ARTIGO ORIGINAL USO DE BIOMARCADORES … · que as substâncias químicas usadas na ati-vi-dade agrícola exercem nela2. Melo (200 ) ... res as margens do Lago com a pro-dução de

4�

Alencaretal.RevistaRiosSaúde20�8,�:�http://www.fasete.edu.br/revistariossaude

USO DE BIOMARCADORES ENZIMÁTICOS E GENOTÓXICOS PARA DIAGNÓS-TICO DA QUALIDADE DA ÁGUA DO LAGO DE ITAPARICA-PE.

USE OF ENZYMATIC AND GENOTOXIC BIOMAKERS FOR DIAG-NOSIS OF THE WATER QUALITY OF LAKE FROM ITAPARICA – PE.

FernandaVivianDaltroAlencar�,ÍtaloMaurícioFariasSandes2,KalineCatielyCamposSilva3.

ResumoDesde a origem do reservatório de Itaparica, alguns fatos demonstram negli-genciasligadasasquestõesambientais.Comacrescentepraticaagrícolaepis-cícola,ousodepesticidasemetaispesadostornou-sefrequentenaregião,re-fletindoemumadegradaçãodoambienteaquático.OpresenteestudoobjetivouavaliaraqualidadedaáguadoLagodeItaparicaatravésde testegenotóxico,utilizando-sedomicronúcleo,etesteenzimático,fazendousodaAcetil(AchE)eButirilcolinesterase(BchE).Comobioindicador,foiescolhidoopeixedaespécieOreochromis niloticus,cultivadoemgrandeescalapormeiodetanques-redesnalocalidadedapesquisa.Osresultadosobtidosnotestedemicronúcleoindicampotencialgenotóxicos.NaavaliaçãodaAchEcerebralna localidadedaSantaRita(2�±0,�)enoRiachoSalgado(��±3,3)evidenciaramdiminuiçãodaativi-dadeenzimática,comparadasaocontrole(�34±3,�),domesmomodoocorreunaBchEdofígado,commédiade(�0±0,�)naSantaRitae(2�±0,�)noRiachoSalgado,comocontrolede(43±�,�).Sugere-sequeoReservatóriodeItaparicaencontra-seimpactadodevidoaoaportedeefluentesdeagriculturasepiscicul-turas,apresentandopotencialgenotóxicoetoxicológico.Palavras-chave:genotoxicidade.micronúcleo.colinesterases.

AbstractFromtheoriginofItaparica’sreservoir,somefactsdemonstratenegligencecon-nectedtheambientquestions.Withthecreasingagriculturalandfishfarm-ingpractice,theuseofpesticidesandheavymetalbecomeofteninregion,reflectingin a degradation of aquatic ambient.The present study objected evaluate thewaterqualityof Itaparica’sLagoon throughGenotoxicTest,using themicro-nucleus,andEnzymaticTest,makinguseofAcetylandButyrylcholinesterase.

ARTIGO ORIGINAL

Autorparacorrespondencia:[email protected]ênciasbiológicaspelauniversidadefederaldepernambuco

�0


Likebioindicator,waschoosethefishofspecieOreochromisniloticus,cultiva-tedinbigscalebymeansoftanksnetworksateresearchlocale.Theobtainedre-sultsinmicronucleustestindicategenotoxicpotential.InavaluationofcerebralAchEinlocaleofSantaRita(2�±0,�)andinRiachoSalgado(��±3,3)evidencedenzymaticdecrease,comparisontocontrol(�34±3,�),asthesamewayoccurredinBchEofliver,withthemediaof(�0±0,�)inSantaRitaand(2�±0,�)inRiachoSalgado,withthecontrolof(43±�,�).ItissuggestedtheItaparica’sReservoirisfoundimpactedowingtothepostageofagricultureandfishfarmingeffluents,presentinggenotoxicandtoxicologicalpotencial.Key words:genotoxicity.micronucleus.cholinesterase.

INTRODUÇÃO

Adeterioraçãodoambienteaquático,oca-

sionada pela sua inadequada gestão, vem

aumentando consideravelmente nos últimos

anos,resultandoemumcompro-metimentoda

qualidade da água para as gerações futuras�.

Omeioaquáticopodeserconsideradocomo

últimoreceptordospoluentesnaturaiseantro-

pológicos, tornando-oumaameaçaparavida

biológica. Tal fato implica em interesse nos

estudos voltados para avaliação da toxidade

daágua,principalmentedevidoaosimpactos

queassubstânciasquímicasusadasnaati-vi-

dadeagrícolaexercemnela2.

