Cromatografia de Troca Iônica

Aula 6

Nicolas Hoch

QBQ 0316 Noturno 2020

Fase estacionária: contas ou resina cobertacom grupos eletricamente carregados

Fase móvel: tampão aquoso de pH definido, Contendo íons e proteínas que se ligam reversivelmente à fase estacionária

Força da ligação depende da carga da proteína,e portanto do pH do tampão

+++++

Proteínas com carga positivaa pH7

Proteínas com carga negativaa pH7

+++++

- -- ----

pH=8

pH=6.5

------

-

+

pH = 8

pH = 6

+++++

Não há mudança das proteínas

retidas na coluna, muda apenas a fração em que

eluem!

Gradiente de 0 a 1M NaCl

Gradiente de 0 a 0.3M NaCl

Gradiente de 0.1 a 0.3M NaCl

Reduziu muitoproteína total

(Bradford)

Pouca perda de atividade

enzimática

Recuperaçãoquase total

Enriquecimentoalto