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UNIVERSIDADE FEDERAL FLUMINENSE FACULDADE DE ODONTOLOGIA AVALIAÇÃO IN VITRO DA MICRODUREZA DO ESMALTE E DA MICROINFILTRAÇÃO ADJACENTE A RESTAURAÇÕES COM CIMENTO DE IONÔMERO DE VIDRO APÓS DESAFIO CARIOGÊNICO: ESTUDO NO MEV Niterói 2018

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UNIVERSIDADE FEDERAL FLUMINENSE

FACULDADE DE ODONTOLOGIA

AVALIAÇÃO IN VITRO DA MICRODUREZA DO ESMALTE E DA

MICROINFILTRAÇÃO ADJACENTE A RESTAURAÇÕES COM CIMENTO DE

IONÔMERO DE VIDRO APÓS DESAFIO CARIOGÊNICO: ESTUDO NO MEV

Niterói

2018

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UNIVERSIDADE FEDERAL FLUMINENSE

FACULDADE DE ODONTOLOGIA

AVALIAÇÃO IN VITRO DA MICRODUREZA DO ESMALTE E DA

MICROINFILTRAÇÃO ADJACENTE A RESTAURAÇÕES COM CIMENTO DE

IONÔMERO DE VIDRO APÓS DESAFIO CARIOGÊNICO: ESTUDO NO MEV

CAROLINA PIO DA SILVA BRAZ

Dissertação apresentada à Faculdade de Odontologia da Universidade Federal Fluminense, como parte dos requisitos para obtenção do título de Mestre, pelo Programa de Pós-Graduação em Odontologia. Área de Concentração: Clínica Odontológica Orientador: Profa. Dra. Thereza Christina Lopes Coutinho

Niterói

2018

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BANCA EXAMINADORA

Profa. Dra. Thereza Christina Lopes Coutinho

Instituição: Faculdade de Odontologia da Universidade Federal Fluminense

Decisão: _________________________Assinatura: ________________________

Profa. Dra. Roberta Barcelos Pereira de Souza

Instituição: Curso de Odontologia da Universidade Federal Fluminense – Instituto de

saúde de Nova Friburgo

Decisão: _________________________Assinatura: ________________________

Prof. Dr. Luiz Flávio Martins Moliterno

Instituição: Faculdade de Odontologia da Universidade do Estado do Rio de Janeiro

Decisão: _________________________Assinatura: ________________________

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DEDICATÓRIA

Dedico este trabalho primeiramente à Deus, por me permitir concluir mais esta etapa na minha vida e aos meus pais, Elio e Regina, pelo amor, dedicação e apoio incondicional.

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AGRADECIMENTOS

Agradeço a Deus, por estar sempre ao meu lado e pela oportunidade de concluir

mais esta etapa na minha vida.

Aos meus pais e minha irmã, Elio, Regina e Fabiane, por todo apoio incondicional

e incentivo em todos os momentos da minha vida. A minha sobrinha e afilhada, Lívia,

que chegou durante este curso para encher meu coração de alegria.

À minha família e amigos, que tem me apoiado e acompanhado durante toda

essa trajetória, em especial a minha prima Jaqueline, pela ajuda na conclusão desta

dissertação.

Agradeço a minha orientadora, Profa. Dra. Thereza Christina Lopes Coutinho, que

me acompanha desde a graduação, pela oportunidade da realização do curso de

mestrado, pela orientação, dedicação, atenção, apoio, incentivo e por todos os

conhecimentos transmitidos.

Agradeço também a aluna de iniciação científica, Mariana Braz Herzog, que

participou desta pesquisa com muita dedicação e comprometimento.

À minha colega de curso, Sunny, pelos momentos de convívio, parceria e

amizade.

À todos os funcionários do LABA e ao seu José Maria, do LABiom-R, pela grande

ajuda na concretização deste projeto.

À secretária da Odontopediatria, Crizolene, pela disponibilidade e carinho durante

todo esse período.

Agradeço ao gerente da minha unidade de trabalho, Carlos Uzeda, pela

colaboração e apoio para que fosse possível conciliar minha jornada de trabalho e o

curso de mestrado.

.

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RESUMO

Braz CPS. Avaliação in vitro da microdureza do esmalte e da microinfiltração adjacente a restaurações com cimento de ionômero de vidro após desafio cariogênico: estudo no MEV [dissertação]. Niterói: Universidade Federal Fluminense, Faculdade de Odontologia; 2018.

Os objetivos deste estudo foram verificar a microdureza longitudinal (ML) e a

microinfiltração marginal (MM) no esmalte adjacente a restaurações, após desafio

cariogênico in vitro. Foram utilizados blocos de esmalte bovino, restaurados com

cimentos de ionômero de vidro (CIV) e resina composta sem flúor e submetidos a

ciclagens de pH. O grupo de controle negativo foi mantido apenas em saliva artificial.

Após, todos os blocos foram imersos em corante, seccionados e o grau de MM medido

através de escores. Para determinar a ML, foi utilizado um microdurômetro Knoop nas

profundidades de 25µm, 75µm e 150µm. Cinco amostras de cada grupo foram

avaliadas qualitativamente no MEV (20x e 80x). Os dados foram analisados

estatisticamente no software SPSS for Windows v. 20 através dos testes não-

paramétricos de Kruskal-Wallis e de Mann-Whitney. Em relação à MM, observou-se

que nenhum dos materiais impediu totalmente a penetração do corante, sendo que,

dentre os CIVs testados, o que obteve melhor desempenho foi o Maxxion R (G4),

seguido pelo ION-Z (G1) e Vitro Fil® R (G2), no entanto, sem diferença significativa

entre eles. Quanto à ML, o G4, G1 e o Vitro Fil® LC (G5) obtiveram os resultados mais

altos de dureza dentre os materiais testados. Em relação à análise do MEV, observou-

se a presença de fendas nas margens das restaurações, independente do material.

Conclui-se que, o Maxxion R e o ION-Z demonstraram bom potencial para prevenção

da microinfiltração e da ocorrência de cárie no esmalte adjacente à restauração,

mesmo em condições de alto desafio cariogênico.

Palavras-chave: cimentos de ionômeros de vidro, infiltração dentária, cárie dentária.

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ABSTRACT

Braz CPS. In vitro evaluation of enamel microhardness and microleakage adjacent to restorations with glass ionomer cement after cariogenic challenge: MEV study [dissertation]. Niterói: Fluminense Federal University, School of Dentistry; 2018.

The purpose of this work was to verify the longitudinal microhardness (LM) and the

marginal microleakage (MM) in the enamel adjacent to restoration after cariogenic

challenge in vitro. Blocks of bovine enamel were used, restored with glass ionomer

(GI) and composite resin without fluoride and submitted of pH cycling. The negative

control group was maintained only in artificial saliva. After, all blocks were immersed

in dye, sectioned and the degree of MM was measured through scores. To determine

LM, a Knoop microhardness tester was used in depths of 25μm, 75μm and 150μm.

