animicroscopia

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óptica, microscopia os créditos das fotomicrografias são do Centro de Microscopia Eletrônica e Setor de Ciências Biológicas - UFPR

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Prof. João Ricardo Alves Costa

Fígado de peixe ( Alfac – HE )

Vesícula Biliar de peixe ( Alfac – HE )

Vidro

4000 anos a.C.

fenícios

egipcianosAreia ( sílica ou

dióxido de silício )

fundida é pastosa

gota de areia derretida

( 1250 ºC ) , arrefecida

e depois lapidada

areia : vidro

( 1,3 : 1,0 )

Renascentismo

século XV

artesãos de vidro

século XVIII

indústria vidreira lusitana

Galileu Galilei (1564-1642)

¶ balança hidrostática

¶ compasso geométrico e militar

¶ contestou as idéias de Aristóteles

¶ Descobriu que a massa não influi

na velocidade da queda

¶ Luneta Astronômica :

montanhas da Lua

satélites de Júpiter

manchas solares

planetas ainda não conhecidos

Galileu (1564-1642)

modifica seu telescópio

Janssen (1590)

holandês construtor de lentes

Kepler (1611)

sugere modos de construção

para o microscópio composto

Hooke - 1655

em Londres,

utiliza o microscópio composto

para ver poros na seção

de cortiça

(celas)

Antonius van Leeuwenhoek (1632-1723)

1660

protozoários em 1674 !bactérias em 1683 ?!

. . . . ., , , ,

-

-

-

-

Célula Animal X Protista

1704

1750

Watkins 1750

Ross 1850

Hepatopâncreas de peixe ( Bouin – Tricrômico de Masson )

VASO

PÂNCREAS

FÍGADO

Swift & Wales 1879

Thomas Edison inventa a lâmpada incandescete

Pillischer 1880

Collinsb 1880

Beck - continental - 1895

Watson 1900

Swift 1901

Watson & Heurck 1907

Beck – black – 1908

Canalículo Biliar em fígado de peixe

( Alfac – HE )

cB

FÍGADO

cB

eritrócitos

Zeiss 1912

Zeiss 1922

Leitz 1935

Watson 1938

Bausch & Lomb

Bausch & Lomb 1945

OLYMPUS

19601970

NIKON

LUZ É UMA ONDA ELETROMAGNÉTICA

(OEM)

Energia Radiante (e=mcc) e Oscilatória de partícula

PROPAGAÇÃO RETILÍNEA

Vácuo

V cte para qualquer

299.792.458 m.s-1 3.108 m.s-1

Vvácuo > Vmatéria

V =

Sequência (no tempo)

de uma OEM tem 2 componentes

campo magnético de oscilação

ignorado para se ver

campo elétrico de oscilação

fenômeno de formação de

imagens

300.000 km.s-1

osc.s m

m.s-1

Maxwell ( 1864 )

equações do

eletromagnetismo

Heinrich Hertz

( 1888 )

validação empírica

1 nm = 0,000000001 m = 10-9 m

= 1.t -1 (Hz) t(s)

óton

Luz Visível ao homem é só uma parte do

espectro radioativo eletromagnético

(violeta) nm 380 780 nm (vermelho)

E

E

metro

Violeta (380-440 nm)

Azul (440-490 nm)

Verde (490-565 nm)

Amarelo (565-590 nm)

Laranja (590-630 nm)

Vermelho (630-780 nm)

atr

aves

sam

su

bst

ân

cias

e q

ueb

ram

molé

cula

sgra

nd

esco

mo o

DN

A

DE RÁDIO: RADAR,

CELULAR, ...DOMÉSTICO

MENOR ENERGIA ( f )

FATOR FÍSICO

PROMOTOR DE CÂNCER

FM

TV

SW

AM

OU CÓSMICOS

( ATRAVESSAM A MATÉRIA )

NÍVEL SUBATÔMICO

átomos

A cor não é propriedade

intrínseca aos objetos !!

refraçãopropagação da OEM de um meio material

para outro, de densidade diferente

alteração da V, do e da direção

(se não for ortogonal à superfície)

em ≠’s substâncias materiais (1 e 2)

de 1 para 2 – cte

para V ( AR >>> ÁGUA )índice de refração

(lei de Snell, 1621)

V = 1 = 2

V1 ≠ V2 1 ≠ 2

AR

AR

VIDRO

ÁGUA

reflexão

absorção

Testículo de peixe ( Alfac – HE )

Epz

n

2n

2n2n n

NA

óleo NA: abertura numérica da objetiva (n sen )

n: índice de refração do meio (ar ou óleo)

: metade da largura angular do cone

de raios coletados pela lente

é uma função da objetiva da sua

capacidade de coletar luz

onde:

é o comprimento de onda (luz, elétrons etc.)

AN d poder de resolução

d poder de resolução

0,61

n send = =

0,61

AN

século XIX: o menor d conseguido para o MOrevela detalhes com distância entre 0,2 m ,

raramente equiparado atualmente

um dado tipo de radiação não pode ser usado

para revelar detalhes muito menores

que seu próprio ( 0,4 m )

brilo

briloobjetiva

condensador

ocular

difraçãoINTERFERÊNCIA entre 2 ou + OEM’s novo padrão de ondas

superposição: onda resultante é soma dos espectros de frequência

PODER DE RESOLUÇÃO ≠ AUMENTO

poder de resolução limite de resolução (d)

d: menor distância entre dois pontos,

na qual eles são distinguidos como tal, “ : “ .

Aberrações na formação de imagens

Efeito de borda: em altas magnificações,

por interferências (ondas fora de fase)

Esférica: raios não convergem a um só ponto

Curvatura de Campo:

lentes que dão imagens curvas de objetos planos

diferença de foco no centro e periferia do campo

Acromáticas: mais comuns

Semi-Acromáticas: fluorita (certa correção)

Apocromáticas: correção ampla (todo o espectro)

Planacromáticas: corrigem a curvatura de campo

Planapocromáticas = planacromáticas + apocromáticas

10-20 μm

0,5 μm

10 mm Aparelho de Golgi por exemplo

AMOSTRA

0,2

μm

0,2

mm

1000

ve

zes

A Luz ou o Elétron atravessam o materialMicroscopia Óptica Microscopia Eletrônica de Transmissão

M E T

hepatócito

fibroblasto

célula mesênquimatosa

da serosa

A Luz ou o Elétron revelam detalhes da superfície do material

Microscopia Eletrônica de Varredura

Microscopia Estereoscópica

( LUPA )

Alberts et alii

( 1997, p. 1 )crédito:

Tony BrainZ

LASER

Light Amplification by Stimulated Emission of Radiation

Amplificação da Luz por Emissão Estimulada de Radiação

dispositivo que produz radiação (onda) eletromagnética :

¶ monocromática

¶ possui bem definido e coerente:

todas as ondas dos fótons que compõe o feixe estão em fase

¶ colimada: propaga-se como um feixe de ondas paralelas