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July 27, 2004
Distâncias de Isolamento em ArrozDispersão de Pólen
Apresentação à CTNBio Reunião Ordinária das Comissões Setoriais
19 de Maio de 2010
André AbreuEng. AgrônomoGerente de Tecnologia – Bayer CropScience
Revisão sobre Dispersão de Pólen e Distâncias de Isolamento em Arroz por André Abreu – CTNBio – Maio 2010
Agenda
Distância espacial de cruzamentos Distância temporal de cruzamentos
Implicações agronômicas
Revisão sobre Dispersão de Pólen e Distâncias de Isolamento em Arroz por André Abreu – CTNBio – Maio 2010
Distribuição de Arroz Silvestre na América do Sul
O. glumaepatula
O. grandiglumis
O. alta
O. latifolia
Arroz CultivadoOliveira, 1994;
Brondani et al., 2005
Santos, 2010
O. subulata
compatibilidade
SIM
NÃO
Revisão sobre Dispersão de Pólen e Distâncias de Isolamento em Arroz por André Abreu – CTNBio – Maio 2010
Ampla rede de estudos sobre cruzamento nesta década
Brasil– EMBRAPA, EPAGRI, IRGA, UFSM
Colômbia– CIAT
EUA– LSU, USDA, UCD
Europa– CIRAD, IRTA
China– CNRRI
Revisão sobre Dispersão de Pólen e Distâncias de Isolamento em Arroz por André Abreu – CTNBio – Maio 2010
Delineamento experimental clássico
Parcela Central de plantas polinizadoras (marcador herbicida)
Amostras de panículas radiando a fonte de pólen 1 2 3 4 5 6
306 bp (LLRice62)
166 bp (wild type)
800 bp
400 bp
OSR-LL62-ZY01
Lane 1: Homozygous LLRice62. Lane 2: Hemizygous LLRice62.Lane 3: O.sativa var. Bengal, wild type. Lane 4: O.sativa var. M202,wild type. Lane 5: water (No Template Control). Lane 6: MW marker(Pharmacia 100 bp ladder)
Teste com HerbicidaValidação molecular
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Estudo a campo gene bar marcador, com cultivar de mesmo ciclo e linhas de arroz Vermelho e Preto.
42m parcela central. Área circundante de 60 x 60 m
Inspeções em floração
Estudo aprovado pela CTNBio - Rio Grande - RS - 2000
Revisão sobre Dispersão de Pólen e Distâncias de Isolamento em Arroz por André Abreu – CTNBio – Maio 2010
Avaliação por pesquisadores diversos para confirmar taxas de cruzamento
Plântulas potencialmente resistentes transplantadas para confirmação em bioensaio
Germinação em meio herbicida(método Embrapa publicado)
validação 1 (GM)
Estudo aprovado pela CTNBio - Rio Grande - RS - 2000
validação 2 (NM)
250000 sementes avaliadas
Revisão sobre Dispersão de Pólen e Distâncias de Isolamento em Arroz por André Abreu – CTNBio – Maio 2010
Resultados: <0,1% até 3 metros
y = -0,0091x + 0,0453R2 = 0,9986
0
0,01
0,02
0,03
0,04
0,05
0 2 4 6
Distância (m)
Cruzamento
(%)
Magalhães e Andres, EMBRAPA-CPACT
Pelotas, Rio Grande do Sul, Brasil
Cruzamento variou entre 0.04 to 0.1% na
distancia de 1 a 3 m , sob condições
favoráveis à abundância de pólen e
coincidência floral de 6 a 10 dias
Não foi observado cruzamento com as
plantas de Arroz Vermelho ou Preto.
