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J. Auger ‐M. Esterio, Laboratorio de Fitopatología Frutal y Molecular, Universidad de Chile
"Botrytis "Botrytis sppspp. en Ar. en Aráándanos: Aspectos ndanos: Aspectos claves en su manejo y en el diseclaves en su manejo y en el diseñño de o de estrategias de control. Principales estrategias de control. Principales resultados generados por Plataforma resultados generados por Plataforma de Sensibilidad de Sensibilidad onon lineline a Botryticidasa Botryticidas““
Proyecto Proyecto InnovaChileInnovaChile de CORFO / FDF / de CORFO / FDF / ComitComitéé de Arde Aráándanos y U. de Chile.ndanos y U. de Chile.
Ing. Agr. MS. Ph.D. Jaime Auger S. / Ing. Agr. MS. Ph.D. Jaime Auger S. / Ing. Agr. Ing. Agr. MgMg. . CsCs. Marcela Esterio G. . Marcela Esterio G.
En la industria frutEn la industria frutíícola de Exportacicola de Exportacióón Botrytis es el principal n Botrytis es el principal problema de problema de ííndole ndole fitopatolfitopatolóógicagica, afecta numerosos , afecta numerosos cultivoscultivos……..
M. Esterio, Lab. Fitopatología Frutal y Molecular, Universidad de Chile
PROCESO DE LATENCIA DE PROCESO DE LATENCIA DE Botrytis cinerea Botrytis cinerea PersPers. EN LA VID. EN LA VID
PREDOMINIO DEL GENOTIPOPREDOMINIO DEL GENOTIPO transposatransposa EN FLORACIEN FLORACIÓÓN N Y EN POSTCOSECHAY EN POSTCOSECHA
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
PROCESO DE LATENCIA DE PROCESO DE LATENCIA DE Botrytis cinerea Botrytis cinerea PersPers. EN KIWI. EN KIWI
PREDOMINIO DEL GENOTIPO PREDOMINIO DEL GENOTIPO vacumavacuma EN FLORACIEN FLORACIÓÓN Y EN N Y EN POSTCOSECHAPOSTCOSECHA
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
Se ha demostrado de manera indirecta la correlaciSe ha demostrado de manera indirecta la correlacióón n entre las infecciones ocurridas en flor con las entre las infecciones ocurridas en flor con las pudriciones de pudriciones de postcosechapostcosecha en vides y en vides y kiwiskiwis..
PREDOMINIO DEL GENOTIPO PREDOMINIO DEL GENOTIPO vacumavacuma EN EN FLORACIFLORACIÓÓN Y EN COSECHAN Y EN COSECHA
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
pCAMgfpCromosomabacteriano vir
T-DNA
Mediante transformación genética de Botrytis spp. utilizando como vector Rhizobium radiobacter
Aislados E1‐4CSensible a Fenhexamid con GFP (CE50 <0.1 µg/ml
Strain bacteriano GV3101
FloraciFloracióón pern perííodo crodo críítico de tico de InfecciInfeccióón n
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
J. Auger et al., 2014 / U. de Chile / ASOEX / Comité de Arándanos / FDF
Arándanos cv. Bluegold inoculadas en flor con suspensión de gfp-Botrytis-FenS
FENHEXAMID (24h pre-inoculación)
SIN DESINFECCIÓN (precosecha)
CON DESINFECCIÓN (precosecha)
CON DESINFECCIÓN (precosecha)
SIN DESINFECCIÓN (precosecha)
12 plantas
12 plantas
89%
33%
0%
67%
1·106 conidias·mL-1
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
Menor infecciMenor infeccióón n …… con Fertilizacicon Fertilizacióón balanceadan balanceada
Susceptibilidad tejido vegetal / botrytis / plantas distintos niveles fertilización N
Exceso de N FAVORECE Botrytis? Exceso de N FAVORECE Botrytis?
XX
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
Ahora bien, CAhora bien, Cóómo enfrentar el control mo enfrentar el control de Botrytis,de Botrytis,……??
‐‐ Primero con Primero con ……..
M. Esterio, Lab. Fitopatología Frutal y Molecular, Universidad de Chile
Manejo integradoManejo integradoControl Químico
Dependiente de:
‐ Sistema de aplicación (canopia, cobertura,…) y del,..
