103Hortic. bras., v. 27, n. 1, jan.-mar. 2009

O cultivo e a comercialização de flores e plantas ornamentais, princi-

palmente das espécies tropicais, têmobtido avanços relevantes na regiãoNordeste, especialmente emPernambuco, Ceará e Bahia (Souza et al.,2004). Segundo os autores, as condiçõesedafoclimáticas desta região têm-semostrado extremamente propícias parao cultivo de muitas espécies ornamen-tais, além de apresentar biomas próprios,ricos em variabilidade, especialmente debromélias e orquídeas.

No Ceará, a área destinada à floricul-tura, em 2006, foi de 260 ha, sendo a maiorparte ocupada pelo cultivo de flores efolhagens tropicais (Seagri, 2006). Atual-mente, o cultivo de abacaxi ornamentalrepresenta uma área de aproximadamen-

CARVALHO ACPP; PINHEIRO MVM; DIAS GMG; MORAIS JPS. 2009. Multiplicação in vitro de abacaxi ornamental por estiolamento eregeneração de brotações. Horticultura Brasileira 27: 103-108.

Multiplicação in vitro de abacaxi ornamental por estiolamento e regenera-ção de brotaçõesAna Cristina PP de Carvalho1; Marcos Vinícius M Pinheiro2; Gabrielen de Maria G Dias2; João PauloS Morais1

1Embrapa Agroindústria Tropical, R. Dra. Sara Mesquita, 2270, Bairro Pici, 60511-110 Fortaleza-CE; 2UFC-Depto. Fitotecnia, Pici,60455-760 Fortaleza-CE; cristina@cnpat.embrapa.br; saraiva@cnpat.embrapa.br; macvini@gmail.com; gabriellen@gmail.com

te 50 ha, concentrando-se na região me-tropolitana, devido ao clima favorável, àproximidade de Fortaleza e à facilidadede escoamento da produção, através doporto e/ou do aeroporto.

Os abacaxis ornamentais, nativos daflora brasileira, vêm sendo bastante uti-lizados, não somente no Brasil, mas tam-bém na Europa e nos Estados Unidosda América. De acordo com Baima (2004),em 2003, as exportações de abacaxi or-namental no Ceará alcançaram US$ 298,9mil. Em 2004, as exportações aumenta-ram 38%, atingindo US$ 412,9 mil, repre-sentando 29% do total exportado, sen-do os principais países importadoresHolanda (70%), Estados Unidos daAmérica (12%), Portugal (8%) e Alema-nha (5%). As variedades mais

comercializadas foram Ananas comosusvar. erectifolius, A. comosus var.bracteatus e A. comosus var. ananassoides,com a primeira correspondendo a 70% dototal exportado.

Normalmente, os plantios de abacaxiornamental têm sido feitos com mudaspropagadas vegetativamente, retiradasde diferentes partes da planta: coroa, fi-lhote e rebentão (Borges et al., 2003),por método semelhante ao do plantio doabacaxi comestível. Esta forma de pro-pagação apresenta várias desvantagens,tais como lentidão, favorecimento à dis-seminação de pragas e doenças, como opatógeno causador da fusariose edesuniformidade do materialpropagativo em tamanho e vigor (Garita& Gómez, 2000).

RESUMOFoi multiplicado in vitro, o abacaxi ornamental Ananas comosus

var. erectifolius, induzindo o estiolamento de segmentos nodais composterior regeneração de brotações. Os eixos caulinares foram inocu-lados nos meios de cultura: MS sem regulador de crescimento; MS +10 µM de ácido indolbutírico (AIB); MS + 10 µM de ácidonaftalenoacético (ANA); MS + 10 µM de ácido indolacético (AIA),e mantidos no escuro, a 25±2oC. Aos 60 dias após a inoculação,avaliaram-se número de brotos/explante, número de nós/broto, com-primento de brotos, distância entre os nós e número total de nós/explante. O meio MS + 10 µM de ANA promoveu os maiores valo-res para número de brotos e número total de nós/explante. Para aregeneração de brotos, foram utilizados segmentos nodais, oriundosde eixo caulinar (explante) estiolados in vitro, contendo dois nós, nosmeios: MS sem regulador de crescimento; MS + 4,44 µM de 6-benzilaminopurina (BAP); MS + 8,88 µM de BAP e MS + 13,32µM de BAP. As culturas foram incubadas sob fotoperíodo de 16horas, a 25±2oC. Aos 30 dias, não houve diferença no número debrotos regenerados por nó entre os meios testados, enquanto aos 45e 60 dias de cultivo, a adição de BAP teve efeito positivo sobre onúmero de brotos regenerados por nó, quando comparado com omeio sem a adição desta citocinina.

