IMUNO-HEMATOLOGIA

Doutoranda Débora Faria Silva

Prof. Drª Simone Aparecida Rezende

Maio/ 2016

UNIVERSIDADE FEDERAL DE OURO PRETO

PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS FARMACÊUTICAS

(CIPHARMA)

Produtos originados do sangue total

Hemocomponentes: gerados nos serviços de hemoterapia

Hemoderivados: gerados em escala industrial

Aférese

Transfusão de sangue de carneiro e “braço a braço”

• James Blundell (1818): 1a transfusão com sucesso

• Karl Landesteiner (1901): classificação das hemácias em quatro tipos:

A, B, AB e O

Atualmente....

•328 Ag eritrocitários descritos, 33 sistemas de grupos sanguíneos

• Ag eritrocitários são constituídos por açúcares ou proteínas; grande parte deles foi identificada pelo uso de anticorpos (ex: Ac anti-A)

Sistemas de grupos

sanguíneos e Ag mais

importantes

CLASSIFICAÇÃO DAS HEMO-AGLUTININAS (Ac contra Ag de grupos sanguíneos)

1 - de acordo com o estímulo

•Ac naturais (maioria são IgM): detectadosnaturalmente a partir de 3-6 meses de idade;resultam de estímulos “inaparentes”.

•Ac imunes (maioria são IgG): resultam deestímulos transfusionais ou gestacionais -Doença hemolítica do recém nascido oueritroblastose fetal.

2- de acordo com a origem do Ag que é reconhecido

•Aloanticorpos: reagem com um Ag estranho, não presentenas hemácias do indivíduo.• ex.: Ac anti-A e anti-B em indivíduos do grupo O

•Autoanticorpos: anticorpos do soro de indivíduos quereagem com seus próprios antígenos.• ex.: auto anticorpos contra Ag I das hemácias,

associados com anemia hemolítica autoimune

3- de acordo com a temperatura de reação

•Anticorpos frios (maioria são IgM)

- Reagem melhor em temperaturas baixas, cerca de 4°C.• ex.: anti-A, anti-B, anti-A,B; anti-M.

•Anticorpos quentes (maioria são IgG)

- Reagem melhor em temperaturas próximas a 37°C.• ex.: anti-D; anti-K; anti-C; anti-E; anti-Fya; anti-jka

4- de acordo com o comportamento em testes imunohematológicos

• Ac completos (aglutinantes): promovem aglutinação dehemácias em meio salino à temperatura ambiente.

• Ex: anticorpos IgM

• Ac incompletos (não aglutinantes): reagem com oantígeno, porém não provocam aglutinação das hemáciasem meio salino.

É necessário usar um substâncias potencializadoras ou

soro de Coombs (anti anticorpo) para sua detecção.

• Ex: anticorpos IgG

Potencial zeta

• Em solução salina, as hemácias apresentam carga negativa oque faz com que haja repulsão entre elas;

• O potencial zeta impede aglutinação espontânea das hemácias.

Fenômeno de hemo-aglutinação

Substâncias potencializadoras

Ligação de AcAlbumina

LISS

Sistemas de grupo sanguíneoH & ABO

Determinantes antigênicos (epitopos) são carboidratos

Expressão dos Ag H, A e B no tecido hematopoiético

SUBGRUPOS DE A

A1 (80% dos pacientes): 1 x 106 sítios antigênicos (quantidade de Ag na

superfície das hemácias)

A2 (19% dos pacientes): 2,5 x 105 sítios antigênicos

• E diferença qualitativa: indivíduos A2 podem apresentar Ac anti A1

Outros subgrupos de A (1% dos pacientes): A3, Ax e Am

N-acetilgalactosamina

Antígeno A2Antígeno A1

Pacientes do grupo A podem apresentar Ac anti A!!!

Especificidade Grupo Incidência

Ac anti A1 A2 1-8%

Ax A maioria

A2B 22-35%

Esses Ac provocam aglutinação de hemácias A1 na prova reversa

Raramente implicados em reações transfusionais e rejeição de órgãos sólidos

Os Ag do sistema ABO estão presentes em outros locais além das hemácias

• forma solúvel: secreções e outros fluidos (saliva, lágrimas, leite elíquido amniótico);

• membrana de tecidos epiteliais e órgãos como medula óssea erins;

• Os Ag do sistema ABO devem ser considerados quando se faz umtransplante de órgão.

FENÓTIPO BOMBAY OU BOMBAIN

tem 1 doador BOMBAY dentre 1 milhão de doadores!!!

SISTEMA Rh (Rhesus)

•Composto por mais de 45 Ag

•Ag mais imunogênicos do sistema Rh: D, C, E, c, e

•Rh+: presença do Ag D

•Ag D: mais de 30 epítopos (9 mais imunogênicos)

VARIAÇÕES DO ANTÍGENO D

• D fraco (99%): alteração quantitativa do Ag D (menos sítiosantigênicos).

