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Laboratório de Microbiologia Configuração • Especialidade • Material a ser manipulado • Comercial ou acadêmico • Pesquisa ou ensino

Níveis de biossegurança NB-1 Agentes conhecidos e bem caracterizados Não provocam doenças em humanos (ex.: E. coli não patogênica, hepatite canina, bactérias não infecciosas em geral) Risco mínimo ao pessoal de laboratório e meio ambiente Laboratório não precisa estar separado do prédio Trabalhos na bancada – BPL Barreiras primárias – jaleco, luvas, óculos Barreiras secundárias – porta, pia, fácil limpeza, telas contra insetos

NB-2 Agentes de risco moderado Treinamento Cabines de segurança biológica Necessário símbolo de risco biológico com informações Barreiras primárias – além das CSB, máscaras e óculos de proteção; Jaleco e touca – permanecem sempre no laboratório Barreiras secundárias – Pias acionadas com os pés; distante de áreas públicas, trancas para dependências que abrigam agentes restritos; lava-olhos; Hepatites, influenza A, dengue, Salmonella, OGMs

NB-3 Agentes causadores de doenças sérias ou potencialmente fatais como resultado de exposição por inalação Acesso ao laboratório deve ser limitado Materiais devem ser descartados apenas após descontaminação Imunização e exames periódicos para o pessoal do lab Elaboração de manual de biossegurança específico Barreiras primárias – além das CSB, máscaras e óculos de proteção; Jaleco e touca – permanecem sempre no laboratório Barreiras secundárias – NB2 + dupla porta; sala de troca de roupas; pia perto da saída sem acionamento manual; janelas lacradas; CSB longe das portas; sistema de ventilação próprio; ar da CSB deve ser filtrado pelo HEPA, podendo recircular; filtração com HEPA (high efficiency particulate arresting) do ar exaurido, dependendo da condição Leishmania donovani, Mycobacterium tuberculosis, Bacillus anthracis

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NB-4 Agentes de alto risco de infecção letal onde vacinas e outros tratamentos estão indisponíveis – ex. Ebola e febres hemorrágicas Pessoal extremamente bem trinado Acesso rigorosamente controlado Edifício isolado ou sala totalmente isolada do restante Manual específico de operações para as instalações Manipulação em CBS classes II ou III e roupa de proteção com pressão positiva Características específicas projetadas para evitar disseminação no meio ambiente Saída do pessoal apenas depois da troca de roupa e uso de chuveiro Uso de roupas descartáveis

EPI

EPI

• Luvas látex • Luvas térmicas • Óculos • Jaleco • Máscaras (filtro / UV)

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Chuveiro lava olhos

Equipamentos Microscópios Estereoscópio (lupa)

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• Proteção pessoal • Proteção do ensaio/produto • Proteção do meio-ambiente

Cabines de segurança biológica

Classe I – Exaustão total; sem proteção do protudo; similar à capela

Classe II – Porcentagem do ar é re-circulado na cabine (tipos A, B1, B2 e B3)

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Cabines de segurança biológica

Classe III - Isolamento

Estufa incubadora Câmara ou sala de crescimento

Freezer e ultrafreezer Chapa aquecedora com rotor magnético

Agitador tipo “vortex”

Balanças

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Autoclaves

• 121°C, 15psi, 20 a 30 minutos

Estufas

Esterilização Secagem

Banhos

• Temperatura constante • Incubações • Água destilada

Centrífugas

Agitador orbital Contador de colônias Termociclador

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Aparato para eletroforese Transiluminador UV Aparato para fotodocumentação

Destiladores

• Água “pura”

Vidraria e outros materiais

Becker

Proveta

Balão volumétrico

Vidro borossilicato Erlenmeyer Cadinho e pistilo

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Placas de Petri Tubos de cultura

Frascos de Roux Dessecador

Estantes Pipetas

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Pipetas automáticas

• Uso de ponteiras descartáveis – rapidez • Precisão – volumes menores • P10 (1 a 10 µl) , P200 (10 a 200 µl), P1000 (200 a 1000 µl)

Pipetas Pasteur

Pisseta

Barrilete

Placas tipo ELISA

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Espátula ou alça deDrigalsky

Bastão de vidro Funil

Aparatos de filtragem

Cabo de Kolle e alça de platina Lâmina e lamínula

Frascos conta-gotas

Bico de bunsen Links http://www.bionewsonline.com/pub/pub5.htm http://www.angelfire.com/mi/nccc/lnotes.html http://www.microbeworld.org/index.php