Palavras-chave: Ananas comosus var. erectifolius, Ananas lucidus,micropropagação, Bromeliaceae, floricultura.

ABSTRACTIn vitro multiplication of ornamental pineapple by shoot

etiolation and regeneration

The in vitro multiplication of etiolated nodal segments wasevaluated for Ananas comosus var. erectifolius shoots production.Stems were inoculated in the following media: MS without growthregulator; MS + 10 µM of indolbutiric acid (IBA); MS + 10 µM ofnaphtalenacetic acid (NAA); MS + 10 µM of indolacetic acid (IAA);and stored in darkness at 25±2ºC. 60 days after inoculation, thenumber of etiolated shoots/stem; number of nodes/etiolated shoot;etiolated shoot length, internode length and total number of nodes/stem were evaluated. The medium MS + 10 µM of NAA showed thehighest values of number of etiolated shoots and total number ofnodes/etiolated shoot. For shoot regeneration, nodal segments fromin vitro etiolated stems with two nodes were inoculated in thefollowing media: MS without growth regulator; MS + 4.44 µM of 6-benzylaminopurine (BA); MS + 8.88 µM of BA; MS + 13.32 µM ofBA. The flasks were incubated under photoperiod of 16 hours, at25±2ºC. At 30 days of culture, the number of regenerated shoots/explant did not differ in the tested media. At 45 and 60 days ofculture, the media with BAP induced higher number of regeneratedshoots per node, differing statistically from the control.

Keywords: Ananas comosus var. erectifolius, Ananas lucidus,micropropagation, Bromeliaceae, floriculture.

(Recebido para publicação em 28 de abril de 2008; aceito em 27 de fevereiro de 2009)(Received in April 28, 2008; accepted in February 27, 2009)

104 Hortic. bras., v. 27, n. 1, jan.-mar. 2009

A micropropagação apresenta-secomo uma alternativa viável de propa-gação vegetativa, podendo solucionarvários dos problemas mencionados. Per-mite obter maior taxa de multiplicação,excelente qualidade fitossanitária e es-tabilidade genética das mudas obtidas,material em quantidade suficiente emmenor período de tempo, independenteda época do ano (Correia et al., 1999a) eainda plantas com alta uniformidade empeso e tamanho (Garita & Goméz, 2000).

A utilização de mudas produzidas emlaboratórios no Brasil, de abacaxi orna-mental, ainda é restrita, pelo reduzidonúmero de laboratórios, preço relativa-mente alto e também por ser uma ativi-dade relativamente recente. Além disso,o principal método utilizado atualmenteconsiste na proliferação de gemas axila-res (Correia et al., 1999a,b; 2000; Borges,2000; Borges et al., 2003; Braga et al.,2003; Costa & Zaffari, 2005; Pasqual etal., 2008). Nesse sistema, é comum ocor-rerem simultaneamente a proliferação degemas axilares e a formação de gemasadventícias na base do explante. Essesdois fenômenos dificilmente podem serseparados, pois ambos se devem aosefeitos da citocinina presente no meiode cultura sobre todo o tecido(Grattapaglia & Machado, 1998). Entre-tanto, estes autores ressaltam que, sobo aspecto de integridade clonal, as ge-mas adventícias são desejáveis comosistema de multiplicação, desde que aformação do calo seja mínima ou nula.Ademais, este sistema demicropropagação no abacaxizeiro é nor-malmente mais demorado que em outrasespécies, pois a produção de mudaspara plantio não é alcançada antes de 9a 12 meses depois do início das culturas(Moreira et al., 2003). Esse obstáculopode ser superado com novos estudospara reduzir o tempo de produção dasmudas. Nesse sentido, Kiss et al. (1995)propuseram um novo método de propa-gação rápida de abacaxizeiro, baseadono alongamento de brotos induzidos invitro, por meio do estiolamento.