Five samples from each group were qualitatively evaluated by SEM (20x and 80x). The

data were analyzed statistically in SPSS for Windows v. 20 software through non-

parametric Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests. Regarding MM, it was observed

that none of the materials completely prevented the penetration of the dye, and among

the GIs tested, the one that obtained the best performance was Maxxion R (G4),

followed by ION-Z (G1) and Vitro Fil® R (G2), however, with no significant difference

among them. As for LM, G4, G1 and Vitro Fil® LC (G5) obtained the highest hardness

results among the tested materials. Regarding the SEM analysis, the presence of gaps

was observed in the margins of the restorations independent of the material. It was

concluded that Maxxion R and ION-Z demonstrated good potential for the prevention

of microleakage and the occurrence of caries in the enamel adjacent to the restoration,

even in conditions of high cariogenic challenge.

Keywords: glass ionomer cements, dental leakage, dental caries.

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1 - INTRODUÇÃO

A longevidade das restaurações dentárias depende da durabilidade do material e

de suas propriedades, tais como a resistência ao desgaste, durabilidade da interface

entre o dente e a restauração e do nível de destruição dentária. Sob condições ácidas,

todos os materiais restauradores dentários têm mostrado degradação ao longo do

tempo (RIOS et al., 2008).

A contração de polimerização dos materiais resinosos é ainda considerada

altamente responsável pelo fracasso de restaurações de resina composta direta. Esta

contração pode induzir tensões, que podem levar à quebra da ligação nas paredes da

cavidade, promover lacunas marginais e, subsequentemente, microinfiltração. A

microinfiltração pode predispor um dente à descoloração, cárie recorrente, inflamação

pulpar, sensibilidade pós-operatória e, inclusive, à necrose pulpar (MOUSAVINASAB

et al.,2008).

Embora os materiais restauradores sejam menos susceptíveis à desmineralização

ácida em comparação com o esmalte, esta desmineralização pode induzir, pelo

menos até certo ponto, a degradação da matriz e partículas de carga de materiais

restauradores (FRANCISCONI et al.,2008). Yu et al. (2009) relatam que o desafio

ácido tem efeitos negativos sobre o desgaste superficial e propriedades físicas de

cimentos de ionômero de vidro (CIV), compósitos modificados por poliácidos e resinas

compostas.

Por ser um material que libera flúor, o cimento de ionômero de vidro resinoso é

amplamente utilizado em crianças e adolescentes (CROLL; NICHOLSON, 2002).

Surgiu a partir do acréscimo de uma resina hidrofílica (HEMA), como um solvente, ao

ionômero de vidro convencional, cujo objetivo foi melhorar suas propriedades

mecânicas (SIDHU; WATSON, 1995), aumentar o tempo de trabalho com controle do

processo fotoquímico de presa, acelerar o endurecimento da superfície (DAVIDSON,

2006) e melhorar o padrão de translucidez, podendo ser utilizado em áreas estéticas.

Algumas propriedades positivas do cimento de ionômero de vidro convencional

também estão presentes no resinoso, como: liberação de flúor e a adesão à estrutura

dental, visto que a reação de presa do tipo ácido-base, também é observada no

cimento de ionômero de vidro resinoso (ESPEZIM, 2011).

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Os materiais restauradores ficam expostos a diversas substâncias provenientes

da alimentação, como ingestão de bebidas e isto inclui uma variedade de compostos

químicos como ácidos, bases, sais, álcoois e oxigênio (FERRACANE, 2006). Estes

compostos podem provocar alterações nas propriedades dos materiais, como

desgaste da matriz orgânica e o deslocamento das partículas inorgânicas, formando

lacunas que tornam a superfície irregular e favorecem o acúmulo de placa bacteriana

e pigmentações, que comprometem, consequentemente, a longevidade das

restaurações (SARRETT et al., 2000; PRAKKI et al., 2005; SOUZA et al., 2005).

Com o tempo, processos de biodegradação também podem promover alterações

na textura superficial dos materiais odontológicos (ROULET; WÃLTI, 1984; VAN

GROENINGEN et al.,1986; SIDHU et al., 1997). Com o aumento da rugosidade,

aumenta-se o risco de desenvolvimento de lesões de cárie e inflamação gengival

(QUIRYNEN, BOLLEN, 1995; BOLLEN et al., 1997), sendo observados como

resultado desta rugosidade de superfície, o brilho diminuído e alterações da cor, o que

afeta a estética das restaurações (SILVA et al., 2013).

Turssi et al. (2002) avaliaram o efeito da água destilada, saliva artificial e um

modelo de ciclagem dinâmica de pH sobre a micromorfologia superficial de materiais

resinosos (um cimento de ionômero de vidro resinoso, um compômero, uma resina

microparticulada e uma microhíbrida). Observaram que os valores de rugosidade dos

materiais aumentaram significativamente quando expostos à ciclagem de pH se

comparados à água destilada e à saliva artificial. O cimento de ionômero de vidro

resinoso apresentou a maior rugosidade em todos os meios de armazenamento.

Observaram ainda, alteração micromorfométrica em aumento de 3000X para a resina

microhíbrida (Filtek Z250), mostrando lacunas que podem ser atribuídas à degradação

ao redor da matriz inorgânica ou do silano.

Além de adequadamente retidas, as restaurações também devem manter o dente

livre de cárie secundária e o paciente livre de sensibilidade dolorosa. Assim,

parâmetros como o potencial de infiltração marginal na interface entre o dente e a

restauração têm grande importância na validação clínica desses materiais (HEINTZE,

2007). Nos últimos anos, houve uma dedicação no desenvolvimento de materiais

restauradores que sejam resistentes ao desgaste e ao mesmo tempo estéticos. Novos

materiais têm sido fabricados para melhorar a adaptação e tentar diminuir a infiltração

marginal gengival, tanto em preparos cavitários em esmalte como em dentina, ou

ambos, porém elas continuam ocorrendo.

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Dessa forma, parece válida a análise do potencial anticariogênico de materiais

restauradores, em ambientes e circunstâncias dinâmicas em que se dá o processo de

cárie. Estudos in vitro com materiais restauradores, avaliando a microdureza das

margens do esmalte antes e após circunstâncias dinâmicas que mimetizem as

condições clínicas de desafio cariogênico, são de grande importância na avaliação do

potencial preventivo desses materiais (RIBEIRO et al, 2009).

Ribeiro et al (2009) avaliaram in vitro, a microdureza do esmalte adjacente a

restaurações com dois CIVs convencionais, um CIV resinoso e uma resina composta

sem flúor após desafio cariogênico e observaram que a desmineralização foi menor

no esmalte adjacente aos CIVs convencionais do que no esmalte adjacente aos

materiais resinosos.

Recentemente, foi lançado no mercado um CIV convencional com propriedades

bioativas (ION-Z). Nosso grupo de pesquisa avaliou este material previamente ao seu

lançamento, com relação à perda de massa e rugosidade em condições de desafio

cariogênico, obtendo resultados promissores (dados ainda não publicados).

