Cultivo de Alimento Vivo

CULTIVO DE ALIMENTO VIVO INFORME N01

Cultivo de Alimento Vivo

INFORME N 01:Preparacin del Material y Area de Trabajo.ALUMNAS:-Bernuy Chvez, Gianela.-Lama Segura, Raisa.-Matheus Valero, Danella.-Zapata Lovera, Katherine.PROFESORA:Vargas Crdenas, Jessie.FECHA DE REALIZACION:29/03/2012.FECHA DE ENTREGA:16/04/2012.

I. INTRODUCCION.A lo largo del tiempo, una de las preocupaciones que se han suscitado, es la de proporcionar un alimento adecuado a diferentes recursos durante su etapa post-larval; debido a que debe predominar el incremento de su peso en un tiempo corto.La mayora de post-larvas cultivadas en aguas clidas consumen zooplancton como primer alimento, despus cambian al alimento natural (fitoplancton, plantas, etc.). En algunos casos comolos juveniles del Paco y de la Gamitana, se alimentan del zooplancton, durante buen tramo de sus vidas. Es as que se opta por un alimento que cubra todas las necesidades del recurso, por el ALIMENTO VIVO.Este tipo de alimento se cultiva en laboratorio y bajo condiciones especficas, segn el tipo de especie con que se trabaja; tomando en cuenta la sensibilidad de estas especies, se debe evitar la contaminacin de estos, ya sea de manera directa e indirecta; puesto que puede incidir de manera decisiva en la supervivencia y produccin del alimento.Para el mantenimiento de las buenas conductas de higiene en el laboratorio se hace uso de procedimiento como la desinfeccin y esterilizacin de diversos materiales que se emplean durante la prctica. En el primero se logra la eliminacin de formas vegetativas de microorganismos aunque no necesariamente de la espora; mientras que en la esterilizacin, se logra la eliminacin completa de toda forma microbiana mediante mtodos fsicos, qumicos o gaseosos.

II. OBJETIVOS.

Obtener la prctica y conocimiento necesarios para aplicar mecanismos de esterilizacin y preparacin del agua, as como del material a utilizar para los cultivos de alimento vivo. Describir los pasos a seguir para una buena limpieza de vidriera. Explicar como hacer para preparar y almacenar agua de mezcla y como remover materia orgnica disuelta del agua. Usar la autoclave y estufa en el proceso de esterilizacin de vidrios y de soluciones. Aplicar los conocimientos de las condiciones de asepsia en los cultivos de laboratorio de microalgas.

III. MATERIALES.

Bomba de Vacio: Son de medio y alto vaco para aplicaciones en laboratorio, con capacidad entre 3 y 75 m3/h. Son sistemas de taponamiento y roscado para viales y botellas

Autoclave: Este equipo esteriliza a la muestra, mediante Vapor a presin; esta mata a las bacterias, microorganismos, etc. por desnaturalizacin de protenas. Existe la relacin presin-temperatura, adems, la existencia de bolsas de aire impedir la penetracin del vapor, es por eso que se debe de eliminarse todo el aire que rodea y penetra en la carga antes de que pueda comenzar la esterilizacin por vapor. En el laboratorio este equipo trabaja a presin de 15lb/pulg2. Balanza Analtica: Esta tiene la funcin de proporcionarnos un pesaje exacto de elementos tangible. Es un artefacto con una alta sensibilidad.

*INSTRUMENTOS

Placa Petri: Es un recipiente redondo, de cristal o plstico, con una cubierta de la misma forma que la placa, pero algo ms grande de dimetro, para que se pueda colocar encima y cerrar el recipiente.

Tubo de ensayo: Es parte del material de vidrio de un laboratorio de qumica. Consiste en un pequeo tubo de vidrio con una punta abierta (que puede poseer una tapa) y la otra cerrada y redondeada, que se utiliza en los laboratorios para contener pequeas muestras lquidas.