A micropropagação de abacaxizeirocomestível (Ananas comosus var.comosus), por meio de segmentos nodaisestiolados foi relatada, pela primeira vez,por Kiss et al. (1995). Posteriormente,vários trabalhos foram desenvolvidosno Brasil, utilizando-se para esta frutei-

ra a metodologia proposta, tais comoMoreira et al. (1999; 2003), Sá et al.(2000), Barboza & Caldas (2001), Pereiraet al. (2001) e Praxedes et al. (2001), ecom abacaxi ornamental, por Carvalhoet al. (2005). Esse método, comparadocom a propagação por gemas axilares,tem a vantagem de evitar lesões na zonade regeneração, minimizando a formaçãode calo e, consequentemente, proporcio-nando baixos níveis de variaçãosomaclonal (Kiss et al., 1995). Além dis-so, este método pode apresentar maioralongamento entre os entrenós, propor-cionando aumento na obtenção de bro-tos por explante (Praxedes et al., 2001).

O objetivo deste trabalho foi estabe-lecer e multiplicar in vitro o abacaxi or-namental A. comosus var. erectifolius,induzindo o estiolamento de segmentosnodais e posterior regeneração debrotações.

MATERIAL E MÉTODOS

O trabalho foi realizado no Labora-tório de Cultura de Tecidos e GenéticaVegetal da Embrapa Agroindústria Tro-pical, em Fortaleza (CE) e desenvolvidode abril a agosto/05.

Estiolamento - Foram utilizadasbrotações, com 3 cm de altura, de A.comosus var. erectifolius, estabelecidasin vitro, cujas folhas foram cortadas,reduzindo-se o tamanho para 2 cm e res-tando apenas o eixo caulinar envolvidopelas bases foliares.

O meio de cultura básico utilizado foio MS (Murashige & Skoog, 1962),suplementado com 30 g L-1 de sacarosee solidificado com ágar a 5,5 g L-1. O pHfoi ajustado para 5,8 antes daautoclavagem, que foi realizada a 121ºC,por 15 minutos.

Em capela de fluxo laminar, osexplantes (eixos caulinares) foram ino-culados em tubos de ensaio com 150 x25 mm, contendo 10 mL de meio de cul-tura, e mantidos em sala de crescimento,a 25±2ºC, permanecendo no escuro por60 dias.

O delineamento experimental foi in-teiramente casualizado, constituído porquatro tratamentos e cinco repetições, ea unidade experimental por seisexplantes. Foram testados os tratamen-tos: T1) MS sem regulador de crescimen-

to (MS0); T2) MS + 10 µM de ácidoindolbutírico (AIB); T3) MS + 10 µM deácido naftalenoacético (ANA); e T4) MS+ 10 µM de ácido indolacético (AIA).

As avaliações ocorreram aos 60 dias,observando-se o número de brotosestiolados por explante (eixo caulinar);número de nós por broto; número totalde nós por explante; comprimento debrotos e distância entre os nós, obtidaatravés da divisão do comprimento dosbrotos pelo número de nós por brotoestiolado. O número total de nós porexplante foi obtido a partir da multiplica-ção do número de brotos estiolados/explante pelo número de nós/brotoestiolado.

Os dados foram submetidos à análisede variância e as médias foram compara-das pelo teste de Tukey a 5% de probabi-lidade. Os dados referentes ao númerode brotos estiolados por explante e nú-mero de nós por broto estiolado foramtransformados para raiz de (x + 0,5).

Regeneração - Para a regeneraçãode brotos foram utilizados, comoexplantes, brotos estiolados in vitro, aos60 dias de cultivo no meio MS na pre-sença de 10 µM de ANA. A escolha des-ses brotos foi em função do maior nú-mero total de nós formados nesse meiode cultura. Os brotos estiolados foramseccionados em segmentos contendoapenas dois nós, sendo estes coloca-dos horizontalmente, em frascos com ca-pacidade de 220 mL, contendo 30 mL demeio de cultura.

O delineamento experimental foi in-teiramente casualizado, constituído porquatro tratamentos e oito repetições, ecada unidade experimental por um fras-co contendo 4 segmentos. Utilizaram-seos tratamentos: T1) MS sem reguladorde crescimento (MS0); T2) MS + 4,44µM de 6-benzilaminopurina (BAP); T3)MS + 8,88 µM de BAP; e T4) MS + 13,32µM de BAP. As culturas foram mantidasem sala de crescimento com temperatu-ra de 25±2ºC, fotoperíodo de 16 horas eintensidade luminosa de 30 µmol.m-2s-1.

Aos 30, 45 e 60 dias, contou-se o nú-mero de brotações regeneradas por nó.Os dados foram submetidos à análise devariância e as médias comparadas peloteste de Tukey a 5% de probabilidade.Os dados referentes a esta variável fo-ram transformados para raiz de (x + 0,5).

