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"FORMULAÇÕES DE S-NITROSOTIÓIS
DOADORES DE ÓXIDO NÍTRICO INCORPORADOS EM GÉIS AQUOSOS TERMI-
CAMENTE REVERSÍVEIS DE COPOLÍMERO TRIBLOCO DE POLI(ÓXIDO DE
ETILENO)-POLI(ÓXIDO DE PROPILENO)-POLI(ÓXIDO DE ETILENO) PLU-
5 RONIC F-127 OU POLOXAMER 407 E METODOLOGIA DE INCORPORAÇÃO DE
S-NITROSOTIÓIS EM MATRIZES DE GÉIS AQUOSOS DE PLURONIC F-127
OU POLOXAMER 407".
Refere-se o presente relatório a
formulações de S-NITROSOTIÓIS doadores de Óxido Nítrico incor-
10 porados em géis aquosos termicamente reversíveis de copolímero
tribloco de Poli(Óxido de Etileno)-Poli(Óxido de Propileno)-
Poli(óxido de Etileno) Pluronic F-127 ou Poloxamer 407, bem
como a metodologia de incorporação de S-NITROSOTIÓIS em matri-
zes de géis aquosos de Pluronic F-127 ou Poloxamer 407, que
15 podem ter aplicações no ramo de medicamentos.
Um número muito grande de traba-
lhos científicos publicados nos últimos dez anos tem demons-
trado que o óxido nítrico (NO) está envolvido em muitos pro-
cessos fisiológicos importantes como a modulação da neuro-
20 transmissão, 1 a citotoxidade mediada pelos macrófagos contra
uma variedade de patologias, incluindo a Leishmania 2 ' 3 , e a va-
sodilatação 4 , identificando-o como o fator de relaxação deri-
vado do endotélio (EDRF). 5 Sabe-se também que o NO possui um
tempo de vida in vivo muito curto (alguns segundos), 6 sendo
25 desativado rapidamente por espécies reativas presentes no
plasma e no meio celular. Assim, foi sugerido que o NO é esta-
bilizado por moléculas carregadoras que preservam sua ativida-
de biológica. 7 ' 8 Os tióis (RSH) de baixo peso molecular são
fortes candidatos para exercer esta função, pois além de serem
abundantes no plasma humano, reagem rapidamente com óxidos de
nitrogênio produzindo S-nitrosotióis (RSNO).9 Os S-
nitrosotióis foram detectados tanto no meio intra como extra
5 celularn e no sistema vascular exercem funções de transporte,
armazenamento e metabolismo do NO. 11 Assim, os nitrosotióis a-
presentam atividades biológicas semelhantes às do NO, sendo
mais estáveis que o NO livre.12
Dessa forma, a preparação de for-
10 mulações contendo S-nitrosotióis é de grande interesse farma-
cológico, uma vez que as mesmas podem ser utilizadas para se
obter os efeitos bioquímicos ou farmacológicos do NO. Sabe-se
também que a maioria dos nitrosotióis são termicamente instá-
vel.s, 13'14 o que dificulta o seu manuseio em trabalhos de pes-
15 guisa e a sua utilização em possíveis aplicações farmacêuti-
cas. Desta forma, o desenvolvimento de métodos de estabiliza-
ção destes compostos, abre perspectivas para a sua utilização
como doadores de NO, em formulações atóxicas.
A obtenção de formulações de S-
20 nitrosotióis, termicamente estáveis e capazes de liberar óxido
nítrico apenas fotoquimicamente, apresenta um interesse adi-
cional e bastante recente nos tratamentos denominados de foto-
quimioterapia (ou terapia fotodinâmica). 15 Nestes tratamentos,
o óxido nítrico pode ser liberado em tecidos específicos pela
25 irradiação com luz visível, exercendo nos mesmos, uma ação ci-
totóxica ou tumoricida.