Matraz: Es un frasco transparente de forma cnica con una abertura en el extremo angosto, generalmente prolongado con un cuello cilndrico, suele incluir algunas marcas. Por su forma es til para realizar mezclas por agitacin y para la evaporacin controlada de lquidos; adems, su abertura estrecha permite la utilizacin de tapones.

Probeta: es un instrumento volumtrico, que permite medir volmenes superiores y ms rpidamente que las pipetas, aunque con menor precisin. Sirve para contener lquidos.

Pipeta: Es un instrumento volumtrico de laboratorio que permite medir alcuotas de lquido con bastante precisin. Suelen ser de vidrio. Est formado por un tubo transparente que termina en una de sus puntas de forma cnica, y tiene una graduacin (una serie de marcas grabadas) indicando distintos volmenes.

Esptula de Drigalsky: Sirve para realizar separaciones de las colonias de microorganismos; consiste en remover verticalmente en un recipiente, junto con cualquier fluido.

Pipeta Pasteur: Es una pipeta de plstico no calibrada pero si graduada que se utiliza apretando la boquilla de arriba e introduciendo en la probeta, para poder sacar el lquido.

Vaso de precipitado: Es un simple contenedor de lquidos, usado muy comnmente en el laboratorio. Son cilndricos con un fondo plano; se les encuentra de varias capacidades, desde 1 mL hasta de varios litros. Normalmente son de vidrio.

Aguja de Kolle: Estas agujas sirven para realizar el conteo de poblaciones de microorganismos, sin provocar dao sobre estos.

Mechero Bunsen: Es un instrumento utilizado en laboratorios cientficos para calentar o esterilizar muestras o reactivos qumicos.

IV. METODOLOGIA 1. LIMPIEZA : LAVADO DE VIDRIOUtilizar escobillas de cerdas anchas tipo pluma; para material de boca ancha y las pequeas para la limpieza de pipetas .Lavar con detergente lquido y enjuagar con agua corriente.2. ESTERILIZACIN E. qumicaLavar con solucin acida cido muritico (cloro o formol) 0.5ml de cloro por litro de agua para eliminar solventes e impurezas del detergente, enjuagar con agua las veces que sea necesario hasta que el olor a acido haya desaparecido y luego con agua destilada.Enjuagar 3 veces con agua destilada o agua caliente.Cuando se haya utilizado la vidriera primero enjuague la cristalera con agua de cao inmediatamente despus de usarla. Djela remojando toda la noche en una solucin con detergente preparada con agua destilada, en un recipiente de acero inoxidableLa solucin con la vidriera calintela o hirvala por una hora. Haga un primer enjuague con agua de cao. E. Fsica (calor)Pipetas y material de vidrio luego de lavadas envolverlas en papel .En elcaso de las pipetas sedebe tratarde proteger con cuidado las puntas de a pipeta con papel. Luego colocarlas en estufa a 120C, si es material metlico a 150C.ERLENMEYER: Deja un poco de agua en su interior. Tapar con algodn, luego papel aluminio y envolver en papel la boca del mismo. Sujetar con pabilo. Llevar la autoclave a 121 psi de 15-20 minutos.

Funcionamiento y mtodo para esterilizar en Autoclave:La esterilizacin se logra autoclavando el medio a 121 grados centgrados de temperatura, 15 lb/pulgada cuadradade presin (de vapor), por un tiempo que vara de 10minutos para un volumen de 100 ml, 20 minutos para 2 lt y 35 minutos para 5 lts. Todo el aire debe salir del autoclave antes de iniciarla esterilizacin. De no ser as la correcta esterilizacinno se dar.En algunos autoclaves este aire se eliminaautomticamente, no as en otros, donde la vlvula de escapedebe permanecer abierta hasta que se vea salir unacolumna de vapor en forma persistente. Cerrando la vlvula, se deja subir la presin hasta 15 libras, momento enque se inicia la esterilizacin y se toma el tiempo.

