest Detection -Emergency Projects A Crambid Moth Duponchelia fovealis (Zeller) County of Kern p 1-2 2010
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
29
INCAPER Morango capixaba garantia de qualidade Informativo especial do Instituto Capixaba de Pesquisa Assistecircncia Teacutecnica e Extensatildeo Rural Ano 1 n1 2010
ISMAN M B Neemand other botanical insecticides barriers to commercialization Phytoparasitica v 25 n 4 p 339-344 1997
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie Berlim Selbstverlag 1995 p 7-7
JAMES C Global Status of Commercialized BiotechGM Crops 2012 Disponiacutevel
em lthttpwwwisaaaorgresourcespublicationsbriefs44highlightsgt Acesso em
16 jan 2014
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
KRIS-ETHERTON P M HECKER K D BONANOME A COVAL S M BINKOSK A E HILPERT K F GRIEL A E ETHERTON T D Bioactive Compounds in Foods Their Role in the Prevention of Cardiovascular Disease and Cancer The American Journal of Medicine v 113 n 9 p 71-88 2002
LEDEZMA E APITZ-CASTRO R Ajoene el principal compuesto activo derivado del ajo (Allium sativum) un nuevo agente antifuacutengico Revista Iberoamericana de Micologiacutea v 23 p75-80 2006
LIMA G M de S Proteiacutenas bioinseticidas produzidas por Bacillus thuringiensis Anais da Academia Pernambucana de Ciecircncia Agronocircmica Recife v 7 p119-137 2010
MOLINA N Uso de extractos botanicos en el control de plagas y enfermedades In Avances en el fomento de productos fitosanitarios no sinteticos Manejo integrado de plagas Costa Rica CATIE 2001 p 56-59
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
OLIVEIRA R P de SCIVITTARO W B Produccedilatildeo de frutos de morango em funccedilatildeo de diferentes periacuteodos de vernalizaccedilatildeo das mudas Horticultura Brasileira v 27 n 1 p 91-95 2009
ONODY H C Estudo da fauna de Hymenoptera parasitoides associados a hortas orgacircnicas e da utilizaccedilatildeo de extratos vegetais no controle de Plutella xylostella (Lepidoptera Plutellidae) 2009 142 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Federal de Satildeo Carlos Satildeo Carlos 2009
PARDO-LOacutePEZ L SOBEROacuteN M BRAVO A Bacillus thuringiensis insecticidal three-domain Cry toxins mode of action insect resistance and consequences for crop protection Microbiology Reviews v 37 n 1 p 3-22 2012
PIJNAKKER J Duponchelia fovealis le leacutepidoptegravere redouteacute des plantes en pot aux Pays-Bas Revue Horticole v 429 p 51-53 2001
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
30
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
PRATISSOLI D FORNAZIER M J HOLTZ A M GONCcedilALVES J R CHIORAMITAL A B ZAGO H B Ocorrecircncia de Trichogramma pretiosum em aacutereas comerciais de tomate no Espirito Santo em regiotildees de diferentes altitudes Horticultura Brasileira v 21 p 73-76 2002
READ T D PETERSON S N TOURASSE NICOLAS BAILLIE L W PAULSEN I T NELSON K E TETTELIN H FOUTS D E EISEN J A GILL S R HOLTZAPPLE E K OslashKSTAD O A HELGASON E RILSTONE J WU M KOLONAY J F BEANAN M J DODSON R J BRINKAC L M GWINN M DEBOY R T MADPU R DAUGHERTY S C DURKIN A S HAFT D H NELSON W C PETERSON J D POP M KHOURI H M RADUNE D BENTON J L MAHAMOUD Y JIANG L HANCE I R WEIDMAN J F BERRY K J PLAUT R D WOLF A M WATKINS K L NIERMAN W C HAZEN A CLINE R REDMOND C THWAITE J E WHITE OWEN SALZBERG S L THOMASONQ B FRIEDLANDER A M KOEHLER T M HANNAQ P C KOLSTOslash A FRASER C M The genome sequence of Bacillus anthracis Ames and comparison to closely related bacteria Nature v 423 p 81-86 2003
RICHTER E Nuumltzlingseinsatz im Zierpflanzenbau unter Glas Handbuch zum praktischen Arbeiten Ergebnisse aus den Verbundvorhaben Nuumltzlinge I und Nuumltzlinge II Berlim Selbstverlag 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente 46p (Seacuteries Documentos 12) 1998
SALLAM M N OVERHOLT W A KAIRU E Dispersal of the exotic parasitoid Cotesia flavipes in a new ecosystem Entomologia Experimentalis et Applicata v 98 p 211ndash217 2001
SANTOS JUacuteNIOR H J G MARQUES E J PRATISSOLI D MACHADO L C ANDRADE G S Efeito de Bacillus thuringiensis (Bacillaceae) sobre paracircmetros bioloacutegicos do parasitoide Trichogramma pretiosum (Trichogrammatidae) Natureza on line v 9 n 1 p 1-6 2011
SINGH V K SINGH D K Pharmacological effects of garlic (Allium sativum L) Annual Review of Biomedical Sciences v 10 p 6-26 2008
SOUZA A E F ARAUacuteJO E NASCIMENTO L C Atividade antifuacutengica de extratos de alho e capim-santo sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-471 2007
STOCKS S D HODGES A 2013 European pepper moth or southern
European marsh pyralid Disponiacutevel em
lthttpentnemdeptufleducreaturesveglepseuropean_pepper_mothhtmgt
Acessado em 26 dez 2013
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
31
STRINGHETA P C OLIVEIRA T T de GOMES R C AMARAL M da P H do CARVALHO A F de VILELA M A P Poliacuteticas de sauacutede e alegaccedilotildees de propriedades funcionais e de sauacutede para alimentos no Brasil Revista Brasileira de Ciecircncias Farmacecircuticas v 43 n 2 p 181-194 2007
TAIZ L ZEIGER E Fisiologia Vegetal 3 ed Porto Alegre Artmed 2004
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas de plantas In TALAMINI V STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de Plantas Florianoacutepolis CCAUFSF 2004 p 45-62
TIILIKKALA K LINDQVIST I HAGNER M SETAumlLAuml H PERDIKIS D Use of botanical pesticides in modern plant protection In STOYTCHEVA M Pesticides in the modern world ndash Pesticides use and management Croatia Intechopen 2011 p 259- 272
VENDRAMIM J D CASTIGLIONI E Aleloquiacutemicos resistecircncia de plantas e plantas inseticidas In GUEDES J C COSTA I D da CASTIGLIONI E Bases e teacutecnicas do manejo de insetos Santa Maria Palloti 2000 p 113-128
VIVAN M P Uso do cinamomo (Melia azedarach) como alternativo aos agroquiacutemicos no controle do carrapato bovino (Boophilus microplus) 2005 72 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Agroecossistemas) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Agroecossistemas Universidade Federal de Santa Catarina Florianoacutepolis 2005
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than conventional insecticides Pesticide Review v17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
ZIMMERMANN O Use of Trichogramma wasps in Germany Present status of research and commercial application of egg parasitoids against lepidopterous pests for crop Gesunde Pflanzen v 56 p 157 -166 2004
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
32
CAPIacuteTULO 2
SUSCETIBILIDADE DE Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) A
Bacillus thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
RESUMO
A Duponchelia fovealis foi relatada ocasionando seacuterios problemas agrave cultura do
morangueiro no estado do Espiacuterito Santo Por se tratar de uma praga recente ainda
natildeo haacute registro de produtos para seu controle Analisando esse cenaacuterio aleacutem eacute
claro da necessidade de uma agricultura mais desenvolvida e sustentaacutevel
pesquisas com agentes de controle bioloacutegico surgem como alternativa viaacutevel para o
manejo desse inseto-praga Mediante esse contexto este trabalho teve como
objetivo estudar a eficiecircncia de formulados comerciais Agreereg e Dipel WPreg agrave base
de B thuringiensis sobre D fovealis avaliando-se a patogenicidade e a virulecircncia
Para isso os bioensaios foram realizados em bandejas contendo microtubos de
acriacutelico preenchidos com dieta artificial Em cada microtubo foi inoculado sobre a
dieta 70 microL de cada formulado comercial na concentraccedilatildeo 1 x 108 esporosmiddotmL-1
Posteriormente 50 lagartas de cada estaacutedio de desenvolvimento foram
acondicionadas individualmente caracterizando um tratamento A mortalidade foi
avaliada diariamente ateacute o 7ordm dia Em seguida avaliou-se a virulecircncia dos