• D parcial ou incompleto (1%): alteração qualitativa do Ag D,falta um ou mais epítopos de D.

• D parcial fraco: ambas alterações.

No laboratório, todos esses pacientes são classificados comoD fraco (não tem como distinguir pelo teste que é usado).

Variações do Ag D

Rh D variante= D fraco

Rh nulo

• ausência de Ags do sistema Rh (D, C, c, E, e) instabilidade

da membrana da hemácia anemia hemolítica

Agulha no palheiro

Doença hemolítica do recém-nascido (DHRN) ou eritroblastose fetal

Doença hemolítica do recém-nascido (DHRN) ou eritroblastose fetal

• Reação do sistema imune maternocontra Ag presentes nas hemáciasfetais e ausentes nas hemáciasmaternas.

• 98% dos casos: incompatibilidade no sistema Rh;

• outras causas: incompatibilidade nos sistema ABO, Lewis, e outros.

• incompatibilidade por ABO: deforma geral não é grave.

• Efeitos sobre o feto: anemia, bilirrubinemia, hidropsia fetal, insuficiênciacardíaca, kernicterus e morte

• Tratamento:• ex-sanguíneo-transfusão

• Fototerapia (para eliminação da bilirrubina)

Hidropsia: Edema

generalizado do feto

Doença hemolítica do recém-nascido (DHRN) ou eritroblastose fetal

Quando ocorre a imunização materna? transfusão incompatível, gestantes: aborto, procedimentos invasivos

(amniocentese), nascimento.

Maior transferência de células fetais: 3ºtrimestre de gestação e parto.

Doença hemolítica do recém-nascido (DHRN) ou eritroblastose fetal

Durante a gravidez:• determinação no soro materno do título de IgG contra Ag

presentes nas hemácias fetais (Coombs indireto)• Amniocentese: determinar concentração de pigmentos biliares

(derivados da lise das hemácias)

• se necessário fazer transfusão de hemácias O negativoApós o nascimento:

• determinar grupo sanguíneo do recém-nascido• Teste de Coombs direto do sangue do cordão umbilical

Doença hemolítica do recém-nascido (DHRN) ou eritroblastose fetal

Prevenção da DHRN

• Imunoglobulina anti D: doses intramuscularesde IgG anti-D induzem imunização materna

•Deve ser feito com 28-30 semanas degestação e até 72 h após o parto.

TESTES LABORATORIAIS NA IMUNO-HEMATOLOGIA

• 1- Gel centrifugação (cartão)• mais sensível, custo elevado

• necessidade de centrífuga especial

2- Microplaca

• Rapidez, custo mais baixo, necessidade de centrífuga demicroplaca;

• Ideal para serviços de hemoterapia (banco de sangue)

3 – Método convencional (em tubo)

•Determinação de grupo sanguíneo do sistema ABO

Causas de discrepância na classificação ABO

1- relacionadas a Ac (interferem na prova reversa):• ausência ou baixa atividade da aglutinina esperada

(pacientes idosos)• interferência dos Ac maternos presentes no sangue de

recém nascidos

• presença de auto anticorpos (Ac anti I)

2- relacionadas a Ag (interferem na prova direta):• baixa expressão de Ag do sistema ABO nas hemácias de

recém-nascidos (usar métodos mais sensíveis)

Teste da Antiglobulina direto – TAD (Coombs Direto)

• Pesquisa Ac e/ou complemento ligado in vivo nas hemácias do paciente• Anemia hemolítica autoimune, doença hemolítica perinatal

Pesquisa de Anticorpos Irregulares – PAI (Coombs Indireto)

• Pesquisa Ac livre no soro do paciente.• Pesquisa de Ac anti-D materno e de Ac irregulares antes da transfusão

Usa hemácias teste do grupo O / Triacel®: suspensão de hemácias do grupo O fenotipadaspara Ag dos sistemas Rh, Kell, Duffy, Kidd, Lewis, MNS, P e Lutheran.

Testes Pré Transfusionais

Recomendações para transfusão:

◦ Doador e receptor com mesmo grupo ABO (isogrupo)sempre que possível.

◦ Excepcionalmente, respeitar a regra transfusional:

Avaliação imuno-hematológica pré transfusão de hemácias

PROVA CRUZADA MAIOR (para transfusão deconcentrado de hemácias):

• soro/plasma do receptor + hemácias do possível doador + 4 condições.

• Se der reação, será necessário identificar o Ac irregular e selecionarhemácias compatíveis com o paciente.

PROVA CRUZADA MENOR (para transfusão deplasma):

• hemácias do receptor + soro/plasma do possível doador (4 condições).

Onde estudar

Obrigada!

UNIVERSIDADE FEDERAL DE OURO PRETO

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