FIBRACURSO DE FARMÁCIA

DISCIPLINA DE IMUNOLOGIA CLÍNICA

DILUIÇÕES

Os métodos de laboratório nos quais uma quantidade de uma substância é adicionada a outra para reduzir a concentração de uma das substâncias são conhecidos como diluições.

IMPORTANTE: Uma diluição é uma expressão de concentração, não de volume. Expressa de outra forma, uma diluição indica a quantidade relativa de substâncias em uma solução. Quando a palavra diluição é usada, ela deve significar o número de partes que foram diluídas em um número total de partes. Em outras palavras, uma diluição deve significar o volume de concentrado no volume total da solução final. O menor número corresponde ao número de partes da substância que está sendo diluída; o maior número refere-se ao número total de partes da solução final.

Considere as seguintes frases: Faça uma diluição 1 para 10 de soro em salina. Faça uma diluição 1 em 10 de soro em salina. Faça uma diluição 1 para 10 de soro com salina. Faça uma diluição 1/10 de soro com salina. Faça uma diluição 1:10 de soro usando salina. Faça uma diluição de 1 parte de soro e 9 partes de salina. Faça uma diluição de 1 parte de soro para 9 partes de salina.

Qual é a diferença entre essas frases? Nenhuma! Todas significam exatamente a mesma coisa.

ENTÃO: Diluir é acrescentar solvente a uma solução mantendo-se inalteradas as quantidades de soluto existentes.

D= ____ V soluto______ V soluto + V solvente

1 parte de soro+ 9 partes de salina

10 partes de solução final

O significado difere quando usamos a palavra razão. Os números passam a se referir aos materiais da razão, que podem ser escritos de diversas formas:

1

1:9 1 para 9 1/9

Não importa como a razão é escrita, a ordem dos números deve corresponder à ordem das substâncias às quais a razão se refere.

Ex: Uma razão de soro para salina 1:9 é igual a uma razão salina para soro 9:1, o que é a mesma coisa que uma diluição de 1:10 de soro com salina.

TÍTULO

TÍTULO é a concentração de uma solução determinada por titulação. É a menor quantidade ou concentração que produzia um efeito particular ou produto. O título é a recíproca da diluição. Então, em uma reação de pesquisa de anticorpos positiva na diluição ½ e ¼ e negativa na diluição 1/8 e 1/16, o título é 4.

DILUIÇÃO SERIADA

Uma série de diluições é um número de soluções feito pela diluição de alguma substância com um solvente, então fazendo uma diluição da solução resultante, e diluindo a segunda solução para fazer uma terceira e assim por diante. A partir da primeira diluição ou da amostra original, as sucessivas diluições são realizadas a partir da ultima diluição feita e não mais da amostra oririnal.

Geralmente,  mantém-se uma razão constante entre as diluições, o que não é regra, ou seja, depende da necessidade. No laboratório clínico, a diluição seriada mais comumente utilizada tem sido na razão 2. Ocasionalmente a série de diluições pode ser descrita de maneira que cada valor de diluição se refira a uma diluição independente de algum material em algum solvente.

O individuo deve estar apto a calcular as seguintes variáveis em cada passo em uma série de diluição" concentração de material em cada solução' quantidade real de material em cada solução e volume total de cada solução.

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EXERCÍCIOS:

1. Faça 250 mL de uma diluição 1:10 de soro em salina.

2. Faça 45 mL de uma diluição 1:15 de soro em salina.

3. Faça 33 mL de uma diluição 1:22 de soro em salina.

4. Faça 4 mL de uma diluição 1:8 de soro em salina.

5. Faça 7,5 mL de uma diluição 1:150 de soro em salina

6. Quanto de uma amostra de sangue é necessária para se preparar 40 ml de uma diluição 1/10 e quando de diluiente você precisaria?

7. Como você prepararia 20 ml de uma diluição de 1/400

8. Determine a quantidade de soro em 40 mL de uma diluição 1:5 de soro em salina.

9. Quanto de uma diluição de 1:32 de urina com água destilada poderia ser feita com 2 mL de urina?

10. Esquematize a diluição de 5 mL de azul de metileno diluído a 1/4000.

11. Fazer uma diluição seriada partir de uma solução de azul de metileno diluído 1/16 em água até a diluição 1/512. O volume em cada tubo deve ser 1,6 mL.

12. Fazer uma diluição seriada a partir de uma solução de azul de metileno diluído 1/64 em água até a diluição 1/256. O volume em cada tubo deve ser 0,4 mL.

13. Fazer uma diluição seriada a partir de uma solução de hemácias diluído 1/20 em água até a diluição 1/20000. O volume em cada tubo deve ser 3,6 mL.

