"Há dois tipos de pessoas: As que fazem as coisas, e as que dizem que fizeram as coisas. Tente...

"Há dois tipos de pessoas: As que fazem as coisas,

e as que dizem que fizeram as coisas. Tente ficar no

primeiro tipo. Há menos competição."

Indira Ghandi 

DUPLICAÇÃO DO DNA

POSSÍVEIS MECANISMOS (HIPÓTESES)

CONSERVATIVA SEMI-CONSERVATIVA

DISPERSIVA

MESELSON E STAHL (1958)

TÉCNICA: ULTRACENTRIFUGAÇÃO EM GRADIENTE DE CLORETO DE CÉSIO (CSCL)

3. DNA EXTRAÍDO DE BACTÉRIAS CULTIVADAS POR 1 GERAÇÃO EM MC COM N14, APÓS 14 GERAÇÕES EM MC COM N15

4. DNA EXTRAÍDO DE BACTÉRIAS CULTIVADAS POR 2 GERAÇÕES EM MC COM N14, APÓS 14 GERAÇÕES EM MC COM N15

1. DNA EXTRAÍDO DE BACTÉRIAS CULTIVADAS EM MC COM N14

2. DNA EXTRAÍDO DE BACTÉRIAS CULTIVADAS EM MC COM N15

KORNBERG (1956): DNA ATUA COMO MOLDE PARA SÍNTESE DAS CADEIAS COMPLEMENTARES

DESCOBRIRAM ENZ. DNA POLIMERASE (DE E. COLI) QUE DIRIGE A SÍNTESE DE

DNA IN VITRO: POLI I DESOXIRRIBONUCLEO-TÍDEOS TRIFOSFATADOS

+ DNASEMENTE (MOLDE)

DNASEMENTE +

DNA SINTETIZADO IN VITRO +

PIROFOSFATO ESTUDOS POSTERIORES: ALÉM DA POLI I, HÁ + 2 POLIMERASES EM BACTÉRIAS:

POLI II E POLI III.

DNA DE BACTÉRIAS: CIRCULARPARA SE DUPLICAR DESENROLAMENTO DA DUPLA HÉLICE (EXPOR AS CADEIAS MOLDE) 

PROTEÍNAS DNAa: SEPARAM AS CADEIAS DE DNA NOS PONTOS DE ORIGEM DA DUPLICAÇÃO.

PROTEÍNAS DE DESEMPARELHAMENTO (= HELICASES): SEPARAM AS CADEIAS AO LONGO DA MOLÉCULA DE DNA, FORMANDO A BOLHA DE REPLICAÇÃO. 

PROTEÍNAS SSP: MANTÉM CADEIAS DE DNA SEPARADAS 

PROTEÍNAS DE RELAXAMENTO (TOPOISOMERASES): QUEBRA UMA DAS CADEIAS, PERMITINDO QUE ELA REALIZE UMA SÉRIE DE GIROS SOBRE A OUTRA CADEIA. 

A DUPLICAÇÃO PROGRIDE EM AMBOS OS SENTIDOS ATÉ OS CHAMADOS PONTOS DE TÉRMINO.  EM E. COLI: - 1 PONTO DE ORIGEM

- 1 PONTO DE TÉRMINO

EM E. COLI: DNA COMPORTA-SE COMO UMA UNIDADE DE DUPLICAÇÃO (REPLICON).

MOLÉCULAS ENVOLVIDAS NA DUPLICAÇÃO DO DNA

DUPLICAÇÃO:•SEMICONSERVATIVA•BIDIRECIONAL•SEMI-DESCONTÍNUA•ASSINCRÔNICA: REGIÕES DE DUPLICAÇÃO TARDIA E DE DUPLICAÇÃO PRECOCE – FAMÍLIA DE RÉPLICONS (REPLICON CLUSTERS)

DECIFRAÇÃO DO CÓDIGO GENÉTICO

QUAL A RELAÇÃO ENTRE SEQÜÊNCIAS ESPECÍFICAS DE NUCLEOTÍDEOS E SEQUÊNCIAS DE A.A.?

