Avaliação das Células T NK em pacientes portadores de Asma

Pesquisador:Régis de Albuquerque Campos

Responsável Institucional: Edgar Carvalho

PRODOC II

Faculdade de Medicina UFBA

Serviço de Imunologia do HUPES

IntroduçãoIntrodução

Células T NK Células T NK

• Grupo Heterogêneo de células T; principal subtipo: invariante TCR (V24J/V11 em humanos)

(tipo 1 ou clássico)

• CD4+ ou CD4 – (DN ou poucos CD8+)

• Em humanos: anticorpo 6B11 dirigido a região CDR3 da cadeia do TCR para identificação

Células T NKCélulas T NK

• Expressam marcadores de linfócitos T e células NK ; marcadores de ativação

• CD1d - glicolipídeos nas APC (-GalCer)

estimulam células T NK; ligante natural identificado (iGb3) em camundongos

• Sistema Imune Inato

Células T NKCélulas T NK•Responde a estímulos produzindo rapidamente altos níveis de citocinas pró e anti-inflamatórias (IL-4, IFN-,IL-10, TNF-, IL-13, IL-5, IL-2, IL-6 and GM-CSF )

•Em humanos, poucas no sangüe periférico

•Correlação entre a expressão de CD4 e capacidade de produzir citocinas Th2

Identificação células T NKIdentificação células T NK

Berzins et al Curr Op Immunol: 17: 448, 2005

Papel das células T NKPapel das células T NK

• Doenças Autoimunes : diabetes, lúpus

• ImunidadeTumoral

• Doenças Infecciosas

• Processos Inflamatórios: aterosclerose

• Doenças Alérgicas: dermatite contato

Células T NK na dermatite de Células T NK na dermatite de contato alérgicacontato alérgica

J Exp Med 2003, 198 (12): 1785

2) Interleukin-4-dependent innate collaboration between iNKT cells and B-1 B cells controls adaptative contact sensitivity

Regis A. Campos, Marian Szczepanik, Atsuko Itakura, Mariette Lisbonne, Neelendu Dey, Maria C. Leite-de-Moraes, Philip W. Askenase

Immunology 2006, 117 (4): 536

1)

AsmaAsma

• Aumento da espessura da parede das vias aéreas (10% a 300%):

INFLAMAÇÃO: linfócitos T CD4 e eosinófilos; modelos animais requerem células T CD4

REMODELAMENTO: mudanças estruturais• Evidências experimentais do envolvimento de

células T NK em modelos experimentais de asma

Leite-de-Moraes, MC et al.

Também: Umetsu, D. et al Nature Medicine 2003, 9 (5): 582

Esquistossomose e células T NK Esquistossomose e células T NK

Cooke, A. et al Eur J Immunol 2003, 33: 1439

ObjetivosObjetivos

• Avaliação do perfil das células T NK em pacientes com asma ( número, produção de IL-4 e IFN-, expressão de CD4)

• Correlação com o status alérgico do paciente• Avaliar o efeito do tratamento com

corticosteróide inalatório na asma no perfil das células T NK

• Avaliar o efeito da infestação por esquistossomose no perfil das células T NK

ResultadosResultados

IndivíduosIndivíduos

• Controles 27

• Rinite 32

• Asma leve 22

• Asma Grave 18

• Esquistossomose crônica 12

• Esquistossomose + asma 11

Total: 111

2%

Assintomático

Avaliação das células T NK em Avaliação das células T NK em pacientes portadores de asmapacientes portadores de asma

0,1%

Asma com teste alérgico posit.

0,45%

Asma com teste alérgico negativoCampos, RA et al 2006

Células T NK e Testes Alérgicos Células T NK e Testes Alérgicos (SPT)(SPT)

Positive SPT Negative SPT0

100

200

300

400

p=0.03

% N

KT

cel

ls x

10-2

n=46 n=24Campos, RA et al 2006

Células T NK em indivíduos Células T NK em indivíduos controles controles

Control SPT+ Control SPT -0

100

200

300

400%

NK

T c

ells

x 1

0-2

SPT = Skin prick test

NS

Campos, RA et al 2006

Células T NK em pacientes com Células T NK em pacientes com asma e riniteasma e rinite

Controles Doença respiratória0

100

200

300

400%

Cél

ula

s T

NK

x 1

0-2

P= 0.07

Campos, RA et al 2006

Células T NK no sangue Células T NK no sangue periféricoperiférico

Controls Rhinitis Asthma0

100

200

300

400%

NKT

cel

ls x

10

-2 P < 0.05

Campos, RA et al 2006

Expressão de CD4 nas células T Expressão de CD4 nas células T NK quanto ao status alérgicoNK quanto ao status alérgico

Teste negativo Teste positivo0

50

100

% C

D4

+ c

elu

las

T N

K

Campos, RA et al 2006

Expressão de CD4 nas células T NKExpressão de CD4 nas células T NK

Controls Rhinitis Asthma0

50

100

p: NS p: NS

p=0.003

% C

D4+

NK

T c

ells

Campos, RA et al 2006

Células T NK em asma vs asma Células T NK em asma vs asma com esquistossomosecom esquistossomose

Asthma Asthma + schisto0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

p=0.01%

NK

T ce

lls x

10

-2

Campos, RA et al 2006

Células T NK na Asma e Células T NK na Asma e EsquistossomoseEsquistossomose

Controls Asthma Schisto0

50

100

150

200

250

300

350

400

p=0.03

p=0.002

% N

KT

ce

lls

x 1

0-2

Campos, RA et al 2006

Células T NK CD4 + na asma e Células T NK CD4 + na asma e esquistossomose esquistossomose

Controls Asthma Schisto0

25

50

75

100

p=0.005

p = NS

% C

D4

+ N

KT

ce

lls

Campos, RA et al 2006

Controle Asma leve Rinite

Células T NK: Anticorpos 6B11Células T NK: Anticorpos 6B11

3.23% 0.76% 0.03%

1.72 ± 2.13 0.32 ± 0.24 0.13 ± 0.24

Campos, RA et al 2006

Outros Achados Outros Achados

• Sem diferença entre pacientes com asma leve ou grave.