respectivos formulados atraveacutes da estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) para o
estaacutedio de maior suscetibilidade Em virtude dos resultados encontrados observou-
se que o estaacutegio inicial de desenvolvimento apresentou mortalidades superiores a
90 e 80 para os produtos Agreereg e Dipel WPreg respectivamente Os resultados
demonstram a patogenicidade e a virulecircncia de ambos os formulados de B
thuringiensis agrave D fovealis Entretanto estudos em condiccedilotildees de semicampo e campo
satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo fitossanitaacuterio
Palavras-Chave Controle microbiano Entomopatoacutegenos Manejo Integrado de
Pragas
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
33
ABSTRACT
Susceptibility of Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) to Bacillus
thuringiensis BERLINER (BACILLACEAE)
Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera Crambidae) was recently reported in
strawberry plantations in the state of Espiacuterito Santo causing major problems to the
crops but by being a recent plague there is no products registration for its control
Despite of the need for a more developed and sustainable agriculture researches
with biological control agents and plant extracts are also an alternative for the
management of this insect pest In this scenario this study was carried out to assess
the efficiency of commercial formulated based on B thuringiensis Agreereg and Dipel
WPreg on D fovealis Trays containing acrylic microtubes and filled with artificial diet
were used in the bioassays to evaluate the pathogenicity and virulence of the two
commercial formulations Inside each microtube was inoculated 70 microL of commercial
formula on the diet at a concentration 1 x 108 sporesmL-1 Then 50 caterpillar of
each stage were individually placed in these microtubes to form a treatment Mortality
was assessed daily until the 7ordm day Then the virulence of each formulated was
evaluated by estimating the lethal concentration ( LC50 ) for the stage with the
greatest susceptibility In view of the results it was observed that the initial
development stage showed mortalities above 90 and 80 for Agreereg and Dipelreg
WP respectively products Both formulated based on B thuringiensis showed
pathogenicity and virulence to D fovealis
Keywords Microbial control Entomopathogens Integrated Pest Management
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
34
4 INTRODUCcedilAtildeO
A cultura do morangueiro se destaca pela importacircncia no estado do Espiacuterito Santo
(BALNINO et al 2006) Entretanto atualmente foi constatada uma nova espeacutecie de
inseto-praga em seu cultivo que ocasiona grandes perdas Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae) Esse inseto caracteriza-se por ser uma praga
poliacutefaga que pode ocorrer em aproximadamente 38 famiacutelias de plantas hospedeiras
No territoacuterio capixaba o ataque destaca-se nos cultivos de morango (Fragaria x
ananassa Duch) em cultivos de tuacutenel alto e baixo Poreacutem natildeo existem registros de
produtos quiacutemicos ou bioloacutegicos para seu controle (FORNAZIER et al 2012)
A busca pela agricultura sustentaacutevel e com maior preocupaccedilatildeo em relaccedilatildeo ao meio
ambiente requer mudanccedilas no meacutetodo convencional de produccedilatildeo Um meacutetodo
alternativo eacute o uso de inseticidas bioloacutegicos que satildeo utilizados haacute mais de 50 anos
no paiacutes (BOBROWSKI et al 2003) Entre os agentes bioloacutegicos utilizados a
bacteacuteria entomopatogecircnica Bacillus thuringiensis Beliner (Bacillaceae) apresenta
resultados promissores em outros paiacuteses de ocorrecircncia desse inseto-praga
(POLANCZYK VALICENTE BARRETO 2008)
Estudos realizados na Califoacuternia mostram que os produtos agrave base de B thuringiensis
tecircm sido utilizados como meio de controle seletivo para D fovealis (BETHKE
VANDER MEY 2010) Bioinseticidas como Dipelreg que possui cepas de B
thuringiensis satildeo sugeridos como larvicidas em regiotildees da Europa (MURPHY
2008) como por exemplo na Alemanha cujos relatos demonstram a eficiecircncia do
mesmo na reduccedilatildeo de 40 da populaccedilatildeo de D fovealis (JAumlCKEL KURZHALS
1995)
Buscando aprimorar tecnologias promissoras no manejo de D fovealis no Brasil
este estudo tem como objetivo a avaliaccedilatildeo da suscetibilidade da referida praga aos
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1) visando sua utilizaccedilatildeo no manejo
integrado de pragas
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
35
41 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
411 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
-eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
36
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
412 Suscetibilidade de D fovealis a formulados de Bacillus thuringiensis
Para avaliar a suscetibilidade de D fovealis a B thuringiensis foram utilizados os
formulados comerciais Agreereg (B thuringiensis var aizawai GC-91 fabricado por Bio
Controle Meacutetodos de Controle de Pragas Ltda lote 001-13-15600 ) e Dipel WPreg (B
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 fabricado por Sumitomo Chemical do
Brasil Representaccedilotildees Ltda lote 026-13-4106) Para cada produto foi feita a diluiccedilatildeo
em aacutegua destilada esteacuteril e em seguida uma aliacutequota de 1 mL da suspensatildeo foi
diluiacuteda 100 vezes em aacutegua destilada onde a concentraccedilatildeo de esporos foi
determinada por meio de leitura em cacircmara de Neubauerreg Apoacutes a leitura a
concentraccedilatildeo de cada produto foi ajustada para 1 x 108 esporosmiddotmL-1 por meio de
diluiccedilotildees sequenciais
Os ensaios de patogenicidade para cada formulado foram conduzidos
separadamente em bandejas confeccionadas com microtubos de acriacutelico de 30 x
20 cm (altura x diacircmetro) onde foram adicionados 2 mL de dieta artificial utilizada
na fase de criaccedilatildeo de D fovealis Posteriormente 70 microL de cada formulado
contendo 1 x 108 esporosmiddotmL-1 foi inoculado nos microtubos de acriacutelico contendo
dieta-artificial e apoacutes a evaporaccedilatildeo do excesso de umidade 50 lagartas de a partir
de cada iacutenstar foram acondicionadas individualmente em cada microtubo de acriacutelico
Os iacutenstares foram determinados em ensaios preliminares a partir de mediccedilotildees da
caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados) Cada grupo de 10 lagartas foi
considerado como uma repeticcedilatildeo perfazendo desta forma 5 repeticcedilotildees por
tratamento (inseticida agrave base de B thuringiensis) O mesmo procedimento foi
realizado para a testemunha de cada iacutenstar poreacutem utilizando somente aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta
O material experimental foi acondicionado em cacircmara climatizada (25plusmn1degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado 12h apoacutes a inoculaccedilatildeo do inseto para verificar
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
37
se ocorreu morte devido agrave inoculaccedilatildeo da lagarta As avaliaccedilotildees posteriores foram
realizadas diariamente ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as
lagartas
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [produtos agrave base de B thuringiensis x
Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia sendo as
meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para confirmar a eficiecircncia do
teste este foi realizado em geraccedilotildees seguintes A mortalidade corrigida foi calculada
em relaccedilatildeo agrave testemunha pela foacutermula de Abbott (1925) Para tal foi o utilizado o
programa Assistat
413 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50)
Os dois produtos testados no experimento de suscetibilidade foram utilizados para a