Verificamos que o gel aquoso de
copolímero em tribloco Poli(óxido de etileno)-poli(óxido de
3/18
propileno)-poli(óxido de etileno) (PEO-PPO-PEO) da marca co-
mercial Pluronic F-127 (ou Poloxamer 407), é capaz de estabi-
lizar S-nitrosotióis térmica e fotoquimicamente além de apri-
sionar o óxido nítrico livre, aumentando seu tempo de vida.
5 Essas propriedades apresentam um grande potencial em aplica-
ções farmacológicas, pois possibilitam a liberação de óxido
nítrico a partir dos S-nitrosotióis em tecidos específicos,
onde ele pode exercer uma ação citotóxica ou vasodilatadora.
O copolímero em bloco Pluronic F-
IO 127 (ou Poloxamer 407) apresenta a seguinte unidade de repeti-
ção em sua estrutura química:
HO (O-CH2-CH2) 95 (0-CH-CH2) 64 (O-CH2-CH2) 950H
CH3
onde os índices 95 e 64 se referem ao número de unidades óxido
I5 de etileno e óxido de propileno respectivamente. A massa molar
nominal deste copolímero é de 12000 e a porcentagem de unida-
des de óxido de etileno é de 70%. 16, 17
Os copolímeros em bloco PEO-PPO-
PEO já vem sendo utilizados em diversas aplicações industriais
20 como detergentes, estabilizadores de dispersões, lubrificantes
1 Na2201918,,e na formulação de cosméticos e de tintas. área
farmacêutica, os copolímeros em bloco tem sido utilizados para
a solubilização de princípios ativos insolúveis em água e para
22,23a sua liberação controlada, bem como na cobertura de feri-
25 mentos de queimadura 24 e na proteção de microorganismos contra
danos mecânicos.25
Os copolímeros em bloco Pluronic
F-127 (ou Poloxamer 407) são considerados não tóxicos para a-
plicações farmacêuticas sendo aprovados para esta finalidade
pela agência norte-americana de controle de alimentos e medi-
camentos FDA (Food and Drug Administration) 27 . Alguns trabalhos
relatam que a administração intravenosa de F- 127 em doses
5 altas (em torno de 137,5 mg/kg), pode levar a um aumento sig-
nificativo dos níveis de triglicerídeos e de colesterol no so-
ro de coelhos, sem alteração de outros parâmetros químicos do
sangue26 . Não foram encontrados relatos de toxicidade em apli-
cações tópicas de formulações contendo Pluronic F-127 (ou Po-
l0 loxamer 407).
Além destas propriedades, solu-
ções aquosas de Pluronic F-127 (ou Poloxamer 407) apresentam
gelificação térmica reversível (a gelificação ocorre com o au-
mento da temperatura e pode ser revertida por abaixamento da
15 temperatura) em concentrações na faixa de 10-40% em massa.28
Tais características têm sido a base das pesquisas feitas so-
bre o uso dos copolímeros PEO-PPO-PEO como possíveis sistemas
de liberação controlada de drogas em humanos. 29 Existem estudos
do copolímero Pluronic F-127 (ou Poloxamer 407) como veículo
20 injetável intra muscular, subcutâneo, epidura1, 39-32 como supo-
sitório líquido33,34 ou associado com outras formas de liberação
controlada, como micro e nano esferas. 35'36
Por tais propriedades, o copolí-
mero Pluronic F-127 (ou Poloxamer 407) foi escolhido como a
25 matriz para a incorporação de S-nitrosotióis, neste invento.
Os resultados obtidos mostram que os S-nitrosotióis incorpora-
dos em matrizes de Pluronic F-127 (ou Poloxamer 407) apresen-
tam uma estabilidade térmica muito maior do que a estabilidade
obtida em soluções aquosas, permitindo condições de armazena-
mento mais adequadas ao uso farmacêutico. A estabilização fo-
toquímica induzida pela matriz de gel aquoso do copolímero
Pluronic F-127 (ou Poloxamer 407) foi também observada neste
5 caso, ampliando a utilidade do invento.