ACPP Carvalho et al.

105Hortic. bras., v. 27, n. 1, jan.-mar. 2009

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Estiolamento - Um mês após a im-plantação do experimento, observou-seque, nos explantes mantidos no meio MSadicionado de 10 µM de AIA (T3), ocor-reu uma indução intensa de brotos nosexplantes, impossibilitando a precisacontagem do número destes, além deocorrer expressiva presença de calos nosexplantes. Tendo em vista que acalogênese é uma característicaindesejada, por tender a aumentar a taxade variação somaclonal, a qual o siste-ma de estiolamento visa a reduzir, estetratamento foi retirado da análise esta-tística. Nos demais tratamentos, não foiobservada a formação de calos.

Para o número de brotos estioladospor explante foram identificadas diferen-ças significativas entre os tratamentostestados (Tabela 1). O número médio debrotos estiolados produzido por explantefoi estatisticamente superior no meiocontendo ANA (Figura 1C). Os resulta-dos obtidos foram semelhantes aosregistrados por Moreira et al. (2003), osquais verificaram que aos 40 e 80 dias,os explantes do abacaxizeiro cv. Pérola,cultivados no meio de cultura sem regu-lador de crescimento, tiveram compor-tamento inferior, independente do perío-do de permanência no escuro, expres-sando um máximo de 2,29 brotos. Taisresultados não confirmam os obtidos porCarvalho et al. (2005) para o abacaxi or-namental Ananas comosus var.bracteatus e por Barboza & Caldas(2001) para o abacaxi comestível, Ananascomosus var. comosus (híbrido PExSC-52), que não registraram diferenças sig-nificativas para o número de brotos for-

Multiplicação in vitro de abacaxi ornamental por estiolamento e regeneração de brotações

Figura 1. Brotos de abacaxi ornamental Ananas comosus var. erectifolius estioladosnos meios: MS sem regulador de crescimento (A), MS com 10 µM de AIB (B), MS com10 µM de ANA (C), MS com 10 µM de AIA (D), aos 60 dias no escuro (ornamentalpineapple Ananas comosus var. erectifolius etiolated shoots in media: MS withoutgrowth regulator (A), MS with IBA at 10 µM (B), MS with NAA at 10 µM (C), MSwith IAA at 10 µM (D), at the 60th day under darkness). Fortaleza, EmbrapaAgroindústria Tropical, 2005.Barra: 2,5 cm.

Tabela 1. Número de brotos estiolados por explante, número de nós por broto, comprimento de brotos, distância entre os nós e número totalde nós por explante de abacaxi ornamental Ananas comosus var. erectifolius, em diferentes tratamentos, aos 60 dias no escuro (number ofetiolated shoot/explant and node/shoot, internode and shoot length and total number of node/explant of ornamental pineapple Ananascomosus var. erectifolius, in different treatments, at the 60th day under darkness)1. Fortaleza, Embrapa Agroindústria Tropical, 2005.

Meio de culturaNúmero de

brotos/ explanteNúmero denós/broto

Comprimento debrotos (cm)

Distância entreos nós (cm)

Número total denós/explante

MS sem regulador de crescimento 2,87 c 4,70 a 3,43 a 0,74 a 12,10 b

MS + AIB a 10 mM 5,13 b 2,61 b 1,38 b 0,51 a 13,04 b

MS + ANA a 10 mM 8,09 a 2,80 b 1,72 b 0,61 a 22,37 a

CV % 13,73 12,23 35,56 26,65 11,68

1Médias seguidas da mesma letra, na coluna, não diferem entre si pelo teste de Tukey a nível de 5 % de probabilidade (means followed by thesame letter in the column don’t differ by the Tukey test at 5 %).

106 Hortic. bras., v. 27, n. 1, jan.-mar. 2009

mados por explante, nos diferentes tra-tamentos, aos 60 e 35 dias no escuro,respectivamente. Sá et al. (2000) propa-garam, por meio de segmentosestiolados, abacaxizeiro comestível, re-gistrando as maiores médias para o nú-mero de brotos (6,0) no meio contendo10 µM de ANA e de BAP. O maior núme-ro de brotos, registrado por Carvalho etal. (2005) e Barboza & Caldas (2001), foide 1,96 e 1,60 por explante, respectiva-mente. Neste trabalho, o maior valor al-cançado para esta característica foi 8,09.