Se coloca agua en la caldera, procurando que su nivel no alcance a los objetos que se disponen sobre una rejilla o canasta de metal. Se cierra asegurando la tapa, ajustando los bulones y se da calor, dejando abierta la vlvula de escape hasta que todo el aire se desaloje y comience la salida de vapor en forma de chorro continuo y abundante.Se cierra la espita de vapor y se espera hasta que llegue a la temperatura adecuada. A partir de all se cuenta el tiempo de esterilizacin, luego del cual se debe esperar al descenso de la temperatura para abrir la espita de purga y la tapa del autoclave nuevamente.

3. Preparacin del agua de cultivo Preparar agua de mezcla con agua de mar (previamente esterilizada, para esto filtrar el agua de mar por filtros de 5u. Verter la en un tanque de 250l y agua dulce, hasta que tenga una salinidad de 20 %. Agregar hipoclorito de sodio, formalina o acido hidroclrico puros (comnmente cido muritico) en concentracin de 25 ppm.

FILTRACIN: Este procedimiento es aplicable a la esterilizacin de lquidos y gases, especialmente los primeros. Cuando el lquido a filtrar no puede resistir, sin descomponerse, la accin del calor, se aplica la tcnica de filtracin, la que puede efectuarse mediante presin o aspiracin. Se basa en el pasaje de lquidos a travs de sustancias porosas que detienen a los microbios. Los antiguos filtros se fabricaban en forma de bujas que son cilindros huecos abiertos por una extremidad y cerrados por otra, de paredes de espesor variable. Airear por 4 horas .el cloro puede ser desactivado con tiosulfato de sodio (248g/l), en proporciones de 0.15ml/l de agua clorinada.

Fig. Proceso de filtrado.4. Desinfeccin del ambiente en el laboratorio de microalgas.Preparar solucin de alcohol de 70 %

Grados de alcohol puro X vol. de alcohol puro =70 X vol. a preparar

IV. REVISION LITERARIA

1. Esterilizacin

Murray (2009) hace referencia a la esterilizacin como un proceso de destruccin completa de todos los microorganismos, incluidas las formas resistentes como esporas bacterianas, virus sin envoltura (no lipdicos) y hongos. Ello puede conseguirse mediante esterilizacin fsica, esterilizacin gaseosa y esterilizacin qumica.

Los esterilizantes fsicos, como el calor hmedo y el calor seco, son los mtodos de esterilizacin utilizados ms a menudo en los laboratorios y estn indicados para la mayora de los materiales, con excepcin de los termosensibles o los que poseen componentes qumicos txicos o voltiles. La filtracin es un mtodo til para eliminar las bacterias y los hongos de las soluciones o el aire (mediante filtros de partculas de alta eficiencia (HEPA)). No obstante, estos filtros no consiguen eliminar los virus ni algunas bacterias de pequeo tamao. Tambin se utiliza con frecuencia la esterilizacin por rayos ultravioleta o radiacin ionizante (p. ej. Microondas o rayos gamma). La principal limitacin de la esterilizacin po rayos ultravioleta radica en la necesidad de una exposicin directa del material a esterilizar.

Algunos principales usos de la esterilizacin son (Gutirrez, 2008):

La esterilizacin de equipos quirrgicos y otros materiales de uso mdico con el propsito de reducir el riesgo de infecciones en pacientes. El acondicionamiento del material (pipetas, tubos, placas de Petri, pinzas, etc.) que va a ser utilizado en los laboratorios. La preparacin de medios de cultivo que sern empleados con diferentes propsitos (cultivo de microorganismos, control de ambiente, equipos o personal, anlisis microbiolgico de medicamentos, cosmticos, alimentos, etc.) La descontaminacin de material utilizado.

Existen diversos mtodos de esterilizacin. La seleccin del mtodo a aplicar en cada caso est determinada por el tipo de producto a esterilizar.

1.1. Clasificacin de los Mtodos de Esterilizacin

En el siguiente esquema explica los principales mtodos de esterilizacin, clasificados de acuerdo al tipo de agente que acta.

