View
219
Download
0
Category
Preview:
Citation preview
7/29/2019 electroforese
1/21
Eletroforeses em acetato de celulose -
Aplicao patologia HematolgicaBIOQUMICA II
Ctia Matias
Dina MatosJoana AlvesMiguel Sousa
5 Junho 2012
7/29/2019 electroforese
2/21
So compostos anfotricos: possuem carga negativa, positiva ou nula
consoante o pH do meio envolvente.
Ponto isoelectrico: Quando as protenas possuem carga nula
em funo do valor de pH do meio
Em meio cido estas comportam-se comobases fracas captando ies H+.
Em meio bsico as protenas comportam-secomo cidos fracos libertando ies H+.
7/29/2019 electroforese
3/21
As protenas estas podem diferir entre elas: - dimenso, - carga eltrica, - pontos isoeltricos.
Utiliza-se uma soluo tampo com um pH bsico osuficiente para superar os pontos isoeltricos detodas as protenas, de modo a todas elas ficaremcom carga negativa e serem todas atradas pelonodo.
O meio de suporte de acetato de celulose utilizadopelo facto de conter poros suficientemente largos, afim de permitir a separao das protenasessencialmente pelas suas cargas eltricas.
7/29/2019 electroforese
4/21
Protenas totais: Albumina: sintetizada no fgado
Globulinas: sintetizada no fgado e por linfocitosB
Funes:- transporte- manuteno da presso coloidosmtica- tamponamento de pH
- imunidade humoral- atividade enzimtica- coagulao- resposta da fase aguda
7/29/2019 electroforese
5/21
Electroforese de zona ou de suporte : nestecaso realizada em Acetato de celulose
Mtodo muito antigo mas muito utilizado empatologia clnica
Simples e fcil de usar
Pode ser lido por densitometriadensitmetro
7/29/2019 electroforese
6/21
pH > pIprotena com carga negativa migra para o
plo positivo
pH
7/29/2019 electroforese
7/21
A visualizao dos resultados deuma electroforese feita atravs da
utilizao de uma coloraoespecfica.
No nosso trabalho prtico foiutilizada a soluo de coloraoPonceau S.
7/29/2019 electroforese
8/21
Os resultados de electroforese podemtambm ser visualizados mediante a
utilizao de aparelhos especficoscomo o densitmetro, e podem sertambm ser exibidos atravs de grficoscomo o cas.o dos protenogramas.
7/29/2019 electroforese
9/21
7/29/2019 electroforese
10/21
yy
y 2
1 Alb.
+
---------------------------------------------------sentido da corrida de separao
7/29/2019 electroforese
11/21
Separao baseada na carga das molculas.
Protenas so compostos anfotricos
Dependendo do pH do meio vo apresentarcarga elctrica, e, funo dessa carga,conseguimos a separao por migraoelectrofortica.
S a Albumina corresponde a um s tipo deprotena, dentro das outras poderemos terdiferentes tipos de proteinas.
7/29/2019 electroforese
12/21
yy
y 2
1 Alb.
+
---------------------------------------------------sentido da corrida de separao
7/29/2019 electroforese
13/21
Separao baseada na carga das molculas.
Protenas so compostos anfotricos
Dependendo do pH do meio vo apresentarcarga elctrica, e, funo dessa carga,conseguimos a separao por migraoelectrofortica.
S a Albumina corresponde a um s tipo deprotena, dentro das outras poderemos terdiferentes tipos de proteinas.
7/29/2019 electroforese
14/21
Existem dois tipos bsicos de suportes: ossuportes de gel e os suportes de papel.
7/29/2019 electroforese
15/21
A electroforese de hemoglobina provavelmente o mtodo laboratorial maistil para a separao e medio dehemoglobinas.
Atravs da electroforese, d-se a
separao de diferentes tipos dehemoglobinas, formando-se uma srie debandas coradas.
7/29/2019 electroforese
16/21
Nos testes e anlises s hemoglobinaspretende-se em muitos casos medir aquantidade de Hb A, detectarhemoglobinas anormais, auxiliar odiagnstico de talassemia , anemiafalciforme, entre outras.
7/29/2019 electroforese
17/21
As protenas plasmticas podem serseparadas por electroforese em duasfraces principais, sendo uma delas afraco correspondente albumina e aoutra constituda por globulinas, as quais sediferenciam da albumina por apresentarem
maior tamanho e maior peso molecular.
7/29/2019 electroforese
18/21
A fraco globulnica uma mistura muitocomplexa sendo dividida em 5 fraces:
-alfa 1 -alfa 2
-beta 1
-beta 2
-gama globulinas
7/29/2019 electroforese
19/21
Aumento de 1 e2 globulinas
Fracionamentonormal
2 1 Albumina
Ocorrncia:
Processo inflamatrio agudoInfeces bacterianas
Leses de tecidos
Insuficincia cardaca
Coma
7/29/2019 electroforese
20/21
Fracionamentonormal
2 1 Albumina
Aumento de 2 e
globulinas
Ocorrncia:
Processo inflamatrio crnicoInfeces crnicas
Malignidades
Doenas auto-imunes
7/29/2019 electroforese
21/21
Fracionamentonormal
2 1 Albumina
Fuso das fraesbeta e gama
Ocorrncia:
Cirrose hepticaFuso -
Recommended