Trabalhos descritos na literatura
mostraram que a eliminação de parasitas de Leishmania, por ma-
crófagos humanos é dependente da produção endógena de NO e que
o processo é potencializado pela introdução de NO exógeno, di-
10 retamente nas áreas dos tecidos infectados. Benefícios sensí-
veis já foram descritos com o uso de um outro doador de NO co-
mercial no tratamento da Leishmaniose cutânea."
Por se tratar de uma formulação
capaz de liberar óxido nítrico localmente, a presente invenção
15 possui um grande potencial de aplicação no tratamento da Lei-
shmaniose cutânea e em outras aplicações médicas ou farmacêu-
ticas que exijam a liberação controlada sistêmica ou locali-
zada de óxido nítrico.
A presente invenção descreve
20 formulações de nitrosotióis em géis de aquosos de Pluronic F-
127 (ou Poloxamer 407) e a metodologia para sua preparação.
Alguns dos nitrosotióis são co-
mercializados em sua forma sólida, como por exemplo, a S-
nitrosoglutationa (GSNO) (ICN Pharmaceutical - Costa Mesa, CA
25 - USA; Sigma -Aldrich, St. Louis, MO - USA; Alexis Biochemi-
cals, San Diego - CA - USA) e a S-nitroso acetilpenicilamina
(SNAP) (ICN Pharmaceutical - Costa Mesa, CA - USA; Sigma -
Aldrich, St. Louis, MO - USA; Alexis Biochemicals, San Diego
CA - USA). Não foi encontrada nenhuma descrição sobre a incor-
poração, a dissolução ou a síntese de S-nitrosotióis em matri-
zes de copolímero em bloco puro ou em solução.
Os métodos de síntese de S-
5 nitrosotióis em meio aquoso existentes são:
A - Reação do tiól com nitrito de sódio (NaNO 2 ) em meio ácido
(HC1) em banho de gelo. O S-nitrosotiól formado é precipitado
através da adição de um solvente com polaridade mais baixa que
a da água, como por exemplo, a acetona ou éter. Para evitar a
10 adição de um outro solvente visando a precipitação do S-
nitrosotiól, pode-se ajustar o pH da solução à 7,4 através da
adição de base NaOH e solução tampão salina.38
B- Patente n2 US5593876 onde são descritos quatro métodos de
nitrosação de tióis, a saber:
15 1 - Nitrosação através da exposição do polipeptídeo a um doa-
dor de óxido nítrico sobre condições onde seja permitida a li-
beração ou transferência do óxido nítrico do doador para o po-
lipeptídeo.
2 - Borbulhamento de uma fonte gasosa de óxido nítrico através
20 de uma solução do polipeptídeo, durante o tempo necessário pa-
ra a formação do nitrosotiól.
3 - Exposição dos tióis a células endoteliais aórticas bovinas
estimuladas a secretar EDRF por exposição a forças de cisalha-
mento.
25 4 - Exposição dos tióis a óxido nítrico sintetase, juntamente
com um substrato e um cofator.
Copolímero em bloco Pluronic F-127 (ou Poloxamer 407).
Esta
classe de materiais se refere aos copolímeros em bloco PEO-
PPO-PEO e abrange uma grande gama de massa molares. O copolí-
mero que é o objeto desta invenção é aquele designado pela
marca comercial Pluronic F-127 ou pela marca comercial Poloxa-
5 mer P-407 fabricado pela ICI. As características físico-
químicas destas duas marcas comerciais são equivalentes e
qualquer uma das duas pode ser utilizada igualmente nas formu-
lações mencionadas abaixo. Este polímero tem massa molar média
de 12.500 g mo1 -1 , contendo, em média, 70% em massa de po-
W li (óxido de etileno), e 30% de poli(óxido de propileno).
O presente invento será descrito
com referência à figura 1, onde é apresentado um gráfico que
retrata exemplos de resultados de estabilização obtidos em ma-
triz de gel de Pluronic F-127.