AGENTES FSICOSCALORHmedo.Ej. Vapor a Presin (autoclave).Seco.Ej. Aire Caliente (horno) IncineracinRADIACIONESAGENTES MECNICOSFILTRACINAGENTES QUMICOSGASEOSOSOxido de etilenoNO GASEOSOSAldehdos. Ej. Glutaraldehdocido PeracticoPerxido de Hidrgeno

1.2. Esterilizacin por Calor Hmedo

El calor hmedo destruye los microorganismos por coagulacin de sus protenas celulares. El principal mtodo de esterilizacin que emplea calor hmedo es la esterilizacin por vapor a presin. Existen otros mtodos de descontaminacin que emplean este tipo de calor los cuales, aunque no permiten la destruccin total de los microorganismos, disminuyen la carga microbiana que posee un material.

Entre estos mtodos podemos citar: Tindalizacin (esterilizacin fraccionada) Agua hirviendo Pasteurizacin Olla de presin

Esterilizacin por vapor a presin La esterilizacin por vapor a presin se lleva a cabo en un autoclave. Estos equipos emplean vapor de agua saturado, a una presin de 15 libras lo que permite que la cmara alcance una temperatura de 121C. El tiempo de esterilizacin usualmente es de 15 minutos, sin embargo, en algunas oportunidades, dadas las caractersticas del material, es necesario variar el tiempo de esterilizacin. (Gutirrez, 2008)

Cuando se utiliza este mtodo es importante controlar en el autoclave la relacin entre la temperatura, la presin y el tiempo de exposicin, ya que stos son factores crticos en el proceso. Slo cuando el vapor se coloca bajo presin, es cuando su temperatura aumenta por encima de los 100C y esto permite alcanzar las temperaturas de esterilizacin (121C). Entre las ventajas de este mtodo de esterilizacin tenemos que no deja residuos, las autoclaves modernas son sencillas de manejar y es un mtodo rpido de esterilizacin. ste es el mtodo de eleccin para esterilizar materiales termoestables y no sensibles a la humedad como medios de cultivo, cultivos de microorganismos para descartar, lencera, uniformes, instrumentos quirrgicos, etc. Entre sus desventajas estn que no permite la esterilizacin de materiales sensibles al calor y materiales no miscibles con el agua como es el caso de polvos, aceites y grasas.

Precauciones Antes de comenzar el proceso de esterilizacin es necesario remover todo el aire de la cmara del autoclave, porque de lo contrario no se podrn alcanzar las condiciones de esterilizacin requeridas debido a que la cmara interna del equipo no podr ser saturada por el vapor de agua. El tiempo de esterilizacin se debe comenzar a contar una vez que se han alcanzado los 121C en la cmara interna del autoclave. Si se van a esterilizar materiales tales como instrumentos quirrgicos, equipos, etc. no se deben cubrir con materiales impermeables al agua como por ejemplo el papel de aluminio, porque ste no permite que el vapor tenga acceso al material y por lo tanto no se lograr la esterilizacin. Cuando se coloca el material a esterilizar en el interior del equipo se debe garantizar la libre circulacin del vapor de agua alrededor de todo el material. Para controlar la esterilizacin por vapor a presin se emplean indicadores fsicos tales como medidores de presin, termmetros, o termgrafos. Aunque estos controles son ampliamente utilizados, actualmente se consideran mtodos secundarios para el control del proceso y son los indicadores biolgicos los que permiten determinar si realmente se llev a cabo en forma efectiva la esterilizacin.

Uso del Autoclave Colocar en la base de la autoclave un volumen de agua ionizada hasta cubrir la bandeja del fondo en caso de que no contenga agua. Colocar la cesta adentro con todos los materiales a esterilizar y enchufar la autoclave. Cerrar correctamente sin ajustar demasiado. (Lo suficiente como para que no escape el aire del interior). Una vez enchufada, mover el termo regulador hasta HI y programar un tiempo de 10 minutos. Una vez terminado el tiempo, bajar la palanca en la parte superior del autoclave y esperar que la presin comience a subir hasta 15 psi. (Dar un tiempo cualquiera). Una vez llegada a esa presin, girar el regulador desde HI hasta 2 o 3 psi, tratando de mantener constante la presin de 15 psi sin que aumente, y colocarle 20 minutos. En caso de que la presin suba demasiado, se puede bajar hasta 1 psi o LOW. Una vez terminado el tiempo, subir la palanca para liberar la presin interna y destapar. Retirar con cuidado los materiales de vidrio y sacar la cesta (Nuca dejarla en contacto con el agua porque entra en un proceso de oxidacin y deterioro).