Melo (200�)� relata que grande parte da

água no Estado de Pernambuco que é usa-da

noabastecimento,vemdereservatórios,quese

encontramemdegradação,porper-correráre-

asurbanas.Essesreservatóriossãoconstruídos

comafinalidadedegerarenergia,sendoode

Itaparicaumexemplo,quepossuiseuperíme-

troirrigado,utilizan-doagrotóxicoselançando

seusefluentesnoriosemnenhumtratamento.

Aagriculturaestá ligadaaocomprome-ti-

mentodaqualidadedaágua.OGovernoFede-

ralchamaaatençãoparaausênciadetrabalhos

acercadediagnósticosemáreascontaminadas

porpesticidas,principalmen-teemecossiste-

masaquáticos3.

Váriospoluentesqueocasionamtalde-gra-

daçãosãocarregadospelaatmosferae/ouágua,

chegandoasepropagaremgrandesdistâncias,

sendoopesticidaumdeles4,�.Oambienteaquá-

ticoéoquemaissofrecomousodessespesti-

cidasemsuasmargenseáreasdelavoura,tanto

com o carreamento e bioacumulação desses

contaminantesnaáguacomopelasensibilidade

dosorganismospresentesnaágua�.

Essespesticidasepoluentescomome-tais

pesadospodemocasionar alterações aníveis

genotóxicos, modificando o DNA e, conse-

quentemente,operfil dosorganismosenvol-

vidoscomomeioaquático,atribuin-docon-

sequências como mutações, enve-lhecimento

aceleradodecélulas,dificulda-dedeadaptação

àsmudançasambientaisecarcinogênese�.

Outrofatoquevemaumentandoade-gra-

daçãodoReservatóriodeItaparicaéocresci-

mentodaaquicultura,praticadapormorado-

resasmargensdoLagocomapro-duçãode

��


peixesemtanquerede,ondesãolançadosna

águaváriospoluentesecontaminantes.Além

de nutrientes, muitas rações comerciais para

peixestêmaltasconcentraçõesdeproteínase

estimuladoresdecrescimento,comoocobree

ozinco,usadosnasformulações,masqueem

con-centrações maiores que 0,0� mg.L� são

tóxicosparamuitasespécies8.

Oefluentedaspisciculturasseasseme-lha

aoefluentedoméstico,possuindocon-centra-

çõesdenutrientesquepodemprovo-caraltera-

çõesfísicasequímicasnaágua,deteriorando

suaqualidade.Essesefluentes,quandolança-

dosnorio,possuemriscosàsaúdepúblicaque

utilizaessaáguaparaconsumo�.

Comapráticadetaisatividades,quecom-

prometemaqualidadedaáguadoReservató-

riodeItaparica,fazsenecessáriosuaavalia-

ção,pormeiodetestedebiomonitoramento.

Dentreostestesutilizados,emnívelgeno-

tóxico, encontra-se o Teste de Micronúcleo

(MNA), que faz uso dos eritrócitos de san-

gueperiféricodopeixe, sendoomaiseficaz

no que diz respeito à avaliação das quebras

deDNA. Já anível enzimático,destaca-se a

atividade enzimática da acetilcolinesterase

(AChE)ebutirilcolinesterase(BChE).Ambas

as enzimas estão presentes no organismo do

peixeesãoresponsáveispelofuncionamento

dosistemaneuralemotor,exercendofunção

dehidrolisaroneurotransmissoracetilcolina.

DeacordocomKligerman(��82)�0agené-

tica toxicológicavemaprimorando testespara

buscar informações sobre os efeitos dos im-

pactosbiológicosnoecossistemaaquático.Os

peixes apresentam-se como organismos mais

usadosnosestudosporpossuíremumaaltasen-

sibilidadeabaixasconcentraçõesdesubstancias

tóxi-caseváriasalteraçõesnosmeiosaquáticos,

sendo considerados bioindicadores de condi-

ções ambientais.Além do mais, aten-dem ca-

racterísticasespecíficasdehábitosalimentares,

abundânciadeespécieesãodefácilcaptura.

Aespécieescolhidaparaopresenteestudo

foiopeixedeáguadoceOreochromisniloticus

mais conhecido por Tilápia, muito cultivada

porterseadaptadoàregiãoemestudo,sendo

escolhidapelafácilcapturaeporseapresen-

tarnosestudosdelevantamentobibliográfico

comoumidealbioindicador.

DeacordocomSobraletal.(200�)��,noes-

tadodePernambucoaáguautilizadaparacon-

sumo humana provém de reserva-tórios que

estão sofrendo processos de degradação por

percorreráreasurbanas,tendocomoexemplo

oLagodeItaparica.

