UPCII M MicrobiologiaTeórica 15

2º Ano2010/2011

Sumário

T15 MJC 2

Capítulo XIV. Diagnóstico Microbiológico

Produtos biológicos para análise

Colheita e transporte de amostras

Identificação do agente infeccioso:

Diagnóstico Directo

Cultura e isolamento

Caracterização do microrganismo

Antibiograma

Detecção da resposta imune

8-11-2011

Diagnóstico Microbiológico

Paciente

Pedido de Exame

Colheita

Transporte

Laboratório

Resultado

Interpretação

Diagnóstico e Terapia

8-11-20113 T15 MJC

Sensibilidade e Especificidade

+ -Presença do

Microrganismo Verdadeiro

(V+)

Falso

(F-)

Ausência do Microrganismo Falso

(F+)

Verdadeiro

(V-)

8-11-2011 T15 MJC

Colheitas a partir de: Excreções Secreções Tecidos Órgãos

8-11-2011T15 MJC 5

Colheita e Transporte das amostras

8-11-2011 T15 MJC

Anaeróbios / Fastidiosos / Vírus Psicrófilos / Mesófilos Colheitas de locais com MI Contaminação do ambiente (Espectoração e

saliva) Meio de recolha Eficácia Meio de transporte Antibioterapia precedente Tempo da colheita /Rota de infecção e ciclo de

infecção Tempo de espera para processamento

Análise laboratorial Directamente (1)

Presença de antigénios (A) Presença de sequências genómicas (B)

Após cultura (2) Presença de antigénios (A) Presença de sequências genómicas (B)

Pesquisa e identificação da toxina

8-11-2011T15 MJC 7

1 – Observação directa

Ovos de helmintas

Cryptococcus neoformans

Espiroquetas

Preparação Tzanck (infecção por vírus herpes simplex ou varicella-zoster)

8-11-2011 T15 MJC

1 - Observação directa - Colorações

Fluido CerebroEspinalBacillus antracis

A= Não acid fast

B=Acid Fast

8-11-20119 T15 MJC

1 - Observação directa – Microscopia electrónica

8-11-201110 T15 MJC

1 - Observação directa – Imunocitoquímica

8-11-201111 T15 MJC

1 - Observação directa – Sondas moleculares

8-11-201112 T15 MJC

2 - Cultura

8-11-201113 T15 MJC

Meios de Cultura: Função?Meios de transporte: Função?Incubação: (Temperatura e oxigénio)

2 - Cultura

Streptococcus beta hemolítico

8-11-201114 T15 MJC

Reacções com o meio de cultura

2 - Cultura Após cultura segue-se identificação:

T15 MJC

Multiloccus enzyme electrophoresis (MLEE)

Pulse Field Gel Electrophoresis (PFGE)

Restriction Fragment Lenght Polymorphism (RFLP)

Ribotyping

SerotipagemBiotipagemTipagem de fagosTipagem de bacteriocinas

8-11-201115

2 – Cultura – Permite antibiograma

T15 MJC 8-11-201116

A – Detecção de antigénios

8-11-2011 T15 MJC

A – Detecção de antigénios

Detecção de Proteínas

8-11-2011 T15 MJC

B- Detecção de sequências genómicas Detecção de ácidos nucleicos

PCR

8-11-201119 T15 MJC

B- Detecção de sequências genómicas PCR

T15 MJC 8-11-201120

B- Detecção de sequências genómicas PCR

Visualização

Utilização noutras técnicas

T15 MJC 8-11-201121

B- Detecção de sequências genómicas Detecção de ácidos nucleicos

RT-PCR (Real Time) RT-PCR (Reverse Transcription) Multiplex PCR Nested PCR

T15 MJC 8-11-201122

B- Detecção de sequências genómicas Detecção de ácidos nucleicos

Sondas moleculares FISH

T15 MJC 8-11-201123

3 – Resposta imunitária Tradicionais

Medem a resposta humoral pela actividade dos anticorpos Aglutinação

8-11-2011 T15 MJC

3 – Resposta imunitária

Tradicionais – Reacção de aglutinação

8-11-2011 T15 MJC

3 – Resposta imunitária

Activação do complemento

8-11-2011 T15 MJC

3 – Resposta imunitária Mais Recentes – Imunoensaios enzimáticos

Medem a resposta humoral pela presença dos anticorpos

8-11-2011 T15 MJC

3 – Resposta imunitária

8-11-2011 T15 MJC

3 – Resposta imunitária

8-11-201129 T15 MJC

Bibliografia

T15 MJC 30 8-11-2011

Capítulo 6

Capítulo 17