Figura. Autoclave de Laboratorio

Parmetros de esterilizacin

Tiempo desde que alcanza temperatura y presinTemperaturaPresin

15 minutos121 C1,5 Atm.

10 minutos126 C2,0 Atm.

3 minutos134 C2,9 Atm.

Recomendaciones para la duracin del material estril segn Norma

EnvolturaEstante cerradoEstante abierto

Un envoltorioSeis semanasUn da

Doble envoltorioSeis semanasSeis semanas

Con cobertor plsticoMximo 5 aosMximo 5 aos

1.3. Esterilizacin por Filtracin

La esterilizacin por filtracin se logra por el paso de un lquido o un gas a travs de un material capaz de retener los microorganismos presentes. La esterilizacin por filtracin se emplea para materiales sensibles al calor, tales como ciertos medios de cultivo, azcares, soluciones de antibiticos y otros medicamentos, etc. (Gutirrez, 2008)

Tipos de Filtros

Hay varios tipos de filtros, entre ellos los que ms se usan son los filtros de profundidad y los filtros de superficie o filtros de membrana.

Filtros de profundidad

Estos filtros estn elaborados por un material fibroso (papel, asbesto o fibra de vidrio) dispuesto al azar, de manera que dentro de la estructura del filtro se crean vas tortuosas donde pueden quedar retenidos la mayora de los contaminantes presentes.Entre sus ventajas se encuentran su alta capacidad de retencin de partculas sobre su superficie y a travs de toda su estructura y que permiten filtrar grandes volmenes. Sin embargo, tienen como desventajas que no presentan un tamao de poro uniforme y existe la posibilidad de liberacin, hacia el material filtrado, de partculas y microorganismos que hayan crecido dentro del filtro. Dadas sus caractersticas los filtros de profundidad se usan principalmente como prefiltros, ya que permiten eliminar las partculas grandes pero no la eliminacin total de los microorganismos.

Filtros de superficie Son filtros elaborados generalmente de acetato de celulosa o nitrato de celulosa y contienen poros de tamao uniforme. Este tipo de filtro tiene como ventaja que, al conocer exactamente el tamao de poro que presentan, se pueden seleccionar filtros capaces de retener la totalidad de los microorganismos presentes en una solucin. Sin embargo, se saturan rpidamente y la velocidad de filtracin a travs de ellos es lenta. Para la filtracin esterilizante se pueden usar combinaciones de un filtro de profundidad con un filtro de superficie que tenga un tamao de poro de 0.22 m. La mayor parte de los filtros de membrana se pueden esterilizar en autoclave y luego se manipulan aspticamente al ensamblar el equipo.

Equipos de Filtracin

Existen diferentes equipos de filtracin, la seleccin del mismo est determinada principalmente por el volumen de lquido a filtrar. As tenemos equipos de filtracin para pequeos volmenes, los cuales generalmente se esterilizan por separado y se ensamblan aspticamente en el momento de la filtracin. Cuando se requiere filtrar volmenes mayores, el filtro de membrana se dispone en un cartucho y se coloca en un estuche de acero inoxidable. Tambin existen pequeos cartuchos de plstico que se pueden esterilizar despus de la insercin de un filtro de membrana; con estos dispositivos la filtracin se hace utilizando una jeringa que permite forzar el lquido a filtrar a travs del filtro hasta un recipiente estril.

Antes de utilizar cualquier sistema de filtracin hay que determinar que los filtros no presenten ninguna ruptura, ya que esto puede ocasionar fallas en el proceso de filtracin.