estimativa da CL50 Para cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas
equidistantes por meio de escala logariacutetmica Na testemunha foi utilizada aacutegua
destilada esteacuteril sobre a dieta artificial O experimento foi conduzido em cacircmara
climatizada (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) e avaliado diariamente ateacute o
7ordm dia para verificar o efeito letal dos isolados sobre as lagartas As concentraccedilotildees
letais foram estimadas usando a anaacutelise de Probit Para tal foi utilizado o programa
Polo Pc
42 RESULTADOS E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F=3402
p=0034) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios dentro do
fator produto e vice-versa Independente do produto foi observada diferenccedila na
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
38
mortalidade em funccedilatildeo dos diferentes estaacutedios de desenvolvimento sendo superior
nos estaacutedios mais jovens
Para os produtos Agreereg e Dipelreg o primeiro estaacutedio de desenvolvimento
apresentou maior suscetibilidade a B thuringiensis com 9588 e 8676 de
mortalidade respectivamente (Tabela 1) Semelhantemente Kloss (2011) ao
trabalhar com isolados e produtos comerciais agrave base de B thuringiensis Agreereg e
Dipelreg avaliando a mortalidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera
Noctuidae) verificou que para alguns isolados e para os produtos comerciais
ocorreu mortalidade de 100 em lagartas de primeiro iacutenstar Diferentemente
Pereira et al (2009) ao avaliarem o efeito de B thuringiensis kurstaki e B
thuringiensis aizawai sobre a mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania
(Cramer) (Lepidoptera Noctuidae) de primeiro e terceiro iacutenstar observaram maior
mortalidade em lagartas de terceiro iacutenstar
Tabela 1 - Suscetibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios de desenvolvimento larval a inseticida agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg
(25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios Produtos
Agree Dipel
A partir do 1ordm estaacutedio 9588 aAsup1 8676 aA A partir do 2ordm estaacutedio 6056 aB 5895 aB A partir do 3ordm estaacutedio 5645 aB 3133 bC A partir do 4ordm estaacutedio 422 aC 271 aD
Fint axb 3402 p 0034
sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O produto Agreereg teve efeito semelhante sobre a mortalidade das lagartas a partir
dos estaacutedios 2 e 3 de desenvolvimento apresentando 6056 e 5645 de
mortalidade respectivamente Jaacute com o produto Dipelreg a mortalidade das lagartas
foi diferente entre todos os estaacutedios observando 5895 de mortalidade a partir do
estaacutedio 2 e 3133 a partir do estaacutedio 3 Da mesma maneira Viana et al (2009) ao
estudar a patogenicidade e a influecircncia de isolados de Bacillus thuringiensis nas
caracteriacutesticas bioloacutegicas de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae)
constataram que dos 58 isolados testados em lagartas de segundo iacutenstar 11
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
39
causaram mortalidade total e os demais influenciaram negativamente no ciclo
bioloacutegico da praga Estudos realizados por Medeiros et al (2005) tambeacutem relataram
novos isolados que causaram 100 de mortalidade das lagartas de P xylostella
A partir do estaacutedio 4 a mortalidade foi inferior a 5 para ambos os produtos esse
fato pode ser decorrente da interrupccedilatildeo alimentar nessa fase e a entrada no periacuteodo
subsequente de preacute-pupa Nesse periacuteodo a lagarta natildeo se alimenta evitando a
contaminaccedilatildeo por produtos de accedilatildeo via ingestatildeo (FRANCO BAPTISTA 2010)
Nesse mesmo contexto Bethke e Vander Mey (2010) recomendam o tratamento
com Bt em lagartas receacutem-eclodidas pois estas ficam mais expostas nas plantas
diferentemente das lagartas mais desenvolvidas que preferem ficar escondidas natildeo
se alimentando das partes que contecircm o produto Aleacutem da especificidade algumas
toxinas de Bt podem ligar-se ao(s) receptor(es) sem no entanto essa ligaccedilatildeo ser
suficiente para causar a morte do inseto (POLANCZYK ALVES 2003)
Dipelreg (Bt Kurstaki HD-1) eacute o produto com maior alcance no mercado mundial
(POLANCZYK ALVES 2003) e embora seja o mais recomendado para o controle
de D fovealis neste trabalho o produto Agreereg proporcionou maior virulecircncia agrave
praga Segundo Polanczyk (2004) a variaccedilatildeo na eficiecircncia dos produtos pode
ocorrer por fatores relacionados ou natildeo ao modo de accedilatildeo desse patoacutegeno tais
como dissoluccedilatildeo do cristal ativaccedilatildeo da protoxina e ligaccedilatildeo da toxina ativada a
receptores no epiteacutelio intestinal
Ateacute o momento ainda natildeo foram identificados os receptores envolvidos na ligaccedilatildeo
com as toxinas Cry do Bt para D fovealis Contudo a utilizaccedilatildeo de inseticidas
formulados agrave base de B thuringiensis tem sido relatada por diversos autores em
diferentes paiacuteses sobre essa praga (JAumlCKEL KURZHALS 1995 MURPHY 2008
BETHKE et al 2012) Na literatura as toxinas Cry 1Aa Cry 1 Ab Cry 1Ac Cry 2Aa e
Cry 2B satildeo relacionadas agrave subespeacutecie kurstaki (Dipelreg) e as toxinas Cry 1Aa Cry
1Ab Cry 1Ca Cry 1Da Cry 2A6 e Cry 9B agrave subespeacutecie aizawai (Agreereg) sendo
essa diversidade determinante para a seletividade da atividade inseticida cada uma
delas tem niacuteveis de toxicidade diferentes para diferentes espeacutecies (GILL 1995
AGBIO WORLD 2014)
Estudos relatando a suscetibilidade de Helicoverpa armigera (Huumlbner) (Lepidoptera
Noctuidae) a diferentes toxinas Cry indicam que as proteiacutenas Cry1Ac Cry1Ab
Cry2A e Cry2B satildeo toacutexicas No entanto Cry1Ac mostra-se mais toacutexica esse fato que
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
40
pode ocorrer devido ao maior nuacutemero de ligaccedilotildees e maior afinidade de ligaccedilatildeo com
receptores no intestino meacutedio desse inseto (LIAO et al 2002 ESTELA et al 2004
ANGELO et al 2010 VALAITIS 2011) Da mesma maneira eacute possiacutevel que as
proteiacutenas Cry presentes exclusivamente no produto formulado Agreereg podem ter
sido determinantes para maior virulecircncia a D fovealis neste estudo
Na estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) houve um acreacutescimo na porcentagem de
mortalidade de lagartas de D fovealis proporcional ao aumento da concentraccedilatildeo de
esporos As avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-
quadrado significativo (2 significativo p gt 005) (Tabela 2) Analisando os intervalos
de confianccedila natildeo foi possiacutevel determinar diferenccedila entre os tempos de experimentos
com os produtos Agreereg e Dipelreg
As inclinaccedilotildees da curva de concentraccedilatildeo-mortalidade variaram entre os produtos
Agreereg e Dipelreg Observou-se menor inclinaccedilatildeo da curva para o produto Agreereg
(034 e 038) se comparado ao produto Dipelreg (125 e 116) Segundo Schmidt
(2002) valores altos de inclinaccedilatildeo da curva indicam que pequenas variaccedilotildees na
concentraccedilatildeo do inseticida promovem grandes variaccedilotildees na mortalidade da praga-
alvo
Tabela 2 - Estimativa da CL50 de inseticidas agrave base de Bacillus thuringiensis Agreereg e Dipelreg a Duponchelia fovealis em lagartas a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h)
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95) χ2 (7) Gl8 P9
Agree 1 444 034 plusmn 0050
207x105 (705x104 - 479x105)
5946 7 0546
2 445 038 plusmn 0051 174x105
(132x104 - 767x105) 19026 7 0278
Dipel 1 446 125 plusmn 0097
886x105 (577x105 - 135x106)
90522 7 0249
2 446 116 plusmn 0089 962 x105
(490x105 - 185x106) 19355 7 0249
1 Prod Produtos agrave base de Bt
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4
InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo 5 CL Concentraccedilatildeo letal (esporosmL
