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0 1 2 3 4 5 6 7 0 10 20 30 40 50 60 70 Maio Junho Julho Agosto Setembro Outubro Novembro Temperatura média(ºC) humidade relativa (%) e velocidade do vento (m/s) Densidade (nº flebotomíneos/CDC/noite) PN PS PA SM Densidade Total Temperatura média Humidade % Velocidade vento ASPETOS BIOECOLÓGICOS DE FLEBOTOMÍNEOS (DIPTERA, PSYCHODIDAE), VETORES DE LEISHMANIA SP., CAPTURADOS NO VELHO E NO NOVO MUNDO: ALENTEJO, PORTUGAL E VOLTA REDONDA, BRASIL, 2016-2017 1 . INTRODUÇÃO Portugal: Região endémica de leishmaniose humana e canina (Campino & Maia, 2010); Alentejo: flebotomíneos, vetores de Leishmania, prospeção há mais de 10 anos; Brasil: Município de Volta Redonda, Estado do Rio de Janeiro, 1ºs casos autóctenes de leishmaniose visceral em 2014, com este trabalho, 1ºs estudos bioecológicos de flebotomíneos realizados de forma sistematizada OBJETIVOS : Identificar: espécies flebotomínicas do Alentejo, Distritos de Beja e Évora, Portugal, e do Município de Volta Redonda, Brasil; Determinar: abundância relativa das espécies, densidades, variação sazonal e infeção das fêmeas por L. infantum S. Pereira 1 , D. Pita-Pereira 2 , T. Araujo-Pereira 2 , C. Britto 2 , J. Ferrolho 3 , M. Vilhena 4 , E.F. Rangel 5 , M.L. Vilela 5 , M.O. Afonso 3 1 Doutoramento em Ciências Biomédicas, IHMT-UNL, Portugal; 2 Laboratório de Biologia Molecular e Doenças Endêmicas, Instituto Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, Brasil; 3 Unidade de Ensino e Investigação em Parasitologia Médica, Global Health and Tropical Medicine (GHTM), IHMT-UNL; 4 Depart. Medicina Veterinária, Universidade de Évora, Portugal; 5 Laboratório Interdisciplinar de Vigilância Entomológica em Diptera e Hemiptera, FIOCRUZ, Rio de Janeiro, Brasil 2 . MATERIAL E MÉTODOS Alentejo, Portugal e Volta Redonda, Brasil, 2016/2017: capturas flebotomínicas; 2 vezes/mês, 2 noites consecutivas; armadilhas CDC; variedades de biótopos domésticos (Figura 1, A e B)e peridomésticos; Identificação morfológica: chaves de Branco (2011) e Gallati (2013, 2016); Abundância relativa: % das espécies flebotomínicas capturadas; Densidade: de flebótomos/CDC/noite; Identificação da infeção por L. infantum: PCR multiplex - hibridização dot blot 3 . RESULTADOS Fig. 2 - Alentejo, Portugal: Distritos e concelhos prospetados, positivos / negativos para a presença de flebotomíneos, 2016/2017 Fig. 3 - Volta Redonda, Brasil: biótopos positivos e negativos para a presença de flebotomíneos. Nºs entre parêntesis: nº de CDC, por biótopo Fig. 7 - Fêmeas flebotomínicas positivas para Leishmania sp., Volta Redonda, Brasil, 2017, PCR multiplex, amplificação da região conservada do kDNA de Leishmania sp. (120 pb), gene cacophony de flebotomíneos (220 pb), coluna 3 - L. longipalpis; colunas 7 e 11 - Evandromyia sallesi. M- Peso Molecular de 100 pb; C- Controlo negativo (sem DNA); colunas 1 e 2: Controlo negativo (machos) Fig. 1 A - Alentejo, Portugal; B - Volta Redonda, Brasil; biótopos domésticos, armadilhas luminosas CDC (seta) A B 34% 1% 34% 31% Phlebotomus perniciosus (51/150) P. ariasi (2/150) P. sergenti (51/150) Sergentomyia minuta (46/150) 84% 12% 4% Lutzomya longipalpis (67/80) Evandromyia sallesi (10/80) Nyssomyia whitmani (3/80) Fig. 4 A - Alentejo, Portugal, B - Volta Redonda, Brasil: abundâncias relativas das espécies flebotomínicas capturadas, 2016, 2016/2017, respetivamente 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5 0 10 20 30 40 50 60 70 80 Fevereiro Março Abril Maio Junho Julho Temperatura média (°C) e humidade relativa (%) Lutzomyia longipalpis Evandromyia sallesi Nyssomyia whitmani Densidade Total Temperatura média (ºC) Humidade % Densidade (nº lebotomíneos/CDC/noite) A B Fig. 5 A - Densidade das espécies flebotomínicas capturadas no Alentejo, Portugal, 2016; B - Densidade das espécies flebotomínicas capturadas em Volta Redonda, Brasil, 2017 Fig. 6 A - Alentejo, Portugal, confirmação da presença de kDNA de Leishmania; B - Confirmação da infeção de Sergentomyia minuta por L. infantum - sonda espécie específica (Pereira et al., 2017) Referências bibliográficas Branco, S., 2011. Estudo dos flebótomos (Diptera, Phlebotominae), vectores de Leishmania sp., no Concelho de Torres Novas, Portugal. Tese de Mestrado em Parasitologia Médica, IHMT/UNL, 181 pp. Campino, L. & Maia, C., 2010. Epidemiologia das Leishmanioses em Portugal. Acta Med. Port., 23: 859-864. Galati, E. A. B., 2013. Morfologia e Taxonomia. Classificação de Phlebotominae. In Flebotomíneos do Brasil. Edited by Rangel, R.F. & Lainson, R., Rio de Janeiro, FIOCRUZ: 23-206. Galati, E. A. B., 2016. Phlebotominae (Diptera, Psychodidae) Classificação, morfologia, terminologia e identificação de Adultos Atualização do capítulo 2 - Morfologia e Taxonomia: 2,1, Classificação de Phlebotominae, p. 23-51 e 2.2. Morfologia, Terminologia de Adultos e Identificação dos táxons da América, p. 53-75. In Rangel, E.F. & Lainson, R. (org.) Flebotomíneos do Brasil, Rio de Janeiro, FIOCRUZ, 367 pp. Pereira, S., Pita-Pereira, D., Araújo-Pereira, Britto T.C., Costa Rego, C.T., Ferrolho, J., Vilhena, M., Rangel, E.F., Vilela, M.L. & Afonso, M.O., 2017. First molecular detection of Leishmania infantum in Sergentomyia minuta (Diptera, Psychodidae) in Alentejo, southern Portugal. Acta Tropica, 174: 45-48. Agradecimentos A Todos os que colaboraram, e colaboram, permitindo a realização deste trabalho A B 4. CONCLUSÕES Alentejo, Portugal: Phlebotomus perniciosus e P. sergenti - espécies mais abundantes; julho - capturadas 4 espécies, maior densidade flebotomínica, maior risco de transmissão vetorial; Sergentomyia minuta - ocorrência de infeção molecular por Leishmania infantum. Volta Redonda, Brasil: Lutzomyia longipalpis - espécie mais abundante; maio - capturadas 3 espécies; fevereiro e março - maiores densidades flebotomínicas, maior risco de transmissão vetorial; L. longipalpis e Evandromyia sallesi - ocorrência de infeção molecular por L. infantum. PORTUGAL BEJA ÉVORA BRASIL, VOLTA REDONDA