‐Nivel de sensibilidad de las poblaciones a nivelpredial
1.‐Manejo Cultural:‐Cortar y remover tejido viejo e infectado‐Fertilización nitrogenada balanceada…‐Uso de var. Menos susceptibles en zonas más riesgosas‐Evitar cosechar fruta sobremadura,..‐No cosechar fruta mojada‐Tratar de no mover aire en sectores
muy contaminados
M. Esterio, Lab. Fitopatología Frutal y Molecular, Universidad de Chile / http://botrytis.uchile.cl
2.2.‐‐
Por qué?
Pero para obtener un resultado exitoso,.. Pero para obtener un resultado exitoso,.. Necesitamos conocer las poblaciones que Necesitamos conocer las poblaciones que tenemos que combatir,tenemos que combatir,……
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
B. cinerea (Grupo II)
Botrytis grupo S
B. fabae
B. pseudocinerea (Grupo I)
B. calthae
transposa (Flipper+/Boty+) / vacuma (Flipper‐/Boty‐)
boty (Flipper‐/Boty+) / flipper (Flipper+/Boty‐)
Y existe un comportamiento diferencial frente a Y existe un comportamiento diferencial frente a determinados fungicidas,determinados fungicidas,……....
GRAN VARIABILIDAD GENÉTICA / distintas especies
Botrytis cinerea sensu stricto (Grupo II)
Botrytis pseudocinerea (Grupo I)
Botrytis Grupo S (Leroch et al., 2013) ( más agresiva; predominante en Tomate en Grecia y en frutillas en Alemania, casi siempre ausente en uva)
Y 4 GENOTIPOS:
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
‐ Botrytis es un patógeno de alto riesgo de generar resistencia a los fungicidas,…
R‐Ampliamente distribuido;
‐Presente en todos los estadios
‐Fase asexual y sexual,…
‐ Ciclo biológico corto y Alta prod. esporas
Ahora el Riesgo de generar resistencia va a ser mayor sí :
> 1 Sitio de acción
> 1 Gen involucrado
> Actividad alta y persistente en el tiempo
FungicidaFungicida
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
Poblaciones dinámicas, cambiantes / reaccionan rápidamente a
condiciones de manejo …
Alto nivel de variabilidad genAlto nivel de variabilidad genéética tica =
Programas de control similares no otorgan igual resultProgramas de control similares no otorgan igual resultadoado
Para diseñar programas de control exitosos es fundamental
conocer la población a controlar ,…
y la única forma es mediante MONITOREOS PERMONITOREOS PERÍÍODICOSODICOS
que permitan visualizar en el tiempo los cambios de sensibilidad de cambios de sensibilidad de
las poblaciones a nivel predial, y Regional,las poblaciones a nivel predial, y Regional,……
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
PLATAFORMAS DE SENSIBILIDAD ON PLATAFORMAS DE SENSIBILIDAD ON LINE A BOTRYTICIDAS EN LINE A BOTRYTICIDAS EN
PRINCIPALES ZONAS PRODUCTORAS PRINCIPALES ZONAS PRODUCTORAS
DE UVA DE MESADE UVA DE MESAYY
DE ARDE ARÁÁNDANOS NDANOS
Y EN ESO ESTAMOS: Y EN ESO ESTAMOS:
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
Diseñar programas óptimosde Control según niveles de sensibilidad a nivel predial
Mantener y alargar la vidaútil de los botryticidas
Determinar mediantemonitoreos periódicos loscambios en sensibilidad de laspoblaciones de Botrytis …
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
Plataforma on line de sensibilidad de botrytis a fungicidas en ArándanosFDF‐Comité de Arándanos –U. de Chile / InnovaChile de CORFO
Inicio de Proyecto: Sept. de 2012
Sistema abierto a productores interesados con fecha 19 de Agosto de 2014
Informaciones:https://[email protected] / [email protected]
En ambos casos el procedimiento a seguir fue el siguiente: En ambos casos el procedimiento a seguir fue el siguiente:
‐ Seleccionar el cuartel más representativo de la variedad del predio ‐ Marcar 6 sectores (cada uno de aprox. 30 plantas), ‐ Colectar al azar muestras en floración y en precosecha (n° 300 flores o frutos / sector)
SECTOR 1x x x x SECTOR 2x x x x x x x xx x x x x x x xx x x x x x x xx x x x SECTOR 3 x x x x
x x x x x x x xx x x xx x x xx x x xx x x x
SECTOR 4x x x xx x x x SECTOR 6x x x x x x x xx x x x x x x xx x x x SECTOR 5 x x x x
x x x x x x x xx x x x x x x xx x x xx x x xx x x x
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
… en Arándanos, se colecta en floración y una semana previo a cosecha
‐Nivel de infección, …
‐Selección de 18 a 21 de los aislados recuperados,
‐Incrementar …‐determinar niveles de sensibilidad a moléculas fungicidas en uso en el predio,..