Com base no que foi exposto acima, o objetivo deste estudo laboratorial in vitro

foi avaliar a alteração de microdureza longitudinal do esmalte restaurado com 6

materiais odontológicos (quatro CIVs convencionais, um CIV resinoso e uma resina

composta) submetido a desafio cariogênico durante 10 dias e a adaptação marginal

destes materiais à parede cavitária. A hipótese nula testada foi que não existe

diferença significativa entre os materiais ionoméricos testados e a resina no que diz

respeito à dureza do esmalte e microinfiltração marginal quando comparado com o

controle.

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2- METODOLOGIA

2.1 Delineamento experimental

O estudo realizado foi in vitro, utilizando 180 blocos de esmalte que foram

restaurados com os seguintes materiais (n=30/grupo): um cimento de ionômero de

vidro (CIV) convencional com composto bioativo, três CIVs convencionais, um CIV

resinoso e uma resina composta sem BisGMA. Após preparo cavitário e restauração

com os respectivos materiais, dez blocos de esmalte restaurados com cada material

(n= 60) foram mantidos em saliva artificial (controle). A avaliação das alterações no

esmalte foi realizada após 10 dias de ciclagem, através da avaliação da

microinfiltração marginal em microscópio e da microdureza longitudinal. Cinco

amostras de cada grupo foram avaliadas ao MEV em aumentos 20x e 80x para análise

do esmalte e adaptação marginal das restaurações após os tratamentos conforme

disposto no fluxograma da Figura 1:

Figura 1 – Fluxograma do experimento

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2.2 Preparo dos blocos de esmalte bovino

Para a realização desta pesquisa foram utilizados 180 incisivos bovinos sem

trincas ou manchas visíveis, obtidos de frigorífico (Vangélio Mondelli, Bauru – SP),

que foram mantidos em solução de timol a 0,2% e pH 7 em refrigerador até o momento

do experimento.

Os dentes foram manipulados no referido laboratório utilizando-se jaleco, óculos

de proteção, gorro, luvas e máscaras seguindo o rigor da biossegurança. Após a

remoção de debris, os dentes foram polidos com taça de borracha (substituídas a cada

5 dentes), pasta de pedra pomes e água durante 10s, em baixa rotação e lavados com

jatos de ar / água por 10s e secos com jatos de ar da seringa tríplice. Posteriormente,

foram seccionados com uma máquina de corte de precisão (Labcut1010 – ExtecCorp.,

EUA) sob refrigeração na região central da coroa obtendo-se um bloco de 5X5mm,

perfazendo um total de 180 blocos.

Os blocos foram submetidos a uma planificação tanto da dentina quanto do

esmalte. Para planificação da dentina, os blocos foram fixados com cera pegajosa

Kota (Kota Ind. e Com. Ltda., São Paulo, SP) ao redor do mesmo, com o auxílio de

um instrumento PKT (Duflex 55G, SS White Artigos Dentários Ltda, Rio de Janeiro,

RJ) e uma lamparina (Jon, Ind. Bras., São Paulo, SP) no centro de um disco de acrílico

cristal de 30 mm de diâmetro por 8 mm de espessura, com a maior área plana do

esmalte voltada para baixo. O conjunto (disco/dente) foi adaptado a uma Politriz

metalográfica (APL 4, Arotec, Cotia, SP), com um sistema de suporte que permitiu que

o desgaste fosse paralelo à base do disco de acrílico. A planificação da dentina interna

foi realizada com uma lixa de silicone carbide de granulação #320 (Carbimet Paper

Discs, ref. 30-5108-320, Buehler, Lake Bluff, IL, USA), em baixa velocidade, com

refrigeração a água deionizada, até que os blocos ficassem com espessura de 3mm.

A seguir, os blocos de esmalte foram removidos dos discos de acrílico e limpos com

xilol (Pharmácia Specifica Manipulação de Fórmulas, Bauru, SP), para remoção dos

resíduos de cera. Os blocos foram novamente fixados nos discos de acrílico com a

cera pegajosa, no centro do disco de acrílico desta vez com a face de esmalte exposta,

para que fosse feita sua planificação e o polimento para obter-se uma superfície plana,

paralela à base do acrílico e polida. A superfície dos blocos foi lixada e planificada

com discos abrasivos de alumina de granulação variada (#600 e #1200, Buehler, EUA)

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refrigerados a água, durante 30s e 60s, respectivamente e polida com disco de feltro

e solução de diamante (1μm, Buehler, EUA) durante 6s na Politriz até que a superfície

apresentasse um aspecto vítreo. Ao final do polimento, os blocos foram lavados por 5

min com água destilada em aparelho de ultrassom.

2.3 Preparo cavitário e restauração dos blocos de esmalte

Cavidades em forma de caixa (2x2x1mm) foram preparadas com pontas

diamantadas #2292 (KG Sorensen, Barueri, SP, Brasil), no centro de cada bloco, com

uma peça de mão de alta velocidade (Dabi Atlante, Ribeirão Preto, SP, Brasil). Brocas

novas foram substituídas a cada cinco preparos. Os preparos foram delimitados com

grafite e a profundidade das cavidades padronizadas através do diâmetro da ponta

ativa da broca.

Após o preparo das cavidades, os 180 espécimes foram randomizados nos grupos

experimentais utilizando função aleatória do Excel (https://pt.wikihow.com/Criar-Uma-

Amostra-Aleat%C3%B3ria-no-Excel), codificados numericamente e distribuídos de

forma homogênea entre os seis grupos (n=30), para serem restaurados com um dos

materiais a serem testados (n=30/grupo): G1 - CIV ION-Z (FGM, Joinville, SC, Brasil);

G2 - Vitro Fil® R (Nova DFL, Rio de Janeiro, RJ, Brasil); G3 – Ionglass R (Maquira,

Indústria de Produtos Odontológicos SA, Maringá, Paraná, Brasil); G4 - Maxxion® R

(FGM, Joinville, SC, Brasil): G5 – CIV Vitro Fil® LC (Nova DFL, Rio de Janeiro, RJ,

Brasil) e G6 – resina composta sem BisGMA Vittra APS (FGM, Joinville, SC, Brasil)

(controle positivo). Sessenta blocos de esmalte restaurados com os respectivos

materiais (n=10/grupo), não participaram das ciclagens e ficaram imersos em saliva

artificial durante o experimento (controle negativo).

