Cromatografia em camada fina (CCF/TLC)Faculdade de Farmcia da Universidade de CoimbraMestrado Integrado em Cincias FarmacuticasQumica Orgnica I 2010/2011

Ana Rita Sequeira; Elma Corveira; Simonetta BorsiniPL 3

Cromatografia Tipos de cromatografiaKroma + graphia = registo da cor

Cromatografia em Camada Fina uma tcnica simples e de grande importncia para a separao rpida e anlise quantitativa de pequenas quantidades de material. usada para:Determinar o nmero de compostos de uma misturaDeterminar a pureza do compostoIdentificar componentes de uma dada mistura comparando-os com padresAcompanhar o curso de uma reaco pelo aparecimento dos produtos e desaparecimento dos reagentes Isolar compostos de uma mistura.Compreende duas fases: a fase estacionria e a fase mvel.

Fase estacionria: remete para a forma fsica do sistema onde ser aplicada a mistura que se pretende separar. Consistem, normalmente, em placas de vidro, metal ou de plstico revestidas por gel de slica, xido de alumnio ou celulose.Fase mvel: remete para o solvente ou mistura de solventes escolhidos.Revelao: a visualizao dos compostos pode ser feita de diversas formas, dependendo das caractersticas dos mesmos:Directamente, no caso de compostos corados;Solues com reagentes que reagem com os compostos a separar formando compostos corados (ex: cido fosfomolibdco)Luz UV 254 nmVapores de iodo

Procedimento:Dissolver a amostra num solvente orgnico voltil (1-2%)Aplicar a amostra com um tubo capilar a cerca de 1 cm da base da placa (linha de base) a mancha no deve ter mais do que 2 -3 mm de dimetro.

Secar amostra

Aplicao da amostra

Desenvolvimento do cromatograma (em cmara saturada, sendo que o solvente deve estar abaixo da linha de base)

Retirar a placa assim que a frente de solvente atingir cerca de 0,5 - 1 cm da parte superior da placa e marcar a linha de solvente a lpis.Secagem e revelao, pelo mtodo mais adequado, do cromatograma

Determinao do valor de Rf (Factor de Reteno)

Tipo de adsorventeSolvente de desenvolvimentoTipo de cmara de desenvolvimentoMtodo de revelaoEspessura da placa TLCQuantidade de material aplicado na placa TLCNo caso de duas substancias terem o mesmo Rf, pode no tratar-se da mesma substncia. O valor de Rf deve apenas ser tomado como guia, visto que existem vrios compostos com o mesmo Rf. Deste modo, outras anlises devem ser efectuadas (como IV) para confirmar a natureza do composto.Condies experimentais que podem interferir com o Rf:ATENO!!!

Bibliografiahttp://pessoal.utfpr.edu.br/poliveira/arquivos/auladecromatografiapapelecamadafina.pdfhttp://pt.wikipedia.org/wiki/Cromatografiahttp://www.ff.ul.pt/paginas/constant/tl/tecnicas/tlc.htmPombeiro, A. J. L. O., Tcnicas e Operaes Unitrias em Qumica Laboratorial, Fundao Calouste Gulbenkian, 4 Ed., 2003http://www.qmc.ufsc.br/qmc5230/aula02/destsimples.htmlhttp://pt.wikipedia.org/wiki/CromatografiaSlides das aulas laboratoriais

Adsortividade afinidade que determinado composto a cromatografar tem com o adsorvente usado**Fase Mvel: e esse processo de escolha consiste, normalmente, em fazer uma soluo de solventes apolares, outra de solventes polares e ainda outra de polaridade intermdia. Depois estuda-se qual delas a mais adequada para a mistura a cromatografar e, aps se ficar a saber qual a soluo mais apropriada pode-se at melhorar essa mistura de solventes, de modo a obter uma cromatografia mais eficiente.

Luz UV 254 nm usa-se com compostos orgnicos no corados, que sejam cromatografados em placas revestidas com silicato de clcio activado com chumbo e magnsio. Estas placas possuem ento fluorescncia quando submetidas a luz UV, localizando-se os compostos atravs de manchas negras que surgem na placa. Vapores de iodo usados no caso de os compostos orgnicos cromatografados no corados reagirem com ele originando compostos corados, revelando deste modo a sua localizao. Em ambos os casos tem que se marcar as manchas correspondentes aos compostos com um lpis, pois aps a paragem dos processos de revelao a placa volta a ser totalmente branca.*Ponto 2 Para alm disso, deve-se ter em ateno o adsorvente, para no o danificar acentuadamente e, para o caso de ser necessrio fazer mais do que uma aplicao, tem que se deixar secar a mancha colocada em primeiro lugar.*Ponto 1 base, no ultrapassando os 3-4 mm, e as manchas devem estar acima do nvel de solvente.MEU*Rf varia sempre entre zero e umMEU*MEU**