EUTM,BIOQUÍMICA,DRA. MIER,2006

ENZIMAS; CINÉTICA ENZIMÁTICAENZIMAS; CINÉTICA ENZIMÁTICA

PROF. ADJ. CRISTINA MIER

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DEFINICIÓN :

NATURALEZA :PROTEÍNAS

FUNCIÓN: CATALIZADORES (BIOLÓGICOS)

1900- 1955:TGO/AST

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NOMENCLATURA:

SUSTRATO + ASA

NOMBRE TRIVIAL O PRÁCTICO(PEPSINA)

NOMENCLATURA SISTEMATIZADA :IUB,1955 ENZIME COMISSION: EC

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4 DÍGITOS SEPARADOS POR PERÍODOS(PUNTOS)

1º : DEFINE LA CLASE POR EL TIPO DE REACCIÓN

1)OXIDORREDUCTASAS

2)TRANSFERASAS

3)HIDROLASAS

4)LIASAS

5)ISOMERASAS

6)LIGASAS

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2º)SUBCLASE

3º SUB –SUBCLASE

4º)Nº ESPECÍFICO DE SERIE

EC 1.1.1.27 :LDH

EC 1.4.1.3: GLDH

EC 2.6.1.1 :AST

EC 2.6.1.2 :ALT

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ESTRUCTURA PROTEICA:

PRIMARIA

SECUNDARIA

TERCIARIA

CUATERNARIA

DETERMINA :ACTIVIDABIOLÓGICA(AFINIDAD,VELOCIDAD)

SITIO ACTIVO CARACTERÍSTICO

INTEGRIDAD: DESNATURALIZACIÓN

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INTEGRIDAD: DESNATURALIZACIÓN

ALMACENAMIENTO

(CONTAMINACIÓN, TEMPERATURA,PH)

CATALIZADOR:SUSTANCIA QUE INCREMENTA LA TASA DE UNA DETERMINADA REACCIÓN QUÍMICA SIN SER CONSUMIDA NI ALTERADA.

FISIOLOGÍA

MÉTODOS DE LABORATORIO

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SITIA ACTIVO : ESPECIFICIDAD (POR EL SUSTRATO)

VARIAS FORMAS: ESTEREOESPECIFICIDAD

DE GRUPO

ISOENZIMAS: CATALIZAN LA MISMA REACCIÓN:

(ESTRUCTURA CUATERNARIA)

(ORIGEN GENÉTICO,

HERENCIA,POLIMORFISMOS)

ORIGEN EMBRIOLÓGICO,ORGANOESPECÍFICAS

ISOFORMAS : POR PÉRDIDA DE AA

VALOR DIAGNÓSTICO Y EVOLUTIVO

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CINÉTICA ENZIMÁTICA

S Sa Pa P

E + S ES P+E

LA ENZIMA DISMINUYE LA ENERGÍA ACTIVACIÓN

k1 k2

K -1

k1 + k 2 /k-1 = KM

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KM : CONSTANTE DE MICHAELIS Y MENTEN

CARACTERÍSTICA DE CADA REACCIÓN

2 TIPOS DE CINÉTICA :

ORDEN 1 (CONC. DE SUSTRATO VARIABLE)

ORDEN 0 (CONC. SUSTRATO 10-100 VECES EL VALOR DEL KM )

VEL= 91% DE V. maxima

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DETERMINACIÓN DE AC. ENZIMÁTICA :ORDEN O

DETERMINACIÓN DE SUSTRATO (ENZIMAS SON

REACTIVOS): ORDEN 1

REACCIONES ACOPLADAS O INDICADORAS

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FACTORES QUE DETERMINAN LA CINÉTICA:

pH ÓPTIMO (7-8 EL MÁS HABITUAL)(VARÍA EL KM)

TEMPERATURA: Q10 ES LA TASA DE INCREMENTO DE VELOCIDAD POR CADA 10ºC DE INCREMENTO DE TEMP.

ACTIVACIÓN Y DESNATURALIZACIÓN SON SIMULTÁNEAS

MÉTODOS :37ºC

COFACTORES:COENZIMAS:NAD,NADP,ATP

METALES:Ca, Mg

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ANTIGÉNOS: MASA (NO ACTIVIDAD)

APLICACIÓN: ENZIMAS COMO MARCADORES TUMORALES

ES DISCUTIDO