Para o preenchimento das cavidades com os CIVs convencionais (G1 a G4), os

materiais foram manipulados de acordo com as proporções indicadas pelos

fabricantes e inseridos com uma seringa Centrix (Nova DFL, Rio de Janeiro, RJ,

Brasil). Após a inserção dos materiais, os mesmos foram cobertos por uma fita matriz

de poliéster e foi exercida uma pressão digital por 10s para uniformizar a superfície e

possibilitar o extravasamento do excesso de material. Para o G5 e G6, após a inserção

dos respectivos materiais na cavidade, foi realizada a polimerização dos mesmos com

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o aparelho LED (Cotolux- Coltène/ Whaledent AG), com comprimento de onda de

470nm, cuja potência foi mantida entre 1037-1090 mW/cm2, por meio de um

radiômetro (Radiômetro RD-7/ ECEL, Ribeirão Preto, SP, Brasil). Foi utilizado o tempo

preconizado pelos fabricantes tanto para a manipulação dos materiais

(condicionamento ácido com ácido fosfórico a 37% (FGM, Joinville, SC, Brasil e

aplicação do primer do próprio material) quanto para a fotoativação. Para os CIVs

convencionais foi aguardado o tempo de presa preconizado pelo fabricante e proteção

dos mesmos com esmalte de unha incolor (Colorama®, São Paulo, Brasil). Após 24

horas em umidade relativa a 37°C, foi realizado o polimento das restaurações com

discos de lixa de óxido de alumínio com granulação decrescente (Sof-Lex®/3MESPE,

Sumaré, SP, Brasil) em baixa rotação sob refrigeração.

2.4 Ciclagens de pH

Os blocos de esmalte restaurados foram cobertos com duas camadas de esmalte

cosmético de cor vermelha (Colorama®, São Paulo, SP, Brasil) deixando livre a

restauração e área de 1,0mm de esmalte ao redor desta para padronizar a área de

atuação das soluções desmineralizante (2mMcloreto de cálcio; 2mM fosfato de

potássio; 75mM acetato de sódio - pH 4,3) e remineralizante (1,5mM cloreto de cálcio;

0,95 mM fosfato de potássio; 150 mM de cloreto de potássio - pH 7,0) durante a

ciclagem de pH. Iniciando o ciclo, cada amostra foi imersa individualmente em 30 mL

de solução desmineralizante por 6h, lavada em água deionizada, seca e imersa

individualmente em 30mL de solução remineralizante, completando o ciclo de 24h.

Decorrido este tempo, os blocos foram removidos da solução remineralizante,

lavados, secos e novamente imersos em solução desmineralizante por 6 h, dando

início a um novo ciclo. Foram realizadas 10 ciclagens para cada grupo experimental

conduzidas por 10 dias. Todas as soluções foram renovadas diariamente, exceto as

dos dias 6, 7, 9 e 10, quando os blocos permaneceram somente na solução

remineralizante de acordo com metodologia descrita por Ribeiro et al (2009).

Os blocos de esmalte dos respectivos grupos controles não participaram das

ciclagens de pH e ficaram imersos em saliva artificial durante o experimento.

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2.5 Avaliação da microinfiltração marginal (MM)

Após a ciclagem de pH, foram reaplicadas as duas camadas de esmalte

cosmético de cor vermelha (Colorama®, São Paulo, SP, Brasil) em toda a superfície

do bloco, exceto em uma faixa de 1mm ao redor das restaurações, permitindo que

somente a interface contatasse o traçador. As amostras foram então imersas em

solução de azul de metileno a 2% (Farmácia Fórmula & Ação, São Paulo, SP, Brasil)

durante 12h (LOPES et al, 2001), incluindo as amostras do grupo controle de cada

material.

Após esta etapa, as amostras foram seccionadas longitudinalmente no sentido

vestíbulo-lingual, através do centro das restaurações com disco diamantado dupla-

face (KG Sorensen, Cotia, SP, Brasil) sob irrigação constante para obtenção de duas

fatias de cada bloco. O grau de MM foi medido com base em uma escala de escores

relacionados ao grau de penetração do traçador através das margens da restauração

(GUGLIELMI et al, 2012): escore 0 = nenhuma penetração de corante; 1 = penetração

do corante até metade da parede incisal ou gengival; 2 = penetração do corante

envolvendo mais da metade da parede incisal ou gengival, sem envolvimento da

parede axial; e 3 = penetração do corante envolvendo toda a extensão da parede

incisal ou gengival, com envolvimento da parede axial. Dois observadores calibrados

avaliaram todas as fatias sob 40X de aumento em lupa estereoscópica (CGA 6745,

Tecnival, Buenos Aires, Argentina) sem conhecimento sobre o material avaliado. Em

caso de discordância, um terceiro observador foi consultado, sendo sua decisão

considerada final.

2.6 Análise de microdureza longitudinal (ML)

Após avaliação da MM, foi realizada a avaliação da ML. Para tal, as amostras

seccionadas foram novamente fixadas com cera pegajosa Kota no centro do disco de

acrílico de maneira que ficasse exposta a superfície interna do esmalte que seria

aplainada e polida. O ensaio de ML foi realizado utilizando-se um microdurômetro

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(modelo HMV-2000 Shimadzu Corporation, Tóquio, Japão) no qual foi acoplado um

penetrador Knoop com carga de 25g por 15s. Duas fileiras de 3 indentações foram

feitas, uma na região central do esmalte exposto e a outra a uma distância de 100μm

da fileira central nas distâncias de 25μm, 75μm e 150μm da superfície externa do

esmalte. Os valores médios dos pontos medidos foram calculados em cada distância

(GUGLIELMI et al, 2012).

2.7 Análise no microscópio eletrônico de varredura (MEV)

Cinco blocos de esmalte selecionados previamente de cada grupo foram

analisados no MEV para avaliação da adaptação marginal das restaurações.

Inicialmente, as amostras foram secas em estufa a 37º C durante 24h e pulverizadas

com ouro. As amostras foram avaliadas ao MEV (Jeol JSM-6510LV, Tóquio, Japão),

com voltagem de aceleração de 25kV em aumentos 20x e 80x (RENGO et al, 2015).

2.8 Análise estatística

Os resultados obtidos foram tabulados e, posteriormente, foi efetuado o

tratamento estatístico em relação à normalidade e homogeneidade dos dados no

software SPSS for Windows v. 20. Os dados relacionados à MM e à ML foram

analisados com o teste não paramétrico de Kruskal-Wallis e, no caso de significância

estatística, o teste não-paramétrico de Mann-Whitney foi utilizado para analisar as

interações entre os grupos. O nível de significância adotado foi de 5% para todos os

testes. O teste de Cohen´s Kappa foi utilizado para checar a reprodutibilidade inter-

examinador. As imagens obtidas do MEV foram analisadas qualitativamente.

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3 - ARTIGO PRODUZIDO

Artigo a ser submetido ao periódico Brazilian Dental Journal.