OLagodeItaparicaestásituadononordes-

te,divididoentreosestadosdePernambucoe

Bahiaefoiconstruídoem��8�comfinalida-

dedegerarenergia,porém,seuusoestádes-

tinadonãosóaoabastecimento,mastambém

à irrigação, piscicultu-ra e turismo. É válido

ressaltarqueemváriaspartesdolagonãoestá

sendoobedecidaafaixade�00metrosdeárea

depreservação,relatadanaresoluçãonº04/8�

doCONAMA�2.

Sobral; Carvalho (200�)�� relatam que no

reservatório, a agricultura irrigada é pratica-

�2


danosprojetosimplantadosàssuasmargens,

sendotambémutilizadaasáreasrasasparaa

práticadeaquicultura.

O número de empreendimentos aquícolas

na regiãovemcrescendoconsideravel-mente

eaespécieTilápiadoNilo(Oreochromis ni-

loticus)émantidaatravésdecul-tivosuperin-

tensivoouintensivodetanques-rede,quesão

estruturasdetelafecha-dasdetodososlados,

onde retêm os peixes e permitem a troca de

água,naformadefluxocontínuo,removendo

metabólitosefornecendooxigênio.

Apesardoexpressivocrescimentodaativi-

dadelocal,encontra-sepoucosestudosdemo-

nitoramentodaqualidadedaáguadoLagode

Itaparicae,namaioriadeles,aabordagemre-

porta-separaanálisesfísico-químicaseocor-

remdeformanãocontinu-ada,impedindoas-

sim,umdiagnósticoprecisoefidedigno.

Opresenteestudotorna-serelevanteàme-

dida que propõe realizar um diagnóstico da

qualidadedaáguadoreservatóriodeItaparica,

ondeestásendorealizadaapro-duçãodepeixes

emtanques-rede,utilizan-domarcadoresbioló-

gicosdosorganismoscultivadosno lagopara

seremcomparadoscomumgrupocontrole.

TalpropostaatendeaomanualdaEmpre-

saBrasileiradePesquisaAgropecuária8, que

descreveasboaspráticasdemanejo,dasquais

sedestacam:�)respeitaracapacidadedesu-

portedoreservatórioemfunçãodastaxasde

alimentação expressa em kg de ração/hora/

dia;2)avaliarospos-síveisimpactosambien-

taisdasatividadesagropecuárias, industriais,

urbanasede-senvolvidasnasáreasadjacentes

aosreser-vatóriosondeestásendorealizadaa

produ-çãodepeixesemtanques-rede.

Sendo assim, o diagnóstico ambiental

usandoorganismosbiológicosservecomoum

alertade riscosnãoapenasparapopu-lações

aquáticas,mastambémparatodososdemais

animais, inclusive a espécie hu-mana, que

alémdeutilizaraáguaparaosmaisvariados

fins,estánotopodacadeiaalimentarpodendo

sofrerumabioacumulaçãodeagentestóxicos

queestãopresentesnaágua,mesmoqueem

pequenasquantidades.

DesdeaorigemdoreservatóriodeItaparica,

vários fatosmarcamanegligênciaquantoàs

questõesambientais,oquepodecomprometer

seriamente sua água.A preo-cupação acerca

daqualidadeambientaléumdoscomponentes

fundamentaisdacompetitividadenomercado

internacionaldecommoditiesaquícolas.Esse

setor tem sido estimulado a buscar sistemas

deges-tão sustentáveisatravésdaadoçãode

BoasPráticasdeManejo(BPM)comvistasa

praticarumaaquicultura sustentávelquenão

prejudiqueomeioambiente8.

Segundo Valenti (2002)�3, a aquicultura

sustentável éaquelaquepossuiumapro-du-

ção lucrativa de organismos aquáticos, com

integraçãoharmônicaeduradoracomosecos-

sistemasecomunidadeslocais.Talnomencla-

tura está sendo difundida para designar uma

forma desejável de se produ-zir pescado no

meioaquático, com racionalidadeambiental,

econômicaesocial.

�3


Aproduçãodepeixesemtanques-rededeve

sermanejadacommétodosbaseadosemBPM

edentrodospreceitosdaaquiculturasusten-

tável, objetivando assim reduzir o impacto

ambiental desses sistemas de produção�3. Os

efeitos dos problemas ambientais podem ser

minimizados, para tan-to, se faz necessário

conhecerosdanosqueomúltiplousodaágua

semumgerenciamentoidealvemcausandoàs

comunidadeseasameaçasqueelesrepresen-

tamparaasgeraçõesfuturas.

Sabe-se que grande parte dos resíduos de

raçõesutilizadasparacultivodospeixessedi-

mentaeseacumulanofundodosre-servató-

rios.Ademais,outraparcelasignifi-cativa,de

80a8�%dosnutrientesdasra-ções,éelimi-

nadapelospeixesemformadefezesoudeou-

troscompostosmetabólicos8.