Proceso debe realizarse al menos por 2 a 3 temporadas,..
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
Procedimientos: Procedimientos:
CCóómo saber si la poblacimo saber si la poblacióón de aislados es n de aislados es resistente o sensibleresistente o sensible
‐ Puntos críticos de sensibilidad de cada fungicida (EC50 / ppm)
‐ Calculando ciertos parámetros a partir de los valores EC50 determinados:
‐‐ Factor de resistencia (R/S); Factor de resistencia (R/S);
‐‐ Frecuencia de Resistencia (%)Frecuencia de Resistencia (%)
‐‐ CategorizaciCategorizacióón de aislados segn de aislados segúún nivel de Resistencian nivel de Resistencia
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
‐‐Correspondencia genotCorrespondencia genotíípica y de Grupo de Botrytis y nivel pica y de Grupo de Botrytis y nivel promedio de sensibilidad a al menos 5 de las molpromedio de sensibilidad a al menos 5 de las molééculas mculas máás s utilizadas en los programas de controlutilizadas en los programas de control
‐‐ a nivel Predial a nivel Predial
‐‐ a nivel Regionala nivel Regional
‐‐ Correspondencia genotCorrespondencia genotíípica de poblaciones de Arpica de poblaciones de Aráándanos es ndanos es diferente a la de la viddiferente a la de la vid,…
M. Esterio, Lab. Fitopatología Frutal y Molecular, Universidad de ChileLab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
Con los resultados obtenidos , Hemos generado Con los resultados obtenidos , Hemos generado importante informaciimportante informacióón: n:
Correspondencia de Grupo y genotCorrespondencia de Grupo y genotíípica diferente a la de la vid:pica diferente a la de la vid:
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
ARARÁÁNDANONDANO VIDVID
Predominio de Grupo IIPero > presencia de Grupo I
Predominio de Grupo IIY muy baja presencia de
Grupo I
Predominio de genotipo vacuma,.. y de Flipper en
algunas zonas
Predominio de genotipo transposa, flipper y algo de
boty
BLUEBERRY CV. BRIGITTA
N=240 (40 per stage/80 per region/3 region)
T (°C): 14Pp (mm): 654.7
T (°C): 12Pp (mm): 1102
T (°C): 11Pp (mm): 1279
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
Nivel promedio de sensibilidad a al menos 5 de las moléculas más utilizadas en los programas de control a nivel Predial y a nivel Regional
SituaciSituacióón bastante aceptable en: n bastante aceptable en: cyprodinilcyprodinil & & fludioxonilfludioxonil eeiprodioneiprodione (Leve resistencia (Leve resistencia …….).)
Cierto nivel de pCierto nivel de péérdida de sensibilidad a rdida de sensibilidad a fenhexamidfenhexamid en algunos en algunos predios y en otros niveles de sensibilidad bastante aceptables,predios y en otros niveles de sensibilidad bastante aceptables,……
En En boscalidboscalid algo pasa,algo pasa,…….. Pero necesitamos .. Pero necesitamos analizar un > analizar un > NN°° aislados (Predios),aislados (Predios),…… (+ temporadas)(+ temporadas)
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
Con los resultados obtenidos, Con los resultados obtenidos, ……
Sistema Botrytis
SIG BDDITERNET
Usuarios
Evolución de situación de sensibilidad en algunos predios, algunos ejemplos….
M. Esterio, Lab. Fitopatología Frutal y Molecular, Universidad de ChileLab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
Ingreso Plataforma on line
https://https://botrytis.comitedearandanosbotrytis.comitedearandanos.cl.cl
Razón Social …….
