Reconhecimento de imaturos e ootecas em Latrodectus geometricus C. L. Koch (1841)

(Araneae: Theridiidae) com base no perfil de Hidrocarbonetos cuticulares.

 Discente: Ingrid de Carvalho Guimarães

Orientador: Prof. Dr. William Fernando Antonialli JuniorCo-orientadora: Prof. Dr. Claudia Andrea Lima Cardoso 

1. Introdução

2.Objetivo Geral

3.Objetivos Específicos

4.Materiais e Métodos

5.Resultados Parciais

6.Conclusão

1. Introdução• Latrodectus geometricus:

Reino Animalia

Filo Arthropoda

Classe Arachnida

Ordem Araneae

Família Theridiidae

Gênero Latrodectus (viúvas-negras) 

1. Introdução• Latrodectus geometricus (Viúva-marrom)

Ampla distribuição Sinantrópicas

Abdômen globoso e pernas finas

Período de agregação

Foto: Guimarães, I.C.Latrodectus geometricus vista ventral. 

1. Introdução

Latrodectus geometricus vista dorsal. Fonte: http://cisr.ucr.edu/brown_widow_spider.html

1. Introdução

1. Introdução• Poucos trabalhos com L. geometricus   baixo 

número de acidentes.

• Estudos recentes:Análises bioquímicas da toxina e sua distribuição 

geográfica (GARB et al., 2004; ALBUQUERQUE et al., 2005; BROWN et al., 2008, VINCENT et al., 2008) 

Desenvolvimento embrionário (LIU et al., 2009)

Canibalismo sexual e Importância do comportamento de agregação (SEGOLI et al., 2008; GUIMARÃES et al., 2012)

• Sem registros de sistemas de reconhecimento.

1. Introdução

• Distinção   fator crucial da evolução social: Limita a possibilidade de não-parentes explorarem ou 

dominarem determinado local de recursos.

• Em espécies solitárias:Reconhecer parceiros sexuais;Feromônios superficiais (Hidrocarbonetos cuticulares 

HCs)         comportamento de corte de machos de várias espécies (KASTON, 1936; SUTER & RENKES, 1982; SUTER & HIRSCHEIMER, 1986; TRABALON et al., 1997)

1. Introdução• Trabalon et al. (1996); Pourié & Trabalon (1999):

Identificaram os componentes cuticulares de Tegenaria atrica;

Após período de agregação dos imaturos há variação nos componentes cuticulares       comportamento agonístico;

Tolerância relacionada com o estágio reprodutivo da fêmea e compostos cuticulares.

1. Introdução

• Grinsted et al. (2011):

Imaturos de Stegodyphus lineatus tem perfis de hidrocarboneto cuticular específicos entre grupos com relação de parentesco;

Diferenciam estímulos cuticulares de parentes e não-parentes;

Autores sugerem que os sinais de reconhecimento de parentesco podem ser alcanos ramificados.

2. Objetivo Geral

Avaliar se há um mecanismo de reconhecimento de parentesco entre os indivíduos imaturos e fêmeas adultas, permitindo assim uma relativa tolerância 

no período reprodutivo. 

3. Objetivos Específicos

• Avaliar se há um mecanismo comportamental e químico de reconhecimento entre fêmeas adultas e imaturos.

• Analisar a composição cuticular de L. geometricus a fim de avaliar se há diferenças entre o perfil de hidrocarboneto de indivíduos com e sem relação de parentesco.

• Investigar se fêmeas adultas são capazes de distinguir suas ootecas de ootecas de co-específicas.

4. Materiais e Métodos

• Espécimes de L. geometricus serão coletados em diversos locais;

• Individualizadas em potes circulares 5x7cm;

• Umidade relativa         algodão umedecido;

• Alimentação         larva de Tenebrio molitor.

4. Materiais e Métodos• Identificação         através das ootecas

Detalhe estrutural de uma ooteca de L. geometricus.Foto: Silva. H.M.

4. Materiais e Métodos• Comportamento agonístico entre fêmeas adultas Comportamento agonístico entre fêmeas adultas 

e imaturos sem parentesco e imaturos sem parentesco (POURIÉ & TRABALON, 1999). 

