Patologia ebv

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Patologia Infecção EBV

Hugo SousaBScH Microbiology, MSc Oncology

PhD Student, MD Student_________________________________________Serviço Virologia – Lab Biologia Molecular

Grupo Oncologia MolecularIPO Porto FG EPE

+Vírus de Epstein-Barr (EBV)

Vírus com distribuição ubíqua Infecta cerca de 90% da população;

Vírus epitelio-mucosotrópico Infecta células epiteliais e mucosas Infecção persistente no hospedeiro;

Características Gerais

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+Vírus de Epstein-Barr (EBV)

Identificado em 1964 em biópsias de Linfoma de Burkitt

2 formas diferentes (EBV-1 e EBV-2): EBV-1 mais frequente em civilizações ocidentais; EBV-2 em zonas endémicas do continente africano;

Características Gerais

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+Vírus de Epstein-Barr (EBV)

Família Herpesvirus

Sub-família gammaherpesvirus

Género Lymphocryptovirus

Características Gerais

Envelopeglicoproteíco

Capsídeo

DNAViral

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+Vírus de Epstein-Barr (EBV)

Cadeia Dupla DNA linear;

Genoma 172 000 pb descodificados

em 1984 (Baer et al); Codifica ≈ 86 proteínas; Persiste como episoma no

núcleo das células infectadas;

Replica-se em sincronização com o DNA do hospedeiro;

Características Gerais

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+Vírus de Epstein-Barr (EBV)

Infecções primárias são normalmente assintomáticas em crianças;

Agente etiológico de diversas patologias Mononucleose Infecciosa: Carcinoma Nasofaringe Linfoma de Burkitt (endémico) Linfomas Células B Linfoma de Células T em

imunossuprimidos Carcinoma da Mama !?!?!?!? Carcinoma Gástrico !?!?!?!?

Características Gerais

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+Vírus de Epstein-Barr (EBV)

Infecta selectivamente: células B células do epitélio da

orofaringe

Infecção

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Infecção primária ocorre nas criptas tonsilares do linfoepitélio dos Aneis de Waldeyer’s, permitindo infecção de células B e epiteliais simultâneamente;

Vírus de Epstein-Barr (EBV)Infecção

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+Vírus de Epstein-Barr (EBV)

Interacção entre o complexo glicoproteico viral (gp350/220) e o receptor CR2/CD21 do sistema C3d do complemento;

O complexo gp85/42 actua como co-receptor de ligação a moléculas do sistema MHC classe II.

Infecção

CR2/CD21MHC

class II

gp350/220

gp85/40

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+Vírus de Epstein-Barr (EBV)Infecção

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+Vírus de Epstein-Barr (EBV)Infecção

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+Vírus de Epstein-Barr (EBV)Infecção

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+Vírus de Epstein-Barr (EBV)Infecção

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+Vírus de Epstein-Barr (EBV)Infecção

Resumindo:

Indivíduos portadores ad eternum;

Infecção controlada regularmente pelo sistema imunitário;

O EBV é capaz de imortalizar células B in vivo e in vitro;

Replicação e libertação viral ocorre em níveis reduzidos em todos os indivíduos seropositivos;

A circulação do vírus e células infectadas ocorre em níveis muito reduzidos e é controlada pelas células T;

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+Vírus de Epstein-Barr (EBV)Mecanismo de Carcinogénese

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+Vírus de Epstein-Barr (EBV)Mecanismo de Carcinogénese

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+Vírus de Epstein-Barr (EBV)Mecanismo de Carcinogénese

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+Vírus de Epstein-Barr (EBV)

EBNA1

Fosfoproteína nuclear essencial na manutenção do DNA viral;

Forma Dímeros que ligam a origem de replicação do DNA viral (EBV oriP) ao DNA do hospedeiro, promovendo a replicação do DNA viral em sincronização com o do hospedeiro;

Sequência variável de repetições de Glicina-Glicina-Alanina que inibem a apresentação de antigénios pelo sistema MHC classe I;

Permite às células escaparem a uma resposta das células T CD8+;

Activação do promotor dos EBNAs e LMPs.

Mecanismo de Carcinogénese

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+Vírus de Epstein-Barr (EBV)

EBNA2

Fosfoproteína nuclear, expressa em primeiro lugar após infecção;

Essencial para a transformação celular;

Potente activador trasncripcional de genes virais e celulares;

Depende da interacção com o factor RBP-Jk de ligação ao DNA, que reconhece a sequência consenso GTGGGAA no DNA; Genes codificantes de antigénios celulares (CD21 e CD23); Genes celulares (c-myc, Runx3 e PI3K) Genes LMP1 e 2; Região promotora dos EBNAs.