-1)
6 IC
intervalo de confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 174 x 105 a 207 x 105 esporosmiddotmL-1 de B thuringiensis var
aizawai GC-91 para o produto Agreereg e 886 x 105 a 962 x 105 esporosmiddotmL-1 de B
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
41
thuringiensis var Kurstaki linhagem HD-1 para o produto Dipelreg Santos Junior et al
(2009) avaliando 27 isolados de B thuringiensis oriundos de amostras de solo e
dois formulados comerciais agrave base de B thuringiensis var aizawai (Xentarireg WG) e agrave
base de B thuringiensis var kurstaki (Dipelreg PM) sobre Helicoverpa zea
constataram que em apenas 7 desses isolados e os produtos comerciais
proporcionaram mortalidades superiores a 941 Para esses isolados promissores
foram encontrados valores para a CL50 variando entre 3 x 104 a 12 x 107
esporosmiddotmL-1
As diferenccedilas da toxicidade destes produtos podem estar relacionadas com a
composiccedilatildeo dos cristais e seu potencial toacutexico (POLANCZYK SILVA FIUZA 2000)
Do ponto de vista praacutetico o controle de D fovealis utilizando B thuringiensis pode
ser considerado efetivo podendo ser uma ferramenta importante em sistemas de
gestatildeo integrada de pragas na cultura do morangueiro Cabe ressaltar que a
atividade desses formulados em condiccedilotildees de campo podem sofrer variaccedilotildees
mediante a influecircncia de fatores bioacuteticos e abioacuteticos o que poderaacute modificar os niacuteveis
de virulecircncia obtidos nos ensaios em laboratoacuterio (SANTOS JUNIOR et al 2009)
43 CONCLUSAtildeO
Verificou-se que os produtos Agreereg e Dipelreg satildeo promissores no manejo de D
fovealis a partir do primeiro estaacutedio de desenvolvimento Contudo observou-se
maior virulecircncia do produto Agreereg que necessitou de uma menor dose para atingir
a CL50 Assim os resultados demonstram a patogenicidade e virulecircncia de ambos os
formulados de B thuringiensis agrave D fovealis no entanto estudos em condiccedilotildees de
semicampo e campo satildeo necessaacuterios para validar o uso em programas de manejo
fitossanitaacuterio
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
42
44 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology v 18 p 265-267 1925
AGBIO WORLD SAFETY OF Bacillus thuringiensis Proteins Used to Control Insect Pests in Agricultural Crops 2014 Disponiacutevel em lthttpwwwagbioworldorgpdfbt-short_safetpdfgt Acesso em 19 jan 2014
ANGELO E VILAS-BOAS G CASTRO-GOMEacuteZ R Bacillus thuringiensis Caracteriacutesticas gerais e fermentaccedilatildeo Ciecircncias Agraacuterias v 31 n 4 p 945-958 2010
BALBINO J M de S MARIN A J Importacircncia Socioeconocircmica da cultura do morango para o estado do Espiacuterito Santo e o planejamento da produccedilatildeo comercial In BALBINO J M de STecnologias para produccedilatildeo colheita e poacutes-colheita de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
BETHKE J A OSBORNE L S STOCKS SD MEYB V HODGES A C SCHUBLE D L SCHMALE L Real and Potential Impact of the European Pepper Moth on Ornamental Plant Production and Agriculture 2012 Disponiacutevel em lthttpcisrucredupdfsaf_proceedings_bethke2012pdfgt Acesso em 27 dez 2013
BETHKE L VANDER MEY B Pest Alert Duponchelia fovealis University os California Cooperative Extension San Diego 2010 Disponiacutevel em lthttpucanrorgsitescetestfiles55177pdfgt Acesso em 26 dez 2013
BOBROWSKI V L FIUacuteZA L M PASQUALI G BODANESE-ZANETTINI M H Genes de Bacillus thuringiensis uma estrateacutegia para conferir resistecircncia a insetos em plantas Ciecircncia Rural v 34 p 843-850 2003
ESTELA A ESCRICHE B FERREacute J Interaction of Bacillus thuringiensis toxins with larval midgut bindings sites of Helicoverpa armigera (Lepidoptera Noctuidae) Applied and Environmental Microbiology v 70 n 3 p 1378-1383 2004
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2012
FRANCO M C BAPTISTA M C Duponchelia fovealis Zeller ndash nova praga em Portugal Frutas legumes e flores A revista dos profissionais v 110 p 34-35 2010
GILL S Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins Memoacuteria do Instituto Oswaldo Cruz v 90 v 1 p 69-74 1995
JAumlCKEL B KURZHALS M Biologische Bekaumlmpfungsmoumlglichkeiten von Duponchelia fovealis In Deutsche Gesellschaft fuumlr allgemeine und angewandte Entomologie 5 ed Berlim 1995 p 7-7
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
43
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
KLOSS T G Bacillus thuringiensis e Trichogramma spp no manejo de populaccedilotildees de Helicoverpa zea (BODDIE 1850) 2011 70 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Produccedilatildeo Vegetal) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Produccedilatildeo Vegetal Universidade Federal do Espiacuterito Santo Alegre 2011
LIAO C HECKEL D AKHURST R Toxicity of Bacillus thuringiensis insecticidal proteins for Helicoverpa armigera and Helicoverpa punctigera (Lepidoptera Noctuidae) major pests of cotton Journal of Invertebrate Pathology v 80 p 55-66 2002
MEDEIROS P T FERREIRA M N MARTINS E S GOMES AC M M FALCAtildeO R DIAS J M C S MONNERAT R G Seleccedilatildeo e caracterizaccedilatildeo de estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas no controle da traccedila-dascruciacuteferas Plutella xylostella Pesquisa Agropecuaacuteria Brasileira v 40 n 11 p 1145-1148 2005
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PEREIRA J M SEII A H OLIVEIRA M F BRUSTOLIN C FERNANDES P M Mortalidade de lagartas de Spodoptera eridania (Cramer) pela utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis (Berliner) Pesquisa Agropecuaacuteria Tropical v 39 n 2 p 140-143 2009
POLANCZYK R A VALICENTE F H BARRETO M R Utilizaccedilatildeo de Bacillus thuringiensis no controle de pragas agriacutecolas na Ameacuterica Latina In ALVES S B LOPES R B Controle Microbiano de Pragas na Ameacuterica Latina avanccedilos e desafios Piracicaba FEALQ 2008 p 111-136
POLANCZYK R Estudos de Bacillus thuringiensis Berliner visando ao controle de Spodoptera frugiperda (J E Smith) 2004 144 f Tese (Doutorado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2004
POLANCZYK R ALVES S Bacillus thuringiensis uma breve revisatildeo Agrociecircncia v 7 n 2 p 1-10 2003
POLANCZYK R SILVA R F P da FIUZA L M Effectiveness of Bacillus thuringiensis strains against Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) Brazilian Journal of Microbiology v 31 p 165-167 2000
SANTOS JUNIOR HJG MARQUES E J POLANCZYK R A PRATISSOLI D RONDELIII V M Suscetibilidade de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) a Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillaceae) Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 76 n 4 p 635-641 2009
SCHMIDT FB Linha baacutesica de suscetibilidade de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera Noctuidae) a lufenuron na cultura do milho 2002 48 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia) - Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Entomologia Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Piracicaba 2002
VALAITIS A Localization of Bacillus Thuringiensis Cry1A toxin-binding molecules in gypsy moth larval gut sections using fluorescence microscopy Journal of Invertebrate Pathology v 108 p 69-75 2011
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
44
VIANA C L T P DE BORTOLI S A THULER R T GOULART R M THULER A M G LEMOS M V F FERRAUDO A S Efeito de novos isolados de Bacillus thuringiensis Berliner em Plutella xylostella (Linnaeus 1758) (Lepidoptera Plutellidae) Cientiacutefica v 37 n 1 p 22 - 31 2009
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
45
CAPIacuteTULO 3
ATIVIDADE DO EXTRATO AQUOSO DE FUMO E ALHO EM Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
RESUMO
A lagarta Duponchelia fovealis foi recentemente encontrada em plantios comerciais