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14. Em vários tubos numerados de 1 a 6, pipetou-se 0,5 mL de tampão em todos eles. No 1º tubo pipetou-se 500 L de azul de metileno e homogeneizou-se. Transferiu-se do tubo nº 1 para o tubo nº 2, 500 L. Este procedimento foi realizado até o 6º tubo. Sabendo-se que não houve perda de volume, responda.

a) Qual o volume de todos os tubos e as respectivas diluições?

b) Qual é o volume e as respectivas diluições de todos os tubos se fosse pipetado 3,5 mL de tampão.

15. Uma diluição 1/10 de uma substância é diluída 3/5, rediluída 2/15 e diluída mais uma vez ½. Qual é a concentração final?

16. Uma solução 3% é diluída 2/30. Qual é a concentração resultante?

17. Uma solução que contém 70 mg/dL é diluída 1/10 e de novo 2/20. Qual é a concentração final?

18. A alíquota de 0,2 mL de soro do paciente é adicionada a 0,8 mL de salina. Transfere-se 0,5 mL para um tubo 2 que possui 0,5 mL de salina. Este procedimento é feito até o tubo 10. As diluições foram utilizadas para testar um anticorpo de um agente infeccioso. Do tubo 1 ao 8, a reação foi positiva para o anticorpo testado. Qual o título que deve ser apresentado ao anticorpo?

19. Em uma série de 8 tubos, coloque 0,9 mL de solução fisiológica no 1º tubo e 0,5 mL de solução fisiológica nos tubos restantes. Adicione 0,1 mL de soro ao 1º tubo, misture e coloque 0,5 mL dessa solução no tubo subseqüente e repita o processo até o último tubo. Despreze o último 0,5 mL. Para cafa tubo adicione 0,5 mL de antígeno. A partir disso, responda:

a) Qual é a diluição de cada tubo antes de adicionar o antígeno?

b)Qual a quantidade de soro presente nos dois primeiros tubos após a transferência?

c) Qual pe a diluição em cada tubo após a adição do antígeno?

20. Quais diluições representam as misturas abaixo?

a) 0,3 mL de soro sanguíneo com 4,2 mL de solução fisiológica.

b)0,5 mL de soro sanguíneo com 3 mL de solução fisiológica.

c) 0,2 mL de soro sanguíneo com 6,2 mL de solução fisiológica.

21. Em vários tubos numerados de 1 a 5, pipetou-se 3X mL de água em cada um deles. No tubo nº 1 pipetou-se X mL de azul de metileno e homogeneizou-se esta solução. Pipetou-se do tubo nº 1 X mL e passou-se para o tubo nº 2. Este procedimento foi feito até o 5º tubo.

a) Qual o volume de todos os tubos se X=2 e as respectivas diluições?

b)Se X=10, qual é o volume final de todos os tubos e as respectivas diluições?

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22. Esquematize a preparação de 50 mL de uma solução tampão fosfato a 1/2000. O tampão foi fornecido pelo fabricante a uma diluição 1/10.

23. Pipetou-se 500 L se um soluto em tubo de ensaio e acrescentou-se 4,5 mL de solvente. Qual é a diluição?

24. Pipetou-se 200 L se um soluto em tubo de ensaio e acrescentou-se 9,8 mL de solvente. Qual é a diluição?

25. Num laboratório de Virologia, foi diluído 200 L de soro diluído a 1:4. Porém, a diluição correta seria 1:10. Como fazer essa correção?

26. Em uma reação imunoenzimática, foi colocado 0,1 mL de soro, 0,8 mL de diluente e 0,1 mL de conjugado. Que volume de soro existe no volume final e qual é a diluição deste soro?

27. Uma solução estoque de ácido oxálico 1/100 está disponível no laboratório de química. Como o laboratorista prepararia 6 mL de ácido oxálico 1/150?

28. Fazer uma diluição seriada de razão 2 a partir de uma solução de azul de metileno em água. Usar uma bateria de 5 tubos. O volume em cada tubo deve ser 4 mL.

29. Fazer uma diluição seriada de razão 10 a partir de uma solução de azul de metileno em água. Usar uma bateria de 8 tubos. O volume em cada tubo deve ser 4,5 mL.

30. Fazer uma diluição seriada de razão 5 a partir de uma solução de azul de metileno em água. Usar uma bateria de 5 tubos. O volume em cada tubo deve ser 3 mL.

31. Fazer uma diluição seriada de razão 2 a partir de uma solução de azul de metileno diluído ½ em água até a diluição 1/64. O volume em cada tubo deve ser 0,7 mL.

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