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Estudo IRGA usando mutação ALS como marcadorCachoeirinha - 2001
Distância entre doador e receptor (m)
0 1 2 3 4 5 8 10
Pla
nta
s h
íbri
das
(%
)
0,00
0,01
0,02
0,03
0,04
0,05
FONTE: RAMIREZ et. al., 2001
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Influencia do Vento na polinização
Citação: Messeguer, J., C. Fogher, E. Guiderdoni, V. Marifà, M.M. Català, G. Baldi, and E. Melé. 2001. Field assessments of gene flow from transgenic to cultivated rice (Oryza sativa L.) using a herbicide resistance gene as tracer marker. Theoretical and Applied Genetics 103:1151-1159.
Circulo central (gene bar marcador) com dois
círculos
Cruzamentos a 1 (0.08%) e 5 m (0,01%),
observados na direção do vento
1m10m
vento
5m
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Dados consistentes indicando baixo cruzamento
país do estudotaxa de cruzamento
(%)autores/ano
Brasil 0,14% a 0,26% Noldin et al. (EPAGRI), 2002
Brasil 0,01% a 0,04% Ramirez et al. (IRGA), 2001
Brasil 0,0065% Villa et al. (UFSM), 2006
Brasil 0,01 a 0,04% Magalhães Jr et al (EMBRAPA -CPACT), 2001
China < 1% Rong et al. 2004
Colombia 0,03% a 0,3% Lentini & Espinoza 2005
Coreia 0,01% a 0,05% Chen et al. 2004
Costa Rica 0,1% a 0,4% Lentini & Espinoza 2005
Espanha e Italia 0,01% a 0,1% Messeguer et al., 2004
EUA 0,08% Linscombe et al, (LSU) 2005
EUA 0,40% Cheetham e Fischer (Univ. California Davis), 2005.
EUA 1% Langevin et al. 1990
EUA 0,01% a 0,14% Burgos et al. 2005, Estorninos et al. 2003a, 2003b
EUA 0,10% a 0,23% Estorninos et al. 2003b
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Agenda
Distância espacial de cruzamentos Distância temporal de cruzamentos
Implicações agronômicas
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Estudo de sincronia floral extrema (aprovado pela CTNBio)
José Alberto Noldin e Satoru Yokoyama - EPAGRI - Empresa de Pesquisa Agropecuária e Extensão Rural de Santa Catarina S.A.
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Baixo cruzamento sob máximas proximidade e sincronia floral
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Estudo com outros biótipos nos EUA corroboram dados do Brasil
12 biótipos de Arroz Vermelho submetidos ao cruzamento com Arroz mutagênico (marcador resistência herbicida)
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Agenda
Distância espacial de cruzamentos Distância temporal de cruzamentos
Implicações agronômicas
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Persistência do Evento no meio
Segurança do Evento
Adaptação dos híbridos
Pressão de seleção
5
7
9
11
13
15
0
10
20
30
40
50
60
70
80
%
AV AP Hibridos LL x AV LL
genótipos
No
. per
filh
os Número de Perfilhos Esterilidade das Espiguetas
AV AP Hibridos LL x AV LL
genótipos
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Qualidade de Semente
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Echinochloa (Capim Arroz) resistente a herbicidas inibidores de ALS
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Modo de ação herbicida e variabilidade genética tem mais influência que a taxa de cruzamento
Revisão sobre Dispersão de Pólen e Distâncias de Isolamento em Arroz por André Abreu – CTNBio – Maio 2010
Inexiste comprovação de variabilidade para tolerância ao Glufosinato
GrupoGrupoGrupoGrupo
HRACHRACHRACHRAC
