Atividade dos derivados da 1,10-fenantrolina-5,6-diona em combinação

com meropenem contra Acinetobacter baumannii: in vitro e em um

modelo de Galleria mellonella

Vitória, ES

2019

A. baumannii produtoras de carbapenemases

• Organização Mundial da Saúde (2015):

− Plano de Ação Global em Resistência Antimicrobiana –comprometimento financeiro no desenvolvimento de novosmedicamentos;

• Organização Mundial da Saúde (2017):

− Lista de patógenos de prioridade global, estabelecendo estratégias para apesquisa e o desenvolvimento de novos antimicrobianos.

1,10-fenantrolina e seus derivados

1,10-fenantrolina e seus derivados - Mais efetivos, Menos efeitos colaterais Grupo promissor

− Propriedades antibacterianas, antifúngicas e antitumorais descritas para diversas espécies;

− Apresentaram perfil de baixa toxidez para larvas e camundongos.

Fonte: Adaptado de Viganor et al .(2015)

CIM da 1,10-fenantrolina e seus derivados

CompostosP. Aeruginosa

(Viganor, 2016)

K. Pneumoniae

(Peregrino, 2018)A. baumannii

1,10-fenantrolina 579,28 μM ND 70,4 μM

Fendiona 31,15 μM 42,06 μM 9,44 μM

Ag-fendiona 14,05 μM 10,10 μM 2,48 μM

Cu-fendiona 7,76 μM 9,88 μM 1,63 μM

4 x

mais

baixo

8 x

mais

baixo

Avaliar o efeito da 1,10-fenantrolina-5,6-dione (fendiona); [Ag(fendiona)2]ClO4 (Ag-fendiona) e

[Cu(fendiona)3](ClO4)2.4H2O (Cu-fendiona) combinados a Meropenem em diferentes cepas de A.

baumannii produtoras de carbapenemases.

Objetivo Geral

11 cepas de A. baumannii MDR

blaOXA-51 blaOXA-23 blaOXA-24

CHECKERBOARD

CURVA TEMPO-MORTE

AVALIAÇÃO DO TRATAMENTO DE INFECÇÃO IN VIVO G. MELLONELA

Avaliação da ação cinética das combinações

• Método de Checkerboard

ICIF = FIC droga A (MPM ou IMP) + FIC droga B (fendiona, Cu-fendiona ou Ag-fendiona)

FIC droga A = FIC droga B =CMI droga A em combinação

CMI droga A sozinha

CMI droga B em combinação

CMI droga B sozinha

Indiferença Sinergismo Antagonismo

*

**

CIM droga A

CIM droga B

FIC (combinação)

**

*

*

*

*

**

*Fonte: Adaptado de Mahon, Lehman e Manuselis (2015)

Critérios de interpretação:

Sinergismo → ICIF ≤ 0,5;

Aditividade→ ICIF > 0,5 a < 2,0;

Indiferença → ICIF ≥ 2,0 a < 4

Antagonismo → ICIF ≥ 4,0

• 6 combinações

• 11 cepas

Avaliação da ação cinética das combinações

• Combinações testadas (nº de amostras com efeito sinérgico):

✓ Ausência de efeito indiferente ou antagônico em todas as combinações;

• Aditividade em todas as combinações dos compostos com MPM;

• Redução da concentração efetiva de até 4 x CIM do MPM, quando em associação aos compostos.

IMP x fendiona (2) IMP x Cu-fendiona (2) IMP x Ag-fendiona (2)

MPM x fendiona (0) MPM x Cu-fendiona (0) MPM x Ag-fendiona (0)

Avaliação da cinética da ação antimicrobiana dos compostos

Fonte: Peregrino (2018)

Avaliação da cinética da ação antimicrobiana dos compostos

• Teste com ½ CIM de cada substância:− MPM x Cu-fendiona → Redução superior a 4 log10

0 3 6 9 12 15 18 21 24100

101

102

103

104

105

106

107

108

109

1010

1011

Controle

MPM x Cu-fendiona

MPM

Cu-fendiona

Tempo (h)

UF

C/m

L

0 3 6 9 12 15 18 21 24100

101

102

103

104

105

106

107

108

109

1010

1011

Controle

MPM x Cu-fendiona

MPM

Cu-fendiona

Tempo (h)

UF

C/m

L0 3 6 9 12 15 18 21 24

100

101

102

103

104

105

106

107

108

109

1010

1011

Controle

MPM x Cu-fendiona

MPM

Cu-fendiona

Tempo (h)

UF

C/m

L0 3 6 9 12 15 18 21 24

100

101

102

103

104

105

106

107

108

109

1010

1011

Controle

MPM x Cu-fendiona

MPM

Cu-fendiona

Tempo (h)

UF

C/m

L

30B

101B98B

38B

Avaliação da cinética da ação antimicrobiana dos compostos

• Teste com ½ CIM de cada substância:− MPM x Ag-fendiona → Redução superior a 3 log10

0 3 6 9 12 15 18 21 24100

101

102

103

104

105

106

107

108

109

1010

1011

Controle

MPM x Ag-fendiona

MPM

Ag-fendiona

Tempo (h)

UF

C/m

L

0 3 6 9 12 15 18 21 24100

101

102

103

104

105

106

107

108

109

1010

1011

Controle

MPM x Ag-fendiona

MPM

Ag-fendiona

Tempo (h)

UF

C/m

L

0 3 6 9 12 15 18 21 24100

101

102

103

104

105

106

107

108

109

1010

1011

Controle

MPM x Ag-fendiona

MPM

Ag-fendiona

Tempo (h)

UF

C/m

L

0 3 6 9 12 15 18 21 24100

101

102

103

104

105

106

107

108

109

1010

1011

Controle

MPM x Ag-fendiona

MPM

Ag-fendiona

Tempo (h)

UF

C/m

L

30B38B

98B 101B

Infecção em G. mellonella

Fonte: Peregrino (2018)

Avaliação da ação antimicrobiana da combinação dos derivados da 1,10-fenatrolina e

Meropenem no modelo de infecção in vivo de Galleria mellonella

Incubação por 4h a 37 ± 2°C

Avaliação da infecção em G. mellonella

Avaliação da infecção em G. mellonella

Avaliação da infecção em G. mellonella

30B 98B

• O tratamento correspondente a ½ x CIM dos compostos Cu-fendiona e Ag-fendiona sozinhos nãoforam efetivos para eliminar a infecção provocada pelas amostras 30B e 98B.

CONCLUSÕES

• Os compostos apresentaram sinergismo e aditividade quando combinados ao antimicrobiano IMP eefeito aditivo em todas as combinações dos compostos com o MPM;

• As combinações dos compostos Ag-fendiona e Cu-fendiona com o MPM, contendo ½ x CIM de cadaagente, demonstraram efeito aditivo por 6 horas, contra cepas de A. baumannii, destacando-semaior eficiência da combinação Ag-fendiona com MPM em erradicar a bactéria;

• A combinação do composto Ag-fendiona com o MPM aumentou a sobrevivência de larvas de G.mellonella infectadas com A. baumannii, quando comparada aos agentes sozinhos;

• Assim, os resultados obtidos demonstram o potencial de 1,10-fenantrolina, fendiona, Cu-fendiona eAg-fendiona como candidatos a fármacos sozinhos ou combinados a antimicrobianoscarbapenêmicos.

Obrigada!

Roberta F. Ventura Mendes

Contato: robertaventuram@gmail.com