As rações utilizadas para cultivo do pei-

xepossuemaltoteordenitrogênioefósforo,

principaiselementosquecausamimpactosno

ambiente aquático, quando encontrados em

altaconcentração.

ComacriaçãodepeixesnoLagodeItapa-

rica,principalmentepróximoaprojetosdeir-

rigação,pode-seinferirquehápossibilidade

dedanostoxicológicosegenotóxicosdevido

ao uso de defensivos agrícolas e nutrientes

utilizados nas rações comerciais, estas pos-

suindo altas concentrações de proteínas e

estimuladores de crescimento, considerados

tóxicos para muitas espécies. Portanto, se

apresentaaquestão:“Existemdanostoxico-

lógicosegenotóxicosemOreochromis nilo-

ticus cultivados em diferentes tanques-rede

noLagodeItaparica?”

Essetrabalhotemcomoobjetivoprincipal

Avaliar aqualidadedaáguadoLagode Ita-

paricautilizandobiomarcadoresenzimáticose

genotóxicosdeOreochromis niloticus captu-

radosemtanque-rede.

METODOLOGIA

Trata-sedeumapesquisadecampodotipo

descritiva, com abordagem quantitati-va. Os

procedimentos experimentais utili-zados na

conservação dos peixes e proce-dimentos de

sacrifícioforamaprovadospelaComissãode

Ética no Uso deAnimais (CEUA) [Protoco-

lo de Nº 230��.0224�� / 20��-2�] da Uni-

versidade Federal de Pernambuco (UFPE) e

estavam em concor-dância com as diretrizes

doConselhoNa-cionaldeControledeExpe-

rimentaçãoAnimal(CONCEA)soboMinis-

tério da Ci-ência, Tecnologia e Inovação do

Brasil(MCTI).

Localização da área de estudo

Oreservatórioescolhidoparaopresenteestu-

dofoioLagodeItaparica,divididoemduas

áreas de coleta.As coletas foram realizadas

emsetembroenovembrode20��.

�4


Optou-sepelopeixedaespécieOreochro-

mis niloticuscomobioindicadorparaostestes

deavaliaçãodaatividadeenzimáticadaAChE

eBChEeTestedeMicronúcleo.

A amostra utilizada foi de �0 peixes por

área de coleta, quantidade considerada sufi-

cientepararepresentarouniversodapesqui-

sa, mantendo a confiabilidade que o estudo

propõe. Para fins de comparação de efeitos,

umaamostracontrolefoicoletadanabaseda

Universidade Rural de Pernambuco (UFR-

PE),naCidadedeRecife,ondeessaespécie

écultivadaemágualimpa.Nestalocalização

foram também coletados �0 espécimes de

Oreochromis niloticus, afim de homogenei-

zaçãoamostral.

Figura 1-Áreadecoleta�.

Figura 2–ÁreadeColeta2

��


Procedimentos

Cercade�mldesangueperiféricodecadaani-

malfoicoletadoatravésdaveiacaudalcomseringa

estérileheparinizada,e,imediatamente,gotejado

(umagotadesangue)emumalâminalimpaeseca,

sendorealizadoumesfregaço.Deixadaa lâmina

para secar em temperatura ambiente, posterior-

mentefoiutilizadaparaaanálisedemicronúcleos.

Orestantedaamostrafoitransferidoparamicrotu-

bos,comanticoagulante,paraanáliseenzimática.

Logoa-pós,oanimalfoisacrificado,utilizando-se

anestésico,eseustecidoscomocérebroefígado

foramcoletadoseimediatamentecongeladoseen-

caminhadosparaolabora-tóriodeEnzimologiada

UniversidadeFe-deraldePernambuco.

Atividade Colinesterásica

Asatividadesdasenzimasacetilebutiril-

colinesterase foram determinadas através do

métodocolorimétricomodificadoporAssiset

al.(20�0)�4:ostecidosforamhomogeneizadas

atéaconcentraçãode20mgdetampão/mLde

tecido.Emseguida,centrifugadoscoletando-

seosobrenadantequeadicionadoaoreagente

cromogênico DTNB. Os substratos acetil ou

butiriltiocolina foram adicionados imediata-

mente an-tes da leitura a 40� nm durante 3

min.emespectrofotômetrodemicroplacas.

Adosagemdeproteínasnoextratobru-to

foi realizada através do método modifi-cado

porSedmakeGrossberg(��),��utilizando-

sealbuminadesorobovinoco-mopadrão.

Todasasanálisesenzimáticasforamre-ali-

zadasemquadruplicata,excetonasde-termi-

nações de proteína (triplicata). Os dados fo-

ramentãoanalisadosutilizando-seosoftware

debioestatísticaMicroCal™Origin®Versão

�.0(Northampton,MA,EUA).