15
Os S-Nitrosotióis que fazem parte
das formulações deste invento são:
- S-nitrosocisteina (S-nitroso-L-mercaptoalanina - C3H6N203S),
abreviada como CisNO.
- S-nitroso-N-acetilcisteina (ácido S-nitroso-L-a-acetamido-(3-
20 mercaptopropionico - C5H8N204 S), abreviada como SNAC.
- S-nitrosoglutationa (S-nitroso-N-(N-L-y-glutamil-L-cistei-
nil)glicina (C 1oH 16N407S), abreviada como GSNO.
O objeto deste pedido de patente
se refere às seguintes formulações:
25 1) Formulações de GSNO incorporada em géis aquosos de Pluronic
F-127 (ou Poloxamer 407)
Estas formulações incluem as por-
centagens em massa de Pluronic F-127 (ou Poloxamer 407) vari-
ando na faixa de 10% a 40% em relação à massa de PEO-PPO-PEO
mais a massa de água, nas quais as porcentagens em massa de
GSNO variam na faixa de 0,0001 a 15% em relação à massa total.
Em todas as formulações de géis
5 aquosos de Pluronic F-127 (ou Poloxamer 407) mencionadas aci-
ma, pode-se substituir a água pura (destilada ou desionizada)
por água tamponada com tampões fosfato ou carbonato, por exem-
plo, tampão fosfato pH 7,4.
2) Formulações de CisNO ou SNAC incorporadas em géis aquosos de
10 Pluronic F-127 (ou Poloxamer 407)
Estas formulações incluem as por-
centagens em massa de Pluronic F-127 (ou Poloxamer 407) vari-
ando na faixa de 10% a 40% em relação à massa de Pluronic F-
127 (ou Poloxamer 407) mais a massa de água, nas quais as por-
15 centagens em massa de CisNO ou SNAC variam na faixa de 0,0001
a 35% em relação à massa total.
Deve ser esclarecido que em todas
as formulações de géis aquosos de Pluronic F-127 (ou Poloxamer
407) mencionadas acima, pode-se substituir água pura (destila-
20 da ou desionizada) por água tamponada com tampões fosfato ou
carbonato, por exemplo, tampão fosfato pH 7,4.
Cabe esclarecer ainda que em to-
das as formulações mencionadas acima o copolimero em bloco
Pluronic F-127 pode ser substituido pelo de marca Poloxamer
25 P-407.
Cabe esclarecer também que em to-
das as formulações mencionadas acima o copolimero em bloco
Pluronic F-127 (ou Poloxamer 407) pode ser substituido por ou-
tros copolímeros em bloco PEO-PPO-PEO, comerciais, com carac-
terísticas semelhantes de massa molar e porcentagens de unida-
des óxido de etileno e óxido de propileno e aprovados pela
FDA.
5
Segue-se abaixo uma descrição da
metodologia proposta.
Incorporação da GSNO em matrizes de géis aquosos de Pluronic
F-127 (ou Poloxamer 407).
A incorporação da GSNO em matri-
10 zes de géis aquosos de Pluronic F-127 (ou Poloxamer 407) com
água não tamponada ou com água tamponada, é obtida a partir
dos procedimentos abaixo:
A) Pesa-se a massa do copolímero em bloco Pluronic F-127 (ou
Poloxamer 407) necessária para a obtenção da porcentagem em
15 massa desejada.
B) Dissolve-se a massa pesada em água (tamponada ou não), sob
agitação à temperatura baixa (aproximadamente 5°C).
C) Após a dissolução ter sido observada visualmente, armazena-
se a solução em repouso à temperatura baixa (< 10°C) durante 8
20 horas para que a solução atinja o equilíbrio de dissolução''.
D) Pesa-se a massa de nitrosotiól sólido necessária para a ob-
tenção da porcentagem em massa desejada.
E) Adiciona-se a massa pesada de nitrosotiól na massa de água
(tamponada ou não) necessária para a obtenção da porcentagem
25 em massa desejada na formulação.