O meio adicionado com ANA reve-lou também o maior número total de nóspor explante, sendo estatisticamentesuperior aos valores obtidos no uso domeio adicionado de AIB e no meio semregulador de crescimento (Tabela 1). Taisresultados confirmam os obtidos porBarboza & Caldas (2001) que consegui-ram em média 17,0 nós/explante, aos 60dias no escuro, em meio contendo 10 µMde ANA. No meio sem reguladores, osautores registraram apenas 12,2 nós/explante, dados muito semelhantes aosobtidos neste trabalho (12,10). Os resul-tados obtidos foram superiores aosregistrados por Carvalho et al. (2005),9,80, em razão, provavelmente da varie-dade de abacaxi ornamental estudada.

Quanto ao número de nós/broto, omeio sem regulador de crescimento foisuperior (Figura 1A), em relação aosoutros tratamentos (Tabela 1). Porém,maiores números de nós/broto estioladoobtidos no presente trabalho, forampropalados nas pesquisas de Barboza& Caldas (2001), no meio contendo 10µM de ANA, e de Carvalho et al. (2005),no meio sem reguladores de crescimen-

to, com valores de 11,3 e 7,75, respecti-vamente, aos 60 dias no escuro. Éconsabido que diferenças em metabo-lismo e estabilidade das auxinas podemcontribuir para diferentes respostas invitro.

O comprimento dos brotos estioladosé uma variável importante, pois está di-retamente relacionada com o número denós que serão recuperados em novasbrotações, quando colocados em con-dições de luz. Com relação a esta carac-terística, os valores obtidos nos meioscom AIB (Figura 1 B) e ANA foram infe-riores aos do meio sem a adição de auxina(Tabela 1). Carvalho et al. (2005), utili-zando este mesmo meio de cultura, paraabacaxi ornamental, detectaram brotosque atingiram 6,19 cm. Enquanto isso,Kiss et al. (1995), Barboza & Caldas(2001), Praxedes et al. (2001) e Moreiraet al. (2003), utilizando o mesmo meio decultura, para abacaxi comestível, obtive-ram brotos que atingiram em média 7,74;4,8; 2,28 e 2,60 cm de comprimento, res-pectivamente, após 30 dias de incuba-ção in vitro, no escuro. Sá et al. (2000)registraram as maiores médias para o ta-manho dos segmentos estiolados, 4,3cm, 45 dias após a inoculação dosexplantes no meio adicionado de 10 µMde ANA e de BAP. O meio MS semfitorreguladores foi significativamentemelhor para o comprimento de brotosestiolados aos 60 dias no escuro.Praxedes et al. (2001) ressaltam que oestiolamento in vitro do abacaxizeiro cv.Pérola pode ser obtido sem aplicaçãoexógena de ANA e AIA.

No escuro, as plantas se tornamestioladas, isto é, investem energia no

alongamento rápido da parte aérea, nãoocorrendo a expansão foliar nem a for-mação do sistema fotossintético funcio-nal (George, 1993). Os brotos estioladosobtidos revelaram coloração branca, in-dicando ausência ou reduzida atividadefotossintética dos explantes. Além dis-so, as folhas formadas apresentaramcoloração branca, sem a expansão doslimbos (Figura 1). Barboza & Caldas(2001) relataram que, no escuro, osentrenós do talo da plântula doabacaxizeiro comestível se alongaram,separando os nós que, normalmente, empresença de luz, permanecem próximos.George (1996) acrescenta que, nãoobstante a maior separação entre os nós,o estiolamento também pode aumentar,nas gemas, a sensibilidade a auxinas, e,conseqûentemente, a freqüência comque elas podem ser enraizadas. Barboza& Caldas (2001) ressaltam que há muitotempo esse comportamento tem sidoobservado em plantas crescendo no es-curo, e que para fins de micropropagaçãoa separação dos nós facilita o desenvol-vimento de gemas axilares e a manipula-ção de plântulas regeneradas. O mesmocomportamento foi observado para estavariedade de abacaxi ornamental estu-dada e por Carvalho et al. (2005) na var.bracteatus.

Não houve diferença entre os trata-mentos para a variável distância entreos nós (Tabela 1). Em média a distânciafoi de 0,62 cm. Entretanto, Carvalho etal. (2005) constataram que os valoresobtidos nos meios adicionados com AIB(1,06 cm), com AIA (0,89 cm) e sem regu-ladores de crescimento (0,80 cm) foramequivalentes entre si e superiores aosobtidos no meio contendo ANA (0,50cm). Neste trabalho, o maior valor, paraesta característica, foi 0,74 cm.