Teste de Micronúcleo

A inspeção do dano genômico foi estabe-

lecidaatravésdoTestedoMicronúcleo.Para

estaanálise, foiempregadaa técnicadescrita

por Heddel (��3) e Schmid (��),��,��com

algumasmodificações.Aslâminaspreviamen-

te confeccionadas foram fixadas em metanol

absoluto(Merck)por�0minutos.Acoloração

da lâmina foi efe-tuada com corante Giem-

sa (Merck) diluído (�:30) em tampão fosfato

(KH2PO4 + Na2HPO4, Merck), pH �.8, por

�0minu-tos.Apósotempodeterminado,aslâ-

minasforamlavadascomáguadestiladaedei-

xa-dasparasecaremtemperaturaambiente.

Foram analisadas �.000 células de cada

indivíduo em microscópio óptico, quanti-

ficando,entreestas,ascélulasnormaiseas

micronucleadas. As frequências das células

micronucleadas foram estabelecidas e com-

paradasestatisticamentepelaANOVA(nível

designificância�%).Utilizandootestequi-

quadradoparacompararasmedi-asdasvari-

áveiscategóricas.

RESULTADOS

Atividades Colinesterásicas:

Atividade da AchE cerebral

As análises da atividade daAchE cere-

bralmostraramdiferençassignificativasnas

��


áreasdecoletaemcomparaçãocomocon-

trole.NalocalidadeSantaRitaaativi-dade

está menor que na localidade do Ria-cho

Salgado.Emrelaçãoaocontroleasativida-

desnasduasáreasdecoletaforammenores

(Figura3).

Figura 3-Atividade daAcetilcolinesterase(AChE) Cere-

braldeOreochromusniloticus.

Fonte:Pesquisadecamporealizadaemnovembro,20��.

Nota:Letrasdiferentesindicamp<0,0�.

Atividade da BchE no Figado

As análises da atividade BchE no fígado

demonstram diminuídas nas áreas de coleta

emcomparaçãoaocontrole.Nalocalidadeda

SantaRitaaatividadeestamenorquenaloca-

lidadedoRiachoSalgado(Figura4).

Figura 4 -Atividade da Butirilcolinesterase (BChE) de

Oreochro-musniloticus.

Fonte:PesquisadeCamporealizadaemnovembro,20��.

Nota:Letrasdiferentesindicamp<0,0�.

��


Teste de Micronúcleo

NaanálisedodanoGenômico,nospei-xes

Oreochromis niloticus foi observado afreqü-

ência de micronúcleos, como exemplificado

nasfiguras�e�,estasanalisadas�000células

porpeixe.

Figura 5 e 6–FotodeMicroscopiadeeritrócitosdepeixe,indicandomicronúcleos.

Fonte:Pesquisadecamporealizadaemnovembro,20��.

Nota:SetasindicamMicronúcleoemeritrócitos.

Dentre os locais coletados para avaliar a

genotoxicidade da água do reservatório de

Itaparica,alocalidadedaSantaRitafoioque

apresentoumaior freqüênciadeMicronúcleo

(mediade4.��±2.��)emrelaçãoalocalidade

doRiachoSalgado(Tabela�)eambosapre-

sentaram diferença significa-tiva, p< 0,0�,

quandocomparadoscomoLagoParanoá,con-

sideradoumambienteimpactado.Pormeiodo

cálculodemédia,analisadopelo testeANO-

VAecompara-çãoentreasmédias,utilizando

otestedoqui-quadrado,consideramosonível

de�% de significância para verificar a dife-

renciaentreasmediasdoslocaisdecoleta.

Tabela 1-MédiaseDesvioPadrãodeMicronúcleosdeOreochromis niloticuscoletadosem

diferenteslocalidades.LocaldeColeta Totaldeexemplares Micronúcleo Referência

SantaRita �0 4.��±2.��* PresentetrabalhoRiachoSalgado �0 3.8�±�.03* PresentetrabalhoLagoParanoá 22 0.8�±�.23 Grisólia,200�RioParanaíba �0 ��,3±3.�4 Silva;Nepomuceno20�0

LagoAzul �0 4,2±�,�* Christofoletti,2008

Fonte:pesquisadecamporealizadaemnovembro,20��.