•Virgem • Incubando•Parental

• Pré dispersão 5 e 20 dias• Pós dispersão 40 e 80 dias

4. Materiais e Métodos

• n=10 para cada grupo;

• Alimentadas 24h antes do teste;

• Avaliadas apenas uma vez;

• Observação        15 minutos e após 24h;

• Resposta comportamental:AceitarEvitarAtacar

4. Materiais e Métodos

• Perfis de Hidrocarbonetos cuticulares:Perfis de Hidrocarbonetos cuticulares:

Espectroscopia Óptica por Transformada de Fourier no Infravermelho Médio por Detecção Fotoacústica (FTIR-PAS);

Cromatografia Gasosa com Detector de Ionização de Chama (CG-DIC).

4. Materiais e Métodos• FTIR-PAS:Aranhas    congeladas;Partes do corpo separadas e pesadas; Secas a vácuo por 48h antes dos testes;

4. Materiais e Métodos• FTIR-PAS:Espectrofotômetro             Thermo-Nicolet Nexus 670 

com detector fotoacústico (MTEC-300)

Foto: Izida, T.

4. Materiais e Métodos• CG-DIC:Extração: 1mL de hexano + ultrassom por 30 min (3x)Extratos secos e redissolvidos em 100µL de hexano Injeção 1µLFocus, GC, Thermo Scientific

4.Materiais e Métodos• Reconhecimento de ootecasReconhecimento de ootecas:• Fêmeas separadas das ootecas  48h antes

Foto: Guimarães, I.C.Fêmeas acasaladas em período de incubação

Ooteca de co-específica

• Resposta após 24h: Aceitar Rejeitar

4.Materiais e Métodos

• Resposta após 24h:AceitarRejeitar

Fêmeas acasaladas em período de incubação

Ooteca própriaFoto: Guimarães, I.C.

5. Resultados parciais

• Comportamento agonístico entre fêmeas adultas Comportamento agonístico entre fêmeas adultas e imaturos sem parentescoe imaturos sem parentesco

Fêmeas virgens Fêmeas parentais

Fêmeas virgens Fêmeas parentais 

Aceitaram imaturos de 5 dias

Aceitaram imaturos de 20 dias

5. Resultados parciais• Perfis de Hidrocarbonetos cuticulares:Perfis de Hidrocarbonetos cuticulares:

• FTIR-PAS:Parece não haver diferença na composição das 

diferentes partes do corpo;

Há pequenas diferenças entre os espectros de imaturos de 5 e 20 dias;

Há diferença nos espectros de imaturos com relação às fêmeas adultas.

5. Resultados parciais

Espectros médios das diferentes partes do corpo de fêmeas adultas de L. geometricus.

5. Resultados parciais

Espectros médios de imaturos de 5 e 20 dias de L. geometricus.

5. Resultados parciais

Espectros médios de fêmeas adultas  e imaturos de 5 e 20 dias de L. geometricus.

5. Resultados parciais• Perfis de Hidrocarbonetos cuticulares:Perfis de Hidrocarbonetos cuticulares:

• CG-DIC:Entre os carbonos C7-C28 todos estão presentes em 

todas as amostras;

Há diferenças na quantidade de HCs nas diferentes partes do corpo: pernas < prossoma < opistossoma;

Aranhas adultas apresentam teores muitos maiores do que imaturos.

5. Resultados parciais

• Reconhecimento de ootecasReconhecimento de ootecas:

De 17 fêmeas testadas 13 aceitaram uma ou mais ootecas de co-específicas;

De 16 fêmeas testadas 14 aceitaram suas próprias ootecas;

Ootecas abertas ou danificadas foram rejeitadas em ambos os testes.

6. Conclusão

• O comportamento agonístico com relação aos imaturos em pré-dispersão parece não existir em Latrodectus geometricus independente do estágio reprodutivo da fêmea. 

• Há distinção entre os perfis de HCs de fêmeas adultas e imaturos; 

• Fêmeas adultas incubando parecem não fazer distinção entre suas ootecas e de co-específicas.

Agradecimentos

Obrigada!