F) Agita-se a solução de nitrosotiól até a dissolução com-
pleta.
G) Adiciona-se a solução do nitrosotiól à solução do copolíme-
10/18
ro em bloco Pluronic F-127 (ou Poloxamer 407) previamente
preparada e agita-se até a obtenção de uma solução homogênea.
As duas soluções devem estar a temperatura baixa (aproximada-
mente 5°C).
5 H) Armazena-se a solução em um frasco com tampa hermética à
temperatura baixa (de B20 a 10°C) protegida da luz.
Na preparação das soluções aquo-
sas do S-nitrosotiol e do copolímero em bloco Pluronic F-127
(ou Poloxamer 407) pode-se utilizar água destilada ou desti-
10 lada e deionizada.
A água utilizada na preparação
das soluções pode ser tamponada através da adição de sais para
se atingir o pH desejado na formulação.
Pode-se adicionar qualquer outro
15 eletrólito à formulação com o objetivo de se alterar a tempe-
ratura de gelificação das formulações.
Os S-nitrosotióis utilizados po-
dem ser S-nitrosotióis disponíveis comercialmente ou S-
nitrosotióis sintetizados a partir da reação de S-nitrosação
20 de substratos que contém o grupo funcional sulfidrila (-SH), e
purificados após a síntese.
Segue-se abaixo a descrição dos
procedimentos para a gelificação das soluções preparadas nos
procedimentos descritos acima.
25 Transfere-se a solução de copolí-
mero em bloco Pluronic F-127 (ou Poloxamer 407) contendo o S-
nitrosotiól desejado para o frasco onde a solução será gelifi-
cada. Aquece-se a solução de forma homogênea até a temperatura
11/18
de gelificação (na faixa de 10 a 100° C até observar o aumento
da viscosidade da solução) ou um pouco acima dela. A gelifica-
ção pode ser constatada pelo enrigecimento da solução no inte-
rior frasco. Após este processo a solução não mais escorrerá
5 se o frasco for invertido.
Dentre as vantagens da metodolo-
gia ora tratada, podem ser citados os seguintes aspectos: a)
os S-nitrosotióis incorporados em matriz de gel de Pluronic F-
127 (ou Poloxamer 407) apresentam maior estabilidade do que
10 em solução aquosa, podendo portanto ser armazenados nesta ma-
triz, permitido a estocagem de doadores de NO com atividade
biológica por períodos prolongados; b) as matrizes de géis,
pela sua consistência viscosa, permitem aplicações tópicas
sobre a pele, sem que haja escorrimento, proporcionando um
15 maior tempo de contato do princípio ativo (S-nitrosotiól) com
a pele ou outros tecidos, característica esta que faz com que
as formulações deste invento tenham um grande potencial de a-
plicação no tratamento da Leishmaniose cutâneal;c) no caso de
infusão do S-nitrosotiól na corrente sanguínea, ou introdução
20 de dispositivos subcutâneos pode-se obter uma liberação lenta
do princípio ativo no organismo; d) por serem transparentes,
as matrizes de géis contendo S-nitrosotióis incorporados, per-
mitem a irradiação com luz visível, o que pode levar a uma a-
celeração da liberação de óxido nítrico do S-nitrosotiol. Este
25 efeito é de grande interesse nas aplicações onde se deseja que
o óxido nítrico tenha uma ação citotóxica. Esta possibilidade
é também de grande interesse no tratamento da Leishmaniose cu-
tânea.
12/18
As matrizes de géis podem ser ad-
ministradas como soluções e gelificam formando um gel semisó-
lido com o aumento da temperatura, proporcionadopelo contato
com o corpo humano. Desta forma evita-se a realização de ci-
5 rurgias para a introdução de dispositivos, subcutâneos ou in-
tra-peritoniais.
Exemplos de resultados de estabi-
lização obtidos em matriz de gel de Pluronic F-127 estão apre-
sentados na figura 1 e na tabela 1.