• Tratamento com corticosteróides inalados não influenciaram as proporções de células T NK

• Sem diferença na produção intracelular de IL-4 e IFN-pelas células T NK no sangue periférico dos grupos estudados com os controles

Sumário e Conclusão Sumário e Conclusão

SumárioSumário

• Os asmáticos exibiram menores proporções de células T NK no sangue periférico

• Houve uma tendência a diminuição progressiva das proporções das células T NK a medida que havia progressão da doença respiratória de vias aéreas superiores para inferiores

• Os indivíduos alérgicos exibiram menores proporções de células T NK no sangue periférico

SumárioSumário

• Havia uma maior proporção de célula T NK CD4+ em pacientes asmáticos

• Não houve diferença nas proporções de células T NK entre pacientes com asma leve e grave

• Pacientes com asma e esquistossomose apresentaram proporções similares de células T NK aos indivíduos controles

• Nos indivíduos estudados, as células T NK expressaram proporções similares de IL-4 e IFN-intracelular

ConclusãoConclusão

• Nas doenças respiratórias alérgicas e asma, ocorre diminuição das proporções de células T NK V24V11 no sangue periférico, com predomínio do subgrupo CD4+. Esse achado não ocorre se o indivíduo for acometido por esquistossomose provavelmente associado ao efeito imunomodulador encontrado nessa parasitose

DivulgaçãoDivulgação

• Campos, R.A., Teles,M.S.,Martins, M.J., Jesus, O.F., Andrade, B.B. Cruz, A. A., Carvalho, E. M. NKT cells in respiratory allergic patients. In Congrès Annuel Société Française D’Ímmunologie, Paris, França, Final Program and Abstracts p. 86, 2004.

• Campos, R.A., Teles,M.S.,Martins, M.J., Jesus, O.F., Andrade, B.B.., Carvalho, E. M., Cruz, A.A., Avaliação células T NK em pacientes asmáticos. In XXXII Congresso Brasileiro de Pneumologia e Tisiologia e III Congresso Luso- Brasileiro de Pneumologia, Salvador, Jornal Brasileiro Pneumologia30 (3): 548, 2004.

• Campos, R.A., Teles, M.S., Martins, M.J., Jesus, O.F., Andrade, B.B., Cruz, A.A., Araújo, M.I., Carvalho, E.M. Evaluation of NK T cells in patients with schistosomiasis and asthma. Annals of the XXX Meeting of the Brazilian Society of Immunology: 157, October 23-26, 2005

• Campos, R.A., Teles,M.S.,Martins, M.J., Jesus, O.F., Andrade, B.B. Cruz, A. A. , Araújo, M.I., Carvalho, E. M. Avaliação das Células T NK em Pacientes com Esquistossomose e Asma. Rev Brasileira de Alergia e Imunopatologia, 28, suppl 1, S21, 2005.

DivulgaçãoDivulgação

• Campos, R.A., Teles,M.S.,Martins, M.J., Jesus, O.F., Andrade, B.B. Cruz, A. A., Carvalho, E. M. Análise do Perfil das Células T NK no Sangue Periférico de Pacientes com Doenças Respiratórias. Rev Brasileira de Alergia e Imunopatologia, 28, suppl 1, S21, 2005.

• Andrade, B.B., Martins, M.J., Teles, M.J., Campos, R. A. Células T “Natural Killers”: papel na imunoregulação da asma e doenças respiratórias, Rev Brasileira de Alergia e Imunopatologia 28 (3): 133-140, 2005.

• R.A. Campos, M.S. Teles, M.J. Martins, O.F. Jesus, B.B. Andrade, A. A. Cruz, M. Araujo, E. M. Carvalho. Evaluation of NK T Cells in Patients with Schistosomiasis and Asthma. J. Allergy Clinical Immunol 117 ( 2 ): S 102, 2006.

ImpactosImpactos

Melhor conhecimento da função das células T NK em humanos com relação a doença respiratória alérgica

Provável papel das células T NK na imunomodulação da asma nos indivíduos com esquistossomose

AplicaçãoAplicação

• Possibilidade de estímulo das células T NK com ligantes induzindo a secreção preferencial de citocinas Th1 em subgrupo de pacientes asmáticos

Breves ComentáriosBreves Comentários

• A diminuição das células T NK no sangue periférico poderia ser devido a migração dessas células para as vias aéreas.

• Evidências na literatura de aumento de células T NK no lavado brônquico alveolar de 14 indivíduos asmáticos (Akbari, O et al. NEJM, 354 (11): 1117-29, 2006)

• Estudar as células T NK em pacientes com esquistossomose (Th2) e portadores de leishmaniose cutânea (Th1)

AgradecimentosAgradecimentos

UFBA Hospital Necker – Paris Maria do Carmo Leite-de-Moraes, PhD

Marcelo Teles

Marcelo Martins

Oswaldo F. de Jesus

Bruno Bezerril

Alvaro A Cruz, MD, PhD

Edgar M. Carvalho, MD, PhD

Maria Ilma Araújo, MD, PhD