Evaluation of microhardness of bovine enamel and microleakage adjacent to restorations with

glass ionomer cement after cariogenic challenge: in vitro

Carolina Pio da Silva BRAZ*

Mariana Braz HERZOG**

Thereza Christina Lopes COUTINHO***

*Universidade Federal Fluminense/Faculdade de Odontologia/ Departamento de

Odontoclínica/ Niterói – Rio de Janeiro - Brasil

** Universidade Federal Fluminense/Faculdade de Odontologia/ Departamento de

Odontoclínica/ Niterói – Rio de Janeiro - Brasil

*** Universidade Federal Fluminense/Faculdade de Odontologia/ Departamento de

Odontoclínica/ Niterói – Rio de Janeiro - Brasil

Correspondência:

Profa. Dra. Thereza Christina Lopes Coutinho

Departamento de Odontologia, Faculdade de Odontologia, UFF, Rua Mário Santos

Braga,28, Valonguinho, 24020-140, Niterói, RJ, Brasil. Tel: +55-21-2629-9829. E-mail:

[email protected]

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SUMMARY

The purpose of this work was to verify the longitudinal microhardness (LM) and the marginal

microleakage (MM) in the enamel adjacent to restoration after cariogenic challenge in vitro.

Blocks of bovine enamel were used, restored with glass ionomer (GI) and composite resin

without fluoride and submitted to pH cycling. The negative control group was maintained only

in artificial saliva. After, all blocks were immersed in dye, sectioned and the degree of MM was

measured through scores. To determine LM, a Knoop microhardness tester was used in depths

of 25μm, 75μm and 150μm. Five samples from each group were qualitatively evaluated by

SEM (20x and 80x). The data were analyzed statistically in SPSS for Windows v. 20 software

through non-parametric Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests. Regarding MM, it was

observed that none of the materials completely prevented the penetration of the dye, and among

the GIs tested, the one that obtained the best performance was Maxxion R (G4), followed by

ION-Z (G1) and Vitro Fil® R (G2), however, with no significant difference among them. As

for LM, G4, G1 and Vitro Fil® LC (G5) obtained the highest hardness results among the tested

materials. Regarding the SEM analysis, the presence of gaps was observed in the margins of

the restorations independent of the material. It was concluded that Maxxion R and ION-Z

demonstrated good potential for the prevention of microleakage and the occurrence of caries in

the enamel adjacent to the restoration, even in conditions of high cariogenic challenge.

Key words: glass ionomer cements, dental leakage, dental caries.

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INTRODUCTION

The longevity of dental restorations depends on the endurance capability of the material

and its properties, such as the resistance to abrasion, the durability of the interface between the

tooth and the restoration and the degree of dental damage. Under acidic conditions, all the dental

restoration materials have shown signs of deterioration thorough time (RIOS et al, 2008) (1).

Besides from being properly retained, restorations also need to keep the tooth free from

secondary dental caries and the patient free from painful sensations. Therefore, parameters such

as the potential for marginal leakage in the interface between the tooth and the restoration have

an important impact on the clinical validation of these materials (HEINTZE, 2007) (2). Over

the past years, there has been a special interest in the development of restoration materials that

are at the same time resistant to abrasion and aesthetic. New materials are being produced to

help the suiting and to reduce gingival marginal leakage, on both enamel and dentin cavity

preparations.

Consequently, the analysis of the anti-cariogenic potential of restoration materials seems

to be validated under the dynamic circumstances and environments on which the dental caries

are formed. In vitro studies using restoration materials, assessing the microhardness of the

enamel margins before and after the dynamic circumstances that mimic the clinical conditions

of the cariogenic challenge, are very important to estimate the preventive potential of these

materials (RIBEIRO et al., 2009) (3).

Ribeiro et al (2009) (3) used in vitro analysis to assess the microhardness of enamel

adjacent to restorations containing two conventional GICs, a resinous GIC and a composite

resin without fluoride, after the cariogenic challenge, and observed that the demineralisation

was less harsh on the enamel adjacent to conventional GICs than the enamel adjacent to

resinous materials.

Recently, a conventional GIC with bioactive properties (ION-Z) was released in the

market. Our research group analysed this material before its release, assessing mass loss and

roughness under cariogenic challenge conditions, and obtained promising results (data yet to

be published).

Based on the above, the goal of this laboratory study was to analyse the alteration in

longitudinal microhardness of enamel restored with six different dental materials (four

conventional GICs, one resinous GIC and one composite resin) under cariogenic challenge in

vitro during 10 days, and the marginal adaptation of these materials to the cavity wall. The null

hypothesis deemed that there is not a significant difference between the ionomer materials

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tested and the resin when it comes to the hardness of the enamel and the marginal microleakage

when compared to the control.

MATERIAL AND METHODS

Experimental design

The study accomplished in vitro utilised one-hundred eighty slabs of enamel restored

with the following dental materials (n=30): one conventional glass-ionomer cement (GIC) with

bioactive composite, three conventional GICs, one resinous GIC and one composite resin

without Bis-GMA. After the cavity preparation and restoration using the respective materials,

ten slabs of enamel, each restored with a different material (n=60), were kept in artificial saliva

(control). The evaluation of alterations on the enamel was carried on after a cycle of 10 days,

through the analyses of the marginal microleakage under a microscope and the longitudinal

microhardness. Five samples of each group were studied with the help of a scanning electron

microscope (SEM) at a magnification ranging from 20x to 80x for analysis of the enamel and

marginal adaptation of restorations after the treatment.

Preparation of bovine enamel slabs

For the purpose of this research, one-hundred eighty slabs of bovine incisors without

noticeable cracks or stains, obtained from a butcher shop (Vangelio Mondelli, Bauru – SP),

were immersed in thymol solution (0.2% and pH 7) and kept inside a refrigerator at the

Laboratory of Dental Materials of the Faculty of Dentistry/UFF until the moment of the

experiment.

The manipulation of the teeth was carried out inside the laboratory using white coats,

protection glasses, hats, gloves and masks, following rigorous biosecurity norms. After removal

of debris, the teeth were polished using rubber cups (replaced after every fifth tooth), pumice

paste and water for 10 seconds at slow rotation, washed with air/water jets for 10 seconds, then

dried with air jets using a triple syringe. Afterwards, each tooth was sectioned using a precision

cutting machine (Labcut1010 – Extec Corp., USA) following refrigeration on the central region

of the crown from which was obtained a slab of 5x5mm, making a total of one-hundred eighty

slabs.

The slabs were submitted to a flattening of both the dentine and the enamel. For flattening

the dentine, Kota sticky wax (Kota Ind. e Com. Ltda., São Paulo – SP) was used around the

slabs for fixation, with the help of a PKT instrument (Duflex 55G, SS White Artigos Dentários

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Ltda., Rio de Janeiro – RJ) and an alcohol lamp (Jon, Ind. Bras., São Paulo – SP) in the centre

of an acrylic disc (30x8mm), with the largest flat area of the enamel facing down. The set

(disc/tooth) was adapted to a metallographic polisher (APL 4, Arotec, Cotia – SP) using a

support system that enabled degradation close to the base of the acrylic disc. The flattening of

the internal dentine was made possible using a SiC grinding paper #320 (Carbimet Paper Discs,

ref. 30-5108-320, Buehler, Lake Bluff, IL, USA) at low speed, cooling to deionised water, until

the slabs reached a thickness of 3mm each. The enamel slabs were then removed from the

acrylic disc and cleaned out of wax residue using xylol (Pharmácia Specifica Manipulação de

Fórmulas, Bauru – SP). The slabs were fixed in the centre of the acrylic disc one more time

using the sticky wax with the enamel facing up this time, for flattening and polishing of the

surface parallel to the base of the acrylic disc. The slabs surface was flattened using alumina

abrasive discs of distinct granulations (#600 and #1200, Buehler, USA) for 30 and 60 seconds,

respectively, and polished with felt discs using a diamond solution (1µm, Buehler, USA) for 6

seconds in the Politriz, until the surface presented a glassy look. After polishing, the slabs were

washed for 5 minutes, using deionised water and an ultrasonic device.