10 Na figura 1 é apresentada uma
comparação entre as curvas cinéticas de absorbância versus
tempo, obtidas na fotodecomposição de soluções de S-nitroso-N-
acetil-cisteina (SNAC). (A) em gel de Pluronic F-127 no escuro
(B) em gel de F-127 irradiado com X>480nm (C) em Hg) no escuro
15 e (D) em 1-120 irradiada com X>480nm.
As curvas foram obtidas a partir
do acompanhamento da variação de absorbância das soluções e
dos géis em 545 nm. A absorbância nesta região corresponde à
banda de absorção característica da SNAC. Portanto, a redução
20 do valor de absorbância com o tempo, permite comparar as velo-
cidades de decomposição da SNAC nos vários casos. Observa-se
que a SNAC incorporada nos géis de Pluronic F-127, apresentam
uma menor taxa de redução da absorbância com o tempo, o que
mostra que as matrizes de géis estabilizam a SNAC, reduzindo a
25 velocidade de liberação de óxido nítrico em relação à água.
Este efeito é observado tanto na decomposição térmica da SNAC
no escuro, como na decomposição fotoquímica da SNAC, sob irra-
diação com luz visível com comprimento de onda maior que
480nm.
Tabela 1: Velocidades iniciais da reação de decomposição da S-
nitroso-N-acetilcisteina (SNAC) em água e matriz de copolímero
Pluronic F-127 no escuro e irradiados com X>480nm.
Condições de reação Velocidades iniciais(s')
11 20 no escuro (4,27 ± 0,04) x 10-5
H20 sob irradiação (X,>480 nm) (6,57 ± 0,02) x 10-5
gel de F-127 no escuro (7,21 ± 0,1) x 10-6
gel de F-127 irradiado (X>480 nm) (3,43 ± 7,76 ) x 10-5
5 No que diz respeito à tabela 1,
as curvas de absorbância versus tempo foram normalizadas de
acordo com a equação 1 Para corrigir pequenas diferenças na
concentração inicial das formulações.
A -At AN-
onde A t , Ai e Af são as absorbâncias nos tempos t, inicial e
10 final respectivamente e AN é a absorbância normalizada.
As velocidade iniciais de fotóli-
se foram calculadas de acordo com a equação 2.
A AI R -
A t
onde, AA e At são as variações de absorbância e os intervalos
de tempo correspondentes, respectivamente. Uma regressão line-
15 ar foi aplicada nos trechos iniciais das curvas, corresponden-
tes a extensões de reação de 10%.
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REIVINDICAÇÕES
1. "FORMULAÇÕES DE s-NITRosoTióis
DOADORES DE ÓXIDO NÍTRICO INCORPORADOS EM GÉIS AQUOSOS TERMI-
CAMENTE REVERSÍVEIS DE COPOLÍMERO TRIBLOCO DE POLI(ÓXIDO DE
5 ETILENO)-POLI(ÓXIDO DE PROPILEN0)-POLI(ÓXIDO DE ETILENO) PLU-
RONIC F-127", caracterizadas pelo fato de compreenderem formu-
lações de GSNO incorporadas em géis aquosos de Pluronic F-127,
que incluem as porcentagens em massa de Pluronic F-127 varian-
do na faixa de 10% a 40% em relação à massa de PEO-PPO-PEO
10 mais a massa de água, nas quais as porcentagens em massa de
GSNO variam na faixa de 0,0001 a 15% em relação à massa total,
sendo que em todas as formulações de géis aquosos do Pluronic
F-127 pode-se substituir a água pura (destilada ou desioniza-
da) por água tamponada com tampões fosfato ou carbono, por e-
xemplo, tampão fosfato pH 7,4; sendo que na presente formula-
ção o copolímero em bloco Pluronic F-127 pode ser substituído
por outros copolímeros em bloco PEO-PPO-PEO, comerciais, com
características semelhantes de massa molar e porcentagens de
unidades óxido de etileno e óxido de propileno e aprovados pe-
20 la FDA.