�8


DISCUSSÕES

Os resultados obtidos neste trabalho apre-

sentaram forte relação com as características

da ocupação e das atividades insus-tentáveis

desenvolvidasemcadalocaldecoleta,quesão

marcados por várias irregularidades devido a

seusmúltiplosusospelapopulaçãodeseuen-

torno.Devidoàinexistênciadeumlocallivre

depoluentes,com-paramosoambienteemes-

tudo com o Lago Paranoá-DF, diagnosticado

com impactado ao usar a mesma espécie do

nossoestudonoseumonitoramento.Olagode

Itaparicaapresentoumaioríndicedeproporcio-

nalidadedasmédiasdemicronúcleosemrela-

ção à média dos mesmos parâmetros obtidos

emTilápias no Lago Paranoá, sugerin-do um

maiorgraudeimpactonolagodeItaparica.

Silva(20�2)�8relataemseuestudooimpac-

toqueosrecursoshídricosvemsofrendo,prin-

cipalmentesobreosreservató-riosdeágua,que

sãooriginadoscomfina-lidadedegerarener-

gia,poremseuusosedestinaaváriosafins.

Oreservatóriode Itaparicaéumexemplo

de reservatórios de múltiplos usos, gerando

umcomprometimentodaqualidadeda água,

consequentemente para saúde pública que

utiliza a água como abasteci-mento. Melo

(200�)��relataquenoreservatóriodeItaparica

nãosendorespeitadaaáreade�00metrosde

preservação,ondeapredominânciaédevárias

pisciculturasumaaoladodaoutra.

Micronúcleos sãobastante utilizadospara

identificar danos em populações ex-postas a

agentesgenotóxicos,quesãoca-pazesdegerar

fragmentoscromossômicosouperdascromos-

sômicasduranteadivisãocelular, resultando

emmicronúcleosquepodemservisualizados

nocitoplasma.Umafrequênciaelevadademi-

cronúcleosindicadanocromossômico20.

De acordo com estudos de Saotome e

Hayashi(2003)2�,BuckereConceição(2004)22

micronúcleosempeixespossuemgrandeinci-

dênciaquandoexpostoseuseritrócitosasubs-

tancias poluentes, como pesticidas e metais

pesadosquesãoacumuladosnoreservatório.

A frequência de micronúcleos analisadas

nopresenteestudo,evidenciamapresençade

substanciasgenotóxicas,causandoumdanono

materialgenéticodopeixe,osresultadosobti-

dos(tabela�)forammaioresqueosresultados

emestudosdeChristofoletti(2008)23querela-

taaqualidadedoLagoAzulestácomprome-

tidacompre-sençadeagentescompotencial

genotóxico. Silva; Nepomuceno (20�0)24 em

seuestudoobtevefrequênciademicronúcleo

muitoelevadacomparadaaopresenteestudo,

poremelesanalisaramodobrodecélulasque

opresenteestudoanalisou.

Ferrariet,al(2004)2�relataqueaativi-dade

colinesterásicaestásendousadacomobiomar-

cador,evidenciandoapresençadepesticidase

inseticidas,usadosnaagricultu-ra,sendooúl-

timo,naaqüicultura,para combaterparasitas.

Monserratet,al.(200�)2�afirmaqueasativida-

descolinesterasicassãoinibidasporcompostos

anticolinesterásicos,estesquepodemserpro-

duzidosnaturalmenteemconsequênciadapo-

luição,oupelaaçãodepesticidaseinseticidas.

��


EstudosfeitosporTortelli(200�)2�queen-

contrarambaixaatividadeenzimaticacolines-

terasicasemáreascontaminadas,comparadas

asatividadesdocontrole,cor-roboramcoma

atividadedaAcetilcolines-teraseeBuririlcoli-

nesterasedeterminadasnopresenteestudo.

Apesardenãopossuirsuafunçãototal-men-

teelucidada,abutirilcolinesterase,queestápre-

senteprincipalmentenofígado,éapontadana

literaturacomoumaenzimadetoxificadoraesua

inibiçãoevidenciaumaproteçãocontraagentes

anticolineste-rásicosprincipalmenteparaosis-

temaner-vosocentralquesofreforteaçãodes-

sesagentesatravésdainibiçãodaAChE.

Osresultadosobtidosestãorelacionadosàs

substânciaspoluentespresentenoreser-vató-

rio de Itaparica, que provem das ativi-dades

deagriculturaepiscicultura,praticadasentor-

nado rio.Aagriculturana regiãoemestudo

utilizapesticidasquesãocarreadosatéchega-

rem ao rio, onde serão bioacumulados pelos

peixes,estesquesãocul-tivadospormeiode

tanquesredes,napraticadepisciculturalocal.