No tratamento sem a presença deauxina, verificou-se que os explantes(eixos caulinares) formaram um menornúmero de brotos (2,87), todavia, esteseram os mais longos (3,43 cm) e apre-sentaram o maior número de nós por bro-to (4,70), quando comparados com ostratamentos contendo auxina (Tabela 1).Entretanto, no processo demicropropagação, o principal objetivo éo aumento da taxa de multiplicação, istoé, a obtenção de maior número de mu-das ao final da técnica. Nesse sentido, omeio mais adequado foi o adicionado de

ACPP Carvalho et al.

Tabela 2. Número de brotos regenerados por nó, em diferentes meios de cultura, a partir desegmento estiolado, de abacaxi ornamental Ananas comosus var. erectifolius (number of regeneratedshoots/node at different culture medium, from etiolated segment of ornamental pineapple Ananascomosus var. erectifolius)1. Fortaleza, Embrapa Agroindústria Tropical, 2005.

Meio de culturaPeríodo de cultivo (dias)

30² 45 60

MS sem regulador de crescimento 0,69 a 0,75 b 0,75 b

MS + BAP a 4,44 mM 1,08 a 2,60 a 3,23 a

MS + BAP a 8,88 mM 1,02 a 2,32 a 3,50 a

MS + BAP a 13,32 mM 0,96 a 2,35 a 3,75 a

CV % 12,88 11,79 10,731Médias seguidas da mesma letra, na coluna, não diferem entre si pelo teste de Tukey a nívelde 5% de probabilidade (means followed by the same letter in the column don’t differ by theTukey test at 5 %); 2Número de dias após inoculação dos explantes nos meios de cultura(number of days after explants inoculation in culture media).

107Hortic. bras., v. 27, n. 1, jan.-mar. 2009

ANA, que possibilitou o maior númerode nós por explante (22,37), apesar dosbrotos estiolados e o número de nós/broto terem sido inferiores ao meio sempresença de auxina. Do ponto de vistaprático para a separação dos nós, nosbrotos estiolados, não há diferença, ten-do em vista que a distância entre os nósfoi semelhante, nestes tratamentos.

Regeneração - Aos 30 dias, não hou-ve diferença no número de brotos rege-nerados por nó entre os tratamentos tes-tados (Tabela 2). Resultados semelhan-tes foram obtidos por Carvalho et al.(2005) nesta característica, sendo 1,01,o maior valor obtido. As avaliaçõesefetuadas aos 45 e 60 dias indicam que aadição de BAP teve um efeito positivosobre o número de brotos regeneradospor nó, quando comparado com a teste-munha, no entanto não foi observadainfluência da concentração de BAP nosvalores médios para o número de brotosregenerados por nó, com valores expres-sos de 2,42 e 3,49, aos 45 e 60 dias, res-pectivamente. Carvalho et al. (2005) ob-tiveram apenas 1,13 e 2,03 plântulas re-generadas/nó, aos 45 dias no meio con-tendo 4,44 µM de BAP e aos 60 dias, nomeio com 13,32 µM desta citocinina, res-pectivamente.

Na Figura 2 é possível observar odesenvolvimento dos brotos de abacaxiornamental, após 60 dias de cultivo invitro, suportando que a adição de BAPao meio de cultura teve um efeito positi-vo sobre o número de brotos por nóquando comparado com a testemunha.

Borges et al. (2003), trabalhando coma micropropagação da mesma variedadede abacaxi ornamental estudada, pelométodo tradicional, isto é, a partir degemas axilares, verificaram que acrésci-mos de meio líquido, efetuados aos 15 e30 dias de cultivo, proporcionaram amaior média de número de brotos (32,6brotos/explante) após a realização detrês subcultivos sucessivos, com dura-ção média de 30 dias cada, em meio MSadicionado de 4,44 µM de BAP e de 0,54µM de ANA. Braga et al. (2003), estu-dando a micropropagação in vitro, des-ta mesma variedade, também pelo méto-do tradicional, obtiveram as maiores ta-xas de multiplicação (3,1) 30 dias após ainoculação no meio MS contendo 4,44µM de BAP e 0,54 ìM de ANA. Consi-

derando-se que, 60 dias após ainoculação dos explantes em meio MSadicionado de 10 µM de ANA, foram ob-tidos, em média, 22,37 nós por explante,e que estes nós, cultivados em meio MScontendo esta mesma concentração deBAP, 4,44 µM, aos 45 dias regeneraram,em média, 2,60 brotos, pode-se estimaruma taxa de multiplicação de 58,16 aofinal de 105 dias.