do morangueiro no estado do Espiacuterito Santo ocasionando grandes problemas agrave
cultura Por ser uma praga recente ainda natildeo haacute registro de produtos para o seu
controle Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiecircncia do uso dos extratos
aquosos de alho e fumo visando sua adoccedilatildeo como meacutetodos alternativos de controle
de D fovealis Para execuccedilatildeo dos bioensaios foram utilizados 60 insetostratamento
para cada iacutenstar larval Os respectivos extratos aquosos foram aplicados na
concentraccedilatildeo 10 (mv) O ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado como
testemunha negativa e na testemunha positiva foi pulverizada aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) Todos os tratamentos foram pulverizados com o auxiacutelio da Torre de Potter
As avaliaccedilotildees foram realizadas diariamente por 7 dias para determinar a atividade
inseticida dos respectivos tratamentos Por ocasiatildeo dos resultados estimou-se
apenas a concentraccedilatildeo letal (CL50) do extrato aquoso de fumo o qual apresentou
mortalidade superior a 85 no teste de suscetibilidade isso analisando o 1ordm e 2ordm
iacutenstar Desta forma conclui-se que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel
no manejo fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em
propriedades que adotam o manejo agroecoloacutegico
Palavras-Chave Plantas inseticidas Manejo Fitossanitaacuterio de Pragas Morango
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
46
ABSTRACT
TOBACCO AND GARLIC AQUEOUS EXTRACT ACTIVITY ON Duponchelia fovealis
Zeller (Lepidoptera Crambidae)
Duponchelia fovealis caterpillar was recently found in the state of Espiacuterito Santo
causing major problems in strawberry culture and as it is a recent plague there is no
products registration for its control This study was carried out to assess the
efficiency of garlic and tobacco aqueous extracts on D fovealis control In bioassays
60 insects were used per treatment in each larval stage Garlic and tobacco aqueous
extract were used at a 10 concentration (mv) As negative control was used the
active ingredient Clorofenapir and as positive control was used sterile distilled water
(SDW) All treatments were sprayed through Potterrsquos Tower To assess insecticidal
activity evaluations were performed daily during 7 days By the results only tobacco
aqueous extract had its lethal concentration ( LC50 ) estimated showing mortality
above 85 in susceptibility testing using 1ordm and 2ordm instar Thus itrsquos possible to
conclude that tobacco aqueous extract can be used as a viable alternative in D
fovealis phytosanitary management in properties that adopt agroecological
management
Keywords Plant insecticides Phytosanitary Pest Management Strawberry
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
47
5 INTRODUCcedilAtildeO
O cultivo do morangueiro eacute uma atividade tipicamente relacionada a pequenas
propriedades uma vez que a matildeo-de-obra eacute caracterizada como familiar um ponto
de extrema importacircncia econocircmica e social respectivamente pela fonte de renda e
fixaccedilatildeo do homem nas zonas agriacutecolas (RADIN et al 2007)
Contudo as perdas na produccedilatildeo em diversas culturas podem ocasionar prejuiacutezos
incalculaacuteveis os quais satildeo decorrentes principalmente dos gastos com insumos
agriacutecolas como os inseticidas utilizados no manejo de vaacuterios insetos-praga
Recentemente foi constatada no estado do Espiacuterito Santo uma nova espeacutecie de
inseto-praga Duponchelia fovealis o qual se alimenta de todas as partes
vegetativas do morangueiro Por ser uma praga nova ainda natildeo haacute registro de
produtos bioloacutegicos ou quiacutemicos para seu controle (FORNAZIER et al 2011
ZAWADNEAK et al 2011)
Apesar da contribuiccedilatildeo dos inseticidas sinteacuteticos na produccedilatildeo de alimentos o uso
indiscriminado e o natildeo cumprimento das especificaccedilotildees de dosagem e carecircncia tecircm
contribuiacutedo para proporcionar efeitos negativos sobre o homem e ao meio ambiente
(AGUIAR-MENEZES 2005) Aleacutem disso a crescente busca por alimentos mais
saudaacuteveis e isentos de resiacuteduos tem determinado o redimensionamento dos
sistemas de produccedilatildeo pois a qualidade das frutas passou a ser uma exigecircncia dos
mercados que buscam aleacutem do aspecto externo a garantia da qualidade interna
(MARTINS 2006)
Dessa forma a pesquisa e o desenvolvimento de medidas alternativas ao uso dos
inseticidas convencionais satildeo necessaacuterios e de vital importacircncia para toda a cadeia
produtiva Entre tais alternativas a utilizaccedilatildeo de extratos vegetais surge como uma
possibilidade de reduzir os prejuiacutezos ao ambiente e ao homem pois apresenta
menor impacto aleacutem de vantagens como raacutepida degradaccedilatildeo menor efeito sobre
organismos natildeo alvos e sobre o meio ambiente aleacutem de maior seguranccedila para o
consumidor (AGUIAR-MENEZES 2005 MAIRESSE COSTA 2009)
Diversos trabalhos corroboram com esse contexto pois os resultados comprovam a
atividade inseticida de vaacuterios compostos extraiacutedos de plantas seja exercendo
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
48
controle de insetos minadores sugadores broqueadores e ou mastigadores
(GRUBER LOacutePES 2004 SOUZA ARAUJO NASCIMENTO 2007)
Nesse contexto acredita-se que a utilizaccedilatildeo de plantas com propriedades
inseticidas como o alho (Allium sativum) e o fumo (Nicotiana tabacum L) possa ser
promissoras no controle de D fovealis Dessa forma este trabalho objetivou avaliar
a atividade inseticida de D fovealis aos extratos aquosos de alho e fumo buscando
alternativas de controle que proporcionem menor impacto ambiental e que sejam
compatiacuteveis com os programas de manejo fitossanitaacuterio das pragas
51 MATERIAL E MEacuteTODOS
O trabalho foi conduzido no Nuacutecleo de Desenvolvimento Cientiacutefico e Tecnoloacutegico em
Manejo Fitossanitaacuterio (NUDEMAFI) do Centro de Ciecircncias Agraacuterias da Universidade
Federal do Espiacuterito Santo (CCA-UFES) Alegre-ES em sala climatizada ajustada
para a temperatura de 25plusmn1degC 60plusmn10 de umidade relativa e fotofase de 12h
511 Obtenccedilatildeo e Multiplicaccedilatildeo de Duponchelia fovealis Zeller (Lepidoptera
Crambidae)
As lagartas de D fovealis foram coletadas em plantios de morango na regiatildeo
serrana do Espiacuterito Santo onde lagartas foram isoladas e enviadas ao Setor de
Entomologia do NUDEMAFI onde foram mantidas e alimentadas ateacute se
transformarem em pupas e adultos
A metodologia empregada na multiplicaccedilatildeo foi desenvolvida no NUDEMAFI onde
adultos de D fovealis foram mantidos em tubos de PVC (200 mm x 20 cm)
revestidos internamente com papel A4 sobre uma base de isopor tambeacutem revestida
com papel A4 sendo a extremidade superior do tubo fechada com tecido tipo ldquovoilrdquo
Para alimentaccedilatildeo dos adultos foi disponibilizado em cada tubo um frasco contendo 5
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
49
mL de soluccedilatildeo aquosa de mel a 10 tampado com um chumaccedilo de algodatildeo e
revestido com papel As posturas foram coletadas diariamente e acondicionadas em
recipientes plaacutesticos ateacute a eclosatildeo das lagartas Posteriormente as lagartas receacutem-
eclodidas foram transferidas para potes de plaacutestico transparente com 16 cm de
diacircmetro por 10 cm de altura com tampas perfuradas para permitir as trocas
gasosas O fundo dos potes foi forrado com papel sanfonado e sobre este foi
colocado um pedaccedilo de tela a fim de evitar o contato entre a dieta e o fundo Para
alimentaccedilatildeo de D fovealis foram depositadas sobre a referida tela fatias finas de
dieta artificial adaptada agrave base de farelo de soja germe de trigo e accediluacutecar proposta