2. "FORMULAÇÕES DE S-NITROSOTIÓIS
DOADORES DE ÓXIDO NÍTRICO INCORPORADOS EM GÉIS AQUOSOS TERMI-
CAMENTE REVERSÍVEIS DE COPOLÍMERO TRIBLOCO DE POLI(ÓXIDO DE
ETILENO)-POLI(ÓXIDO DE PROPILEN0)-POLI(OXIDO DE ETILENO) POLO-
25 XAMER 407", caracterizadas pelo fato de compreenderem formula-
ções de GSNO incorporadas em géis aquosos de POLOXAMER 407,
que incluem as porcentagens em massa de POLOXAMER 407 variando
na faixa de 10% a 40% em relação à massa de PEO-PPO-PEO mais a
massa de água, nas quais as porcentagens em massa de GSNO va-
riam na faixa de 0,0001 a 15% em relação à massa total, sendo
que em todas as formulações de géis aquosos de POLOXAMER 407
pode-se substituir a água pura (destilada ou desionizada) por
5 água tamponada com tampões fosfato ou carbono, por exemplo,
tampão fosfato pH 7,4; sendo que na presente formulação o co-
polímero em bloco POLOXAMER 407 pode ser substituído por ou-
tros copolímeros em bloco PEO-PPO-PEO, comerciais, com carac-
terísticas semelhantes de massa molar e porcentagens de unida-
10 de óxido de etileno e óxido de propileno e aprovados pela FDA.
3. "FORMULAÇÕES DE S-NITROSOTIÓIS
DOADORES DE ÓXIDO NÍTRICO INCORPORADOS EM GÉIS AQUOSOS TERMI-
CAMENTE REVERSÍVEIS DE COPOLÍMERO TRIBLOCO DE POLI(ÓXIDO DE
ETILENO)-POLI(ÓXIDO DE PROPILENO)-POLI(ÓXIDO DE ETILENO) PLU-
15 RONIC F-127", caracterizadas pelo fato de compreenderem formu-
lações de CisNo ou SNAC incorporadas em géis aquosos de Pluro-
nic-F127 que incluem as porcentagens em massa de Pluronic F-
127 variando na faixa de 10% a 40% em relação à massa de Plu-
ronic F-127 mais a massa de água, nas quais as porcentagens em
20 massa de CisNo ou SNAC variam na faixa de 0,0001 a 35% em re-
lação à massa total.
4. "FORMULAÇÕES DE S-NITROSOTIÓIS
DOADORES DE ÓXIDO NÍTRICO INCORPORADOS EM GÉIS AQUOSOS TERMI-
CAMENTE REVERSÍVEIS DE COPOLÍMERO TRIBLOCO DE POLI(ÓXIDO DE
25 ETILENO)-POLI(ÓXIDO DE PROPILENO)-POLI(ÓXIDO DE ETILENO) POLO-
XAMER 407", caracterizadas pelo fato de compreenderem formula-
ções de CisNO ou SNAC incorporadas em géis aquosos de POLOXA-
MER 407 que incluem as porcentagens em massa de POLOXAMER 407
variando na faixa de 10% a 40% em relação à massa de POLOXAMER
407 mais a massa de água, nas quais as porcentagens em massa
de CisNo ou SNAC variam na faixa de 0,0001 a 35% em relação à
massa total.