O sistema de micropropagação deabacaxizeiro utilizado atualmente, pormeio da proliferação de gemas axilares,demanda, aproximadamente, nove mesespara que as mudas obtidas estejam de-senvolvidas adequadamente paraaclimatização, isto é, são necessáriosdois meses para a fase de estabelecimen-to; seis meses para a fase de multiplica-ção, efetuando-se seis subcultivos su-cessivos de 30 dias cada; e mais um mêspara indução de alongamento eenraizamento. Comparando-se com ométodo sugerido, esse tempo poderiaser reduzido para seis meses e meio, istoé, seriam necessários também dois me-ses para a fase de estabelecimento; doismeses para a fase de estiolamento; ummês e meio para a fase de regeneraçãodas brotações e também um mês para o

Figura 2. Brotos de abacaxi ornamental Ananas comosus var. erectifolius regenerados em meioMS sem regulador de crescimento (A), MS com 4,44µM de BAP (B), MS com 8,88µM deBAP (C), MS com 13,32µM de BAP (D), aos 60 dias após a inoculação (ornamental pineappleAnanas comosus var. erectifolius shoots regenerated in MS medium without growth regulator(A), MS with BAP at 4,44 µM (B), MS with BAP at 8,88 µM (C), MS with BAP at 13,32 µM(D), at the 60th day after inoculation).Fortaleza, Embrapa Agroindústria Tropical, 2005.Barra: 1,3 cm.

Multiplicação in vitro de abacaxi ornamental por estiolamento e regeneração de brotações

alongamento e enraizamento; portanto,resultando em economia em tempo emão-de-obra.

Tendo em vista os resultados obti-dos, pode-se concluir que o método doestiolamento de segmentos nodais e re-generação de brotos é viável para a mul-tiplicação in vitro do abacaxizeiro orna-mental, Ananas comosus var.erectifolius. Sendo os melhores trata-mentos a utilização de ANA a 10 µM parao estiolamento dos brotos, seguido deBAP a 4,44 µM para a regeneração dasbrotações.

AGRADECIMENTOS

Ao ETENE/FUNDECI/Banco doNordeste do Brasil S/A pelo financia-mento da pesquisa e ao CNPq pela con-cessão de bolsas.

REFERÊNCIAS

BAIMA S. Sistema de Informação GerencialAgrícola – SIGA da Secretaria deAgricultura e Pecuária do Ceará – SEAGRI[mensagem recebida] por<cristina@cnpat.embrapa.br> em 20 fev.2004.

108 Hortic. bras., v. 27, n. 1, jan.-mar. 2009

ACPP Carvalho et al.

BARBOZA SBSC; CALDAS LS. 2001.Estiolamento e regeneração namultiplicação in vitro de abacaxizeirohíbrido PE x SC-52. Pesquisa AgropecuáriaBrasileira 36: 417-423.

BORGES NSS. 2000. Influência da adição demeio de cultura líquido no crescimento edesenvolvimento de gemas de abacaxiornamental (Ananas lucidus Miller) in vitro.Fortaleza: UFC. 44p (Monografia).

BORGES NSS; CORREIA D; ROSSETTI AG.2003. Influência do meio bifásico namultiplicação de gemas e no alongamentode brotos in vitro de Ananas lucidus Miller.Revista Brasileira de HorticulturaOrnamental 9: 37-44.

BRAGA EP; MORAIS JPS; CARVALHOACPP; SANTOS MRA. 2003. Avaliaçãodos efeitos do número de explantes, do meiode cultura e do fotoperíodo na multiplicaçãoin vitro de abacaxi ornamental (Ananaslucidus Miller). In: CONGRESSOBRASILEIRO DE FLORICULTURA EPLANTAS ORNAMENTAIS, 14,CONGRESSO BRASILEIRO DECULTURA DE TECIDOS DE PLANTAS,1. Anais... Lavras: UFLA. p.313.

CARVALHO ACPP; BRAGA EP; SANTOSMRA; MORAIS JPS. 2005.Micropropagação de abacaxi ornamental(Ananas comosus var. bracteatus) por meioda indução ao estiolamento e regeneraçãode plântulas. Revista Brasileira deHorticultura Ornamental 11: 121-126.