Inibição da AcetoLactato Sintase (ALS)Inibição da AcetoLactato Sintase (ALS)Inibição da AcetoLactato Sintase (ALS)Inibição da AcetoLactato Sintase (ALS) BBBB pyrazosulfuron-ethyl, Imazaphirpyrazosulfuron-ethyl, Imazaphirpyrazosulfuron-ethyl, Imazaphirpyrazosulfuron-ethyl, Imazaphir 101101101101
Inibição da fotossíntese (PSII)Inibição da fotossíntese (PSII)Inibição da fotossíntese (PSII)Inibição da fotossíntese (PSII) C1C1C1C1 Atrazine, ChlorotoluronAtrazine, ChlorotoluronAtrazine, ChlorotoluronAtrazine, Chlorotoluron 68686868
Inibição da AcetilCoA Carboxilase (ACCase)Inibição da AcetilCoA Carboxilase (ACCase)Inibição da AcetilCoA Carboxilase (ACCase)Inibição da AcetilCoA Carboxilase (ACCase) AAAA FenoxapropFenoxapropFenoxapropFenoxaprop 36363636
Auxina sintética - similar ac. indolacéticoAuxina sintética - similar ac. indolacéticoAuxina sintética - similar ac. indolacéticoAuxina sintética - similar ac. indolacético OOOO 2,4D2,4D2,4D2,4D 28282828
Inibição da fotossíntese (PSII)Inibição da fotossíntese (PSII)Inibição da fotossíntese (PSII)Inibição da fotossíntese (PSII) C2C2C2C2 PropanilPropanilPropanilPropanil 21212121
(Glicina) Inibição da EPSPS (Glicina) Inibição da EPSPS (Glicina) Inibição da EPSPS (Glicina) Inibição da EPSPS GGGG GlyphosateGlyphosateGlyphosateGlyphosate 16161616
inibição da formação das tubulinasinibição da formação das tubulinasinibição da formação das tubulinasinibição da formação das tubulinas K1K1K1K1 OryzalinOryzalinOryzalinOryzalin 10101010
outrosoutrosoutrosoutros ---- 9999
Inibição da síntese de lipídeosInibição da síntese de lipídeosInibição da síntese de lipídeosInibição da síntese de lipídeos NNNN ThiocarbamatosThiocarbamatosThiocarbamatosThiocarbamatos 8888
Inibição da biosíntese de carotenóidesInibição da biosíntese de carotenóidesInibição da biosíntese de carotenóidesInibição da biosíntese de carotenóides F3F3F3F3 UreasUreasUreasUreas 4444
Inibidor de PPOInibidor de PPOInibidor de PPOInibidor de PPO EEEE OxyfluorfenOxyfluorfenOxyfluorfenOxyfluorfen 3333
Inibidor de ácidos graxos de cadeia longaInibidor de ácidos graxos de cadeia longaInibidor de ácidos graxos de cadeia longaInibidor de ácidos graxos de cadeia longa K3K3K3K3 ButachlorButachlorButachlorButachlor 3333
Inibição da divisão celularInibição da divisão celularInibição da divisão celularInibição da divisão celular LLLL QuincloracQuincloracQuincloracQuinclorac 2222
(Ácido Fosfinico) Inibição Glutamina Sintetase (Ácido Fosfinico) Inibição Glutamina Sintetase (Ácido Fosfinico) Inibição Glutamina Sintetase (Ácido Fosfinico) Inibição Glutamina Sintetase HHHH GlufosinatoGlufosinatoGlufosinatoGlufosinato 0000
Modo de AçãoModo de AçãoModo de AçãoModo de Ação Exemplo de herbicidaExemplo de herbicidaExemplo de herbicidaExemplo de herbicida total de espécies resistentes total de espécies resistentes total de espécies resistentes total de espécies resistentes descritasdescritasdescritasdescritas
Revisão sobre Dispersão de Pólen e Distâncias de Isolamento em Arroz por André Abreu – CTNBio – Maio 2010
Conclusões
Norma do MAPA de 3 metros para < 1% é mais que suficiente Taxa média de < 0,1% de cruzamento até 1 metro de distância. Distância: a partir de 5 metros tende a zero Sincronia floral: < 15 dias para o cruzamento Perda de eficácia de herbicidas resultando de
– Modalidade de atividade química vs variabilidade genética – Manejo de pureza de sementes– Manejo de lavoura– Favorecimento ao cruzamento
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Obrigado