Fig. Sistema de Filtracin al Vaco

2. Lavado

Para desarrollar correctamente cualquier trabajo en el laboratorio es necesario mantener siempre limpio el material y la mesa de trabajo. El material debe estar limpio y seco antes de empezar el experimento.La limpieza del material se debe realizar inmediatamente despus de cada operacin ya que es mucho ms fcil y adems se conoce la naturaleza de los residuos que contiene.Para limpiar un objeto, en primer lugar se quitan los residuos (que se tiran en el recipiente adecuado) con una esptula o varilla y despus se limpia con el disolvente apropiado. El agua con jabn es uno de los mejores mtodos de limpieza. Ocasionalmente, se utilizan cidos, bases o disolventes orgnicos para eliminar todos los residuos difciles.La ltima operacin de lavado consiste en enjuagar todo el material con agua destilada. El material limpio se seca en un soporte adecuado inclinado o vertical, colocando el material boca abajo, o bien se utiliza una estufa de secado. En este ltimo caso el material debe ser introducido en la estufasin tapones ni llaves.Existen otros mtodos para lavar el material que comportan la utilizacin de agentes ms agresivos (cidos, bases, agua regia, mezcla crmica, potasa alcohlica, etc.). En caso de tener un residuo intratable consultar al profesor.

3. Desinfeccin

La desinfeccin es la destruccin de formas vegetativas de microorganismos en objetos inanimados y no necesariamente esporas. Se realiza por mtodos qumicos o fsicos. La desinfeccin de alto nivel implica la eliminacin total de toda forma de vida microbiana excluyendo slo a esporas bacterianas. Existen agentes desinfectantes que no tienen capacidad para la destruccin completa de todos los microorganismos vegetativos, en este caso la desinfeccin que obtiene se califica como de nivel intermedio o bajo. Estos ltimos niveles de desinfeccin tienen muy poca aplicacin prctica en la actualidad.

Preparacin del alcohol de 70 (v/v):

Para realizar la limpieza del rea de trabajo se utiliza la preparacin de este alcohol, para ello se parte de alcohol de 96.(Preparacin de 300 ml de alcohol de 70)

C1 x V1 = C2 x V2

96 x V1 = 70 x 300 ml

V1= 218.75 ml de alcohol de 96

Por lo tanto se necesita mezclar 218.75 ml de alcohol de 96 enrazando este volumen con agua destilada hasta llegar a 300 ml. V. RESULTADOS.Preparacin del agua de cultivo (agua de mezcla)Clculos:-Salinidad del agua de mar: 38-Salinidad deseada del agua de mezcla: 20-Volumen deseado del agua de mezcla: 2L-Volumen inicial de agua de mar = ? = V1-Volumen inicial de agua del cao = ? = V2

(38) x V1 + (3) x V2 = 2L x (20) V1 + V2 = 2L38V1 + 3(2 - V1) = 4038V1 + 6 - 3V1 = 40 35V1 = 34 V1 = 0.97 L de Agua de Mar

2L - V1 = V22L - 0.97L = 1.03L de Agua del Cao

Preparacin de solucin desinfectanteEs la solucin que se usara en las prximas sesiones para desinfectar manos, mesas, ambiente de trabajo y objetos a usar en el desarrollo del cultivo de alimento vivo.Clculos:-Grado de pureza inicial del alcohol = 96-Grado de pureza del alcohol solucin = 70-Volumen deseado de solucin = V2 = 500 ml-Volumen inicial del alcohol = ? = V1-Volumen de agua de cao = ? = V3

(96) x V1 = (70) x V296 x V1 = 70 x 500ml V1 = 364.6ml de Alcohol de 90

V3 = V2 - V1 V3 = 500ml - 354.6ml V3 = 135.4ml de Agua de Cao

VI. DISCUSIN. Durante el proceso de esterilizacin en el autoclave, los alumnos estuvimos muy pendientes de dicho proceso, esto debido a que cuando se utiliza este mtodo es importante controlar la relacin entre la temperatura, la presin y el tiempo de exposicin, ya que stos son factores crticos en el proceso (Gutirrez, 2008) que determinan el xito de la esterilizacin, as como la prevencin de posibles accidentes.