ASPETOS BIOECOLÓGICOS DE FLEBOTOMÍNEOS (DIPTERA ... VIII... · DE LEISHMANIA SP., CAPTURADOS NO VELHO E NO NOVO MUNDO: ALENTEJO, PORTUGAL ... Estado do Rio de Janeiro, 1ºs casos

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Page 1: ASPETOS BIOECOLÓGICOS DE FLEBOTOMÍNEOS (DIPTERA ... VIII... · DE LEISHMANIA SP., CAPTURADOS NO VELHO E NO NOVO MUNDO: ALENTEJO, PORTUGAL ... Estado do Rio de Janeiro, 1ºs casos

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ASPETOS BIOECOLÓGICOS DE FLEBOTOMÍNEOS (DIPTERA, PSYCHODIDAE), VETORES

DE LEISHMANIA SP., CAPTURADOS NO VELHO E NO NOVO MUNDO: ALENTEJO, PORTUGAL

E VOLTA REDONDA, BRASIL, 2016-2017

1. INTRODUÇÃOPortugal: Região endémica de leishmaniose humana e canina (Campino & Maia, 2010); Alentejo: flebotomíneos, vetores de Leishmania, prospeção há

mais de 10 anos; Brasil: Município de Volta Redonda, Estado do Rio de Janeiro, 1ºs casos autóctenes de leishmaniose visceral em 2014, com este

trabalho, 1ºs estudos bioecológicos de flebotomíneos realizados de forma sistematizada

OBJETIVOS: Identificar: espécies flebotomínicas do Alentejo, Distritos de Beja e Évora, Portugal, e do Município de Volta Redonda, Brasil; Determinar:

abundância relativa das espécies, densidades, variação sazonal e infeção das fêmeas por L. infantum

S. Pereira1, D. Pita-Pereira2, T. Araujo-Pereira2 , C. Britto2 , J. Ferrolho3, M. Vilhena4, E.F. Rangel5, M.L. Vilela5, M.O. Afonso3

1Doutoramento em Ciências Biomédicas, IHMT-UNL, Portugal; 2Laboratório de Biologia Molecular e Doenças Endêmicas, Instituto Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, Brasil; 3Unidade de Ensino e Investigação em Parasitologia Médica, Global Health and Tropical Medicine

(GHTM), IHMT-UNL; 4Depart. Medicina Veterinária, Universidade de Évora, Portugal; 5Laboratório Interdisciplinar de Vigilância Entomológica em Diptera e Hemiptera, FIOCRUZ, Rio de Janeiro, Brasil

