Colonização de espinafre por Verticillium dahliae e Efeitos

Patógenos de localização sobre a eficácia do tratamento

de sementesApresentador: Jean Henrique Silva Oliveira

Instituto Federal Goiano - campus UrutaíCurso de Ciências Biológicas e Agronomia

Disciplina de Microbiologia

Maruthachalam, K., Klosterman, S. J., Anchieta, A., Mou, B., and Subbarao, K. V. 2013. Colonization of spinach by Verticillium dahliae and effects of pathogen localization on the efficacy of seed treatments. Phytopathology 103:268-280

INTRODUÇÃO

• VERTICILLIUM DAHLIAE

OBJETIVOS

• Examinar a colonização

• Avaliar a presença e localização de V. dahliae

MATERIAIS E MÉTODOS

• Proteína fluorescente verde (GFP)

•Inoculação de espinafre por conídios Plântulas de três semanas de idade foram inoculados com conídios de VdSo925-316 em 1 × 107 conídios / ml usando uma rega do solo. Após 1 semana a inoculação (PI), as mudas foram transplantadas para copos com isolamento de espuma de 0,5 litros cheios de solo de areia pasteurizada / envasamento em uma mistura de 3:1. As plantas controle foram inoculados com fingida SDW. As plantas foram mantidas em bancos em uma estufa (24 +\- 2 ºc), 14 dias ( PI).

• Avaliação pós-tratamento de semente V. dahliae

A presença de V. dahliae na semente de espinafre foi confirmada com base em produção de microesclerócios e conidióforos verticilados. Em Adicionalmente, uma porção das sementes tratadas e não tratadas foi armazenado a temperatura ambiente durante 2 a 3 meses para avaliar o efeito do armazenamento na V. dahliae crescimento.

Tratou-Pro-Gro lotes de sementes comerciais (1 a 5) foram obtidos a partir de Germinação Semente ( lote 6), tratados com o tratamento de vapor Seedgard (IncoTec. Inc., Holanda).

• Tratamento de semente inoculadas com V. dahliae

RESULTADOS E DISCUSSÃOTABELA 1. Quantificação de DNA a partir de Verticillium dahliae pela reação em cadeia da polimerase quantitativa em seis lotes diferentes de sementes de espinafre comercial tratados com fungicida e vapor.

a. tratamento de vapor e tratado com Seedgard. Para lotes de sementes de 1 a 5, os resultados das amostras tratadas e não tratadas foram derivadas de três repetições de 1000 sementes. b. Valor médio do ciclo de quantificação (Cq). Cq valores obtidos a partir de sementes não tratadas a partir de lotes de sementes de 1 a 5 foram relatados previamente, utilizados no quadro para efeitos de comparação. c. SD = desvio padrão.d. β-Tubulin número de cópias.e. sequência de actina a partir de espinafres (verificação inibição da amplificação de DNA e de controle). f. Com base em duas repetições de 750 sementes de cada um dos lotes e tratado com vapor de semente não tratada do lote de sementes 6.

Fig. 1. Verticillium dahliae isolado a partir de sementes de espinafre (VdSo925) expressando a proteína fluorescente verde (GFP).

Fig. 3. Fases posteriores do caule e raiz do espinafre colonizado pela proteína fluorescente verde (GFP)-espinafre marcado e isolado de Verticillium dahliae, VdSo925-316. Imagens foram capturadas 6 e 10 semanas pós-inoculação (PI) de plântulas com conídios de V. dahliae. Barras de escala = 100 µm.

Fig. 4. Colonização de Verticillium dahliae em flores estaminadas e pistiladas. Imagens confocal capturados em confocal 12 semanas após a inoculação de mudas com conídios de proteína fluorescente verde (GFP) expressando Verticillium.

Fig. 5. Os primeiros e últimos estágios de colonização em sementes de espinafre por uma proteína fluorescente verde (GFP)-de Verticillium dahliae tensão VdSo925-316, espinafre isolado e etiquetado, com 10 e 12 semanas pós-inoculação (PI) de mudas de espinafre com 3 semanas de idade.

Fig. 6. Colonização avançada de proteínas verde fluorescente de Verticillium dahliae tensão VdSo925-316 em sementes de espinafre, mudas de espinafre com 3 semanas de idade, com 14 semanas de inoculação.

Fig. 7. Exame de sementes de espinafre armazenados em temperatura ambiente cerca de 3 meses após a coleta das plantas não inoculadas, e a partir de plantas infectadas.

Fig. 8. Avaliação do tratamento de sementes de espinafres, comparando as sementes não tratadas e tratadas com fungicidas em plantas que foram inoculadas com Verticillium dahliae tensão VdSo925-316 ou sem inoculação.

CONCLUSÕES

• Esta informação ajudará no desenvolvimento de tratamentos de sementes.

• Não a completa eliminação do patógeno, utilizando o tratamento de sementes.

LITERATURAS CITADAS