EmAgostode20��aáguanalocalida-de

deSantaRitaapresentou-seesverdeada,com

bastanteproliferaçãodealgas,Deacordocom

Macedo e Sipaúba-Tavares (20�0)� afirmam

que proliferação de algas é referente a uma

Eutrofização artificial que é originada por

efluentedepisciculturas e atividades agríco-

las.Supõe-sequeafrequênciadeMicronúcle-

osmais elevadanaSantaRita, e a atividade

colinesterasica mais inibida, comparada ao

local Riacho Salgado deve-se a uma maior

concentração de Pisciculturas e Irrigação no

entornodorioemsualocalidade.

CONCLUSÕES

OTestedoMicronúcleodemonstrouquehou-

veefeitomutagênicosignificantesobreoseritró-

citosdeOreochromus niloticus, capturados em

duaspisciculturasnoreservatóriodeItaparica.

Oestudorevelouapresençadeefeitosge-

notóxicosmaisintensonalocalidadedeSanta

Rita,sugerindoumriscoambientalparaesta

eoutrasespéciesqueestãointe-gradasaágua

oriundadestalocalidade.

Opresente trabalho,atravésdaanálisedas

enzimascolinesterásicas,revelouefei-tosdele-

térios,naespécieemestudo,doscontaminantes

oriundosdospontosestuda-dos,sugerindoum

potencialefeitotoxicológicodasmisturasdes-

sescontaminantesnosambientesamostrados.

Os múltiplos usos da água e do solo em

torno do reservatório apontam para uma ne-

cessidadedecontínuomonitoramentoafimde

melhorgerirousodessesrecursos.

Detalhes dos autores: �BacharelembiomedicinapelaFaculdadeSetedeSe-tembro,2bacharelembiomedicinapelaFaculdadeSetedeSe-tembro,3 Doutora em Ciências Biológicas pela UFPE, autorparacorrespondencia:[email protected]

Conflitos de interesse:Nãoháconflitosdeinteresse.

Recebido: 20 Outubro 20��. Aceito: 0� Dezembro20��. Publicado:xxMarço20�8.REFERÊNCIAS�. Melo, G. L. Estudo da qualidade da água no reser-

vatório de Itaparica localizado na bacia do rio São

�0


Francisco.200�.��f.Dissertação(mestrado)–Progra-madePós-GraduaçãoemTecnologiaAmbientaleRe-cursosHídricosdoDepartamentodeEngenhariaCivil,UniversidadeFederaldePernambuco.Recife,200�.

2.Fuzinatto,C.F.Avaliaçãotoxicológicaempeixesdaespécieoreochromisniloticusexpostosàságuasdoriocubatãodosul/sc:estudogenotóxico,epigenéti-coedeestresseoxidativo.20�3.�4�f.Dissertação(Doutorado)-ProgramadePós-GraduaçãoemEn-genhariaAmbiental,UniversidadeFederaldeSantaCatarina.Florianopolis,20�3.

3. IBAMA. Instituto Brasileiro de Meio Ambiente eRecursos Naturais Renováveis. Geo Brazil, 2002.BRAZILEnvironmentOutlook.Brasília,2002.

4.Barr,D.B.etal.ConcentrationsofDialkylPhosphateMetabolitesofOrganophosphorusPesticidesintheU.S. Population. Environmental Health Perspecti-ves.2004;��2(2):�8�-200.

�.Dubus, I.G. et al.Pesticides in rainfall inEurope.EnvironmentalPollution.2000;��0(3):33�-344.

�.Tomita,R.Y.;Beyruth,Z.Toxicologiadeambientesaquáticos.OBiológico.2002;�4(�):�3�-�42.

�. Reifferscheid G., Grummt T. Genotoxicity in Ger-mansurfacewaters–resultsofacollaborativestu-dy.WaterAirSoilPollut.2000;�23(2):��-��.

8.EmpresaBrasileiradePesquisaAgropecuária.Boaspráticasdemanejo(BPMs)paraaproduçãodepei-xes em tanques-redes.Corumbá:EMBRAPAPan-tanal.2003;2�p.�.Macedo,C.F.;Sipaúba-Tavares,L.H.Eutrofizaçãoequalidadedaáguanapiscicul-tura: consequências e recomendações. Boletim doInstitutodePesca.20�0;3�:�4�-��3.

�0.Kligerman,A.D.Fishes asbiologicaldetectorofthe effects of genotoxic agents, In Mutagenicity:NewHorizonts inGeneticsToxicology.AcademicPress.��82;43�-4��.

��.Sobral,MD.;etal.Usoeocupaçãodossolosnoentor-nodereservatóriosnosemi-áridobrasileirocomofatordeterminantedaqualidadedaágua.In:CongressoInte-ramericanodeIngenieríaSanitáriayAmbiental.200�.

�2.Melo.G.L.etal.InfluênciadevariáveisambientaisnacomunidadefitoplanctônicanosreservatóriosreceptoresdoprojetodeintegraçãodoRioSãoFrancisco.RevistaBrasileiradeGeografiaFísica.20�2;�:�300-�3��.