CORREIA D; OLIVEIRA PMA; RIBEIRO KA;SILVEIRA MRS. 1999a. Avaliação damultiplicação in vitro do abacaxiornamental (Ananas lucidus Miller).Fortaleza: Embrapa Agroindústria Tropical,2p. (Pesquisa em Andamento, 56).

CORREIA D; BORGES NSS; SILVEIRA MRS.1999b. Avaliação do crescimento in vitrode brotos de abacaxi ornamental (Ananaslucidus Miller) em meio de cultura bifásico.Fortaleza: Embrapa Agroindústria Tropical.2p. (Pesquisa em Andamento, 59).

CORREIA D; RIBEIRO KA; ROSSETTI AG;SILVEIRA MRS. 2000. Efeito do ácidoindol butírico e do carvão ativado noenraizamento in vitro de brotos de abacaxiornamental (Ananas lucidus Miller).Fortaleza: Embrapa Agroindústria Tropical.3p. (Pesquisa em Andamento, 66).

COSTA T; ZAFFARI GR. 2005.Micropropagação de Ananas bracteatus(Shultz) cv. estriatus Hort. RevistaBrasileira de Horticultura Ornamental 11:109-113.

GARITA H; GÓMEZ L. 2000.Micropropagation de la variedad de piñaChampaka F-153. AgronomiaCostarricense 24: 63-73.

GEORGE EF. 1993. Factors affecting growthand morphogenesis. In: GEORGE EF. Plantpropagation by tissue culture. Edington:Exegetics Limited. p. 183-230.

GEORGE EF. 1996. Rooting and establishment.In: GEORGE EF. Plant propagation bytissue culture. Edingtion: Exegetics Limited.p. 670-732.

GRATTAPAGLIA D; MACHADO MA. 1998.Micropropagação. In: TORRES AC;CALDAS LS; BUSO JA (eds). Cultura detecidos e transformação genética deplantas. Brasília: Embrapa InformaçãoTecnológica/Embrapa Hortaliças. p.183-260.

KISS E; KISS J; GYULAI G; HESZKY LE.1995. A novel method for rapidmicropropagation of pineapple.HortScience 30: 127-129.

MOREIRA MA; ANJOS SOBRINHO A;PASQUAL M. 1999. Indução aoestiolamento in vitro de brotos de abacaxicv. Pérola. Revista da Universidade deAlfenas 5: 193-197.

MOREIRA MA; PASQUAL M; CARVALHOJG; FRÁGUAS CB. 2003. Estiolamento namicropropagação do abacaxizeiro cv.Pérola. Ciência e Agrotecnologia 27:1002-1006.

MURASHIGE T; SKOOG F. 1962. A revisedmedium for rapid growth and bio assayswith tobacco tissue cultures. PhysiologiaPlantarum 15: 473-497.

PASQUAL M; SANTOS FC; FIGUEIREDOMA; JUNQUEIRA KP; REZENDE JC;FERREIRA EA. 2008. Micropropagaçãodo abacaxizeiro ornamental. HorticulturaBrasileira 26: 45-49.

PEREIRA FD; BRAGA MF; SÁ MEL; ALCINOOAG; COLENGHI IC. 2001. Influence ofBAP and NAA on multiplication ofpineapple cv. Perolera, from in vitroetiolated shoots. Bioscience Journal 17:49-60.

PRAXEDES SC; SILVA JÚNIOR AF;FIGUEIREDO FLB; FIGUEIREDO ML;CÂMARA FAA; OLIVEIRA OF. 2001.Estiolamento in vitro do abacaxizeiroPérola em presença de ANA e AIA.Caatinga 14: 13-15.

SÁ MEL; PEREIRA FD; BRAGA MF;MUSTAFÁ PC; ALVES AP. 2000.Propagação in vitro de abacaxi (Ananascomosus) por meio de segmentosestiolados. In: CONGRESSO BRASILEIRODE FRUTICULTURA, 16. Resumos...Fortaleza: SBF. p. 21.

SEAGRI-SECRETARIA DA AGRICULTURAE PECUÁRIA DO GOVERNO DO ESTADODO CEARÁ. 2006. O Agronegócio daFloricultura Cearense. Fortaleza: Gerênciade Flores - Instituto Agropolos. 5p.

SOUZA FVD; SEREJO JAS; CABRAL JRS.2004. Beleza rara. Cultivar Hortaliças eFrutas 28: 6-8.