Nombre Usuario …….
Contraseña ……
Parámetros evaluados
Niveles de Infección
Evaluación de Sensibilidad a fungicidas …Caracterización genotípica…
Región del Maule
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
Y esta pérdida de sensibilidad implica cambios en la población : disminución de aislados sensibles absolutos
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
Frecuencia de resistencia MFrecuencia de resistencia Múúltiple predio ltiple predio xxxxxx RegiRegióón del Maulen del Maule
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Un fuerte incremento de sensibilidad a fenhexamid se refleja en importante aumento de aislados sensibles absolutos en la población,… y nivel de pérdida de sensibilidad a Carboxamidas aún no presenta un alto riesgo para la población,… (EC50 < 50 ppm)
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
Frecuencia de resistencia MFrecuencia de resistencia Múúltiple predio ltiple predio xxxx RegiRegióón del n del BBííoo‐‐BBííoo
Región de los Ríos
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
Leve Incremento en pérdida de Sensibilidad a dicarboxamidas y alto Carboxamidas se refleja directamente en la disminución de aislados de sensibilidad absoluta en la población , …AL INICIO DE LA SEGUNDA TEMPORADA SOLO UN 5,56 % DE LOS AISLADOS SON SENSIBLES A TODOS LOS FUNGICIDAS EVALUADOS
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
Frecuencia de resistencia Múltiple predio xxx Región de Los Ríos
Y los resultados seY los resultados seññalan lo importante alan lo importante que es continuar en algunos de los que es continuar en algunos de los predios con el monitoreo,predios con el monitoreo,……
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
En Uva de Mesa ya llevamos 3 En Uva de Mesa ya llevamos 3 temporadas,temporadas,……. .
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
INCREMENTAR NINCREMENTAR NÚÚMERO DE PUNTOS DE MUESTREO (mayor MERO DE PUNTOS DE MUESTREO (mayor cantidad de predios) PARA QUE SEA REPRESENTATIVO cantidad de predios) PARA QUE SEA REPRESENTATIVO y que podamos conocer un poco más respecto de la dinámica de las poblaciones de Botrytis,…
En ArEn Aráándanos los resultados obtenidos son ndanos los resultados obtenidos son importantes, pero se requiere de mimportantes, pero se requiere de máás s ……. .
y particularmente en esta temporada en que y particularmente en esta temporada en que todo indica que sertodo indica que seráá de lluvias en primavera,de lluvias en primavera,……
FavoreciFavoreciééndose andose aúún mn máás el desarrollo de s el desarrollo de infecciones por BOTRYTIS..infecciones por BOTRYTIS..
Qué es lo que viene ahora?‐Nuestra meta es proteger la Industria Frutícola, mediante un uso óptimo de los botryticidas y de los nuevos emergentes, para manejar Botrytis de manera medioambientalmente sustentable en el tiempo, …
Estamos empeñados en recuperar la sensibilidad de los fungicidas, aplicar menos, contaminar menos, y obtener un
resultado económicamente superior,….
y también estamos analizando el comportamiento errático detectado en algunos predios …Con respecto a dos de los grupos fungicidas base de los programas en Chile,…
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
BotryticidasRiesgo R resistencia
Modo de acción / genes involucrados
Hydroxyanilidasfenhexamid
(fenpyrazamine)B‐M
Demetilación del C4 de 3‐ketoreductasa / gen Erg27 (R, HydR3‐ HydR3+)
Anilinopyrimidinascyprodinil
pyrimethanil(mepanypyrim)
M‐A Síntesis de metionina y otros a.ac. (R)
Phenylpyrrolesfludioxonil(fenpiclonil)
B‐M/ < Sobreviv.
Osmoregulación; transducción (os‐2)
Carboxamidas(SDHIs)
boscalid(fluopyram)(izopyrazam)(isofetamida)
M‐A
Respiración, Complejo II de Succinatodehidrogenasa / gen sdhB (R) inhibe transporte de electrones , impidiendo
formación de ATP
2,6‐dinitroanilina fluazinam B Respiración, desacoplador fosforilación oxidativa
Dicarboximidasiprodione
procymidone?(vinclozolin)
M‐AOsmoregulación, señales de transducción Histidina kinasa (R)
(Bos1)
DMIs (IBEs) tebuconazole medio IBEs (C14) (erg11/cyp51)
Estrobilurinas
azoxystrobinkresoxim‐methylpyraclostrobintrifloxystrobin,..