Cavity preparation and restoration of enamel slabs

Cavities shaped like a box (2x2x1mm) were prepared using diamond burs #2292 (KG

Sorensen, Barueri – SP), in the centre of each slab, with the help of a high-speed hand-piece

(Dabi Atlante, Ribeirão Preto – SP). The burs were replaced, after every fifth procedure. The

preparations were delimited using graphite and the depth of the cavities, standardised through

the diameter of the active tip of the drill bit.

After the preparation of the cavities, all the one-hundred eighty specimens were mixed

inside the experimental groups, using the “random” function on Excel

(https://pt.wikihow.com/Criar-Uma-Amostra-Aleat%C3%B3ria-no-Excel), codified by

number and distributed homogeneously between the six groups (n=30), to be restored using one

of the dental materials to be tested (n=30/group): G1 – GIC ION-Z (FGM, Joinville, SC, Brazil);

G2 – Vitro Fil® R (Nova DFL, Rio de Janeiro, RJ, Brazil); G3 – Ionglass R (Maquira, Indústria

de Produtos Odontológicos SA, Maringá, Paraná, Brazil); G4 – Maxxion® R (FGM, Joinville,

SC, Brazil); G5 – CIV Vitro Fil® LC (Nova DFL, Rio de Janeiro, RJ, Brazil) and G6 –

composite resin without Bis-GMA Vittra APS (FGM, Joinville, SC, Brazil) (positive control).

Sixty enamel sections, restored using the same materials (n=10/group), were not incorporated

in the pH cycling and remained immersed in artificial saliva during the experiment (negative

control).

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For the filling of the cavities, the conventional GICs (G1 and G4) were manipulated

proportionally, according to the manufacturer instructions, and injected with a Centrix syringe

(Nova DFL, Rio de Janeiro, RJ, Brazil). Following the insertion of the materials, the slabs were

covered using polyester matrix tape, and some pressure was applied to smooth the surface,

enabling the overflow of excessive material. For the G5 and G6 groups, after the insertion of

materials using the Centrix syringe in the middle of the cavities, polymerisation was made

possible through the use of LED equipment (Cotolux-Coltene/ Whaledent AG), with a

wavelength of 470nm and potency between 1037-1090 mW/cm2, measured with a radiometer

(Radiometer RD-7/ECEL, Ribeirão Preto, SP, Brazil). The correct time, as specified by the

manufacturers, was employed during the administration of the materials - acidic conditioning

using phosphoric acid at 37% (FGM, Joinville, SC, Brazil) and application of the primer of the

material itself – and also during the photo-activation. For the conventional GICs, the

manufacturer's recommended setting time was also applied, and a transparent nail polish

(Colorama®, São Paulo, Brazil) was used for protection (Fig. 1). After 24 hours in a relatively

humid environment at 37ºC, the restorations were polished using file discs made of aluminium

oxide and decreased granulation (Sof-Lex®/3MESPE, Sumaré, São Paulo, Brazil) at low

rotation under refrigeration.

Group

Material

Manufacturer

Classification

Lot Cavity

conditioning

Proportion

Powder:Liquid

Protection of

material surface

Photo-

polymerisation

G1

ION-Z

FGM

Conventional

GIC

130

116

Application of the

liquid contained in

the material for

10s;

Washing of the

cavity with water

jets; Removal of

water excess with

air jets.

1:1 Application of

transparent nail

polish

(Colorama®)

_____________

_________

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22

G2

Vitro Fil® R

Nova DFL

Conventional

GIC

160

912

70

Application of the

vitro conditioner

for 10s;

Washing of the

cavity with water

jets;

Drying of the

cavity with air jets.

1:1 Application of

transparent nail

polish

(Colorama®)

_____________

_________

G3

Ionglass R

Maquira

Conventional

GIC

070

216

_______________

___________

1:1 Application of

transparent nail

polish

(Colorama®)

_____________

_________

G4

Maxxion® R

FGM

Conventional

GIC

050

117

Application of the

liquid contained in

the material for

10s;

Washing of the

cavity with water

jets; Drying of the

cavity with air jets.

1:1 Application of

transparent nail

polish

(Colorama®)

_____________

_________

G5

Vitro Fil® LC

Nova DFL

Resinous GIC

160

811

13

Application of the

vitro conditioner

for 10s;

Washing of the

cavity with water

jets; Drying of the

cavity with air jets;

Application of the

primer for photo-

polymerisation.

1:2 Application of

the material’s

glazer

20 seconds

G6

Vittra APS

FGM

Composite

resin

260

117

Application of

conditioning

material (Condac

37) for 15s;

Washing of the

cavity with water

jets; Drying of the

cavity with air jets;

application of

adhesive.

_____________

___________

______________

__________

20 seconds

Fig 1. Description of materials and techniques used in each group.

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pH Cycling

Each restored enamel slab received two coats of red nail polish (Colorama®, São Paulo,

SP, Brazil), while the restoration itself and an area of 1mm around it were left free from the

product. That served to standardise the area in which demineralising (2mM of calcium chloride,

2mM of potassium phosphate, 75mM of sodium acetate - pH 4,3) and remineralising (1,5mM

of calcium chloride, 0,95mM of potassium phosphate, 150 mM of potassium chloride - pH 7,0)

solutions would act upon during the pH cycling. To begin the cycle, each sample was immersed

in 30ml of demineralising solution for 6 hours, washed with deionised water, dried and

immersed again in 30ml of remineralising solution, completing a cycle of 24 hours. After this

time, the slabs were removed from the remineralising solution, washed, dried and immersed in

demineralising solution for 6 hours one more time, thus starting a new cycle. Ten cycling

procedures took place for each experimental group, for ten days. Every solution was daily

replaced, except on days 6, 7, 9, and 10 when the enamel slabs stayed in remineralising solution,

following the methodology described by Ribeiro et al (2009) (3).

The enamel slabs from the control groups were not submitted to the pH cycling process,

and stayed immersed in artificial saliva during the experiment.

Marginal microleakage (MM) analysis

After the pH cycling process, two coats of red nail polish (Colorama®, São Paulo, SP,

Brazil) were reapplied to the surface of each slab, expect from the 1mm string around the

restorations so that the interface would be the only part exposed to the dye solution. The samples

were then immersed in methylene blue solution at 2% (Farmácia Fórmula & Ação, São Paulo,

SP, Brazil) for 12 hours, including the control samples of each material.