�3.Valenti,W.C.Aquiculturasustentável.In:Congres-sodeZootecnia,VilaReal,Portugal,VilaReal:As-sociaçãoPortuguesadosEngenheirosZootécnicos.Anais.2002;�2º:��-��8.

�4.Assis,C.R.Detal.Characterizationofacetylcholines-terasefromthebrainoftheAmazoniantambaqui(Co-lossomamacropomum)andinvitroeffectoforgano-phosphorusandcarbamatepesticides.EnvironmentalToxicologyandChemistry.20�0;2�(�):2243-2248.

��.Sedmak,J.J.,&Grossberg,S.E.Arapid,sensiti-ve, and versatile assay for protein using Coomas-sie brilliant blue G2�0. Analytical Biochemistry.��;��(2):�44-��2.

��.Heddel,J.A.Arapidinvivotestforchromosomal

damage.MutationRes.��8(2):�8�-��0.��.Schmid,W.Themicronucleus test.MutationRes.

��;3�(�):�-��.�8. Silva, C.C. K. Caracterização daAcetilcolineste-

rase cerebral de tucunaré, Cichla ocellaris (BLO-CH & SCHNEIDER, �80�): efeito de íons e pes-ticidas organofosforados e carbamatos sobre suaatividade.20�2. 80f.Dissertação (Mestrado em ci-ências Biológicas). Programa de Pós-Graduaçãoem Ciências Biologia, Uni-versidade Federal dePernambuco,Recife; 20�2.��. Melo C.; Moreno,P.Bioindicadorescomoferramentaparaomanejo,gestãoeconservaçãoambientalIn:SimpósioSuldeGestãoEConservaçãoAmbiental,2.200�,Erechim.Anais.Erechim:URI-CampusdeErechim,200�.

20.AraldiR.,etal.Usingthecometandmicronucleusassaysforgenotoxicitystudies:Areview.Bio.Phar-ma.20��;�2(�):�4-82.

2�. Saotome, Kyoko; Hayashi, Makoto. Applicationof a sea urchin micronucleus assay to monitoringaquatic pollution: influence of sample osmolality.Mutagenesis.2003;�8(�):�3-��.

22.Bucker,AugustoeConceição,MoisésB.Avaliaçãodagenotoxicidadeporfre-qüênciademicronúcleosemeritrócitosdetilápiasexpostasàságuasdosriosItajaí-Açúe Itajaí-Mirim,SantaCatarina–Brasil.In:CongressoBrasileiroDeecotoxicologia,8,2004,Florianópolis. Resumos. Florianópolis: SociedadeBrasileiradeEcotoxicologia–SETAC,2004.

23. Christofoletti, C.A.Avaliação dos potenciais ci-totóxico, genotóxico e mutagênico das águas deum ambiente lêntico, por meio dos sistemas-testede alliumcepa eoreochromisniloticus.2008.�2�f.Dissertação(Mestrado)-ProgramadePós-Gradua-çãoemCiênciasBiológicas,UniversidadeEstadualPaulista.RioClaro,2008.

24.CostaESilva,A.;Nepomuceno,J.C.Avaliaçãodafrequênciademicronúcleosemeritrócitosperiféri-cosdemandi-amarelo(Pimelodusmaculatus)dorioParanaíba. Perquirĕre - Revista do Núcleo Interdis-ciplinardePesquisaeExtensãodoUNIPAM.PatosdeMinas:UNIPAM.20�0;�(�):��-��.

2�. Ferrari, A., Venturino, A. & D’Angelo, A.M.P.Timecourseofbraincholinesterase inhibitionandrecoveryfollowingacuteandsubacuteazinphos33methyl,parathionandcarbarylexposureinthegoldfish (Carassius auratus). Ecotoxicology Environ-mentalSafety.2004;��(3):420-42�.

2�.Monserrat,J.M.&Bianchini,A.Anticholinesteraseeffectofserine(physostigmine)infishandcrusta-ceanspecies.BrazilianArchivesofBiologyandTe-chnology.200�;44(2):�3-�8.

2�.Tortelli,V.Atividadecolinesterásicanomonitora-mento ambiental: importância da determinação deparâmetroscinéticosempeixesestuarinos.Disser-tação (Mestrado em Ciências Fisiológicas: Fisio-logiaanimalcomparada)-FundaçãoUniversidadeFederaldoRioGrandedoSul,RioGrande,200�.

Documents

ARTIGO ORIGINAL USO DE BIOMARCADORES … · que as substâncias químicas usadas na ati-vi-dade agrícola exercem nela2. Melo (200 ) ... res as margens do Lago com a pro-dução de