4 NUCLEOTÍDEOS 20 AA

GEORGE GAMOW (FÍSICO - 1954): HIPÓTESE: CADA A.A. SERIA CODIFICADO POR UM CONJUNTO DE 3 NUCLEOTÍDEOS (= TRINCA = CODON)

4 BASES 20 A.A. (X) 16 COMBINAÇÕES DE DUPLAS DE BASES 20 A.A. (X) 64 COMBINAÇÕES DE TRINCAS DE BASES 20 A.A.

CRICK E COL. (1961) CONFIRMARAM A HIPÓTESE USANDO FAGO T4:

A LEITURA DA MENSAGEM INICIA-SE NUM EXTREMO E DESLOCA-SE EM BLOCOS

CONSECUTIVOS DE 3 BASES, SEM PONTUAÇÃO.

TABELA DO CÓDIGO GENÉTICO1ª posição 2ª posição 3ª posição

extremidade 5’ U C A G extremidade 3’  UUU-Phe UCU-Ser UAU-Tyr UGU-Cys UU UUC-Phe UCC-Ser UAC-Tyr UGC-Cys C  UUA-Leu UCA-Ser UAA- * UGA- * A  UUG-Leu UCG-Ser UAG- * UGG-Trp G             CUU-Leu CCU-Pro CAU-His CGU-Arg U

 C CUC-Leu CCC-Pro CAC-His CGC-Arg C  CUA-Leu CCA-Pro CAA-Gln CGA-Arg A  CUG-Leu CCG-Pro CAG-Gln CGG-Arg G             AUU-Ile ACU-Trh AAU-Asn AGU-Ser UA AUC-Ile ACC-Trh AAC-Asn AGC-Ser C  AUA-Ile ACA-Trh AAA-Lys AGA-Arg A  AUG-Met** ACG-Trh AAG-Lys AGG-Arg G             GUU-Val GCU-Ala GAU-Asp GGU-Gly U

G GUC-Val GCC-Ala GAC-Asp GGC-Gly C  GUA-Val GCA-Ala GAA-Glu GGA-Gly A  GUG-Val GCG-Ala GAG-Glu GGG-Gly G

*: códons de terminação**: códon de iniciação

CÓDIGO GENÉTICO

Códon Código universal Código mitocondrial Mamíferos Drosophila Leveduras Plantas

UGA TERM TRP TRP TRP TERM

AUA ILE MET MET MET ILE

CUA LEU LEU LEU THR LEU

AGA AGG ARG TERM SER ARG ARG

SÍNTESE PROTÉICA (PROCARIONTES)

ENVOLVE OS 3 TIPOS DE RNA 1 - LIGAÇÃO DO A.A. AO SEU RNAT ESPECÍFICO

SÍNTESE PROTÉICA (PROCARIONTES)

ENVOLVE OS 3 TIPOS DE RNA 1 - LIGAÇÃO DO A.A. AO SEU RNAT ESPECÍFICO 2 - INICIAÇÃO FORMILAÇÃO DA METIONINA A.A. QUE INICIA A SÍNTESE FORMAÇÃO DO COMPLEXO:

RNATA.A + RNAM + RIBOSSOMO

SÍNTESE PROTÉICA (PROCARIONTES)

ENVOLVE OS 3 TIPOS DE RNA 1 - LIGAÇÃO DO A.A. AO SEU RNAT ESPECÍFICO 2 - INICIAÇÃO FORMILAÇÃO DA METIONINA A.A. QUE INICIA A SÍNTESE FORMAÇÃO DO COMPLEXO:

RNATA.A + RNAM + RIBOSSOMO 3 - ELONGAÇÃO CRESCIMENTO DO POLIPEPTÍDEO

SÍNTESE PROTÉICA (PROCARIONTES)

ENVOLVE OS 3 TIPOS DE RNA 1 - LIGAÇÃO DO A.A. AO SEU RNAT ESPECÍFICO 2 - INICIAÇÃO FORMILAÇÃO DA METIONINA A.A. QUE INICIA A SÍNTESE FORMAÇÃO DO COMPLEXO:

RNATA.A + RNAM + RIBOSSOMO 3 - ELONGAÇÃO CRESCIMENTO DO POLIPEPTÍDEO 4 - TERMINALIZAÇÃO CODON DE TERMINAÇÃO NO SÍTIO A

+ FATOR DE TERMINALIZAÇÃO (RF)

+ GTP

LIBERAÇÃO

- ÚLTIMO RNAT - POLIPEPTÍDEO - SUBUNIDADES DO

RIBOSSOMO - RNAM