citoplasma matriz mitrocondrial - IQ USP · 06 22 25 40 82 Procedimento B - Detecção da atividade...

citoplasma

matriz mitrocondrial

Mitocôndria

Reoxidação das coenzimas reduzidas com produção de ATP

Fracionamento Celular

Complexo II

Fumarato + FADH2 Succinato

Complexo II

Fumarato + FADH2 Succinato

1 e 2 – Controles. Há redução do azul de metileno na ausência de succinato? De onde provêm os eletrons? Substratos endógenos? 5 – Controle. Há redução detectável do azul de metileno na ausência de catalisador (enzima)? 3 e 4 – Testes. Detecção da reação nas frações 1 ou 2.

Inibidor substrato

1- Controle. Há redução de MTT na ausência de S e I ? “Branco de substrato” 2 e 3 – Testes. Há reação detectável entre MTT e succinato na ausência de inibidor? 4 – Controle. Há reação entre malonato e MTT? 5 , 6 e 7 – Testes de inibição. Ocorreu reação quando S e I estão presentes? Notar a concentração crescente do substrato (succinato).

ox

0,36V red

e-

0,235V

0,815V

Aceptor artifical de elétrons

Complexo II

Fumarato + FADH2 Succinato

ox

0,36V red

e- 0,235V

0,815V

ox

0,36V

e- 0,235V

0,815V

Complexo II

Complexo II

Fumarato + FADH2 Succinato

Fumarato + FADH2 Succinato

Aceptores artificiais