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UPCII M MicrobiologiaTeórica 15
2º Ano2010/2011
Sumário
T15 MJC 2
Capítulo XIV. Diagnóstico Microbiológico
Produtos biológicos para análise
Colheita e transporte de amostras
Identificação do agente infeccioso:
Diagnóstico Directo
Cultura e isolamento
Caracterização do microrganismo
Antibiograma
Detecção da resposta imune
8-11-2011
Diagnóstico Microbiológico
Paciente
Pedido de Exame
Colheita
Transporte
Laboratório
Resultado
Interpretação
Diagnóstico e Terapia
8-11-20113 T15 MJC
Sensibilidade e Especificidade
+ -Presença do
Microrganismo Verdadeiro
(V+)
Falso
(F-)
Ausência do Microrganismo Falso
(F+)
Verdadeiro
(V-)
8-11-2011 T15 MJC
Colheitas a partir de: Excreções Secreções Tecidos Órgãos
8-11-2011T15 MJC 5
Colheita e Transporte das amostras
8-11-2011 T15 MJC
Anaeróbios / Fastidiosos / Vírus Psicrófilos / Mesófilos Colheitas de locais com MI Contaminação do ambiente (Espectoração e
saliva) Meio de recolha Eficácia Meio de transporte Antibioterapia precedente Tempo da colheita /Rota de infecção e ciclo de
infecção Tempo de espera para processamento
Análise laboratorial Directamente (1)
Presença de antigénios (A) Presença de sequências genómicas (B)
Após cultura (2) Presença de antigénios (A) Presença de sequências genómicas (B)
Pesquisa e identificação da toxina
8-11-2011T15 MJC 7
1 – Observação directa
Ovos de helmintas
Cryptococcus neoformans
Espiroquetas
Preparação Tzanck (infecção por vírus herpes simplex ou varicella-zoster)
8-11-2011 T15 MJC
1 - Observação directa - Colorações
Fluido CerebroEspinalBacillus antracis
A= Não acid fast
B=Acid Fast
8-11-20119 T15 MJC
1 - Observação directa – Microscopia electrónica
8-11-201110 T15 MJC
1 - Observação directa – Imunocitoquímica
8-11-201111 T15 MJC
1 - Observação directa – Sondas moleculares
8-11-201112 T15 MJC
2 - Cultura
8-11-201113 T15 MJC
Meios de Cultura: Função?Meios de transporte: Função?Incubação: (Temperatura e oxigénio)
2 - Cultura
Streptococcus beta hemolítico
8-11-201114 T15 MJC
Reacções com o meio de cultura
2 - Cultura Após cultura segue-se identificação:
T15 MJC
Multiloccus enzyme electrophoresis (MLEE)
Pulse Field Gel Electrophoresis (PFGE)
Restriction Fragment Lenght Polymorphism (RFLP)
Ribotyping
SerotipagemBiotipagemTipagem de fagosTipagem de bacteriocinas
8-11-201115
2 – Cultura – Permite antibiograma
T15 MJC 8-11-201116
A – Detecção de antigénios
8-11-2011 T15 MJC
A – Detecção de antigénios
Detecção de Proteínas
8-11-2011 T15 MJC
B- Detecção de sequências genómicas Detecção de ácidos nucleicos
PCR
8-11-201119 T15 MJC
B- Detecção de sequências genómicas PCR
T15 MJC 8-11-201120
B- Detecção de sequências genómicas PCR
Visualização
Utilização noutras técnicas
T15 MJC 8-11-201121
B- Detecção de sequências genómicas Detecção de ácidos nucleicos
RT-PCR (Real Time) RT-PCR (Reverse Transcription) Multiplex PCR Nested PCR
T15 MJC 8-11-201122
B- Detecção de sequências genómicas Detecção de ácidos nucleicos
Sondas moleculares FISH
T15 MJC 8-11-201123
3 – Resposta imunitária Tradicionais
Medem a resposta humoral pela actividade dos anticorpos Aglutinação
8-11-2011 T15 MJC
3 – Resposta imunitária
Tradicionais – Reacção de aglutinação
8-11-2011 T15 MJC
3 – Resposta imunitária
Activação do complemento
8-11-2011 T15 MJC
3 – Resposta imunitária Mais Recentes – Imunoensaios enzimáticos
Medem a resposta humoral pela presença dos anticorpos
8-11-2011 T15 MJC
3 – Resposta imunitária
8-11-2011 T15 MJC
3 – Resposta imunitária
8-11-201129 T15 MJC
Bibliografia
T15 MJC 30 8-11-2011
Capítulo 6
Capítulo 17
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