A Respiración, complejo III, citocromo bc (Q0) (Cytb) (R)
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
Temporadas: 2011-2012 / 2012-2013 / 2013-2014Región de los Ríos
¿¿ ??
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
Niveles muy altos de pérdida de sensibilidad a carboxamidas, …generalmente no asociados con mayor presión de selección de fungicidas sugiere que otros factores están involucrados,…. ¿ Tipo de mutación predominante y su frecuencia en la población?...
Mediante la implementación de técnicas moleculares que permiten detectar las mutaciones asociadas a la pérdida de sensibilidad a éstas moléculas y su frecuencia en la población analizada, …
Este aspecto es bastante importante porque algunas de las mutaciones son más estables que otras y este conocimiento permitirá tomar decisiones
respecto del uso de estos fungicidas en las temporadas posteriores con el fin de mantener su eficacia a través del tiempo…
Proyecto : USO ÓPTIMO BOTRYTICIDAS EMERGENTES UVA DE MESA
Y cómo lo vamos a realizar,…
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
Para realizarlo tenemos que conocer las poblaciones, Determinar Para realizarlo tenemos que conocer las poblaciones, Determinar cucuáál o cul o cuááles son los fungicidas mles son los fungicidas máás efectivos para esa poblacis efectivos para esa poblacióón n ((SituaciSituacióón del Predio) en los pern del Predio) en los perííodos modos máás crs crííticos de infecciticos de infeccióón,n,……
Lo importante es partir con la molLo importante es partir con la moléécula base cula base mmáás efectiva para la poblacis efectiva para la poblacióón,n,……
Intercalar o posicionar entre perIntercalar o posicionar entre perííodos crodos crííticos de infecciticos de infeccióón n molmolééculas fungicidas alternativas (orgculas fungicidas alternativas (orgáánicas naturales, como nicas naturales, como extractos de plantas, activadores de extractos de plantas, activadores de mecmec. de defensa; productos . de defensa; productos de amplio espectro de accide amplio espectro de accióón, antagonistas bioln, antagonistas biolóógicos gicos ……etcetc.),.),……
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
‐‐ CCóómo manejar Botrytis y recuperar la sensibilidad de los mo manejar Botrytis y recuperar la sensibilidad de los fungicidas claves? fungicidas claves? ……
Y todo esto con un manejo cultural adecuado a la Y todo esto con un manejo cultural adecuado a la variedad y segvariedad y segúún condiciones de la localidad n condiciones de la localidad (Regi(Regióón),n),……
Lab. de Fitopatología Frutal y Molecular / [email protected]
En ArEn Aráándanos los resultados obtenidos son importantes, ndanos los resultados obtenidos son importantes, pero se reitera la necesidad de un Monitoreo constante, pero se reitera la necesidad de un Monitoreo constante, con mayores puntos (predios) con mayores puntos (predios) ……. .
Y por al menos 3 temporadas seguidas,Y por al menos 3 temporadas seguidas,……
Para sugerir un programa adecuado de control, Para sugerir un programa adecuado de control, Necesitamos saber como se comporta la poblaciNecesitamos saber como se comporta la poblacióón a travn a travéés s
del tiempo y distintas condiciones (clima)del tiempo y distintas condiciones (clima)……
““PlataformasPlataformas onon‐‐line de line de sensibilidadsensibilidad a a
Botryticidas en Botryticidas en ArAráándanosndanos: la base : la base parapara el el
disediseññoo de de programasprogramas de Controlde Control””
Es por ello que los invitamos a sumarse a esta importante Es por ello que los invitamos a sumarse a esta importante iniciativa para juntos lograr un manejo exitoso de la principaliniciativa para juntos lograr un manejo exitoso de la principalcausa de deterioro y rechazo de la produccicausa de deterioro y rechazo de la produccióón del Arn del Aráándano ndano ChilenoChileno
[email protected]/ [email protected]@uchile.cl / [email protected]
Agosto, 2014
Laboratorio de Fitopatología Frutal y Molecular U. de Chile