por King e Hartley (1985) para Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera
Crambidae) a qual foi utilizada durante todo o estaacutegio larval Os insetos
permaneceram nesses potes ateacute atingirem o periacuteodo pupal
512 Obtenccedilatildeo do extrato aquoso de fumo e alho
Para a obtenccedilatildeo do material vegetal de alho foram utilizados bulbos de alho
cultivados na regiatildeo serrana do estado do Espiacuterito Santo O material foi descascado
e cortado em pequenos pedaccedilos e espalhados sobre bandejas de alumiacutenio
revestidas com papel alumiacutenio e levado agrave estufa de circulaccedilatildeo forccedilada a temperatura
de 40 degC ateacute obter peso constante para que fosse conservada as suas
caracteriacutesticas quiacutemicas Apoacutes a fase de secagem o material foi triturado em moinho
de faca sendo posteriormente armazenado em potes de vidro de tampa rosqueaacutevel
revestido com papel alumiacutenio para evitar perdas nos constituintes por
fotodegradaccedilatildeo Para a obtenccedilatildeo do poacute de fumo foi utilizado o de rolo
industrializado O material foi desfiado e submetido ao processo de secagem
trituraccedilatildeo e conservaccedilatildeo semelhante ao descrito acima
Para a obtenccedilatildeo de cada extrato o poacute do material vegetal triturado (100 g) foi
transferido para um Erlenmeyer (1L) contendo aacutegua destilada esteacuteril (ADE) (900
mL) para a obtenccedilatildeo de 1L da soluccedilatildeo inicial a 10 (mv) Posteriormente foram
mantidos sob homogeneizaccedilatildeo por 24h em agitador transversal (240 rpm)
Posteriormente a mistura foi filtrada com tecido tipo voil e transferido para um balatildeo
volumeacutetrico e o volume aferido para 1L
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
50
513 Suscetibilidade de D fovealis a extrato aquoso de fumo e alho
No bioensaio de suscetibilidade o extrato aquoso de fumo e alho na concentraccedilatildeo
de 10 (mv) preparado conforme descrito anteriormente foi utilizado para cada
iacutenstar Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por repeticcedilatildeo
totalizando 60 insetos por tratamento Os iacutenstares foram determinados em ensaios
preliminares a partir de mediccedilotildees da caacutepsula cefaacutelica (dados natildeo apresentados)
Cada repeticcedilatildeo foi acondicionada em placa de Petri de 95 x 15 cm (diacircmetro e
altura) forradas com papel filtro As lagartas foram transferidas para cada placa
contendo um disco de folha de morango da cultivar Tudla de 45 cm de diacircmetro Os
mesmos foram pulverizados utilizando Torre de Potter com pressatildeo de 15 lbpolsup2 e
12 mL de soluccedilatildeo de cada formulado para cada repeticcedilatildeo sendo pulverizados 6 mL
em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem pulverizadas
apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2 por face
pulverizada O produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir foi utilizado
como testemunha negativa por apresentar efeito nocivo a D fovealis em ensaios
preliminares na dosagem de 50microL de produto para 200 mL aacutegua destilada esteacuteril
(ADE) e na testemunha positiva foi pulverizada ADE As placas foram mantidas em
cacircmara climatizada (25plusmn1ordmC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12h) O efeito inseticida
foi avaliado diariamente ateacute o 7ordm dia Os discos foliares pulverizados foram trocados
quando necessaacuterio
O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em
esquema de parcelas subdivididas 2 x 4 x 2 [extratos aquosos 10 (mv) - fumo e
alho x Iacutenstares (estaacutedios) x tempos (geraccedilotildees)] sendo os dados transformados por
Para confirmar a eficiecircncia do teste este foi realizado em dois tempos
diferentes A mortalidade corrigida foi calculada em relaccedilatildeo agrave testemunha pela
foacutermula de Abbott (1925) Os dados obtidos foram submetidos agrave anaacutelise de
variacircncia sendo as meacutedias comparadas pelo Teste de Tukey (p le 005) Para tal foi
utilizado o programa Assistat
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
51
514 Estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL)
Foi submetido ao bioensaio para estimativa da CL50 e da CL90 o extrato aquoso que
apresentou melhor accedilatildeo inseticida sobre D fovealis e o iacutenstar de maior
suscetibilidade Cada tratamento foi composto por seis repeticcedilotildees e 10 lagartas por
repeticcedilatildeo totalizando 60 insetos por tratamento Foi pulverizado 6 mL do extrato
aquoso em cada lado da folha de maneira que as lagartas transferidas fossem
pulverizadas apenas 1 vez tendo-se depositado um volume meacutedio de 162 mgmiddotcm2
por face pulverizada As pulverizaccedilotildees foram feitas em placas de Petri de 95 x 15
cm (diacircmetro e altura) forradas com papel filtro utilizando Torre de Potter com
pressatildeo de 15 lbpolsup2 correspondendo a um volume meacutedio de 162 mgcm2 Para
cada produto foram utilizadas concentraccedilotildees espaccediladas em escala logariacutetmica
(entre os limites de 001 a 10 ) e as dosagens foram obtidas atraveacutes da foacutermula
C1V1 = C2V2 Aacutegua destilada esteacuteril na concentraccedilatildeo de 0 (vv) foi utilizada na
testemunha O experimento foi conduzido em cacircmara climatizada (25plusmn10degC UR de
70plusmn10 e fotofase de 12 h) e avaliado apoacutes 12 h da inoculaccedilatildeo do inseto para
verificar se ocorreu morte na inoculaccedilatildeo da lagarta e posteriormente diariamente
ateacute o 7ordm dia para verificar o efeito letal sobre as lagartas oferecendo discos de
folhas novas sempre que necessaacuterio As concentraccedilotildees letais foram estimadas
usando a anaacutelise de Probit utilizando o programa Polo Pc
52 RESULTADO E DISCUSSAtildeO
Existiu interaccedilatildeo significativa apenas entre os fatores estaacutedios e produtos (F
F=1177 plt0001) Dessa forma procedeu-se o desdobramento do fator estaacutedios
dentro do fator extrato Foi observada diferenccedila na mortalidade em funccedilatildeo dos
diferentes estaacutedios de desenvolvimento
Analisando cada extratoproduto separadamente podemos observar que o extrato
de alho apresentou maior suscetibilidade no estaacutedio 1 se comparado com os
demais estaacutedios O extrato de fumo teve efeito sobre o estaacutedio 1 e 2 com
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
52
mortalidades de 9824 e 8772 respectivamente Jaacute o produto quiacutemico teve
accedilatildeo inseticida nos estaacutedios 1 2 e 3 apresentando mortalidade acima de 8103
Ao observar o efeito entre os estaacutedios percebe-se que os maiores valores de
mortalidades ocorreram nos tratamentos em que foram utilizados extrato aquoso de
fumo e o produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir (testemunha
negativa) apresentando mortalidades superiores a 9824 no estaacutedio 1 No estaacutedio
2 foram observados 8772 e 983 respectivamente Jaacute no estaacutedio 3 apenas o
produto comercial com o ingrediente ativo Clorofenapir manteve mortalidade
superior a 80 Os tratamentos com extrato aquoso de alho apresentaram valores
de mortalidade inferiores a 40 em todos os estaacutedios de desenvolvimento
Tabela 3 - Susceptibilidade de Duponchelia fovealis em diferentes estaacutedios larvais de desenvolvimento a extratos aquoso de Alho (Allium sativum) e Fumo (Nicotina tabacum) e ao ingrediente ativo Clorofenapir (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees)
Estaacutedios ExtratosProduto
Alho Fumo IA (Clorofenapir)
A partir do 1ordm estaacutedio 3542 bA1 9824 aA 10000 aA
A partir do 2ordm estaacutedio 1586 bB 8772 aA 9830 aA
A partir do 3ordm estaacutedio 1481 bB 1293 bB 8103 aA
A partir do 4ordm estaacutedio 1563 abB 1238 bB 2821 aB
Fint axb 117681
p lt0001 sup1 Meacutedias seguidas por mesma letra minuacutescula na linha e maiuacutescula na coluna natildeo diferem entre si pelo teste de Tukey (ple005)