Mecanismo de Carcinogénese

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+Vírus de Epstein-Barr (EBV)

EBNA2

Essencial para a transformação celular;

Kempkes et al. 1995 mostrarou que se obtinham linhas celulares linfoblástica mediante a activação da expressão da EBNA2; Linha celular portadora de uma estirpe EBV mutante (P3HRI)

(deleção no gene EBNA2) Plasmídeo contendo o gene EBNA2 fundido com um receptor de

estrogénios;

Mediante a adição de estrogénios era possível obter células em proliferação.

Mecanismo de Carcinogénese

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+Vírus de Epstein-Barr (EBV)

EBNA3 (A, B e C)

Proteínas nucleares hidrofílicas;

Papel no processo de transformação ainda nao é entendido;

Apenas a EBNA3A e 3C são esenciais na transformação celular: EBNA3A: Co-factor da ligação entre EBNA2 e RBP-Jk; EBNA3B: inibidor da ligação entre EBNA2 e o factor RBP-Jk,

controlando a transcrição de genes e a proliferação celular; EBNA3C: activação da expressão de LMP1 e CD21 para promover

a estabilidade celular; inactivação da proteína pRb e consequente fuga aos check-points do ciclo celular.

Mecanismo de Carcinogénese

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+Vírus de Epstein-Barr (EBV)

EBNA LP

Grupo de proteínas expressas dependendo do splicing alternativo;

Tamanho varia com o número de repetições BamHI da estirpe viral;

Co-factor de tranformação celular atarvés da activação da transcrição de genes celulares; Colabora com a EBNA2; Aumenta a expressão de Ciclina D2; Inibe a actividade da p53 e da pRb Promove o escape à apoptose.

Mecanismo de Carcinogénese

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+Vírus de Epstein-Barr (EBV)

LMP1

Proteína membranar integral;

2 regiões activadoras: CTAR1: essêncial na transformação de células B; CTAR2: essêncial na promoção da proliferação celular;

Essêncial na transformação celular; Indução de factores de adesão celular; Activação de antigénios celulares; Expressão de sinais anti-apoptóticos (BCL2 e A20); Activação de vários mecanismos de proliferação celular...

Mecanismo de Carcinogénese

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+Vírus de Epstein-Barr (EBV)

LMP2 (A e B)

Proteínas membranares integrais;

Não essênciais na transformação celular;

LMP2A surge como a mais importante: Bloqueia a activação das imunoglobulinas de superfície em células

B; Activa a via de proliferação celular PI3K-Akt; Bloqueia a ligação de cálcio ao receptor de células B (BCR); Inibe a passagem do EBV para a fase Lítica.

Promove a estabilidade da infecção viral.

Mecanismo de Carcinogénese

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+Vírus de Epstein-Barr (EBV)

Genes Líticos (Immediate early lytic genes)

BamHI Left Frame genes BZLF1: activador da transcrição com capacidade de ligação à

origem de replicação litica do EBV (OriLyt);

BHLF1: inibidor da apoptose (similar ao BCL-2);

BamHI Right Frame genes BCRF1: inibidor da activação dos macrófagos e da resposta

imunológica por células TH1;

BARF1: estimula a proliferação celular através da ligação ao CSF1 (Colony Stimulating Factor 1);

Mecanismo de Carcinogénese

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+Vírus de Epstein-Barr (EBV)Mecanismo de Carcinogénese

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+Cancro da Nasofaringe

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+Cancro da Nasofaringe

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+Cancro da Nasofaringe Distribuição Mundial

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+Cancro da Nasofaringe Distribuição Mundial

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+Cancro da Nasofaringe

Patologia rara no mundo ocidental; Incidência entre 0,1 e 3 / 100 000

Incidências muito elevadas no sul asiático com valores entre 20–30/100 000;

Distribuição Mundial...

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+Cancro da Nasofaringe

Neoplasia rara;

Incidência mais alta da Europa Incidência entre 0,5 e 1.0 / 100 000

Alta Morbilidade;

Baixa Qualidade de Vida

Em Portugal...

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+Cancro da Nasofaringe

O EBV é o agente etiológico principal;

Influência factores genéticos e ambientais; Tabaco Sal Fumo Exposição outros carcinogénios ambientais

Etiologia

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+

Normal

Cancro da Nasofaringe Patologia

Histologia

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+

Lesões Pré-invasoras

Cancro da Nasofaringe Patologia

Histologia

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Carcinoma da Nasofaringe

Cancro da Nasofaringe Patologia

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+

Carcinoma da Nasofaringe

Cancro da Nasofaringe Patologia

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+Cancro da Nasofaringe Patologia

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+Cancro da Nasofaringe Patologia

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+Cancro da NasofaringeSusceptibilidade Genética

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Patologia Infecção EBV

Hugo SousaBScH Microbiology, MSc Oncology

PhD Student, MD Student_________________________________________Serviço Virologia – Lab Biologia Molecular

Grupo Oncologia MolecularIPO Porto FG EPE