2. MATERIAL E MÉTODOSAlentejo, Portugal e Volta Redonda, Brasil, 2016/2017: capturas flebotomínicas; 2 vezes/mês, 2

noites consecutivas; armadilhas CDC; ≠ variedades de biótopos domésticos (Figura 1, A e B) e

peridomésticos; Identificação morfológica: chaves de Branco (2011) e Gallati (2013, 2016);

Abundância relativa: % das espécies flebotomínicas capturadas; Densidade: nº de

flebótomos/CDC/noite; Identificação da infeção por L. infantum: PCR multiplex - hibridização

dot blot

3. RESULTADOS

Fig. 2 - Alentejo, Portugal: Distritos e concelhos

prospetados, positivos / negativos para a presença

de flebotomíneos, 2016/2017

Fig. 3 - Volta Redonda, Brasil: biótopos positivos e

negativos para a presença de flebotomíneos. Nºs entre

parêntesis: nº de CDC, por biótopo

Fig. 7 - Fêmeas flebotomínicas positivas para Leishmania sp., Volta

Redonda, Brasil, 2017, PCR multiplex, amplificação da região

conservada do kDNA de Leishmania sp. (120 pb), gene cacophony de

flebotomíneos (220 pb), coluna 3 - L. longipalpis; colunas 7 e 11 -

Evandromyia sallesi. M- Peso Molecular de 100 pb; C- Controlo

negativo (sem DNA); colunas 1 e 2: Controlo negativo (machos)

Fig. 1 A - Alentejo, Portugal; B - Volta Redonda, Brasil; biótopos domésticos,

armadilhas luminosas CDC (seta)

A B

34%

1%

34%

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Phlebotomusperniciosus (51/150)

P. ariasi (2/150)

P. sergenti (51/150)

Sergentomyia minuta(46/150)

84%

12%

4% Lutzomya longipalpis(67/80)

Evandromyia sallesi(10/80)

Nyssomyia whitmani(3/80)

Fig. 4 A - Alentejo, Portugal, B - Volta Redonda, Brasil: abundâncias relativas das espécies flebotomínicas

capturadas, 2016, 2016/2017, respetivamente

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Fig. 5 A - Densidade das espécies flebotomínicas capturadas no Alentejo, Portugal, 2016; B - Densidade das espécies flebotomínicas capturadas em Volta Redonda, Brasil, 2017

Fig. 6 A - Alentejo, Portugal, confirmação da presença

de kDNA de Leishmania; B - Confirmação da infeção

de Sergentomyia minuta por L. infantum - sonda

espécie específica (Pereira et al., 2017)

Referências bibliográficasBranco, S., 2011. Estudo dos flebótomos (Diptera, Phlebotominae), vectores de Leishmania sp., no Concelho de Torres Novas, Portugal. Tese de Mestrado em Parasitologia Médica, IHMT/UNL, 181 pp.

Campino, L. & Maia, C., 2010. Epidemiologia das Leishmanioses em Portugal. Acta Med. Port., 23: 859-864.

Galati, E. A. B., 2013. Morfologia e Taxonomia. Classificação de Phlebotominae. In Flebotomíneos do Brasil. Edited by Rangel, R.F. & Lainson, R., Rio de Janeiro, FIOCRUZ: 23-206.

Galati, E. A. B., 2016. Phlebotominae (Diptera, Psychodidae) Classificação, morfologia, terminologia e identificação de Adultos Atualização do capítulo 2 - Morfologia e Taxonomia: 2,1, Classificação de Phlebotominae, p. 23-51 e 2.2. Morfologia, Terminologia de Adultos e Identificação dos táxons da América, p. 53-75. In Rangel, E.F. & Lainson, R.

(org.) Flebotomíneos do Brasil, Rio de Janeiro, FIOCRUZ, 367 pp.

Pereira, S., Pita-Pereira, D., Araújo-Pereira, Britto T.C., Costa Rego, C.T., Ferrolho, J., Vilhena, M., Rangel, E.F., Vilela, M.L. & Afonso, M.O., 2017. First molecular detection of Leishmania infantum in Sergentomyia minuta (Diptera, Psychodidae) in Alentejo, southern Portugal. Acta Tropica, 174: 45-48.

Agradecimentos

A Todos os que colaboraram, e colaboram, permitindo a realização deste trabalho

A B

4. CONCLUSÕES

Alentejo, Portugal: Phlebotomus perniciosus e P. sergenti -

espécies mais abundantes; julho - capturadas 4 espécies,

maior densidade flebotomínica, maior risco de transmissão

vetorial; Sergentomyia minuta - 1ª ocorrência de infeção

molecular por Leishmania infantum.

Volta Redonda, Brasil: Lutzomyia longipalpis - espécie mais

abundante; maio - capturadas 3 espécies; fevereiro e março -

maiores densidades flebotomínicas, maior risco de transmissão

vetorial; L. longipalpis e Evandromyia sallesi - ocorrência de

infeção molecular por L. infantum.

PORTUGAL

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ÉVORA BRASIL, VOLTA REDONDA