O extrato de alho possui substacircncias repelentes que modificam o odor natural que
cada planta produz enganando os insetos Sabe-se tambeacutem que as substacircncias
atuam somente por contato com os quimiorreceptores do inseto e natildeo por contato
com a cutiacutecula ou os neurocircnios (TALAMINI STADNIK 2004 AGUIAR-MENEZES
2005)
Nos bioensaios realizados natildeo foi possiacutevel observar eficiecircncia na repelecircncia do
extrato aquoso de alho a D fovealis ocasionando baixa mortalidade Provavelmente
o alho teve uma variaccedilatildeo na concentraccedilatildeo dos compostos segundo o hospedeiro-
alvo e em terceiro esse resultado pode estar relacionado com a quantidade dos
princiacutepios ativos presente no extrato que talvez natildeo estivessem presentes em
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
53
quantidades suficientes para ocasionar mortalidades Variaccedilotildees nos valores de
concentraccedilatildeo da alicina de alhos de diferentes origens foram verificadas por Mendes
(2008) Contudo Pant e Williams (2007) relataram que essas concentraccedilotildees variam
de 04 para 09 no alho cru dependendo das condiccedilotildees de crescimento dos
bulbos
Realizando a prospecccedilatildeo fitoquiacutemica para a detecccedilatildeo de metaboacutelicos secundaacuterios
em extrato aquoso de alho (A sativum) Lins et al (2012) detectaram mono e
sesquiterpenoides triterpenoides e esteroides e vaacuterios outros compostos sulfurados
como a alicina e tiosulfinatos aleacutem de compostos natildeo sulfurados como as
saponinas e aacutecidos fenoacutelicos Outros princiacutepios ativos presentes no alho como
ajoeno aacutecido fosfoacuterico livre oacuteleo volaacutetil essecircncias sulfuradas e oxigenadas aliina
sulfureto de alila sulfeto de alilo aliglucoacutesio oacutexido dialila dissulfeto alinase
alitiamina sulfuretos hormocircnios resinas e os compostos isoticiacircnico inulina
nicotinamina e glalantamina foram relatado por Vieira (1992) Entre os componentes
do alho a alicina ocupa o lugar de maior destaque por ser considerada como a
substacircncia de maior atividade bioloacutegica (LAWSON WANG 2005 BETANCOURT
2010)
Diferentemente do resultado encontrado no presente trabalho Bestete (2011) ao
avaliar a eficiecircncia dos extratos aquosos de alho e fumo em lagartas de Helicoverpa
zea (Boddie) (Lepidoptera Noctuidae) observou que o extrato de alho foi sempre
igual ou superior ao de fumo sendo responsaacutevel pelas maiores porcentagens de
mortalidade de lagartas de dois dias de idade indicando melhor eficiecircncia para o
extrato de alho
A eficiecircncia do extrato de fumo para D fovealis pode ser devido agrave presenccedila de
substacircncias como a nornicotina a anabasina e a nicotina que estaacute presente em
maior concentraccedilatildeo Saito e Lucchini (1998) relataram que essas substacircncias satildeo as
encontradas em maior concentraccedilatildeo no fumo A nicotina eacute uma toxina que atua por
meio de ligaccedilotildees a receptores no sistema nervoso do inseto causando impulsos
nervosos natildeo controlados ocasionando rapidamente a morte do inseto
(WIESBROOK 2004)
O resultado encontrado neste trabalho confirma os resultados relatados por outros
autores Biermann et al (2009) avaliando a atividade de inseticidas botacircnicos sobre
lagartas de Ascia monuste orseis (Latreille) (Lepidoptera Pieridae) por meio de
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
54
accedilatildeo de contato utilizando extrato aquoso de Nicotiana tabacum L (poacute-de-fumo)
(10 mv) afirmam que esses produtos proporcionaram reduccedilatildeo da viabilidade da
fase larval de 100 Semelhantemente Boiccedila Juacutenior et al (2005) avaliaram o efeito
de 21 extratos aquosos de plantas na concentraccedilatildeo de 10 no desenvolvimento de
Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) sobre discos de folhas de couve
imersos nesses extratos e oferecidos a lagartas receacutem-eclodidas O tratamento com
N tabacum causou 100 de mortalidade das larvas e as sobreviventes natildeo
atingiram a fase de pupa Do mesmo modo Dequech et al (2009) estudando o
efeito do extrato aquoso de poacute de fumo sobre esta mesma praga observaram efeito
na mortalidade das lagartas e decliacutenio na oviposiccedilatildeo dos adultos
Avaliando a adaptaccedilatildeo de Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera Noctuidae)
em algumas plantas comuns nos agroecossistemas brasileiros Saacute et al (2009)
observaram que sob condiccedilotildees de confinamento as lagartas receacutem-eclodidas que
alimentaram-se com folhas de fumo apresentaram apenas 4 de sobrevivecircncia
poreacutem nenhuma conseguiu chegar agrave fase de pupa
A estimativa da concentraccedilatildeo letal (CL50) foi realizada apenas para o extrato de fumo
que apresentou mortalidade superior a 90 no estaacutedio 1 de desenvolvimento As
avaliaccedilotildees se adequaram ao modelo de Probit apresentando qui-quadrado
significativo (2 natildeo significativo p gt 005) (Tabela 4) Para o extrato aquoso de alho
natildeo foi possiacutevel estimar a CL50 devido agrave baixa mortalidade observada no bioensaio
anterior (35) natildeo atendendo agraves exigecircncias do modelo de Probit As inclinaccedilotildees da
curva de concentraccedilatildeo-mortalidade apresentaram semelhanccedila nos dois tempos de
experimento (082 e 081) natildeo sendo observada diferenccedila na anaacutelise dos intervalos
de confianccedila
A concentraccedilatildeo letal requerida para ocasionar a mortalidade de 50 da populaccedilatildeo
de D fovealis variou de 166 a 218 mv Resultado semelhante foi encontrado por
Pinheiro e Quintela (2004) com concentraccedilotildees acima de 2 em folhas de feijoeiro
quando avaliaram a eficiecircncia do extrato de fumo para o controle de ninfas de
Bemisia tabaci bioacutetipo B (Gennadius) (Hemiptera Aleyrodidae)
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
55
Tabela 4 - Estimativa da CL50 do Extrato Aquoso de Fumo em lagartas de Duponchelia fovealis a partir do estaacutedio 1 de desenvolvimento (25plusmn1degC UR de 70plusmn10 e fotofase de 12 h) em dois tempos (geraccedilotildees) alimentadas com folhas da cultivar Tudla
Prod1 E2 N3 InclinaccedilatildeoplusmnEP4 CL505 (IC6 95)
2 (7) Gl8 P9
Fumo 1 500 082plusmn008 166 (068 - 740) 2851 7 0202
Fumo 2 460 081plusmn008 218 (099 - 786) 1651 7 0137 1 Prod Extrato aquoso de fumo
2 E experimentos no tempo
3 N nuacutemero de observaccedilotildees
4InclinaccedilatildeoplusmnEP inclinaccedilatildeo da curva plusmn erro padratildeo
5 CL Concentraccedilatildeo letal
6 IC intervalo de
confianccedila 7 X
2 Qui-quadrado
8 Gl graus de liberdade e
9 P probabilidade
Em estufas dos EUA e Canadaacute tem sido utilizada a fumigaccedilatildeo com fumo para o
controle dos adultos de D fovealis em ambientes protegidos sendo preferiacutevel que
esses fumigadores sejam alocados acima das plantas para permitir melhor
dispersatildeo em toda a estufa (MURPHY 2008) poreacutem o uso como fumigante pode ter
efeito sobre os agentes de controle bioloacutegico naturais da aacuterea ou liberados entre
outros insetos de corpo mole (CFIA 2005) Contudo pesquisas comprovam e
recomendam o uso levando-se em consideraccedilatildeo algumas precauccedilotildees para sua
utilizaccedilatildeo pois algumas espeacutecies de plantas que possuem substacircncias bioativas de
accedilatildeo eficiente contra insetos apresentam graus diferenciados de toxicidade para o
homem e mamiacuteferos recomendando-se seu uso com precauccedilotildees e seguindo
algumas condiccedilotildees como o periacuteodo de degradaccedilatildeo bioloacutegica do produto de
aproximadamente 4 dias quando aplicado sobre plantas comestiacuteveis (AGUIAR-
MENEZES 2005)
53 CONCLUSAtildeO
Pode-se concluir que o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis em lagartas do estaacutedio 1 e 2 de desenvolvimento sendo