After the completion of this stage, the samples were sectioned longitudinally in the lingual

vestibular direction, through the centre of the restorations, using double side diamond burs (KG

Sorensen, Cotia, SP, Brazil) under constant irrigation to obtain two slices of each slab. The

levels of marginal microleakage were measured using a scale of scores associated with the

degree of penetration of the dye through the margins of the restoration (GUGLIELMI et al,

2012) (4): score 0 = no dye infiltration; 1 = dye infiltration through half of the incisal or gingival

wall; 2 = dye infiltration comprising over half-portion of the incisal or gingival wall, without

the involvement of the axial wall; and 3 = dye infiltration comprising the whole extent of the

incisal or gingival walls, with the involvement of the axial wall. Two calibrated observers

evaluated all the slices under a magnification of 40X in a stereoscopic magnifying glass (CGA

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6745, Tecnival, Buenos Aires, Argentina) without knowledge of the material. In the event of

disagreement, a third observer was consulted and its results were taken as final.

Longitudinal microhardness (LM) analysis

After the evaluation of the MM, the analysis of the LM took place. For the experiment, the

samples were fixed once again to the centre of the acrylic disc using Kota sticky wax. The

internal surface of the enamel was left exposed to be flattened and polished. The LM test was

carried using a microhardness tester (HMV-2000 Shimadzu Corporation, Tokyo, Japan),

attached to a Knoop penetrator with charge of 25g for 15 seconds. Two lines of three

indentations were created: one in the central region of the exposed enamel and the other, 100µm

far from the central line and 25µm, 75µm and 150µm from the external surface of the enamel.

The average valuations were calculated at each distance (GUGLIELMI et al, 2012) (4).

Scanning electron microscope (SEM) analisys

For the SEM analysis, five enamel slabs were parted from each group to assess the marginal

suiting of the restorations. Initially, the samples were dried in a drying oven at 37ºC for 24

hours and pulverised with gold. The samples were evaluated using the SEM (Jeol JSM-6510LV,

Tokyo, Japan), with an acceleration voltage of 25kV and magnifications of 20x and 80x

(RENGO et all, 2015) (5).

Statistics analysis

The results were tabulated and the statistics processing was carried out, taking into

consideration the normality and homogeneity of the data, using the SPSS software for Windows

Vista v. 20. The data, related to MM and LM, were analysed using the non-parametric Kruskal-

Wallis test. In the event of statistical significance, the Mann-Whitney test was applied,

examining group interactions. A 5% of significance level was adopted in all tests. The Cohen's

Kappa test was used to check the inter-examiner reproducibility. The images extracted from the

SEM were then analysed qualitatively.

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RESULTS

The valuations of inter-examiner reproducibility (Kappa value) was of 0.84. The results of

marginal microleakage are displayed below (Table 1 and Fig 2). None of the materials

prevented the marginal microleakage completely. The Kruskal-Wallis test pointed to a

significant statistic difference between the groups (H = 16.2815; p = 0.00). When the Mann-

Whitney test was applied, the results showed a significant statistic difference between the

groups G1 and G3 (Z = 1.97; p = 0.02), G1 and G5 (Z = 2.27; p = 0.01), G3 and G4 (Z = 2.16;

p = 0.01); G3 and G6 (Z = 2.40, p = 0.00); G4 and G5 (Z = 2.21; p = 0.01); G5 and G6 (Z =

2.70; p = 0.00).

When compared with the respective control groups, a significant statistic difference was

noticed only between the groups G3 (p < 0.05), G4 (p < 0.01) and G5 (p < 0.01).

Of all the GICs studied, the Maxxion R (G4) showed the best results, followed by ION-Z

(G1) and Vitro Fil® (G2), without significant differences between them (p > 0.05).

The results regarding microhardness can be found in Table 2 and graphics of Fig 3.

Analysing the microhardness at the depths of 25µm, 75 µm and 150µm, the Kruskal-Wallis test

only showed significant statistic differences between the groups at the depth of 25µm (H =

15.65; p = 0.00). On the other hand, the Mann-Whitney test pointed to a significant statistic

difference between the groups G1 and G3 (Z = 1.99; p < 0.05), G2 and G5 (Z = 3.15; p = 0.00),

G3 and G4 (Z=1.68; p < 0.05), G3 and G5 (Z = 3.15; p = 0.00), G5 and G6 (Z = 3.04; p = 0.00).

Regarding comparisons to the control group, the Kruskal-Wallis test showed a significant

difference only on G6 (H = 19.54; p = 0.00), in all depths.

Concerning the analysis obtained with the SEM, the presence of cracks was observed, on

the margins of the restorations, regardless of the material. The SEM images are displayed

further below (Fig 4), showing smaller gaps in groups G1, G4 and G6, respectively; when

compared with the gaps in groups G2, G3 and G5, respectively.

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Table 1. Average levels (± standard deviation) of Marginal Microleakage (MM) of the

experimental groups and respective control groups

Materials Control

Groups

Average

(d.p)

Experimental groups Average

(d.p)

ION-Z C1

2,45A

(±0,64) G1A,a

2,27

(±0,71)

Vitro Fil®R C2

2,10B

(±0,85) G2B,a,b

2,30

(±0,86)

Ionglass R C3

1,82C

(±1,10) G3D,b,c

2,66

(±0,58)

Maxxion® R C4

1,28E

(±0,66) G4F,a,b,d

2,16

(±0,84)

Vitro Fil® LC C5

1,72G

(±1,23) G5H,b,c

2,73

(±0,49)

Vittra APS C6

1,17I

(±1,13) G6I,a,b,d

1,90

(±1,04)

Numbers with the same overwritten lowercase and uppercase letters, no statistical difference

observed (p<0.05). The lowercase letters interact within the same column, the uppercase letters

within the same row.

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Fig 2. Graphic of average levels (± standard deviation) of Marginal Microleakage (MM) of

experimental groups and respective control groups

Table 2.Averagelevels (± standard deviation) of Longitudinal Microhardness (LM) of the

experimental groups and respective control groups

Materials Control

groups

Average

(d.p) Experimental

groups

Average

(d.p)

25µm 75 µm 150 µm 25 µm 75 µm 150 µm

ION-Z C1

312,85

(±44,60)

326,68

(±16,40)

335,68

(±39,63) G1

288,34a

(±75,45)

288,37a

(±52,68)

307,19a

(±74,13)

Vitro Fil®R C2

190,62

(±46,49)

230,23

(±22,79)

246,46

(±11,27) G2

248,61a,b

(±16,91)

249,95a

(±63,37)

276,54a

(±68,27)

Ionglass R C3

250,29

(±90,11)

260,82

(±34,94)

279,72

(±52,68) G3

214,14b,c

±63,90

224,07a

(±96,22)

229,98a

(±87,09)

Maxxion®

R C4

295,75

(±65,06)

293,33

(±30,23)

331;65

(±35,59) G4

295,47a,b,d

(±69,22)

321,10a

(±65,31)

331,18a

(±98,78)

Vitro Fil®

LC C5

282,62

(±74,23)

289,08

(±97,11)

328,53

(±117,93) G5

318,15a,d,e

(±39,17)

326,21a

(±78,78)

335,42a

(±90,45)

Vittra APS

C6 310,20B

(±53,07)

341,92D

(±38,84)

386,91F

(±72,51) G6

252,44C,a,b,

c,d

(±20,78)

256,75E,a

(±10,46)

258,63G,a

(±60,45)

Numbers with the same overwritten lowercase and uppercase letters, no statistical difference

observed (p<0.05). The lowercase letters interact within the same column, the uppercase letters

within the same row.

