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Cromatografia de Troca Iônica
Aula 6
Nicolas Hoch
QBQ 0316 Noturno 2020
Fase estacionária: contas ou resina cobertacom grupos eletricamente carregados
Fase móvel: tampão aquoso de pH definido, Contendo íons e proteínas que se ligam reversivelmente à fase estacionária
Força da ligação depende da carga da proteína,e portanto do pH do tampão
+++++
Proteínas com carga positivaa pH7
Proteínas com carga negativaa pH7
+++++
- -- ----
pH=8
pH=6.5
------
-
+
pH = 8
pH = 6
+++++
Não há mudança das proteínas
retidas na coluna, muda apenas a fração em que
eluem!
Gradiente de 0 a 1M NaCl
Gradiente de 0 a 0.3M NaCl
Gradiente de 0.1 a 0.3M NaCl
Reduziu muitoproteína total
(Bradford)
Pouca perda de atividade
enzimática
Recuperaçãoquase total
Enriquecimentoalto
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