() Entre las ventajas de esterilizacin en autoclave tenemos que no deja residuos, es un mtodo de fcil manipuleo y rpido. Entre sus desventajas tenemos que no permite la esterilizacin de materiales sensibles al calor y materiales no miscibles con el agua como es el caso de polvos, aceites y grasas() Sin embargo, en el caso del laboratorio de cultivo de alimento vivo es de mucha utilidad pues abunda la presencia de materiales termoestables y no sensibles a la humedad como instrumentos quirrgicos y medios de cultivo.

Para la esterilizacin por filtracin es necesario contar con el equipo adecuado, pues los filtros de material fibroso (papel, asbesto o fibra de vidrio) tienen una alta capacidad de retencin de partculas grandres. Sin embargo, al no presentar un tamao de poro uniforme pueden permitir la liberacin, hacia el material filtrado, de partculas y microorganismos que hayan crecido dentro del filtro. Por ello se usan principalmente como prefiltros, ya que permiten eliminar las partculas grandes pero no la eliminacin total de los microorganismos. En el presente laboratorio se uso un sistema de filtracin al vacio a fin de garantizar un mayor % retencin de impurezas del agua de mar.

El lavado, a pesar de sonar como un procedimiento simple y comn, es muy importante en un laboratorio. () La limpieza del material se debe realizar inmediatamente despus de cada operacin ya que es mucho ms fcil y adems se conoce la naturaleza de los residuos que contiene (). En el presente laboratorio, realizamos el lavado de materiales del ciclo pasado, situacin que debemos cambiar pues como seala la revisin bibliogrfica es mejor realizar el lavado inmediatamente terminado la operacin.

La solucin de alcohol a 70 nos permite desinfectar el ambiente de trabajo, se entiende por desinfeccin como () la destruccin de formas vegetativas de microorganismos en objetos inanimados y no necesariamente esporas (). El conocimiento de la preparacin de dicha solucin es muy importante pues, es ser muy utilizada en las prxima sesiones de laboratorio.

VII. CONCLUSION.

Se logr el aprendizaje del protocolo del uso del autoclave. Se logr el aprendizaje del procedimiento para la ptima limpieza de vidriera. Se logr el aprendizaje de la preparacin de agua de cultivo. Se logr el aprendizaje de la preparacin de la solucin desinfectante de alcohol. Se comprendi la importancia de los procedimientos llevados a cabo durante el presente laboratorio, como procedimientos imprescindibles para el desarrollo de las prximas sesiones de laboratorio. Se comprendi la importancia de las condiciones de asepsia en cada uno de los procedimientos dentro del laboratorio de cultivo de alimento vivo.

VIII. BIBLIOGRAFIA.2009 MURRAY, Patrick R.Microbiologa Mdica. ElsevierMosby. Sexta Edicin. (Versin On line)

2008GUTIERREZ, SofaMtodos de Esterilizacin. Laboratorio de Microbiologa, UCV.(Versin On line)http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_M%C3%A9todos_de_esterilizaci%C3%B3n.pdf

2008GUTIERREZ, SofaEsterilizacin por Calor Hmedo. Laboratorio de Microbiologa, UCV.(Versin On line)http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_Esterilizaci%C3%B3n_por_calor_h%C3%BAmedo.pdf

2008GUTIERREZ, SofaEsterilizacin por Filtracin. Laboratorio de Microbiologa, UCV.(Versin On line)http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_Esterilizaci%C3%B3n_por_filtraci%C3%B3n.pdf

VARGAS, Jessie.Preparacin del Material y rea de Trabajo. Gua Laboratorio de Cultivo de Alimento Vivo.http://aula.lamolina.edu.pe/mod/resource/view.php?id=7687

Otros links:

http://www.ub.edu/oblq/oblq%20castellano/neteja.html

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