5 5. "METODOLOGIA DE INCORPORAÇÃO
DE S-NITROSOTIÓIS EM MATRIZES DE GÉIS AQUOSOS DE PLURONIC F-
127", caracterizada pelo fato de compreender as etapas de: a)
Pesa-se a massa do copolímero em bloco Pluronic F-127 (ou Po-
loxamer 407) necessária para a obtenção da porcentagem em mas-
10 sa desejada; b) Dissolve-se a massa pesada em água (tamponada
ou não), sob agitação à temperatura baixa de aproximadamente
51C; c) Após a dissolução ter sido observada visualmente, ar-
mazena-se a solução em repouso à temperatura baixa (< 10° C)
durante 8 horas para que a solução atinja o equilíbrio de
15 dissolução; d) Pesa-se a massa de nitrosotiól sólido necessá-
ria para a obtenção da porcentagem em massa desejada; e Adi-
ciona-se a massa pesada de nitrosotiól na massa de água (tam-
ponada ou não) necessária para a obtenção da porcentagem em
massa desejada na formulação; f) Agita-se a solução de nitro-
20 sotiól até a dissolução completa; g) Adiciona-se a solução do
nitrosotiól à solução do copolímero em bloco Pluronic F-127
(ou Poloxamer 407) previamente preparada e agita-se até a ob-
tenção de uma solução homogênea, sendo que as duas soluções
devem estar à temperatura baixa (aproximadamente 5°C); h) Ar-
25 mazena-se a solução em um frasco com tampa hermética à tempe-
ratura baixa (de B20 a 10°C) protegida da luz.
6. "METODOLOGIA DE INCORPORAÇÃO
DE S-NITROSOTIÓIS EM MATRIZES DE GÉIS AQUOSOS DE POLOXAMER
407", caracterizada pelo fato de compreender as etapas de: A)
Pesa-se a massa de copolímero em bloco Poloxamer 407 necessá-
ria para a obtenção da porcentagem em massa desejada; b) Dis-
solve-se a massa pesada em água (tamponada ou não), sob agita-
5 ção à temperatura baixa de aproximadamente 51 C; c) Após a
dissolução ter sido observada visualmente, armazena-se a solu-
ção em repouso à temperatura baixa (< 10 0 C) durante 8 horas
para que a solução atinja o equilíbrio de dissolução; d) pesa-
se a massa de nitrosotiól sólido necessária para a obtenção da
10 porcentagem em massa desejada; e) adiciona-se a massa pesada
de nitrosotiól na massa de água (tamponada ou não) necessária
para a obtenção da porcentagem em massa desejada na formula-
ção; f) agita-se a solução de nitrosotiól até a dissolução
completa; g) adiciona-se água à solução do nitrosotiól do co-
15 polímero em bloco Pluronic F-127 (ou Poloxamer 407) previamen-
te preparada e agita-se até a obtenção de uma solução homogê-
nea, sendo que as soluções devem estar à temperatura baixa de
aproximadamente 51C; H) armazena-se a solução em um frasco com
tampa hermética à temperatura baixa de -20 a 101C) protegida
20 da luz.
1 1 i 1 i 1 1 1 1 16000 8000 10000 12000 14000
Tempo (s)
2000 4000
F75. 1
RESUMO
"FORMULAÇÕES DE S-NITROSOTIÓIS
DOADORES DE ÓXIDO NÍTRICO INCORPORADOS EM GÉIS AQUOSOS TERMI-
CAMENTE REVERSÍVEIS DE COPOLÍMERO TRIBLOCO DE POLI(ÓXIDO DE
5 ETILENO)-POLI(ÓXIDO DE PROPILEN0)-POLI(ÓXIDO DE ETILENO PLURO-
NIC F-127 OU POLOXAMER 407 E METODOLOGIA DE INCORPORAÇÃO DE S-
NITROSOTIÓIS EM MATRIZES DE GÉIS AQUOSOS DE PLURONIC F-127 OU
POLOXAMER 407", sendo que o presente relatório trata de formu-
lações de S-NITROSOTIÓIS doadores de Óxido Nítrico incorpora-
i() dos em géis aquosos termicamente reversíveis de copolímero
tribloco de Poli(Óxido de Etileno)-Poli(Óxido de Propileno)-
Poli(óxido de Etileno) Pluronic F-127 ou Poloxamer 407, bem
como a metodologia de incorporação de S-NITROSOTIÓIS em matri-
zes de géis aquosos de Pluronic F-127 ou Poloxamer 407, que
15 podem ter aplicações no ramo de medicamentos.