a concentraccedilatildeo ideal em torno de 166 a 218 (mv) Podendo esse resultado se
equiparar com o resultado obtido por meio da utilizaccedilatildeo de produtos quiacutemicos com a
vantagem de ser de faacutecil obtenccedilatildeo e menos oneroso aos produtores que cultivam o
morangueiro
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
56
54 REFEREcircNCIAS
ABBOTT W S A Method of computing the effectiveness of an insecticide Journal of Economic Entomology Lanham v 18 p 265-267 1925
AGUIAR-MENEZES E L Inseticidas botacircnicos seus princiacutepios ativos modo de accedilatildeo e uso agriacutecola Embrapa Agrobiologia 58p (Documentos 205) 2005
BESTETE L R Produtos alternativos e associaccedilatildeo com Trichogramma pretiosum RILEY (Hym Trichogrammatidae) visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lep Noctuidae) em tomateiro 2011 66 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Entomologia Agriacutecola) ndash Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Entomologia Agriacutecola Universidade Federal Rural de Pernambuco Recife 2011
BETANCOURT M de los AacuteC Extraccioacuten y purificacioacuten de alicina a partir de ajo (Allium sativum L) Implicaciones analiacuteticas 2010 72 f Tesis (Maestro en ciecircncias) - Instituto Politeacutecnico Nacional Centro Interdisciplinario de Investigacioacuten para el Desarollo Integral Regional Ooxaca 2010
BIERMANN A C S STURZA A S ROSALINO P K PONCIO A DEQUECH S T B Bioatividade de inseticidas botacircnicos sobre lagartas de Ascia monuste orseis (Lepidoptera Pieridae) sob accedilatildeo de contato VI ENCONTRO INTERNACIONAL DE PRODUCcedilAtildeO CIENTIacuteFICA CESUMAR 5 2009 Maringaacute Anais Maringaacute Centro Universitaacuterio de Maringaacute 2009
BOICcedilA JUacuteNIOR A L MEDEIROS C A M TORRES A L CHAGAS FILHO N R Efeito de extratos aquosos de plantas no desenvolvimento de Plutella xylostella (L) (Lepidoptera Plutellidae) em couve Arquivos do Instituto Bioloacutegico v 72 n 1 p45-50 2005
CFIA Risk management Decision Document for Duponchelia fovealis in Canada 2005 Disponiacutevel em lthttpentnemdeptufledupestalertduponchelia_fovealis_risk_managementpdfgt Acesso em 28 dez 2013
DEQUECH S T B EGEWARTH R SAUSEN C D STURZA V S RIBEIRO L do P Accedilatildeo de extratos de plantas na oviposiccedilatildeo e na mortalidade de traccedila-das-cruciacuteferas Ciecircncia Rural v 39 n 2 p 551-554 2009
FORNAZIER M J PRATISSOLI D MARTINS D dos S DALVI L P TEIXEIRA C P SILVA A T da THOMPSON E L RODRIGUES A K PRATES R S COZER E MOREIRA J P de A BECALLI L PAES J P P TIBURCIO M O Praga exoacutetica no estado do Espiacuterito Santo ndash Duponchelia fovealis Zeller 1847 (Lepidoptera Crambidae) Morango mais saudaacutevel ndash Morando monitorado e rastreado Vitoacuteria ES (folder) 2011
GRUBER A K LOacutePEZ P J A Controle bioloacutegico de insectos mediante extractos botacircnicos In CARBALL M GUAHARAY F Control bioloacutegico de plagas agriacutecolas Managua CATIE 2004 p 137-160
KING E G HARTLEY G G Diatraea saccharalis In SINGH P MOORE R F Handbook of insect rearing New York Elsevier 1985 p 265-270
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
57
LAWSON L D WANG Z J Allicin and allicin ndash derived garlic compounds increase breath Acetone through Allyl Methyl Sulfide Use in measuring Allicin bioavailability Journal of agricultural and food chemistry v 53 p 1974-1983 2005
LINS S R de O OLIVEIRA A M A de XAVIER H S RANDAU K P Prospecccedilatildeo fitoquiacutemica de extratos de plantas e controle da podridatildeo penducular em manda Revista Brasileira de Ciecircncias Agraacuterias v 7 n 1 p 97-103 2012
MAIRESSE L A S COSTA E C Contaminaccedilatildeo ambiental pela agricultura e as novas perspectivas com a moderna biotecnologia Santa Maria Orium 2009
MARTINS D dos S Produccedilatildeo integrada de frutas no Brasil In BALBINO J M de S Tecnologias para produccedilatildeo colheira e poacutes-colheira de morangueiro 2 ed Vitoacuteria Incaper 2006 p 11-14
MENDES P A P Estudo do teor de Alicina em Alho 2008 55 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Engenharia Quiacutemica) ndash Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Engenharia Quiacutemica Escola Superior de Tecnologia e de Gestatildeo de Braganccedila Braganccedila 2008
MURPHY G An overview of Duponchelia control options 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwgreenhousecanadacomcontentview142438gt Acesso em 08 jan 2014
PANT C WILLIAMS D Process for the production of allicin United States Patent Neem Biothech Ltd 2007
PINHEIRO P V QUINTELA E D Efeito de Extratos de Plantas Sobre a
Mortalidade de Ninfas de Bemisia Tabaci (Genn) Bioacutetipo B (Hemiptera
Aleyrodidae) em Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L) Embrapa Arroz e Feijatildeo XXp
(Comunicado Teacutecnico 95) 2004
RADIN B LISBOA B B WITTER S BARNI V BUENO A C BARNI N A
MATZENAUER R Produtividade do morango em funccedilatildeo da localizaccedilatildeo na estufa
In ANTUNES L E C RASEIRA M do C B PEREIRA J F M III Simpoacutesio
Nacional do Morango e II Encontro Sobre Pequenas Frutas e Frutas Nativas do
MERCOSUL Pelotas Embrapa Clima Temperado 2007 p 19-22
SAacute V G M DE FONSECA B V C BOREGAS K G B WAQUIL J M
Sobrevivecircncia e desenvolvimento larval deSpodoptera frugiperda (J E Smith)
(Lepidoptera Noctuidae) em hospedeiros alternativos Neotropical entomology v
38 n1 2009
SAITO M L LUCCHINI F Substacircncias obtidas de plantas e a procura por
praguicidas eficientes e seguros ao meio ambiente Embrapa Meio Ambiente
46p (Documentos 12) 1998
SOUZA AEF ARAUacuteJO E NASCIMENTO LC Atividade antifuacutengica de extratos
de alho e capimsanto sobre o desenvolvimento de Fusarium proliferatum isolado de
gratildeos de milho Fitopatologia Brasileira v 32 n 6 p 465-71 2007
TALAMINI V STADNIK M J Extratos vegetais e de algas no controle de doenccedilas
de plantas In TALAMINIV STADNIK M J Manejo Ecoloacutegico de Doenccedilas de
Plantas Florianoacutepolis UFSC 2004 p 45-62
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
58
VIEIRA L S Fitoterapia da Amazocircnia manual de plantas medicinais 2 ed Satildeo
Paulo Agronocircmica Ceres Ltda 1992
WIESBROOK M L Natural indeed Are natural insecticides safer and better than
conventional insecticides Pesticide Review v 17 n 3 p 1-8 2004
ZAWADNEAK M A VIDAL H GONCcedilALVES R B KUHN T M A ARAUJO E
DOLCI E M SANTOS B SILVA C da R BENATTO A 2011 Duponchelia
fovealis Nova praga em morangueiro no Brasil Disponiacutevel em
lthttpwwwmultiplantacombr20anoscntaspp=Pgagt Acesso em 18 dez 2013
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
59
6 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS
Com o presente estudo eacute possiacutevel fornecer uma nova ferramenta a ser utilizada no
Manejo Fitossanitaacuterio de Duponchelia fovealis visto que esta espeacutecie foi relatada
recentemente e ainda natildeo haacute produtos registrados para seu manejo
Verificou-se a niacutevel de laboratoacuterio que os produtos formulados Agreereg e Dipelreg e o
extrato aquoso de fumo satildeo promissores no manejo de D fovealis a partir do
primeiro estaacutedio de desenvolvimento sendo que a mortalidade de D fovealis
aumentou em funccedilatildeo da concentraccedilatildeo A utilizaccedilatildeo dos inseticidas bioloacutegicos Agreereg
e Dipelreg tem sido relatada com potencial de uso em conjunto com outros agentes de
controle bioloacutegico Jaacute o extrato de fumo pode ser uma alternativa viaacutevel no manejo
fitossanitaacuterio de D fovealis considerando a sua utilizaccedilatildeo em propriedades que
adotam o manejo fitossanitaacuterio isso por ser um produto de faacutecil obtenccedilatildeo e menos
oneroso aos produtores que cultivam o morangueiro poreacutem estudos mais
detalhados sobre sua atividade sobre outros agentes de controle bioloacutegico devem
ser estudados de maneira a propiciar o uso integrado deles pelos produtores