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Fig 3. Graphic of average levels (± standard deviation) of Longitudinal Microhardness (LM) of

experimental groups and respective control groups

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Fig 4. Representative SEM photomicrographs of the enamel surface adjacent to the restorations

in the six experimental groups.

G1 G2

G3 G4

G5 G6

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30

DISCUSSION

The present research assessed the marginal microleakage and longitudinal microhardness

of enamel samples restored with ionomer materials in high cariogenic challenge conditions.

The microleakage may predispose a tooth to discolouration, recurring caries, pulp

inflammation, postoperative sensibility and even pulp necrosis (MOUSAVINASAB et al,

2008) (6).

In previous studies, thermo-cycling was used to simulate the ageing of the restoration in

the laboratory. The present study did not use the technique, following the results of Spierings

et al. that, in 1985 (7), proved that thermo-cycling, do not really mimic real temperatures in the

oral cavity. And the results of Arcoria et al. (1990) (8) and Bijella et al. (2001) (9), that did not

find any significant difference before or after the thermo-cycling of the restorations of glass

ionomer cements.

It was observed that, among the restoring materials utilised in this study, none was capable

of preventing the marginal microleakage completely, which is in agreement with previous

researches (HALLETT; GARCIA-GODOY, 1993 (10); RAGGIO et al., 2002 (11); RIBEIRO

et al., 2009 (3)). However, the Maxxion R (G4) and the ION-Z (G1) obtained the best results,

showing moderate levels of marginal microleakage and sound levels of microhardness

(statistically significant), rejecting the null hypothesis. These results are compatible with the

images obtained by SEM that showed smaller gaps on these groups (Fig. 4).

At a depth of 25µm, the Maxxion R presented low rates of hardness. However, at higher

depth values (75µm and 150µm), a lower grade of demineralisation of the enamel was observed,

corroborated by higher levels of hardness (Fig. 3). These results were similar to results obtained

in the control group. Event after the cariogenic challenge, the restoration material was able to

prevent the progression of the demineralisation.

Some positive characteristics of the conventional glass-ionomer cement, such as the release

of fluoride and adherence to the dental structure, are also present in the resinous type. That

happens because of the acid-base setting reaction, also observed in the resinuous glass-ionomer

cement (ESPEZIM, 2011) (12). However, the resinous modified GIC tested during this

experiment did not obtain a better result compared to the conventional ones. After the

cariogenic challenge, the demineralisation on the adjacent enamel was lower amongst the

traditional materials. The results make sense since the amount of fluoride liberated by these

materials is higher in comparison to resin-modified GIC. Similar results can be found in

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previous studies (HALLETT; GARCIA-GODOY, 1993 (10); RIBEIRO et al., 2009 (3);

SALAS et al., 2011 (13)).

The composite resin (G6), although presenting lower levels of marginal microleakage,

compatible with the image obtained by SEM (Fig. 4), did not reach a favourable result for

microhardness. When compared to the control and other experimental groups, it showed lower

values than the GICs, following the studies of Salas et al., 2011 (13) that observed a significant

mineral loss in those specimens restored with composite resin. It is worth mentioning that the

composite resin used in the present study was released recently and does not contain Bis-GMA

in its composition thus other studies are required, for the evaluation of this material and

confirmation of the results.

The present study used bovine teeth to evaluate the marginal microleakage and the

longitudinal microhardness of the enamel. Reeves et al., 1995 (14) and Abuabara et al., 2004

(15) concluded that bovine teeth show significantly higher microleakage levels when compared

to human teeth. However, Donassollo et al., 2007 (16) did not observe a high contrast, when it

comes to microhardness levels between bovine and human enamels. This research, because it

was accomplished in vitro, has its limitations. Therefore, clinical studies utilising these

restoration materials need to be carried out to corroborate the results of this experiment, as well

as the analysis on deciduous substrate.

In conclusion, the Maxxion R and the ION-Z showed lower levels of microleakage and

higher levels of microhardness in the cariogenic challenge, proving to have good potential to

minimise the microleakage and the demineralisation of the enamel adjacent to restoration.

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Os objetivos deste estudo foram verificar a microdureza longitudinal (ML) e a microinfiltração

marginal (MM) no esmalte adjacente a restaurações, após desafio cariogênico in vitro. Foram

utilizados blocos de esmalte bovino, restaurados com cimentos de ionômero de vidro (CIV) e

resina composta sem flúor e submetidas a ciclagens de pH. O grupo de controle negativo foi

mantido apenas em saliva artificial. Após, todos os blocos foram imersos em corante,

seccionados e o grau de MM medido através de escores. Para determinar a ML, foi utilizado

um microdurômetro Knoop nas profundidades de 25µm, 75µm e 150µm. Cinco amostras de

cada grupo foram avaliadas qualitativamente no MEV (20x e 80x). Os dados foram analisados

estatisticamente no software SPSS for Windows v. 20 através dos testes não-paramétricos de

Kruskal-Wallis e de Mann-Whitney. Em relação à MM, observou-se que nenhum dos materiais

impediu totalmente a penetração do corante, sendo que, dentre os CIVs testados, o que obteve

melhor desempenho foi o Maxxion R (G4), seguido pelo ION-Z (G1) e Vitro Fil® R (G2), no

entanto, sem diferença significativa entre eles. Quanto à ML, o G4, G1 e o Vitro Fil® LC (G5)

obtiveram os resultados mais altos de dureza dentre os materiais testados. Em relação à análise

do MEV, observou-se a presença de fendas nas margens das restaurações, independente do

material. Conclui-se que, o Maxxion R e o ION-Z demonstraram bom potencial para prevenção

da microinfiltração e da ocorrência de cárie no esmalte adjacente à restauração, mesmo em

condições de alto desafio cariogênico.

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4 - CONCLUSÕES

Conclui-se que, o Maxxion R e o ION-Z demonstraram bom potencial para minimizar a

microinfiltração e a microdureza longitudinal no esmalte adjacente à restauração, mesmo em

condições de alto desafio cariogênico, sendo consideradas boas opções para o uso clínico,

principalmente, em Odontopediatria.